JPS587278B2 - ジペプチドの製造方法 - Google Patents
ジペプチドの製造方法Info
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- JPS587278B2 JPS587278B2 JP51043686A JP4368676A JPS587278B2 JP S587278 B2 JPS587278 B2 JP S587278B2 JP 51043686 A JP51043686 A JP 51043686A JP 4368676 A JP4368676 A JP 4368676A JP S587278 B2 JPS587278 B2 JP S587278B2
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- amino acid
- protected amino
- benzyloxycarbonyl
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Description
【発明の詳細な説明】
本発明はＬ−Ｌ−ジペプチドを製造する方法に関する。
更に詳しくは本発明はアミン基保護のアミノ酸とカルボ
キシル基保護のアミノ酸とを金属プロテナーゼの存在下
、反応体の少なくとも一方をラセミ体として反応させて
、選択的にＬ ・ Ｌ −ジペプチドを製造する方法に
関するものである。
キシル基保護のアミノ酸とを金属プロテナーゼの存在下
、反応体の少なくとも一方をラセミ体として反応させて
、選択的にＬ ・ Ｌ −ジペプチドを製造する方法に
関するものである。
近年生理活性を有するペプチドが次々に明らかにされ、
それに伴ってペプチド合成法の開発も盛んである。
それに伴ってペプチド合成法の開発も盛んである。
本発明者等は、先に蛋白質分解酵素がその逆反応として
のペプチド結合の生成を広く触媒作用することを見出し
、従来のペプチド合成法に加わる一つの方法として利用
できることを明らかにした（特開昭５０−１４０６８６
号参照）。
のペプチド結合の生成を広く触媒作用することを見出し
、従来のペプチド合成法に加わる一つの方法として利用
できることを明らかにした（特開昭５０−１４０６８６
号参照）。
この酵素を用いた方法によればラセミ化やその他の望ま
しくない副反応を避けることができ、操作も簡単で反応
条件も常温、水溶媒系であることなど、工業的製造法と
して、従来の化学的合成法と比べて数多くのすぐれた特
徴を有している。
しくない副反応を避けることができ、操作も簡単で反応
条件も常温、水溶媒系であることなど、工業的製造法と
して、従来の化学的合成法と比べて数多くのすぐれた特
徴を有している。
本発明者等は蛋白分解酵素の有効利用を目的として更に
研究を重ねた結果、アミノ基保護のアミノ酸とカルボキ
シル基保護のアミノ酸との少なくとも一方をラセミ体と
して金属プロテナーゼの存在下反応させることにより、
Ｌ・Ｌ−ジペプチドのみを選択的に、しかも高収率且つ
高純度で製造出来ることを見出したものである。
研究を重ねた結果、アミノ基保護のアミノ酸とカルボキ
シル基保護のアミノ酸との少なくとも一方をラセミ体と
して金属プロテナーゼの存在下反応させることにより、
Ｌ・Ｌ−ジペプチドのみを選択的に、しかも高収率且つ
高純度で製造出来ることを見出したものである。
即ち、本発明はアミノ酸の光学分割とペプチド生成結合
を単一工程で解決したものであり、従来法からは全く予
想し難い画期的な発明であると言えるものである。
を単一工程で解決したものであり、従来法からは全く予
想し難い画期的な発明であると言えるものである。
本発明を反応式で示すと次の通りである。
（式中Ｒ１ はアルコキシカルボニル基、又はメトキシ
基を有するもしくは有しないベンジルオキシカルボニル
基であり、Ｒ２はα−アミノ酸の側鎖基であり、Ｒ３は
α−アミノ酸の側鎖基であり、Ｒ４はカルボキシル基の
保護基である。
基を有するもしくは有しないベンジルオキシカルボニル
基であり、Ｒ２はα−アミノ酸の側鎖基であり、Ｒ３は
α−アミノ酸の側鎖基であり、Ｒ４はカルボキシル基の
保護基である。
）上記の反応式における原料アミノ基保護のアミノ酸（
Ｉ）とカルボキシル基保護のアミノ酸（ｎ）との糾合わ
せはの３種類であり、生成物はＬ・Ｌ−■のみである。
Ｉ）とカルボキシル基保護のアミノ酸（ｎ）との糾合わ
せはの３種類であり、生成物はＬ・Ｌ−■のみである。
即ち、反応が選択的であるのが本発明の特徴である。
式中、Ｒ１ で表わされる基としてはアルコキシカルボ
ニル、たとえば第３級ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ
一）、メトキシ基を有するもしくは有しないベンジル
オキシカルボニル、たとえばベンジルオキシカルボニル
（Ｚ一）、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル（ｐ
ｍＺ−）、３・５−ジメトキシベンジルオキシカルボニ
ル 〔Ｚ（ＯＭｅ）２−〕などが挙げられる。
ニル、たとえば第３級ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ
一）、メトキシ基を有するもしくは有しないベンジル
オキシカルボニル、たとえばベンジルオキシカルボニル
（Ｚ一）、ｐ−メトキシベンジルオキシカルボニル（ｐ
ｍＺ−）、３・５−ジメトキシベンジルオキシカルボニ
ル 〔Ｚ（ＯＭｅ）２−〕などが挙げられる。
又、Ｒ４で表わされるカルボキシル基の保護基としては
第３級アルコキシ基、たとえば第３級ブトキシ（−０Ｂ
ｕ−ｔ）、置換または非置換ベンジルオキシたとえばベ
ンジルオキシ（一０Ｂｚｌ）、置換または非置換ベンズ
ヒドリルオキシ基たとえばベンズヒドリルオキシ（−０
Ｂｈ）、置換または非置換ベンジルアミノ基たとえば２
・４−ジメトキシベンジルアミノ（−ＮＨＤＭＢ）、置
換または非置換ベンズヒドリルアミノ基たとえばベンズ
ヒドリルアミノ（−ＮＨＢｈ）等が挙げられる。
第３級アルコキシ基、たとえば第３級ブトキシ（−０Ｂ
ｕ−ｔ）、置換または非置換ベンジルオキシたとえばベ
ンジルオキシ（一０Ｂｚｌ）、置換または非置換ベンズ
ヒドリルオキシ基たとえばベンズヒドリルオキシ（−０
Ｂｈ）、置換または非置換ベンジルアミノ基たとえば２
・４−ジメトキシベンジルアミノ（−ＮＨＤＭＢ）、置
換または非置換ベンズヒドリルアミノ基たとえばベンズ
ヒドリルアミノ（−ＮＨＢｈ）等が挙げられる。
前記一般式ＣＩ）及び（Ｉｌ）に含まれる化合物はいず
れも容易に入手し得る化合物である。
れも容易に入手し得る化合物である。
本発明によれば例えば甘味物質として知られているアス
パラチルフエニルアラニンメチルエステルも容易に製造
出来る。
パラチルフエニルアラニンメチルエステルも容易に製造
出来る。
即ちＮ−ベンジルオキシカルボニル（β−ベンジル）一
アスパラギン酸とフエニルアラニンメチルエステルを本
発明の方法で反応させることにより形成されるＮ−ベン
ジルオキシカルボニル（β−ベンジル）一アスパラチル
−フエニルアラニンメチルエステルを常法により還元す
ることにより製造出来る。
アスパラギン酸とフエニルアラニンメチルエステルを本
発明の方法で反応させることにより形成されるＮ−ベン
ジルオキシカルボニル（β−ベンジル）一アスパラチル
−フエニルアラニンメチルエステルを常法により還元す
ることにより製造出来る。
本発明の方法は金属プロテナーゼの使用を必須要件とす
るものである。
るものである。
金属プロテナーゼ（ Ｍｅｔａｌｌｏ ｐｒｏｔｅｉｎ
ａｓｅ ）に属する酵素としてはバチルス・ズブチリス
・バリエタス・アミロリクイファシエンス（ Ｂａｃｉ
ｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ｖａｒ，ａｍｙｌｏｌｉ
ｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ ）起源のプロリシン（ Ｐｒｏ
ｌｉｓｉｎ ：商品名）、サーモライシン（Ｔｈｅｍｏ
ｌｙｓｉｎ ：慣用名）、コラゲナーゼ（ Ｃｏｌｌａ
ｇｅｎａｓｅ ）及びクロタルスアトロックスプロテナ
ーゼ（ Ｃｒｏｔｕｌｕｓ ａｔｒｏｘ ｐｒｏｔｅｉ
ｎａｓｅ ）を例示することができる。
ａｓｅ ）に属する酵素としてはバチルス・ズブチリス
・バリエタス・アミロリクイファシエンス（ Ｂａｃｉ
ｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ ｖａｒ，ａｍｙｌｏｌｉ
ｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ ）起源のプロリシン（ Ｐｒｏ
ｌｉｓｉｎ ：商品名）、サーモライシン（Ｔｈｅｍｏ
ｌｙｓｉｎ ：慣用名）、コラゲナーゼ（ Ｃｏｌｌａ
ｇｅｎａｓｅ ）及びクロタルスアトロックスプロテナ
ーゼ（ Ｃｒｏｔｕｌｕｓ ａｔｒｏｘ ｐｒｏｔｅｉ
ｎａｓｅ ）を例示することができる。
これらの酵素は市販品として人手し得るが、エステラー
ゼ作用を有する微量の不純物を含んでいる場合があるの
で、精製処理するのが望ましい。
ゼ作用を有する微量の不純物を含んでいる場合があるの
で、精製処理するのが望ましい。
また別法として反応系にポテトインヒビター等の如きア
ルカリプロテアーゼ阻害剤を併用することにより、エス
テラーゼ作用を防止し、収率を向上させることができる
。
ルカリプロテアーゼ阻害剤を併用することにより、エス
テラーゼ作用を防止し、収率を向上させることができる
。
本発明においてペプチド結合を生成する脱水縮合反応は
緩衝溶液中で実施することが好ましい。
緩衝溶液中で実施することが好ましい。
すなわち金属プロテナーゼに属する酵素は中性プロテナ
ーゼであるので、ｐＨ６．０〜８．０の緩衝溶液たとえ
ばクエン酸緩衝溶液、マクイルバイン（ Ｍｃ Ｉ ｌ
ｖａｉｎｅ ）緩衝溶液、コルトツフ緩衝溶液ミハエリ
ス緩衝溶液、トリス塩酸緩衝溶液、クラークーラプス緩
衝溶液、アトキンスーパンチン緩衝溶液、パリツヒ緩衝
溶液、ウオルホール緩衝溶液に前記２者の出発物質を溶
解し、これに酵素を添加して反応を行なう。
ーゼであるので、ｐＨ６．０〜８．０の緩衝溶液たとえ
ばクエン酸緩衝溶液、マクイルバイン（ Ｍｃ Ｉ ｌ
ｖａｉｎｅ ）緩衝溶液、コルトツフ緩衝溶液ミハエリ
ス緩衝溶液、トリス塩酸緩衝溶液、クラークーラプス緩
衝溶液、アトキンスーパンチン緩衝溶液、パリツヒ緩衝
溶液、ウオルホール緩衝溶液に前記２者の出発物質を溶
解し、これに酵素を添加して反応を行なう。
出発物質は一般にアミン基保護のアミノ酸１．０モルに
対してカルボキシル基保護のアミノ酸１．０〜１．５モ
ルであり、これらの出発物質が緩衝溶液としての水性溶
媒に溶け難い場合には緩衝溶液１．０に対して０．２〜
１０のメタノール、エタノールのようなアルコール、ジ
メチルホルムアミド、ジオキサン、テトラヒドロフラン
、ジメチルスルホキシド等の極性溶媒を加えてもよい。
対してカルボキシル基保護のアミノ酸１．０〜１．５モ
ルであり、これらの出発物質が緩衝溶液としての水性溶
媒に溶け難い場合には緩衝溶液１．０に対して０．２〜
１０のメタノール、エタノールのようなアルコール、ジ
メチルホルムアミド、ジオキサン、テトラヒドロフラン
、ジメチルスルホキシド等の極性溶媒を加えてもよい。
反応に要する酵素量は基質１ ｍｍｏｌに対して１０〜
４００■（２×１０〜２×１０−２ｍｍｏｌ）、望まし
くは５０〜３００ｍｇである。
４００■（２×１０〜２×１０−２ｍｍｏｌ）、望まし
くは５０〜３００ｍｇである。
精製した酵素を用いる場合には５〜３０ｍｇで十分であ
る。
る。
反応温度は酵素活性を維持する観点から般には２０〜８
０℃である。
０℃である。
前前記の条件で反応を実施することにより、反応は円滑
に進行し、２〜２４時間で完結し、生成物は水または水
性溶媒に難溶であるため、反応系外に析出するので容易
に単離することができる。
に進行し、２〜２４時間で完結し、生成物は水または水
性溶媒に難溶であるため、反応系外に析出するので容易
に単離することができる。
以下実施例により本発明を更に詳細に説明する。
尚、実施例中の精製サーモアーゼ（商品名）は次のよう
な操作により得たものである。
な操作により得たものである。
粗サーモアーゼを１／５０モル酢酸カルシウムに溶解し
、不溶物を遠心分離により除き、うわずみ液を二回１／
１００モル酢酸カルシウムに対し透析した。
、不溶物を遠心分離により除き、うわずみ液を二回１／
１００モル酢酸カルシウムに対し透析した。
透析液に０．８倍量のアセトンを加え、生じた沈澱物を
濾過により除き、濾液に全量が２．５倍になるまでアセ
トンを加えた。
濾過により除き、濾液に全量が２．５倍になるまでアセ
トンを加えた。
生じた沈澱を遠心分離により単離し、常温にて減圧乾燥
することにより形成した。
することにより形成した。
実施例 Ｉ
Ｎ−ベンジルオキシカルボニルー（β−ベンジル）−Ｄ
・Ｌ−アスパラギン酸７ １． ５ｍｇ（ ２．０ ０
ｍｍｏｌｅ ）、Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル
塩酸塩２１５ｍｇ（１． Ｏ Ｏ ｍｍｏｌｅ ）、精
製したサーモアーゼ２０ｍｇ、およびポテトより得られ
たインヒビター２０ｍｇを含む混合物に２．０×１０−
２Ｍの酢酸カルシウムを含む１ｏｍ．ｌ．のトリス塩酸
緩衝液（ｐＨ８．０）を加えたあと、ＩＮ苛性ソーダを
加えｐＨを７．５に調整する。
・Ｌ−アスパラギン酸７ １． ５ｍｇ（ ２．０ ０
ｍｍｏｌｅ ）、Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル
塩酸塩２１５ｍｇ（１． Ｏ Ｏ ｍｍｏｌｅ ）、精
製したサーモアーゼ２０ｍｇ、およびポテトより得られ
たインヒビター２０ｍｇを含む混合物に２．０×１０−
２Ｍの酢酸カルシウムを含む１ｏｍ．ｌ．のトリス塩酸
緩衝液（ｐＨ８．０）を加えたあと、ＩＮ苛性ソーダを
加えｐＨを７．５に調整する。
これを振盪しながら３９℃で１７時間反応を行なった。
得られた白色沈澱物を濾取し、５％アンモニア水、５％
クエン酸水溶液、水にて順次よく洗浄後減圧乾燥し、Ｎ
−ベンジルオキシカルボニルー（β一ベンジル）〜Ｌ−
アスパラチルーＬ−フエニルアラニンメチルエステル４
１ ３ｍｇを得た。
クエン酸水溶液、水にて順次よく洗浄後減圧乾燥し、Ｎ
−ベンジルオキシカルボニルー（β一ベンジル）〜Ｌ−
アスパラチルーＬ−フエニルアラニンメチルエステル４
１ ３ｍｇを得た。
酢酸エチルー石油エーテルより再結晶。
収率７９．６％。融点１１６〜１１７℃。
Ｃ ａ 〕２０−−１ ２．２ （ ｃ＝１。
０、ＤＭＦ）元素分析（ Ｃ２９Ｈ３０Ｎ２０＝ ５
１ ８．５ ５ ）計算値（％） Ｃ＝６７．１７、
Ｈ＝５．８３、Ｎ＝５．４０， 測定値（％） Ｃ＝６７．３５、Ｈ＝５．８１、Ｎ＝
５．２８， 実施例 ２ Ｎ−ベンジルオキシ力ルボニルー（β−ベンジル） −
Ｄ − Ｌ−アスパラギン酸７１５■、Ｄ−Ｌ一フエニ
ルアラニンメチルエステル塩酸塩４３１■及びザーモラ
イシン２０ｍｇを用い、インヒビタ一を用いなかった以
外は実施例１と同様にして反応を行い、実施例１と同じ
生成物２４４ｍｇ（収率４７，０％）を得た。
１ ８．５ ５ ）計算値（％） Ｃ＝６７．１７、
Ｈ＝５．８３、Ｎ＝５．４０， 測定値（％） Ｃ＝６７．３５、Ｈ＝５．８１、Ｎ＝
５．２８， 実施例 ２ Ｎ−ベンジルオキシ力ルボニルー（β−ベンジル） −
Ｄ − Ｌ−アスパラギン酸７１５■、Ｄ−Ｌ一フエニ
ルアラニンメチルエステル塩酸塩４３１■及びザーモラ
イシン２０ｍｇを用い、インヒビタ一を用いなかった以
外は実施例１と同様にして反応を行い、実施例１と同じ
生成物２４４ｍｇ（収率４７，０％）を得た。
実施例 ３
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−（β−ベンジル ）
− Ｌ−アスパラギン酸３ ５ ７ｍｇ（１．０ ０ｓ
ｍｏｌｅ ）とＤ・Ｌ−フエニルアラニンメチルエステ
ル塩酸塩４ ３ １ ｍｇ（ ２．０ ０ ｍｍｏｌｅ
）を用い実施例１と同様にして反応を行ない、Ｎ−ベ
ンジルオキシカルボニル−（β−ベンジル）−Ｌ−アス
パラチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル４２６
ｍｇ、〔α〕２５＝−１２、５ （ Ｃ＝１．Ｏ、ＤＭ
Ｆ） を得た。
− Ｌ−アスパラギン酸３ ５ ７ｍｇ（１．０ ０ｓ
ｍｏｌｅ ）とＤ・Ｌ−フエニルアラニンメチルエステ
ル塩酸塩４ ３ １ ｍｇ（ ２．０ ０ ｍｍｏｌｅ
）を用い実施例１と同様にして反応を行ない、Ｎ−ベ
ンジルオキシカルボニル−（β−ベンジル）−Ｌ−アス
パラチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル４２６
ｍｇ、〔α〕２５＝−１２、５ （ Ｃ＝１．Ｏ、ＤＭ
Ｆ） を得た。
収率８２．１％。実施例 ４
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−（β−ベンジル）−Ｄ
−Ｌ−アスパラギン酸７１５ｍｇ（２、００ｍｍｏｌｅ
） とＤ− Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル塩
酸塩４ ３ １ （ ２．０ ０ ｍｍｏｌｅ）を用い
実施例１と同様にして反応を行ないＮ−ベンジルオキシ
カルボニル−（β−ベンジル）−Ｌ−アスパラチル−Ｌ
−フエニルアラニンメチルエステル４１０ｍｇ、〔ａ
〕２０＝−１ ２．０ （ Ｃ ＝ １．Ｏ、ＤＭＦ）
を得た。
−Ｌ−アスパラギン酸７１５ｍｇ（２、００ｍｍｏｌｅ
） とＤ− Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル塩
酸塩４ ３ １ （ ２．０ ０ ｍｍｏｌｅ）を用い
実施例１と同様にして反応を行ないＮ−ベンジルオキシ
カルボニル−（β−ベンジル）−Ｌ−アスパラチル−Ｌ
−フエニルアラニンメチルエステル４１０ｍｇ、〔ａ
〕２０＝−１ ２．０ （ Ｃ ＝ １．Ｏ、ＤＭＦ）
を得た。
原料のＬ一体含有量に基づく収率は７９．０％であった
。
。
実施例 ５
和サーモアーゼ１００ｍｇとポテトより得られたインヒ
ビター１００ｍｇを２．０×１０−３Ｍの酢酸カルシウ
ムを含む１０ｍｌのトリス−塩酸緩衝液（ ｐＨ ８．
０ ）に加え、１０分間３０℃で振盪した。
ビター１００ｍｇを２．０×１０−３Ｍの酢酸カルシウ
ムを含む１０ｍｌのトリス−塩酸緩衝液（ ｐＨ ８．
０ ）に加え、１０分間３０℃で振盪した。
不溶物をガラスフィルター（Ｇ−３）により除き、濾液
をＮ−ベンジルオキシカルボニル−（β−ベンジル）
− Ｄ ・ Ｌ−アスパラギン酸７１５ｍｇ（ ２．０
０ ｍｍｏｌｅ ）とＬ−フエニルアラニンメチルエ
ステル塩酸塩２ １ ５ｍｇ（ １．０ ０ ｍｍｏｌ
ｅ ）を含む混合物に加え、ＩＮ苛性ソーダでｐＨを７
．５に調整したあと、浸湯しなから３９゜Ｃで１７時間
反応を行なった。
をＮ−ベンジルオキシカルボニル−（β−ベンジル）
− Ｄ ・ Ｌ−アスパラギン酸７１５ｍｇ（ ２．０
０ ｍｍｏｌｅ ）とＬ−フエニルアラニンメチルエ
ステル塩酸塩２ １ ５ｍｇ（ １．０ ０ ｍｍｏｌ
ｅ ）を含む混合物に加え、ＩＮ苛性ソーダでｐＨを７
．５に調整したあと、浸湯しなから３９゜Ｃで１７時間
反応を行なった。
得られた白色沈澱物を実施例１と同様に後処理をし、Ｎ
−ベンジルオキシカルボニル−（β−ベンジル）−Ｌ−
アスパラチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル４
． １ １ ｍｇ、〔α〕２３＝−１２５（Ｃ−１．０
、ＤＭＦ）を得た。
−ベンジルオキシカルボニル−（β−ベンジル）−Ｌ−
アスパラチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル４
． １ １ ｍｇ、〔α〕２３＝−１２５（Ｃ−１．０
、ＤＭＦ）を得た。
収率７９２％。
実施例 ６
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−（β−ベンジル）−Ｄ
−Ｌ−アスパラギン酸７ １ ５ｍｇ（ ２．０ ０ｍ
ｍｏｌｅ）とＬ−フエニルアラニンメチルエステル塩酸
塩２ １ ５ｍｇ（１．００ ｍｍｏｌｅ ）、プロリ
シン２００■及びポテトより得られたインヒビター２０
０ｍｇを用い実施例５と同様にして反応を行ないＮ−ベ
ンジルオキシカルボニル−（β−ベンジル）一Ｌ−アス
パラチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル１１０
ｍｇを得た。
−Ｌ−アスパラギン酸７ １ ５ｍｇ（ ２．０ ０ｍ
ｍｏｌｅ）とＬ−フエニルアラニンメチルエステル塩酸
塩２ １ ５ｍｇ（１．００ ｍｍｏｌｅ ）、プロリ
シン２００■及びポテトより得られたインヒビター２０
０ｍｇを用い実施例５と同様にして反応を行ないＮ−ベ
ンジルオキシカルボニル−（β−ベンジル）一Ｌ−アス
パラチル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル１１０
ｍｇを得た。
収率２１。２％。〔α〕＝− １ ２．８ （Ｃ ．＝
１．０、ＤＭＦ ）。
１．０、ＤＭＦ ）。
実施例 ７
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル− （β−ベンジル）
．−Ｌ −アスパラギン酸３５７ｍｇ（１．００ｍｍｏ
ｌｅ ）とＤ・１、一フエニルアラニンメチルエステル
塩酸塩４． ３ １ｍｇ（ ２．０ ０ ｍｍｏｌｅ
）を用い実施例６と同様にして反応を行ないＮ−ベンジ
ルオギシカルボニル−（β−ベンジル）−Ｌ−アスパラ
チル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル２３８ｍｇ
を得た。
．−Ｌ −アスパラギン酸３５７ｍｇ（１．００ｍｍｏ
ｌｅ ）とＤ・１、一フエニルアラニンメチルエステル
塩酸塩４． ３ １ｍｇ（ ２．０ ０ ｍｍｏｌｅ
）を用い実施例６と同様にして反応を行ないＮ−ベンジ
ルオギシカルボニル−（β−ベンジル）−Ｌ−アスパラ
チル−Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル２３８ｍｇ
を得た。
収率４５．８％。〔α〕２０−−１ ３．２ （ Ｃ
＝ １．．０、ＤＭＦ″）。
＝ １．．０、ＤＭＦ″）。
実施例 ８
Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−（β一ベンジル）−Ｄ
− Ｌ−アスパラギン酸７１５ｍｇ（２．００ｍｍｏ１
ｅ）とＤ−Ｌ−フエニルアラニンノチルエステル塩酸塩
４ ３ １ｍｇ （ ２．０ ｍｍｏｌｅ ）を用い、
実施例６と同様にして反応を行ない、Ｎ−ベンジルオキ
シカルボニル−（β−ベンジル）−Ｌ−アスパラチル−
Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル１２１ｍｇを得た
。
− Ｌ−アスパラギン酸７１５ｍｇ（２．００ｍｍｏ１
ｅ）とＤ−Ｌ−フエニルアラニンノチルエステル塩酸塩
４ ３ １ｍｇ （ ２．０ ｍｍｏｌｅ ）を用い、
実施例６と同様にして反応を行ない、Ｎ−ベンジルオキ
シカルボニル−（β−ベンジル）−Ｌ−アスパラチル−
Ｌ−フエニルアラニンメチルエステル１２１ｍｇを得た
。
収率２３．３％。〔α〕２６一一１ ２．４ （ ｃ＝
ｏ．５、ＤＭＦ）。
ｏ．５、ＤＭＦ）。
実施例 ９〜１５
実施例１の処方に従い、下記第−表に示す条件下で反応
を行い、実施例１と同じ生成物を形成した。
を行い、実施例１と同じ生成物を形成した。
実施例 １６〜２９
実施例１と同様の操作により各種アシルアミノ酸及びア
ミノ酸誘導体を用いて反応を行い、下記第二表の結果を
得た。
ミノ酸誘導体を用いて反応を行い、下記第二表の結果を
得た。
生成物はすべてＬ・Ｌ一体である。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 金属プロテナーゼの存在下アミン基保護のアミノ酸
（Ｉ）とカルボキシル基保護のアミノ酸世とを（イ）Ｌ
−ＩとＤＬ−■、（口）ＤＬ一ＩとＬ−■または（ハ）
ＤＬ−ＩとＤ Ｌ−■Ｉのいずれかの組合わせで反応さ
せることを特徴とする、Ｌ・Ｌ−ジペプチドの製造方法
。 ２ アミノ基保護のアミノ酸が一般式 （式中Ｒ１はアルコキシカルボニル基又はメトキシ基を
有するもしくは有しないベンジルオキシカルボニル基で
あり、Ｒ２はα−アミノ酸の側鎖基である。 ）で表わされる化合物であり、カルボギシル基保護のア
ミノ酸が一般式 （式中Ｒ３はα−アミノ酸の側鎖基であり、Ｒ４はカル
ボキシル基の保護基である。 ）で表わされる化合物である、特許請求の範囲第１項に
記載の方法。 ３ 反応を緩衝溶液中ｐＨ６〜９で行なうことから成る
特許請求の範囲第１項または第２項に記載の方法。 ４ 金属プロテナーゼ及びアルカリプロテナーゼ阻害剤
の存在下アミノ基保護のアミノ酸（Ｉ）とカルボキシル
基保護のアミノ酸（■とを（イ）Ｌ−ＩとＤＬ−■、（
ロ）ＤＬ−ＩとＬ − ＩＩまたは（ハ）ＤＬ−ＩとＤ
Ｌ−■のいずれかの組合わせで反応させることを特徴と
する、Ｌ−Ｌ−ジペプチドの製造方法。 ５ アミノ基保護のアミノ酸が一般式 （式中Ｒ１ はアルコキシカルボニル基又はメトキシ基
を有するもしくは有しないベンジルオキシカルボニル基
であり、Ｒ２はα−アミノ酸の側鎖基である。 ）で表わされる化合物であり、カルボキシル基保護のア
ミノ酸が一般式 （式中Ｒ３はα−アミノ酸の側鎖基であり、Ｒ４はカル
ボキシル基の保護基である。 ）で表わされる化合物である、特許請求の範囲第４項に
記載の方法。 ６ 反応を緩衝溶液中ｐＨ６〜９で行なうことから成る
特許請求の範囲第４項または第５項に記載の方法。
Priority Applications (10)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US05/572,630 US3972773A (en) | 1975-04-29 | 1975-04-29 | Process for producing peptide |
| JP51043686A JPS587278B2 (ja) | 1975-04-29 | 1976-04-19 | ジペプチドの製造方法 |
| DE2647189A DE2647189C2 (de) | 1975-04-29 | 1976-10-19 | Verfahren zur Herstellung von Oligopeptiden |
| GB43344/76A GB1523546A (en) | 1975-04-29 | 1976-10-19 | Process for producing a peptide in the presence or an enzyme |
| NLAANVRAGE7611569,A NL172462C (nl) | 1975-04-29 | 1976-10-20 | Werkwijze voor het bereiden van een di-, tri- of tetrapeptide. |
| FR7631894A FR2328695A1 (fr) | 1975-04-29 | 1976-10-22 | Procede de preparation d'un peptide |
| CH1336476A CH623807A5 (en) | 1975-04-29 | 1976-10-22 | Process for the preparation of a peptide |
| IT2860576A IT1077079B (it) | 1975-10-23 | 1976-10-22 | Procedimento per la produzione di un peptide |
| CA263,912A CA1059051A (en) | 1975-04-29 | 1976-10-22 | Process for producing a peptide |
| US05/839,848 US4116768A (en) | 1975-04-29 | 1977-10-06 | Process for producing a peptide |
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US05/572,630 US3972773A (en) | 1975-04-29 | 1975-04-29 | Process for producing peptide |
| JP51043686A JPS587278B2 (ja) | 1975-04-29 | 1976-04-19 | ジペプチドの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS52128290A JPS52128290A (en) | 1977-10-27 |
| JPS587278B2 true JPS587278B2 (ja) | 1983-02-09 |
Family
ID=26383488
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP51043686A Expired JPS587278B2 (ja) | 1975-04-29 | 1976-04-19 | ジペプチドの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS587278B2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6137181U (ja) * | 1984-08-09 | 1986-03-07 | 第一精工株式会社 | デジタルオ−デイオカセツト |
| JPS6341665Y2 (ja) * | 1981-12-09 | 1988-11-01 | ||
| JPH0249031Y2 (ja) * | 1983-11-09 | 1990-12-21 |
-
1976
- 1976-04-19 JP JP51043686A patent/JPS587278B2/ja not_active Expired
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6341665Y2 (ja) * | 1981-12-09 | 1988-11-01 | ||
| JPH0249031Y2 (ja) * | 1983-11-09 | 1990-12-21 | ||
| JPS6137181U (ja) * | 1984-08-09 | 1986-03-07 | 第一精工株式会社 | デジタルオ−デイオカセツト |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS52128290A (en) | 1977-10-27 |
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