JPS588083A - プリン誘導体の精製方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はプリン誘導体を再結晶法によって精製するに当
り熱溶解液を所定の温度まで静置冷却し。

次いで急激に刺激を与え急速に晶析させることを特徴と
するプリン誘導体の精製方法に関する。

プリン誘導体は一般に醗酵法で得られた核酸類を加水分
解するか、諸々の製造法で合成するがして得られる。近
年合理的な製造法が開発され、現在市販されているプリ
ン誘導体の大部分は合成法によって製造されたものであ
る。ところがプリン誘導体を合成法で得ようとした場合
、精製が非常従来プリン誘導体は一般的に水から再結晶
することによって精製されているが、置換基の１１１１
類によってはアルコール等からの再結晶法、或いは一旦
塩にして檀製侵中和して遊離塩基を得る方法郷も知られ
ている。また特殊な例としては昇華による方法、＊イオ
ン交換樹脂カラムによる方法等が文献に記載されている
・ 合成法によって得られたプリン誘導体を水から再結晶す
る場合、不純物の除去及び脱色の目的で一役的に活性炭
が用いられるが、その量は非常に多くを必要とし、場合
によっては被精製物と同量かそれ以上を使わなくてはな
らない。従って精製ロスが非常に多く、製造上全く不利
である。

筐た反応生成物は通常不純物として螢光物質を含んでい
るが、この除去がまた非常にやっかいである。

本発明者等はかかる背景の下でまずアデニンの精製法に
ついて鋭意検討して米た０特に螢光物質除去法について
種々検討した結果本発明に到達した。

本発明の骨子社アデニンの晶析挙動をたくみに利用する
ことにある。すなわち水から再結晶する場合アデニンは
一般的な有機化合物や無機化合物と異なった晶析挙動を
示し非常に安定な過飽和状態を形成する。また晶析温度
によって無水物或いは８分子の結晶水を持った物で晶析
する。この二つの性質を組合せることによってアデニン
の精製効果を向上させることが出来た。具体的な効果と
しては螢光物質の除去、１色物質の除去、及び精製収率
の向上が挙げられる。

アデニンは沸騰水に約２％溶解するが、この溶解液を攪
拌しながら冷却すると、７０℃付近から乳濁し６０℃付
近から微小の粉末が析出して来るＯそして８０℃付近ま
でその量は増加するが、それ以下の温度では外見上変化
は見られない（以後こて静置冷却すると温度が１０℃以
下になっても全く結晶は析出しない。この過飽和溶液を
急激に攪拌したり２種晶を添加したりすることによって
刺激を与えると急速に針状晶の結晶が析出して来る（以
後この晶析方法を急晶析と略す）。このようにして得ら
れたアデニンの結晶は徐１析で得られた粉末に比べて白
色度は＾くかつ螢光強度は低いものであり、更に精製収
率も向上するＯ本発明を更に詳しく説明する。アデニン
の合成法としては例えば４．６−ジアミツー２−メルカ
プト−５−二トロンピリミジンを経名方法、Ｗ、Ｔｒ−
ａｕｂｅ、Ａｎｎ、、８８Ｌ　　６４（１９０４）；ア
ト７芝４ミジンｒｍ酸壜から合成する方法、　ｇ、　ｃ
、　Ｔａｙｌｏｒ、　ｅｔａｌ。

、Ｌ　Ａｍ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｃ、、　８２．８１４
４（１９６０）　：フェニルアゾマロノニトリルを経る
方法、特公昭５１−２８５１６号公報２等があるが、こ
れらのいずれ分の粉末を溶解せし″め熱時不浴物を戸去
し、Ｆ液に適当量の活性炭を加え１時間程度還流し脱色
を行う。熱時活性炭を炉去しＦ液を冷却して晶析させア
デニンの結晶を得る。しかし通常この程度の積装手段だ
けでは市場で°要求される着色度、螢光傾度、及び溶状
物の品−一到達したアデニンを得ることは困−離である
・そのため工業−にアデニンを製造しようとした場合、
その精一工程には諸々の工夫がなされている。その手段
の−ちとして良く用いられるのは２段精製方法である。

それは第（ ある◇ 本発明の精製方法はどちらかといえば第２段目の精製に
適する。

以下本発明方法を更に詳細に説明する。すなわ加え約１
時間加熱脱色して活性炭をＰ去する０そのろ液を静置し
外部から水或いは氷水で８０℃以下、好ましくは２０℃
以下讐で冷却する。その透明液を攪拌するかまたは種晶
を少量添加するかすることによって過飽和状態を破壊し
てやると、白色の針状結晶が急速に析出して来る。充分
熟成を行った後、Ｆ栖してアブ二）の結晶を得る。この
結晶は徐冷−で得らｎる粉末状の結晶と異なり結晶が大
きく非常にｐ過性は良好である。過飽和状轢を破壊する
方法は目的を達成さえすればどんな方法でも良いが一般
的には攪拌が揮晶小加が用いられる。得られた針状晶の
結晶は適当な方法で乾燥され白色のアデニンの結晶性粉
末を得る・このようにして得られた急晶析結晶は徐晶析
で得られた結晶より精製収率で５〜１０％、白色度で５
〜ＩＯ％、螢光強度で５０〜６０％、良好な品位を持つ
ものであったう この急晶析法をアデニン以外の一般的に水からついて実
施してみたところアデニンの場合とほぼ同様に良好な結
果が得られた。

以下に実施例を挙げて本発明を更に具体的に説明するが
１本発明はその主旨を超えない限り、以下の実施例に限
定されるものではない。

尚２回収率及び物性値の分析方法は以下の逼り。

回収率＝（精製した結晶（ｆ）／供試結晶（の）×１０
０ 白色度＝波長４８０国での標準白板に対する比反射率 純　度＝０．１Ｎ塩酸溶液につき 吸光度分析法による。

標品に対する ＷＩ＝標品ｔ（岬） Ｗ、＝サンプル！（η） Ｅ、＝標品溶液の吸光度 Ｅ、＝サンプル溶液の吸光度 長４１８ｎＥｌｌ、励起波長８４０．及び８７８ｎｍで
分光螢光光度計によって 測定した螢光強度。（標準溶液： ０、ＩＮ、　ＨＣＩ　） 実施例　１ （υ　粗アデニンの調製 フェニルアゾマロノニトリル＆、　４　Ｗｌ　ｔ−アン
モニアを６チ含むホルムアミド８４にと共に５０ｔオー
トクレーブに入れ密封後１５０〜１５５°Ｃで８時間加
熱反応させた。反応終了後１ｈちにアンモニアを放出除
去し冷却２次いでラネーニッケル合金８４０２から展開
したラネーニッケル触媒と活性炭３４０ｔを反応物に添
加して密封し水素ガスを８０１封入して１８０〜１８５
°Ｃで接触還元を行った。改元が終了したら次いで反応
ＯＡ度を１５０〜ｌ　５５　”Ｃに上げ４時間加熱した
。反応物をオートクレーブから取り出し余剰のホルムア
ミドを減熱時触媒及び活性炭等の不溶物を戸遇して除き
ｐ液に活性炭８００ｔを加え１時間加熱還流し、活性炭
を濾過・除去し、冷却した。析出し九結晶を炉取し乾燥
して粗アデニン２．ｌＫｆを得た。

粗アデニンの物性値は以下の通りであった。

４８％　　　　　　　２５８　１８９ ■）晶　析 粗アデニン２０ｔ、水１１００ｍｇ、活性炭２ｔ（１０
重量％対アデニン）を１時間還流し、その後、活性炭を
熱時に濾過し、Ｐ液を２等分した。

その一方を攪拌しながら、液温か１０℃になる迄冷却し
、その温度で攪拌しながら４時間晶析させた。（以後、
この方法を徐晶析と呼ぶ）そして、残る一方は静置した
まま冷却し、液温が１０℃に達した時点で急激に攪拌を
始めて、その温度で攪拌しながら４時間晶析させた。（
以後燥した。以下に回収率及び物性値を示す。

徐晶析　７６．８チ　　８１．８　　９９．６慢　　９
８１　６７−５急晶析　８３．８％　　８８．４　　９
９．２チ　　８７１　２０．５実施例　２ 晶析温度を２０℃で行い、そｑ他は実施例１に準じた。

徐晶析　６９．２．％　　　８２．Ｑ９８．９慢、　９
６．０　６８．６急晶析　７５．７チ　　８７．８　　
９９．２４　　８４．７　１８．２実施例　３ 晶析温度を８０℃で行い、その他は実施例１に準じた。

急晶析　６６．２壬　　９０．７　９９．５％　　２６
．５　１１．８実施例　４ 粗アデニン２０２．水２０ｏＷｔｌを加え、２０％苛性
ソーダでｐＨ１２，５に調製した。室温で８０分間かき
まぜてアデニンを完全に溶解させ、不溶物を濾過除去し
た□ｐ液を４９％硫酸で中和し、ｐＨ６，５〜７に調製
し、水９００−を追加して１時間還流した。その均−液
を三等分し、一方を１０℃で４時間冷却し、徐晶析させ
、残る一方を１０℃で４時間冷却し、急晶析させた。得
られたそれぞれの結晶は７０℃で２０時間乾燥した。以
下に回収率及び物性値を示す。

急晶析　８０．６％　　８６．６　　９８．（１釜　２
２．１　１’７．６実施例　５ 粗アデニン２０？、水２０〇−加え、２０チ苛性ソーダ
でｐＨ１２，５に調製した。室温で８０分間かきまぜて
アデニンを完全に溶解させ、不溶物を濾過除去した。炉
液を４９チ硫醒で中和し、−６゜５〜７に調製し、水９
００ｍ、活性炭２ｆ（１０重量一対アデニン）を加えて
１時間還流した。その後、活性炭を熱時に濾過し、Ｐ液
を三等分した。

一方を１０℃で４時間冷却し、徐晶析させ残る一方を１
０℃で冷却し急晶析させた。得らｎたそれぞれの結晶は
７０°Ｃで２，０時間乾燥した。以下に回収率及び物性
値を示す。

徐晶析　７４．９％　　６０．０　９８．７Ｌｓ８０．
５　５５．５急晶析　７７．０％　　７８．４　９８．
６悌　２ｇ、５　１５．８実施例　６ ２−７エニルアゾシアノアセトアミドを、アンモニアを
７％含むホルムアミド中２ネーニッケル　　　　　□存
在下オートクレーブ中水素（初圧８０ＫｖＭ）加圧下１
５０〜１５８℃で８時間反応して合成したヒホキサンチ
ンを用い、実施例１の粗アデニンの調製と同様な処理を
行い粗ヒポキサンチンを調製した〇 水１５００＋ｄＫ上記粗ヒポキサ／チン２０９及び活性
炭２ｔを加え１時間加熱還流し熱時活性炭を除いた液に
ついて実施例１と同様に徐晶析と急晶析を行った０得ら
れたそれぞれの結晶は７０℃で２０時間乾燥した。回収
率及び物性値は表ＩＫ示した。

実施例　７ ２−シアノ−２−（フェニルアゾ）アセチルウレアとギ
酸アミドをラネーニッケル存在下オートクレーブ中水素
初ｔ＝ｓｏｈり下１５０〜１５５℃に加熱反応して合成
したキサンチ／を用い、実施例１の徂アデニンのＡ製と
同様な処理を行い粗キサンチンを、ｌｌ！Ｉ製した。水
２８１に上記粗キサンチン２０ｆ及び活性炭２ｔを加え
１時間加熱還流し熱時活性炭を除いた液について実施例
１と同様に徐晶析と急晶析を行った。得られたそれぞれ
の結晶は７０℃で２０時間乾燥した。回収率及び物性値
は表１に示した。

実施例　８ 市販ｓ！：薬のテオプロミン２（ｌＫ水８０００＋ｄを
加えて加熱して溶解した液について実施例１と同様に徐
晶析と急晶析を行った◇得られたそれぞれの結晶は７０
℃で２０時間乾燥した。回収率及び物性＋ｉ［は表１に
示し九□ 実施例　９ 市販試薬のテオフィリン２０　ｔＫ水６００ｍ／ヲ加え
た以外は実施例８と同様に処理し、結果は表１に示した
。

表１

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）　　プリン誘導体を再結晶法によって精製するに
   当り、熱溶解液を所定の温度まで静置冷却し１次いで急
   激に刺激を与え急速に晶析させることを特徴とするプリ
   ン誘導体の精製方法。 ＠）　プリン誘導体がアデニン、ヒボキサンチン。 キサンチン及びそれらの誘導体である特許請求の範囲ｌ
   の精製方法。 （８）晶析を開始させる温度が８０℃以下である特許請
   求の範囲１の精製方法。 （４）溶解溶媒が水である特許請求の範囲１の精製方法
   。