JPS5926065A - ヒト尿カリクレイン測定用試薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本ａｔｑに、多数の仮構液中の尿カリクＶイ〜に迅速か
つ正確に定量することが可能なヒト尿刀ＩＪクレイン測
定試薬に関するｄ４・、。

カリクンインは血漿中のキニ／−ゲンに作用して、生理
活性ペプタイドであるキニンをＪｉｌする酵素である。

カリクレインの生物学的作用は、遊Ｒトサれたキニンを
介して発現される。例え汀血管拡張作用、血圧降下作用
、平滑筋収縮作用、毛細血管透過性作用、カテコールア
ミン分泌先進作用、プロスフグランジン生物学的作用等
である。

ヒトに限らず、多くの動物の尿にカリクンインが排泄さ
れることが知られている。尿中のカリクレインは腎臓に
おいて生合成されたもので、特に腎血流量の調節及び血
圧の調節に関与している。

このように、カリクレインは人混な生理作用を示すこと
により生体の恒常性維持に対して爪型な役割をはたして
いる。従って、カリクレインの生合成低下や分泌低下は
重篤な疾患を惹起する。例えば、本悪性高皿圧症、腎性
高血圧症の患者の尿中へのカリクレイン排泄量は健常人
のそれと比較して着用に低下しており、まｆｃｌＪＡ発
性アルドステロン症やバーター症候群患者法ではカリク
レイン・排泄量が高く、腎不全患者では低いことが知ら
れている。

このように高血圧症をはじめ、各種疾患においてカリク
レイン排泄量を定量することは疾患の診断にとって、祿
めて有用である。

ところで、カリクレインの定量法としては、古くよりＦ
ｒｅｙの方法、即ち麻酔した犬に検体’（＋−静脈内投
与して、その際に観察される全身血圧の降下度を指標と
する方法がとられてきた（文献ｌ参照）。しかしながら
、この方法は操作が複雑で、かつ、犬の個体差によるバ
ラツキを除去しがたいなど問題点が指摘されている。

また、各種の合成基質、たとえば、トシルアルギニンメ
チルエステル、ベンソイルアルキニンエチルエステル、
フロリルーフェニルアラニルーアルギニンメチルクマリ
ン７　ミ）”　、　Ｄ−ノクリル−ロイシルーアルギニ
ンパラニトロアニリドなどに対するカリクレインの加水
分解活性を測定する方法は、Ｆ”ｒｅｙの方法より操作
が簡便であり、四現性も高い。ところが尿中の在りフレ
インを測定する場合、これらの合成基質は尿中に存在す
るカリクレイン以外の蛋白質分Ｍ酵素によっても分解さ
れるため、カリクレインのみを選択的に、正確に測定す
ることはできない。

これらの方法に対して、抗原−抗体反応による各疫学的
定量法を応用すれば、たとえ尿を検体とした場合にもカ
リクレインのみを選択的に６１１］定することが可能で
ある。これ迄に免疫学的測定法としでに後記文献２．３
及び４に開示の方法が報告されている。

これらの報告から明らかな通り、免疫学的定量法の応用
により、尿中に排泄される微量のカリクレインを精密に
測定できるようになり、各種疾患と尿中カリクレイン排
泄量の関連性が詳細に検討されるようになった。

ところか、カリクレインの免疫学的定量法に関する上記
の文献に開示された方法では以下の問題点が指摘される
。すなわち、■抗原−抗体反応を定量的忙追跡するため
に抗原であるヒト尿カリクレインを放射性同位元素で標
識する方法が採用されているため、放射性同位元素に基
づく欠点をもっている。たとえば放射性同位元素は通道
、不安定であり、従って、標識化合物を艮ル１間呆存す
ることかできない。また、放射性同位元素は人体に対し
て有害であり、その取扱いには、一定の基準によりａ３
町された施設を必要とする。その上に、放射性同位元素
は高価であり、測定機器も、踵価である。■抗原−抗体
反応を液相で行なっており、抗体と複合体を形成し、を
抗原（８体）と、遊ｇｔの抗原（Ｆ体）を分離するため
に（いわゆるＢ／Ｆ分離）二抗体法チたは、ポリエチレ
ングリコール沈澱法が採用されている。この７しめ、イ
ンキュベーションや遠心分離操作を必要とし、したがっ
て測定のＡめの所要時開が延長し、ま次操作も複雑にな
る。

従って、放射性同位元素標識法に代わる標識方法及びＢ
／Ｆ分離のｆｆ１）便な方法を見い出して、多数の被検
尿にりいて迅運力・つ正イ血に尿中の力°Ｊクレインを
測定できる定量法を確立することげ当面の課題であり、
本発明の目的はかかる課題を解決し几尿中カリクレイン
定量試薬を提供することである。

本発明は、特異抗ヒト尿カリクレイン抗体をすνＪ物物
面血球感作して得た抗ヒト尿カリクレイン感作赤血球を
含む逆受身抗体赤血球凝集反応用ヒト尿カリクレイン測
定試薬に関する。

本発明に係る測定試薬は、各試薬をキット化しておくこ
とが便宜的であるので、以下キット化されたものを例と
して本発明を説明する。

本発明試薬をキット化した場合、次のごとき各試薬にて
構成される。即ち、（イ）特異抗ヒト尿カリクレイン抗
体を動物赤血球に感作して得た抗ヒト尿カリクレイン感
作赤血球（以下、感作赤血球という。）、（ロ）酵素活
性測定用緩衝液、←９標阜ヒト尿陽性コントロール（以
下、陽性コントロールという）及びに）標準ヒト尿陰性
コントロール（以下、陰性コントロールという＞噌の組
合せにて当該キットＬｆ１．構成される。

感作赤血球は、特異抗ヒト尿カリクレイン抗体を動物赤
血球に感作させた感作赤血球がその本体をなす。特異抗
ヒト尿カリクレインは高度に精製された免疫用のヒト尿
カリクレインを動物（好ましくｈ異種切物）Ｋ免疫し、
得られる抗血清よシ精製することによって製造される。

当該抗血清の製造は公知の方法にで行えばよく、ｋとえ
ｌ”ｊ’　Ｉｌｉｌ精度ヒト尿カリクレインと７０イン
ドの完全アジュバントの混合乳液を作り、動物の皮内に
２〜８回注射し、数日後採血を行い室温で凝固せしめた
後、４°ＣＴ−夜放置後、８．００Ｏｒｐｍ２０分間の
遠心分離により当該抗血清が得られる。免疫に用いる動
物によって、ヒト尿カリクレインに対する抗体産生能力
が異ることがら、感受性の高い動物群、例えば、モルモ
ット、ウサギ、ヒツジ、ニワトリを選ぶことが経済的に
有利である。当該抗血清の精製は、たとえば後記文献５
．６に記載の方法にて行われる。抗ヒト尿カリクレイン
抗体を感作させる赤血球は、特に動物を選ぶ必要はない
が、安定でしかも感度の茜い試薬全作る。ｒめにはヒツ
ジ、ニワトリ、ヒトの０型赤血球などが望せしい。

赤面′Ｍ、ｆ″ｉ生理食塩水で十分仇浄した後、グルク
ール・アルデヒド、ホルマリンなどの処理で安定化させ
る。

このような赤血球ｉｉ５〜１５μ程度のものが良い。精
製抗体でこれらの赤血球全感作するのは公知（文献７＄
照）の方法で実施すること〃・Ｕ」米る。

それには、赤血球と抗体とを緩圃液中で感作させるのが
よく、一般には赤血球＃廃液と抗体合有液を混合するこ
とにより行う。

本操作は、ｐＨ６，８−８，５、温度２０−６０’ＣＴ
行９のがよい、感作赤血球に凍結乾燥して、＾とえはバ
イアル中に、好筐しくけナトリウムアジドなどの如き区
存剤を１八加して、封入しておくことが好ましい。

本発明に関する陽性コントロールは、標串倹加線を作成
するために用いられるものであり、辿７；３はヒト尿カ
リクレイン含有の凍結乾燥品よシなるものである。かか
るヒト尿、カリクレインとじでは、たとえは新鮮人尿を
コロイド性含水ケイ酸アルミニムウと接触後、不溶液ト
リプシン阻害剤によるアフイニテイクロマトグラフイー
を行う方法（特願Ｆ＠５６−１８８７４４号）にて得ら
れたヒト尿カリクレイン凍結乾燥品などが用いられる。

糠非北ト尿カリクレインは緩衝ｉ１’ｌ解して使用され
、この際たとえば５〜５０　ｎｓ’／ｍｔとなるように
４〜６濃度段階まで小分けして標準検量線の作１１ｉ：
使用される。

陽性コントロールは、たとえばバイアル中に１好１しく
にナトリウムアジドなどの区存剤を添加して封入してお
く。

ｈ性コントロールは人尿カリクレイン抗体及び人尿カリ
クレイン抗原が共に陰性の液体（たとえば人血清、生理
食塩ｇ、など）よりなり、たとえばバイアル中に、好ま
しくはナトリウムアジドなどの保存剤を添加して、封入
しておくことが好ましいＯ 酵素活性測定用緩衝液は、感作赤血球、陽性コントロー
ル、＠性コントロールを希釈するために…いられるもの
であり、ｔとえげリン酸緩衝敢よりなり、非特異的反応
の生じるのを防止するために、たとえばストローマ、動
物血清などを添加してもよい。また、たとえばナトリウ
ムアジドなどの紀存剤を添加しておくことが好ましい。

本発明試薬のキットにおいては、さらに赤血球凝集反応
の特異性判定のための確認試薬（以下、確認試薬という
）を組合せてもよい。確認試薬は抗ヒト尿カリクレイン
よりなるものである。

実施例１ 比活性６．６力リクレイン矩位／　ｍ７蛋白の精製ヒト
尿カリクレインを家兎に免疫して抗ヒト尿カリクレイン
血清を得た。この抗血清を硫安分画。

陰イオン交換樹脂、ゲル濾過方法等により精製ヒト尿カ
リクレイン抗体の純度を上げた。ｆｆ１Ｊち、この抗血
清を生理食塩液で２倍希釈し、硫酸アンモニウム飽和溶
液の同等量を混合し、３０分間攪拌して８０分間静置後
遠心分離により沈澱を回収し友。この沈澱をｐＨ６，３
の０．０１７５　Ｍｌ、１ン酸緩衝液ＶＣ溶解して、同
緩衝液で平衡化し、　、ｔ　Ｌ）　ＥΔＦ−セルロース
に通して、同緩衝液でセルロース内の残液全溶出しつく
して精製した。この溶出液を減圧透析法によｐ透析と濃
縮全行ったのち、生理食塩水濃度の食塩を同上緩衝液に
加えたもので、Ｇ−２００セフツデツクスを膨潤したゲ
ルを用いてゲルろ過を行い、その最初に分取したピーク
部分を精製ヒト尿カリクレイン抗体として感作用に使用
した。

感作のための動物赤血球は、ヒツジ赤血球に’）ン酸緩
衝液で充分に洗浄後、グルクールアルデヒド奮終濃度０
．５　％　ｗ　／　ｖに添加して約１時間室温処理し、
上記緩衝液でゲルタールアルデヒドを除いて固定化赤血
球を得た。

５％ｗ　／　ｖ固定化赤血球の懸濁液と等量の上記の精
製ヒト尿カリクレイン（Ｅ２８゜ｎｍでｏ、ｏｉ程度）
を混合し、ｐＨ７，２でタンニン酸５〜２０ｍ９／ｄｌ
ｒ添加・攪拌後、４℃で１夜放置して感作し抗ヒト尿カ
リクレイン感作赤血球奮得た。そして充分に同上リン酸
緩衝液で洗浄し７’Ｃｏこの感作血球を分注してから凍
結乾燥して試薬を得た。

凍結乾燥後の抗ヒト尿カリクレイン感作赤血球を動物血
＠を含有する増化ナトＩＪウム含有等張化リン酸緩衝液
（ｐＨ７，２）に２％以上のヒツジ赤血球ストローマを
含むリン酸緩衝液で０．５％に、、１．′ｌ！整溶解し
、ヒト尿カリクレインに対する凝集反応をマイクロプレ
ート法で１ｊｌｔ１足した。検体中に含有せるヒト尿カ
リクレイン量の２・ｎｉ／ｍｌまでの測定は可能であっ
た。

実施例２　キットの構成 ヒト尿カリクレインキットに２−ｉれている試薬類は、
次の５種である。

■　抗ヒト尿カリクレイン感作ヒツジ赤血球：ｌバイア
ルの内容物は、乾燥感作ヒツジ赤血球および保存剤で■
のリン酸緩衝液（ＰＢＳ）の５−をこれに加えてａ濁さ
せるとき、０．５％（ｗ／ｖ）赤血球浮遊液か得られる
。保存剤としてナトリウムアジド１ｍ７が添加されてい
る。

■　ヒト尿カリクレイン陽性コントロール；ｌバイアル
中、除菌濾過した人尿カリクレイン１　ｍｌを含有する
。本溶液のＲＰＨＡ法による人尿カリクレイン量はｌ：
６４以上である。保存剤としてナトリウムアジドｌｆｆ
！ｆ（０，１％）が添加されている。

■　陰性コントロール： ｌバイアル中、除菌濾過した人尿カリクレイン抗体なら
びに人尿カリクレイン抗原が共Ｋｍ性の人血清又は生理
食塩液１　ｍｌを含有する。保存剤としてナトリウムア
ジド１ｍｓ’（０，１％）が添加されている。

■　リン酸緩衝液： ｌバイアル中、除菌濾過した塩化ナトリウム加等張リン
酸緩衝液、ｐＨ７−２（ＰＢＳ　）５０−を含有する。

ＰＢＳには、試験に際して非特異反応の生じるのを防止
するため、可溶化ストローマおよび動物血清を配合して
いる。

組成（５０Ｉ！！／中） リン酸ニナトリウム（無水）　　　８９５ｍ？リン酸−
カリウム　　　　　　　　１５５ｆｆｌＦ塩化ナトリウ
ム　　　　　　　　２２５ｍ？ストローマ　　　　　　
　　　　　　３　％動物血清　　　　　　　　　　　　
　ｌ　％ナトリウムアジド’　　　　　　　　５Ｑｙｎ
ｒｐＨ７，２ リン酸緩衝液の１０ｍ／ｒｒｉ抗ヒト尿カリクレイン感
作ヒツジ赤血球の懸濁用に用いられ、伐りは被験液の希
釈に用いる。印存剤としてナトリウムアジドｌ　ｍｓ’
（０，１％）を加えておくことが好ましい。

■　特異性判定のための確認試薬・ ｌバイアル中、除菌濾過した精製ヒト尿カリクレイン抗
体（ＰＨＡ価で５１２以上）を含む凍結乾燥品である。

これを生理食塩水の５−で溶解する。

実施例３　実施例２に示した試薬を用いて定量試験を次
の通り実施した。

■　抗ヒト尿カリクレイン感作ヒツジ赤血球を、１バイ
アル当たりリン酸緩衝Ｗ５ｒｎｔＶＣ懸ｌ蜀する。

■　Ｕ−プレートの各穴に、ｄｒｏｐｐｅｒでリン酸緩
衝ｇ、をそれぞれ２５μｔずつ入れる。

■　ｄｉｌｕｔｅｒＫよシ、Ａ列の穴に被験液各２５μ
ｔｆつを入れる。Ａ列の混液を上に用いたｄｉｌｕｔｅ
ｒ　　ＴＢ列へ移し、丈にＢ列よりＣ列へ移し、次々と
順次移して３列までこれを行う。これにより被験液は、
２倍段階希釈されており、３列の希釈倍数は１０２４倍
となっている。

■　別に被験液の代わりに、陽性コントロールおよび陰
性コントロールについても、同様にして希釈系列をつく
る。

■　ｄ　ｒｏｐｐｅｒを用い、すべての穴に抗ヒトカリ
クンイン感作ヒツジ赤血球のリン酸緩衝液懸濁欣を２５
μｔｆつ加える。

■　プレートは、ｍｉｃｒｏｍｉｘｅｒで約ｉｏ秒１１
１Ｉ振１ｉ、ｘ温で２ｎ間インキュベートする。

■　コントロールの観察 陽性コントロールについては、通常６４倍希釈以上で凝
集を認める。陰性コントロールは、Ａｍ」のすべて罠お
いて穴の底に赤血球の沈降物金認める（測定が良好な場
合、陰性像は小さくりＪ瞭である）。

■　試験結果 被Ｍ液洗つき、陰性コントロールと比較して凝集像ｆｃ
認める最高希釈＠数をもってヒト尿りノリクレイン価と
して、相関係数より概算量を求める。

その正確定Ｍｌ−ｉ、希釈列と凝集像の１＠、′径を求
め、標準線（約３〜ＢＯｎｒ）の対数グラフでの直線部
分より相関を算出して、禾知彼験液のヒト尿カリクレイ
ン量を測定することにより結果全米めることが出来る。

実施例４　感度と特異性の比較実験 ヒト尿被験液につき、カリクレインの比較定量試験を行
った。

本発明によるＲＰＨＡ法、ダ差電気泳動法（ＣＥＰ法お
よび、固相ラジオインムノアツセイ法（ＲＩＡ法：ミド
リ十字社！！！試製品）とで行った結果Ｖ′ｉ表１に示
すとおりである。

（以下余白） 表１　ヒト尿検体にりいてのカリクレイン定量試験 例えば、被験液Ｎｏ、２の場合、ＣＥＰ価がｌ：ｌであ
るのに対し、ＲＩＡ価１−１．ｌ：２０４８であり、不
発ＦＩＣよるＲＰＨＡ価がＲＩＡ価と同等以上の感度を
示した。本発明によるＲＰＨＡ法とＲＩＡ法とＫよる測
定結果には十分相図性がみられた。

又、ヒト尿被験液についての特異性を見るために行った
に験では、ヒト尿被験液を抗体であらかじめ中和して再
試験した結果、偽陽性と判定されるものは８％以下であ
り、本測定用試薬が非常に特異性の高いものであること
が判った。尚、血清にりいてはやや高い非特異率を示し
た。なお、確認試薬を添＋ｌ″ｌｊることにより測定結
果の確実性がより完全となる。

注） 文献１．　　Ａｒｃｈ、　ｋｌｉｎ、　Ｃｈｉｒ、、　
１４２６６３（１９２６）文献２．　　Ｊ、　Ｃｌ１ｎ
、　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｎ、　Ｍｅｔａｂ、　５１８４
０　（１９８０） 文献８．　　ＡｇｅｎｔｓａｎｄＡｃＬｉｏｎ５１０　
３２９（１９８０）文献４、　Ｊ、　ＩｈＴｎＬ１！ｎ
Ｄｌｌ（ＱｇｙＪ１２Ｇ　　２３６１　（１９８１）文
献５．　　Ｊ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、、　６
２　８３８６（１９４０） 文献６．　　Ｆｅｄ、　Ｐｒｏｃ、　１７　１１１６（
１９５８）文献７．医学のあゆみ　７８　７５９（１９
７０）手続補正書（自発） 昭ＩＩ’　５　フイｌ゛、ｌ　ＯＪ］１ゴ日特π１庁長
官　　　　　殿 １　！１１件の表示 昭　（１５７イ１　　　　／ｉヶ　許　　　［（・１ｉ
　　ｉ１′！　　１３５００１　　Ｑ２　発明の名称　
　ヒト尿カリクレイン測定用試薬：ｉ　　？＋ｌ１１１
］・する−バ ’Ｉ”　（’ｌト”　閂（、ｆ４％Ｎ′［出Ａ１１　人
ｊ℃’　”？；　（ｉ’＋ｌ’Ｆ）株式会社ミ　トリ十
字０、　１Ｉｌｉ　１１ニ、１す増加Ｔ　るｉＱ明’Ａ
ｔ７、　　ｉ１１丙１す７］象 ■、明細１（１第１頁のｌｒ婦′「請求の範囲を別紙の
通りに訂正すしとン。

２、回ｉｆｆ第４頁、第９　ｒＪ’ｒｈ　ｒ名反学」佑
１゛免投学」にＦ４Ｊ’、＋Ｅする。

３、　　ｌｂＪ摺第５頁、第１４行の「ポリエチレング
リコール」会：「各、（市のＪ　Ｖ（−ＭＪ’、ｉｌニ
する。

４、同ＦＪ４第６５＝：、第１７行の［（ｔγ素素性性
測定用り削除す／、）０ ５、　　ｌｉｉ理Ｊ第７頁、第５〜６行の「（好１しく
は異種動物う」令：削除する。

６、同シ１第、７頁、第１０行の「動′吻の皮肉に」牙
「たとえは動物の皮肉に２〜：３］而間１８１隔で」に
ｔ■正゛Ｔる。

７、同店第７頁、第Ｊｌイｉの「叔Ｈ後」ｔｒＪｉ赫γ
投−り後７へ一１０ＬＪ後」に’ｉｉＪ’ｊＥする。

８、同囚第８頁、第６行のｌ−１５ｔｔ　Ｊ孕ｒ　１．
５ミクロン」にｇ」止、−Ｔる。

９、同ｖ４第９頁、第１９行の「酵素活性測定用Ｊ　Ｔ
ｃ削除する。

１０．１司店第１０戸、第１１行のＵＪも活仙二６．６
カリクレイ７単位／ｍバ１ｆ白の精製」ヶ「関度に鞘製
した」にＡｌ正する。

１１、、　１ｒｔＪ　１ｉ第１１頁、第５行の１ろ過」
〒１濾、過」にＨｌ正す々０ １２、回１（第Ｊ１貞、第１４行の１）Ｊリフレイン」
孕「カリクレイン抗体」に削正する。

１３、　　同５０第１４頁、第１０行のｌ−５１２Ｊ奮
ｒｌ：５１２Ｊに削正する。

１４、回喪第１６頁、第２簀７行の「とじて、−−−〜
−出来るｍｌケ［とじＩこ。カリフレイノ含基ケ更に精
密に定ハ［するためには、以下に述べる伸準線ケ作成し
たＯｊシーわちヒト尿カリクレイ／の含、Ｈｌ、埒、知
溶液の祐釈倍数と対応する凝集像の直径（Ｉｍ）？ｌｒ
対数グラフにプロットし“ご標準極ＹｔｉｉμＡ’ｃ得
た。この検呈線孕もとに未知破倹液の希釈倍数と凝４１
も像の直径かしカリフレ・ｆノ含量ケ求めた。」に４止
する。

１５、同肖第１７負、下から第８９ｉの「同等ば上」孕
ｒ＋ｒｒｔｑ町に訂正する。

１６、同′Ｙ１４第Ｊ７頁、下から第１行［１〜第１８
頁、第；３行の「尚、−一−−−−冗全とｈ之（ＱＪイ
［削除′３−る。

１７、　　同’＃１１１８Ｍ、第８行のｌ’　Ａｇｅｎ
ｔｓａ＋ｌｄ　Ｊ　−〉１−Ａｇｅｎｔｑ　　ａ＋ｌ（
ｌ　Ｊに１ＪｊＬ！る。

別紙 ２、　　ｒ（″、ｆ許請求の範囲 （ＩＪ　　牛″」異抗し１・尿ノＪリクレイン４几イ本
イｒ：ｊ恥Ｊ′吻σ」珀［球にＡ６作し、で１（）たｌ
′）’ｃ、ヒト尿カリクレイノ感作赤血球４２むこと介
’ｒ、Ｊ徴とｒる逆受ノ］抗体赤Ｊｆ１１．Ｊｌ：　Ａ
’ｒ！（集成応用ヒト尿）Ｊリクレイノ１ｌｌｌｌ定試
梨。

（２）　　ｌｒケ異抗ヒ１−尿カリクレイン抗トド介動
物赤血球に感作（７でイ！）　７Ｃ抗ヒト尿カリクレ・
ｒノ感作赤血球、緩衝Ｙ１舷件準ヒト尿陽性コノトロー
ル及ｏ１・３ｆ１ニコノトｒＪ−ルｒ氷１１合）ｔで、
γるＡ−ノドへ柚五ヒしｆこ’ｒ’ｊ　１ＹＩ”Ｒｒ’
ｊ２ノンノ１）ｌｉ＞　曲用（１）Ｊ’Ｊ’ｉ　Ｎｅ＋
１ｉｌＥ　ノヒｈ　ｌｔＮ　カリ７／　ｖ　（ｙｄ用定
試薬。

（３）　　沁０に赤血球ＮＬ集反応の・１−１ｒ異１１
ユ看１Ｆ認のためのヒト尿カリクレーｒノ抗体よりなる
確認Ｗ・（薬牙ＡＩＩ合一＋ｔてなろ１１ケＷＩ＃ｎ求
の１１１囲第（２）項記載のピト尿カリクレ・ｆノロ］
１（定ｔ・（薬。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）特異抗七ト尿カリクレイン抗体を動物赤血球に感
   作して得た抗ヒト尿カリクレイン感作赤血球を含むこと
   を特徴とする逆受身抗体赤血球凝集反応用ヒト尿カリク
   レイン測定試薬。
2. （２）特異抗ヒト尿カリクレイン抗体を動物赤血球に感
   −′作して得た抗ヒト尿カリクレイン感作赤血球、酵素
   活性測定用緩衝液、標準ヒト尿陽性コントロール及び陰
   性コントロールを組合せてなるキットの形態した特許請
   求の範囲第（１）項記載のヒト尿カリクレイン測定試薬
   。
3. （３）　　さらに赤血球凝集反応の特異性確認めための
   ヒト尿カリクレイン抗体よシなる確認試薬を組合せてな
   る特許請求の範囲第（２）項記載のヒト尿カリクレイン
   測定試薬。