JPS58116459A - トリヒドロキシビタミンｄ↓３化合物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なビタミンＤ化合物に関する。

さらに詳細には、本発明は、ヒドロキシ基を側　　。

鎖に有するビタミンＤ３誘導体に関する。

ビタミンＤ３は、治療上、くる病及び人間の他の骨の疾
病の防止に幅広く用いられており、人間及び動物の正常
な血液カルシウム及びリンのレベル維持に重要であるこ
とは、知られている。また、ビタミンＤは、生体内で一
連の物質代謝を受けてヒドロキシル化誘導体に変換され
、ビタミンＤｋよって現わされる生物学的活性に対して
関与するのが、これらのヒドロキシビタミンＤ代謝物質
であると考えられている。ビタミンＤ３は例えば、生体
内で生物学的に活性な代置物質すなわち、２５−ヒドロ
キシビタミンＤ、、　　１．２５−ジヒドロキシピタミ
ンＤ３．２４．２５−ジヒドロキンビタミ７ＤＪｔび２
５，２６−シヒドロキシビタミンＤ、のよ５な物質に変
換される。ビタミンＤ２も同様な代謝変換を受ける。そ
の合成類縁体の関係する調製方法と共に、これらの化合
物の特徴付けとその生物学的特性は特許及び他の文献に
記録されている。

新規なビタミンＤ３誘導体が今見出された。これは下記
式Ｉで表わされる。この誇導体の好ましい形は、側鎖に
おける隣接した３個のヒドロキシ基によって特徴付けら
れ、２３．２４．２５〜トリヒドロキシビタミンＤ３と
以下称される。このように、この化合物は、既知の生物
学的活性な２４．２５−ジヒドロキシビタミンＤ３の新
規なヒドロキシ類この好ましいトリヒドロキシ化合物は
ビタミンＤ３を多量に投与された鶏の血液から単離して
純粋な形で得られた。

６０羽の１２−週才のホワイトレグホンの雄のヒナトリ
〔ノーザン　ハツチリーズ（ビーバーダム　ライスコン
シン）から市販されている〕を市販の食餌（ラルストン
　プリナ、セントルイス、ミズーリー）で育て、それぞ
れが１日投与量１０５１、Ｕ、の純粋ビタミンＤ、　（
エタノール０．０５ｍｔ中に溶解）を筋肉内注射により
３日間せっ取した。

４白目に、それぞれのヒヨコは同じルートにより、さら
に１．５Ｘ１０　１．Ｕ、のビタミンＤ、の投与を受け
た。４日後、心臓を刺して、各ヒヨコから血液を収集し
た。血液を貯め、遠心分離Ｋかけ、生成した血漿を、次
いで抽出した。

抽出は１容量の血漿を３容量のメＩノール／り０ヮホル
ム２：１溶液と混合し、−晩冷所（約４〜１０℃）Ｋ放
置して相分離を起こさせて達成できる。次Ｋ、さらに１
容量のクロロホルムを添加して有機相を除いた。水相を
さら忙１容量のクロ０ホルムで抽出後、有機相を一緒に
し、溶剤を蒸発させて残留物を得たが、次にこれをクロ
マトグラフィーで分別した。

血漿３８０　ｍｌからのクロロホルム抽出物をヘキサン
／クロロホルム／メタノール（９：１：１）で溶離する
、３Ｘ３０ｃｍ　　セファデックスＬＨ−２０カラム（
ファーマシア、ビスカタウエイ、ニューシャーシー）上
でのクロマトグラフィーＫかけた。

アラクシ１ン（２３ｍｊ毎）を集め、ビタミンＤ化合物
忙ついてシェパードらの結合分析法（Ｂｉｏ−ｃｈｅｍ
、　Ｊ、　１−８２．５５．　１９７９）により分析し
た。

１１５０〜１４７２ｍＡから溶出するビタミンＤ代謝物
質を集めさらに精製するため高速液体クロマトグラフィ
ー（ＨＰＬＣ）に付した。

最初、ＨＰＬＣ精製を、ヘキサン中の１２１２−プロパ
ツールで溶離させる０、４５Ｘ２５ｃｍの微粒子シリカ
カラム（シーパックス−８ＩＬ、デュポン社、ウイルミ
ントン、プラウエア）上で行った。標準の１，２５−ジ
ヒドロキシビタミンＤ、（１，２５−（ＯＨ）２０３　
）がこの系では、約１８ｍｔで溶出した。約１０〜１２
ｍｔで溶出する物質を、目的の代謝物質をさらに精製す
るため集めた。これらの７ラクシ四ンは、メタノール中
の２０−水で溶離を行う０．４５　Ｘ　２５ａ＋＋の逆
相カラム（シリカ結合のオクタデシルシラン、シーパッ
クス−０ＤＳ；デエポン社、ウイルミントン、プラウエ
ア）上でのＨＰＬＣに付した。標準の１　、２５−　（
ＯＨ）ｚＤｓはこの系では２５　ｍｌで溶出した。目的
の代謝物質は７〜８　ｍｌで溶出した。

トリヒドロキシ化合物の最後の精製をヘキサン中の１４
チ２−グロバノール液で溶出させる０、４５Ｘ２５ａ＊
微粒子シリカカラム上で行った。この化合物は７．５〜
９．５　ｍＡで溶出した。

この一連のステップは、所望の化合物を純粋な形で提供
する。この化合物は最大紫外吸収λｍａｘ＝２６５ａｍ
を示した。

回収された化合物の構造は下記の分光分析により立証さ
れた。

トリヒドロキシ化合物の２６５ｎｍＫおける紫外吸収は
、ビタミンＤ５．６−７スートリエン発色間そのままを
指示するものであり、そのクロマトグラフィー極性は３
個の付加的ヒドロキシ基の結合を示唆するものである。

ヒドロキシ基の数とその位置を決定するため、その化合
物を１　％　）　ＩＪメチセシリルクロリドを含むＮ、
０−ビス−トリメチルシリル−トリフルオロアセタミド
で、ピリジン中で３０〜５０℃で処理することによりト
リメチルシリル（ＴＭＳ）エーテル誘導体に変換し、生
成物を質量分析に付した。質量分析ではｍ／ｅ７２０に
おける分子イオンを示し、これはトリヒドロキシビタミ
ンＤ３誘導体のテトラ−トリメチルシリル　エーテル生
成物に関して予想された通りである。ｍ／ｅ２０８と１
１８　（２０８−ＨＯＴＭＳ）のピークの存在は、これ
らがビタミンＤ３−０−ＴＭＳの特性的Ａ環フラグメン
トであるのでＣ−３−ヒドロキシ基が存在し、典型的な
ビタミンＤ３Ａ環とトリエン系は不変であるという事実
が確認された。側鎖中における３個のヒドロキシ基の位
置はｍ／ｅ　１３１と４８７の目立ったピークから明白
である。ｍ／ｅ１３１のピークはＣ２４とＣ２５０間の
開裂から生じたものであり、側鎖の炭素２５．２６及び
２７を含む［（ＣＨ３）２　Ｃ＝０−８ｉ（ＣＨ３）　
ｓ　）　　イオンを表わす。このピークは２５２５−０
−Ｔ誘導体の特徴であり、炭素２５におけるヒドロキシ
基の存在を証明するものであり、そして、炭素２６及び
２７においてはいかなるヒドロキシ置換基も存在しない
ことを示す。ｍ／ｅ４８７（同じ＜ｍ／ｅ３９７及び３
０７のピーク。これらは４８７からのＨＯＴＭＳの連続
的な脱離から生ずる。）は、Ｃ−２３，２４結合の開裂
から生起し、Ｃ−Ｃ−２３−ＯＴ置換基の存在と、炭素
２２．２１又は２０にヒドロキシ置換基がないことを、
必要としている。このように、２個のヒドロキシ基は確
かに炭素２３及び２５に位置しており、そして他のすべ
ての位置は除外されるので、３番目のものは、炭素２４
に帰する。

これらのデータは、それ故、トリヒドロキシ化合物の構
造が２３．２４．２５−）リヒドロキシビタミンＤ３で
あることを立証するものである。

２３．２４．２５−）リヒドロキシビタミンＤ。

は容易に他の有用な誘導体に変換できる。例えば適当な
アシル化又はアルキルシリル化試薬で標準的な条件下で
処理することによりアシル又はアルキルシリル誘導体を
得ることができる。好適なアシル化剤＆１アシルクロリ
ド又は酸無水物であり、好適なアルキルシリル化剤はア
ルキルシリルハライド又は類似の活性化アルキルシリル
誘導体である。このように、例えば、無水酢酸で２５〜
５０℃でピリジン中で処理すること傾より３．２３゜２
４−トリアセチル誘導体を生じるが、しかし、反応を昇
温’Ｆ（７５〜１００℃）で行うとテトラアセチル生成
物が得られる。他の所望のアシル誘導体、プロピオニル
、ブチリル、トリハロアシル、ベンゾイル、ニトロ及び
ハロベンゾイル誘導体は適当な酸無水物又はアシルハラ
イドによって類似の方法によって得ることができる。部
分的にアシル化された誘導体は、異なるアシル基によっ
てさらにアシル化されたりまた、アルキルシリルハライ
ド剤の処理によりアルキルシリル化される。ここでアヤ
キル基は炭素１〜約５の炭化水素基、例えば、メチル、
エチル、プロピル、ブチル、ｔｅｒｔ　−ブチルなどを
表わす。

式１から明白なように本発明のトリヒドロキシ化合物は
、生物学的効能の確立しているビタミンＤ代謝物質であ
る２４．２５−ジヒドロキシビタミンＤ３０類似体であ
る。それ故、このトリヒドロキシ化合物は生体内ビタミ
ンＤ一様活性で特徴づけられ、したがってビタミンＤ３
や他の側鎖ヒドロキシル化ビタミンＤ代謝物質の代替品
として、その知られている治療上その他の応用面におい
て利用することができることが予期されるであろう。

特許出願人　ライスコンシン　アラムナイ　ＩＪｆ−チ
フォンデーシ曹ン 代理人　　弁理士　川　崎　隆　大 同　　　弁理士　飯　１）敏　三

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）次式で表わされる化合物。 （式中各Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３及びＲ４は水素、アシル及び
   アルキルシリルからなる群から選（ｆれたものである。 ） （２）各々のＲ１，Ｒ２、Ｒ３及びＲ４がアセチル又＋
   ｉベンゾイルである特許請求の範囲第１項記載の化合物
   。 ＋８１　２３．２４．２５−　トリヒドロキシビタミン
   Ｄ３である特許請求の範囲第１項記載の化合物。 （４）結晶形である特許請求の範囲第３項記載の化合物
   。