JPS59102399A - 試料の微生物的状熊の保持方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は微生物病原体検出のための新規な方法および装
置に関する。別の観点からすれば、本発明は微生物を抗
菌因子を含有する試料液から選択的に分離するための新
規な技術および手段に関する。なお別の観点からすれば
、本発明は微生物の回収が改善される、微生物病原体検
出に使用する方法および手段に関する。さらに別の観点
からすれは本発明は、所定の時点に試料液中に存在する
微生物の数を後になって測定する場合−にこれを正確に
求めるための方法および手段に関する。

敗血症とは血液中に病原微生物が存在することであるが
、これはわれわれが遭遇する最も重篤な感染の一つであ
る。敗血症が髄膜炎に次ぐ重篤な感染であることは医業
界において異論のない川である３つ近代医学によって抗
生物質とか真菌剤といった武器が提供されたとはいえ敗
血症による死亡率は約２５係である。丑た敗血症にショ
ックが伴なう場合は死亡率は６０％以上にも増加する。

哀別性疾患、大手術、免疫抑制剤または抗がん剤の投与
は患者を特に敗血症にか＼り易くする６、原因となるも
のの早ル］診断と適当な抗生療法との併用が敗血症の治
療に不可欠である。従って医師が出来るたけ甲く、患者
が敗血症であることのみでなく、病気を起している微生
物が何であるか、−１りその微生物の抗生剤に対する感
受性を知ることが絶対必要である３、従って、敗血症の
正しい時機を得た診断は患者の血液の極めて迅速、効率
的な定量的分析にか＼つている１、さらに、患者の血液
の定量的分析の間に血液試料が病院環境からの病原体に
よって汚染されないことが必要である。

尿毒症は尿中に病原微生物の存在することであるが、最
も普通には幼児、姐娠中の女子、閉塞性病変寸たは排尿
に影響する泌尿器疾患のある、または尿路に器具を使用
した後の患者におこる。尿毒症から膀胱内寸たけ腎臓内
の限局性感染を生ずることがある。膀胱内に限られてい
る場合は感染は通常抗生療法によって十分治療し得る。

しかし一旦腎臓が感染すると治療にもか５わらず病変が
進行し続け、慢性腎炎および敗血症となることがある。

体液中の微生物の存在を測定するために種々の分析系が
使用されている。通常使用される系の例としては、液状
肉汁培養法、いわゆる埋没平板法および固体床フィルタ
ーを使用づ−る濾過法がある。

これらの系はいずれも欠点があり、いずれも血液試料中
の微生物の迅速な検出はできない。一般に、液状肉汁法
は定量的ではなく、−また埋没平板法およびｉｌ：Ｊ過
失（固体床フィルター使用）は開放系であって夕（的汚
染、例えば実験室の空気および人から培養基への病原体
持込を蒙むる。

試′Ｉ−１液体からの病原体を定量的に分析するため最
近開発された方法および製造が、°°クソンヨン剤を使
用する微生物病原体の検出方法°°と題する米国特許第
４，１３１，５１２号明細書および゛クッンヨノ剤を使
用する微生物病原体検出用装置″と題する米国特許第４
，２１２，９４８号明細書に開示されている３３前記特
許に開示された技法には（血液試料分析の場合う、血球
化合物の予備溶解、次に遠心分離による微生物の、血液
中に存在する抗菌因子を含む他の成分からの濃縮分離が
含捷れる。濃縮した微生物は次で栄養培地上に、少くと
も６０倍に試料が希釈されるようにして、置く。この技
法により慣用の液状肉汁培養、埋没平板法、または固体
床フィルターを使用１〜る濾過法よりも多くの陽性培養
を生ずることが以前に報告されている。

（Ｇｏｒｄｏｎ　Ｄｏｒｎ　、　Ｊｅｏｆｆｒｅｙ　Ａ
、Ｌａｎｄ　、およびＧｅｏｒｇｅ　Ｊ’２．　Ｗｉ　
ｌ５ｏｎ、１９７９年、遠心分離による改良された血液
培養法：臨床的評価、Ｉ　、ＣＩ　ｉｎｉｃａｌＭｉｃ
ｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　、第９巻、３９１−３９６ページ
）。

この溶解−遠心分離法は確かに微生物病原体分析におけ
る一つの進歩であるが、この技法の潜在的な欠点は試料
が遠心分離およびその次の、適当な培養基例えば寒天平
板上への配分の前に、血液試料中に存在する抗菌因子例
えば血清因子および抗生物質にさらされることである。

一般に、試料中に存在する抗菌因子が微生物に対し阻害
的であって致死的ではないときは、遠心分離工程中に微
生物病原体と共に存在するか＼る因子は、一般に培養基
上に置かれた場合その微生物の成長阻害を邪けるに十分
な程度に希釈されるであろう。しかしＭｆＪ記の浴解−
遠心分離法を実施する場合、ある種の微生物は生育条件
のえり好みが激しく、前記溶解−遠心分離法に従って希
釈した場合にある独の抗生物質によシその成長が影響を
受ける。さらに重要なことに、もしこの抗菌因子例えば
抗生物質が致死的である場合には、遠心分離および培養
基上への布置の前に管内にこれが存在すると、この間に
微生物の死滅が生じ貴重な陽の培養全得撰なうことかあ
る。−また一方その間に微生物の好ましくない生長がお
こり測定の精度に影響を与えることもあり得る６、最近
、混合樹脂床系を使用して種々の抗菌因子を除去するこ
とにより、試料内の微小生物相を実質的に変えることな
く尻重因子の除去を行ない得ることが認められている３
、か＼る樹脂床糸は米国特許第４，１４５．３０４号お
よび同第４，１７４゜２７７号明細書に記載されている
。しかしこのような樹脂床の使用は試料にさらに操作と
汚染の可能性とを加えることになる。

尿中の抗菌剤の１戎長活動防止のためＶこ便用しイｌｊ
る系については市。大な時間のずれの問題が存在する。

これらの慣用の系は微生物の成長を阻害する手段を含ん
ではいるが、これらの使用には本質的に試料の採取とそ
の系内への装置との間に好ましくない時間的ずれが生じ
、これによシ微生物１が１且害前に成長するとい９好丑
しくない結果を生ずることがある。その上、これらの系
は抗生剤阻害または叫断手段を倫えていない１．主題発
明の改良においては抗菌因子非活性化系が排尿の時点で
カップ内に存在するので、この改良の実施により殺菌性
抗生剤の公知の有害作用が瞬時に遮断されて尿試料の微
生物的状態が保持される。主題発明の改良の実施はさら
に制菌剤の役を果し、これにより微生物の実際に計数さ
れる値は殺菌剤の有無にかＳわらず一定に保持される。

従って、微生物病原体と抗菌因子とを含有する疑いのあ
る液体試料の受入には、試料の単離の間には液体状態で
抗菌因子を非活性化し、試料を容器から取出して培養基
上に布置した後は試料中に存在する微生物がその中の、
生育条件のえり好みの激しいものも含めて増殖し確認し
得るようになるような密閉無菌法および手段が必要であ
る。。

本発明によれは、試料液体が採取されてからその微生物
病原体が分析される前までの間抗菌因子？非活性化し微
生物の定量的な本来の状態を維持するための系を含む、
改良された微生物病原体検出技法が提供される。

本発明の好捷しい一態様によれば、次の目的すなわち （１）　　ペニシリン１ｉｔ）　、セファロスポリン類
オ、１：　ｏニアミノグリコノド類の殺菌作用を即時に
趣断するとよ （２）　　酸素の致死作用を受は易い生育条件のえり好
みの激しい微生物に対する無気輸送系を創始すること （３１正常ヒト血液の殺菌作用を完全に中和すること （４１微生物の生育可能な数を長時間安定に保持するこ
と に役立つ、Ａｉｌ記抗菌因子と微生物病原体とを含有す
る試料液体内で抗困囚子を非活性化するだめの試料解体
用箔の糸、ならひにその使用方法が提供される。

本方法Ｑ、ｊ−あらゆる種類の体液、例えば血液、骨髄
、髄液および胸膜１１り、体分泌物、尿等に対して使用
できる１、一般に、血液試料と共に使用するときは、抗
菌因子非活性化系は溶解剤を含有する３、本発明の新規
液体系は試料採取および輸送用容器内に使用し、試料が
採取された後、しかしその中の微生物病原体が例えば微
生物病原体用の培養基上に装置することにより分析され
る前に試料と混合することができる。本発明の新規系は
前記試料採取、輸送容器に内蔵された水溶液の形であっ
てもよい。しかし、抗菌因子非活性化用の本新規系は、
試料液体に可溶々固体粒子の形で前記容器内に位置して
いることが好ましい。

本発明は、１９７８年１２月２６日発行の゛クッション
剤を使用する微生物病原体の検出方法″表題する米国特
許第４，１３１，５１２号明細書に開示の基本的方法を
使用する１９８０年７月１５日発行の゛クッション剤を
使用する微生物病原体検出用装置″と題する米国特許第
４，２１２，９４８号明細書に開示されているような溶
解−遠心分離装置内に使用し得ると考えられる。才た、
本発明の一態様によれば、ｆａ）　　溶解−遠心管内に
、前記第４，２１２，９４８号特許に開示されたような
液状クツジョン剤および固体粒子状の抗菌非活性化糸を
置き、（ｂｌ　　ｒ＞：Ｉ配管内を真空とし、前記管を
前記ｌ改状りノンヨン剤の蒸発温度、例えば約１２０℃
で該管内を滅菌するに十分な時間例えば３０分間力１１
熱し次に該管を宇瀞に冷却する ことを含む、溶解−遠心分離装置の組立および滅菌のＩ
ＣめのｊＶｉ　Ｌ（Ｊな方ｌ去が提供される４゜さらに
本発明の糸は、１９７９年８月１４日発行の゛微生物病
原体検定のための表面分離技法″と題する米国特許第４
　、１６４　、４４９号明細書に開示されている溶解−
遠心分離法を実施する場合に使用することができる３、 Ｓ：　＜べきことには、本発明の新規な系は液体試４：
’を中にａ捷れている微生物病原体の生長を、病原体が
容器内にある間、例えば溶解−遠心管の中でもが処理の
ために保管すれている間、阻害する。

か＼る系によれば、あとで試料を培養基上に装置しＩＣ
場合に過大な１数、従って誤った臨床的解釈をもたらす
恐れのある好１しくない生長を管内で牛することなく、
２４時間もの保管時間が可能となる１、 本発明の抗菌因子非活性化糸は抗生物質および（または
）ヒトの血清因子を中和する役をする特定の化学的化合
物を非常に高濃度含有する１、この一 高い濃度は慣用の肉汁系に容易には混和できない。

何故なら必要な高濃度の化学品が多くの、潜在的に病原
性の有機体に対し阻害的となるからである３、従って本
発明の抗菌因子非活性化系は抗生物質およびその他の抗
菌因子を、液体試料がそれらと混合される場合に効果的
に非活性化するものであり、生成混合物が微生物病原体
の培養基上で、例えば、病原微生物に対して非活性化薬
剤が非阻害的である濃度迄希釈されることが必要である
。かくして本発明は処理前に希釈が必要な系、例えば痰
、尿およびＡｉＪ記米国特許第４，１６４，４４９号、
第４，１３１゜５１２号、および第４　、２２１　、９
４８号明細書に開示されている溶解−遠心分離系（溶解
−遠心系に固有の高い希釈率による）に有用かつ有利に
使用される。

それ故にＭｆｆ記のような、たソし遠心分離ｔｋ’内に
抗菌因子非活性化系を含む溶解−遠心分離糸を、遠心分
離および濃縮微生物の培養基への装置の前の血液試料の
処理用に実際使用すると、液体試料内に存在する抗菌因
子例えば、本質的に致死的である抗生物質および抗血清
因子の攻撃から微生物を保護する３、も（−カ・−る微
生物病原体か遠心分離に寸たけ輸送系内で破壊されたな
らば望ましくない偽の負の培養すなわち不正確な定量と
いう結果を来すことがある３５本発明の使用の基本的な
利点は次の１１４！論により一層図式的に説明でびる。

敗血症、すなわちンヨノク、ＤＩＣ、低血圧等の臨床的
徴候を伴う血液中の微生物の存在は、曲数自体が感染し
ていることを意味するものでない。こ１７）理論的モデ
ルＣ（おいては他の場所、例えば腎臓、肺等に一次感染
があり、微生物は一定速度で血液中に供給される。免疫
系および（−！たは）抗生物質が微生物を一定速度で除
去している。患者は供給速度が除去速１隻よりも小モい
場合に、甘たその場合にのみ敗血症の危機を脱すること
ができる。

かくして、この理論的モデルによれば、慣用の血液培養
系は重大な数の偽の負の培養を生ずるであろう。という
のは試料が一旦採取されメば一次源からの微生物供給は
終結するが患者の血液中ｅＣＣ存在る抗菌因子は依然活
性だからである１ｏ従って輸送または処理の間にこれら
の因子が採取の時点で存在した生育可能な有機体を殺し
、その結果試験結果を負とすることがあり得る。この概
念は十分な免疫を有する患者−！たは広汎スペクトルの
抗生物質を使用している患者の場合本質的に重要となる
。かくして、本発明の改良を俗解−遠心分離系と併用実
施することにより、溶解−遠心分離法に固有の特徴であ
るこれら因子の寒天平板上での希釈に先立って免疫系お
よび殺菌性抗生物質の公知の有害作用全戸１ノ時に腐断
することによって血液試料の微生物状態がその！、Ｎに
保持される。

尿分析に抗菌因子非活性化系を使用するときは、臨床的
に適当なアリコートの尿を面接微生物分析用にそこから
取出し得る排尿容器の中に抗菌因子非活性化系を存在さ
ぜる。かくして本発明の実施により、殺菌性抗生物質の
全知の有害作用を即時に遮断しまた殺菌剤の不在におい
ても制菌剤として作用することによって尿試料の微生物
状態がそのま＼に保持される。

本発明の新規な抗菌因子非活性化系は、抗菌因ｆ例え／
′ｉ抗生物質および正常ヒト血液中の致死因子を非活性
化する特異性の化学薬品を比較的高濃度に含有する１、
例えは本発明の一態様によれば、アミノク９コント抗牛
物質とポリミキシンＩ３とに対する遮断剤が抗菌因子非
活性化系に名−すれる。

代表的なアミノグリコ７ド抗生物質の例としてはゲンク
ミノ、ドプラマイ７ンおよびアミカシンがある７、アミ
ノグリコンドおよびポリミキシンＢはすべて全体として
ＩＦの電荷を有する。この電ｑ町＊遮断するとこれらの
化合物はその効力を失う１．従って本発明の一態様によ
れは、この正の電荷に対Ｊ−る迦ユ断剤が抗菌因子非活
性化系に含捷れる１、好−ましい化合物１はポリアネト
ールスルホン酸ナトリウムである。ポリアネトールスル
ホン酸すトリウムは了ミノグリコンドおよびポリミキシ
ンＢのイ乍用倉その濃度に正比例して阻害し、ポリアネ
トールスルホン酸すトリウム約０．６重量％の濃度でこ
れら抗生物質は’１１’：全に１ＫＩ１群される。かＸ
る遮断化合物のもう一つはアミロ硫酸ナトリウムである
３゜本発明の抗菌因子非活性化系は、試料液と抗菌因子
非活性化系との合計の重量に対して約帆１ないし約１．
０重量％、好ましくは約帆３ないし約帆６重量％になる
に十分な量のポリアネトールスルホン酸ナトリウムを含
む。ポリアネ］・−ルスルホン酸すトリウムはある種の
微生物に対し阻害的であることが知られており、この阻
害効果は後に培養基上で培養基に対しボリアネト〜ルス
ルホン酸ナトリウムの最終濃度が約０．０１１重量％な
るよう希釈することによって排除することができる。

本発明の抗菌因子非活性化系は好捷しくは捷たベニ／リ
ン、ストレプトマイシンおよびセファロスポリン類の作
用を阻害する化学的組成物をも含有する３、か５る化学
薬品は好捷しくはチオグリコラート、グルタチオン、お
よびＮ−アセチル／スティンから選ばれる。これら化合
物は一般に抗菌因子非活性化系中に試料液と抗菌因子非
活性化剤との合計に対して約０．５ないし約６重世襲に
なる量存在１−得る。本発明の抗菌因子非活性化系ば゛
またペニシリン、セファロスポリンおよびある柚の−ｒ
ミノグリコントの致死作用を非活性化するために／ステ
ィンをもＪイｊすることができる３、システィンは好捷
しくは抗菌因子非活性化系内に、試料７１ケとわ″］菌
因子非活性化系との金言１に対して約帆０５ないし約２
．５市年係、好捷しくけ約０．１ない１〜約１．６Φ赦
チになる量存在する。特に好ましい一態様においては本
発明の抗菌因子非活性化系は、／スティンをｉＨＪ、０
５ないし約２．５重世襲、　およびチオグリコラートを
約０．０５ないし約１．６重量係含廟する、チオグリコ
ラートと７ステインとの相乗混合物を含有ずゐ。この組
合せはベニ７リン類、セファロスポリン類およびある禅
のアミノグリコノド類を非常に効果的に非活性化しかつ
捷た生成した系の粘度を低下させる。チオグリコラ−１
・および類似の化合物自体は抗菌因子非活性化系の好寸
しくない粘明増加を起す。しかし前記の／ステイノとチ
オグリコラ−１・との組合せは、例えば血液の溶解後、
はるかに低い粘度を生ずることが判明した。さらにとの
細合せによりチオグリコラ＝１・衾、牛育粂イ４１のめ
んどうな微生物に対して毒性がより少いよつな割合で使
用することかできる３、さらに一つの利点は／スティン
が１１り化され易く、チオグリコラ−１・の存在が溶解
−遠心管の調製中システィンを還元状態に保つ助けとな
ることである。米国特許第４　、２１２　、９４８号明
細−に記載されたような遠心管に使用１−得るシスティ
ンとチオグリコラートとの絹合せの一例は、試ｊｌ′Ａ
ｇ！ｉ、と抗菌因子非活性化糸とに対して初濃度がシス
ティ世襲、２重量係、チオグリコラート０．１重世襲、
前記特許に開示され／こように最終的に培養基上に希釈
されたときの最終濃度が７ステイン帆０１８重量係、チ
オグリコラート０．００２−ｗ世襲である。システィン
の酸化し易い性辿のため、遠心管の製作中、背を真空に
しオートクレーブ加熱する前の最終段１偕でシスティン
を添加するのが奸才しいことに注意を要する。システィ
ンの純度は重要である３、抗菌因子非活性化系内で要求
される７ステインの濃度が高いため、この化合物の純度
は９５チより犬でなければならない。もしシスチンの混
入している／スティンを使用すると、血液の処理中にシ
スチンが沈殿する３、／スチンの沈殿は寒天イ板上で微
生物の小コロニーに類似しているので、これは好捷しく
ない性Ｊ６である。チオグリコラートと７ステインとの
組合せの添加は、これが嫌気性微生物例えばクロス］・
リジウム属を輸送中に血液試料中に存在する酸素の害か
ら保護するという二次的効果を有する。これはチオグリ
コラートその他のスルフヒドリル化合物が優れた酸素捕
捉剤であることに基く。システィンは他のスルフヒドリ
ル化合物よりも、グラムまたはモル当りベニノリ７類、
セファロスポリン類およびある種のアミノグリコ／１・
頓の殺菌作用を迩断する効果がはるかに大きく、さらに
ＭＯ記の通り／スティンの存在によりＲｉ　Ｗ４血液の
粘度が低下し遠心管内における微生物の沈降が改善され
るという利点もある。

本発明のさらに一つの態様によれば、サルファ化合物に
対する非活性化剤が抗菌因子非活性化系に存在する。、
サルファ化合物はバクテリアの葉酸経路を妨害してその
抗菌作用を発揮する８、この経路は微生物１）ＮＡの主
化合物である核酸の合成に不可欠でちる。従って、好ま
しくはパラアミノ安息香酸（ＰＡＢＡ　）をサルファ化
合物の拮抗阻害剤として抗菌因子非活性化系に添加する
。ＰＡＢＡの好ましい濃度は試料と抗菌因子非活性化系
との合計のミリリットリ当り約５ないし約５００マイク
ログラムの範囲で、最も好捷しい範囲は１ミリリットル
当り約１０ないし約１００マイクログラムである。

一般に、もし試料液の保管時間が２時間以下であれば、
通常ＰＡＢＡ化合物は必要でないことが認められる。し
かしサルファ剤の殺菌作用が敏感な有機体の増殖を抑制
することは公知であり、従ってもし血液を２時間以上保
管する場合はＰＡＢＡの添加が望ましいことが明かにな
るであろう。

本発明の抗菌因子非活性化系はまたある種の抗生物質と
作用しこれを非活性化するｌｌＩ？素、例えばベータラ
クタマーゼ、およびペニンリナーゼをも含有することが
できる。通常、かＮる酵素の約１ないし約２０活性単位
がこの系に有効である３゜本発明の抗菌因子非活性化系
は、系の用途に応じて他の化合物を含有することができ
る３３例えば、血液の処理に使用する系は溶解剤、例え
ば１９７５年５月１．３　Ｂ発行の°′サポニンの無毒
化″と題する米国特許第：３　、８８３　、４２５号明
細書に開示されている精製サポニンを含有することがで
きる。本組成物はまた、凝固防止剤例えばクエン酸塩ま
たはエチレンンアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含有するこ
とができる。

第１図について説明すると、（２０）はＭｉＪ記米国特
許第４，１３１，５１２号明細書および特許米１１特許
第４．２１２，９４８号明細１に開示されている遠心分
離装置の図である１、これらの特許は血液試料中の微生
物病原体の存在を従来よりも迅速正確に分析するための
方法および装置を目的としている１、血液試料を溶解し
、高密度で水と混合しない疎水性、無毒性液状クソンヨ
ン剤上に置き遠心分離にかける。

溶解血液試料内に含捷れる微生物病原体はクツ７ヨン剤
と血液試料残分との界面に隣接する層に集捷り、この製
部された形で容易に血液試料の残部から分離して培養お
よび足適的計数に使用される。

図に示す通り、装置（２０）は管の上端を密閉する慣用
の注入可能なふた（２４）と管の下端を密閉する注入可
能なふた（２６）とを有する細長い遠心分離容器（２２
）から成る。装置（２０）は有効量のクッション剤（２
８，１を含有している。抗菌因子非活性化系は細長管状
遠心分離容器（２２）内で使用するときは粒状固体の層
（３０）としてクソンヨン剤（２８）の上に置く。

抗菌因子非活性化系を装置（２０）内において、例えは
約％　ミＩＪ　ＩＪソトルの水溶液内に含有させてもよ
いが、前記固体粒状粉末（３０）の形であることが好捷
しい。固体粒状粉末（３０）は液体クツ７ヨン剤（２８
）に溶解せず、同じ成分から成る液体よりも貯蔵安定性
が大きい。さらに粒状固体抗菌因子非活性化系の使用に
より装置（２０）内においで、後述するような新規な滅
菌法を行なうことが可能となる１１本発明のび１ましい
態様においては抗菌因子非活性化系は水溶液にせよ層（
３０）にせよ、試料液例えば血液を加えた場合抗菌因子
非活性化系と血液との合計がポリアネトールスルホン酸
ナトリウム約０．１ないし約６重世襲、システィン約帆
５ないし約２．５重量％、チオグリコラート約０．１な
いし約１．６重ｔｉｔ％、バラアミノ安息香酸約５ない
し約５００マイクログラム／ミリリットル含有するに十
分な宿存在する１、さらに、この特定の態様は血液試料
の処理に使用されるので、生成全容積中には１次精製ザ
ポニノ約０．０２ないし約１重＠　％　、Ｅ１〕ＴＡ約
帆０１ないし約０．５車量チを含有する。、抗菌因子−
非活性化系が水溶赦の形のときは遠心容器（２２）に血
液約７．５　ミ’Ｊ　’Ｊソトルを吸引する。前記抗菌
因子非活性化液体系は、抗菌因子非活性化系、試料液体
およびクツジョン剤の合計量を沈む遠心管（２２）内の
全液体に対し好１しくは少くとも３６計係、さらに好捷
しくけ約５ないし３０容量係である。

抗菌因子非活性化系が粒子層（３０）の形でりるときシ
」、細長管状遠心容器（２２）に血液約８ミリリットル
を吸引する１１本兆明の最も好捷しい態様においては層
（３０）　＆、１／ステイノ０．０９６グラム、チオグ
リコラ−１−０，００８グラム、ポリアネトールスルホ
ン酸すトリウム帆０４８グラム、精製サポニン０．０１
８グラト、およびＥｌ）ｉ’Ａ　０．００８　クラムを
含Ｋｉスル、、十分購ノポリーγイ、１・−ルスルホン
酸ナトリウムが存在する限り血液凝塊形成の防止にＥ　
Ｄ　Ｔ　Ａは必要でないことを述べておく。例えば、別
の満足な面液処理系（層（３０）　）はポリアネトール
スルホン酸ナトリウム０．０４８グラム、ジスティン０
．０８グラム、チオグリコラート０．００９グラムおよ
び精製ザボニンｔＪ、、０］、９グラム乞与有判る。

Ｊ５ｉ’、ω１１子非油性化糸と尿との組合ぜの場合に
１合計量（ｌこ第５し好１しくはボリアネ１−ルスルホ
ン酸ナトリウノ・約（）、Ｇないし約２．０重＠、％、
ｊ々′ｆ角１を塩却−／スティン約０．５ないし約２．
５Φ虻予、チオグリコラート約し［了１１修受、炭酸水
素ナトリウム約２．９塁を係、およイ、′−ｊ−、塾化
す１リワム約ｚ、５なし＞、１，４．（１重量り・を含
有する１Ｊ炭酸水卓すｌ・リウ六を尿抗菌１が子弁活性
化系に添加したのは尿の通常の酸性または塩基性を調節
してｐＨを中性とするためである。例えば塩化ナトリウ
ムの形で添加した塩は尿中抗生物質の不在において系の
制菌効果を増大させる。遊離塩基システィン例えばＩＣ
１’Ｊシステイノを従来使用されたし−７ステイン匹代
えて使用したのは、前者は炭酸水素ナトリウム緩衝液と
混合した場合、従来Ｌ−Ｍ７ステインー炭酸水素ナトリ
ウム混合物の場合にみられたようなガス状反応を牛しな
いからである。

遠心分離容器（２２）はンリコーン処理ガラスまたは硬
質プラスチック例えばポリカーボネートまたはポリプロ
ピレンで作製することができる。注入１」能なふた（２
４）および（２６）はゴム製密封栓から成ることができ
る。注入可能なふた（２４）および（２６）は共に、通
常の型の注射針による注入全容易とするため、それぞれ
くほみ（２４ａ）および（２６ａ）を有する３、排気さ
れた空間（３２）は、遠心分離容器に既知量の液体を注
入可能なふた（２４）を通して注入する場合容器内部に
過大な圧が生じて注入用能なふグこ（２４）および（２
６）が遠心分離容器（２２）の開口部からずれる恐れな
しに注入が行ない得るよう、大気圧より低い所定の圧力
に保たれる。

遠心分離容器（２２）の下端における注入可能なふた（
２６）につりで特に述べると、注入可能なふた（２６）
の内部表面（３４）は遠心容器（２２）の壁に対しある
角度をなしている、。

装Ｒ（２０）はアングルローター遠心分離器に使用する
ように特別に設計され、傾いた内部表面（３４）はロー
ターの角に対し余角をなしていることを述べておく。し
かし本発明の装置は通常のスインギングパケット型遠心
分離器においても使用し得ることを注意しねばならない
。後者の場合には表面（３４）は装置（２０）の底面に
対し直角でなければならぬがそれ以外は、以後第１図に
示す装置（２０）について述べるのと同様にして使用さ
れる。表面（３４）は平滑で、微生物病原体が捕捉され
る恐れのあるすき間や割目が実質的に皆無でなければな
らない。

さらに、注入可能なふた（２６）の祠料が遠心分離容器
（２２）の壁に接する表面（３りの周囲の環状密封域は
、その界面に微生物病原体がとゾまる恐れのあるような
大きな環状の割目を生じないよう密封されていなければ
ならない。

平滑表面（３４）の遠心分離容器（２２）の壁に対する
傾角は装置（２０）の遠心分離を行なうべき遠心分離装
置に応じて決定される。

前述のように、スインギングパケット型遠心分離器を使
用するときは、表面（３４）は装置（２０）の底面に対
し直角に位置する。しかしアングルローター遠心分離器
を使用するときは表面（３４）はローターの角の余角を
なす。従って、一般に、ローター角度が約６０°ないし
１０°の範囲であるときは、表向（３４）の角度、すな
わち遠心分離容器内の傾角（３６）はこれに応じて３０
０ないし８０°の範囲となる。すなわち、弧（３６）で
示した傾角は一般に、装置（２０）が遠心分離の間遠上
分離器内で位置する角度の余角となる。例えば第１図に
示す傾角（３６）は約３４゜である。従って例えば、装
置（２０）が遠心分離が約５６°、の角度で行なわれる
アングルローター遠心分離容器内に置かれるときは、装
置（２０）内に含まれる敵は表面（３４）に対して実質
的に直角をなして押しつけＩＺｌれる。。

クノンヨノ剤（２８）の使用量は遠心分離の際に表面（
３４）　（ｆ完全に梼うに十分で々ければならない。

クツ／コン剤の使用量は選定した特定の系の諸元、例え
ば栓のデザイン、残存血液の容積および使用するクツ／
コン剤の揮発性によって要化し得る３、適当なりッショ
ン剤の量は、装置（２０）から取出して微生物病原体の
存在を試験すべき残留血液試料−クッション剤混合物の
＆ｆＪｔに対して約３．３ないし約４０容量チである。

一般に、本発明のクッション剤は高密度、疎水性の水と
混合しない液体から成ることができる。

先述のように、こ＼で“高密度″とは遠心力の存在にお
いて、血液と血液処理液との混合物または微生的病原体
を含有すると疑われる他のいかなる試料液によっても支
えられない液体を意味する。

さらにクッション剤は微生物病原体に対して無毒であり
、かつブチルゴム、シリコーンゴムおよびその他の、前
記注入可能なふたの製作に使用される弾性体に対し不活
性でなければならない。クッション剤の密度は約１．２
グラム／立方センチないし約２．０グラム／立方センチ
の範囲であり得る。

一般に１４ｔｆ記の特性を有し約３００ないし約８５０
の範囲の分子量のフッ化炭化水素が好ましい。さらに前
記の特性を有し７７°Ｆ、　１気圧における蒸気圧が帆
００６　ｐｓｉ　（０，３ｍｍＨｇ　）　　ないし約帆
５８ｐｓｉ（３０ｍｍＨｇ　）、好寸しくは蒸気圧がは
Ｘ水と等しいフッ化炭化水素が好適である。従って、前
記の性ｆＲを有し沸点約２０００Ｆなイシ約４２０￥（
９３℃−２１６℃）、好１しくは約２２５’Ｆなイシ約
２８０　’Ｆ　（１０６’Ｃ−１３８℃）のクッション
剤が使用し祷る。クッション剤の比熱は７７’Ｆ、Ｌ気
圧において好ましくは０．２ｆ−ｃａ４／ｇ℃、以北、
最も好ましくは水の比熱以上である６、クッション剤の
蒸気圧は捷だ管の製作工程、例えばオートクレーブ加熱
の間に注入可能なふたが管から外れないようなものでな
ければならない。ミネソタ州ミネアポリスの３Ｍ社がら
フルオリナート（ＦＬＵＯＲＩＮＥＲＴ）の商品名で販
売されているフッ化炭化水素がクッション剤として良好
に作動することが判明した。特定的には、フルオリナー
ト系列のＦＣ−７５、ＦＣ−４８オ、１：び１ｊ″Ｃ−
４３が特に有用であることが判明した。

か＼るクッション剤の果す機能は完全には知られていな
いが、それらは遠心分離された血液試料内の懸ン蜀状態
から抜は出てきた微生物病原体の収集を少くとも二つの
方法で改善するものと信じられる。第一に、クッション
剤は遠心分離容器（２２）の平滑な表面（３４）および
、遠心分離容器（２２）と注入可能なふた（２６）との
間の界面の両方にあるすき間、割れ目、裂は目を密封す
るのに役立つ。すなわち、クッション剤がなければこの
ようなすき間に捕捉されそのため回収されなかった恐れ
のある微生物病原体が、装置（２０）から取出すときに
クッション剤と共に回収される。第二に、クッション剤
は遠心分離中に血液試料中の懸濁状態から押出されてく
る微生物病原体の衝１１１を緩衝する作用金なすと信ぜ
られる。この緩衝効果はこれがなければ衝撃時に生じた
であろう微生物への傷害の危険を減少させる。さらに、
微生物病原体の一部は実際クツ７ヨン剤中に進入するか
も知れないが、完全に通過するものは実質的になく、大
部分はクッション剤（２８）と血液試料との界面でクツ
７ヨノ削の表面に層を成して集まる。

クッション剤（２８）を遠心分離装置（２０）内に堆置
し終ったのち、血液に対する抗菌因子非活性化系（３０
）もそこに堆置することができる。

抗菌因子非活性化系（３ｏ）を遠心分離装置（２ｏ）内
に堆置し終ったならば、注入可能なふた（２４）を所定
の位置にかぶせ、空間（３２）を所望の大気圧以下の圧
力、例えば水銀柱２５ないし３０インチの減圧にする。

一実施態様によれば遠心分離装置（２ｏ）の内部を次に
新規な技法によって滅菌する。遠心分離装置をその内部
のフルオリナートの蒸発温度、例えば少くとも約１２０
℃に加熱し十分な時間例えば約３０分間保持すれば管の
内部および固形粒状抗菌因子非活性系（３ｏ）は熱フル
オリナート蒸気によって滅菌されることが判明した。こ
れが終了すれば、遠心装置（２０）は単に室温に冷却し
、例えば販売用に包装される。

さて第２図〜第９図について、一連の分析手順を図式的
に示し本発明の好ましい一態様を説明する３、−例とし
て、血液試料内の微生物病原体検出のため本発明の一態
様に従って行なう操作は次の装置によって便利に行なう
ことができる：クッション剤（２８）および抗菌因子非
活性化系（３ｏ）を内蔵する前記の遠心分離装置（２ｏ
）。この容器の容積は１２〜１４　ミＩＪ　ＩＪクツル
であってよい。

滅菌ガラス注射筒１本およびＩＶ２インチ、２１番の使
い捨て注射針１本。

滅菌ガラス注射筒１本および１インチ、１８番の使い捨
て注射針１本。

ハブに木綿を挿入した５／８インチ、２５番注射針１本
（通気用に使用）。

血液寒天平板　２枚。

チョコレ−１・寒天平板　２枚。

遠心分離装置（２０）　または何等がこれと同等の装置
以外は釉々の周知の実験器具および培養基を本発明の新
規な方法の実施のために使用し得ることを述べておく。

特に前掲の培養基は単に代表例であり、一般に最も普通
に知られた微生物病原体の検出に使用するのに好ましい
ことに注意しておく。

前記の血液寒天平板は慣用的に使用される血／？ダ寒天
平板で、どれは基本的には羊の血液と基本営養剤例えば
脳・心臓浸出液とをぺ）　ＩＪ皿り寒天同化剤で固め合
せたものである。チョコレ−１・寒天平板はある種の生
育条件の難しい病原体、例えばへモフイラスを培養する
／（めのものである。、かく１〜で、本発明の方法には
ｆψ々の装置を使用しイ）するが、１ｊ１１掲の装置お
よび利料は本発明の範囲内シ（＝おいて丁記のようにし
て便利に使用１することができる１、 第１図に示しまた遠）し・分離装置（２０）を使用する
には先ずこれを、注入”Ｊ能なふた（２６）がその平滑
な斜めの面（３４）が装置（２０）の下端に来、クッシ
ョン剤（２８）抗菌因子非活性化固体（３ｏ）が平滑な
斜めの而（３りの上に乗るように位置させる。実際には
取扱い上クッション剤（２８）と抗菌因子非活性化系（
３０）との混合物か生じ従って二つのはつきりした層が
必ずしも存在しないことがあり得る。クッション剤（２
８）と抗菌非活性化系（３０）とのこの不安定な混合物
はとＸに述べる方法には全く悪影響を与えない３．何故
なら固体を形成している系（３０）は水性試料（面数）
に迅速に浴解し、生成した二つの液相は遠心分離によっ
て迅速に分離するからである。

次に、患者から採取した所定量、例えば８ミリリソＩ・
ルの血Ｍｔ遠心分離装置（２０）の減圧空間内に第３図
に示すように通常の型の注射器（４０）を使用して注入
する。別の方法として、慣用の真空血液吸引装置例えば
Ｂｅｃｔｏｎ　Ｄｉｃｋｉｎｓｏｎ　　から”　Ｖａ　
ｃ　ｕｔａｉｎｅｒ”　（バクテナー）の商品名で販売
されているものと共に供給される標準の二重釧備品を使
用して、試料を直接装置（２０）内に吸引することがで
きる。次に、血液試料（３８）、抗菌因子非活性化系（
３０）およびクッション剤（２８）の入った装置（２０
）を混合操作にかけて凝固防止剤、赤血球溶解剤、およ
び抗菌因子非活性化系（３０）が血液試料（３８）と確
実に完全に混合するようにする。この混合工程は第４図
に示す。混合工程により、溶解剤を含有する抗菌因子非
活性化系（３０）が確実に、血液試料と完全に混合しこ
れに可溶化される。この可溶化作用により抗菌因子と抗
菌因子非活性化系（３０）の化学的成分との接触が確保
されかくして血液試料ｑ３８）内に含捷れる病原体がす
べて確実に抗菌活性から保護されるようになる。

血液試料（３８）をこのように処理した後、遠心分離装
置（２０）　ｅ遠心分離にかけて処理された血液試料（
４２）内のｅ　ＬＬ物１病原体を懸ｌ蜀液から抜は出し
て、高密度クッション剤（２８）と試料液の残分との界
面の隣りに集捷らぜる３、微生物病原体の中には実際遠
ノし容器（２２）の１１１１１壁に平滑表面（３４）の
１％い方の端に隣接して点（２２ａ　）に堆積するもの
もある。この遠ノし分離工程は図式的に第５図に示す。

遠心分離の速度および時間は遠心分離装置（２０）の構
成４１料お」：ひ遠心分離装置の種類によって広く変化
し得る１、遠心分離は既処理血液試料（４２）およびク
ッション剤（２８）を含む遠心分離装置（２０）に約１
５００　　ないＬ　６０００　　車力加速度、好ましく
は約１５００ないし：３０００重力加速度を加えて行な
うのが便利である。

第５図に示す如く、遠心分離装置（２０）　ｋ遠心分離
中１クリえば５６°の角（弧（４３）で示す）をなして
置くアングルローター遠心分離器を使用する１、従って
、もし平滑な斜めの表面（３４）が遠心分離装置（２０
）の内壁に対して３４°の角をなすならば、既処理血液
試料（４２）とクッション剤（２８）とは遠心・分離の
際平滑な斜めの入面（３４）に対し相対的に直角をなし
て押しつけられる。スインギングバスケノト型遠心分離
器を使用するときは遠心分離装置１２０）は水平向に対
し実質的に０°の角度で遠心される１、従ってこのよう
な場合には表面（３りの角度は約９０°となり、注入可
能なふ／ｌ　（２６）の代りに平たい内部表面を有する
注入可能なゴムのふたを使用する。

遠心分離工程が完了した後、遠心分離器＃ｔ２０＋を遠
心分離器から取出し、微生物病原体かすでに分離した既
処理血液試料（４２）の大部分を除去することができる
。なおこ＼で使用しているパ残留既処理血液″または゛
残存血液″という語は、その中に存在する微生物病原体
が試料の底部に集ま９、実質的に微生物病原体を含まな
い“残存″試料部分をめとに残すように遠心分翻された
血液試料を指す。この工程全第６図に示す。除去を容易
にするため例えばハブに木綿を入れた通常の注射針の形
の通気側（４４）　ｋ注入可能なふ／ζ（２４）　’Ｆ
ｅ通して突き刺す。次に注射筒（４５）をＨした第二の
注射針を、微生物病原体が既に分離された残存既処理面
液試料（４２）の大部分を除去するために注入可能なふ
た（２６）　ｔ＝通して突き刺す。例えは遠心容器の容
積が１２ないし約１４　ミＩＪ　ＩＪットルである場合
は、既処理血敢試料（４２）のうち約１．３−１．７　
ミＩＪ　ＩＪツトル以外の全部を除去するのにｌ　’Ａ
インチ、１８番のｄ：躬針金便用ずることがてきる。図
示のＪｌ］り遠心容器（２２）の内部から抜き出すべき
残存血液試料の大部分は、二つの液の界面十および賢°
Ｉ！−面内ならびに前記斜めの平滑表面（３４）の上端
に瞬接する遠心容器（２２）の側壁上に生成している微
生物病原体の層を乱さぬために、平滑表面（３４）の上
部頌角端に１４接した側壁の反対側の点から取出すこと
が好捷しい。残存血液の大部分はこの］二様で除かれる
。しかし残存血液の小部分は遠心容６　（２２）内に残
して、残存全数体中クッション剤が約３．３ないし約４
０．０　　容置チヲ占めるようにしなけれはならない。

前記クッション剤が約２０芥量係より多くならないこと
が好゛ましい３．何故ならクッション剤の量がこれ以上
であると、本方法に使用する以後の病原体培養上程にお
いて微生物病原体コロニ゛−の形態に惑影響がありイ！
７る〃・らである１、 既帆理残存皿液試料の大部分を除去した後、注入可能な
ふた（２４）および（２６）から針を両方とも抜さとり
、遠心分νｊｌＩ装置（２０）を第７図に模式的に示し
た第二の混合工程にかりる。しかしＲｒ望ならば、通気
用針（４４）は後の工程で病原体含有散体の除去を容易
とするため、注入ｎＪ能なふた（２４）に刺したま＼に
しておいてもよい。第二の混合工程は、残存既処理血液
試料（４２）の大部分から分離して前記の層を形成して
いる病原微生物を再懸濁させる役をする。このように残
りの小部分の残存既処理血液試料（４２）中に集められ
た微生物病原体を再懸濁することにより、より高率でよ
り均一な回収が確実となる。

混合工程を再び停止した後、小部分の残存既処理血液試
料（４幻中の微生物病原体、残存既処理血液試料中の微
生物病原体と高密度クッション剤との混合物は遠心分離
装置（２０）から取出すことができる。この工程は第８
図に示す。前記したように、もし９１望ならば、残存成
分の取出金一層容易にするために通気用注射針（４４）
を注射可能なふた（２４）を通して挿入してもよい。次
に注射針をつけた注射器（４６）を注入可能なふた（２
６）に刺してクッション剤（２８）、残りの小部分の残
存血液試料（４２）およびその中に存在する微生物病原
体の混合物を抜き出す。これらの成分を取出すために使
用する注射針を斜めの平滑表面（３４）の低い方の端に
刺せに、′特に良好な回収ができることを述べておく。

表面（３４）の頗角ｄ、一部、倣イ］物を含有する残存
散体が流入する７１１斗の役をすると１６じられる。高
密度クッション剤（２８）と残りの小部分の残存既処理
血液試、ｆＪＩ　＜４２）および回収された微生物病原
体との混合物（４８）は約１１／２ミリリツトルの液と
なるはずである。

次にこの液を適当な培養基上に散布する。この工程を次
に模式的に第９図に示す。前に目Ｃした装置を使用し、
月利は次のようにして散布することができる。

血液寒天平板２枚は水溶液種４ミリリットルを受入れる
ことができ、無気性環境において３６′０で培養するこ
とができる１、チョコレート寒天平板２枚は水溶７Ｐｊ
−０，４ミ’Ｊ　’Ｊソトルを受入れることができ、キ
ャントルジャー（ｃａｎｄｌｅ　ｊｏｒ　）内で３６℃
で培養することかできる。培養基は毎日コロニーのイ］
無全調べな＆Ｊ’　ｔＬσならない。微生物学的分析１
支法を１史１１］することができる。血液１ミリリツト
ル中の微生！ｂｌ＋病原体の数はコロニー数に補正係数
を乗じて求めることができる。この補正係数には所定の
微生物に対する回収率、使用した血液および高密度クッ
ション剤の容積および平板散布した最終混合物の量を考
慮に入れる。前記した一般例において補正係数は帆５で
ある。

前記の手順により、残りの小部分の残存既処理血液試料
（４２）は培養基上で少くとも約１：６０ｔで希釈され
ることになる。これにより抗菌因子非活性化系中に残存
する化学薬品の量は確実に、その中で微生物病原体の成
長を阻害しないのに十分に希釈される。本発明の抗菌因
子非活性化系は致死的薬剤を中和するかまたは阻害する
１９例えばポリアネトールスルホン酸ナトリウムは一般
に中和し、／スティンは一般に阻害する。さらに、試料
を遠心容器（２２）から取出した後システィンに対する
酸素の影響により微生物に対するその阻害作用が破壊さ
れる。１］Ｉ丁記の希釈操作は、抗菌因子非活性化系の
成分および（または〕薬剤を微生物の成長に対し致死的
でも阻害的でもない水準まで希釈するのに必要であり借
る。さらに、血液試料中に存在するが微生物に対して車
に１泪害効果を発揮するのみで致死的効果の無いような
抗生物質に対しては、ｌ：６０希釈が微生物に対するそ
の阻害動電を無くずに一般に十分であることがわがる３
、この神の化合物の一例はカントリンンである。すなわ
ち、一般にに６０希釈により大部分の微生物−抗生物質
の組合せについて成長阻害が防止される。しかし、ある
神の抗生物質の殺菌捷たは阻害作用に対して特異的に敏
感は微生物も存在する３３例えば黄色ブドウ球菌の非常
に敏感な菌株（最小阻害濃度０．２マイクログラム／ミ
リリットル）を単離しようとする場合、血液試料がポリ
アネト−ルスルポン酸すトリウムかパラアミノ安息香酸
がンスティンーチオグリコラートかによって遮断されて
いない抗生物質２０マイクログラム／ミリリットルを含
有するならば血液試料ミリリットル当り０．４マイクロ
グラムを通常装置する前記の方法による慣用の寒天平板
（培地２０ミリリツトル）上ではこの微生物は生長しな
い。この組合せでは最終花釈は約１：６０になる。かく
して、この例では抗生物質の平板内での最終濃度は０．
３３マイクログラム／ミリリツトルとなり、これは確か
に以後の黄色ブドウ球菌菌株の生長を阻害するであろう
。

さらに、抗生物質の希釈は瞬間的でなく最初に寒天平板
上の高水準の抗生物質が致死効果を発揮することがあり
得る。この問題を解決ししかも、本発明の新規な抗菌因
子非活性化系によって改善された溶解−遠心分Ｎ「法の
周知の利点を維持するためにはさらに一つの改変が必要
である：すなわち大形ペトリ皿である。臨床実験室では
抗生物質の試験用に１．５０　ｔｎｍ　Ｘ　２０　ｍｍ
のベトリ皿をも同時に使用している。この皿は６０〜８
０ミリリットルの培地を含み、通常の１００　ｍｍ　ｘ
　２０　ｍｍのぺ１・り皿の２．２５倍の表面積がある
。この大形皿の表面上に０．４　ｍｌの血液試料を均一
に線状接種すれば拡散速度を２．２５倍に増加でき、最
終希釈を約１　：　２００ないし約１　：　２７０にす
ることができる。先に使用した例においては、これは最
終抗生物質濃度帆１ないし帆０７５マイクログラム／ミ
リリットルということになる。この皿を使用すれば抗生
物質の最終濃度は最小阻害濃度より十分低くなり微生物
は１Ｆ、常に生長する筈である。すなわち、大型の皿を
すべての場合に使用する必要はないが、ある棹の生育条
件のめんどうな微生物と抗生物質との糾合ぜ例えば黄色
ブトつ球菌−セファロチンの疑いがある場合はそれを使
用すべきである。

次に第１０図により、体分泌物試料の採取および運搬用
装置から成る、本発明のさらに一つの態様を示す９．装
置（１００）は一端（１０４）において閉じられ反対側
の端（１０６）において開放されている細長いｉｉＪ撓
管（１０２）から成る。ふた（１０８）は開放ψ＃］’
＋　ｆ：閉じる３、管内の密閉端（１０４）の近くに、
微生物に７・Ｊす、る適当な液状培養基の入った圧砕可
能なアンプル（１１０）か内蔵されている。アンプル（
１１０）　Ｋ隣接して吸収（者）拐料（１１２）があり
、これは任意の適当な吸収（膚）剤、例えば綿でよい。

吸収（着）利料（１１，２）はその中に抗菌因子非活性
化固体（１，１，４）を分数含有し２ている。管（１０
６）の開［コ端内に綿棒（１１６）があり、これは例え
ば病変部からの体分泌物の採取用の吸収剤先端部（１２
０）とハシ１−ル（１１８）とから成っている。

抗菌因子非活性化固体（１１４）は前記の溶解−遠心容
器内での使用用に開示したのと同じ材料であってよく、
固体（１１４）と培養基（１１０）と吸収剤先端部（１
２０）に採取された体分泌物との合計量に対し、前記し
た成分の血液試料に対するのと同じ量比で存在してよい
。操作に際してはふた（１０６）を外し綿棒（１１りを
管（１０２）の中から取出す。綿棒は例えば開放病変部
からの体分泌物に接触した後再び管（１０２）内に挿入
され、管の開口端（１０６）にふた（１０８）をかぶせ
る。その後、管（１０２）の密閉端（１０４）に隣接す
る部分を押しつぶしてアンプル（１１０）　’に破壊し
液状培養基を放出、吸収（着）材料（１１２，）を十分
に浸させ抗菌因子非活性化固体（１１４）　’！ｉ＝　
ｆｉｌ溶化させる。生成した、抗菌因子非活性系を溶解
含有する液体は綿棒の先端部（１２０）に吸収されて、
先端部に存在する抗微生物病原体を維持するための媒体
ならびに、綿棒（１１６）の先端部（１２０）上に吸収
（着）された体分泌物中に存在するかも知れない抗菌因
子を非活性化するための抗菌因子非活性化因子を提供す
る１３綿棒（１１６）を後にｍ　？、’＃　（１０２）
から除き、前述のようにして微生物学的に分析を行なう
、。

以外の火施例シ」、本発明の理解をさらに容易にするだ
めのものであって、その範囲を限定するものではない１
、すべての実施例において ＣＩ＝’Ｕ−微生物のコロニー形成単位／管中に最初に
接種した血ｔｊ、−９％１本当り血液７Ｖ２ｍｌ処理。

回収係−処理後に見いだした全微生物中勾配において回
収された微生物の百分率１゜ Ｓ因子＝生存指数＝管内全内答物から回収されたＣＩ”
Ｕの数／導入したＣＦＵの数 Ｓ＝１は殺菌の無いことを意味する。

Ｓ　＝　０．１は１０％生存を意味する、。

である。

１りＩｌｌ 抗生物質ゲンタミ／ンに対するポリアネトールスルホン
酸ナトリウム（ＳＰＳ）の作用を説明する。

試験は米国特許第４，２１２，９４８号明細書に開示し
謂Ｊくされている原形の遠心分離装置を含めて実施した
。原形式においては、台管はクツ７ヨン剤古してフルオ
リナー）　１”Ｃ４８０，３ｒｎｌ、血液処理液として
ＰＰＧ　Ｏ，００５ミリリツトル、ＥＬＩＴＡ　Ｏ，０
０８グラム、ＳＰＳ　Ｏ，００４８グラムならびに溶解
剤としての精製サポニン０．０１８グラムを含有する蒸
留水種５ミリリットルを含む１．管は滅菌されており水
溶液のｐｆ（は７．４で、ヒト血液約７．５　ミＩＪ　
ＩＪットルを吸引するに十分な減圧としである。第二の
管はポリアネトールスルホン酸ナトリウムを、処理液と
血液試料とに対し最終濃度０．６重量％に等しくなるよ
うに水溶液に加える以外同様に調製した。次に一連の前
記原形管および原形管プラスポリアネト−ルスルボン酸
ナトリウムをゲンタミン６マイクログラム／ミリリット
ルを含有する血液試料中既知量の黄色ブドウ球菌を添加
して試験した３、血液を溶解し、管は臨床的条件を模す
るため遠心分離前に室温（約７２°Ｆ）に２時間保った
。次に管を前述のように１−で遠心し濃縮した材料を培
養基上に平板散布して回収率を調べた。結果は次に示す
。

第１表 黄色ブトつ球菌（Ａｉ’ＣＣ２５９２３７）ケノタミ／
ノ（６）ｔｇ／ｍｌ） 糸　　　　　　コ迂す　　回収チ　　Ｓ因子原　　　　
　　　　　　１３３　　　　　１００　　　　　．０６
原−１０，６％　ＳＰＳ　　　２０３　　　８０　　　
．９原形管は全回収率が６％であるのに対しＳＰＳ糸の
回収率ｔよ７２％である（　１１．０倍の改Ｏｆ　）　
。

例　　２ アジピンリンに対するチオグリコラートの非活性化効果
を示すため次の例を加える。本例は表記の計のチオクリ
コラ−トヲ第二および第三の系列の管に添加した以外は
例１と同様に１．て行なった。

第２表 ケ■１（色ブトつ球菌（Ａｉ’ＣＣ２５９２３７）−ア
ジピンリン（２１Ｉｔ　ｇＡｎｔ　）涼→６係チオクリ
コラート　　４６６　　　８９　　　．１３＊処理液＋
血散試料の融に対する係 属形管の全回収率が０．０７％であるのに対し、６％チ
オグリコラートの系の回収率は１２．５％であった一１
７９倍の改良。

例　　３ 本例はアンピシリンおよびゲンタミンン非活性化用の新
規なシスティン−チオグリコラ−１・の組合せを説明す
るものである。下記の一連の試験は、液状血液処理拐料
に添加したチオグリコラ−１・−システィンの表示の量
および抗生物質の量以外は例１と同様にして行なった。

第　　３　　表 黄色ブドウ球菌（ＡＴＣＣ２５９２３７）アジピンリン
（２１μν匍 −Ｌ　　　　　コ用里　３仔 原　　　　　　　　　１９６　　３３　　　．００２＊
　処理液と血液との合計量に対するチ第　　４　　表 ゲ１色ブＩ・つ球菌（Ａ′ｌ’ＣＣ２５９２３７）ケノ
タミ／ノ（６μ？、Ａｎｌ） 系　　　　　　　　ＣＦＵ　　回収％　８因子原　　　
　　　　　　　　　　　１３３　　　１００　　　　　
．１−　　　＊ ＪｊＫ　＋　０　、５％チオクリコフー１・　　２０３
　　１００　　　　．２−　　　＊ 原＋０　、５％チ牙クりコフート　　２８７　　　８６
　　　　．８＊ 原４０．２係／スティン ＊　処理液と血液との合占」蚤に対するチ第：３表おま
ひ絹４表の比較データからチオクリコラート−７ステ・
ｆノの組合せの効果は明らかである。。

１列　　　４ 本（９１］は１％？　Ｉ’ｉｌヒト血液の粘度低−トに
幻するチオグリコラ−１・−７ステイン混合物の相乗効
果を示すものてあろ１、−１れそれの」烏合に、ヒト血
液’７−！ｉミリリットルを（〜製すポニン２．５沖量
係および（添ツノ１１する場合は）表にＩ弓げた量のチ
オグリコラートと／ステイノとを３山する水溶敵で処理
した（チは処理液と血液との骨旧ｉ−に対するものであ
る）。

各試料の粘度は２３．５ないし２４．８°Ｃで測定した
。

結果を以下に示す。

１　サポニンｘｉ　　　　　　　　　　　　　　　　４
．０４２　　〃　　　〃　→０．１係チオグリコラート
　　　　　　７．２８３　　　ｔｔ　　　　ｔｔ＋０．
５チ　　　／／　　　　　　　　　　　７．７７４　　
　〃／／＋１．０％　　　ｕ　　　　　　　　　　　８
　、５６５　　　ｎ　　　　／／＋２．０％　　　〃　
　　　　　　　　　８・５１６　　　ｔｔ　　　／７＋
３．０チ　　ｔｔ　　　　　　　　　８　、４．６７　
　　〃　　　〃　→　０．１係システイン　　　　　　
　　　４．５６Ｂ　　　ｕ　　　　ｔｔ＋Ｑ、５係　　
　ｕ　　　　　　　　　　　３　、４６ｇ　　　ｕ　　
　／／＋１．０係　　〃　　　　　　　２・８９＊試料
温度　２３．５〜２４．８℃ 例　　５ 沖の原形溶解一連ノし・分離装置を例１に記した」２つ
に１；１↓＼ンてた９、寸だ、水相を下記のように変更
（−た以外Ｏ−：１例１と同様Ｋ　して第二の一連の溶
解−遠心分離装置を組立てた： ポリブＬ１ピレンクリコール０．００５ミリリットルを
Ｊイｊ′Ｊ−るズ≦留水帆５ミリリットルを管に装入１
、 次に各肯に粉末混合物０．１７グラムを加えた。

この混合物は次の成分を宮有する： 楯製−リーポーン１．＞３グラム、ポリアネトールスル
ホノ１タナトリウム４．８グラム、チオグリコラ−１・
０．８クラノ・、およびンスティン９．６グラ　）、　
１． １１″１′・１、Ａ−トクレープ加熱により滅菌しその
最終１１１１　＆；１．　ｆ〕、（ｉないし６．８であ
った。

管内は血液７．５　ミ！Ｊ　ＩＪットルを吸引するに十
分なだけの減ハ、にした１、 −１・・のト・の＼１易含に、後出の表に示すような量
の４１．１．定の微生物と抗生物質を血液７．５　ミ！
Ｊ　’Ｊノトルに加えた。次に血液を溶解−遠心管に入
れ、臨床条件を模するため管を室温に２時間保持した後
、本明細書に記載のようにして遠心分離にかけた。

次に各管内の濃縮残分を等分量づつ適当な培養基の入っ
た１００ミリメートル×２０ミリメートルの太さの５組
の基天平板に平板散布した０、遠心分離後に残存する上
清１ミリリットルも同様平板５枚に散布した。結果を次
の第６表に示す。

ヘ０ＩＮ−のべ一〇のへののトＮへ寸−の＋１＋１旧刊
刊＋ｌ　＋ｌ　＋１４１刊旧＋ｌ　＋ｌ　＋ｌ　＋ｌ　
＋ｌ　＋１　＋１−Ｉ−＋■のω■帥ωトーーのωＯ■
トの−のト■ｏＯ１，１′）ＣＩ）■■■■トド■の■
０の■０■■■■■■の■■■Φ■■■Ｏ■■−賛も４
１１−、　（１（ヤヤヘｌＴ％　）−１べｂ本」ヤ本＼
　大　穴　大台管からの濃縮残分を、培地含有の１００
　ミＩＪメートルＸ　２０　ミＩＪノー　トルのペトリ
皿の代りに１５０ミリメールＸ　２０ミリメートルのベ
トリ皿に散布した以外は前記と同様にしてさらに試験を
行なった。

後ψ１の皿は６ｆ１−８０　ミ’）　’）ソトルの培地
を會み、１ｊｉｌ記第６表のデータを得るのに使用した
ＭｉＪ記の１００ミリツートルＸ　２０ミリメートルの
ベトリ皿の約２．２５倍の表囲４１′ｆ　を有する。結
果は次の第７表に小す、う ゲノタミ／ン（９ｇ）　　　→　　→−＋　　　　６３
０　　９２　　．７±、２ドプラマイン／（４μｇ）＋
　　→ アミブノ７ノ（２１μｇ）　　十　　　＋　　　　→　
　　＋　　　十（ニー／ソノ（２０μｇ）　→　　　＋
　　　　　　＋＋士アノビ／リン（２１／ｚｇ）→−＋
　　　　十　　　＋　　　→七フーＪ’Ｃコブン（２０
μｇ、）２１４　　１（Ｊｏ　　　　、４　　±、２　
　７７７　　１００　　　．８±、１ヒフオＡ−／チン
（２５／／　）４６７　　９６　　　、７±、２　３０
１　　９９．８　．９±、１ガントリンン（１００／ｉ
ｇ、） クリンタマイ／ン（５μｇ）　　　　　十　　　＋　　
　　　＋　　　　　＋　　　＋　　　　＋メチシリン　
　　　（９〃ｇ）　　　　　　＋　　　　　十　　　　
　十　　　　　＋　　　　十　　　　→バンコマイシン
　（襲ｇ）　　　　＋　　　→−十十十十ビペラノリン
　　（６０μｇ）　　　　＋　　　→　　　　→−十　
　十　　　→モギサラクタム（１０促ｇ）　　　　十十
＋　　　　十十＋セフオタキ／ム（２（ロ）妬７）　　
　５ｆ）４　　１００　．８±、１　　５６７　１００
　．９±、１１１、大腸菌（ＡＴＣＣ＋２５９２２）な
し　　　　２３７　９１　　］、、３±、３１７２９４
　１．５±、６ゲンタミシン（６／’ｇ）　　　　　＋
　　　　＋　　　　、　　＋　　　　　十トフ゛ラマ・
ｆソノ（４〃） アミ力７ノ　（２１１υ ペニシリン　（２０１υ　　　　　　　　　　　　　　
＋　　　千　　十アンビ／リノ（２１ｚＱ セファロチン（２０／Ｑ　　　　１０２　１００　　　
．１±、９　　２８８９２　　　．８±、１セフオキ／
チン（２５リ　　　４５４　１００　　　．５±、＋　
　　４０６９９　　　．９±、３テトラサイクリン（Ｑ
ｌＱ　　　　＋　　　　→−エリスロマイ７ノ（８／Ｑ
　　　３０５　　１００　　　．９±、２　　２１２９
９　　１．０±、２ガントリ／ノ（１００＃）　　　　
１．４０　　９９．８　　］、、４±、６　　２３１９
９　　１．０±　１チ力ルンリ区１５０／ｊ化６）　　
→　　　＋　　　　＋カルベニンリン（２０／１７．）
　　　＋　　　　　十＋ピペラノリン　（６０／ｉｇ）
＋＋ 才　容管は処理前に室温（２０℃）に２時間保持した。

＊＊　小型＋１ｆｌは寒天培地２０−を、大型皿は８０
ｒｎ！、を含ｔｒ。

＊＊＊括弧内の数は使用抗生物質最終濃度／血液−を示
す、。

十　小型皿での回収率良好につき試験ぜす。

第６表および第７表のデータは本発明の次の重安な而を
示す３、すなわち １、平均的血清水糸の神々の抗生物質の存在する場合、
原糸は最初の接種物の９９．７％までも失うことがある
（黄色ブドウ球菌対アンピシリン）１．黄色ブドウ球閑
の場合抗生物質１９中１３種は２時間以内に微生物の５
０％以」二を殺した。大腸菌の場合はこの過大な致タヒ
作用は抗生物質のうちの９神につい−Ｃ牛じた１゜ ２．１″ノましい糸については、最旨殺菌率は７０％で
、接神物ノの５０チ以下への減少は黄色ブドウ球菌に対
；−で２神の抗生物１↓、大腸菌に対して２独の抗生物
質について牛した２、新装置に大型皿を加えることによ
りこれら４ケースで観察された致死効果は殆ど全く消滅
した（　Ｓ　＝　０．８対帆３、Ｓ　＝　０．９対０．
５、Ｓ　＝　０．８対帆５、Ｓ　＝　０．５対０．３）
。

総括すると、断糸に大型ベトリ皿を併用することにより
輸送および処理中の血液試料内に存在するバクテリアに
対する血液および治療用抗生物質の殺菌効果を１効に阻
害することができる。

以下の第８表から第１４表寸でに示すデータは、敗血症
の患者の血液から普通に単ｈ「されるその他の病原体に
対する本発明の一般的有効性を確証するものである。

８　ｆｌの潜在的病原体および神々の抗生物質について
前記例５と同様の操作を行ない、容管からの濃縮残分を
以下の衣に示すように小型および大型の両皿に平板散布
した。

第８表 回収係　　　Ｓ因子 １目　　　　ｎ＋　　　　　　　　　　１日　　　　　
　　新１′ノヒ／リノ　　　　　　’ＪＷ、５　　９５
　　　　　　１．５　　±、５　　　．８±　、１ノノ
ルベニ／リノ　　　　　ｆ）　　　　　９４　　　　　
　　　　０　　　　　．６±、３チカル／リノ　　　　
　１０Ｆ１　　　　８６　　　　　　　．０６±、０７
　　１．３±、６トブラマイ／ン　　　１００　　　７
５　　　　　　．０３±、（１１・９±・２り「」ラル
ノエニコール　９８　　　８０　　　　　　．９　　±
、２　　１．２±、３ｊ斗ラリイクリノ　　　９）３　
　　８８　　　　　　．９　　±、５　　１．４±、７
カノトリノノ　　　　　　９７　　　　９９　　　　　
　．６　　±、１　　　．８±、１な　　し　　　　　
　　　　　　　　　　９７　　　　　　９８　　　　　
　　　　１．４　　　±、２　　　　　１．２　　±　
、１セフオギ７ナノ　　　　９５　　　９７　　　　　
　．９　　±、２　　．８±、２十ノｊ゛ロＪノ　　　
　　９９．（ｉ　　　８８　　　　　　ＬＯ±、２　　
．９±、１ゲノタミ７）　　　　　　９り９９　　　　
　　　、ｆＪ４±、０３　　１．１上、１トブラマ１／
ノ　　　　９Ｂ　　’９３　　　　　．９±、５　　１
．１±、２クロラノ、フエニコー／１．　　＋　　　　
　９７　　　　　　　　　　　　　　　・９±・３十／
］惧り皿の回収率良θイにつき試験せず第９表 肺炎桿菌≠６３２−２−小型皿 カルベニゾリン　　　　　９３　　９４　　．１±、１
　　．８±、２チカル７リン　　　　　９９　　８９　
１．０±、１　．９±、１トブラマインン　　　　　８
５　　９３　　．３　±、３　　１．１±、２クロラム
フェニコール　　９９　　９３　１．３±、２　　１．
０±、４テトラサイクリア　　　　　９８　　　９５　
　１．０　±、１　　　９±、２ガントリ／ン　　　　
　　　９５　　　９８　　１．０　±、１　　．９±、
１セフオキシチン　　　　　４９　　９７　　．０２±
、０２　１．Ｕ±、１なし　　　　９２　９３１．１±
、３．７±、１セフアロチン　　　　　　１００　　９
８　　．２　±、１　　．５±、２第１０表 緑１儂菌　４Ｐ２７８５３−小型皿 回収襲　　　　　　Ｓ因子 カルく二／リン　　　　　９８　　　９５　　　．９±
、３　　．９±、１チカルンリン　　　　　９３　　９
１　　．３±、Ｉ　　　ＬＺ上　ｌドプラマイノン　　
　　　　９８　　　９０　　１．０±４１　　．９±　
、２クロラムフエニコール　　９６　　８６　　　．７
±　２　１．１±、２テトラサイクリン　　　　　９５
　　　８９　　１．０±、Ｌ　　　　１．２±　、１セ
フオキシチン　　　　　９７　　８６　　１．４±、２
　　．９±、４セフアロチン　　　　　　９０　　９２
　　１．４±、１　　１．４±、０１ゲンタミ／ノ　　
　　　　９８　　５６　　１．０±、４　　１．２±、
２モキサラクタム　　　　　９７　　８７　　．６±　
１　　４９±、１第　　１１　　　表 アンピノリン　　　　４３　　６５　　　．０１±、０
１　　　　　　　．６±、２メチ／リン　　　　　　８
３　　　８６　　　．００３±、００４　　　　　　　
．４±、２ドプラマイノン　　　　９７　　　８８　　
　．８　　±、４　　　　　　　　．６±、４クロラム
フエニコール９９　　　９３　　　．６　　±、４　　
　　　　　．８±、２テトラサイクリン　　１００　　
　９９　　　．３　　±２２　　　　　　　　．４±、
２エリスロマイ／ン　　　＊９７　　杓８　　＊、３　
±、３　　　　　　　　＊１．３±、３セフオキソチン
　　　　９７　　９９　　　．４　　±、１　　　　　
　　．５±、２なし　　　　９３　９０　１．０±、０
３　　　１．Ｕ±、１ゲンタミ／ノ　　　　　　９９．
８１００　　１．０　　±、１　　　　　　　　１．１
±、１＊培養時間　・・４８時間 大型皿 回収％　　　　　　　Ｓ　因　子 旧　　　新　　　　　　旧　　　　　　　　勅テトラザ
・１′クリノ　　　９９　　１００　　　．５±、２　
　　　．７±、２トブラマインン　　　　　９８　　９
９　　　１．０±　、３　　　　　１．１±、２アノビ
／リン　　　　　　　　　８２　　　　　　　　　　　
　．９±・３セフオキシチン　　　　１００　　　９９
　　　　．２±　、１　　　　　．８±・１メチ／リン
　　　　　　　　　　　　９７　　　　　　　＋　　　
　　　　　　、６±、１ベニ７リン　　　　　　　　　
　　６３　　　　　±　　　　　　　　、９±、１十　
小型皿の回収率良好につき試験せず第　　１２　　　表 化膿連鎖球菌　≠１９６１５−小型皿 回収チ　　　　　　　　Ｓ因子 旧　　　　新　　　　　旧　　　　　　　　　新ペニシ
リン　　　　　　０．２　　１００　　　．０２　　±
、０２　　．６±、２アンピシリン　　　　　０　　　
　９９　　　．０００２±、０００３　．６±、１メチ
ンリン　　　　　　　９５　　９０　　　．２　　　±
、１　　．８±、２ドプラマイノン　　　　　　　９８
　　　１００　　　　．６　　　±　、１　　　．５±
　、２クロラムフエニコール　　９８　　　９７　　　
　．５　　　±、１　　．４±、２テトラザイクリン　
　　　　１００　　　９６　　　　．３　　　±　、１
　　　．１±　・１エリスロマイ７ン　　　　１００　
　１００　　　　．０２　　±、０１　　　．０計、０
１セフオキンチン　　　　　　９８　　１００　　　　
．３　　　±、１　　　・２±・０３なし　　　　９２
　９５　１．０　　±、５．５±、１ゲンタミ７ノ　　
　　　　　９９　　　９４　　　　．６　　　±、１　
　．９±、１大型皿 回収％　　　　　　　　Ｓ因子 トフ゛ラマインン　　　　　９９　　１００　　　　　
１．０土、ｉ　　　ｉ、ｉ±　、３クロラムフエニコー
ル　　９９　　　９９　　　　　　．８±、３　．９±
　、３テトラサイクリン　　　　　９９．６　１００　
　　　　　　　。６±・１　　　・７±　・３エリスロ
マインン　　　　１００　　１００　　　　　　　．１
±、１　　．１±　、１セフオキ／チン　　　　　９８
　　　９５　　　　　　．６±　１　．７±　、２なし
　　　　９８　９７　　　．８±、１１．０±、２アン
ピシリン　　　　　　＋　　　１００　　　　　　　　
＋　　　　１．５±　、２ゲンタミシン　　　　　　　
＋　　　　９９．５　　　　　　　　＋１．２±　、３
第１３表 回収％　　　　　　　　Ｓ因子 アンビリノン　　　　３３　　９５　　　　　．０１±
、Ｕ］　　　、９±　、１セフオキ／チン　　　８０　
　９７　　　　．１±、１　．７±　、２クリンタマイ
／ン　　９６９９１．２±、２　　１．１±　、２エリ
スロマイシン　　９４　１０ｆＪ　　　　　　、４±、
１　　．７±　、２ゲノタミ／ン　　　　９０　　７７
　　　　　．４±、１　　１．３±　、４カナマイ７ノ
　　　　　９４　　９９　　　　　．８±、１　　．９
±　、１ノチ／リン　　　　　　９４　　９９　　　　
　．９±、２　．８±　、１ベニンリン　　　　　７３
　　９９　　　　．１±、１　．６±　、１テ］・ラザ
イクリン　１００　　９９　　　　．２±、１　．６±
、１バノコマインン　　　９５　　９９　　　　　．７
±、２　．８±　、２大型皿 ］蝉優−−姿一因子一 旧　　　納　　　　　　　　旧　　　　　　實なし　　
　　　　９５　９９　　　．９±、１　１．．２±、１
セフオギ７ヂン　　　　　９３　９５　　　　　．８±
、６　　　．７±、２ガントすノン　　　　　　　９２
９８１．２±・７　　　・６±・１ベニンリン　　　　
　　１００　　９９　　　　　．３±・２　　　・６±
・２第　　１４　　　表 回収％　　　　　Ｓ因子 旧　　　新　　　　　　旧　　　　　新し　　　　　　
　　　　　　　　　　８８　　　　５１　　　　．７　
　±、２　　１．０　　±　、３カルベニ／リン　　　
　　９６　　　８２　　　．０９±、０５　　−５±、
１セフオタキシム　　　　　９７　　１００　　　．７
±、２　．８±、１セフオキ／チン　　　　　９４　　
　９９　　　．５　±、３　１．１±、５クロラムフエ
ニコール　　８７　　　８８　　　．９±、２　．９±
・１エリスロマイ／ン　　　　９８　　　６４．　　　
．７　±、５　．６±、２ペニシリン　　　　　　８７
　　５１　　．７±、１　．７±、１テトラサイクリン
　　　　９０　　　９０　　　．５　±、１　．５±　
、１バンコマインン　　　　　９５　　　９９　　　．
７　±、２　．８±、２スポロゲネスｍ４ｊ−１９４０
４小型皿なし　　　　　　　　　９７　　９３　　　６
　±、１　．６±、２カルベニンリン　　　　　　　９
８　　　９９　　　　３　　±、３　．８±、３セフオ
タキシム　　　　　　　９７　　　９８　　　　５　　
±、２　．５±、２クロラルフエニコール　　　　９６
　　　９７　　　　７　　±、４　．６±、４クリンダ
マイ／ン　　　　　　　９９．７　１００　　　　　’
４　　±、２　．３±、２エリスロマイシン　　　　　
　　９６　　　９９　　　　５　　±、２　．８±、２
ガントリジノ　　　　　　　　　９３　　　９９　　　
　５　　±、１　．７±、１ゲンタミノン　　　　　　
　　　９８　　　９８　　　　８　　土、２　．６±、
４ペニシリン　　　　　　　　１００　　　９６　　　
０８±、０４　．８±、３この場合にも断湿合剤１ｌ−
１：微生物を抗生物質の致死作用から保護している。致
死作用を発揮しない抗生物質に対しては予期した通り原
形管も抗菌因子非活性化系を含有する変形管も共に微生
物の実回収率は同じになった。さらに例５および例６に
より、ｍ＝の特定の微生物と抗生物質との組合せ、例え
ば黄色ブドウ球菌対セファロチンを取扱う場合は大希釈
（１：　２６７　）が必要なことがわかる。

これらのデータは大希釈はｍ＝の抗生物質、例えハセフ
ァロチン、テトラサイクリン、エリスロマイシン、およ
びある種の微生物、例えば千球閑の場合にのみ必要であ
ることを示唆する。アミノグリコシド、ペニシリン、チ
ンピ／リンおよびクロラムフェニコールはこの合剤によ
り完全に中第１１されるが、セファロチンは部分的に中
和される、。

例６ 例５に述べたような一連の原形管と、例５に述べたよう
な抗菌因子非活性化系を含有する管とを使用して、陽の
血液培養確認によシ敗ｌ４Ｊ１症の疑のある患者から採
取した血液を処理した。各々の場合、患者からの血液を
原形管および抗菌因子非活性化系を含有する変形管に装
入した。管を遠心分離にかけ濃縮残分を例５に記した小
型ペトリ皿に平板散布した。試験結果を次の第１５表に
示す。

第　　１５　　　表 □ Ｉ　　　Ａｃｌｎｅｔｏｂａｃｔｅｒ種　　　　　　Ｎ
Ｇ　　　　　］、、４２　　　Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔ、
ｅｒ　ａｇｇｌｏｍｅｒａｎｓ　　　　　Ｏ，７０，７
３Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅ　　　　
　　　Ｏ，Ｉ　　　　　　ＮＧ４　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　Ｎ　Ｇ　　　　　　Ｏ，１５大
腸菌　　　　　　　　０．６　　　２．９６　　　　　
　　１．１　　．７ ７　　　　　　　１３．０　９２．８ ８　　　　　　　７．３　１２，５ ９　”　　　　　　２・１　１０．２ １０　　　　　　　　ＮＧ　　　’０．１１．１　　／
／　　　　　　ＮＧ　　　Ｏ，１１２フラボバクテリウ
ム　　　　　　　　　　　ＮＧ　　　　　　　Ｏ，６１
３）１ｉｓｔｏｐｌａｓｍａ　Ｃａｐｓｕｌａｔｕｍ　
　　　　　１０．５　　　　　　７．０１４　　　　　
　　　　　　　　　ｔｔ　　　　　　　　　　１．６　
　　　　　２．６１５　　　　　　ｔｔ　　　　　　　
　　　　　　　　　　　１３．５　　　　　　１４．２
１６　　　　）（ｌｅｂｓｊｅｌｌａ　０ｘｙｔｏｃａ
　　　　　　　　　　８．８　　　　　２０．６１７　
　　　　　　　　　　　１１　　　　　　　　　　　２
．１　　　　　　３．９］８　肺炎桿菌　　　　　０．
１　　０．１１９　　　　　　〃１１．９　　　　　　
１９．３２０　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　１３０．８　　　　　７８．１２１　　　　　　
ｔｔ　　　　　　　　　　　　　　　　　１６３．０　
　　　　１８２．０２２　　　　　　ｔｔ　　　　　　
　　　　　　　　　　　　Ｏ，３ＮＧ２３　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　０．３　　　　　
　１．０２４　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　　７．３　　　　　　８．４２５　　　単球症リ
ステリア　　　　　　　　　　０．４　　　　　９．５
；２６　　緑膿菌　　　　　　１３１．３　　８３．０
２７　　螢光菌　　　　　　０．１　　　ＮＧｆｌ叉　
　　　採取時血清中抗生物質 なし ０　　　なし ドプラマイノンおよびセファゾリン セフオキンチン ＋３８３　　　ペニシリンおよヒトフラマイ７ン５７ ＋６１４　　　なし ＋７１　　　　チカル／リンおよびゲノタミノン＋３８
５　　　　なし メフオキンン ペニシリンおよびドプラマイノン ー５０　　　アノホテリンノＢ ＋６２ ＋　　０５ ＋１３４　　　なし ＋８６　　　ゲンタミソンおよびチヵルンリンゲンタミ
ノン ＋　６２　　　ドプラマイノンおよびカルベニシリン−
６７なし ＋　１２　　　ドプラマイノンおよびカルベニシリン＋
２２７　　　ゲンタマイシンおよびチヵルノリン十　　
１５　　　　　　　　　　　　　〃＋２２７　　　セフ
オキシチン 一５８トプラマインンおよびカルペニシリンなし 結　　論 １．陽性試料の６８係において、新管の方がより大きな
微生物数／血液ｍｅが得られた。差は増加カウントとじ
て、低い方は５係、高い方は６１４係の範囲となった。

２、断糸では陽性試料３個が負となったが原糸では５個
が負となった。

：ｌ　　４例においては原糸の方がカウントが高かった
。しかしこれは実験のばらつきから容易に予期し得る程
度のものである。

４、患者の３６％は血液採取の時点で抗生物質を使用し
ていなかった。、断糸ではそれらの患者の５０係におい
てより高いカウントが得られた。差は低くて１３４％、
高くて６１４％増の範囲となった。

５．１７培養は同じ時点で同時に陽性となった。２培養
（リステリアおよび大腸菌の一つ）は断糸においては一
日早く陽性となった。

表に示す辿り試料の６８％において、抗菌因子非活性化
糸を含有する改変装置は原装置よりも高いカウント（５
％ないし６１４係増）を与えた。

５例において、原装置は陰性、新装置は陽性であった。

試料の大部分は同時に陽性であったが、新装置の方が１
日早く陽性培養を検出した例が二つあった（大腸菌およ
びリステリア試料の一つ）。

驚くべきことに、新装置は患者が抗生物質を使用してい
ない場合にもより大きなカウントを生ずるように思われ
る（３名の患者）。これは抗菌因子非活性化系を含有す
る新装置が原装置の液状血液処理液よりもより効果的に
患者の免疫系を遮断したことを示す。

例７ 原浴解−遠心分離装置の第一の系列を例１と同様に組立
てた。溶解−遠心分離装置の第二の系列を例５における
第二系列と同様にして組立てた。

溶解−遠心分離装置の第三の系列は次のようにして組立
てた 米国特許第４，２１２，９４８号明細書に開示されてい
るのと同様な品に、クッション剤としてのフルオリナー
１−　ＦＣ４８を乾燥粒状粉末の次の化合物と共に添加
した。

チオグリコラート　　　　ｏ、ｏｏｓグラムポリアネト
−ルスルホン酸ナトリウム　０　、０４８グラムおよび
精製サポニン　　　　　０．０１８グラム。

第三系列の管を血液８ミリリツトルの吸引に十分なたけ
減圧にした。次にこの系列の管を１２１℃に３０分間加
熱し、室温に放冷した。

各々の場合に、後掲第１６表ないし第２１表に示す鼠の
特定の微生物および抗生物質（もし加えるならは）を、
第一、第二の系列の管では７．５　ミＩＪ　ＩＪノトル
、第三系列の管では８ミリリツトルの血液に添加した。

血液を次にそれぞれの溶解−遠心管に入れ、容管を水量
細組に記載のようにして遠心分離にかけた。谷々の微生
物病原体−抗生物色の組合ぜを同量、例５に記したと同
様大型皿および小型皿の両方に平板散布した。結果を次
の第１６ないし２１表に示す。

ｉｉＪ記のデータかられかる通り、本発明の乾燥粒状粉
末抗菌因子非活性化系を含有する本発明によって製作し
た溶解−遠心分離装置は、管内の水溶液中に抗菌因子非
活性化系を含有する本発明による系と少くとも同等の成
績を示した。新派はいずれも、実施例に示した通り原形
より明かに良い成績を示した。

例８ 原溶解−遠心分離装置の第一の系列を例１と同様に組立
てた。溶解−遠心分離装置の第二の系列Ｇ１２、例７の
第１６−第２１表に示したデータを得るのに使用した第
三系列の溶解−遠心分離装置と同様にして組立てた。

各々の場合に、後記第２２表に示す隼の特定の微生物を
、第一系列の管では７．５ｍＡ、第二系列の管では８１
ｎｅの血液に添加した。次に血液をそれぞれの溶解−遠
心管に入れた後管を第２２表に示す時間２１℃に保った
３１次に谷Ｖｋ遠心分離にかけ、濃縮された内容物全明
細山記載のようにして培養基上に’Ｆ　ｖｉ散布した。

第２２表のデータかられかる通りある種のバクテリアは
原形管中で２４時間保持すると増殖するかまたは死滅す
る。驚くべきことに、同じ種のバクテリアが、抗菌因子
非活性化剤を含有する新管の第二系列では実質的に生長
も死滅もしなかった。遠心管を長時間放置することは推
奨できないが、病院の環境においてはか＼る管が処理前
ある期間放置されることが判明している。データからは
大部分の鍾属では新管内で２４時間後実質的に増殖を認
めないが、管をできるだけ早く、間違いなく保持時間１
２時間以内に、処理すべきであると信じられる。さらに
ある種のバクテリア例えばｐｎｔｅｒｏ−ｂａｃｔｅｒ
　ｃｌｏａｃａｅ　　の生長を確実に防止するために、
例えば後出例１１に示す尿の例におけるように、塩化す
］・リウムを添加することができる１）塩化ナトリウム
の世は最終処理溶液および血液試料に対し約帆１ないし
約１０重世襲、好ましくは約１ないし約５チの範囲、最
も好１しくは約３チである。

第２２表 血　　液 保持時間再構成試験 （目４４−２）　　　新１２３６　９９−１．９±、２
　　ＴＮＴＣｌ”ＮＴｃ−過多のためカウントせず 例９ 一連の溶１’ｙ（−遠心分離装置を、例８における抗菌
因子非活性化系を含有する第二の系列と同様にして組立
てた。各々の管に、大腸菌８４２　ＣＦＵ、抗生物質セ
フオタキンム２０μｆ／ｙｎｌ　　ならびに後掲第２３
表に示す量のベータラクタマーゼ酵素を含有する血液８
１ｎ１．を加えた。使用したベータラクタマーゼ酵素は
カリホルニア州、Ｌａ　Ｊｏｌｌａ　、　Ｃａ１ｂｉ。

ｃｈｅｍ　−Ｂｅｈｒｉｎｇ社、　注文番号４２６２０
５、　ロット番号２０３４３５　　のベータラクタマー
ゼ（セレウス菌）であった。（注：ベータラクタマーゼ
１１３活性単位対ベータラクタマーゼ■　１活性単位）
。次に血液をそれぞれの溶解−遠心管に入れ容管を水量
細門に記載のようにして遠心分離にかけた。微生物病原
体−酵素の組合せを回置つつ例５に記したように小型ペ
トリ皿に散布した。結果を次の第２３表に示す。、 第２３表 太腸閑−セフオタキ／ム２０μｇ／ｍｌ酵素の中位　回
収チ　Ｓ因子 ０　　　５８　　　．０２ ．０１　　１００　　　．０１１ ０．１　　　１．００　　　．０５２ １．０　　　９９　　　．３３ ２．０　　　９９　　　１．１７ ４．０　　　９９　　　．８２ ５．０　　　９９．８　　．９５ 第２３表かられかる通り、抗菌因子非活性化系の（１４
成要素としてのベータラクタマーゼは、溶解−遠心管に
添加された場合抗生物質の活動を辿［１７Ｌ微生物を殺
すのを防止するよう効果的に作用する。

比較として例１に記したようにして第二の系列の管を組
立て、容管に大腸菌７６５　ＣＦＵ、セフオタキノム２
０μＶ／ｍｌ　、第２４表に示す単位のベータラクタマ
ーゼおよび血液７．５　ｍ７！を加えた。次に′Ｕを遠
心外聞１にかけ、試ｖ４を前記のように培養した。

結果を次の第２４表に示す。

第２４表 酵素の単位　　　回　収　チ　　　　Ｓ　因　子０　　
　　　　　　　　　９３　　　　　　　　　　．０８１
　　　　　　　　　　　９０　　　　　　　　　　　、
０４５　　　　　　　　　　　９５　　　　　　　　　
　　　、１５５第２４表の結果を第２３表と比較すると
、抗菌因子非活性化系を含まない溶解−遠心管に使用す
る場合は酵素を添加してもＳ値は満足に改善されないこ
とがわかる。

さらに、第２４表に関して調製したものと同一で抗菌因
子非活性化系を含有しない溶解−遠心管の第一の系列、
第２３表に関して使用したものと同一であるかｒｌＹ素
を含まない溶解−遠心管の第二の系列、および第二系列
の管と同じであるが後出第２５−３０表に示す量のベー
タラクタマーゼ酵累を含ｆｆｒ溶解−遠心管の第三の系
列の比較試験を行なった。

容管に、表示したバクテリア２００ないし１００ＯＣＩ
”Ｕを含有する血液を加え、本例において＾ｉＪ　ｉ：
己したと同様゛に処理した。結果を次の第２５衣ないし
第３０表に示す。

第２５−３０表の結果は、本発明の抗菌因子非活性化系
に酵素を添加すると前記の種類の抗生物質に対するその
中和能力が有効に増進されることを示す。

例　　１０ 第２５−３０表に示した第二系列に使用し／こ抗菌因子
非活性系を含有する溶解−遠心管を調製した。

これらの管の第一の系列には後掲第３１表に示す量のベ
ータラクタマーゼ酵素全添加した。

次に管をコバルト滅菌した後、第３１表に示す微生物病
原体および抗生物質を含有する血ｒｉ、８ｍ１．をこれ
に加え、例９と同様に処理した。第二の系列の青は蒸気
滅菌した後指示量のベータラクタマーゼ酵素を加え、次
で指示量の微生物病原体および抗生物質を含有する血孜
８ｄをこれに加え、例９と同様に遠心分離し、処理した
。これらの試験の結果を次の第３１表および第３２表に
示す。

第　　３１　　　表 コバルト滅菌 酵素単位　　　回収率ｆ％ｌ　　　Ｓ因子　　回収率優
）　　Ｓ因子０．１　　　　　６７　　　　．０１　　
　　１００　　　．０４１．０　　　　　８３　　　　
．０６　　　　　９７　　　　、］、７５．０　　　　
　８１　　　　．４１　　　　　９７　　　．３３第　
　３２　　　表 蒸気オートクレーブ滅菌 酵素単位　　回収率（％）　　Ｓ因子　　　回収率（％
ｌ　　　Ｓ因子０．１　　　１００　　　　．０５　　
　　　１７　　　　．００２１．０　　　　９９　　　
　．３３　　　　　２６　　　　．５０５．０　　　　
９９．８　　　．９５　　　　　３４　　　１．６５第
３１表と第３２表のデータの比較から認められる通り、
コバルト滅菌による酵素活性の減少は酵素の濃度により
２０チないし８咋の範囲である。しかし第３１表は明か
にコバルト滅菌が有効に利用し得ること、そしても１〜
使１１１するときは滅菌ＡｉＪに管に染加する酵素の計
を増加すべきことを示している。

ある１ツバ度、試（１中に存白ミすると予想きれる抗菌
因ｒのｆｌＴｉ類によって、抗菌因子非活性死因Ｐに使
用すべき他の化学薬品を予想し得ることに留意すべきで
あるｔ−＋　１２’ｌえば、他の種類の抗菌物質例えば
次亜塩素酸ナトリウム、重金属等に対し拮抗的な他の水
溶性化合物として、例えば能硫酸水素す）　ｌ）ラムお
よびスルフヒドリル類が挙げられる。前記の通り、本発
明の抗菌因子非活性化系は米国特許第４　、１３１　、
５１２号、同４，２１２，９４８号明細層に記載された
ような溶解−遠心管において特に有用である。

さらにこの抗菌因子非活性化系は米国特許第４゜１６４
．４４９号明細書に記載の溶解−遠心管において有用で
ある。さらに本発明の抗菌因子非活性化系は、ｎ＋ｒ液
１ないし２７の採取用に設剖された標準ｌｌ’ｉ、　、
１全真９．管を有するだけの新生児用血液処理管に１史
川することができる３、この管は本発明の抗菌因子非活
性化系と所望ならばサポニンと以外の物質を沈まないで
あろう３、血液は管に注入して処理し直接培養基に散布
することができる。

以上の実施例は本発明の抗菌因子非活性化因子を血液試
料中の微生物病原体の分析用の溶解−遠心管に使用する
ときの有利な効果を示すものである。しかし本発明の抗
菌因子非活性化系は血液以外の試料においても、これを
採取して、あとで微生物病原体の存在全分析する場合微
生物の保護に有用である。例えば本発明の抗菌因子非活
性化系は、綿棒、尿、蜆、髄液その他の体液中に存在す
る微生物を輸送中に保護する。これらの敵も体液からの
抗菌物質と化学的抗菌物質（患者が抗生物質で治療され
ている場合）との両方を含んでいることは良く知られて
いる。尿試料については、抗生物ａの濃度が実際血清中
より大となることがある。尿中の抗生物質を中オ目する
ための改変された抗菌因子非活性化系の例を次の例１１
に示す。

例１１ 本例は抗菌因子非活性化床用合剤の、慣用の治療用抗生
物質を阻止し、尿中に存在する微生物数を２４時間まで
安定に保持する能力を試験するために行なつ／（，３ 一系列の管のそれぞれに次の乾燥混合物を装入した。

ポリアネトールスルホン酸すトリウム　０．０３グラム
チオグリコラート　　０．００５グラムＩＣＮ遊離塩基
ンスデイン０．１グラム炭酸水素ナトリウム　　　０．
１グラム。

後出第：３３−３３表に表記した種々の抗生物質をやは
り表に示した濃度で、前記抗菌因子非活性化圧用合剤を
含む′篩、および圧用合剤を含１ぬ同数の管にυ［１え
た。３次にずへての管に滅菌尿５ミリリットルを加えた
後激しく管をかき１ぜた。対照用管は尿のみ、捷／ζは
尿プラス前記抗菌因子弁活性化尿用合剤を含むものとし
た。対照用管には抗生物質を添加１−なかった３、第３
３−３８表に示す微生物はマクファーリン（ＩＶｆｃ　
Ｆａｒｌｉｎ　）　０．５に調節した後滅菌培養基によ
り１　二１００に希釈した。単一の微生′吻のアリコー
１−０．１　ミリリットルをそれぞれの尿剖有・肖にＵ
Ｏえ、イｕた混合物を激しくかき捷せた。

生成混合物を會ｔｒ各仙−からの１０マイクロリツトル
のアリコートを直ちにトリブチツク大豆寒天乎板上に接
種し滅菌展延器で拡げた。接捗した平板は使用微生物に
適当な環境および温度で一夜培養した。次に管を室温に
２４時間放置した。さらに１０マイクロリツトルのアリ
コートを第３３−３８表に示す時間毎に先に述べたと同
様にして平板散布した。すべての散布は四反復で行ない
、Ｓ因子は四反復散布の平均値として次の第３３−３８
表に示した。

第　　３３　　　表 大腸菌　２５９２２ ＊アンピリンン（２１０）　　　　　　　　　　　　、
９２　　．７５　　　、’７０アンピリ／ン（２１０）
　　　　　　　　　　　、０２　　．００１　　　０＊
カルベニ／リン（２００）　　　　１．１２　　　．９
０　　−−　　　．３１カルベニシリン（２００）　　
　　　、８３　　　．３７　　−−　　　．００３＊セ
フアマンドール（２００）　　　　　、８８　　　．４
５　　−−　　　．３１セフアマンドール（２００）　
　　　　、３７　　　．３３　　−−　　　．０（１５
＊セフオビソド（５００）　　　　　−−１，１６１，
６３１，６８セフオビソト（５００，）　　　　　　　
　　　　　、０２　　　　０　　　　０−　再構成に含
まれぬ時点 ＊　抗菌因子非活性化系搬用ば剤存在 ＊＊　括弾内の数字は尿中抗生物質の最終濃度（ｐ？／
７）をシｊ＼す ’ｒｘ’ｒ”ｃ−過多のため語数せノ゛第　　３４　　
　表 肺炎桿菌 ニリンｏ　マイシン（８０）　　　　　　　１．６３　
　２．２５　　’Ｌ’ＩＮ’ｌＵＴＮＴＣＴＮ’ｒ（、
：： ８ゲノタミノノ　（６０）　　　　　　　　　、９４　
　　．７３　　．２２ケンタミシン　（６０）　　　　
　　　　　　０　　　　０　　　０＊モキザラククム（
１０００）　　　　　　　３．４８　　３．５２　２．
３０七八′”リラククｌ、（１，０００）　　　　　　
　　、ＩＬ　　　　　（＋　　　　０＊ビベラ／リン　
（６００，）　　　　　　　　　、５２　　　．８４−
　　．４６ピペラ／リン　（６００）　　　　　　　　
１．０７　　　．１５　　．３４＊テトラザイクリン（
９０）　　　　　　　　、７５　　３．（１２，２３テ
］・ラザイクリン（９０）　　　　　　　、９０　　．
９７　　．２３−　再ｒｔＩ￥成に言まれぬ時点 ＊　抗菌因子非活性化系尿用合剤存在 錦括弧内の数字は尿中抗生物質の最終＃度（μ７７削を
）Ｊくす Ｔ　Ｎ　ｉ”　Ｃ＝過多のためΔ１数せず第　　３５　
　　表 緑膿菌 ｍ−再１ｆＯ成に含まれない時点 ＊　抗菌因子非活性化基原用合剤　存在＊＊　括弧内の
数字は尿中抗生物質の最終濃度（μη篇）を示す ＴＮＴＣ＝過多のため計数せず 第　　：３６　　　表 尋常変形菌 時点（時間） ＊＊ 一−ｐ〕構成に會丑れない時間 ＊　抗菌因子非活性化基原用合剤存在 ′Ｉ″Ｎ　’Ｉ”　Ｃ−過多のため４数せず第　　３７
　　　表 Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅなし　　　
　　　　　　　２　、２１　７　、９１　　　ＴＮＴＣ
−ミカノン　（２１０）　　　　　　　１．１２　　．
６２　　　．１１−ミカ／ノ　（２１０，）　　　　　
　　　　０　　　０　　　　　０−ンピノリン（２１０
）　　　　　　　、９９　　］、６ｉ８　　３．６０−
ンピンリン（２１０）　　　　　　　、１８　　．０７
　　　．０２ルベニ／リン　（７１０）、７６　　．７
６　　　．１４ルベユ／リン　（７１０）　　　　　、
２５　　．２３　　　．２０フアマノトール（２００）
　　　　　、８９　１．４４　　　１．１１ｔファマン
ト−ル（２００）　　　　１．１３　　．４８　　　．
４４＊　セフオビソド　　（５００）　　　　　、０７
　　．１３　　　．０４セフオビノト　　（５００）　
　　　　　、０３　　．００３　　　．０００５フオタ
ギ／ム　（２００）　　　　　　、９２　１．０４　　
　　．５９フオタキンム　（２００）　　　　　　、１
２　　．０２　　　　．０５＊　セフオキ７チン　（２
５０）　　　　　１．０１　１．１４　　　２．１セフ
オキノチン　（２５０）　　　　　、２５　　．５２　
　４．３４＊　セファロチン　　（２ｔＪＯ）、８Ｂ　
　１．０３　　　．４９−１＝７アロチ／　　　（２０
０）２，４１　４．３７　　　　’Ｌ’ＮＴＣ＊ク ク ＊　エ エリスロマイシン　（８０）　　　　１．２３　１．２
７　　　　ＴＮＴＣ−１与１１４成に含まれない時点 ＊　抗菌因子不活性化系床用合剤存在 ＊＊括弧内の数字は尿中抗生物質の最終議題（μ９Ａｎ
ｌ）を小す ’Ｉ”　Ｎ　ｉ’　Ｃ＝−過多のため馴致せず第　　３
８　　　表 黄色ブドウ球菌 ＊ ＡＤＳ尿 クロラムノ１＝コール（１８０）　　１．００　−−　
　．４Ｊ、ｚｂ　　　、＋Ｊ８（ｒ−１Ｊ：ｆ黄成に含
まれない時点 ＊　抗菌因子非活性糸尿用合剤存在 ′１゛Ｎ′ｒＣ＝過多）ｙｔ　メｉｆ数せず第：３３−
３８表は、抗菌因子非活性化搬用合剤が尿中の１１′ｉ
用の治９ｐ　ＪｆＪ抗菌剤すなわち抗生′吻′ｎを＃′
断し、微生物のノＪウントヲ抗菌物質の不在において比
較的一定に保持する能力と明瞭に示している。

抗生物質を除いた通常の尿においては、普通の病原性微
生物（大腸菌、肺炎桿菌、緑膿菌、尋常変形菌および、
ｌ（、ｃｌｏａｃａｅ　）が室温で２４時間にわたって
生長することは留意すべきである。従ってもし尿試料を
直ちに分析しないと偽の陽の結果を生じ得る１、抗生物
質が平均尿中濃度（血清中濃度の１０倍）存在する場合
、敏感な病原性微生′吻は容易に死滅する。この結果実
験者は、実際に（＃、１：採取の時点で試料中に相当数
（ｌＯ５）の病原体が含すれているにかＸわらずそれだ
けの病原性微生物を含捷ないと結論することがあり得る
。換言すれば、もし採取と実験室処理との間に２時間丑
たはそれ以上が経過すると、得られたカウントは１０　
　という低い饋になり、大した数でないと考えられるこ
とがある。

尿抗菌因子非活性化系により次の二つの重要な改善が達
成される。すなわち １、これにより抗生物質の致死作用を少くとも６時間、
多くの鳴合には２４時間１で有効に遮断することができ
′−る。

２、時間ゼロの点で存在する微生物の数が抗生物質のａ
在廿たは不在において少くとも６時間一定に保たれる３
゜ 結論として、この尿抗菌因子非活性化系の他に類をみな
い特徴により尿試料を処理する迄２４時間も、試料の本
来の微生物状態に有害な影響を与えることなく保持する
ことができる。冷凍は不必四であり、系は抗菌物質の存
在においても不在においても有効である。

以上の例かられかる通り、本発明の範囲内に属する抗菌
因子非活性化系には多くの用途がある。。

抗菌因子非活性化系が微生物のカラン）’（ｃ−一定に
保持する能力により、これが無けれは他のより迅速に分
裂する微生物の過度の成長によって隠蔽されたてあろう
車°葭な微生′吻４市の演出がｉＪＪ目＠となる。

例１２ 一連の肯の一七れぞれに、次の乾燥混合物を装入した ポリアネト−ルスルホ／酸ナトリウム　０．０３グラム
、チオグリコラ−１０，ｔＪＯ５グラム ＩＣＮ遊離塩遊離塩テンステム１グラム炭酸水素ナトリ
ウム　　０，１グラム 次に上記の抗菌因子非活性化畜尿用合剤を含有する容管
に後掲第３８表に示す種々の重世襲の塩化ナトリウムを
加えた。次に滅菌尿のアリコート５ミリリットルを、前
記抗菌因子非活性化畜尿用合剤を含有するすべての管お
よび搬用合剤を含有しない同数の管に加えた。Ｅｎｔｅ
ｒｏｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅＡＴＣＣ［３４４−
２ｅ含有する培養基をマクファーリン帆５にＩＡＩ　製
しく培養基ミリリットル当り約５×１０８微生物を示す
）、次で滅菌培養基で１１００に希釈された微生物のア
リコートＯ，ｔ　ミリリットルを尿を含む試験管全部に
加え、得られた混合物を激しくかき捷せた。混合物のア
リコート１０マイクロリツトルを例１と同様にして寒天
−１Ｖ板に散布した。残りの混ａ物を２４時間室温に放
置した後、第二のアリコート１０マイクロリツトルをレ
リ１と同様にして散布した。散布はすべて二反伽とし、
生存指数（Ｓ因子）をそれぞれについて前の例に記した
と同様にして計算した。各時点に対する平均Ｓ因須ヲ求
めて次の第３９表に示す。

第　　３９　　　表 ２、　＋　　−１，００１，７２ ３１１，００１，２７ ４＋　　２１．００　．８０ ５　　＋　　４１．００１．０３ ６　　＋　　８１．０００．６９ ＊　Ａｌａｓ抗菌因子非活子弁系尿用基原＊＊　（％）
塩化ナトリウム電歇チ ＊＊＊　ＴＮＴ、Ｃ過多（７）　ｆｃめｉｔ　ｉＦ＆せ
ず抗菌因子非活性化畜尿用合剤が存在しない場合口、（
第３９表試料１参照）、尿中に存在する微生物ハ速かに
増殖し、このため臨床医は尿ミリリノ］・ル当りの微生
物の数の正確なカラントラ得ることができなくなる５、 第：３９にの結果は、抗菌因子非活性化基原用げ剤が微
生物の増殖速度を減少させ、食塩の如き塩の添加が、尿
中のバクテリアのカウントを２４時間にわたって一定に
する尿合剤の効果を増大させることを示している。第３
９表に示す結果から求めた塩の好ましい範囲は約２．５
ないし約４．０重敗係である。

前記の、塩の量を変化させての実験の結果から、抗菌因
子非活性化畜尿用合剤に約３重ｉ％の塩化ナトリウムを
添加することにより尿中のＥｎｔｅｒ。

ｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅ　　の過度の成長が２４
時間にわたって防止されるとの結論を得た。この結論を
実証するため、前記のように調製した抗菌因子非活性化
畜尿用合剤を一連の管に加えた。第二の系列の管は同一
合剤プラス塩化すトリウム帆１５グラム（３重置チに相
当）を加えて調製した。第三の系列の１は合剤なしとし
た。次に、合剤不含のものも含めた容管に滅菌尿のアリ
コート５ミリリツトルを加えた。後出第４０表に示す４
菌株のＥｎｔｅｒ。

ｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅ　　を別に培養しマクフ
ァーリン０．５に調整した。次に各菌株を滅菌培養基に
１：１００に希釈しそれぞれの帆１ミリリットルのアリ
コ−１・を第４０表に示すように各尿管に加えた３、激
しくかき捷せた後裔りから１０マイクロリツトルのアリ
コ−１・を例［１と同様にして寒天平板に散布）７だ３
、その後混ａ物を室温に放置し、第４０表に示ノ一時間
毎にさらに１０ミリリツトルのアリコ−１・を例１と同
様にして散布した。第４０表に示１″各１１．１．点シ
こおりる結果は四反復故布の゛ヒ均による生存指数（Ｓ
因子少である。

次の第４０表に小ず結果から、抗菌因子非活性化系合剤
に塩化す］・リウム約３重量％ｋ　Ｉ’＋’ｉ加するこ
とにより、Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ　ｃｌｏａｃａｅ
　　の４菌株すべてに対しコロニー形成の安定化が増進
されることが確認される５、 例１：３ 本例りま、塩化すトリウム３重敗％を含む抗菌因子非活
性化系圧用合剤の、後掲第４１〜４３表に示す各ｆΦ轍
生物のコロニーカウントを第４１〜４３表に示す抗生物
質の存在および不在において２４時間ＰＣわたり安定に
保つｈ）電力を試験するために行なった。

一連の滅菌した管に次の乾燥混合物を装入した：ボリア
ネト〜ルスルポン酸ナトリウム　０．０３グラムチオク
リコラ−１０，００５グラム ＩＣＮ遊離塩基／ステイン　　　　０．１　　グラム炭
酸水素すトリウム　　　　　　　０．１　　グラム塩化
すトリウム　　　　　　　　　０，１５　　グラム。

次の第４１〜４３表に示す神々の抗生物質を同じく第４
１〜４３表にノ」・ず濃１隻で、ｒｊｉＪ記抗菌因ｒ非
活性化尿川ば圧用含ｔｒ官、およびこれを言まぬ同致の
満“に添加し５た。次に全部の管に滅菌尿５ミリリット
ルを加えた後αりしく温容した。対照用ばは尿のみケ、
捷ｌこな」、尿プラス前記抗−因子弁活性化用尿用今ｊ
’ｉ！Ｉ　ｋ　沈有するものとした。対照用Ｕには抗生
物質は添加しなかった。第４１−４．３表に示す微生物
はマクファーリン帆５に調製した後、無菌培養基により
１　：　１００に希釈した。単一の微生物の０．１ミリ
リツトルのアリコートを尿を含むそれぞれの管に加え、
得た混合物を激しくかきまぜた。

生成混合物を含有する容管からの１０マイクロリツトル
のアリコートを例１１に記したようにして直ちに平板散
布した。次に管は室温に２４時間放置した。

第４１〜４３衣に示す時点で例１１に記したようにして
さらに１０マイクロリツトルのアリコートを散布した。

散布はすべて四反復で行ない、第４１−４３表に示した
Ｓ因子は四反復散布の平均を示す。

第４１−４３　Ｔｈの結果は、塩含有抗菌因子非活性化
畜尿用合剤が、尋常変形菌、肺炎連鎖球菌および化膿連
鎖球菌のコロニーカウントを大部分のｌ：Ｉ’ｌ；生物
質の存在においても不在においても比較的安定に保つこ
とができることを示」″。

第４１表 なし　　　　　　　　　１，０６　１．０７　　Ｌ３８
　３．１５　１．１２　’Ｌ”ＮＴＣアンビノリ／　　
（２１０μｇ）　　　、７７　　．１９　１．１９　　
．０４　　−８７　．００４セフスキソチン（２５０μ
ｇ）　　　、７３　　．００２　　．７９　．０００８
　　．２５　　０ガツトす／ン（１０００／”ｇ）　　
１．４７　　．５６　　１．２８　１．３２　　１．１
９　　ＴＮＴＣメズロ／リノ　（５００μｇ）　　２．
１４　　．３１　　１．５１　　．５（Ｊ　　　ｌ↓　
　〇−丙ｆｔ＋５成に含丑れぬ時点 ＊　抗菌因ｒ−非活性化基原用合剤存在＊＊　括弧内の
数字は尿ミＩＪ　ＩＪノトル当り抗生物質最終濃度を示
す １’　Ｎ　ｉ’　Ｃ−過多のため計数せず第　　　４２
　　表 なし　　　　　　　１．１９　．８２　　．９５　　．
７３　　１．２７　　４．８０アンピシリン　　　１．
（ｉｆＪ　　　、５４　　１．３４　　．４３　　１．
０８　　　　、（＋７（２１０μ２） セファマンドール　　、４２　１．０４　　．７！’）
　　１．１２　　１．：＋６　　　．２８（２００μｍ
） セフオキシチン　　１．、Ｕ８　　（Ｊ、９８　　１．
１１　　．９４　　１．０１　　　　．２０（２５０μ
７） セファロチン　　　１．０４　　．５３　　１．４２　
　．５３　　２．５４　　　　．２１（２００μ２） （８０μ９） −再構成に含まれぬ時点 ＊ｖＬ菌因子非子弁化系尿基原剤存在 ＊＊括弧内の数字は尿ミリリットル当り最終微生物濃度
を示すＴ　Ｎ　Ｔ　Ｃ−過多のため計数せず 第４３表 （２１０）ｚＪ （２ｆＪ　Ｏμ２） −ノＩ（（ｉ′：′、成に含まれぬ＋＋ｇ７点：七　抗
菌囚ｒ非１店１４化系尿用合剤存在＊＊括弧内の数字は
尿ミリリットル当り抗生物質最終濃度を小才 ’Ｉ”ＮＴＣ＝　ｌ（→多のため４数せず例　　１４ 本例は、後出第４４表に示す各種抗生物質の存在におけ
る抗菌因子非活性化基原用合剤中のポリアネトールスル
ホン酸ナトリウム（ｓｐｓ　）の有効濃度範囲を確定す
るために実施した。

一連の滅菌管の中に次の乾燥混合物を装入した。

チオグリコラ−）　　　　０．００５グラムＩＣＮ遊離
塩基ンステイン　０．１　　　グラム炭酸水素ナトリウ
ム　　０．１　　グラム塩化ナトリウム　　　　０．１
５　　グラム。

第４４表に重世襲で示す種りの量のＳＰＳを、前記抗菌
因子非活性化因子非活性化基原用合剤を含有する管およ
び対照用管に加えた。次に第４４表に示す各種の抗生物
質を前記抗菌因子弁活生化尿用合剤を含む管の半分に加
えた。次にすべての管に滅菌尿の５ミリリットルのアリ
コートを加えた。１尿のみヲハみ抗生物質を含１ぬ対照
用管ができ、その半分は前記抗菌因子弁活化基原用合剤
プラス第４４表に示す種々の量の５ｐｓｉ含有する。黄
色ブドウ球菌ＡＰＣＣす２５９２３を培養、調製し、そ
のアリコート全例１１同様にしてすべての管に加えた。

すべての管を例１１と同様にして次の第４４表に示す時
点で平板散布した。

第４４表の結果は、抗菌因子非活性化系床用合剤中の５
ｌ）Ｓの最適範囲が約０．６ｆｉいし約２．０重世襲で
あることを示す。

本発明をその好ま１〜い態様について説明したが、明ａ
書の記載から当業者にとシ種々の変法がすでに明らかで
あシ、本発明は特許請求の範囲内にあるか５る変法をも
包含するものであることを理解すべきである。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の実施に使用し借る遠心分離装置の断面
図であり、 第２図−第９図は本発明全使用し得る微生物病原体検出
法の工程を示し、 第１０図は仕分圧、物試料の採取および輸送用の装置か
ら成る本発明の別の態様を図示するものである。 ＦＩ６．８

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）　　試料体液を患者から採取し次に微生物病原体
   を含有するその少くとも一部を前記微生物病原体を生長
   させ得る培養基上に希釈により配分することから成る試
   料体液中の微生物病原体の検出方法において、前記試料
   を、前記試料の患者からの採取の後そして前記培養基へ
   の配分の前に前記体ｌａ中に住在する抗１ａ因子の非活
   性化に有効な抗菌因子非活性化系と混合することを特徴
   とする前記微生物病原体の検出方法。 １２１　０＋Ｊ配体液として血液、骨髄、髄液、痰、胸
   膜液、体分泌物および尿から選ばれるものを使う、前項
   （１）に記載の方法。 （３１前記体液として血液を使う、ＭＵ項山に記載の方
   法１、 （４）　　前記体液として尿を使う、前項（１）に記載
   の方法。 （５１前記抗菌因子非活性化系がアミノグリコンド遮断
   剤を含有する前項（１）に記載の方法。 （６）　　前記抗菌因子非活性化系がペニシリンおよび
   セファロスポリン非活性化剤を含有する前項（１）に記
   載の方法。 （７）　　前記抗菌因子非活性化系がザルファ化合物非
   活性化剤を含有して成る前項（１）に記載の方法。 （８）　　前記抗菌因子非活性化系が抗生特異性酵素を
   含有して成る前項（１）に記載の方法。 （９）　　試料体ｇ！Ｌヲ患者から採取し次に微生物病
   原体を含有するその少くとも一部を前記微生物病原体を
   生長させ得る培養基上に希釈により配分することから成
   る試料体液中の微生物病原体の検出方法において、前記
   試料を、前記試料の患者からの採取の後そして前記培養
   基への配分の前に、前記体液中に存在する抗菌因子の非
   活性化に有効でありかつ前記体液に存在する前記微生物
   病原体の数の安定化に有効である抗菌因子非活性化系と
   混合することを特徴とする、前記微生物病原体の検出方
   法。 （１０，）　　ｒｉｉｌ記体液として血液、骨髄、髄液
   、痰、胸膜液、仕分泌物および尿から選ばれるものを使
   う、Ａｉ１項（テ〕）に記載の方法１、 （１１）前記体液として血液を使う、前ｊＪ４　（９］
   に記載の方法。 （１２）前記体液と１〜て尿を使う、前項（９）に記載
   の方法３、 （１３）前記抗菌因子非活性化系がアミノグリコ７ド遮
   断剤を含有する前項（９）に記載の方法い（１４〕前記
   抗薗因子非活性化系がベニ／リンおよびセファロスポリ
   ン非活性化剤を含有する前項（９）に記載の方法４゜ （１５）前記抗菌因子非活性化剤がサルファ化合物非活
   性化剤を含有して成る前項（９）に記載の方法。 （１６）前記抗菌因子非活性化系が抗生物質特異性酵素
   を含有して成る前項（９）に記載の方法。 （］７）試料体液ケ、密閉された無菌遠心分離帯域内に
   置きこれを遠心分離に付して微生物病原体を濃縮し、次
   に前記濃縮された微生物病原体をＡｉＪ記遠心分離帯域
   から分離しその微生物病原体を分析する、微生物病原体
   と少くとも一つの抗菌因子とを含有する疑いのある試料
   体液中の微生物病原体の検出方法において、 前記試料体液をＭ紀密閉された無菌遠心分離帯域内に置
   くときに、前密閉された無菌遠心分離帯域内において前
   記微生物病原体に対して致死的でない抗菌因子非活性化
   剤を非活性化に有効な搬、前記試料と完全に混合するよ
   うに試料に混和することにより、前記試料が前記密閉遠
   心分離帯域内にある間および前記分析の前に前記抗菌因
   子が前記微生物病原体を攻撃するのを防止することを特
   徴とする、前記微生物病原体の検出方法。 （１８）前記体液として血液、骨髄、髄液、痰、胸膜液
   、体分泌物および尿から選ばれるものを使う、前項（１
   ７）に記載の方法。 （１９）前記体液として血液を使う、前項（１７）に記
   載の方法。 （２０）両虎抗菌因子非活性化系がアミノグリコンド遮
   断剤を含有する前項（１７）に記載の方法。 （２］）　ＭｉＪ記抗菌因子非活性化系がベニ／リンお
   よ０・セファロスポリン非活性化剤を含有する前項（１
   ７）に記載の方法。 （２２）前記抗菌因子非活性化剤がサルファ化合物非活
   性化剤を含有して成る前項０７）に記載の方法。 （２３）前記抗菌因子非活性化剤がポリアネトールスル
   ポン取す）　ＩＪウムを前記処理液および前記試料液の
   約帆１ｆ！、いし約１．０屯量チ、システィンを０１Ｊ
   記試料液および前記処理液の約０．０５ないし約２．５
   屯量チ、チオグリコラートを前記処理液および前記試料
   液の約帆０５ないし約１．６ｉ１ｆｍ％含有する前項（
   １７）に記載の方法。 （２４）さらに、パラアミノ安息香酸を前記処理液おま
   ひ前記試料液の１ミリリットル当り約５マイクログラム
   ないし約５００マイクログラム含有して成る前項（２３
   ）に記載の方法。 （２５）微生物病原体と少くとも一つの抗生剤を含む抗
   菌因子とを含有する疑いのある血液試料中の微生物病原
   体の検出方法において、 （ａ）　　１ｍ１ｌ記血液試料を、溶解剤と、ＡｉＪ記
   抗生剤に対する非活性化剤の有効量を含む抗菌因子非活
   性化系とを含有する水性血液処理媒体と接触させて密閉
   された無菌帯域内に置き、 （ｂｌ　　前記血液試料を前記血液処理媒体と混合して
   前記血液処理媒体によシ前記血液試料を処理し、（ｃ）
   　　前記密閉された無菌帯域を遠心分離に付することに
   よって前記微生物病原体を濃縮し、そして （ｄｉ　　前記濃縮された微生物病原体を前記密閉され
   た無餉帯域から分離してこれを同定分析に付する ことを特徴とする前記・微生物病原体の検出方法。 （２６）前記同定が、前記濃縮された微生物病原体をこ
   れに対する培養基上に少くとも約１：６０の比に希釈し
   、次で前記微生物病原体を培養することから成る、前項
   （２５）に記載の方法。 （２７）前記体液として血液、骨髄、髄液、痰、胸膜液
   、体分泌物、および尿から選ばれるものを便う、Ｍ項（
   ２５）に記載の方法。 （２８）前記体液として血液を使う、前項（２７）に記
   載の方法、。 （２９）前記抗菌因子非活性化系がアミノグリコン１−
   遮断剤を含有する前項（２５）に記載の方法。 （３０）前記アミノグリコシド遮断剤としてポリアネト
   ールスルホン酸ナトリウムおよびアミロ硫酸すトリウム
   から選ばれる化合物を使う、前項（２９）に記載の方法
   。 （３１）前記アミノグリコシド遮断剤の歇が前記試料液
   と前記処理液との帆ｌないし１．０重駄係である前項（
   ３０）に記載の方法。 （３２）前記アミノグリコシド遮断剤の畦が前記試料液
   と前記処理液との約帆３ないし約０．６重量％である前
   項（２５）に記載の方法。 （３３）前記抗菌因子非活性化系がペニシランおよびセ
   ファロスポリン非活性化剤を含有する前項（２５）に記
   載の方法。 （３４）前記ペニシランおよびセファロスポリン非活性
   化剤としてチオグリコラート、グルタチオン、Ｎ−アセ
   チル／スティンおよびシスティンから成る群から選はれ
   るものを使う、前項（ｊ３）に記載の方法。 （３５）前記ペニシリンおよびセファロスポリン非活性
   化剤として１１Ｊ記試料液と前記処理液との帆５ないし
   ６重量係存在するチオグリコラートを使う、前項（３り
   に記載の方法。 （３６）　前記ペニシランおよびセファロスポリン非活
   性化剤として前記試料液と前記処理液との約０．０５な
   いし約２．５重量％存在する／スティンを使う、前項（
   ３５）に記載の方法。 （３７）　１ｊｉｌ記ベニ７リンおよびセファロスポリ
   ン非活性化剤として、前記処理液と前記試料液との０．
   ０５ないし約２．５重量％のシスティンを含み前記チオ
   グリコラートが前記処理液と前記試料液との約帆０５な
   いし約１．６重電チ存在する、７ステイノとチオグリコ
   ラートとの混合物を使う、前項（３４）に記載の方法。 （３８）前記抗菌因子非活性化剤がサルファ化合物非活
   性化剤を含有して成る前項（３５）に記載の方法。 （３９）前記サルファ化合物非活性化剤として前記処理
   液と前記試料液との１ミリリツレレ当り約５マイクロダ
   ラムないし約５００マイクログラムの量のバラアミノ安
   息香酸を使う、前項（３８）に記載の方法。 （４０）前記抗菌因子非活性化剤として、ポリアネトー
   ルスルホン酸ナトリウムを前記処理液およびＡｉＪ記試
   料液の約０．１ないし約１．０重量％、システィンを前
   記試料液と前記処理液との約０．０５ないし約２．５重
   −鼠係、およびチオグリコラートを前記処理液と前記試
   料ｄりとの約０．０５ないし約１．６　　重量％含有す
   る前項（２５）に記載の方法。、（４１）さらに、パラ
   アミノ安息香酸を前記処理液と前記試料液との１ミリリ
   ットル当り約５マイクログラムないし約５００マイクロ
   グラム含有してノ戊る前項（４０）に記載の方法。 （４２）微生物病原体と、少くとも一つの抗生剤を含む
   抗菌因子とを含有する疑いのある血液試料中の微生物病
   原体検出方法において、 （ａ）　　ｉ？ｉｌ記血液試料を、溶解剤と、前記微生
   物病原体に対して致死的でない前記抗生剤に対する非活
   性化剤のイイ効景を含有する抗菌因子非活性化糸とを含
   有する水性血液処理媒体と接触させて密閉された無菌帯
   域内に置き、 （ｂ）　　前記血液試料を前記血液処理媒体と混合して
   前記血液処理媒体により前記血液試料を処理し、ｆｃｌ
   　　ＡｉＪ記密閉された無菌帯域を遠心分離にイ」する
   ことによって前記微生物病原体を濃縮し、（ｄｌ　　前
   記濃縮された微生物病原体を前記密閉された無菌帯域か
   ら分離し、そして （ｅｌ　　前記濃縮された微生物病原体をこれに対する
   培養基上に約１：６０よシ大きな比に希釈し、次で前記
   微生物病原体を培養する ことを特徴とする前記微生物病原体の検出方法。 （４３）前記の比が少くとも約１　：　２００である前
   項（４２）に記載の方法。 （４４）前記抗菌因子非活性化系がアミノグリコンド遮
   断剤を含有する前項（４３）に記載の方法。、（４５）
   前記アミノグリコシド遮断剤としてポリアネトールスル
   ホン酸ナトリウムおよびアミロ硫酸ナトリウムから選ば
   れる化合物を使う、前項（４４）に記載の方法。 （，４６）　　ｎｉｌ記アミノダリコンド遮断剤の量が
   前記試ｆ−Ｆ液と前記処理液との帆１ないし帆ＯＭＫ％
   である１）１１項（４５）に記載の方法。 （４７）　　前記アミノグリコシド遮断剤の量が前記試
   別液とＡｉｌ記処理液との約０．３ないし約ｉ、ｏｉｒ
   ｒ、量係である前項（４６）に記載の方法。 （４８）ｎｉｌ記抗菌因子非活性化系がベニ／リンおよ
   びセファロスポリン非活性化剤を含有する前項（４３）
   に記載の方法。 （４９）　　前記抗菌因子非活性化系がサルファ化合物
   非活性化剤全含有するｎｉｌ項（４３）に記載の方法４
   、（５０）　　ｎｉＪ　ｎｒ２抗菌因子非活性化剤とし
   てポリアネトールスルホン酸ナトリウムｋ　Ａ＋Ｊ記試
   料液と前記処理液との約０．１ないし約１．０１欺チン
   スティンを前記試料液と前記処理液との約帆０５ないし
   約２．５］Ｅ硅係、およびチオグリコラートを前記処理
   ７（父ど１１１５記試料１俟との約帆０５ないし約１−
   ６＊＊％含する前」貢（４：りに記載の方法５） （５１）さらにバラアミノ安息香酸をＩｉＪ記処ＪＭ１
   液と前記試釈、液との１ミリリットル当り約５マイクロ
   グラス・ないし約５００マイクログラム含有して成る前
   項（５０）に記載の方法。 （５２）微生物病原体と少くとも一つの抗菌因子とを含
   有する疑いのある尿試料内の微生物病原体検出方法にお
   いて、 （ａ）前記試料ｉｔたはその一部を前記抗菌因子に対す
   る非活性化剤を有効量含有する抗菌因子非活性化系と接
   触させて密閉された無菌帯域内に置き、（ｂ）前記尿試
   料を前記抗菌因子非活性化系と混合し、そして、 （ｃ）前記混合物を同定分析にイ」することを特徴とす
   る前記微生物病原体の検出方法。 （５：３）　　ＡｉＪ記抗菌因子非活性化系がアミノグ
   リコシド遮断剤を含有する前項（５２）に記載の方法。 （５４）　　ＡｉＪ記アミノグリコシド遮断剤としてポ
   リアネト−ルスルホン酸ナトリウムおよびアミロ硫酸酸
   すｌ−ＩＪウムから選ばれる化合物を使う、前項（５３
   ）に記載の方法。 （５５，）　　Ａｉｌ記アミノグリコンド連断剤の量が
   試料液の約０．６ないし約２．０重量％である前項（５
   ４）に４．己・１、（の方／去７、 （５６）　　ｎｉｌ、’ｉｃ：抗菌因抗菌因子活性次系
   シリンおよびセファロスポリン非活性化剤を含有する前
   項（５２）にｄ己、Ｉｉ、１．の方法１、 （５７）　　前Ｍｅペニシリンおよびセファロスポリン
   非活性化剤として／スティンおよびチオグリコラートを
   使う、６１１項（５６）に記載の方法。 （５８）　＋ｉｉＪ　ｇ己抗菌囚了−非活性化系が、ポ
   リアネトールスルホン酸ナトリウムを前記試料液の約帆
   ６ない１〜約２　、　ＯＭ量係、システィンを前記試別
   液の約０．５ないし約２．５重檄チ、チオグリコラート
   ｉ前記試料数の約帆１重量％、炭酸水素ナトリウムを試
   料液の約２．０４４ｉｊｉ４％、および前記試料液を昔
   有する前」ｙｉ　（５２）に記・１あの方法、。 （５９）前記抗菌因子非活性化系が塩を含有する１）１
   ５項（５８）に記載の方法。 （（ｉ　０　）　　１１！Ｊ記塩として塩化ナトリウノ
   、を使う、前項（５９）に記載の方法Ｃ。 （６１）　　ｒａｉｌ記塩化ナトリウムの量が？’＋Ｉ
   記試料准の約２．５ないし約４．０小惜係であるＫ１項
   （６０）にｈ己４父の方法。 （６２）（ａｔ注入可能なふたによって適当に閉じられ
   その内部は、排気されて大気圧より低圧に保たれ、その
   中に所定重量の試料後を吸引し得る空間と、それに隣接
   して、前記試料液から懸濁状態から抜は出てくる微生物
   病原体の実質的に全部を、後記遠心分離容器内に存在す
   る隙間への損失なしに集めることのできる高密度で微生
   物病原体に無毒な水と混合しない疎水性液状クツノヨン
   剤とを有し、ＡｉＪ記液状クツりヨン剤の密度は試料液
   体とそれに対する処理液との混合物によって支えられぬ
   だけの十分の密度である密閉された遠心分離容器と、（
   ｂｌ溶解剤と微生物病原体に対し致死的でカい抗菌因子
   非活性化剤とを含有してなる処理液とから成る、試料液
   からの微生物病原体の濃縮に使用する装置。 （６３）前記抗菌因子非活性化系がアミノグリコンド遮
   断剤を含有する前項（６２）に記載の装置。 （６４）前記アミノグリコシド遮断剤としてポリアネト
   ールスルホン酸ナトリウムおよびアミロ硫酸すトリウム
   から選はれる化合物を使う、前項（６３）に記載の装置
   １、 （６５）前記アミノグリコント趣断剤の喰が前記試料液
   とＡｉｌ記処理液との０．１ないし１．０重着係である
   前項（ｆ］４　）に６己・１表の装置、。 （６６）　　ｒｉｉｌ記アミノグリコシド辿断剤の）ｊ
   ｔが前ｉ己試料液とＡｉＪ記処理液との約帆３ないし約
   ０．６重歇係であるＡｉＪ項（６５）に記載の装置、。 （６７）前記抗菌因子非活性化系がペニシリンおＪ：ひ
   セファロスポリン非活性化剤を含有する１１１項（６２
   ）に記載の装置３゜ （６８）　　Ａｉｌ記ベニ／リンおよびセファロスポリ
   ン非活性化剤としてチオグリコラ−１・、グルタチオノ
   、Ｎ　−−ｒセチルシスティンおよびシスティンから成
   る群から選ばれるものを使う、前項（６７）に記載の装
   置１、 （６９）　　１１ｉＪ６ｅペニンリンおよびセファロス
   ポリン非活性化剤としてｉｉｌ記試料液と前記処理液と
   の０．５ないし６重敗係の中のチオグリコラートを使う
   、１ｉｉ１項Ｃ，６Ｂ）に記載の装置。 （７０）前記ペニシリンおよびセファロスポリン非活性
   化剤として前記試料液と前記処理液との約０．０５ない
   し約２．５　！［％の量のシスティンを使う、前項（６
   ９）に記載の装置。 （７１）前記ペニシリンおよびセファロスポリン非活性
   化剤として、システィンを前記試料液と前記処理液との
   帆０５ないし約２．５重量％、およびチオグリコラート
   を前記処理液とｉＶＪ記試料液との約０．１ナイし約１
   ％含有する、システィンとチオグリコラ−１・との混合
   物を使う、前項（６８）に記載の装置。 （７２）前記抗菌因子非活性化剤がサルファ化合物非活
   性化剤を含有して成る前項（６２）に記載の装置。 （７３）前記ザルファ化合物非活性剤として前記処理液
   と前記試料液との１ミリリットル当り約５マイクログラ
   ムないし約５００マイクログラムの量のパラアミノ安息
   香酸を使う、前項（７２）に記載の装置。 （７４）前記抗菌因子非活性化剤としてポリアネト−ル
   スルボッ酸ナトリウムを前記処理液と前記試料液との約
   帆１ないし約１．０重量％、システィンｋ　ｉ１１記試
   料液と前記処理液との約０．（１５ないし約２、Ｓ−＊
   ＝係、およびチオグリコラートを前記処理液との約帆１
   ないし約１重−曖チ含有する前項（６２）に記載の装面
   ′７、 （７５）さらにバラアミノ安息香酸を前記処理液と前記
   試料液との１ミリリットル当り約５マイクログラムない
   し約５００マイクログラム含有して成る前項（７４）に
   記載の装置。 （７６）微生物病原体に対して致死的でない抗菌因子非
   活性化系を含有して成る試料処理材料を含、イー１する
   容器を含有して成る、試料液からの微生物病原体の収集
   および処理に使用する装置３゜（７７）前記抗菌因子非
   活性化系がアミノグリコ／１・遮断剤を含有する前項（
   ７６）に記載の装置。 （７８）前記抗菌因子非活性化系がペニシリンおよびセ
   ファロスポリン非活性化剤を含有する前項（７６）に記
   載の装置。、 （７９）　　ｒｊｉｌ記抗菌因子非活性化系がサルファ
   化合物非活性化剤を含有して成る前項（７６）に記載の
   装置。 （８０）前記容器がその開放端に取外し得るふたを有し
   、内部に前記抗菌因子非活性化系を固体粒子として含有
   する尿試料受入用開放端管である前項（７６）〜（７９
   ）のいずれかに記載の装置。 （８１）（ａ）第一の密閉端と第二の開放端とを有する
   細長い可撓性管； （ｂ）前記第一端に対する取外し得るふた。 （ｃ）管内部に前記密閉端に隣接して位置し、その内部
   に液状培養基を含有する圧砕し得るアンプル；（ｄｌ前
   記アンプルに隣接して前記アンプルと前記一般開放端と
   の間に位置し、前記抗菌因子非活性化剤をその内部に分
   布した固形粒子として含有する吸収材料体。 （ｅｌその一端に、前記吸収倒斜体に隣接して位置し、
   そこから前記開放端に延びているハンドルに接続された
   吸収（着）剤を含有して成る綿棒力）ら成る前項（７６
   ）〜（７９）のいずれかに記載の装置。 （８２）前記第一の開放端に延ひている前記綿棒の前記
   ・・ントルが前記取り（し得るふたに接続されている前
   項（８１）の装置。 （８３）　ｉａ）取入可能力ふたを有する溶解−遠心管
   を用意し、 （ｌ〕）前記管内に沸点ｆｉｉｉ１囲が約９３゛Ｃない
   し約２１６°Ｃであるフッ化炭化水系から成る液状クツ
   ／ヨ７剤を置き、 ｆｃｌ前記管内に固体粒子状の抗菌因子非活性化系を置
   き、 （ｄｉ前記管をＡｉｌ記取人勇能なふたで閉じ、（ｅ）
   前記管内を真空とし、 （ｆ）前記管を９３℃ないし２１６℃の範囲の温度に加
   熱して管内部を滅菌するに十分な時間この温度を保ち、 （ｇ）　ｎｉｌ記臂を室温に冷却する ことから成る、溶解−遠心装置の組立おまひ滅菌方法１
   、 （”４．）　　ｌｌ’ｌ記抗生因子非活性化系がアミノ
   グリコント遮断剤を含弔する前項（８３）に記載の方法
   。 （８５）前記抗菌内子非活性化系がペニシリンおよびセ
   ファロスポリン非活性化剤を含有する前項（８３）に記
   載の方法。 （８６）前記抗菌因子非活性化剤がザルノア化合物非活
   性化剤を含有１〜で成る前項（８３）に記載の方法。 （８７）　　Ｍ記管を１０６℃ないし１３８℃の範囲の
   温度に加熱し、この加熱を前記管の滅菌に十分な時間桁
   なう前項（８３）〜（８６）のいずれかに記載の方法。 （８８）前記管を温度約１２１℃に約３０分間加熱する
   前項（８７）に記載の方法。