JPH11505246A

JPH11505246A - 抗−血小板凝集抑制剤および血管拡張剤として有用な新規アミジン誘導体

Info

Publication number: JPH11505246A
Application number: JP8534903A
Authority: JP
Inventors: ジー．カーリー，マーク; エス．トジョエング，フォー; イー．ザペック，マーク
Original assignee: ジー．ディー．サールアンドカンパニー
Priority date: 1995-05-15
Filing date: 1996-05-15
Publication date: 1999-05-18
Also published as: BR9608759A; CA2220549A1; EP0825994A1; WO1996036639A1; CN1189833A; KR19990014816A; CN1088708C; AU5735996A; US5674894A; NZ307881A; MX9708827A; AU696915B2

Abstract

(57)【要約】本発明は、単独種の化合物で血小板凝集を抑制することができ、かつまた血管拡張を促進させることができる酸化窒素供与性を有する式（Ｉ）を有する新規アミジン誘導体に関する：

Description

【発明の詳細な説明】抗−血小板凝集抑制剤および血管拡張剤として有用な新規アミジン誘導体発明の背景発明の分野本発明は酸化窒素供与性（nitric Oxide donating property）を有する新規アミジン誘導体、その医薬組成物または製剤および治療におけるそれらの使用、特に不安定狭心症、卒中、心筋梗塞、心筋虚血および再循環、内臓虚血および再循環、アテローム硬化症、充血性心不全、虚血性不整脈、血栓症、高血圧症、肺疾病、転移および骨粗鬆症を処置するための、血管拡張剤、抗じゅく腫形成剤、および血小板凝集、血小板付着および再発性狭窄の抑制剤としてのそれらの使用に関する。関連技術フィブリノーゲンは血漿の正常成分として存在する糖蛋白質である。これは凝血メカニズムにおいて血小板凝集およびフィブリン生成に関与する。血小板は全血中に見出される細胞要素であり、血液凝集にまた関与する。血小板に結合するフィブリノーゲンは凝血メカニズムにおける正常な血小板機能にとって重要である。血管が損傷を受けると、フィブリノーゲンに結合する血小板が凝集を開始し、血栓を形成する。フィブリノーゲンと血小板との相互反応は、ＧＰ IIｂ／IIＩａとして知られている膜糖蛋白質複合体により生じる；これは血小板機能の重要な特徴である。この相互反応の抑制剤は血小板血栓形成性の緩和に有用である。主要細胞外マトリックス蛋白質であって、フィブロネクチンと命名されているもう一つの大型糖蛋白質が血小板と相互反応することはまた公知である。フィブロネクチンの細胞結合領域に存在する種々の比較的大型のポリペプチド断片が細胞−付着活性を有することが見出されている。米国特許第４，５１７，６８６号；同第４，５８９，８８１号；および同第４，６６１，１１１号参照。同一分子からの或る比較的短いペプチド断片は、基質に不動化されると、基質に対する細胞付着を促進すること、あるいは可溶化された形態または懸濁された形態である場合には、付着を抑制することが見出されている。米国特許第４，５７８，０７９号および同第４，６１４，５１７号参照。米国特許第４，６８３，２９１号には、血小板に結合するフィブリノーゲンの高親和的拮抗体であるようにデザインされている合成ペプチドによる、血小板機能の抑制が記載されている。米国特許第４，８５７，５０８号は、血小板凝集の抑制剤として有用性を有するテトラペプチド化合物を開示している。その他の合成ペプチドおよびそれらの血小板に対するフィブリノーゲン結合の抑制剤としての使用は下記の刊行物に記載されている：Kozcewiak 等によるBioc hem.，２３，１７６７〜１７７４（１９８４）；Plow 等によるProc．Natl．Acad ．Sci.，８２，８０５７〜８０６１（１９８５）；Ruggeri 等による同書、８３，５７０８〜５７１２（１９８６）；Ginsberg 等による J．Biol．Chem.,２６０（７），３９３１〜３９３６（１９８５）；Haverstick 等による Blood，６６（４），９４６〜９５２（１９８５）；およびRuoslahti および Piersbacherによる Science，２３８，４９１〜４９７（１９８７）。さらにその他の同様の抑制性ペプチドは、ヨーロッパ特許出願２７５，７４８および同２９８，８２０に開示されている。ヨーロッパ特許出願５１２，８３１は、血小板に対するフィブリノーゲンの結合を抑制し、従って血小板凝集の抑制に有用であるピペリジニルアルキル−アザシクロアルカノン化合物を開示している。ヨーロッパ特許出願５０３，５４８は、細胞相互反応の抑制に有用であり、これにより血栓症、塞栓症および転移の処置または予防に有用である環状尿素誘導体（イミダゾロン化合物およびトリアゾロン化合物）を開示している。ヨーロッパ特許出願４９６，３７８は、細胞−細胞相互反応および細胞−マトリックス相互反応を抑制し、従って血栓症、脳血管系疾病、肺塞栓症、心筋梗塞、アテローム硬化症、骨粗鬆症および腫瘍転移の処置に有用であるアミジノビフェニル化合物を開示している。ヨーロッパ特許出願４４５，７９６は、血小板への接着性蛋白質の結合に対して、およびまた血小板凝集および細胞−細胞接着に対して抑制作用を有する、酢酸誘導体を開示している。ヨーロッパ特許出願３７２，４８６は、Ｎ−アシルβ −アミノ酸誘導体およびそれらの塩を開示している。ここに開示されている化合物は血栓症、卒中、心筋梗塞、炎症およびアテローム硬化症の処置における血小板凝集の抑制に、およびまた転移の抑制に有用である。ヨーロッパ特許出願３８１，０３３は、血栓症、卒中、心臓系梗塞、炎症、アテローム硬化症および腫瘍の処置に有用であるアミジノまたはグアニジノアリール置換アルカン酸誘導体を開示している。国際出願ＷＯ９５／０６０３８および同ＷＯ９４／２２８２０は、血小板凝集抑制剤として有用なフェニルアミジン誘導体を開示している。米国特許第５，２２０，０５０号、同第５，２３９，１１３号、同第５，２５４，５７３号、同第５，２７２，１６２号、同第５，３７８，７２７号、同第５，３１４，９０２号、同第５，３４４，９５７号、同第５，３４４，８３７号および同第５，３５４，７３８号には、新規血小板凝集抑制剤が記載されている。１９８０年初頭から、アセチルコリンによってもたらされる血管弛緩が内皮の存在に依存し、この活性が内皮−由来弛緩因子（ＥＤＲＦ）と称される不安定な体液因子に帰因することが知られていた。血管拡張剤としての酸化窒素（ＮＯ）の活性は１００年以上も前から周知であり、ＮＯは亜硝酸アミル、三硝酸グリセリルおよびその他のニトロ血管拡張剤の活性成分である。ＥＤＲＦの最近のＮＯとしての同定は、ＮＯが酵素ＮＯシンターゼによってアミノ酸Ｌ−アルギニンから合成されるという生化学経路の発見と一致している。構成酵素により放出されるＮＯは数種の生理学的応答の基礎にあるトランスダクションメカニズム（tran sduction mechanism）として作用する。誘導酵素によって産出されるＮＯは腫瘍細胞の細胞毒性分子であり、かつまた微生物を侵す。ＮＯは可溶性グアニル酸シクラーゼの内在刺激体であり、内皮依存性弛緩に加えて、食細胞の細胞毒性および中枢神経系における細胞−細胞連絡を包含する多くの生物学的作用に含まれる（Moncada 等による Biochemical Pharmacology,３８，１７０９〜１７１５（１９８９）およびMoncada 等による Pharmacological Reviews,４３，１０９〜１４２（１９９１）参照）。さらにまた、ＮＯは抗血栓作用（Radomski 等による British Journal of Pharmacology，９２，６３９〜６４６（１９８７）、Moncada 等によるJournal of Cardiovascular Pharmacology ，１７，Ｓ２５（１９９１）、Yao 等による Circulation，８６，１３０２〜１３０９（１９９２）、Byrne 等による国際特許出願ＷＯ９４０３４２１−Ａ２およびSchonafinger 等によるドイツ国特許出願ＤＥ４２２３８００−Ａ１参照）、気管支弛緩作用（Persson 等による European Journal of Pharmacology,２４９，Ｒ７〜Ｒ８（１９９３））、抗炎症作用、殺微生物作用（Alspaugh およびGran ger による Infection and Immunity，５９，２２９１〜２２９６（１９９１））および胃保護作用（Wallace 等によるEuropean Journal of Pharmacology，２５７，２４９〜２５５（１９９４）参照）を有することが動物モデルで証明されている。さらにまた、酸化窒素は、骨粗鬆症のインビトロモデルで骨の損失に対して有効であることが示唆されている（MacIntyre 等によるProc．Natl．Acad．Sci ．ＵＳＡ，８８，２９３６〜２０４０（１９９１））。従って、これらの性質は、それらの生物学的作用を増大させ、かつまたそれらの副作用を減少させることによって、酸化窒素を前記の種々の病気の処置における血小板凝集抑制剤の作用を高める理想的薬剤にしている。本発明は血小板凝集抑制剤の新規硝酸および亜硝酸エステル化合物、それらの製造方法、これらの化合物を含有する医薬製剤およびそれらの使用方法に関する。発明の要旨本発明に従い、新規アミジノ誘導体が提供される。これらの新規抑制剤化合物は下記化学式（Ｉ）で表わすことができる化合物またはその医薬として許容される塩である：式中、Ａは独立して、下記の基からなる群から選択され：（各式中、点線は単結合または二重結合を表わす）、そしてＢはカルボニルまたはイミノカルボニル基からなる群から選択され；Ｗは水素、低級アルキル基、低級アルケニル基、低級アルキニル基、脂環式炭化水素基および芳香族炭化水素基からなる群から選択され、これらの基は全部が、置換基としてヒドロキシル、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、アミノ、アシルオキシ、フェニルおよびナフチルを有していてもよく、これらの置換基はハロゲン、ニトロ、低級アルコキシおよび低級アルキルにより置換されていてもよく；Ｚ、Ｚ′は独立して、水素、ハロゲン、シアノ、スルホニル、ヒドロキシ、低級アルコキシおよび低級アルキル基からなる群から選択され；Ｘは低級アルキル基、低級アルケニル基、低級アルキニル基、カルボニル、脂環式基または複素環式基であり；Ｙは硝酸（ＯＮＯ₂）(nitrate)、亜硝酸(ＯＮＯ)(nitrite)、あるいは酸化窒素供与性化合物、好ましくはフロキサン誘導体あるいは有機硝酸／亜硝酸化合物、例えばＳ−ニトロソ−システイン、Ｓ−ニトロソ−ペニシラミンおよび（各式中、Ｒは酸素またはイミノ基である）であり；ｎは１〜約４の整数である。本発明はまた、式（Ｉ）で表わされる化合物を含有する医薬組成物に関する。これらの化合物および製剤は、不安定狭心症、卒中、心筋梗塞、心筋虚血および再循環、内臓虚血および再循環、アテローム硬化症、充血性心不全、虚血性不整脈、血栓症、高血圧症、肺疾病、転移および骨粗鬆症を処置するための血管拡張剤、抗−じゅく腫形成剤、および血小板凝集、血小板付着および再発狭窄の抑制剤として有用である。本発明はまた、このような処置を必要とする哺乳動物における血小板凝集および血小板付着の抑制方法、再発狭窄の防止方法、アテローム硬化症の防止方法、および血管拡張の増進方法に関する。発明の詳細な説明本発明の好適態様は、式Ｉで表わされる化合物またはその医薬として許容される塩にある：式中、Ａは下記の基からなる群から選択され：（各式中、点線は単結合または二重結合を表わす）、そしてＢはカルボニルまたはイミノカルボニル基からなる群から選択され；Ｗは水素、炭素原子１〜約６個を有する低級アルキル基、炭素原子２〜約６個を有する低級アルケニル基、炭素原子３〜約６個を有する脂環式炭化水素基および炭素原子６〜約１２個を有する芳香族炭化水素基からなる群から選択され、これらの基は全部が、置換基としてヒドロキシル、低級アルコキシ、低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、アミノ、およびアシルオキシを有していてもよく；Ｚ、Ｚ′は独立して、水素、ハロゲン、シアノ、スルホニル、ヒドロキシ、低級アルキル基および低級アルコキシ基からなる群から選択され；Ｘは低級アルキル基、低級アルケニル基、低級アルキニル基、カルボニル、脂環式基または複素環式基であり；Ｙは硝酸(ＯＮＯ₂)、亜硝酸（ＯＮＯ）、あるいは酸化窒素供与性化合物、好ましくはフロキサン誘導体あるいは有機硝酸／亜硝酸化合物、例えばＳ−ニトロソ−システイン、Ｓ−ニトロソ−ペニシラミンおよび（各式中、Ｒは酸素またはイミノ基である）であり；ｎは１〜約４の整数である。本発明のもう一つの望ましい態様は、式Ｉで表わされる化合物またはその医薬として許容される塩にある：式中、Ａは下記の基からなる群から選択され：（各式中、点線は単結合または二重結合を表わす）、そしてＢはカルボニルまたはイミノカルボニル基からなる群から選択され；Ｗは水素、炭素原子１〜約６個を有する低級アルキル基、炭素原子３〜約６個を有する脂環式炭化水素基および炭素原子６〜約１２個を有する芳香族炭化水素基からなる群から選択され、これらの基は全部が、置換基としてヒドロキシル、低級アルコキシ、低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、アミノおよびアシルオキシを有していてもよく；Ｚ、Ｚ′は独立して、水素、ハロゲン、アルコキシおよび低級アルキル基からなる群から選択され；Ｘは低級アルキル基、カルボニルまたは脂環式基であり；Ｙは硝酸(ＯＮＯ₂)または酸化窒素供与性基、好ましくはフロキサン誘導体あるいは有機硝酸化合物、例えば、（各式中、Ｒは酸素またはイミノ基である）であり；ｎは１〜約３の整数である。本発明のもう一つの望ましい態様は、式Ｉで表わされる化合物またはその医薬として許容される塩にある：式中、Ａは下記の基からなる群から選択され：（各式中、点線は単結合または二重結合を表わす）、そしてＢはカルボニルまたはイミノカルボニル基からなる群から選択され；Ｗは水素、メチル、エチル、プロピル、シクロヘキシル基からなる群から選択され；Ｚ、Ｚ′は独立して、水素およびヒドロキシ基からなる群から選択され；Ｘはカルボニルまたは脂環式基であり；Ｙは硝酸(ＯＮＯ₂)または酸化窒素供与性基、好ましくはフロキサン誘導体あるいは有機硝酸化合物、例えば、（各式中、Ｒは酸素またはイミノ基である）であり；ｎは１〜約３の整数である。本発明のもう一つの望ましい態様は、式Ｉで表わされる化合物またはその医薬として許容される塩にある：式中、Ａは下記の基からなる群から選択され：（各式中、点線は単結合または二重結合を表わす）、そしてＢはカルボニル基であり；Ｗは水素、エチルおよびシクロヘキシル基からなる群から選択され；Ｚ、Ｚ′は水素であり；Ｘはカルボニル基であり；Ｙは酸化窒素供与性基、好ましくは有機硝酸化合物、例えば、（各式中、Ｒは酸素である）であり；ｎは１〜約２の整数である。上記定義のとおりの組成物および化合物は化学物質としてそのまま投与することができるが、これらを医薬製剤として提供すると好ましい。もう一つの態様において、本発明は上記定義のとおりの調製物または化合物あるいはその医薬として許容される塩または溶媒和物を、１種または２種以上の医薬上で許容される担体および所望により、別の治療成分とともに含有する医薬製剤を提供する。担体（１種または２種以上）は製剤中の他の成分に適合し、かつまたその受容者に対して有害に作用しないという観点から、「許容される」ものでなければならない。これらの製剤には、経口投与、非経口投与（皮下、皮内、筋肉内、静脈内および動脈内を包含する）、直腸投与および局所投与（皮膚、口腔内、舌下および眼内を包含する）に適するものが包含されるが、最も適当な投与経路は、例えば受容者の状態および障害に依存して変えることができる。これらの製剤は、単位剤型で提供すると好ましく、調剤技術で周知の方法のいずれかによって製造することができる。これらの方法は全部が上記定義のとおりの化合物またはその医薬として許容される塩または溶媒和物（「活性成分」）を、１種または２種以上の補助成分を構成する担体と一緒に配合する工程を包含する。一般に、これらの製剤は活性成分を液状担体または微粉砕した固形担体あるいはその両方と一緒に均一に、かつまた緊密に配合し、次いで必要に応じて、この生成物を所望の製剤に成形することによって製造する。経口投与に適する本発明の製剤は、例えば既定量の活性成分を含有するカプセル剤、カシェ剤または錠剤として；粉末または顆粒として；水性液体または非水性液体中の溶液または懸濁液として；あるいは水中油型または油中水型液体エマルジョンとして提供することができる。活性成分はまた、塊剤、舐剤またはペーストとして提供することもできる。錠剤は、必要に応じて１種または２種以上の補助成分とともに、圧縮または成型することによって製造することができる。圧縮錠剤は、粉末または顆粒などの自由流動形態の活性成分を、任意に結合剤、滑剤、不活性稀釈剤、潤滑性、界面活性剤または分散剤と混合して、適当な機械で圧縮することによって製造することができる。成型錠剤は、不活性液状稀釈剤で湿らせた粉末状化合物の混合物を適当な機械で成型することによって製造することができる。これらの錠剤は必要に応じて、被覆することができ、または刻み目を入れることができ、あるいはその中の活性成分の遅延放出または制御放出が得られるように処方することができる。非経口投与用製剤は、酸化防止剤、緩衝剤、静菌剤および当該製剤を意図する受容者の血液と等張にする溶質を含有することができる水性および非水性の無菌注射液；および懸濁剤および増粘剤を含有していてもよい水性または非水性の無菌溶液または懸濁液を包含する。これらの製剤は単位用量容器または多回用量容器、例えば密封したアンプルまたはバイアル中に存在させることができ、およびまた使用の直前に無菌液体担体、例えば塩類溶液、注射用水の添加のみを要する凍結乾燥（真空凍結乾燥）状態で保存することもできる。即席注射用溶液または懸濁液は、前記種類の粉末、顆粒および錠剤から調製することができる。直腸投与用製剤は、カカオ脂またはポリエチレングリコールなどの慣用の担体を用いて座薬として提供することができる。口内に、例えば口腔内または舌下に局所投与するための製剤は、風味付けした基剤、例えばショ糖およびアラビアゴムまたはトラガカントゴム中に活性成分を含有するトローチ、およびまた例えばゼラチンおよびグリセリンあるいはショ糖およびアラビアゴムなどの基剤中に活性成分を含有するペストリーを包含する。好適単位剤型は活性成分を以下に記載する有効薬用量でまたはその適当な一部の量で含有するものである。特に前記した成分に加えて、本発明の製剤は、例えば対象製剤のタイプに関連して当技術で慣用のその他の成分を含有することができ、一例として、経口投与に適する製剤は風味付与剤を含有することができるものと理解されるべきである。本発明の化合物は、０．１〜５００mg／kg／日の用量で経口によりまたは注射により投与することができる。成人したヒトに対する用量範囲は一般に、５mg〜５ｇ／日である。錠剤または分離した単位で提供されるその他の形態の製剤は、このような剤型に有効であるか、または多回投与剤型として有効である量で本発明の化合物を含有すると好ましく、一例として、これらの単位剤型は２．５mg〜５００mg、通常５mg〜２００mg付近の量で本発明の化合物を含有する。式（Ｉ）で表わされる化合物は経口によりまたは注射により（静脈注射または皮下注射）投与すると好ましい。患者に投与される化合物の正確な量は担当医師の責任である。しかしながら、使用される薬用量は患者の年齢および性別、処置される正確な症状およびその重篤度を包含する多くの因子に依存する。また、投与経路は症状およびその重篤度に依存して変えることができる。本明細書で使用されているものとして、「低級アルキル」の用語は、単独でまたは組合わされて、炭素原子１〜約１０個、好ましくは炭素原子１〜約８個、そしてさらに好ましくは炭素原子１〜約６個を有する非環状アルキル基を意味する。このような基の例には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ− ブチル、イソブチル、sec −ブチル、tert−ブチル、ペンチル、イソアミル、ヘキシル、オクチルなどが包含される。「低級アルケニル」の用語は、少なくとも１個の二重結合を含有する不飽和の非環状炭化水素基を意味する。このような基は炭素原子約２〜約１０個、好ましくは炭素原子約２〜約８個、そしてさらに好ましくは炭素原子２〜約６個を含有する。適当なアルケニル基の例には、プロピレニル、ブテン−１−イル、イソブテニル、ペンテン−１−イル、２，２−メチルブテン−１−イル、３−メチルブテン−１−イル、ヘキセン−１−イル、ヘプテン−１−イルおよびオクテン−１ −イルなどが包含される。「低級アルキニル」の用語は、１個または２個以上の三重結合を含有する不飽和の非環状炭化水素基を意味する。これらの基は炭素原子約２〜約１０個、好ましくは炭素原子約２〜約８個、そしてさらに好ましくは炭素原子２〜約６個を含有する。適当なアルキニル基の例には、エチニル、プロピニル、ブチン−１−イル、ブチン−２−イル、ペンチン−１−イル、ペンチン−２−イル、３−メチルブチン−１−イル、ヘキシン−１−イル、ヘキシン−２−イル、ヘキシン−３− イル、３，３−ジメチル−ブチン−１−イル基などが包含される。「低級アルコキシ」の用語は、単独でまたは組合わされて、アルキルエーテル基を意味し、ここでアルキルの用語は前記定義のとおりであり、そして最も好ましくは炭素原子１〜約４個を含有する。適当なアルキルエーテル基の例には、メトキシ、エトキシ、ｎ−プロポキシ、イソプロポキシ、ｎ−ブトキシ、イソブトキシ、sec −ブトキシ、tert−ブトキシなどが包含される。「脂環式」または「シクロアルキル」の用語は、環内に炭素原子３〜約１０個、そして好ましくは炭素原子３〜約６個を有する脂環式基を意味する。適当な脂環式基の例には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘキセニルなどが包含される。「芳香族炭化水素」の用語は、炭素原子４〜約１６個、好ましくは炭素原子６〜約１２個、さらに好ましくは炭素原子６〜約１０個を有する芳香族基を意味する。適当な芳香族炭化水素基の例には、フェニル、ナフチルなどが包含される。「ヘテロサイクリル基（複素環式基）」の用語は、炭素原子４〜約１０個、好ましくは炭素原子約５〜約６個を有し、この基中の１〜約４個の炭素原子が窒素、酸素または硫黄により置き換えられている芳香族系を包含する、飽和または不飽和の環状炭化水素基を意味する。この「複素環式基」は、芳香族炭化水素基に縮合させることができる。適当な例には、ピロリル、ピリジニル、ピラゾリル、トリアゾリル、ピリミジニル、ピリダジニル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、インドリル、チエニル、フラニル、テトラゾリル、２−ピロリジニル、３−ピロリジニル、ピロリンジニル、１，３−ジオキソラニル、２−イミダゾンリニル、イミダゾリジニル、２−ピラゾリニル、ピラゾリジニル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、オキサジアゾリル、トリアゾリル、チアジアゾリル、２Ｈ−ピラニル、４Ｈ−ピラニル、ピペリジニル、１，４− ジオキサニル、モルホリニル、１，４−ジチアニル、チオモルホリニル、ピラジニル、ピペラジニル、トリアジニル、１，３，５−トリチアニル、ベンゾ（ｂ）チオフェニル、ベンズイミダゾリル、キノリニルなどが包含される。「ハロゲン」の用語は、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。「プロドラッグ」の用語は、インビボでさらに活性になる化合物を意味する。本明細書で使用されているものとして、患者の「処置」の用語は、予防を含むものとする。本出願で引用されている米国または外国の刊行物、特許または出願の全部を、本明細書に記載されているものとして引用してここに組入れる。本発明の構成に使用されている出発物質は、Sigma 社などから市販されている。本発明の化合物について、２つの一般合成経路を以下で概説する。本明細書に記載の本発明の化合物の全部を製造するための出発物質および処理条件の選択における修正は当業者にとって自明であると見做される。本発明を以下の例によって説明する。例１Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨ（５．０ｇ；１０ミリモル）、イソソルビッド−５−モノナイトレート（２．０ｇ；１０ミリモル）および４−ジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ、１００mg）をジクロロメタン（１５０ml）に溶解した。この溶液に、Ｎ，Ｎ′−ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ、２．３ｇ；１２ミリモル）を、撹拌しながら添加した。この混合物を室温において週末にわたり撹拌した。少量の試料を質量スペクトル分析用に採取した。この試料は所望の中間体の存在を示した（ＦＡＢ−ＭＳ：（Ｍ＋Ｌｉ）⁺＝５９１）。固形尿素を濾過により分離し、濾液を１時間かけてジエチルアミン（ＤＥＡ；４０ml ）で処理した。溶媒を回転蒸発器で除去し、残留物はさらに精製することなく使用した。ＦＡＢ−ＭＳ：（Ｍ＋Ｌｉ）⁺＝３６９。例２例１に記載の方法に従い、Ｆｍｏｃ−Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−ＯＨおよび２−アミノ−１，４：３，６−ジアンヒドロソルビトール−５−ナイトレートから標題の化合物を製造する。例３４−アミジノフェニルペンタン酸・ＨＣｌ（２．６ｇ；１０ミリモル）、ジスクシンイミジルカーボネート（ＤＳＣ、２．５ｇ；１０ミリモル）および４−ジメチルアミノピリジン（０．５ｇ）を、ジメチルホルムアミド／ピリジン（３：１；２００ml）中で一夜にわたり撹拌した。この混合物に、Ａｓｐ（ＯｔＢｕ） −イソソルビッド−５−モノナイトレート（例１）をゆっくり添加した。この反応混合物を室温でさらに１日撹拌し、次いで濾過した。この濾液から少量の試料を質量スペクトル分析用に採取した。この試料は所望の中間体の存在を示した（ＦＡＢ−ＭＳ：（Ｍ＋Ｌｉ）⁺＝５６５）。この濾液を乾燥させ、残留物をトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、１００ml）で１時間処理した。酸を回転蒸発器で減圧下に分離し、油状残留物をデルタパック（Deltapak）Ｃ１８カラムで５％〜５０％アセトニトリル／水／０．０５％トリフルオロ酢酸の線状勾配を用いる逆相調製ＨＰＬＣによって精製した。この生成物を凍結乾燥させ、白色固形物４５０mgを得た。ＦＡＢ−ＭＳ：（Ｍ＋Ｈ）⁺＝５０８．９。¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆ ）１．４〜１．６（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ₂−ＣＨ₂−）、２．１５（ｔ，２Ｈ，ＣＨ₂−フェニル）、４．３５および５．１（ｄ，２Ｈ，イソソルビッド）、４．５（ｑ，１Ｈ，α−ＣＨ）、４．９２および５．５（ｔ，２Ｈ，イソソルビッド）、７．４および７．７５（ｄｄ，４Ｈ，フェニル）、８．３４（ｍ，１Ｈ，ＮＨ）、９．０５および９．２（ｓ，２Ｈ，アミジン）。例４例３に記載の方法に従い、４−アミジノフェニルペンタン酸・ＨＣＬおよび例２の標題の生成物から標題の化合物を製造する。例５例３（１００mg）を、１０nMシステインを含有するリン酸塩緩衝した塩類溶液（pH７．４；１０ml）に溶解し、この混合物を室温で週末にわたり撹拌した。この反応の進行は分析ＨＰＬＣによって追跡した。この混合物を次いで、デルタパックＣ１８カラム上で５％〜５０％アセトニトリル／水／０．０５％トリフルオロ酢酸の線状勾配を用いる調製逆相ＨＰＬＣにより精製した。この生成物を凍結乾燥させ、白色固形物５mgを得た。ＦＡＢ−ＭＳ：（Ｍ＋Ｈ）⁺＝４６４．４。例６４−［［４−アミジノフェニル］−アミノ］−４−オキソブタン酸・ＴＦＡ（３．５ｇ；１０ミリモル）を、室温において、乾燥ジメチルホルムアミド（１００ml）に添加し、次いでＮ−メチルモルホリン（ＮＭＭ、１ｇ；１０ミリモル）およびイソブチルクロロホーメート（１．３７ｇ；１０ミリモル）を添加した。この混合物に、Ａｓｐ（ＯｔＢｕ）−イソソルビッド−５−モノナイトレート（例１；〜１０ミリモル）を添加し、次いでＮ−メチルモルホリン（１ｇ；１０ミリモル）を添加した。この反応混合物を室温で２時間撹拌し、次いで濾過した。この濾液を乾燥させ、残留物をトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ、５０ml）で１時間処理した。酸を回転蒸発器で減圧下に分離し、油状残留物をデルタパックＣ１８カラムで５％〜５０％アセトニトリル／水／０．０５％トリフルオロ酢酸の線状勾配を用いる調製逆相ＨＰＬＣにより精製した。この生成物を凍結乾燥させ、白色固形物７００mgを得た。ＦＡＢ−ＭＳ：（Ｍ＋Ｈ）⁺＝５２４．４。¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）４．３５および５．０５（ｄ，２Ｈ，イソソルビッド）、４．５（ｑ，１Ｈ，α−ＣＨ）、４．９２および５．５（ｄ，２Ｈ，イソソルビッド）、７．７５（ｓ，４Ｈ，フェニル）、８．４４（ｍ，１Ｈ，ＮＨ）、８．８５および９．１５（ｓ，２Ｈ，アミジン）。例７例６に記載の方法に従い、４−［［４−アミジノフェニル］−アミノ］−４− オキソブタン酸・ＴＦＡおよび例２の標題の生成物から標題の化合物を製造する。例８例６（１００mg）を、１０mMシステインを含有する稀重炭酸ナトリウム溶液（ pH７．４；５ml）に溶解し、この混合物を室温で一夜にわたり撹拌した。この反応の進行は分析ＨＰＬＣによって追跡した。この混合物を次いで、デルタパックＣ１８カラムで５％〜５０％アセトニトリル／水／０．０５％トリフルオロ酢酸の線状勾配を用いる調製逆相ＨＰＬＣにより精製した。この生成物を凍結乾燥させ、白色固形物４０mgを得た。ＦＡＢ−ＭＳ：（Ｍ＋Ｈ）⁺＝４７９．４。例９例３に記載の方法に従い、α−［［１−［４−（アミノイミノメチル）フェニル］−２−オキソ−ピロリジン−３−イル］酢酸および例１の標題の生成物から標題の化合物を製造する。例１０例３に記載の方法に従い、α−［１−［４−（アミノイミノメチル）フェニル］−２−オキソ−ピロリジン−３−イル］酢酸および例２の標題の生成物から標題の化合物を製造する。例１１例３に記載の方法に従い、α−［１−［４−（アミノイミノメチル）フェニル］−２−イミダゾリノン−３−イル］酢酸および例１の標題の生成物から標題の化合物を製造する。例１２例３に記載の方法に従い、α−［１−［４−（アミノイミノメチル）フェニル］−２−イミダゾリノン−３−イル］酢酸および例２の標題の生成物から標題の化合物を製造する。例１３例３に記載の方法に従い、α−［１−［４−（アミノイミノメチル）フェニル］−２−メルカプト−イミダゾリジン−３−イル］酢酸および例１の標題の生成物から標題の化合物を製造する。例１４例３に記載の方法に従い、α−［１−［４−（アミノイミノメチル）フェニル］−２（３Ｈ）−オキソ−１Ｈ−イミダゾール−３−イル］酢酸および例１の標題の生成物から標題の化合物を製造する。例１５例３に記載の方法に従い、α−［１−［４−（アミノイミノメチル）フェニル］−２（３Ｈ）−オキソ−１Ｈ−イミダゾール−３−イル］酢酸および例２の標題の生成物から標題の化合物を製造する。例１６例３の生成物（２５mg）を、ＨＣｌ（気体）飽和エタノール溶液（５ml）で処理した。この混合物を減圧下に乾燥させ、残留物をデルタパックＣ１８カラムで５％〜５０％アセトニトリル／水／０．０５％トリフルオロ酢酸の線状勾配を用いる逆相ＨＰＬＣにより精製した。この生成物を凍結乾燥させ、白色固形物２０ mgを得た。ＦＡＢ−ＭＳ：（Ｍ＋Ｈ）⁺＝５３６．９。¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ− ｄ₆）１．１８（ｔ，３Ｈ，ＣＨ₃）、１．４〜１．６（ｍ，４Ｈ，−ＣＨ₂−ＣＨ₂−）、２．１（ｔ，２Ｈ，ＣＨ₂−フェニル）、４．０５（ｍ，２Ｈ，−ＯＣＨ₂−）、４．３５および５．１（ｄ，２Ｈ，イソソルビッド）、４．５（ｑ，１Ｈ，α−ＣＨ）、４．９５および５．５（ｔ，２Ｈ，イソソルビッド）、７．４および７．７５（ｄｄ，４Ｈ，フェニル）、８．３８（ｍ，１Ｈ，ＮＨ）、８．９５および９．１（ｓ，２Ｈ，アミジン）。例１７例１６の方法によって、例６の生成物（２５mg）を、ＨＣｌ（気体）飽和エタノール溶液で処理し、標題の化合物を白色固形物として生成した（２０mg）。ＦＡＢ−ＭＳ：（Ｍ＋Ｈ）⁺＝５５２．５。¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）１．１８（ｔ，３Ｈ，ＣＨ₃）、４．０５（ｍ，２Ｈ，−ＯＣＨ₂−）、４．３５および５．０５（ｄ，２Ｈ，イソソルビッド）、４．５（ｑ，１Ｈ，α−ＣＨ）、４．９２および５．５（ｍ，２Ｈ，イソソルビッド）、７．７５（ｓ，４Ｈ，フェニル）、８．４４（ｍ，１Ｈ，ＮＨ）、８．７５および９．１５（ｓ，２Ｈ，アミジン）。例１８例１６の方法によって、例７の生成物をＨＣｌ（気体）飽和エタノール溶液で処理し、標題の化合物を生成させる。例１９例１６の方法によって、例１１の生成物をＨＣｌ（気体）飽和エタノール溶液で処理し、標題の化合物を生成させる。例２０例１６の方法によって、例１２の生成物をＨＣｌ（気体）飽和エタノール溶液で処理し、標題の化合物を生成させる。例２１例１６の方法によって、例９の生成物をＨＣｌ（気体）飽和エタノール溶液で処理し、標題の化合物を生成させる。例２２例１６の方法によって、例１４の生成物をＨＣｌ（気体）飽和エタノール溶液で処理し、標題の化合物を生成させる。生物学上記発明の化合物を血小板に富んだ血漿（ＰＲＰ）におけるインビトロヒト血小板凝集試験で、およびまた精製ヒトフィブリノーゲンおよびビトロネクチンレセプターに対する競合的固相結合試験で試験した。ＰＲＰにおけるインビトロヒト血小板凝集少なくとも２週間、いかなる抗血小板凝集剤も服用していない健康な男性または女性の献血者を採血前の８時間、断食させた；次いで全血３０mlを蝶型針および０．１２９Ｍ緩衝クエン酸ナトリウム（３．８％）３mlを含有する３０ccプラスティック製注射器を用いて採血した。この注射器を注意して回転させ、クエン酸塩を混合させた。室温で１２分間、２５０Ｘｇで遠心分離し、この遠心分離を中断することなく停止点まで進行させることによって血小板に富んだ血漿（ＰＲＰ）を調製した。このＰＲＰを、プラスティック製ピペットにより血液から分離し、室温に維持されているプラスティック栓付き５０mlコーニング(Corning)円錐形無菌遠心分離管に入れた。残りの血液を室温で１５分間、２０００Ｘｇで遠心分離し、この遠心分離を中断することなく停止点まで進行させることによって血小板に乏しい血漿（ＰＰＰ）を調製した。このＰＲＰをＰＰＰによって、２〜３×１０⁸血小板／mlの数値に調整した。このＰＲＰ試料４５０μl および被験化合物または塩類溶液５０μl をペイトン（Payton）凝集計(Payton Scientific ，Inc.，Buffalo，N．Y.)で３７℃において１分間予備インキュベートした。アデノシン５′−ジホスフェート(ＡＤＰ)(２００mM)５０μl をキュベットに加え、次いで凝集を１分間測定した。全化合物を、２回試験した。結果は次のとおりに計算した：対照のパーセント＝[（化合物の最大ＣＤ−化合物の初期ＣＤ）] ÷［（対照塩類溶液の最大ＣＤ−対照塩類溶液の初期ＣＤ）］×１００。抑制％＝１００−（対照のパーセント）。被験化合物および中央抑制濃度（ＩＣ₅₀）で表わされるそれらの活性は表１に記録されているとおりであった。固相レセプター試験これらの試験は基本的に、従来開示されている方法と同一であった。精製したヒトビトロネクチンレセプター(α_vβ₃)または精製したヒトフィブリノーゲンレセプター(ＩＩ_bβ₃)を、１．０mMのＣａ⁺⁺、Ｍｇ⁺⁺およびＭｎ⁺⁺を含有するトリス（Tris）−緩衝塩類溶液、pH７．４（ＴＢＳ⁺⁺⁺）に、１０μg ／mlに原液から稀釈した。この稀釈したレセプターを直ちに、リンブロ（Linbro）微量滴定板に１００μl ／凹部（１００ngレセプター／凹部）で移した。この板をシールし、次いで４℃で一夜にわたりインキュベートし、レセプターを凹部に結合させた。残りの全部の工程は室温で行った。これらの試験板を空にし、次いでＴＢＳ⁺⁺⁺（ＴＢＳ⁺⁺⁺／ＢＳＡ）中の１％放射性免疫検定品質ウシ血清アルブミン２００μl をブロック露出プラスティック表面に加えた。２時間のインキュベーション後に、この試験板を９６凹部板洗浄機を用いてＴＢＳ⁺⁺⁺により洗浄した。被験化合物および対照の対数関数的の一連の稀釈を２mMの原液濃度から出発し、かつまた稀釈液としてＴＢＳ⁺⁺⁺／ＢＳＡ中の２nMビオチン化ビトロネクチンを使用して行った。この試験（または対照）リガンドで標識付したリガンドの予備混合および引続く５０μl 部づつの試験板への移動は、ＣＥＴＵＳプロペット（Propette）ロボットにより行った。標識付したリガンドの最終濃度は１nMであり、そして被験化合物の最高濃度は１．０×１０^-4Ｍであった。競合を２時間生じさせた後に、全凹部を前記のとおりに板洗浄機により洗浄した。アフィニティ精製したホースラディッシュペルオキシダーゼ標識付したヤギ抗ビオチン抗体をＴＢＳ⁺⁺⁺／ＢＳＡ中で１：３０００に稀釈し、各凹部に１２５μl づつ加えた。３０分後に、これらの板を洗浄し、次いで１００mM／リットルクエン酸塩緩衝液（pH５．０）中のｏ−フェニレンジアミン／Ｈ₂Ｏ₂基質とともにインキュベートした。これらの板を、微量滴定板読取り機により４５０nmの波長で読取り、最大結合対照凹部が約１．０の吸光値に達した時点で、最終Ａ₄₅₀を分析用に記録した。このデータをエクセル（ＥＸＣＥＬ）（登録商標名）スプレッドシートプログラムで使用されるマクロリツン(macrp writtem)を用いて分析した。平均標準偏差値および変動係数％は、二種の濃度について決定した。平均Ａ₄₅₀値を４つの最大−結合対照（競合体は添加されていない）の平均値に対して正規化した。この正規化値を、セミ−ログスケール上にプロットした４種のパラメーター曲線適合アルゴリズムに付し、次いでコンピューター算出ＩＣ₅₀および対応する相関係数を記録した。フィブリノーゲンのペプチド断片であるＧＲＧＤＳＰを陽性対照として各板に包含させた。前記説明から、当業者は、本発明の本質的特徴を容易に認識することができ、かつまた本発明の精神および範囲から逸脱することなく、各種用途および条件に適合させるために、本発明を種々に変更および修正することができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者トジョエング，フォーエス. アメリカ合衆国 63021 ミズーリ州マンチェスター，シュガーヒルドライブ 875 (72)発明者ザペック，マークイー. アメリカ合衆国 62260 イリノイ州オーフォーロン，グレンホロウドライブ 914

Claims

【特許請求の範囲】１．下記式を有する化合物またはその医薬として許容される塩：式中、Ａは独立して、下記の基からなる群から選択され：（各式中、点線は単結合または二重結合を表わす）、そしてＢはカルボニルまたはイミノカルボニル基からなる群から選択され；Ｗは水素、低級アルキル基、低級アルケニル基、低級アルキニル基、脂環式炭化水素基および芳香族炭化水素基からなる群から選択され、これらの基は全部が、置換基としてヒドロキシル、低級アルキル、低級アルコキシ、ハロゲン、ニトロ、アミノ、アシルオキシ、フェニルおよびナフチルを有していてもよく、この置換基はハロゲン、ニトロ、低級アルコキシおよび低級アルキルにより置換されていてもよく；Ｚ、Ｚ′は独立して、水素、ハロゲン、シアノ、スルホニル、ヒドロキシ、低級アルコキシおよび低級アルキル基からなる群から選択され；Ｘはカルボニル、脂環式基または複素環式基であり；Ｙは硝酸(ＯＮＯ₂)、亜硝酸（ＯＮＯ）、Ｓ−ニトロソ−システイン、Ｓ−ニトロソ−ペニシラミンまたは下記基の１つであり：（各式中、Ｒは酸素またはイミノ基である）ｎは１〜約４の整数である。２．Ａは下記の基からなる群から選択され：（各式中、点線は単結合または二重結合を表わす）、Ｂはカルボニルまたはイミノカルボニル基からなる群から選択され；Ｗは水素、炭素原子１〜約６個を有する低級アルキル基、炭素原子２〜約６個を有する低級アルケニル基、炭素原子３〜約６個を有する脂環式炭化水素基および炭素原子６〜約１２個を有する芳香族炭化水素基からなる群から選択され、これらの基は全部が、ヒドロキシル、低級アルコキシ、低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、アミノおよびアシルオキシにより置換されていてもよく；Ｚ、Ｚ′は独立して、水素、ハロゲン、シアノ、スルホニル、ヒドロキシ、低級アルキルおよび低級アルコキシ基からなる群から選択され；Ｘはカルボニル、脂環式基または複素環式基であり；Ｙは硝酸(ＯＮＯ₂)、亜硝酸（ＯＮＯ）、Ｓ−ニトロソ−システイン、Ｓ−ニトロソ−ペニシラミンまたは下記基の１つであり：（各式中、Ｒは酸素またはイミノ基である）、そしてｎは１〜約４の整数である、請求項１に記載の化合物。３．Ａは下記の基からなる群から選択され：（各式中、点線は単結合または二重結合を表わす）、Ｂはカルボニルまたはイミノカルボニル基からなる群から選択され；Ｗは水素、炭素原子１〜約６個を有する低級アルキル基、炭素原子３〜約６個を有する脂環式炭化水素基および炭素原子６〜約１２個を有する芳香族炭化水素基からなる群から選択され、これらの基は全部が、ヒドロキシル、低級アルコキシ、低級アルキル、ハロゲン、ニトロ、アミノおよびアシルオキシにより置換されていてもよく；Ｚ、Ｚ′は独立して、水素、ハロゲン、アルコキシおよび低級アルキル基からなる群から選択され；Ｘはカルボニルまたは脂環式基であり；Ｙは硝酸(ＯＮＯ₂)、亜硝酸（ＯＮＯ）、Ｓ−ニトロソ−システイン、Ｓ−ニトロソ−ペニシラミンまたは下記基の１つであり：（各式中、Ｒは酸素またはイミノ基である）、そしてｎは１〜約３の整数である、請求項２に記載の化合物。４．Ａは下記の基からなる群から選択され：（各式中、点線は単結合または二重結合を表わす）、Ｂはカルボニルまたはイミノカルボニル基からなる群から選択され；Ｗは水素、メチル、エチル、プロピル、シクロヘキシル基からなる群から選択され；Ｚ、Ｚ′は独立して、水素およびヒドロキシ基からなる群から選択され；Ｘはカルボニルまたは脂環族基であり；Ｙは硝酸(ＯＮＯ₂)、亜硝酸（ＯＮＯ）、Ｓ−ニトロソ−システイン、Ｓ−ニトロソ−ペニシラミンまたは下記基の１つであり：（各式中、Ｒは酸素またはイミノ基である）、そしてｎは１〜３の整数である、請求項３に記載の化合物。５．Ａは下記の基からなる群から選択され：（各式中、点線は単結合または二重結合を表わす）、そしてＢはカルボニル基であり；Ｗは水素、エチルおよびシクロヘキシル基からなる群から選択され；Ｚ、Ｚ′は水素であり；Ｘはカルボニル基であり；Ｙは下記の基の１つであり：（各式中、Ｒは酸素である）、そしてｎは１〜２の整数である、請求項４に記載の化合物。６．請求項１、２、３、４または５に記載の化合物を、少なくとも１種の無毒性で医薬上で許容される担体とともに含有する医薬組成物。７．血小板凝集を抑制し、および血管拡張を増進させる哺乳動物の処置方法であって、このような処置を必要とする哺乳動物に請求項１、２、３、４または５に記載の化合物の少なくとも１種の治療有効量を投与することからなる処置方法。