JPS59183370A - ヘモグロビン標準物質の製造方法 - Google Patents
ヘモグロビン標準物質の製造方法Info
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明はグルコースを含有していないヘモグロビン標準
物質の製造方法に関するものである。
物質の製造方法に関するものである。
糖尿病患者の代謝作用を制御するには、糖尿病を視監す
る際に血液および尿の糖を測定するほかグリコジル化（
ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ ） ヘモグロビンを測定す
るのが臨床診療において有益で信頼できる方法であるこ
とが知られている。
る際に血液および尿の糖を測定するほかグリコジル化（
ｇｌｙｃｏｓｙｌａｔｅｄ ） ヘモグロビンを測定す
るのが臨床診療において有益で信頼できる方法であるこ
とが知られている。
血球の色素であるヘモグロビンは、着色成分である約５
％のヘムと蛋白質である約９５％のグロビンとからなり
、ヘムとグロビンとは複合体カラムクロマトグラフィー
によってヘモグロビン溶液を分離した場合に、主ヘモグ
ロビン部分すなわちＨｂＡ工が不均一であること、すな
わち主フラクションより前にＨｂＡ：ｃと呼ばれる一連
のより迅速に移動するヘモグロビンが溶離することか知
られている。かかるヘモグロビン・フラクションは成分
ＨｂＡＩａ 、Ｈｔ）ＡよりおよびＨｂＡ工。に分離で
きる。
％のヘムと蛋白質である約９５％のグロビンとからなり
、ヘムとグロビンとは複合体カラムクロマトグラフィー
によってヘモグロビン溶液を分離した場合に、主ヘモグ
ロビン部分すなわちＨｂＡ工が不均一であること、すな
わち主フラクションより前にＨｂＡ：ｃと呼ばれる一連
のより迅速に移動するヘモグロビンが溶離することか知
られている。かかるヘモグロビン・フラクションは成分
ＨｂＡＩａ 、Ｈｔ）ＡよりおよびＨｂＡ工。に分離で
きる。
化学構造を測定した結果、糖蛋白質すなわちヘモグロビ
ンＡＩのグリコジル化生成物が含有されていて、これは
フルクトース−】１６−ジフオスフエート、グルコース
−６−フォスフェートおよびグルコースのような炭水化
物の分子のアルデヒド基と末端アミ７基との縮合反応に
よって生成することが分った。先ず平衡反応の結果不安
定なアルジミン（シッフ塩基）が生成し、これ（１アマ
ドリン配向（Ａｍａｃｉｏｒｉｕｍｌａｇｅｒｕｎｇ
） ニＪ： ツテ不ｉＪ 通約にケトアミンになる。約
１２０日の赤血球の寿命の間に非酵素反応によってグリ
コジル化ヘモグロビン（Ｈｔ）Ａ −Ｈｔ）Ａ４ｂ−
およびＨｂＡ工。）が生成する。
ンＡＩのグリコジル化生成物が含有されていて、これは
フルクトース−】１６−ジフオスフエート、グルコース
−６−フォスフェートおよびグルコースのような炭水化
物の分子のアルデヒド基と末端アミ７基との縮合反応に
よって生成することが分った。先ず平衡反応の結果不安
定なアルジミン（シッフ塩基）が生成し、これ（１アマ
ドリン配向（Ａｍａｃｉｏｒｉｕｍｌａｇｅｒｕｎｇ
） ニＪ： ツテ不ｉＪ 通約にケトアミンになる。約
１２０日の赤血球の寿命の間に非酵素反応によってグリ
コジル化ヘモグロビン（Ｈｔ）Ａ −Ｈｔ）Ａ４ｂ−
およびＨｂＡ工。）が生成する。
ａ
健康な代謝作用が行われている糖尿病でない人の場合に
はグリコジル化ヘモグロビンの全Ｈｂに対する割合は３
．５〜７．５％であるが、糖尿病患者の場合には２０％
以上まで増大する。
はグリコジル化ヘモグロビンの全Ｈｂに対する割合は３
．５〜７．５％であるが、糖尿病患者の場合には２０％
以上まで増大する。
米国特肝第Ｌ９６４．８６５号は、濾過によって導入さ
れた大気中の酸素によって５モグロビンがメトヘモグロ
ビンすなわちオキシヘモグロビンに酸化されている「粗
」ヘモグロビン・７ラクシヨンを濾過することによって
生成する全ヘモグロビンを比色測定用するための凍結乾
燥したヘモグロビン標準物質を開示している。メトヘモ
グロビンを所定の濃度値に調整した後に凍結乾燥すると
、メトヘモグロビンはこの形態において全ヘモグロビン
の比色測定用の標準物質として適当である。
れた大気中の酸素によって５モグロビンがメトヘモグロ
ビンすなわちオキシヘモグロビンに酸化されている「粗
」ヘモグロビン・７ラクシヨンを濾過することによって
生成する全ヘモグロビンを比色測定用するための凍結乾
燥したヘモグロビン標準物質を開示している。メトヘモ
グロビンを所定の濃度値に調整した後に凍結乾燥すると
、メトヘモグロビンはこの形態において全ヘモグロビン
の比色測定用の標準物質として適当である。
ナショナル・アカデミ−・オブ・サイエンシス−ナショ
ナル・リサーチ・カランシルＵＳＡ（ＮＲＯ）およびイ
ンターナショナル・コミッティー・フォー・スタンダー
ダイジング・イン・ヘマトロジ−（Ｉ ａ Ｓ Ｈ）に
よって定められた規格と合致させるために、この凍結乾
燥した標準物質を使用前に６シアノメトヘモグロビンに
転化する。
ナル・リサーチ・カランシルＵＳＡ（ＮＲＯ）およびイ
ンターナショナル・コミッティー・フォー・スタンダー
ダイジング・イン・ヘマトロジ−（Ｉ ａ Ｓ Ｈ）に
よって定められた規格と合致させるために、この凍結乾
燥した標準物質を使用前に６シアノメトヘモグロビンに
転化する。
しかし、現在の技術状態の標準物質を使用する場合には
、全ヘモグロビンの分光器による測定のみが可能であっ
て、個々のヘモグロビン・７ラクシヨン例えばＨｂＡ
フラクションの測定は不可能■ である。この理由は、ヘモグロビンがメトヘモグロビン
に酸化される際に、配合団および連鎖の配向特性の両者
が変化するので、かがる標準物質は、例えば、未処理の
血液とは異なるクロマトグラフィー特性な示し、従って
ヘモグロビン・フラクションを直接測定するために使用
することも、分離フロセス、例えば、ＨｂＡ 測定用分
離プロセスヲ正■ しく行うための標準物質として使用することもできない
。
、全ヘモグロビンの分光器による測定のみが可能であっ
て、個々のヘモグロビン・７ラクシヨン例えばＨｂＡ
フラクションの測定は不可能■ である。この理由は、ヘモグロビンがメトヘモグロビン
に酸化される際に、配合団および連鎖の配向特性の両者
が変化するので、かがる標準物質は、例えば、未処理の
血液とは異なるクロマトグラフィー特性な示し、従って
ヘモグロビン・フラクションを直接測定するために使用
することも、分離フロセス、例えば、ＨｂＡ 測定用分
離プロセスヲ正■ しく行うための標準物質として使用することもできない
。
全ヘモグロビン中のグリコジル化ヘモグロビンの割合ご
測定するには種々の方法を使用することができる。グル
コシル化ヘモグロビンの負電荷は比較的大きいので、グ
リコジル化ヘモグロビンはイオン交換クロマトグラフィ
ー、高圧液相クロマトクラフィーおよび電気滲透によっ
て他のヘモグロビンから分離することができる。グリコ
ジル化ヘモグロビンの池の測定方法はシュウ酸中におけ
るグリコジル化ヘモグロビンの加水分解に基づいており
、ヘキソースが開裂して５−ヒドロキシメチルフルフラ
ールに転化し、これをチオバルビッール酸ｆＴＥＡ＋と
反応後に測光法により測定することができる。また、ヘ
モグロビンに結合している炭水化物Ｌ／）水酸基ご利用
する親和力（ａｆｆｉｎｉｔｙクロマトグラフィー分離
も可能である。
測定するには種々の方法を使用することができる。グル
コシル化ヘモグロビンの負電荷は比較的大きいので、グ
リコジル化ヘモグロビンはイオン交換クロマトグラフィ
ー、高圧液相クロマトクラフィーおよび電気滲透によっ
て他のヘモグロビンから分離することができる。グリコ
ジル化ヘモグロビンの池の測定方法はシュウ酸中におけ
るグリコジル化ヘモグロビンの加水分解に基づいており
、ヘキソースが開裂して５−ヒドロキシメチルフルフラ
ールに転化し、これをチオバルビッール酸ｆＴＥＡ＋と
反応後に測光法により測定することができる。また、ヘ
モグロビンに結合している炭水化物Ｌ／）水酸基ご利用
する親和力（ａｆｆｉｎｉｔｙクロマトグラフィー分離
も可能である。
しかし、異なる測定方法を使用する場合には、同一試料
について得られた分析結果が使用した方法によって互に
Ｉ＠なる関係にあるという欠点がある。従って、例えは
１割合で示した糖ヘモグロビン含量を測定するためにマ
クロカラムまたはミクロカラムのいずれご使用するかに
は無関係に、化学的ＴＥＡ方法によって求められたＨｂ
ＡＩ値は補正係数のみによって比較できるようになる
。しかも、従来の分析方法では、全ＨｂＡエフラクショ
ンおよび分離された個々のＨｂＡエユ、ｂおよび■ｂＡ
工。７ラクシヨンＣ１別個に測定されるので、分析値は
一様でなく、従って分析値を互に比較するのは困難であ
る。例えば、グリコジル化ヘモグロビンｌＥ分Ｈｂ人工
ａ＋ｂ＋。Ｇま従来のミクロカラム°クロマトグラフィ
ーおよび高圧液相クロマトグラフィーの両者によって容
易に測定できるが、グリコジル化ヘモグロビン成分を分
析した場合に、結果の評価は両方注量に相関関係がある
が両方注量で一致しないことを示すにすぎない。
について得られた分析結果が使用した方法によって互に
Ｉ＠なる関係にあるという欠点がある。従って、例えは
１割合で示した糖ヘモグロビン含量を測定するためにマ
クロカラムまたはミクロカラムのいずれご使用するかに
は無関係に、化学的ＴＥＡ方法によって求められたＨｂ
ＡＩ値は補正係数のみによって比較できるようになる
。しかも、従来の分析方法では、全ＨｂＡエフラクショ
ンおよび分離された個々のＨｂＡエユ、ｂおよび■ｂＡ
工。７ラクシヨンＣ１別個に測定されるので、分析値は
一様でなく、従って分析値を互に比較するのは困難であ
る。例えば、グリコジル化ヘモグロビンｌＥ分Ｈｂ人工
ａ＋ｂ＋。Ｇま従来のミクロカラム°クロマトグラフィ
ーおよび高圧液相クロマトグラフィーの両者によって容
易に測定できるが、グリコジル化ヘモグロビン成分を分
析した場合に、結果の評価は両方注量に相関関係がある
が両方注量で一致しないことを示すにすぎない。
要するに、グリコジル化ヘモグロビンの個々σ〕測定方
法、特にイオン交換クロマトグラフィーでは、フラクシ
ョンの分離に関しては良好な結果が得られるが、測定結
果は使用した方法によって左右されるので、転用できず
、従って比較できないと云える。特定の分離方法の内部
コントロールとして従来標準物質が使用されているが、
この方法はあるプロセスに使用できるにすぎない。しか
し、使用した分離技術のすべて、従って普媚的標準物質
を用いて求めた測定値のすべてを比較できることが、日
常の臨床検査において重要な要件である。
法、特にイオン交換クロマトグラフィーでは、フラクシ
ョンの分離に関しては良好な結果が得られるが、測定結
果は使用した方法によって左右されるので、転用できず
、従って比較できないと云える。特定の分離方法の内部
コントロールとして従来標準物質が使用されているが、
この方法はあるプロセスに使用できるにすぎない。しか
し、使用した分離技術のすべて、従って普媚的標準物質
を用いて求めた測定値のすべてを比較できることが、日
常の臨床検査において重要な要件である。
不発明の目的は、同一物質を用いて内外で使用・ぎれて
いるすべての分離方法によって）ＩｂＡ工を測定する際
の品質のコントロールとすることができる安定なグリフ
シル化へモグ四ビン標準物質の製造方法を得ることにあ
る。
いるすべての分離方法によって）ＩｂＡ工を測定する際
の品質のコントロールとすることができる安定なグリフ
シル化へモグ四ビン標準物質の製造方法を得ることにあ
る。
この目的はべ発明方法によって達成される。
不発明の概要
本発明（ゴグルコースを含有していないヘモグロビン標
準物質のＷ遣方法に関するものである。不発明方法では
、赤血球のアリフートを等張塩溶液で洗浄し、次いで溶
血させる。溶血物中の遊離ヘモグロビンおよびグリフシ
ル化ヘモグロビンを、希薄に８［Ｆｅ（（Ｊ）６） 溶
液および希薄Ｋ ＣＩＪ浴溶液使用することにより、対
応するシアンメトヘモグロビンに転化し、次いで適当な
緩衝剤を添加する１６滴適当溶媒により脂質および細胞
残留物を除去し、生成した溶血物を脱環し、次いで凍結
乾燥する。
準物質のＷ遣方法に関するものである。不発明方法では
、赤血球のアリフートを等張塩溶液で洗浄し、次いで溶
血させる。溶血物中の遊離ヘモグロビンおよびグリフシ
ル化ヘモグロビンを、希薄に８［Ｆｅ（（Ｊ）６） 溶
液および希薄Ｋ ＣＩＪ浴溶液使用することにより、対
応するシアンメトヘモグロビンに転化し、次いで適当な
緩衝剤を添加する１６滴適当溶媒により脂質および細胞
残留物を除去し、生成した溶血物を脱環し、次いで凍結
乾燥する。
発明の詳説
安定なグｌｌｌコシル化ヘモグロビン標準物質の製２υ
造’方ｉは、ヘモグロビンのシアンメトヘモグロビンへ
の転化に基づく。本発明方法によって生成するシアンメ
トヘモグロビンは長期の貯蔵期間中でも一定の吸光比（
Ｅｘｔｉｎｋｔｉｏｒｉｓ ｖｅｒｈＫｌｔｎｉｓｓｅ
ｌを保持しているが、置換基の異なるヘモグロビンの
吸光比Ｇま長期の貯蔵期間中にＨｂ変異体（Ｖａｒｉａ
ｎｔｌに特定な値に当ってはいないので、標準物質とし
て適当でない。
造’方ｉは、ヘモグロビンのシアンメトヘモグロビンへ
の転化に基づく。本発明方法によって生成するシアンメ
トヘモグロビンは長期の貯蔵期間中でも一定の吸光比（
Ｅｘｔｉｎｋｔｉｏｒｉｓ ｖｅｒｈＫｌｔｎｉｓｓｅ
ｌを保持しているが、置換基の異なるヘモグロビンの
吸光比Ｇま長期の貯蔵期間中にＨｂ変異体（Ｖａｒｉａ
ｎｔｌに特定な値に当ってはいないので、標準物質とし
て適当でない。
一杢発明においては、不発明方法によりグリコジル化ヘ
モグロビンご首尾よく製造するには、溶血前に赤血球を
希薄Ｎａｐｔ等張溶液で数回洗浄し、しかる後に遊離ヘ
モグロビンおよびグリコジル化ヘモグロビンを対応する
シアンメトヘモグロビンに転化し、しかる後に溶血物を
ナトリウム・リン酸塩−シアン化物緩衝液で安定化する
のが特に有・利であることを確かめた。これは、かがる
手段の結果として、それ以外の場合には反応条件下に不
安定であるに８［Ｆｅ（ＯＮＩ６）錯体が、−万ではそ
の酸化作用を保持し、他方ではグロビン連鎖に望ましく
ない反応を行わせないからである。マスキングＯＮイオ
ンの代りに、例えばＳＯＮイオンも使用できる。
モグロビンご首尾よく製造するには、溶血前に赤血球を
希薄Ｎａｐｔ等張溶液で数回洗浄し、しかる後に遊離ヘ
モグロビンおよびグリコジル化ヘモグロビンを対応する
シアンメトヘモグロビンに転化し、しかる後に溶血物を
ナトリウム・リン酸塩−シアン化物緩衝液で安定化する
のが特に有・利であることを確かめた。これは、かがる
手段の結果として、それ以外の場合には反応条件下に不
安定であるに８［Ｆｅ（ＯＮＩ６）錯体が、−万ではそ
の酸化作用を保持し、他方ではグロビン連鎖に望ましく
ない反応を行わせないからである。マスキングＯＮイオ
ンの代りに、例えばＳＯＮイオンも使用できる。
脂質および細胞残、留物をきれいに除去するには、次い
で溶血物をＣａＺ、で処理するのが有利であることを確
かめた。ａａｔ、の代りに、例えば、トルエン等のよう
な異なる脂肪溶媒を使用できるが、溶媒はその池の点で
はヘモグロビンに対して不活性であることが必要である
。
で溶血物をＣａＺ、で処理するのが有利であることを確
かめた。ａａｔ、の代りに、例えば、トルエン等のよう
な異なる脂肪溶媒を使用できるが、溶媒はその池の点で
はヘモグロビンに対して不活性であることが必要である
。
不発明方法によって製造したヘモグロビン標準物質を製
造直後に使用しない場合には、先ず低温で凍結し、次い
で極めてゆるやかに徐々に温度を上昇することによって
高真空中で凍結乾燥する。
造直後に使用しない場合には、先ず低温で凍結し、次い
で極めてゆるやかに徐々に温度を上昇することによって
高真空中で凍結乾燥する。
このプロセスは特に重要であって、この理由Ｃま、ヘモ
グロビン標準物質がＨｌ）ＡＩ測測定際の品質のコント
ロールとして機能する性質を損なわないためには、ヘモ
グロビン中の蛋白質が変性しないようにする必要がある
からである。このようにして製造された品質のコントロ
ールは光を遮断し、冷凍した状態において８ｔ月以上保
存することができる。
グロビン標準物質がＨｌ）ＡＩ測測定際の品質のコント
ロールとして機能する性質を損なわないためには、ヘモ
グロビン中の蛋白質が変性しないようにする必要がある
からである。このようにして製造された品質のコントロ
ールは光を遮断し、冷凍した状態において８ｔ月以上保
存することができる。
’ｆｆ１ＢＡ法に関して、不発明方法によって製造した
環ヘモグロビン標準物質は未結合グルコースを含有して
いないので、平衡を安定化するためにグルコースを必要
とせずかつグリコジル化ヘモグロビンの開裂がその製造
・貯蔵中Ｇこ起らない点を、特に強調する必要がある。
環ヘモグロビン標準物質は未結合グルコースを含有して
いないので、平衡を安定化するためにグルコースを必要
とせずかつグリコジル化ヘモグロビンの開裂がその製造
・貯蔵中Ｇこ起らない点を、特に強調する必要がある。
これは、池の場合に５ヒドロキシ−メチル−フルフラー
ルの生成が非特異的に増大する結果として、ＴＢＡ法に
よる値が比較的大きくなるのを防止する。
ルの生成が非特異的に増大する結果として、ＴＢＡ法に
よる値が比較的大きくなるのを防止する。
塩析作用によってヘモグロビン標準物質の溶解１０度が
低下して、ある方法ではヘモグロビン成分に関する値が
正しくなくなるのを防止するために、不発明方法では脱
塩をゲルの濾過または透析によって行う。
低下して、ある方法ではヘモグロビン成分に関する値が
正しくなくなるのを防止するために、不発明方法では脱
塩をゲルの濾過または透析によって行う。
凍結乾燥したヘモグロビン標準物質Ｇま所要に応じて極
めて迅速かつ簡単に再形成して品質のフントロールとし
て使用することができる。
めて迅速かつ簡単に再形成して品質のフントロールとし
て使用することができる。
不発明を次の実施例について説明する。
実施例
先ず、１−の赤血球を２０−の等張ＮＡＯｔ溶液で数回
洗浄し、その都度遠心分離後に上澄液を吸引除去した。
洗浄し、その都度遠心分離後に上澄液を吸引除去した。
次いで１４の蒸留水を加えて溶血ぎせ、この溶液を２分
間静置した。ｓ ｏ ｐｔの５％に８（Ｆｅ（ａｕ＋、
）溶液および２ｔｔｔの０．５ ％ Ｋ ＯＮ溶液を添
加し、それぞれの場合に２分間静置し、激しい混合？繰
返すことによりヘモグロビンをシアンメトヘモグロビン
に転化した。次いで溶血物ＥｐＨ約６．７のナトリウム
・リン酸塩−シアン化物緩衝液】２−で希釈した。この
ｐＨ値は、通常そうであるように、ＮａＨ２ＰＯ，ｘ
Ｈ２Ｏ４，５９りとＮａ２ＨＰ○、］、、１８クトＫ
ＯＮ Ｏ，６５クトヲ蒸留水に溶解して全容積を１ｔと
することにより達成したＤ次いで、脂質および細胞残留
物を除去するために、２−のａａｔ、、を添加し、この
混合物ＦＩＯ分間遠心分離した。次いで、従来法、例え
ば、ゲルの濾過または透析により脱塩を行った。
間静置した。ｓ ｏ ｐｔの５％に８（Ｆｅ（ａｕ＋、
）溶液および２ｔｔｔの０．５ ％ Ｋ ＯＮ溶液を添
加し、それぞれの場合に２分間静置し、激しい混合？繰
返すことによりヘモグロビンをシアンメトヘモグロビン
に転化した。次いで溶血物ＥｐＨ約６．７のナトリウム
・リン酸塩−シアン化物緩衝液】２−で希釈した。この
ｐＨ値は、通常そうであるように、ＮａＨ２ＰＯ，ｘ
Ｈ２Ｏ４，５９りとＮａ２ＨＰ○、］、、１８クトＫ
ＯＮ Ｏ，６５クトヲ蒸留水に溶解して全容積を１ｔと
することにより達成したＤ次いで、脂質および細胞残留
物を除去するために、２−のａａｔ、、を添加し、この
混合物ＦＩＯ分間遠心分離した。次いで、従来法、例え
ば、ゲルの濾過または透析により脱塩を行った。
上述の出発溶液から約２４の標準物質を得た。
保存のためにこれらの標準物質を高真空中で先ず−４・
０°Ｃで、次いで一２０°Ｃに昇温して４８時間凍結乾
燥した。
０°Ｃで、次いで一２０°Ｃに昇温して４８時間凍結乾
燥した。
これらの標準物質の安定性は、暗所で冷凍下に保存した
場合に、８ｔ月以上の間保証されることを確かめた。こ
れらの品質のコントロール？、それぞれ０，５〜２−の
好ましくは蒸留水を添加することにより再形成した後に
、使用した。この例σ〕標準物質の全ヘモグロビン含量
（、；１＋〜６ｒｎ９１０．５−であった。正確な測定
は常法で行った。
場合に、８ｔ月以上の間保証されることを確かめた。こ
れらの品質のコントロール？、それぞれ０，５〜２−の
好ましくは蒸留水を添加することにより再形成した後に
、使用した。この例σ〕標準物質の全ヘモグロビン含量
（、；１＋〜６ｒｎ９１０．５−であった。正確な測定
は常法で行った。
不発明方法によって製造した標準物質は、すべてのグリ
コジル化ヘモグロビン測定方法に、これらの特定の検出
方法および標準範囲を考慮した上で使用することができ
るので、普遍的な標準物質をヘモグロビンのＨｂＡエフ
ラクションの測定にはじめて使用することができるよう
になった、このことは次の第１表に示されている。
コジル化ヘモグロビン測定方法に、これらの特定の検出
方法および標準範囲を考慮した上で使用することができ
るので、普遍的な標準物質をヘモグロビンのＨｂＡエフ
ラクションの測定にはじめて使用することができるよう
になった、このことは次の第１表に示されている。
第１表から分るように、高圧液相クロマトグラ１フイー
（Ｉ（ＰＬＣ）、マクロカラム、ミクロカラム、および
チオバルビッール酸法−−この方法は分離カラム法の測
定値２ある補正係数で補正した後に比較可能になるｍ−
のような、互に異なってはいるが比較可能である分離方
法を使用すると・糸に固有の予想誤差限界内、の結果が
得られるので・糖尿病患者の代謝状態を測定する際に用
いられるＨｂＡ工測定方法の精度のコントロールとして
、不発明方法で製造したヘモグロビン標準物質を使用ｌ
・・することは普遍的に重要である。
（Ｉ（ＰＬＣ）、マクロカラム、ミクロカラム、および
チオバルビッール酸法−−この方法は分離カラム法の測
定値２ある補正係数で補正した後に比較可能になるｍ−
のような、互に異なってはいるが比較可能である分離方
法を使用すると・糸に固有の予想誤差限界内、の結果が
得られるので・糖尿病患者の代謝状態を測定する際に用
いられるＨｂＡ工測定方法の精度のコントロールとして
、不発明方法で製造したヘモグロビン標準物質を使用ｌ
・・することは普遍的に重要である。
最近導入された親和力クロマトグラフィー法によって求
めた値でさえも予想と同程度の大きざの範囲内に入る。
めた値でさえも予想と同程度の大きざの範囲内に入る。
不発明方法で製造したヘモグロビン標準物質を１コント
ロ゛−ルとして使用すると、ヘモグロビン・フラクショ
ンの分離機構が異なるために上述の池の方法と比較でき
ないイソ７オーカシング（Ｉｓｏｆｏｋｕｓｓｉｅｒｕ
ｎｇ ）法および電気滲透法ノヨうな分離方法の場合で
も、分離系が正しく取扱われ、ているかどうかを明確に
確認することができる。
ロ゛−ルとして使用すると、ヘモグロビン・フラクショ
ンの分離機構が異なるために上述の池の方法と比較でき
ないイソ７オーカシング（Ｉｓｏｆｏｋｕｓｓｉｅｒｕ
ｎｇ ）法および電気滲透法ノヨうな分離方法の場合で
も、分離系が正しく取扱われ、ているかどうかを明確に
確認することができる。
第１表から明らかなように、イソ７オーカシング法およ
び電気滲透法では、ＨｂＡＩ収分に関して約７％低い値
が得られるが、これらの値はこれらの方法の場合におい
て池の方法で得られた値から予想される範囲内の結果で
ある。同様な比例関係が同一組成を有する未処理の血液
について比較測定した場合にも観察された。
び電気滲透法では、ＨｂＡＩ収分に関して約７％低い値
が得られるが、これらの値はこれらの方法の場合におい
て池の方法で得られた値から予想される範囲内の結果で
ある。同様な比例関係が同一組成を有する未処理の血液
について比較測定した場合にも観察された。
全フラクションＨｂＡ工全を個々のフラクションＨｂＡ
Ｉａ＋ｂおよびＨｔ）ＡＩ。に分離することは実際の検
査ではさほど重要なことではないが、これらのフラクシ
ョンも、本発明方法によって製造したグリコジル化ヘモ
グロビンを使用することにより分離方法、特にＨＰＬＯ
，ＴＢＡ＝マクロカラムおよびイソフォーカシング法と
は無関係に、正確に試験することができる。
Ｉａ＋ｂおよびＨｔ）ＡＩ。に分離することは実際の検
査ではさほど重要なことではないが、これらのフラクシ
ョンも、本発明方法によって製造したグリコジル化ヘモ
グロビンを使用することにより分離方法、特にＨＰＬＯ
，ＴＢＡ＝マクロカラムおよびイソフォーカシング法と
は無関係に、正確に試験することができる。
−３９！
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ グルコースを含有していないヘモグロビン標準物質
を製造するに当り、 （ａ）赤血球のアリコートを等張塩溶液で洗浄し、 （ｂ）この赤血球を溶血させて遊離のグリコジル化ヘモ
グロビンを含有する溶血物を生成しＩＪ＋Ｃ）この赤血
球中の遊離ヘモグロビンおよびグリフシル化ヘモグロビ
ンを、希薄に８（Ｆｅ （ＯＮ ＋、）溶液および希薄
ＫＯＮ溶液を使用することにより、対応するシアンメト
ヘモグロビンに転化し、 （ｃｌ）緩衝剤を加えて工程（０）からの溶血物を安定
化し、 （ｅ）不活性溶媒ご使用することにより工程＜Ｃ）の安
定化溶血物から脂質および細胞残留物を除去し、 （’ｆ＋工程（ｅｌから得た溶血物を脱塩し、（ｇ）工
ｆｆｌ （ｆ）から得た溶血物を凍結乾燥することを特
徴とするヘモグロビン標準物質の製造方法。 λ 工程［ａ）の等張塩溶液が等張ＮａＯｌ溶液である
特許請求の範囲第１項記載の方法。 ＆ 蒸留水を使用して工ｉ （ｂｌの溶血反応を行う特
許請求の範囲第１項記載の方法。 表 工程（ｄ）の緩衝剤がす） ＩＪウム・リン酸塩−
シアン化物緩衝液である特許請求のｌ１ｌｉ！囲第１１
（１項記載の方法。 五 工程（ｅ）の溶媒がａＣｔ、またはトルエンである
特許請求の範囲第１項記載の方法。 ＆ ゲルの濾過または透析により工程（ｆ）の脱塩を行
う特許請求の範囲第１項記載の方法。 ？、 工程（Ｃｊ）の溶血物を工Ｎ （ｄｌにおいてｐ
Ｈ約６．７のナトリウム・リン酸塩−シアン化物緩衝液
で希釈することにより安定化する特許請求の範囲第１項
記載の方法。 ＆ 工程（ｇ）の凍結乾燥な真空中−４０”Ｃで行う特
許請求の範囲第１項記載の方法。 ９ 特許請求の範囲第１項記載の方法により製造したグ
ルコースを含有していないヘモグロビン標準物質。 １０、 蒸留水を添加することにより再形収した特Ｗ
ｆ請求σ）範囲第９項記載のヘモグロビン標準物質。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3311458A DE3311458C2 (de) | 1983-03-29 | 1983-03-29 | Verfahren zur Herstellung einer glukosefreien Hämoglobinkontrolle |
| DE33114587 | 1983-03-29 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS59183370A true JPS59183370A (ja) | 1984-10-18 |
Family
ID=6195010
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP59059712A Pending JPS59183370A (ja) | 1983-03-29 | 1984-03-29 | ヘモグロビン標準物質の製造方法 |
Country Status (6)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4590164A (ja) |
| EP (1) | EP0129646A1 (ja) |
| JP (1) | JPS59183370A (ja) |
| CA (1) | CA1210694A (ja) |
| DE (1) | DE3311458C2 (ja) |
| HU (1) | HU191646B (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2017156228A (ja) * | 2016-03-02 | 2017-09-07 | 特定非営利活動法人 病態解析研究所 | 血液分析装置の精度管理用管理物質及びその製造方法 |
| JP2022510731A (ja) * | 2019-02-15 | 2022-01-27 | シーメンス・ヘルスケア・ダイアグノスティックス・インコーポレイテッド | 患者の液体試験サンプル中の糖化ヘモグロビンパーセントを決定するためのキャリブレーターおよびコントロール |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1206003B (it) * | 1987-05-18 | 1989-04-05 | Menarini Sas | Soluzione di controllo della funzio nalita' della colonna cromatografica a scambio ionico di apparecchiature hplc (cromatografia liquida ad alta prestazione), e relativo procedimento di preparazione |
| EP0590047A1 (en) * | 1991-06-19 | 1994-04-06 | Abbott Laboratories | Rapid determination of glycated hemoglobin |
| US7361513B2 (en) * | 2005-04-08 | 2008-04-22 | Streck, Inc. | Cellular controls for glycated hemoglobin Hb A1c |
| US7521244B2 (en) * | 2006-10-26 | 2009-04-21 | Bionostics, Inc. | Standard reference solutions |
| JP6197434B2 (ja) * | 2013-07-24 | 2017-09-20 | 株式会社アドヴィックス | 電動駐車ブレーキ装置 |
| CN106033076A (zh) * | 2015-03-18 | 2016-10-19 | 杭州量康科技有限公司 | 用于检测干血样本的方法以及系统 |
| CN106771261B (zh) * | 2017-01-20 | 2019-05-24 | 深圳市雷诺华科技实业有限公司 | 糖化血红蛋白质控品的制备方法及其质控品 |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3607695A (en) * | 1969-02-14 | 1971-09-21 | Pfizer & Co C | Hemoglobinopathy controls |
| US3964865A (en) * | 1975-01-30 | 1976-06-22 | Sigma Chemical Company | Lyophilized human hemoglobin standard for colorimetric determination of total hemoglobin |
| US4465774A (en) * | 1981-07-16 | 1984-08-14 | Sherwood Medical Company | Standard or control material for glysocylated or total hemoglobin determination |
| US4485174A (en) * | 1982-09-29 | 1984-11-27 | Instrumentation Laboratory Inc. | Hemoglobin-based blood gas control |
-
1983
- 1983-03-29 DE DE3311458A patent/DE3311458C2/de not_active Expired
-
1984
- 1984-03-22 CA CA000450176A patent/CA1210694A/en not_active Expired
- 1984-03-26 US US06/593,127 patent/US4590164A/en not_active Expired - Fee Related
- 1984-03-28 EP EP84103421A patent/EP0129646A1/de not_active Withdrawn
- 1984-03-28 HU HU841237A patent/HU191646B/hu unknown
- 1984-03-29 JP JP59059712A patent/JPS59183370A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2017156228A (ja) * | 2016-03-02 | 2017-09-07 | 特定非営利活動法人 病態解析研究所 | 血液分析装置の精度管理用管理物質及びその製造方法 |
| JP2022510731A (ja) * | 2019-02-15 | 2022-01-27 | シーメンス・ヘルスケア・ダイアグノスティックス・インコーポレイテッド | 患者の液体試験サンプル中の糖化ヘモグロビンパーセントを決定するためのキャリブレーターおよびコントロール |
| US11327081B2 (en) | 2019-02-15 | 2022-05-10 | Siemens Healthcare Diagnostics Inc. | Calibrators and controls for the determination of percent glycated hemoglobin in a patient's liquid test sample |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| HUT34262A (en) | 1985-02-28 |
| DE3311458C2 (de) | 1986-02-13 |
| EP0129646A1 (de) | 1985-01-02 |
| DE3311458A1 (de) | 1984-10-11 |
| CA1210694A (en) | 1986-09-02 |
| HU191646B (en) | 1987-03-30 |
| US4590164A (en) | 1986-05-20 |
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