JPS587256A - 体液中の免疫抑制物質des−i除去剤 - Google Patents
体液中の免疫抑制物質des−i除去剤Info
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- JPS587256A JPS587256A JP56104379A JP10437981A JPS587256A JP S587256 A JPS587256 A JP S587256A JP 56104379 A JP56104379 A JP 56104379A JP 10437981 A JP10437981 A JP 10437981A JP S587256 A JPS587256 A JP S587256A
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- Japan
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- des
- antibody
- plasma
- removing agent
- blood
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- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
■1発明の背景
技術分野
本発明はガン患者の体液中に存在する免疫抑制物質DE
S−Iの除去剤に関するものである。
S−Iの除去剤に関するものである。
ガン患者の血液および腹水中には正常人に比べて多量の
DES−Iが存在し、このものは免疫抑制活性を有する
。そこで正常値を越えて存在するDES−Iを体液中か
ら除去することは、ガンの治療上有効であると考えられ
る。
DES−Iが存在し、このものは免疫抑制活性を有する
。そこで正常値を越えて存在するDES−Iを体液中か
ら除去することは、ガンの治療上有効であると考えられ
る。
先行技術の問題点
肝臓、膵臓等の臓器ガンや白血病等の疾病時に血液等の
体液中に正常の値を越えて発現するフェリチン等を抗原
−抗体反応を利用して取シ除くことによりこれらの疾病
の症状を軽減乃至治癒せしめる装置は従来公知である(
特開昭55−141.248号等)。しかし、体液中の
フェリチン等を取シ除くのみではガン疾病時にみられる
免疫力の低下を十分防止することはできない。
体液中に正常の値を越えて発現するフェリチン等を抗原
−抗体反応を利用して取シ除くことによりこれらの疾病
の症状を軽減乃至治癒せしめる装置は従来公知である(
特開昭55−141.248号等)。しかし、体液中の
フェリチン等を取シ除くのみではガン疾病時にみられる
免疫力の低下を十分防止することはできない。
そこで本発明者等は、ガン患者の体液に含まれる免疫抑
制物質について鋭意研究を重ねた。即ち、フィトヘムア
グルチニン(PI(A)のヒドリンA球幼若化抑制活性
を指標として、ガン患者血清又は腹水をDEAE−セル
ロースイオン交換クロマトグラフィー、ケゝルクロマト
グラフィーおよびクロマトフォーカッシング法によシ分
離処理し、免疫抑制活性を有するタンパク物質DES−
Iなる物質を発見した。そして抗原−抗体反応を利用し
て、このものを体液中から除去することによシ免疫力低
下を防止し得ることを知った。
制物質について鋭意研究を重ねた。即ち、フィトヘムア
グルチニン(PI(A)のヒドリンA球幼若化抑制活性
を指標として、ガン患者血清又は腹水をDEAE−セル
ロースイオン交換クロマトグラフィー、ケゝルクロマト
グラフィーおよびクロマトフォーカッシング法によシ分
離処理し、免疫抑制活性を有するタンパク物質DES−
Iなる物質を発見した。そして抗原−抗体反応を利用し
て、このものを体液中から除去することによシ免疫力低
下を防止し得ることを知った。
旧発明の目的
従って本発明の目的は、びン患者の体液中から正常量以
上の免疫抑制物質DES−Iを取シ除くための新規な除
去剤を提供する(−とにある。
上の免疫抑制物質DES−Iを取シ除くための新規な除
去剤を提供する(−とにある。
■1発明の詳細な説明
本発明ばDES−I抗体を担体に担持させてなる体液中
の免疫抑制物質DES−Iの除去剤からなる。
の免疫抑制物質DES−Iの除去剤からなる。
本発明のDES−I抗体を調製するに際して、先ずDE
S−Iは次の方法によりガン患者体液中から分離される
。
S−Iは次の方法によりガン患者体液中から分離される
。
即ち、ガン患者から血液、腹水等の体液4を採取し、遠
心分離にかけ、得られた上澄液を半透膜に入れpH8,
0,0,02MIJン酸緩衝液に対して透析する。
心分離にかけ、得られた上澄液を半透膜に入れpH8,
0,0,02MIJン酸緩衝液に対して透析する。
内液をDEAE−セルロースイオン交換クロマトグラフ
ィーにかけ、1M食塩を添加した0、02M’Jン酸緩
衝液で溶出し、溶離液を濃縮後、セファデックスG−2
00(ファルマシア社製)のカラムにかけ、0.02M
!jン酸緩衝液で展開し、最初のUV吸収ピーク部分を
集め、これをpt(4〜6のクロマトフォー力ッシング
にかけ、pH4,5〜38部分にUV吸収ピークとして
溶出される。得られた溶離液をセフアゾ、クスG−15
0で精製してDES−Iを得る。
ィーにかけ、1M食塩を添加した0、02M’Jン酸緩
衝液で溶出し、溶離液を濃縮後、セファデックスG−2
00(ファルマシア社製)のカラムにかけ、0.02M
!jン酸緩衝液で展開し、最初のUV吸収ピーク部分を
集め、これをpt(4〜6のクロマトフォー力ッシング
にかけ、pH4,5〜38部分にUV吸収ピークとして
溶出される。得られた溶離液をセフアゾ、クスG−15
0で精製してDES−Iを得る。
DES−Iを等電点電、気泳動で調べたところ、等電点
け41〜48であった。また、DES−Iは、PHAに
よるリン・ぐ球の幼若化を抑制する(濃度0.5Iψ/
mlで100%抑制)ほか、遅延型アレルギー反応の抑
制、抗体産生の抑制およびガン増殖の促進活性を有する
。DES−I抗体は、上記の如くして得られたDES−
1を用いてそれ自体公知の方法で調製される。例えば、
DES−Iを供試動物例えばウサギに投与して免疫化し
、その血清からDES−I抗体を得る方法、DES−I
を供試動物たとえば一7ウスに投与して免疫化し、その
膵臓細胞を同種動物の骨髄陳細胞と融合させ、その融合
細胞の培養液から得る方法、上記融合細胞を同種動物に
移植してそれが成長した腫瘍組織またはその動物の腹水
から得る方法等が挙げられる。
け41〜48であった。また、DES−Iは、PHAに
よるリン・ぐ球の幼若化を抑制する(濃度0.5Iψ/
mlで100%抑制)ほか、遅延型アレルギー反応の抑
制、抗体産生の抑制およびガン増殖の促進活性を有する
。DES−I抗体は、上記の如くして得られたDES−
1を用いてそれ自体公知の方法で調製される。例えば、
DES−Iを供試動物例えばウサギに投与して免疫化し
、その血清からDES−I抗体を得る方法、DES−I
を供試動物たとえば一7ウスに投与して免疫化し、その
膵臓細胞を同種動物の骨髄陳細胞と融合させ、その融合
細胞の培養液から得る方法、上記融合細胞を同種動物に
移植してそれが成長した腫瘍組織またはその動物の腹水
から得る方法等が挙げられる。
DES−I抗体の固定化は、一般のタン・ぐり固定化の
種々の方法およびそれ自体公知の抗体特有の固定化方法
をそのまま使用することができる。尚、本除去剤の目的
から、固定化形態は包括法や架橋法よりも共有結合法が
適当である。抗体を固定化する担体の材質としてはセル
ロース、セファデックス、セファロース等の多糖類、合
成繊維または合成樹脂など公知のものが使用されるが、
固定化の安定性、方法の簡便性、人体への応用性からセ
ルロースまたはナイロンが好ましい。担体の形態として
は、体液の流通性等の理由から不織布、織布、綿あるい
は糸が好ましい。ここで不織布にはp紙状のものも含め
る。
種々の方法およびそれ自体公知の抗体特有の固定化方法
をそのまま使用することができる。尚、本除去剤の目的
から、固定化形態は包括法や架橋法よりも共有結合法が
適当である。抗体を固定化する担体の材質としてはセル
ロース、セファデックス、セファロース等の多糖類、合
成繊維または合成樹脂など公知のものが使用されるが、
固定化の安定性、方法の簡便性、人体への応用性からセ
ルロースまたはナイロンが好ましい。担体の形態として
は、体液の流通性等の理由から不織布、織布、綿あるい
は糸が好ましい。ここで不織布にはp紙状のものも含め
る。
本発明のDES−I除去剤を用いて、ガン患者体液中か
らDBS−Iを除去するに際しては、それ自体公知の方
法を使用することができる。即ち、体外循環により患者
体液を外へ導き出し、本発明のDES−I除去剤を充填
した装置内キ通過させた後、再び体液を患者体内に戻す
ことによって体液中のDES−Iを除去することができ
る。体液を除去装置に導く場合、血液を直接嗜いてもよ
いし、あらかじめp過装置、遠心装置により、血球と血
漿とに分離し、血漿のみを除去装置に導いてもよい。除
去装置としては、DES−I除去剤を層状あるいはラン
ダムにカラムに充填して連続的に処理司能としたもの、
ちるいはDES−I除去剤を一般容器に入れたり、血流
バッグなどの密封袋に入れたシしてパッチ処理としたも
のが使用される。さらに、この除去装置には、本発明の
DBS−I除去剤と組合せて他の公知の免疫抑制物質除
去剤例えばZエリチン除去剤を充填し、治療効果を一層
高めることもできる。
らDBS−Iを除去するに際しては、それ自体公知の方
法を使用することができる。即ち、体外循環により患者
体液を外へ導き出し、本発明のDES−I除去剤を充填
した装置内キ通過させた後、再び体液を患者体内に戻す
ことによって体液中のDES−Iを除去することができ
る。体液を除去装置に導く場合、血液を直接嗜いてもよ
いし、あらかじめp過装置、遠心装置により、血球と血
漿とに分離し、血漿のみを除去装置に導いてもよい。除
去装置としては、DES−I除去剤を層状あるいはラン
ダムにカラムに充填して連続的に処理司能としたもの、
ちるいはDES−I除去剤を一般容器に入れたり、血流
バッグなどの密封袋に入れたシしてパッチ処理としたも
のが使用される。さらに、この除去装置には、本発明の
DBS−I除去剤と組合せて他の公知の免疫抑制物質除
去剤例えばZエリチン除去剤を充填し、治療効果を一層
高めることもできる。
次に添伺図面を参照しつつ、本発明のDES−I除去剤
を使用してガン患者血液中からDES−Iを除去する装
置について説明する。
を使用してガン患者血液中からDES−Iを除去する装
置について説明する。
第1図は該DES−1除去装置の溝数の一例を示す図で
ある。第1図にみられるように、該装置は、分離器(1
)、該分離器へ供給する血液の流量制御器(2)、該分
離器の血漿流出口に始端を有し、血液流路上の上記分離
器の下流位置に終端を有する血漿流路(3)、該血漿流
路上に配置されたDBS−I除去部(4)および血漿の
定量送液制御器(5)からなる。血液は流量制御器(2
)によって定量されて分離器(1)に供給され、分離器
(1)に内蔵されフンー血球血漿分離用p過膜によって
血漿が一部血液から分離される。分離された血漿は分離
器(1)の血漿流出口から血漿路(3)を通ってDES
−I除去部(4)に入り、ここで担体に担持されたDE
S−I抗体の作用V(より血漿中のDES−Iが除去さ
れる。血漿は定量送液制御器(5)によって血漿流路(
3)中を送液され、再び血液に合流する。
ある。第1図にみられるように、該装置は、分離器(1
)、該分離器へ供給する血液の流量制御器(2)、該分
離器の血漿流出口に始端を有し、血液流路上の上記分離
器の下流位置に終端を有する血漿流路(3)、該血漿流
路上に配置されたDBS−I除去部(4)および血漿の
定量送液制御器(5)からなる。血液は流量制御器(2
)によって定量されて分離器(1)に供給され、分離器
(1)に内蔵されフンー血球血漿分離用p過膜によって
血漿が一部血液から分離される。分離された血漿は分離
器(1)の血漿流出口から血漿路(3)を通ってDES
−I除去部(4)に入り、ここで担体に担持されたDE
S−I抗体の作用V(より血漿中のDES−Iが除去さ
れる。血漿は定量送液制御器(5)によって血漿流路(
3)中を送液され、再び血液に合流する。
第2図は、DES−I除去部の構成の一例を示す断面図
である。この除去部は両端に人口(6)および出口(7
)を有する容器(8)とその内部に収容されたDES−
■除去剤(9)と、入口(6)および出口(7)にDE
S−I除去剤(9)を挾んで設けられたフィルター(1
(1)からなる。
である。この除去部は両端に人口(6)および出口(7
)を有する容器(8)とその内部に収容されたDES−
■除去剤(9)と、入口(6)および出口(7)にDE
S−I除去剤(9)を挾んで設けられたフィルター(1
(1)からなる。
フィルターαOはDES−I除去剤(9)の担体破片等
が血液に入り体内に流れ込むのを防ぐために設けられて
いる。
が血液に入り体内に流れ込むのを防ぐために設けられて
いる。
次に実施例をあげて本発明をさらに詳細に説明する。
A、DES−Iの調製
(1) 胃ガン患者腹水からの調製
前ガ゛ン患者から採取した腹水を遠心分離にかけ、固形
分を除き、−F−澄液をP■(8,01002Mリン酸
緩衝液に対して透析し、その内液を得る。かクシ7て得
られた内液を上記緩衝液であらかじめ平衡化したDEA
E−セルIコース(ワットマン社製DE−52)カラム
にかけ、同緩衝液で十分洗浄する。
分を除き、−F−澄液をP■(8,01002Mリン酸
緩衝液に対して透析し、その内液を得る。かクシ7て得
られた内液を上記緩衝液であらかじめ平衡化したDEA
E−セルIコース(ワットマン社製DE−52)カラム
にかけ、同緩衝液で十分洗浄する。
次に0.02Mリン酸緩衝1(p118.0)に1M食
塩を加えた溶媒をカラムに流し、タンパクを溶離する。
塩を加えた溶媒をカラムに流し、タンパクを溶離する。
得られた溶離液をその1まあるいは適当にセントリフロ
ー(アミコン・ファースト・リミテ。
ー(アミコン・ファースト・リミテ。
ド社製)で濃縮した後、あらかじめ0.02 M !J
ン酸緩衝液(p)(8,0)で平衡化(−だセフアゾ、
クスG−200(ファルマシア社製)のカラムにかけ、
同緩衝液で展開し、最初のUV吸収ピーク部分を集める
。これをpt(4〜6のクロマトフオーカシングにかけ
、pH4,Q付近のピーク部分を集める。得られた試料
中に含まれるポリバッファーをセフアゾ。
ン酸緩衝液(p)(8,0)で平衡化(−だセフアゾ、
クスG−200(ファルマシア社製)のカラムにかけ、
同緩衝液で展開し、最初のUV吸収ピーク部分を集める
。これをpt(4〜6のクロマトフオーカシングにかけ
、pH4,Q付近のピーク部分を集める。得られた試料
中に含まれるポリバッファーをセフアゾ。
クスG−150にかけ、最初に溶出されるUV吸収のピ
ーク部゛分を集め、これをDBS−Iとする。これらの
ステッノで得られる両分は、次に記すPHAによるリン
・3球幼若化を抑制する活性を測定して抑制活性を持つ
両分として分離された。腹水100 ml(総タンハク
量4300m9)からDES−I 503 m9が得ら
れた。
ーク部゛分を集め、これをDBS−Iとする。これらの
ステッノで得られる両分は、次に記すPHAによるリン
・3球幼若化を抑制する活性を測定して抑制活性を持つ
両分として分離された。腹水100 ml(総タンハク
量4300m9)からDES−I 503 m9が得ら
れた。
(2) 胃ガン患者血漿からの調製
胃ガン患者から採取した血漿に0.01M塩化カルシウ
ム液を適当量加え、生じた沈澱を遠心除去する。得られ
た上澄液を0.02M’Jン酸緩衝液(p’ 8.0
)に対して透析し、透析内液を上記(1)と全く同様に
処理してDES−Iを得た。血漿100 m/!(総タ
ンパク量7400my)からDES−I 875 ”i
7が得られた。
ム液を適当量加え、生じた沈澱を遠心除去する。得られ
た上澄液を0.02M’Jン酸緩衝液(p’ 8.0
)に対して透析し、透析内液を上記(1)と全く同様に
処理してDES−Iを得た。血漿100 m/!(総タ
ンパク量7400my)からDES−I 875 ”i
7が得られた。
B、 PHAによるリン・ぐ球幼若化抑制活性の測定
方法および活性 ヒト末梢血リンパ球を10%ウシ胎児血清を含むRPM
I−1640培地で1.0X106個細胞/m7!に調
整する。これにPHAを15μt/mlとなるように加
゛え・同時に試料を加え、54時間培養する。その後3
H−TdRを加え18時間培養し、’H−TdRのリン
パ球へのとりこみ抑制を対照と比較して測定する。
方法および活性 ヒト末梢血リンパ球を10%ウシ胎児血清を含むRPM
I−1640培地で1.0X106個細胞/m7!に調
整する。これにPHAを15μt/mlとなるように加
゛え・同時に試料を加え、54時間培養する。その後3
H−TdRを加え18時間培養し、’H−TdRのリン
パ球へのとりこみ抑制を対照と比較して測定する。
DES−Iの抑制活性を表1に示す。表1に示すように
、抑制活性は0.5 m9/−濃度でいずれの試料でも
ほぼioo%と高い。
、抑制活性は0.5 m9/−濃度でいずれの試料でも
ほぼioo%と高い。
表 1
DES−I標品のPHAによる974球幼若化抑制C1
等電点 DES−Iを35から70のPHグラディエンドを持つ
平板等電点電気泳動にかけたところ、pH4,1〜48
のところに数本のバンドを形成した。従って・DBS−
Iは等電点が4.1〜48の範囲内にあるものである。
等電点 DES−Iを35から70のPHグラディエンドを持つ
平板等電点電気泳動にかけたところ、pH4,1〜48
のところに数本のバンドを形成した。従って・DBS−
Iは等電点が4.1〜48の範囲内にあるものである。
D、遅延型アレルギー反応抑制活性の測定方法および活
性 Ba1b/c雄5週令マウスの腹腔に生理食塩水05−
に溶かしたDES−I 2 mqを投与する。対照は生
理食塩水0.5−を腹腔内に投与したものとする。翌日
生理食塩水に懸濁したヒツノ赤面球(SRBC) 5
X106個を腹腔内に投与する。DES−I投与後4日
目に5×108個5RBCをマウス足部に注射し、その
翌日足前の肥大をシックネスケ゛−ジで測定する。その
結果を表2に平均値で示す。なお平均値は6匹マウスに
よるものである。
性 Ba1b/c雄5週令マウスの腹腔に生理食塩水05−
に溶かしたDES−I 2 mqを投与する。対照は生
理食塩水0.5−を腹腔内に投与したものとする。翌日
生理食塩水に懸濁したヒツノ赤面球(SRBC) 5
X106個を腹腔内に投与する。DES−I投与後4日
目に5×108個5RBCをマウス足部に注射し、その
翌日足前の肥大をシックネスケ゛−ジで測定する。その
結果を表2に平均値で示す。なお平均値は6匹マウスに
よるものである。
表 2
DES−I標品の遅延型足踵反応抑制
表2から2m9/マウス投与により、DBS−Iは顕著
に遅延型アレルギー反応を抑制することがわかる。
に遅延型アレルギー反応を抑制することがわかる。
Dと同様にして、マウス1匹ちたりDES−I 2 m
9を腹腔内設すし、翌日、5RBCを5×106個同様
に投与する。この[]より5日後口径を摘出し、膵臓内
細胞をと9出し、抗体産生細胞をカニンガム(Cuni
ngham)法(Immunology 14 、59
9〜600 + 1968 )によってPFCを数える
。結果を表3に・示す。
9を腹腔内設すし、翌日、5RBCを5×106個同様
に投与する。この[]より5日後口径を摘出し、膵臓内
細胞をと9出し、抗体産生細胞をカニンガム(Cuni
ngham)法(Immunology 14 、59
9〜600 + 1968 )によってPFCを数える
。結果を表3に・示す。
DES−Iはこの活性も抑制することがわかる。
表 3
DES−Iの液性抗体産生(PFC)抑制御試料(27
V、z’?ウス)1PFC/106牌臓細胞1′抑制率
%) 1□ F、腫瘍増殖促進活性測定法および活性ICRマウス(
雄、5週令)の腹腔内にDES−Iを前記同様に1匹あ
たり2m9投与し、同時にザルコーマ180細胞を背部
皮下に106個移植する。3週間後に成長した腫瘍組織
を切りと9、その重量を測定する。結果を表4に示す。
V、z’?ウス)1PFC/106牌臓細胞1′抑制率
%) 1□ F、腫瘍増殖促進活性測定法および活性ICRマウス(
雄、5週令)の腹腔内にDES−Iを前記同様に1匹あ
たり2m9投与し、同時にザルコーマ180細胞を背部
皮下に106個移植する。3週間後に成長した腫瘍組織
を切りと9、その重量を測定する。結果を表4に示す。
表4から、DBS−Iが腫瘍増殖を促進することが明ら
かである。
かである。
表 4
DBS4の腫瘍増殖促進活性
G、抗体の製法
(1) ウサギへの免疫による抗体取得常法によって
DES−Iをウサギに投与して免疫し、最終免疫1週間
後に全採血する。全血から血清を分離し、硫安分画によ
るγ−グロブリン分画を分離する。かくして得られた分
画を0. OI M IJン酸緩衝液(pH8,0)で
平衡化したDEAE−セルロースカラムにかけ、素通シ
画分を集める。これを濃縮したのち、セファデックスG
−1000ケゝルクロマトグラフイーにかけ、最初のピ
ークを集め、抗体標品とする。
DES−Iをウサギに投与して免疫し、最終免疫1週間
後に全採血する。全血から血清を分離し、硫安分画によ
るγ−グロブリン分画を分離する。かくして得られた分
画を0. OI M IJン酸緩衝液(pH8,0)で
平衡化したDEAE−セルロースカラムにかけ、素通シ
画分を集める。これを濃縮したのち、セファデックスG
−1000ケゝルクロマトグラフイーにかけ、最初のピ
ークを集め、抗体標品とする。
(2)融合細胞による抗体取得
Ba1b/cマウス1匹あたり500γのDES−Iを
計3回投与し、最終免疫1週間後膵臓を摘出する。膵臓
細胞5X107個と8−アザグアニン耐性x63−Ag
8653マウス骨髄腫細胞をポリエチレングリコール1
000を用いて常法に従って融合させ、常法によp H
AT培地を用いて融合細胞のみを選択的に培養する。次
いでRPMI 1640培地(10チウシ胎児血清入り
)で培養する。この融合細胞のうち、抗体産生細胞を同
種マウス胸腺繊維芽細胞を用いたフィーダーレイヤー法
によりクローニングする。
計3回投与し、最終免疫1週間後膵臓を摘出する。膵臓
細胞5X107個と8−アザグアニン耐性x63−Ag
8653マウス骨髄腫細胞をポリエチレングリコール1
000を用いて常法に従って融合させ、常法によp H
AT培地を用いて融合細胞のみを選択的に培養する。次
いでRPMI 1640培地(10チウシ胎児血清入り
)で培養する。この融合細胞のうち、抗体産生細胞を同
種マウス胸腺繊維芽細胞を用いたフィーダーレイヤー法
によりクローニングする。
クローン細胞は浮遊培養によって培養し、培養液を集め
、培養液より上記(1)と同様にして抗体標品を調製す
る。
、培養液より上記(1)と同様にして抗体標品を調製す
る。
H6抗体の担体への固定化法
(1) ナイロン不織布への固定化
ナイロン不織布(富士紡社製) 2 V−をツメチル硫
酸200 mlに浸漬し、100℃で4分間加熱する。
酸200 mlに浸漬し、100℃で4分間加熱する。
これを氷水浴中で急冷し、冷メタノール50〇−で5回
洗浄する。メタノールをよく切った犬イ1、ロン不織布
にリン酸緩衝* (P)17.4 ) 40−に溶かし
た1チ抗体標品を加え、4℃で1日培養する。
洗浄する。メタノールをよく切った犬イ1、ロン不織布
にリン酸緩衝* (P)17.4 ) 40−に溶かし
た1チ抗体標品を加え、4℃で1日培養する。
その後リン酸緩衝液で洗浄し、リン酸緩衝液中1Mグリ
シンで処理する。ナイ「2ン不織布1g−あたり約30
7n9の抗体標品が結合する。織物(ナイロン製濾過膜
)、ナイロン糸でもほぼ同様の結果が得られた。
シンで処理する。ナイ「2ン不織布1g−あたり約30
7n9の抗体標品が結合する。織物(ナイロン製濾過膜
)、ナイロン糸でもほぼ同様の結果が得られた。
(2)P紙およびレイヨン不織布への固定化東洋p紙A
51あるいはレイヨン不織布(工材化学社製)2Iを常
法によp pi(11〜12で臭化シアンを用いて活性
化する。これを0.1M重炭酸ソーダ水溶液でよく洗浄
する。これに0.1 M IJン酸緩衝液(pH8,4
)に溶かした1チ抗体標品20m1を加え、5℃で1日
培養する。その後1Mエタノールアミン(pl(9,0
)で処理し、蒸留水、0.5Mリン酸緩衝液(pH6,
0)および蒸留水で順次十分に洗浄する。この方法によ
り、p紙11あたり25m?、レイヨン不織布IIあた
p33m9の抗体標品が固定化された。脱脂綿を用いた
ところ、脱脂綿11あた。941mゾが固定された。涙
紙やレイヨン不織布は細かい繊維が出やすいため、使用
゛に際しては、それを除去するフィルターが必要とされ
る。
51あるいはレイヨン不織布(工材化学社製)2Iを常
法によp pi(11〜12で臭化シアンを用いて活性
化する。これを0.1M重炭酸ソーダ水溶液でよく洗浄
する。これに0.1 M IJン酸緩衝液(pH8,4
)に溶かした1チ抗体標品20m1を加え、5℃で1日
培養する。その後1Mエタノールアミン(pl(9,0
)で処理し、蒸留水、0.5Mリン酸緩衝液(pH6,
0)および蒸留水で順次十分に洗浄する。この方法によ
り、p紙11あたり25m?、レイヨン不織布IIあた
p33m9の抗体標品が固定化された。脱脂綿を用いた
ところ、脱脂綿11あた。941mゾが固定された。涙
紙やレイヨン不織布は細かい繊維が出やすいため、使用
゛に際しては、それを除去するフィルターが必要とされ
る。
■、発明の作用効果
本発明のDBS−I除去剤をガン患者の体液と接、触せ
しめることにより、該体液中の免疫抑制物質DES−I
を容易に除去することができる。
しめることにより、該体液中の免疫抑制物質DES−I
を容易に除去することができる。
次に試験例を掲げて本発明の効果を具体的に示す。
試験例
本発明のDES−I除去剤を充填したカラムにガン患者
から採取した体液試料を通した。カラムの入口と出口に
おける試料中のDES−I濃度を一元放射免疫拡散法で
定量した。結果を表5に示す。
から採取した体液試料を通した。カラムの入口と出口に
おける試料中のDES−I濃度を一元放射免疫拡散法で
定量した。結果を表5に示す。
表 5
体液中DES−Iの吸着除去結果
第1図は、本発明のDES−I除去剤を使用してガン患
者血液中からDES−Iを除去する装置の構成の一例を
示し、第2図は上記装置を構成するDES−I除去部の
一例を示す断面図である。 1・・・分離器、2・・・流量制御器、3・・・血漿流
路、4・・・DES−I除去部、5・・・血漿定量送液
制御器、6・・・入口、7・・・出口、8・・・容器、
9・・・DES−I除去剤、10・・・フィルター。 第1図 第2図 手続補正書(自発) 昭和56年11月24日 特許庁長官 島田春樹 殿 1 事件の表示 昭和56升 特許 願第104379号2 発明の名称
体液中の免疫抑制物質DES−1除去剤3 補正をす
る者 事件との関係 特許出願人 4、代理人 (1)明細書第4頁第1行目の 「・・・溶出される。得られた溶離液・・」を 「・・・溶出される溶離液・・・」 と訂正する。 (2) 同第8頁下から第4行目〜第3行目の「・・
・ポリバッファーをセファ−f、り・」を 「・・・ポリバッファーを除去するためセファクス」 と訂正する。 (3) 同第14頁第10行〜第11行の「面J性x
63−Ag 8.653マウス」を 「耐性X63−Ag3・653マウス」と訂正する。 以
者血液中からDES−Iを除去する装置の構成の一例を
示し、第2図は上記装置を構成するDES−I除去部の
一例を示す断面図である。 1・・・分離器、2・・・流量制御器、3・・・血漿流
路、4・・・DES−I除去部、5・・・血漿定量送液
制御器、6・・・入口、7・・・出口、8・・・容器、
9・・・DES−I除去剤、10・・・フィルター。 第1図 第2図 手続補正書(自発) 昭和56年11月24日 特許庁長官 島田春樹 殿 1 事件の表示 昭和56升 特許 願第104379号2 発明の名称
体液中の免疫抑制物質DES−1除去剤3 補正をす
る者 事件との関係 特許出願人 4、代理人 (1)明細書第4頁第1行目の 「・・・溶出される。得られた溶離液・・」を 「・・・溶出される溶離液・・・」 と訂正する。 (2) 同第8頁下から第4行目〜第3行目の「・・
・ポリバッファーをセファ−f、り・」を 「・・・ポリバッファーを除去するためセファクス」 と訂正する。 (3) 同第14頁第10行〜第11行の「面J性x
63−Ag 8.653マウス」を 「耐性X63−Ag3・653マウス」と訂正する。 以
Claims (2)
- (1) DES−I抗体を担体に担持させてなること
を特徴とする体液中の免疫抑制物質DES−I除去剤。 - (2)担体が不織布、織布、綿あるいは糸である特許請
求の範囲第1項記載の免疫抑制物質DES−I除去剤。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP56104379A JPS587256A (ja) | 1981-07-06 | 1981-07-06 | 体液中の免疫抑制物質des−i除去剤 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP56104379A JPS587256A (ja) | 1981-07-06 | 1981-07-06 | 体液中の免疫抑制物質des−i除去剤 |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPS587256A true JPS587256A (ja) | 1983-01-17 |
Family
ID=14379133
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP56104379A Pending JPS587256A (ja) | 1981-07-06 | 1981-07-06 | 体液中の免疫抑制物質des−i除去剤 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JPS587256A (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS59151964A (ja) * | 1983-02-17 | 1984-08-30 | 武田薬品工業株式会社 | 特異的IgE除去物質および装置 |
JPS61172563A (ja) * | 1984-11-16 | 1986-08-04 | アニサ メデイカル インコ−ポレ−テツド | 哺乳動物の血液から免疫反応抑制成分を取除くための方法ならびに系統 |
JPH01265972A (ja) * | 1988-10-29 | 1989-10-24 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 体液中の有害成分の除去方法 |
-
1981
- 1981-07-06 JP JP56104379A patent/JPS587256A/ja active Pending
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS59151964A (ja) * | 1983-02-17 | 1984-08-30 | 武田薬品工業株式会社 | 特異的IgE除去物質および装置 |
JPH0313905B2 (ja) * | 1983-02-17 | 1991-02-25 | Takeda Chemical Industries Ltd | |
JPS61172563A (ja) * | 1984-11-16 | 1986-08-04 | アニサ メデイカル インコ−ポレ−テツド | 哺乳動物の血液から免疫反応抑制成分を取除くための方法ならびに系統 |
JPH01265972A (ja) * | 1988-10-29 | 1989-10-24 | Kanegafuchi Chem Ind Co Ltd | 体液中の有害成分の除去方法 |
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