JPS58101690A - カタラ−ゼの製造方法 - Google Patents
カタラ−ゼの製造方法Info
- Publication number
- JPS58101690A JPS58101690A JP19968381A JP19968381A JPS58101690A JP S58101690 A JPS58101690 A JP S58101690A JP 19968381 A JP19968381 A JP 19968381A JP 19968381 A JP19968381 A JP 19968381A JP S58101690 A JPS58101690 A JP S58101690A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- catalase
- aqueous solution
- titer
- dried
- microbial cells
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
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- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は高力価で安定なカタラーゼ粉末の製造方法に関
し、更に詳しくは、カタラーゼ含有水溶液中に、カタラ
ーゼ活性を保有する乾燥微生物細胞を浸漬して吸水と同
時に水浴液中のカタラーゼを細胞に捕集させた後当餓倣
生物細胞を脱水乾燥し、高力価カタラーゼ活性を有する
粉末を製造する方法に関する。
し、更に詳しくは、カタラーゼ含有水溶液中に、カタラ
ーゼ活性を保有する乾燥微生物細胞を浸漬して吸水と同
時に水浴液中のカタラーゼを細胞に捕集させた後当餓倣
生物細胞を脱水乾燥し、高力価カタラーゼ活性を有する
粉末を製造する方法に関する。
カタラーゼは周知の如く過酸化水素を水と酸素とに分解
する酸素であり、自然界に広く分布しておシ、その能力
は医薬品、食品、その他工業分野に亘って広範囲に利用
されている。カタラーゼを得るオリジンは、動物内臓（
特に肝臓）、カビ培養液、微生物細胞等多岐に亘ってい
るがそれぞれに含まれるカタラーゼの童は微量である。
する酸素であり、自然界に広く分布しておシ、その能力
は医薬品、食品、その他工業分野に亘って広範囲に利用
されている。カタラーゼを得るオリジンは、動物内臓（
特に肝臓）、カビ培養液、微生物細胞等多岐に亘ってい
るがそれぞれに含まれるカタラーゼの童は微量である。
そのため、多くの場合医薬的、工業的に使用されるカタ
ラーゼは粗酵素であって、Ａ、Ｏ，Ａ、Ｃ１３２，０６
０によれば純粋なカタラーゼの力価を示すＫｆ値は４０
，０００〜６０，０００であるのに、工業的に用いられ
る市販のカタラーゼ製剤のＫｆ値は２０〜２００程度で
ある。
ラーゼは粗酵素であって、Ａ、Ｏ，Ａ、Ｃ１３２，０６
０によれば純粋なカタラーゼの力価を示すＫｆ値は４０
，０００〜６０，０００であるのに、工業的に用いられ
る市販のカタラーゼ製剤のＫｆ値は２０〜２００程度で
ある。
本発明者等は、より高力価のカタラーゼ製品を得んとし
て種々研究を重ねていたところ、カタラーゼ活性を保有
する乾燥微生物側ｊ胞を、カタラーゼ含有水溶液中に浸
漬すると、乾燥細胞が吸水する際同時に水溶液中のカタ
ラーゼを細胞内に取り入れるか又は細胞壁に吸着するか
して捕集することを見い出した。カタラーゼ含有水溶液
は、純粋カタラーゼの水溶液に限らず、粗酵素液や酵素
抽出液のように、種々の夾雑物が混在している溶液でも
同様の現象がみられた。
て種々研究を重ねていたところ、カタラーゼ活性を保有
する乾燥微生物側ｊ胞を、カタラーゼ含有水溶液中に浸
漬すると、乾燥細胞が吸水する際同時に水溶液中のカタ
ラーゼを細胞内に取り入れるか又は細胞壁に吸着するか
して捕集することを見い出した。カタラーゼ含有水溶液
は、純粋カタラーゼの水溶液に限らず、粗酵素液や酵素
抽出液のように、種々の夾雑物が混在している溶液でも
同様の現象がみられた。
こうして得られるＭＡｍ−力タラーゼ結合体を常法例え
ば遠心沈澱法とアセトン沈澱法の併用などによシ、脱水
乾燥して高力価のカタラーゼ活性を有する粉末を得るこ
とに成功した。また、通常のカタラーゼ製品は粉末状に
おいても、また水溶液においても力価が不安定であシ、
例えば特公昭５５−７２３４にみられるようにその安定
化に工夫がなされているところであるが、本発明に係る
高力価カタラーゼ活性の製品は、後述するように意外に
も長期間その力価が安定であることを見い出して本発明
を完成した。
ば遠心沈澱法とアセトン沈澱法の併用などによシ、脱水
乾燥して高力価のカタラーゼ活性を有する粉末を得るこ
とに成功した。また、通常のカタラーゼ製品は粉末状に
おいても、また水溶液においても力価が不安定であシ、
例えば特公昭５５−７２３４にみられるようにその安定
化に工夫がなされているところであるが、本発明に係る
高力価カタラーゼ活性の製品は、後述するように意外に
も長期間その力価が安定であることを見い出して本発明
を完成した。
即ち、本発明は、カタラーゼ活性を保有する乾燥微生物
細胞をカタラーゼ含有水溶液に浸漬して水溶液中のカタ
ラーゼを微生物細胞に捕集させ、しかる後微生物細胞を
脱水乾燥することを特徴とする局力価で安定なカタラー
ゼ粉末の製造方法である。
細胞をカタラーゼ含有水溶液に浸漬して水溶液中のカタ
ラーゼを微生物細胞に捕集させ、しかる後微生物細胞を
脱水乾燥することを特徴とする局力価で安定なカタラー
ゼ粉末の製造方法である。
本発明における乾燥微生物細胞としては、例えば入手容
易な市販のドライ・イースト（サツカロミセス・セルビ
シエの乾燥物）があげられるが、それ以外の微生物の乾
燥細胞でも差支え’ｌイ０ カタ７ −ｔ”含有水溶液
としては、通常豚、牛等の肝臓が入手容易である。市販
のドライ・イーストのカタラーゼ活性は必すしも一様で
はないが、ｆｔｊＪ３胞を消化して精製した場合には大
体１１当ｆｉ Ｋｆ値で１００〜２００の製品が得られ
る。
易な市販のドライ・イースト（サツカロミセス・セルビ
シエの乾燥物）があげられるが、それ以外の微生物の乾
燥細胞でも差支え’ｌイ０ カタ７ −ｔ”含有水溶液
としては、通常豚、牛等の肝臓が入手容易である。市販
のドライ・イーストのカタラーゼ活性は必すしも一様で
はないが、ｆｔｊＪ３胞を消化して精製した場合には大
体１１当ｆｉ Ｋｆ値で１００〜２００の製品が得られ
る。
カタラーゼの分子量はオリジンによっても異なるが、お
＼むね２４万〜２６万程度であるので微生物の細胞壁を
簡単に通過して細胞内に取シ入れられるとは考えにくい
ので、その大部分は細胞壁に吸着されるものとも考えら
ｎるが、後述する様に、サツカロミセス・セルビシエの
生細胞と乾燥細胞とを夫々カタラーゼ水溶液中に浸漬し
た場合の液中のカタラーゼ力価の差から考えると、乾燥
によって細胞壁に変化が起シカタラーセの一部が吸水時
剣胞内に取り込まれるものとも考えられる。
＼むね２４万〜２６万程度であるので微生物の細胞壁を
簡単に通過して細胞内に取シ入れられるとは考えにくい
ので、その大部分は細胞壁に吸着されるものとも考えら
ｎるが、後述する様に、サツカロミセス・セルビシエの
生細胞と乾燥細胞とを夫々カタラーゼ水溶液中に浸漬し
た場合の液中のカタラーゼ力価の差から考えると、乾燥
によって細胞壁に変化が起シカタラーセの一部が吸水時
剣胞内に取り込まれるものとも考えられる。
以下試験例及び実施例をあげて本発明を具体的に説明す
るが、本発明はこれによって限定されるものではない。
るが、本発明はこれによって限定されるものではない。
試験例１． ドライイーストのカタラーゼ力価ドライイ
ースト〔フランスＳ、工、 ＬＢＳＡＦＦＲＥ、１Ｊｌ
ｉ Ｓａｆ −Ｌｅｖｕｒｅ ］を０．１ Ｍリン酸緩
衝液（ｐＨ７，０）に５チ濃度に懸濁し、Ａ、○、Ａ、
Ｏ０法（３２，０５８〜３２．０６１）によってカタラ
ーゼ活性を測足した。
ースト〔フランスＳ、工、 ＬＢＳＡＦＦＲＥ、１Ｊｌ
ｉ Ｓａｆ −Ｌｅｖｕｒｅ ］を０．１ Ｍリン酸緩
衝液（ｐＨ７，０）に５チ濃度に懸濁し、Ａ、○、Ａ、
Ｏ０法（３２，０５８〜３２．０６１）によってカタラ
ーゼ活性を測足した。
ドライイーストのＫｆ値−２５／ｒ
試験例２． 自己消化したドライイースト細胞内の全力
タラーゼカ価 ドライイースト １に９（／Ｃ水１ｔを加え均一なペー
スト状にした後トルエン ２０１を加え４０℃に４時間
放置した。更に一３０℃で２４時間凍結してから３０℃
で解凍し、冷アセトン４ｔを加え３＋０００ ｒ、ｐｏ
ｍ、で１０分間遠心沈澱する。洗直を２０メツシユの篩
を通した後２０℃の冷風乾燥輩で２４時間乾燥し、水分
６％の粉末を得て試料とした。
タラーゼカ価 ドライイースト １に９（／Ｃ水１ｔを加え均一なペー
スト状にした後トルエン ２０１を加え４０℃に４時間
放置した。更に一３０℃で２４時間凍結してから３０℃
で解凍し、冷アセトン４ｔを加え３＋０００ ｒ、ｐｏ
ｍ、で１０分間遠心沈澱する。洗直を２０メツシユの篩
を通した後２０℃の冷風乾燥輩で２４時間乾燥し、水分
６％の粉末を得て試料とした。
試料粉末のＫｆ値−１４０／？
試験例３． 豚肝臓抽出液の製造方法とカタラーゼ力価
屠殺直後の豚肝臓５００ｖをミンチ状にした抜水１Ｇ０
０ｍｌを加え、水冷下で３０分間攪拌した。
０ｍｌを加え、水冷下で３０分間攪拌した。
抽出液１３５０ゴをガーゼ沖過した後、水冷アセトンを
５００ｍ１を加えた。３．０００１ｐ、ｍ、１０分間遠
心沈澱して得た沈直に水３０００ｍｌを加え充分溶解し
た後、１．００Ｏｒ、ｐ、ｍ、３分間遠心沈澱して得た
上清液２８０ｍＪを粗カタラーセ溶液とした。
５００ｍ１を加えた。３．０００１ｐ、ｍ、１０分間遠
心沈澱して得た沈直に水３０００ｍｌを加え充分溶解し
た後、１．００Ｏｒ、ｐ、ｍ、３分間遠心沈澱して得た
上清液２８０ｍＪを粗カタラーセ溶液とした。
粗カタラーゼのＫｆ値−１１０／ゴ
試験例４． ドライイースト及び生イーストのカタラー
ゼ捕集 ドライイーストは試験例１と同じもの、生イーストは三
共フーヅ株式会社製のものを用い、粗カタラーセ水溶液
は試験例２で得られた溶液カタラーゼ溶液はＰ、Ｌ、Ｂ
ｉｏｃｈｅｍｉｃａ１社製のものをＫｆ値−１１０ｖｃ
なるようＡ整した溶液を使用した。
ゼ捕集 ドライイーストは試験例１と同じもの、生イーストは三
共フーヅ株式会社製のものを用い、粗カタラーセ水溶液
は試験例２で得られた溶液カタラーゼ溶液はＰ、Ｌ、Ｂ
ｉｏｃｈｅｍｉｃａ１社製のものをＫｆ値−１１０ｖｃ
なるようＡ整した溶液を使用した。
Ａ：１００ｍＪのビーカーに粗酵素液５０ｍＡ！を入れ
ドライイースト５ｖを加えた。
ドライイースト５ｖを加えた。
Ｂ：１００ｍ１ｔ７）ビーカーに粗酵素液５ｒＪｒｎｌ
を入れ化イースト１Ｂ、４ｆを加えた（ドライイースト
との水分換算による）。
を入れ化イースト１Ｂ、４ｆを加えた（ドライイースト
との水分換算による）。
Ｃ：１００１ｎｌのビーカーにカタラーゼ溶液５０ｍ１
を入れドライイースト５２を加えた。
を入れドライイースト５２を加えた。
Ｄ：１００ｍ１のビーカーにカタラーゼ溶液５０ｄを入
れ生イース）１８．４Ｐを加えた。
れ生イース）１８．４Ｐを加えた。
Ａ、Ｂ、Ｏ，Ｄ共室温で３０分間攪拌した後、３．００
Ｏｒ、ｐ、ｍ、５分間遠心沈澱し、上清液のＫｆ値を
測定した。
Ｏｒ、ｐ、ｍ、５分間遠心沈澱し、上清液のＫｆ値を
測定した。
実施例１゜
試験例３の方法により抽出したＫｆｆｌ１０の粗カタラ
ーゼ浴液ｓ、ｏｏｏｍｌに、試験例１のドライイース）
５００ ｆを浸漬し充分に攪拌して均一な状態にして
から、４０℃で１８時間攪拌しつ５置いた。
ーゼ浴液ｓ、ｏｏｏｍｌに、試験例１のドライイース）
５００ ｆを浸漬し充分に攪拌して均一な状態にして
から、４０℃で１８時間攪拌しつ５置いた。
１８時間抜３．０００ ｒ、ｐｏｍで５分間遠心沈澱し
、沈ｉ２，３ＢＯｆを得た。これに水冷アセトンを５．
０００ｍ１加えてから遠心沈澱し、沈渣に更に水冷アセ
トン５，０００ｍ／！を加えて遠心沈澱°シタ。沈渣を
２０メツシユの篩を通した後、２０℃の冷風乾燥室で２
４時間乾燥し、水分６％粉末６１２１を得た。当該粉末
のＫｆ値は９０６７ｆであった。
、沈ｉ２，３ＢＯｆを得た。これに水冷アセトンを５．
０００ｍ１加えてから遠心沈澱し、沈渣に更に水冷アセ
トン５，０００ｍ／！を加えて遠心沈澱°シタ。沈渣を
２０メツシユの篩を通した後、２０℃の冷風乾燥室で２
４時間乾燥し、水分６％粉末６１２１を得た。当該粉末
のＫｆ値は９０６７ｆであった。
以上よ９次の関係が成り立つ。
粗カタラーゼ溶液中のカタラーゼ総力価＝１１０Ｘ５，
０００−５５０，１）００ ｆｌ）ドライイース
ト中のカタラーゼ総力価＝１４０Ｘ５００−７０．００
０ ｆ２１（１）と（２）の合計： ６２
０，０００得られた粉末のカタラーゼ総力価： ９０６Ｘ６１２−５５４．４７２ 本発明の方法によって得られた粉末のカタラーゼ総力価
は、使用された材料の総力価の８９．４％にも達し、更
に特長的なことは工程中にドライイーストを消化しない
にも拘らず消化精製したのと同様な力価の発現があるこ
とである。
０００−５５０，１）００ ｆｌ）ドライイース
ト中のカタラーゼ総力価＝１４０Ｘ５００−７０．００
０ ｆ２１（１）と（２）の合計： ６２
０，０００得られた粉末のカタラーゼ総力価： ９０６Ｘ６１２−５５４．４７２ 本発明の方法によって得られた粉末のカタラーゼ総力価
は、使用された材料の総力価の８９．４％にも達し、更
に特長的なことは工程中にドライイーストを消化しない
にも拘らず消化精製したのと同様な力価の発現があるこ
とである。
実施例２゜
実施例１で得られた粗カタラーゼ粉末を４℃及び２５℃
に置き、経時的な力価の安定性を調べた。
に置き、経時的な力価の安定性を調べた。
以上のように、粗カタラーゼ粉末■の材料である＠およ
び■が短時日で力価が減少したのに対し、■は極めて安
定した力価を示し、何等安定剤を加えていないのに、２
４℃で６０日を経過しても９６％の力ｆＬｉｉを保ち、
９０日佐でも７４係に下ったにすぎない。これは本発明
における系の中で細胞内及び外部から加えられたカタラ
ーセが何等かの安定した状態に１電化されたものと考ん
られる。
び■が短時日で力価が減少したのに対し、■は極めて安
定した力価を示し、何等安定剤を加えていないのに、２
４℃で６０日を経過しても９６％の力ｆＬｉｉを保ち、
９０日佐でも７４係に下ったにすぎない。これは本発明
における系の中で細胞内及び外部から加えられたカタラ
ーセが何等かの安定した状態に１電化されたものと考ん
られる。
特許出顔人 成和化成株式会社
代理人 弁理士俣出庄治
Claims (1)
- カタラーゼ活性を保有する乾燥微生物細胞をカタラーゼ
含有水溶液に浸漬して水溶液中のカタラーゼを微生物ａ
組に捕集させ、しかる後微生物細胞を脱水乾燥すること
を特徴とする高力価で安定なカタラーゼ粉末の製造方法
。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19968381A JPS6013669B2 (ja) | 1981-12-11 | 1981-12-11 | カタラ−ゼの製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP19968381A JPS6013669B2 (ja) | 1981-12-11 | 1981-12-11 | カタラ−ゼの製造方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS58101690A true JPS58101690A (ja) | 1983-06-16 |
| JPS6013669B2 JPS6013669B2 (ja) | 1985-04-09 |
Family
ID=16411869
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP19968381A Expired JPS6013669B2 (ja) | 1981-12-11 | 1981-12-11 | カタラ−ゼの製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6013669B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2016510725A (ja) * | 2013-02-26 | 2016-04-11 | アヴェント インコーポレイテッド | 界面活性剤を有する安定化されたカタラーゼ酵素の調製 |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102174173B1 (ko) * | 2018-11-01 | 2020-11-04 | 가톨릭관동대학교산학협력단 | 하지부동 측정을 위한 보조도구 및 스마트 단말을 이용한 하지부동 측정방법 |
| JP2022512262A (ja) | 2019-11-21 | 2022-02-03 | ベイジン センスタイム テクノロジー デベロップメント カンパニー， リミテッド | 画像処理方法及び装置、画像処理機器並びに記憶媒体 |
| CN111105348A (zh) | 2019-12-25 | 2020-05-05 | 北京市商汤科技开发有限公司 | 图像处理方法及装置、图像处理设备及存储介质 |
-
1981
- 1981-12-11 JP JP19968381A patent/JPS6013669B2/ja not_active Expired
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2016510725A (ja) * | 2013-02-26 | 2016-04-11 | アヴェント インコーポレイテッド | 界面活性剤を有する安定化されたカタラーゼ酵素の調製 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS6013669B2 (ja) | 1985-04-09 |
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