JPS58211659A - 免疫比濁法による血清ｃｒｐの簡易迅速定量法 - Google Patents
免疫比濁法による血清ｃｒｐの簡易迅速定量法Info
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- JPS58211659A JPS58211659A JP9403882A JP9403882A JPS58211659A JP S58211659 A JPS58211659 A JP S58211659A JP 9403882 A JP9403882 A JP 9403882A JP 9403882 A JP9403882 A JP 9403882A JP S58211659 A JPS58211659 A JP S58211659A
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- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は血清ＣＲＰの簡易迅速定量法に係り、殊に免疫
比濁法を利用する定量法に係る。
比濁法を利用する定量法に係る。
周知のように、ＣＲＰは急性相反応性血漿蛋白成分の一
種であシ、糊々の炎症性及び組織崩壊性疾患に際して出
現する非特異旧蛋白成分てあって、生体に上記疾患が生
じた場合に６〜２４時間以内の短時間で増喰しその回復
に餅ない減酸消失すると謂う特徴を有しており、従って
その検査は臨床上不可欠とされている。
種であシ、糊々の炎症性及び組織崩壊性疾患に際して出
現する非特異旧蛋白成分てあって、生体に上記疾患が生
じた場合に６〜２４時間以内の短時間で増喰しその回復
に餅ない減酸消失すると謂う特徴を有しており、従って
その検査は臨床上不可欠とされている。
従来におけるＣＲＰ検査法としてはルーチン検査法例え
１毛細管法、ラテックス凝集法、−元免疫拡散法等が使
用されて来たが、これら測足法ではＣＲＰ値の変動を時
間の経過と共に定量的に把握することが不可能であった
り、測足感ｅ、精度や操作時間等の問題により特に低値
域におけるＣＲＰ値の変動の把握に難点がある等の欠陥
があった。
１毛細管法、ラテックス凝集法、−元免疫拡散法等が使
用されて来たが、これら測足法ではＣＲＰ値の変動を時
間の経過と共に定量的に把握することが不可能であった
り、測足感ｅ、精度や操作時間等の問題により特に低値
域におけるＣＲＰ値の変動の把握に難点がある等の欠陥
があった。
しかしながら最近では、検出方法の進歩によ一シ血漿中
の種々の微量蛋白が定量的に測定し得るようになりつつ
ある。この検出方法の代表例が比濁法であり、既述のル
ーチン横歪法に代って普及しつつある。
の種々の微量蛋白が定量的に測定し得るようになりつつ
ある。この検出方法の代表例が比濁法であり、既述のル
ーチン横歪法に代って普及しつつある。
但し近年普及して米たこの比濁法はレーザー比濁計等を
用いているので高感度ではあるが、その有用性について
は絶対的なものとは云えないのが実イｆｆである。蓋し
、機器が極めて高価であるのみならず、測定ａ度や測定
範囲に問題が′ｔｂｖ１又高感度故に試薬や検体血清の
澄明度に特別の注意を払う必要があるのでそのＨ１ｒ処
理が煩雑となる等の欠点が存在するからであり、更には
レーザー比濁法は脂濁血清、黄痙血清又は溶血血清を検
体とする場合に不適当であシ、又不活化しない血清では
可成シのバラツキの出ることが報告されているからであ
る。
用いているので高感度ではあるが、その有用性について
は絶対的なものとは云えないのが実イｆｆである。蓋し
、機器が極めて高価であるのみならず、測定ａ度や測定
範囲に問題が′ｔｂｖ１又高感度故に試薬や検体血清の
澄明度に特別の注意を払う必要があるのでそのＨ１ｒ処
理が煩雑となる等の欠点が存在するからであり、更には
レーザー比濁法は脂濁血清、黄痙血清又は溶血血清を検
体とする場合に不適当であシ、又不活化しない血清では
可成シのバラツキの出ることが報告されているからであ
る。
斯くて、本発明の目的は、免疫比濁法を利用するもので
はあるが、特殊にして高価な機器を必要とせずに、安定
且つ良好な稍度にて実施し得る血清ＣＲＰの比較的迅速
な足置法を提供することである。
はあるが、特殊にして高価な機器を必要とせずに、安定
且つ良好な稍度にて実施し得る血清ＣＲＰの比較的迅速
な足置法を提供することである。
本発明によれば、この目的は、被験液（Ｔ）及び試１ｆ
ｆ（ＲＢ）並びにこれらのブランク液（ＳＢ及びＢＢ）
を調整し、これらをインキュベートしてプラトーに達せ
しめた後に、それぞれの液の吸光度（ＡＴ。
ｆ（ＲＢ）並びにこれらのブランク液（ＳＢ及びＢＢ）
を調整し、これらをインキュベートしてプラトーに達せ
しめた後に、それぞれの液の吸光度（ＡＴ。
ＡＲＢ 、 ＡＳＢ及びＡＢＢ ）を測足し、ＣＲＰに
よる検体血清の吸光度（ＡｃｔζＰ）を式 ％式％） により算定し、一方上記と同様に但し血ｆｆｆの代シに
ＣＲＰ標準液を用いて吸光度−ＣＲＰ イｉｉの検量線
を作成し、上記算定吸光度値に該当するＣＲＰ １ｉｎ
を上記検量線から求めることによシ達成される。
よる検体血清の吸光度（ＡｃｔζＰ）を式 ％式％） により算定し、一方上記と同様に但し血ｆｆｆの代シに
ＣＲＰ標準液を用いて吸光度−ＣＲＰ イｉｉの検量線
を作成し、上記算定吸光度値に該当するＣＲＰ １ｉｎ
を上記検量線から求めることによシ達成される。
抗原−抗体複合体は光を消散し或は吸収するが、同じ濁
度（吸光度）は抗原過剰状態でも或いは抗体過剰状態で
も得られる可能性がある。免疫比濁法による血清ＣＲＰ
の定量に際しては吸光度測定を抗体過剰状態で行ない抗
原過剰状態のものとは之を区別せねばならない。従って
、このために！″ｆ特異性が高く且つ高力価の抗血清が
必要とされる。
度（吸光度）は抗原過剰状態でも或いは抗体過剰状態で
も得られる可能性がある。免疫比濁法による血清ＣＲＰ
の定量に際しては吸光度測定を抗体過剰状態で行ない抗
原過剰状態のものとは之を区別せねばならない。従って
、このために！″ｆ特異性が高く且つ高力価の抗血清が
必要とされる。
本発明方法に使用されるこの棹の抗血清としては例えば
と） ＣＲＰヤギ血清から得られたγ−′グロブリン分
画かあ不。
と） ＣＲＰヤギ血清から得られたγ−′グロブリン分
画かあ不。
次に、試薬、標準液測足方法、結果等に関連して本発明
方法を更に詳細に説明する。
方法を更に詳細に説明する。
ａ）試薬及び標準液
１）緩衝液
１）抗血イｎ希釈緩尚液
１［ＥＰＥＳ ｂｕｆｆｅｒ ｐＨ７，１０，０１Ｍ
ＩＩＥＰＥＳ Ｏ，Ｉ Ｍ ＮＡＣＡ 、 Ｑ、１％ＮａＮ３１１）
検体緩衝液 ＰＥＧ ６０００ ３％ Ｔｗｅｅｎ ２０ ０；２％ １１１）検体ブランク緩衝液 （抗血７＃希釈緩衝液を検体緩衝液で１１倍に希釈した
もの） ２）希釈液 ＣＲＰ標準液及び検体の希釈用であって、生理食塩水を
ベースとする３％ウシアルブミン／夜とヒトプール血清
（ＣＲＰ除去）との７対３混液 ３）生理食塩液 ４）ＣＲＰ１次標準液 ガン患者のプール腹水からイオ７父侯りａマド、ゲルｐ
過でＣＲＰを純化したもの。その純度はアクリルアミド
電気泳動法、オウチターロニイ法、免疫電気泳動法で確
認され、こ０ＣＲＰ標準液の１贋度は蛋白定１會、フイ
ニテイクロマト及び５ＲＩＤ法によシ決定された。。
ＩＩＥＰＥＳ Ｏ，Ｉ Ｍ ＮＡＣＡ 、 Ｑ、１％ＮａＮ３１１）
検体緩衝液 ＰＥＧ ６０００ ３％ Ｔｗｅｅｎ ２０ ０；２％ １１１）検体ブランク緩衝液 （抗血７＃希釈緩衝液を検体緩衝液で１１倍に希釈した
もの） ２）希釈液 ＣＲＰ標準液及び検体の希釈用であって、生理食塩水を
ベースとする３％ウシアルブミン／夜とヒトプール血清
（ＣＲＰ除去）との７対３混液 ３）生理食塩液 ４）ＣＲＰ１次標準液 ガン患者のプール腹水からイオ７父侯りａマド、ゲルｐ
過でＣＲＰを純化したもの。その純度はアクリルアミド
電気泳動法、オウチターロニイ法、免疫電気泳動法で確
認され、こ０ＣＲＰ標準液の１贋度は蛋白定１會、フイ
ニテイクロマト及び５ＲＩＤ法によシ決定された。。
５）ＣＲＰ２次標準液
プール腹水から硫酸アンモニウム分画によシ得た粗ＣＲ
Ｐを希釈液で一定の磯度に希釈したものであって、その
良度Ｖｉ１次標準液を用い５ＲＩＤ法により決定された
。この２次標準液は４℃に維持する場合には少なくとも
６ケ月間に亘り安定である。
Ｐを希釈液で一定の磯度に希釈したものであって、その
良度Ｖｉ１次標準液を用い５ＲＩＤ法により決定された
。この２次標準液は４℃に維持する場合には少なくとも
６ケ月間に亘り安定である。
６）抗ＣＲＰ血清
抗と） ＣＲＰヤギ血清から得たｒ−グロブリン分画を
抗血清希釈緩衝液に溶解したものであって、その特異件
はオウチターロニイ法及び免疫電気泳動法によシ確認さ
れた。
抗血清希釈緩衝液に溶解したものであって、その特異件
はオウチターロニイ法及び免疫電気泳動法によシ確認さ
れた。
７）抗血清原液
抗血清希釈緩衝液により２倍に希釈された抗ＣＲＰ血清
。この原液は４℃に維持する場合には少なくとも１２ケ
月間安定である。
。この原液は４℃に維持する場合には少なくとも１２ケ
月間安定である。
８）抗血清使用液
検体緩衝／ｒ［により抗血清原液を１１倍に希釈し、ミ
リポアフィルタ（ポアサイズ０．４５μｍ）で濾過した
もの。
リポアフィルタ（ポアサイズ０．４５μｍ）で濾過した
もの。
ｂ）測定法
下記表
検体血清５０μｍ ５０μｍ−一
抗血渭使用液 ２．０ ｍｅ −２，０ｍｌ−
に見られる４種の液を調製し、６液を３７℃でインキュ
ベートした後に波長３４０ｎｍでの吸光度を測定し、検
体血清の吸光度を式 ％式％） により算定し、一方上記と同様にして但し血清の代りに
ＣＲＰ ２次標準液を用いて操作して吸光［−ＣＲＰ濃
度に関する検量線を作成し、上記算定吸光度値に該当す
るＣＲＰ値を上記０２情糾を利用して求めることにより
測定する。
に見られる４種の液を調製し、６液を３７℃でインキュ
ベートした後に波長３４０ｎｍでの吸光度を測定し、検
体血清の吸光度を式 ％式％） により算定し、一方上記と同様にして但し血清の代りに
ＣＲＰ ２次標準液を用いて操作して吸光［−ＣＲＰ濃
度に関する検量線を作成し、上記算定吸光度値に該当す
るＣＲＰ値を上記０２情糾を利用して求めることにより
測定する。
Ｃ）結果
１）経時変化
ＣＲＰ ２次標準液を用いそのＣＲＰ ４度が１６４Ｗ
／２（ａ） 、 ６３ ｑ／１（ｂ） 、１５ ”
ｆ／１（ｃ）及び４η／１（ｄ）の場合の吸光度変化（
ＡＴ −ＡＢＢ ）にライて、又ＡＲＢ −ＡＢＢ （
ｅ）について１２０分間に亘シ追究した処、反応は略々
１５分間で一定となり、その後は吸光度が変化しないこ
とが判明した（第１図参照）。これはインキュベート時
間が１５分程度で充分なことを示している。
／２（ａ） 、 ６３ ｑ／１（ｂ） 、１５ ”
ｆ／１（ｃ）及び４η／１（ｄ）の場合の吸光度変化（
ＡＴ −ＡＢＢ ）にライて、又ＡＲＢ −ＡＢＢ （
ｅ）について１２０分間に亘シ追究した処、反応は略々
１５分間で一定となり、その後は吸光度が変化しないこ
とが判明した（第１図参照）。これはインキュベート時
間が１５分程度で充分なことを示している。
１１）沈降素曲線
抗血清使用液（ｆ）及び希釈抗血清使用液（ｇ）（検体
ブランク緩衝液にて抗血清使用液を１７２に希釈したも
の）を用いて沈降素曲線を追究した処、第２図に見られ
る通りであり、曲線は比較的緩やかであり、従ってこの
抗血清は免疫比濁法に使用するに当って充分な高力価を
有し且つ測定範囲の汎いものであることが判る。
ブランク緩衝液にて抗血清使用液を１７２に希釈したも
の）を用いて沈降素曲線を追究した処、第２図に見られ
る通りであり、曲線は比較的緩やかであり、従ってこの
抗血清は免疫比濁法に使用するに当って充分な高力価を
有し且つ測定範囲の汎いものであることが判る。
ｌ１１）検量線
ＣＲＰ ２次標準液を用いてそのＣＲＰ 濃度が８．０
，２９゜５ 、６５．０ 、１１４．５ 、１６４．０
及び２２０、Ｏｒ、’ｆ／ｌのものを調製し、１日１回
とし５日間に亘υ吸光度を測定し、その平均値をＣＲＰ
Ｈに関しニブロットした処、第３図に示される通シで
あり極めて安定した直線性が得られた。
，２９゜５ 、６５．０ 、１１４．５ 、１６４．０
及び２２０、Ｏｒ、’ｆ／ｌのものを調製し、１日１回
とし５日間に亘υ吸光度を測定し、その平均値をＣＲＰ
Ｈに関しニブロットした処、第３図に示される通シで
あり極めて安定した直線性が得られた。
尚ＣＲＰ ｆ［ｉが２２０η／を以上となると次第にス
ローゾを呈する。
ローゾを呈する。
Ｉｖ） 測定値と算定値との相関性
ＣＲＰ ２次標準液を希釈してＣＲＰ値が７段階の検体
（即ちＣＲＰ値が２２０．１６３．１２２゜６２．３６
．１７及び９ ｍＶｔ０もの）を調製し、測定値と算定
値との関係につき５回の平均値をグロットした処、第４
図に見られる通り安定した直線が得られた。
（即ちＣＲＰ値が２２０．１６３．１２２゜６２．３６
．１７及び９ ｍＶｔ０もの）を調製し、測定値と算定
値との関係につき５回の平均値をグロットした処、第４
図に見られる通り安定した直線が得られた。
このことは、本方法がＣＲＰ値が２２０ ｍｆ／を又は
それ以下の検体を良好な梢度で測定し得ることを示して
いる。
それ以下の検体を良好な梢度で測定し得ることを示して
いる。
Ｖ）干渉物質の影響
ビリルビン及びヘモグロビンを血清に添加して測定した
が、、これら添加物質がＣＲＰ値に及ばず影＃は第５図
（−）及び（ｂ）に示されるように殆んど見られなかっ
た。
が、、これら添加物質がＣＲＰ値に及ばず影＃は第５図
（−）及び（ｂ）に示されるように殆んど見られなかっ
た。
尚、脂濁血清、黄斗血清及び溶血血清に関する本方法に
よる測定値は次の６表に示される通り５ＲＩＤ法による
測定値と類似した値を示した（レーザー比濁法による測
定値とも相関関係の存在を示している。但し脂濁血清に
関してはレーザー比濁法では測定不能であった）。
よる測定値は次の６表に示される通り５ＲＩＤ法による
測定値と類似した値を示した（レーザー比濁法による測
定値とも相関関係の存在を示している。但し脂濁血清に
関してはレーザー比濁法では測定不能であった）。
これらの事実は、レーザー比濁法で必要とされる検体血
清の特別な前処理が、本発明では不要であることを如実
に示している（表中の数値の単位Ｆｉ■／ｌである）。
清の特別な前処理が、本発明では不要であることを如実
に示している（表中の数値の単位Ｆｉ■／ｌである）。
脂濁血（Ｎ検体
溶血血清検体
叙上のように、本発明方法では測定値と計１ｆｆｌとが
極めて良好な直線的相関関係を呈するので、機器として
分光光度計さえあれば血清ＣＲＰの定量測定が可能であ
り、これに検量線記憶、自動ブランク補正、プリントア
ウト等の装置が付縞していれば、その測定を迅速ならし
めることができ、更には測定自体の自動化が可能である
０
極めて良好な直線的相関関係を呈するので、機器として
分光光度計さえあれば血清ＣＲＰの定量測定が可能であ
り、これに検量線記憶、自動ブランク補正、プリントア
ウト等の装置が付縞していれば、その測定を迅速ならし
めることができ、更には測定自体の自動化が可能である
０
第１図はＣＲＰ ９度と吸光度との経時変化を示すグラ
フ、 第２図は抗血清液の沈降素曲線を示すグラフ、第３図は
検１に線をその経口ｉ１＋１Ｊ定＋−Ｖ）現性と共に示
すグラフ、 第４図は測定値と８１３９−値との関係を示すグラフ、
第５図は干渉物質のＣ’ＲＰ値に及はす影響を示すグラ
フであって、第５図（ａ）及び第５図（ｂ）は干渉物質
としてそれぞれビリルビン及びヘモグロビンを添加した
場合を示したグラフである。 特許出願人 日水表薬株式会社 第１図 第２閃 第４図 第５図 （？Ｌ）
（ｂ）ｅ ’ＪＩＬ、ｊ’ ７５Ｍ−重量
へＥ７”０ビｙｓｉ−加量手 続 補
正 ｆｌ（自発）昭和５７年７月３０日 特許庁長官 若 杉 和 夫 殿 １、事件の表示 昭和５７年特許願第９４０３８号 ２、発明の名称 免疫比濁法による血清ＣＲＰの簡易迅速定量法代表者小
林泰明 ５、補正の対象 （１； 本願明細１！１の特許ａｎ求のｎ・１コ囲を
別紙のとおり補正する。 （２１同第２向第１５行目に「微量蛋白・・・」とある
を、「微ｔ？ｌＴ白・・・」と補正する。 ｔ；３）同第３向第１８行目に「を調整し、」とあるな
、「を哨製し、」と補正する。 （４） 第４頁第２行目にｒＡｃｉｐ＝（Ａ丁−ＡＩ
ＩＩＢ）−（ＡＲＢ−Ａｎｎ）Ｊとあるを、「Ａｃｎｐ
＝ＡＴ−Ａｓｎ −（ＡＲＢ−ＡＢＭ）Ｊと補正する。 （５）同βｒ１５行目に「は例えばヒト０ＦＩＰヤギ血
清・・・」とあるを、「け例えば抗ヒｈｃＲＰヤギ血清
・・・」と補正する。 （６）同第５自第２０行目乃至＠６に第５行目に「オウ
チターロニイ法、・・・・・・・・・フイニテイクロマ
ト及び」とあるを、「オフタロニー法、免疫泳動法で確
認され、このＯＲＰ標準液の濃度ｅ工侍白定量、アフィ
ニティークロマトグラフィー及び」と補正する。 （７） 同＠６自第１４行目に「オウチターロニイ法
」とあるを、「オフタロニー法」と補正する。 （１） 被験液（Ｔ）及び試＄ （ＲＢ）並びにこれ
らのブランク液（日Ｒ及びＢＢ）６ｎ１Ｍ製し、こノ１
ら？インキユベートシてプラトーに達せしめた後に、そ
れぞれの静の吸光度（Ａ丁、ＡＲＢ、ＡＢＭ及びＡｎｎ
）？測定し、Ｃ！ＲＰによる検体血清の吸光＋ｆｆ、（
Ａｃｎｐ）を式％式％） により′算定し、一方上記と同様に但し血清の代りにＯ
ＲＰ榊準液を用いて吸光度−ＣＲＰ値の検殴ａｖｒ作成
し、上記算定吸光度値に該当するＣＲＰ値を上記検量線
から求めろことを特徴とする、免１１２．被濁法による
血清ＣＲＰの簡易迅速定量法。 手 続 補 正 魁自発ノ 昭和５７鈑８月２＋６ 特許庁喪家 若 杉 和 夫 殿 １、事件の表示 特願昭５７−９４０５８号２、発明の
名称 免疫比濁法による血清Ｃ）Ｌ Ｐ Ｃ）簡易迅速
定量法 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 東京都豊島区駒込２丁目５番１１号 日水製薬株式会社 代表者 小 林 泰 明 ４、イ（理 人 〒 １０５ 束冨都港区虎）門１丁目１１番７号 明細書の費許請求の範囲の欄 ６、補正の内科 （１１本願明細書の特許請求の範囲を別紙のとお補正す
る。 特許請求の範囲 （１１被験液（Ｔ）及び試薬／ＩＶ（ＲＢ）；Ｉしび【
でこれらのブランク液（ＳＲ及びＢＢ）を調製ｔ−７、
これらを４ンキユベートしてプラトーに達せしめた阪Ｏ
て、そｈぞれの液の吸光度（ＡＩ＝、Ａ、むＢ＠ＡＳＢ
及びＡｎｎ）を測定し、ＣＲＰによる検体血清の吸光度
（ＡＣＲＰ）を式 ％式％） により算定し、一方上記と同様に但し血清の代りにＣＲ
Ｐ標準液を用いて吸光度−ＣＲＰ値の検量線を作成し、
上記算定吸光度値に該当するＣＲＰ値を上記検量線から
末ぬること全特徴とする、免疫比濁法による血清ＣＲＰ
の簡易迅速定量法。 す
フ、 第２図は抗血清液の沈降素曲線を示すグラフ、第３図は
検１に線をその経口ｉ１＋１Ｊ定＋−Ｖ）現性と共に示
すグラフ、 第４図は測定値と８１３９−値との関係を示すグラフ、
第５図は干渉物質のＣ’ＲＰ値に及はす影響を示すグラ
フであって、第５図（ａ）及び第５図（ｂ）は干渉物質
としてそれぞれビリルビン及びヘモグロビンを添加した
場合を示したグラフである。 特許出願人 日水表薬株式会社 第１図 第２閃 第４図 第５図 （？Ｌ）
（ｂ）ｅ ’ＪＩＬ、ｊ’ ７５Ｍ−重量
へＥ７”０ビｙｓｉ−加量手 続 補
正 ｆｌ（自発）昭和５７年７月３０日 特許庁長官 若 杉 和 夫 殿 １、事件の表示 昭和５７年特許願第９４０３８号 ２、発明の名称 免疫比濁法による血清ＣＲＰの簡易迅速定量法代表者小
林泰明 ５、補正の対象 （１； 本願明細１！１の特許ａｎ求のｎ・１コ囲を
別紙のとおり補正する。 （２１同第２向第１５行目に「微量蛋白・・・」とある
を、「微ｔ？ｌＴ白・・・」と補正する。 ｔ；３）同第３向第１８行目に「を調整し、」とあるな
、「を哨製し、」と補正する。 （４） 第４頁第２行目にｒＡｃｉｐ＝（Ａ丁−ＡＩ
ＩＩＢ）−（ＡＲＢ−Ａｎｎ）Ｊとあるを、「Ａｃｎｐ
＝ＡＴ−Ａｓｎ −（ＡＲＢ−ＡＢＭ）Ｊと補正する。 （５）同βｒ１５行目に「は例えばヒト０ＦＩＰヤギ血
清・・・」とあるを、「け例えば抗ヒｈｃＲＰヤギ血清
・・・」と補正する。 （６）同第５自第２０行目乃至＠６に第５行目に「オウ
チターロニイ法、・・・・・・・・・フイニテイクロマ
ト及び」とあるを、「オフタロニー法、免疫泳動法で確
認され、このＯＲＰ標準液の濃度ｅ工侍白定量、アフィ
ニティークロマトグラフィー及び」と補正する。 （７） 同＠６自第１４行目に「オウチターロニイ法
」とあるを、「オフタロニー法」と補正する。 （１） 被験液（Ｔ）及び試＄ （ＲＢ）並びにこれ
らのブランク液（日Ｒ及びＢＢ）６ｎ１Ｍ製し、こノ１
ら？インキユベートシてプラトーに達せしめた後に、そ
れぞれの静の吸光度（Ａ丁、ＡＲＢ、ＡＢＭ及びＡｎｎ
）？測定し、Ｃ！ＲＰによる検体血清の吸光＋ｆｆ、（
Ａｃｎｐ）を式％式％） により′算定し、一方上記と同様に但し血清の代りにＯ
ＲＰ榊準液を用いて吸光度−ＣＲＰ値の検殴ａｖｒ作成
し、上記算定吸光度値に該当するＣＲＰ値を上記検量線
から求めろことを特徴とする、免１１２．被濁法による
血清ＣＲＰの簡易迅速定量法。 手 続 補 正 魁自発ノ 昭和５７鈑８月２＋６ 特許庁喪家 若 杉 和 夫 殿 １、事件の表示 特願昭５７−９４０５８号２、発明の
名称 免疫比濁法による血清Ｃ）Ｌ Ｐ Ｃ）簡易迅速
定量法 ３、補正をする者 事件との関係 特許出願人 東京都豊島区駒込２丁目５番１１号 日水製薬株式会社 代表者 小 林 泰 明 ４、イ（理 人 〒 １０５ 束冨都港区虎）門１丁目１１番７号 明細書の費許請求の範囲の欄 ６、補正の内科 （１１本願明細書の特許請求の範囲を別紙のとお補正す
る。 特許請求の範囲 （１１被験液（Ｔ）及び試薬／ＩＶ（ＲＢ）；Ｉしび【
でこれらのブランク液（ＳＲ及びＢＢ）を調製ｔ−７、
これらを４ンキユベートしてプラトーに達せしめた阪Ｏ
て、そｈぞれの液の吸光度（ＡＩ＝、Ａ、むＢ＠ＡＳＢ
及びＡｎｎ）を測定し、ＣＲＰによる検体血清の吸光度
（ＡＣＲＰ）を式 ％式％） により算定し、一方上記と同様に但し血清の代りにＣＲ
Ｐ標準液を用いて吸光度−ＣＲＰ値の検量線を作成し、
上記算定吸光度値に該当するＣＲＰ値を上記検量線から
末ぬること全特徴とする、免疫比濁法による血清ＣＲＰ
の簡易迅速定量法。 す
Claims (1)
- （１）被験液（Ｔ）及び試薬液（ＲＢ ）並びＫこれら
のブランク液（ＳＢ及びＢＢ ）を調製し、これらをイ
ンキュベートしてプラトーに達せしめた後に、それぞれ
の液の吸光度（ＡＴ −ＡＲＢ 、ＡｓＢ 及びＡＢ
Ｂ ）を測足し、ＣＲＰによる検体血清の吸光度【、Ａ
ＣＰＲ）を式 ％式％） により３？し、一方上記と同様に但し血清の代シにＣＲ
Ｐ標準液を用いて吸光度−ＣＲＰ （［の検量線をｒ「
成し、土肥算足吸光度値に該当するＣＲＰ頃を上記検Ｉ
ｊｋ線から求めることを特徴とする、免疫比濁法による
血清ＣＲＰの簡易迅速定量法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9403882A JPS58211659A (ja) | 1982-06-03 | 1982-06-03 | 免疫比濁法による血清ｃｒｐの簡易迅速定量法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9403882A JPS58211659A (ja) | 1982-06-03 | 1982-06-03 | 免疫比濁法による血清ｃｒｐの簡易迅速定量法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58211659A true JPS58211659A (ja) | 1983-12-09 |
| JPH049262B2 JPH049262B2 (ja) | 1992-02-19 |
Family
ID=14099391
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP9403882A Granted JPS58211659A (ja) | 1982-06-03 | 1982-06-03 | 免疫比濁法による血清ｃｒｐの簡易迅速定量法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58211659A (ja) |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6125061A (ja) * | 1984-07-13 | 1986-02-03 | Nitsusui Seiyaku Kk | 免疫比濁法による血清ｃｒｐの改良定量法 |
| JPS61243363A (ja) * | 1985-04-22 | 1986-10-29 | Nitsusui Seiyaku Kk | Ｃｒｐの高感度定量法 |
| JPS62192661A (ja) * | 1986-02-20 | 1987-08-24 | Nitsusui Seiyaku Kk | 免疫比濁法によるｃｒｐの測定法 |
| JPS63115060A (ja) * | 1986-10-24 | 1988-05-19 | ベーリングヴエルケ・アクチエンゲゼルシヤフト | 測光的評価を用いる物質の測定法 |
| WO2002031503A1 (en) * | 2000-10-11 | 2002-04-18 | Pharmacia Diagnostics Ab | Assay method and kit therefor |
| US6777198B2 (en) | 2000-10-11 | 2004-08-17 | Pharmacia Diagnostics Ab | Assay method and kit therefor |
| WO2010013789A1 (ja) * | 2008-08-01 | 2010-02-04 | 国立大学法人岡山大学 | タンパク質製造方法，融合タンパク質及び抗血清 |
-
1982
- 1982-06-03 JP JP9403882A patent/JPS58211659A/ja active Granted
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6125061A (ja) * | 1984-07-13 | 1986-02-03 | Nitsusui Seiyaku Kk | 免疫比濁法による血清ｃｒｐの改良定量法 |
| JPS61243363A (ja) * | 1985-04-22 | 1986-10-29 | Nitsusui Seiyaku Kk | Ｃｒｐの高感度定量法 |
| JPS62192661A (ja) * | 1986-02-20 | 1987-08-24 | Nitsusui Seiyaku Kk | 免疫比濁法によるｃｒｐの測定法 |
| JPS63115060A (ja) * | 1986-10-24 | 1988-05-19 | ベーリングヴエルケ・アクチエンゲゼルシヤフト | 測光的評価を用いる物質の測定法 |
| JP2595267B2 (ja) * | 1986-10-24 | 1997-04-02 | ベーリングヴエルケ・アクチエンゲゼルシヤフト | 測光的評価を用いる物質の測定法 |
| WO2002031503A1 (en) * | 2000-10-11 | 2002-04-18 | Pharmacia Diagnostics Ab | Assay method and kit therefor |
| US6777198B2 (en) | 2000-10-11 | 2004-08-17 | Pharmacia Diagnostics Ab | Assay method and kit therefor |
| WO2010013789A1 (ja) * | 2008-08-01 | 2010-02-04 | 国立大学法人岡山大学 | タンパク質製造方法，融合タンパク質及び抗血清 |
| JP4604231B2 (ja) * | 2008-08-01 | 2011-01-05 | 国立大学法人 岡山大学 | タンパク質製造方法，融合タンパク質及び抗血清 |
| JPWO2010013789A1 (ja) * | 2008-08-01 | 2012-01-12 | 国立大学法人 岡山大学 | タンパク質製造方法，融合タンパク質及び抗血清 |
| US8865428B2 (en) | 2008-08-01 | 2014-10-21 | National University Corporation Okayama University | Protein production method, fusion protein, and antiserum |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH049262B2 (ja) | 1992-02-19 |
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