JPS5912990B2 - 人間の癌胚抗原の精製方法 - Google Patents
人間の癌胚抗原の精製方法Info
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- JPS5912990B2 JPS5912990B2 JP48051263A JP5126373A JPS5912990B2 JP S5912990 B2 JPS5912990 B2 JP S5912990B2 JP 48051263 A JP48051263 A JP 48051263A JP 5126373 A JP5126373 A JP 5126373A JP S5912990 B2 JPS5912990 B2 JP S5912990B2
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Classifications
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- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
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- B01J47/02—Column or bed processes
- B01J47/04—Mixed-bed processes
-
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- B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
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- B01J39/26—Cation exchangers for chromatographic processes
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
- G01N33/57473—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving carcinoembryonic antigen, i.e. CEA
-
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- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
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Description
【発明の詳細な説明】
５ 本発明は人間の癌胚抗原（ｃａｒｃｉｎｏｅｍｂｒ
ｙｏｎｌＣａｎｔｉｇｅｎ（ＣＥＡ））の精製方法に関
する。
ｙｏｎｌＣａｎｔｉｇｅｎ（ＣＥＡ））の精製方法に関
する。
本発明による方法は、癌胚抗原物質を、桿状形粒子、容
量１．０±Ｏ、ｌｍｅｑ／Ｉ、粒径分布約２０μ〜約６
０μ及び公許水分２．３〜２．８９／Ｉ乾燥交１０換体
を有する遊離塩基形態における微粒子状のジエチルアミ
ノエチルセルロース並びに桿状形粒子、容量１．０±Ｏ
、Ｉｍｅｑ／Ｉ、粒径分布約２０μ〜約６０μ及び公許
水分２．３〜２．７ｆｌ／ ９乾燥交換体を有する微粒
子状のカルボキシメチルセルロース１５からなる混合床
セルロースイオン交換カラムによつてクロマトグラフに
かけ、塩化ナトリウム中の酢酸アンモニウムで溶離して
生じた溶離液を捕集し、次いで生じた物質を二つの異な
るゲルカラム（第一カラムはアガロース（ ａｇａｒｏ
ｓｅ）約６重量２０％及び粒径４０〜２１０μを有する
アガロースゲル及び第二カラムは親水性の水に不溶性の
交叉結合したデキストラン重合体ゲルである）により連
続的にクロマトグラフにかけ、そして分光光度吸収ピー
ク波長２８０ｍμ及び分子量約２００、０００２５〜５
００、０００を有する溶離液を濃縮することから成る。
ここで「癌胚抗原物質」とは癌又は腫瘍組織をホモジネ
ートし且つ常法に従つて予備処理することによつて得ら
れるＣＥＡを極めて不純な状態で３０含有する抽出物フ
ラクシヨンを意味する。
量１．０±Ｏ、ｌｍｅｑ／Ｉ、粒径分布約２０μ〜約６
０μ及び公許水分２．３〜２．８９／Ｉ乾燥交１０換体
を有する遊離塩基形態における微粒子状のジエチルアミ
ノエチルセルロース並びに桿状形粒子、容量１．０±Ｏ
、Ｉｍｅｑ／Ｉ、粒径分布約２０μ〜約６０μ及び公許
水分２．３〜２．７ｆｌ／ ９乾燥交換体を有する微粒
子状のカルボキシメチルセルロース１５からなる混合床
セルロースイオン交換カラムによつてクロマトグラフに
かけ、塩化ナトリウム中の酢酸アンモニウムで溶離して
生じた溶離液を捕集し、次いで生じた物質を二つの異な
るゲルカラム（第一カラムはアガロース（ ａｇａｒｏ
ｓｅ）約６重量２０％及び粒径４０〜２１０μを有する
アガロースゲル及び第二カラムは親水性の水に不溶性の
交叉結合したデキストラン重合体ゲルである）により連
続的にクロマトグラフにかけ、そして分光光度吸収ピー
ク波長２８０ｍμ及び分子量約２００、０００２５〜５
００、０００を有する溶離液を濃縮することから成る。
ここで「癌胚抗原物質」とは癌又は腫瘍組織をホモジネ
ートし且つ常法に従つて予備処理することによつて得ら
れるＣＥＡを極めて不純な状態で３０含有する抽出物フ
ラクシヨンを意味する。
本発明の方法は、混合床セルロースイオン交換カラムよ
りも、アガロース及びデキストロースカラムを製造する
際のスケール・アップが一層容易であるという事実を利
用するものである。３５混合床セルロースイオン交換カ
ラムは、好ましくはジエチルアミノエチルセルロース及
びカルボキシメチルセルロースの重量で等量を含むもの
である。
りも、アガロース及びデキストロースカラムを製造する
際のスケール・アップが一層容易であるという事実を利
用するものである。３５混合床セルロースイオン交換カ
ラムは、好ましくはジエチルアミノエチルセルロース及
びカルボキシメチルセルロースの重量で等量を含むもの
である。
混合床カラムから溶離する際に用いる塩化ナトリウム中
の酢酸アンモニウムの溶液は、好ましくはＰＨ値約４を
有する。
の酢酸アンモニウムの溶液は、好ましくはＰＨ値約４を
有する。
人間の癌胚抗原をその二つの成分Ａ及びＢに分離する際
に、塩化ナトリウムのモル濃度を変える。
に、塩化ナトリウムのモル濃度を変える。
人間の癌胚抗原成分Ａの単離に際し、溶離媒質として０
．０５Ｍ塩化ナトリウム中の酢酸ナトリウムをＰＨ値４
で用いることができ、一方、成分Ｂの単離に際しては０
．０５Ｍ塩化ナトリウムの代りに０．１Ｍのモル濃度を
用いることができる。混合床セルロースイオン交換カラ
ムにおいて陽イオン交換体として作用するカルボキシメ
チルセルロースは、好ましくはＮａ＋イオン形で用いら
れる。適当なイオン交換体は、商品名「ＣＭ５２」及び
「ＣＭ３２」としてアメリカ合衆国ニューシャーシ一州
クリプトン（ＣｌｉｆｔＯｎＮｅＷＪｅｒｓｅｙラＵｎ
ｉｔｅｄＳｔａｔｅｓＯｆＡｍｅｒｉｃａ）のエツチ・
リーフ・エンジエル社（Ｈ．ＲｅｅｖｅＡｎｇｅｌＩｎ
ｃ．）により予備膨脹形として市販されている。後者は
前者よりも容積当り低容量を有する。陰イオン交換体と
して作用するジエチルアミノエチルセルロースは、商品
名「ＤＥ５２」としてアメリカ合衆国ニューシャーシ一
州クリプトン、エツチ・リーフ・エンジエル会社により
市販されている形態で有利に用いることができる。
．０５Ｍ塩化ナトリウム中の酢酸ナトリウムをＰＨ値４
で用いることができ、一方、成分Ｂの単離に際しては０
．０５Ｍ塩化ナトリウムの代りに０．１Ｍのモル濃度を
用いることができる。混合床セルロースイオン交換カラ
ムにおいて陽イオン交換体として作用するカルボキシメ
チルセルロースは、好ましくはＮａ＋イオン形で用いら
れる。適当なイオン交換体は、商品名「ＣＭ５２」及び
「ＣＭ３２」としてアメリカ合衆国ニューシャーシ一州
クリプトン（ＣｌｉｆｔＯｎＮｅＷＪｅｒｓｅｙラＵｎ
ｉｔｅｄＳｔａｔｅｓＯｆＡｍｅｒｉｃａ）のエツチ・
リーフ・エンジエル社（Ｈ．ＲｅｅｖｅＡｎｇｅｌＩｎ
ｃ．）により予備膨脹形として市販されている。後者は
前者よりも容積当り低容量を有する。陰イオン交換体と
して作用するジエチルアミノエチルセルロースは、商品
名「ＤＥ５２」としてアメリカ合衆国ニューシャーシ一
州クリプトン、エツチ・リーフ・エンジエル会社により
市販されている形態で有利に用いることができる。
上記の混合カラムは、例えば１０倍容量の水を加え、攪
拌し、そして沈降させて生じた上澄液の吸引によつて各
イオン交換体から微粒子を除去して製造することができ
る。
拌し、そして沈降させて生じた上澄液の吸引によつて各
イオン交換体から微粒子を除去して製造することができ
る。
次いで、１．０Ｍ塩化ナトリウム中の酢酸アンモニウム
からつくつた溶液を各カラムに加え、次に生じたスラリ
の各々の等容量を混合し、２．５×４０ｃｍのカラムに
入れて２．５×１８？の混合カラムを得る。アガロース
ゲルはスウエーデン，ウプサラ（ＵｐｐｓａｌａほＷｅ
ｄｅｎ）のエイピ一●フアルマシア（ＡＢＰｈａｒｍａ
ｃｉａ）により商品名「セフアロース６Ｂ」（Ｓｅｐｈ
ａｒＯｓｅ，６Ｂ）として入手し得る形で有利に用いる
ことができる。
からつくつた溶液を各カラムに加え、次に生じたスラリ
の各々の等容量を混合し、２．５×４０ｃｍのカラムに
入れて２．５×１８？の混合カラムを得る。アガロース
ゲルはスウエーデン，ウプサラ（ＵｐｐｓａｌａほＷｅ
ｄｅｎ）のエイピ一●フアルマシア（ＡＢＰｈａｒｍａ
ｃｉａ）により商品名「セフアロース６Ｂ」（Ｓｅｐｈ
ａｒＯｓｅ，６Ｂ）として入手し得る形で有利に用いる
ことができる。
このゲルは保存剤として０．０２％ナトリウムアジド中
の水性懸濁液として得られる。このゲル構造は水素結合
のためである。ゲル中のアガロースの濃度はその分別範
囲（ＦｒａｃｔｉＯｎａｔｉＯｎｒａｎｇｅ）を決定す
る。「セフアロース６Ｂ」と称する物質は、分子量４×
１０６またはこれ以下の物質を分離する分別範囲を有す
る。デキストラン重合体ゲルは英国特許第８５４．７１
５号に記載の如くして製造することができる。
の水性懸濁液として得られる。このゲル構造は水素結合
のためである。ゲル中のアガロースの濃度はその分別範
囲（ＦｒａｃｔｉＯｎａｔｉＯｎｒａｎｇｅ）を決定す
る。「セフアロース６Ｂ」と称する物質は、分子量４×
１０６またはこれ以下の物質を分離する分別範囲を有す
る。デキストラン重合体ゲルは英国特許第８５４．７１
５号に記載の如くして製造することができる。
適当なゲル物質は、商品名「セフアデツクス」（Ｓｅｐ
ｈａｄｅｘ）としてスウエーデンウプサラのエイビ一・
フアルマシアから入手し得る。
ｈａｄｅｘ）としてスウエーデンウプサラのエイビ一・
フアルマシアから入手し得る。
デキストラン重合体ゲルは一緒に結合または交叉結合し
たデキストラン物質の三次元の巨視的網状からなり、こ
のものは膨脹に伴い水を吸収し得る。ゲル物質の水を吸
収する能力は、ゲル物質におけるデキストランの交叉結
合の程度に反比例する。デキストランゲルは多孔率に関
する違いで種々の等級で入手し得る。本発明の方法に用
いるのに好適なゲルには、商品名「セフアデツクスＧ−
２００」（ＳｅｐｈａｄｅｘＧ−２００）及び「セフア
デツクスＧ−１００」として市販されているものが含ま
れ、前者が好適である。セフアデツクスＧ−２００はほ
ぼ分子量除外限界２００，０００、公許水分（Ｈ２Ｏ９
／乾燥ゲル９）２０±２．０１粒径４０〜１２０μ及び
ベツド容量／ｍｌ／乾燥ゲル９３０〜４０を有する。セ
フアデツクスＧ−１００はほぼ分子量除外限界１０００
００、公許水分（Ｈ２Ｏ９／乾燥ゲル９）１０±１．０
、粒径４０〜１２０μ及びベツド容量／耐／乾燥ゲル９
１５〜２０を有する。
たデキストラン物質の三次元の巨視的網状からなり、こ
のものは膨脹に伴い水を吸収し得る。ゲル物質の水を吸
収する能力は、ゲル物質におけるデキストランの交叉結
合の程度に反比例する。デキストランゲルは多孔率に関
する違いで種々の等級で入手し得る。本発明の方法に用
いるのに好適なゲルには、商品名「セフアデツクスＧ−
２００」（ＳｅｐｈａｄｅｘＧ−２００）及び「セフア
デツクスＧ−１００」として市販されているものが含ま
れ、前者が好適である。セフアデツクスＧ−２００はほ
ぼ分子量除外限界２００，０００、公許水分（Ｈ２Ｏ９
／乾燥ゲル９）２０±２．０１粒径４０〜１２０μ及び
ベツド容量／ｍｌ／乾燥ゲル９３０〜４０を有する。セ
フアデツクスＧ−１００はほぼ分子量除外限界１０００
００、公許水分（Ｈ２Ｏ９／乾燥ゲル９）１０±１．０
、粒径４０〜１２０μ及びベツド容量／耐／乾燥ゲル９
１５〜２０を有する。
更にデキストラン重合体ゲルカラムは、ＣＥＡ物質また
は成分Ａもしくは成分Ｂを含むフラクシヨンを精製する
。
は成分Ａもしくは成分Ｂを含むフラクシヨンを精製する
。
このデキストランカラムは、分子量範囲１００，０００
〜２５０，０００に対してアガロースカラムよりも大き
な分割力（ＲｅｓＯｌｖｉｎｇｐ６ｗｅｒ）を有するの
で、更に低分子量物質からＣＥＡ物質または成分Ａもし
くは成分Ｂの分離が達成される。デキストラン重合体ゲ
ルカラムは、コロイド状粒子をアガロースカラムによつ
て除去した後にのみ使用すべきであり、何故ならそれは
該粒子がカラムをふさぎ、無効にするためである。本発
明の方法により精製された人のＣＥＡは、例えば、癌の
診断においてＣＥＡラジオイムノアツセイテスト用の検
出試薬として有用である。本発明を次の実施例によつて
さらに説明する。実施例転移性（Ｍｅｔａｓｔａｔｌｃ
）肝臓腺癌腫瘍５００ｇを４℃で３分間ホモジナイザー
中にて脱イオン化水の２倍容量中で粉砕均質化した。
〜２５０，０００に対してアガロースカラムよりも大き
な分割力（ＲｅｓＯｌｖｉｎｇｐ６ｗｅｒ）を有するの
で、更に低分子量物質からＣＥＡ物質または成分Ａもし
くは成分Ｂの分離が達成される。デキストラン重合体ゲ
ルカラムは、コロイド状粒子をアガロースカラムによつ
て除去した後にのみ使用すべきであり、何故ならそれは
該粒子がカラムをふさぎ、無効にするためである。本発
明の方法により精製された人のＣＥＡは、例えば、癌の
診断においてＣＥＡラジオイムノアツセイテスト用の検
出試薬として有用である。本発明を次の実施例によつて
さらに説明する。実施例転移性（Ｍｅｔａｓｔａｔｌｃ
）肝臓腺癌腫瘍５００ｇを４℃で３分間ホモジナイザー
中にて脱イオン化水の２倍容量中で粉砕均質化した。
生じた均質物を２０分間７１００倍の重力で遠心分離し
た。上澄液をデカンテーシヨンによつて除去した。この
上澄液を、１．２Ｍの過塩素酸等容量を加えそして４℃
で２０分間混合することによつて、過塩素酸について０
．６Ｍにした。生じた混合物を５０００聯で３０分間遠
心分離した。生じた上澄液を捕集し、濃水酸化アンモニ
ウムを徐々に添加し、混合してＰＨ値７．０に中和した
。得られた混合物を脱イオン化水に対して完全に透析し
た。透析抽出物をＸＭ−３００膜による限外沢過によつ
て５０ｍ１よりも少ない容量に濃縮した。該濃縮した抽
出液を９１？０００倍の重力で６０分間遠心分離して残
つた粒子物質を除去した。得られた上澄液を混合床イオ
ン交換樹脂上にてＰＨ値４でクロマトグラフにかけ、不
連続の塩化ナトリウム濃度勾配で溶離した。
た。上澄液をデカンテーシヨンによつて除去した。この
上澄液を、１．２Ｍの過塩素酸等容量を加えそして４℃
で２０分間混合することによつて、過塩素酸について０
．６Ｍにした。生じた混合物を５０００聯で３０分間遠
心分離した。生じた上澄液を捕集し、濃水酸化アンモニ
ウムを徐々に添加し、混合してＰＨ値７．０に中和した
。得られた混合物を脱イオン化水に対して完全に透析し
た。透析抽出物をＸＭ−３００膜による限外沢過によつ
て５０ｍ１よりも少ない容量に濃縮した。該濃縮した抽
出液を９１？０００倍の重力で６０分間遠心分離して残
つた粒子物質を除去した。得られた上澄液を混合床イオ
ン交換樹脂上にてＰＨ値４でクロマトグラフにかけ、不
連続の塩化ナトリウム濃度勾配で溶離した。
用いた混合床イオン交換樹脂はＣＭ−５２：ＤＥ−５２
カラムであつた。このカラムを０．０５Ｍ塩化ナトリウ
ム及び０．１Ｍ塩化ナトリウムを含む酢酸アンモニウム
一ＮａＣｌ溶液各５００ｍ１で溶離した。０．０５Ｍ及
び０．１Ｍ塩化ナトリウム溶離液中の活性フラクシヨン
を各々別々に濃縮し、ＵＭ−１０膜を用いて限外沢過に
よつて透析し、４〜６ａの容量にした。
カラムであつた。このカラムを０．０５Ｍ塩化ナトリウ
ム及び０．１Ｍ塩化ナトリウムを含む酢酸アンモニウム
一ＮａＣｌ溶液各５００ｍ１で溶離した。０．０５Ｍ及
び０．１Ｍ塩化ナトリウム溶離液中の活性フラクシヨン
を各々別々に濃縮し、ＵＭ−１０膜を用いて限外沢過に
よつて透析し、４〜６ａの容量にした。
次いで更にこの各フラクシヨンを、セフアロース６Ｂカ
ラム上でクロマトグラフにかけてゲル沢過し、トリス（
ヒドロキミメチル）−アミノメタン−ＮａＣＩｌ（トリ
ス−ＮａＣｌ）溶液で、０．５ｍ１／分の速度で５ｍ１
フラクシヨンに捕集される管当り８０滴を用いて溶離す
ることにより分別した。フラクシヨン２１１〜２９５ｍ
１から各フラクシヨンの得られた濃厚物を濃縮し、限外
沢過により透析して１５ｍ１の容量にし、次にセフアデ
ツクスＧ一２００のカラムに加えた。生じた生成物はＣ
ＥＡ成分Ａであり、ここのものを０．０５ＭＮａＣ１で
溶離し、ＣＥＡ成分Ｂは０．１ＭＮａＣ１で溶離した。
これらの物質を各々電気泳動させ、更に免疫学的及び化
学的に分析した結果、関連物質の標準試料と同一である
ことがわかり、それぞれ成分Ａ及び成分Ｂとして同定し
た。なお、本発明の主な実施態様を示せば次のとおりで
ある。
ラム上でクロマトグラフにかけてゲル沢過し、トリス（
ヒドロキミメチル）−アミノメタン−ＮａＣＩｌ（トリ
ス−ＮａＣｌ）溶液で、０．５ｍ１／分の速度で５ｍ１
フラクシヨンに捕集される管当り８０滴を用いて溶離す
ることにより分別した。フラクシヨン２１１〜２９５ｍ
１から各フラクシヨンの得られた濃厚物を濃縮し、限外
沢過により透析して１５ｍ１の容量にし、次にセフアデ
ツクスＧ一２００のカラムに加えた。生じた生成物はＣ
ＥＡ成分Ａであり、ここのものを０．０５ＭＮａＣ１で
溶離し、ＣＥＡ成分Ｂは０．１ＭＮａＣ１で溶離した。
これらの物質を各々電気泳動させ、更に免疫学的及び化
学的に分析した結果、関連物質の標準試料と同一である
ことがわかり、それぞれ成分Ａ及び成分Ｂとして同定し
た。なお、本発明の主な実施態様を示せば次のとおりで
ある。
１）癌胚抗原物質を、桿状形粒子、容量１．０±０．１
ｍｅｑ／９、粒径分布約２０μ〜約６０μ及び公許水分
２．３〜２．８／９乾燥交換体を有する遊離塩基形態に
おける微粒子状のジエチルアミノエチルセルロース並び
に桿状形粒子、容量１．０±０．１ｍｅＶｆ！、粒径分
布約２０μ〜約６０μ及び公許水分２．３〜２．７９／
９乾燥交換体を有する微粒子状のカルボキシメチルセル
ロースからなる混合床セルロースイオン交換カラムによ
つてクロマトグラフにかけ、塩化ナトリウム中の酢酸ア
ンモニウムで溶離して生じた溶離液を捕集し、次いで生
じた物質を二つの異なるゲルカラム（第一カラムはアガ
ロース約６重量％及び粒径４０〜２１０μを有するアガ
ロースゲル及び第二カラムは親水性の水に不溶性の交叉
結合したデキストラン重合体ゲルである）により連続的
にクロマトグラフにかけ、そして分光光度吸収ピーク波
長２８０ｍμ及び分子量約２００，０００〜５００，０
００を有する溶離液を濃縮することを特徴とする人間の
癌胚抗原の精製方法。
ｍｅｑ／９、粒径分布約２０μ〜約６０μ及び公許水分
２．３〜２．８／９乾燥交換体を有する遊離塩基形態に
おける微粒子状のジエチルアミノエチルセルロース並び
に桿状形粒子、容量１．０±０．１ｍｅＶｆ！、粒径分
布約２０μ〜約６０μ及び公許水分２．３〜２．７９／
９乾燥交換体を有する微粒子状のカルボキシメチルセル
ロースからなる混合床セルロースイオン交換カラムによ
つてクロマトグラフにかけ、塩化ナトリウム中の酢酸ア
ンモニウムで溶離して生じた溶離液を捕集し、次いで生
じた物質を二つの異なるゲルカラム（第一カラムはアガ
ロース約６重量％及び粒径４０〜２１０μを有するアガ
ロースゲル及び第二カラムは親水性の水に不溶性の交叉
結合したデキストラン重合体ゲルである）により連続的
にクロマトグラフにかけ、そして分光光度吸収ピーク波
長２８０ｍμ及び分子量約２００，０００〜５００，０
００を有する溶離液を濃縮することを特徴とする人間の
癌胚抗原の精製方法。
２）該混合床カラムが重量でジエチルアミノエチルセル
ロース及びカルボキシメチルセルロースの等量を含むこ
とからなる上記１における如き方法。
ロース及びカルボキシメチルセルロースの等量を含むこ
とからなる上記１における如き方法。
３）塩化ナトリウム中の酢酸アンモニウムの溶液がＰＨ
値４を有することからなる上記１または２における如き
方法。
値４を有することからなる上記１または２における如き
方法。
４）塩化ナトリウムが０．０５Ｍのモル濃度を有するこ
とからなる人間の癌胚抗原成分Ａの製造に対する上記１
〜３のいずれかにおける如き方法。
とからなる人間の癌胚抗原成分Ａの製造に対する上記１
〜３のいずれかにおける如き方法。
５）塩化ナトリウムが０，１Ｍのモル濃度を有すること
からなる人間の癌胚抗原成分Ｂの製造に対する上記１〜
３のいずれかにおける如き方法。
からなる人間の癌胚抗原成分Ｂの製造に対する上記１〜
３のいずれかにおける如き方法。
Claims (1)
- １ 癌胚抗原物質を、桿状形粒子、容量１．０±０．１
ｍｅｑ／ｇ、粒径分布約２０μ〜約６０μ及び公許水分
２．３〜２．８ｇ／ｇ乾燥交換体を有する遊離塩基形態
における微粒子状のジエチルアミノエチルセルロース並
びに桿状形粒子、容量１．０±０．１ｍｅｇ／ｇ、粒径
分布約２０μ〜約６０μ及び公許水分２．３〜２．７ｇ
／ｇ乾燥交換体を有する微粒子状のカルボキシメチルセ
ルロースからなる混合床セルロースイオン交換カラムに
よつてクロマトグラフにかけ、塩化ナトリウム中の酢酸
アンモニウムで溶離して生じた溶離液を捕集し、次いで
生じた物質を二つの異なるゲルカラム（第一カラムはア
ガロース約６重量％及び粒径４０〜２１０μを有するア
ガロースゲル及び第二カラムは親水性の水に不溶性の交
叉結合したデキストラン重合体ゲルである）により連続
的にクロマトグラフにかけ、そして分光光度吸収ピーク
波長２８０ｍμ及び分子量約２００，０００〜５００，
０００を有する溶離液を濃縮することを特徴とする人間
の癌胚抗原の精製方法。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US252700A US3867363A (en) | 1970-06-01 | 1972-05-12 | Carcinoembryonic antigens |
| US252700 | 1972-05-12 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS4947521A JPS4947521A (ja) | 1974-05-08 |
| JPS5912990B2 true JPS5912990B2 (ja) | 1984-03-27 |
Family
ID=22957148
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP48051263A Expired JPS5912990B2 (ja) | 1972-05-12 | 1973-05-10 | 人間の癌胚抗原の精製方法 |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5912990B2 (ja) |
| AU (1) | AU468779B2 (ja) |
| BE (1) | BE799405A (ja) |
| CA (1) | CA948991A (ja) |
| CH (1) | CH583036A5 (ja) |
| DD (1) | DD107293A5 (ja) |
| DE (1) | DE2323955A1 (ja) |
| DK (1) | DK133559B (ja) |
| FR (1) | FR2184753B1 (ja) |
| GB (1) | GB1378134A (ja) |
| IL (1) | IL42119A (ja) |
| IT (1) | IT998101B (ja) |
| NL (1) | NL7306346A (ja) |
| SE (1) | SE403912B (ja) |
| ZA (1) | ZA732770B (ja) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4146603A (en) * | 1977-02-18 | 1979-03-27 | Research Corporation | Tumor specific glycoproteins and method for detecting tumorigenic cancers |
| GB2122641B (en) * | 1982-06-07 | 1986-08-06 | Otto A Gansow | Metal chelate conjugated monoclonal antibodies where in the metal is an emitter |
| JPS6076395A (ja) * | 1983-10-03 | 1985-04-30 | Dainippon Screen Mfg Co Ltd | 印刷版の溶出装置 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3697638A (en) * | 1970-06-01 | 1972-10-10 | Hoffmann La Roche | Antigens |
-
1973
- 1973-04-11 CH CH519673A patent/CH583036A5/xx not_active IP Right Cessation
- 1973-04-20 IT IT23343/73A patent/IT998101B/it active
- 1973-04-24 ZA ZA732770A patent/ZA732770B/xx unknown
- 1973-04-25 CA CA169,501A patent/CA948991A/en not_active Expired
- 1973-04-27 IL IL42119A patent/IL42119A/en unknown
- 1973-04-30 AU AU54989/73A patent/AU468779B2/en not_active Expired
- 1973-05-07 DK DK249773AA patent/DK133559B/da not_active IP Right Cessation
- 1973-05-07 NL NL7306346A patent/NL7306346A/xx unknown
- 1973-05-10 JP JP48051263A patent/JPS5912990B2/ja not_active Expired
- 1973-05-10 DD DD170753A patent/DD107293A5/xx unknown
- 1973-05-11 SE SE7306698-7A patent/SE403912B/xx unknown
- 1973-05-11 BE BE131003A patent/BE799405A/xx not_active IP Right Cessation
- 1973-05-11 FR FR7317188A patent/FR2184753B1/fr not_active Expired
- 1973-05-11 DE DE2323955A patent/DE2323955A1/de active Pending
- 1973-05-11 GB GB2261173A patent/GB1378134A/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DD107293A5 (ja) | 1974-07-20 |
| FR2184753A1 (ja) | 1973-12-28 |
| BE799405A (fr) | 1973-11-12 |
| IL42119A0 (en) | 1973-06-29 |
| FR2184753B1 (ja) | 1977-11-04 |
| IT998101B (it) | 1976-01-20 |
| SE403912B (sv) | 1978-09-11 |
| DK133559B (da) | 1976-06-08 |
| IL42119A (en) | 1976-08-31 |
| CH583036A5 (ja) | 1976-12-31 |
| CA948991A (en) | 1974-06-11 |
| AU5498973A (en) | 1974-10-31 |
| JPS4947521A (ja) | 1974-05-08 |
| ZA732770B (en) | 1974-04-24 |
| AU468779B2 (en) | 1976-01-22 |
| NL7306346A (ja) | 1973-11-14 |
| DE2323955A1 (de) | 1973-11-22 |
| DK133559C (ja) | 1977-02-21 |
| GB1378134A (en) | 1974-12-18 |
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