JPH11318466A - サーカディアンリズムに関するｄｎａ、該ｄｎａがコードする蛋白質、該蛋白質を認識する抗体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 Ｐｅｒ１遺伝子、Ｐｅｒ２遺伝子以外のサー
カディアンリズムに関するＤＮＡを取得すること、該Ｄ
ＮＡがコードする蛋白質および該蛋白質を認識する抗体
を提供すること。 【解決手段】 ヒトＰｅｒ３ＤＮＡおよびマウスＰｅｒ
３ＤＮＡ、該ＤＮＡがコードする蛋白質および該蛋白質
を認識する抗体を提供する。また、該ＤＮＡとハイブリ
ダイズするポリヌクレオチド、該ポリヌクレオチドがコ
ードする蛋白質を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、サーカディアンリ
ズムに関するマウスＰｅｒ３ＤＮＡおよびヒトＰｅｒ３
ＤＮＡ、該ＤＮＡがコードする蛋白質ならびに該蛋白質
を認識する抗体に関する。

【０００２】

【従来の技術】地球上のほとんど全ての生物は、外部か
らの時間情報が遮断された際にも、内因的周期で日々の
生命活動を行う。このリズムをサーカディアンリズム
（概日リズム）という。このサーカディアンリズムに関
する遺伝子として、ショウジョウバエでＰｅｒ遺伝子が
同定された。マウスでは、サーカディアンリズムに関す
る遺伝子として、Ｐｅｒ１遺伝子、Ｐｅｒ２遺伝子が同
定されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、Ｐｅｒ１遺
伝子、Ｐｅｒ２遺伝子以外のサーカディアンリズムに関
するＤＮＡを取得することを課題とする。また該ＤＮＡ
がコードする蛋白質および該蛋白質を認識する抗体を提
供することを課題とする。

【０００４】

【課題を解決するための手段】本発明者は、マウスＰｅ
ｒ２遺伝子の塩基配列をもとにＥＳＴデータベースを探
索して該データベースからマウスＰｅｒ２遺伝子とホモ
ロジーのある塩基配列を選び出した。そして、該塩基配
列の一部の塩基配列からなるプライマーを作製した。そ
して、該プライマーを用いてマウス脳ｃＤＮＡライブラ
リーおよびヒト視床下部ｃＤＮＡライブラリーを鋳型に
してそれぞれについてＰＣＲを行うことで新規なサーカ
ディアンリズムに関する遺伝子であるＰｅｒ３ＤＮＡを
単離し、その塩基配列を決定した。

【０００５】本発明は、前記のヒトＰｅｒ３ＤＮＡおよ
びマウスＰｅｒ３ＤＮＡを提供するものである。

【０００６】また、本発明は、前記のヒトＰｅｒ３ＤＮ
ＡおよびマウスＰｅｒ３ＤＮＡ（以下、まとめてＰｅｒ
３ＤＮＡということがある。）とハイブリダイズするポ
リヌクレオチド（アンチセンスポリヌクレオチドを含
む）を提供するものである。

【０００７】また、本発明は、前記Ｐｅｒ３ＤＮＡがコ
ードするアミノ酸配列からなるＰｅｒ３蛋白質（以下、
Ｐｅｒ３ということがある）を提供するものである。

【０００８】また、本発明は、前記Ｐｅｒ３ＤＮＡとハ
イブリダイズするポリヌクレオチドがコードする蛋白質
を提供するものである。

【０００９】また、本発明者は、前記Ｐｅｒ３を認識す
る抗体を提供するものである。

【００１０】

【発明の実施の形態】配列表の配列番号１または３に記
載の塩基配列からなるＤＮＡのコード領域（配列表の配
列番号１に記載の塩基配列については２８７番目のＡか
ら３８３５番目のＴまで、配列表の配列番号３に記載の
塩基配列については２４１番目のＡから３５８５番目の
Ｔまで）をプローブとして用いて、ポリヌクレオチドラ
イブラリーからＰｅｒ３ＤＮＡとハイブリダイズするポ
リヌクレオチドを得ることができる。ポリヌクレオチド
にはＤＮＡとＲＮＡがある。本出願において、ポリヌク
レオチドの鎖の数は特に限定されない。配列番号１に記
載の塩基配列からなるＤＮＡにハイブリダイズするＤＮ
Ａは、センス鎖、アンチセンス鎖および両者からなる二
本鎖すべてを含む。ＲＮＡについては、センスＲＮＡお
よびアンチセンスＲＮＡを含む。

【００１１】以下に例として、ｃＤＮＡライブラリーか
ら、Ｐｅｒ３ＤＮＡとハイブリダイズするｃＤＮＡを得
る方法について説明する。 １）配列番号１または３に記載の塩基配列のコード領域
からなるＤＮＡをＴａｋａｒａ ＭＥＧＡ ＬＡＢＥＬ
キット（登録商標、宝酒造社製）を用いて取扱説明書の
通りに標識する。 ２）次に、下記の組成のＤＮＡ反応液を調製し、この液
を３７℃で３０分間インキュベートした後、７０℃で１
０分間熱処理し、酵素を失活させる。 ＤＮＡプローブ（２ｐｍｏｌ／μｌ） ２μｌ １０倍ホスホライレイション緩衝液 ２μｌ 〔γ−３２Ｐ〕ＡＴＰ（３７０ＭＢｑ／ｍｌ）（アマシャム製） ５μｌ Ｔ４ ポリヌクレオチドキナーゼ １μｌ 合計１０μｌ

【００１２】３）Ｔ５０Ｅ（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−Ｃｌ
ｐＨ８．０，１ｍＭ ＥＤＴＡ）で平衡化されたＳｅ
ｐｈａｄｅｘＧ−２５（登録商標、ファルマシア社製）
を１．５ｍｌポリプレップカラム（バイオラッド社製）
にベッドボリュームが１ｍｌになるように詰め、２）で
熱処理をしたＤＮＡ反応液を該カラムに載せる。 ４）その後、２００μｌＴ５０Ｅをカラムに４回流し、
２回目の２００μｌで溶出した画分から標識化ＤＮＡプ
ローブを得る。

【００１３】５）前記で得られた標識化ＤＮＡプローブ
画分のうち１５０μｌを、ニトロセルロース膜上に固定
したプラークのｃＤＮＡプローブ（ｃＤＮＡライブラリ
ーのニトロセルロース膜上への固定は、、Ｍｏｌｅｃｕ
ｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ ２ｎｄ Ｅｄｉｔｉｏｎ（Ｃ
ｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔ
ｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、１９８９年）第９章９．３８ペー
ジないし９．４１ページに記載の方法にしたがって行え
る。）と以下の条件でハイブリダイズさせる。 プレハイブリダイゼーション ６×ＳＳＣ ５×Ｄｅｎｈａｌｄｔ’ｓ ０．０５％ ピロリン酸ナトリウム １００μｇ／ｍｌ ｄｅｎａｔｕｒｅｄ ｈｅｒｒｉｎ
ｇ ｓｐｅｒｍＤＮＡ ０．５％ＳＤＳ 総液量 ５０ｍｌ 反応温度３７℃ 反応時間１時間 ハイブリダイゼーション ６×ＳＳＣ １×Ｄｅｎｈａｌｄｔ’ｓ ０．０５％ ピロリン酸ナトリウム １００μｇ／ｍｌ ｄｅｎａｔｕｒｅｄ ｈｅｒｒｉｎ
ｇ ｓｐｅｒｍＤＮＡ １×１０⁶ ｃｐｍ／ｍｌ ｃＤＮＡプローブ 総液量５０ｍｌ 反応温度４２℃ 反応時間１８時間

【００１４】６）ハイブリダイズの終了したニトロセル
ロース膜を以下の条件で１回ずつ洗浄する。 ６×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ ５００ｍｌ 温度４０℃ 時間２０分間 ３×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳ ５００ｍｌ 時間４２℃ 時間２０分間 ７）洗浄したニトロセルロース膜をＸ線フィルム（例え
ば、コダック社製ＸＡＲ５フィルム）に−８０℃で一晩
露光し、オートラジオグラフを撮影する。 ８）得られたオートラジオグラフから、陽性のプラーク
の位置を決定し、対応する寒天上のプラークをＳＭ溶液
に回収する。 ９）回収したプラークは、常法により再度ＮＺＹ寒天培
地上にプラーク形成を行わせ、ニトロセルロース膜上に
固定する。 １０）５）〜９）の過程を３回繰り返し、陽性のプラー
クは単一なものにする。該プラークを回収し、１００μ
ｌのＳＭ溶液に懸濁し、ファージを安定化させる。該プ
ラークから単離した遺伝子がＰｅｒ３にハイブリダイズ
するｃＤＮＡである。

【００１５】３．Ｐｅｒ３ＤＮＡにハイブリダイズする
ｃＤＮＡの大量調製 １）ＳＭ溶液に懸濁したプラークのファージ５０μｌと
Ｙ１０９０ｒ−大腸菌２０μｌを混合し、３７℃、１５
分間放置する。 ２）その後、１００μｇ／ｍｌアンピシリンを含む１０
ｍｌＮＺＹ培地に１）で混合した溶液を移し、３７℃で
６時間培養する。 ３）８０００ｒｐｍ、５分間遠心分離し、上清を回収す
る。 ４）該上清に、５Ｍ ＮａＣｌを１ｍｌ、ポリエチレン
グリコール６０００を１．１ｇを加え、溶かす。 ５）該溶液を氷上に１時間置き、その後１００００ｒｐ
ｍ、４℃で２０分間遠心分離を行う。 ６）沈殿を回収し、７００μｌのＳＭ溶液に懸濁する。 ７）クロロホルムを５００μｌ加えて撹拌し、残った大
腸菌を溶かす。 ８）５０００ｒｐｍ、１０分間遠心分離し、水層を回収
する。

【００１６】９）これに、１ｍｇ／ｍｌ ＲＮａｓｅ
Ａ、５ｍｇ／ｍｌ ＤＮａｓｅＩ（共にシグマ製）を各
１μｌずつ加え、３７℃で１時間放置したのち、２０％
ポリエチレングリコール６０００（０．８Ｍ ＮａＣ
ｌ）を６００μｌ加え、氷上に３０分間放置する。 １０）４℃で、１５０００ｒｐｍ、２０分間遠心分離し
た後、沈殿を回収する。 １１）この沈殿に５００μｌのＳＭ溶液、５０μｌの５
Ｍ ＮａＣｌ、５０μｌの０．５Ｍ ＥＤＴＡを加え、
更に、４００μｌのフェノールを加えて撹拌し、ファー
ジを溶かしてｃＤＮＡを遊離させる。 １２）該溶液を室温で１５０００ｒｐｍ、５分間遠心分
離した後、水層を回収する。これに１ｍｌのエタノール
を加え、１５０００ｒｐｍ、２０分間遠心分離し、液層
を捨てる。 １３）７０％エタノール１ｍｌで沈殿を洗浄し、１００
μｌのＴＥ溶液（Ｔｒｉｓ−Ｃｌ ｐＨ８．０ １０ｍ
Ｍ、１ｍＭ ＥＤＴＡ）に沈殿を溶かし、ＤＮＡ溶液を
得る。

【００１７】４．形質転換体の作製 実施例１の７．と同様にして前記で得たＰｅｒ３ＤＮＡ
とハイブリダイズするｃＤＮＡを適当なベクター（例え
ば、ｐＧＭＴベクター）に挿入した後、宿主（例えば、
大腸菌）に導入することで形質転換体を作製することが
できる。

【００１８】前記のようにして得られたポリヌクレオチ
ドがコードする蛋白質は、Ｐｅｒ３の主たる機能が変化
することなく、配列表の配列番号２または４に記載のア
ミノ酸配列における一または複数のアミノ酸が置換、欠
失または付加されたアミノ酸配列からなる蛋白質となる
ことがある。このような蛋白質をＰｅｒ３変異体とい
う。

【００１９】本発明のＰｅｒ３変異体のアミノ酸配列
は、該変異体をコードする遺伝子の塩基配列から決定す
ることが可能である。例えば、市販のプログラム（例え
ば、ＭａｃＶｅｃｔｏｒ（登録商標、イーストマンケミ
カル社製）を用いて可能である。

【００２０】遺伝暗号の縮重により、ポリヌクレオチド
から生産されたポリペプチドのアミノ酸配列を変えるこ
となく、該ポリヌクレオチドの塩基配列の少なくとも一
部の塩基を他の種類の塩基に置換することができる。し
たがって、本発明のＰｅｒ３をコードするポリヌクレオ
チドとは、縮重の全てのパターンを含むものである。

【００２１】配列表の配列番号１に記載の塩基配列から
なるＤＮＡは、天然に存在するヒトＰｅｒ３（ｈ−Ｐｅ
ｒ３）ＤＮＡであり、配列表の配列番号３に記載の塩基
配列からなるＤＮＡは、天然に存在するマウスＰｅｒ３
（ｍ−Ｐｅｒ３）ＤＮＡである。

【００２２】本発明は、前記したように、Ｐｅｒ３をコ
ードするポリヌクレオチドのアンチセンス鎖の塩基配列
からなるアンチセンスポリヌクレオチドおよびその誘導
体を含むものである。アンチセンスポリヌクレオチドは
ポリヌクレオチドに含まれるものであるが、本明細書に
おいて、特にアンチセンス鎖の塩基配列からなるポリヌ
クレオチドであることを明示する場合にアンチセンスポ
リヌクレオチドという。該アンチセンスポリヌクレオチ
ドは、Ｐｅｒ３をコードするポリヌクレオチドにハイブ
リダイズすることが可能なものであり、それがハイブリ
ダイズするポリヌクレオチドがコード領域のポリヌクレ
オチドであれば該ポリヌクレオチドがコードするポリペ
プチドの生合成を阻害することが可能である。ポリペプ
チドの生合成を阻害するためのアンチセンスポリヌクレ
オチドは、１２塩基以上からなることが好ましい。一
方、細胞内に全長のアンチセンスポリヌクレオチドを取
り込ませるのは、あまりに長くても不適である。細胞内
にアンチセンスポリヌクレオチドを取り込ませ、Ｐｅｒ
３の生合成を阻害させる場合、１２塩基以上３０塩基以
下、好ましくは１５塩基以上２５塩基以下、より好まし
くは１８塩基以上２２塩基以下の塩基からなるアンチセ
ンスポリヌクレオチドを用いるのがよい。

【００２３】本発明のアンチセンスポリヌクレオチドま
たはその一部分は、塩基、リン酸、糖からなるヌクレオ
チドが複数結合したものが、天然には存在しないものを
含めて全て含まれる。代表的なものは、アンチセンスＤ
ＮＡとアンチセンスＲＮＡである。

【００２４】本発明のアンチセンスポリヌクレオチドに
ついて、公知のアンチセンス技術を用いて、目的のＤＮ
ＡやｍＲＮＡとの結合力、組織選択制、細胞透過性、ヌ
クレアーゼ耐性、細胞内安定性の高い様々なアンチセン
スポリヌクレオチド誘導体が得られる。

【００２５】ハイブリダイズのし易さの点では、一般的
には、ステムループを形成している領域の塩基配列に相
補的な塩基配列を持つアンチセンスポリヌクレオチドま
たはその誘導体を設計するとよいとされている。本発明
のアンチセンスポリヌクレオチドおよびその誘導体は、
必要に応じ、ステムループを形成することが可能であ
る。

【００２６】また、翻訳開始コドン付近、リボソーム結
合部位、キャッピング部位、スプライス部位の配列に相
補的な配列を有するようなアンチセンスポリヌクレオチ
ドは、一般に高い発現抑制効果が期待できる。したがっ
て、本発明のアンチセンスポリヌクレオチドまたはその
誘導体であって、Ｐｅｒ３をコードする遺伝子またはｍ
ＲＮＡの翻訳開始コドン付近、リボソーム結合部位、キ
ャッピング部位、スプライス部位の相補的な配列を含む
ものは、高い発現抑制効果が期待される。

【００２７】現在一般的に知られている誘導体は、ヌク
レアーゼ耐性、組織選択性、細胞透過性、結合力の少な
くとも一が高められた誘導体であることが好ましい。特
に好ましくは、フォスフォロチオエート結合を骨格構造
として有する誘導体である。本発明のポリヌクレオチド
およびその誘導体についても、これらの機能または構造
を有する誘導体が含まれる。

【００２８】天然型のアンチセンスポリヌクレオチドで
あれば、化学合成機を使用して合成したり、Ｐｅｒ３Ｄ
ＮＡを鋳型とするＰＣＲ法により本発明のアンチセンス
ポリヌクレオチドを作製することができる。また、メチ
ルフォスフォネート型やフォスフォロチオエート型等、
誘導体の中には、化学合成できるものもある。この場合
には、化学合成機に添付されている説明書にしたがって
操作を行い、得られた合成産物を逆相クロマトグラフィ
ー等を用いたＨＰＬＣ法により精製することによって
も、目的のアンチセンスポリヌクレオチドまたはその誘
導体を得ることができる。

【００２９】本発明のＰｅｒ３をコードするポリヌクレ
オチド、そのアンチセンスポリヌクレオチドまたはそれ
らの一部（連続する１２塩基以上の塩基配列からなるポ
リヌクレオチド）であるポリヌクレオチドをプローブと
して、ｃＤＮＡライブラリー等からＰｅｒ３ＤＮＡをス
クリーニングするためのプローブとして使用可能であ
る。このときＧＣ含有率が３０ないし７０％のものが好
適に使用可能である。また、連続する１５塩基以上の塩
基配列からなるポリヌクレオチドが特に好ましい。プロ
ーブとして用いる該ポリヌクレオチドは誘導体であって
もよい。通常、前記の塩基数以上の配列は特異性のある
配列であると認識されている。該プローブを用いたスク
リーニングにおいて使用するｃＤＮＡライブラリーとし
ては、ｍＲＮＡから作製されたものが好ましく使用でき
る。これらのｃＤＮＡライブラリーからランダムサンプ
リングにより選択された一群のｃＤＮＡを検索の試料と
することができる。また、市販のものでも使用可能であ
る。

【００３０】例えば、配列表の配列番号１または３に記
載の塩基配列のうちの連続する１２塩基以上の塩基配列
からなるＤＮＡまたは該ＤＮＡにハイブリダイズするポ
リヌクレオチド（アンチセンスポリヌクレオチド）、ｃ
ＤＮＡライブラリー等からＰｅｒ３ＤＮＡをスクリーニ
ングするためのプローブとして使用可能である。

【００３１】また、本発明のＰｅｒ３をコードするポリ
ヌクレオチド、そのアンチセンスポリヌクレオチドまた
はそれらの一部であるポリヌクレオチドをプローブとし
て、各組織由来のｍＲＮＡについてノーザンブロットハ
イブリダイゼーションを行うことにより、Ｐｅｒ３遺伝
子由来のｍＲＮＡが発現している組織を見出すことが可
能である。

【００３２】プラスミドを大腸菌等の適当な宿主に導入
して、形質転換体を得ることは公知の方法により可能で
ある。本発明のＰｅｒ３ＤＮＡを導入した形質転換体を
培養してＤＮＡの増幅または蛋白質の発現を行わせ、Ｐ
ｅｒ３またはＰｅｒ３変異体を作製させることが可能で
ある。次に作製物を回収し、必要に応じて濃縮、可溶
化、透析、各種クロマトグラフィー等の操作を行うこと
により、本発明のＰｅｒ３またはＰｅｒ３変異体を精製
することが可能である。

【００３３】形質転換体の培養については、各種の教科
書があり、本発明に記載の塩基配列に基づいてＰｅｒ３
またはＰｅｒ３変異体を作製させることは、公知の方法
により可能である。このとき、宿主としては、大腸菌等
の最近、酵母、動物細胞のいずれも使用可能であるが、
特には動物細胞が好ましい。細胞に遺伝子を導入するに
は、リボソーム法、エレクトロポーレーション法等を用
いることができる。特に、核内微量注入法を用いること
が好ましい。

【００３４】得られた培養物からＰｅｒ３またはＰｅｒ
３変異体を精製する精製方法には、免疫沈降法、塩析
法、限外濾過法、等電点沈殿法、ゲル濾過法、電気泳動
法、イオン交換クロマトグラフィー法、疎水性クロマト
グラフィー法や抗体クロマトグラフィー法等の各種アフ
ィニティークロマトグラフィー、クロマトフォーカシン
グ法、吸着クロマトグラフィー法および逆相クロマトグ
ラフィー法等があり、適宜選択して行えばよい。

【００３５】また、製造段階において、製造するＰｅｒ
３またはＰｅｒ３変異体は、他のポリペプチドとの融合
ペプチドとして形質転換体に作製させてもよい。この場
合は、精製工程において、ブロムシアン等の化学物質や
プロテーゼ等の酵素で処理して、Ｐｅｒ３またはＰｅｒ
３変異体を切り出す操作が必要になる。

【００３６】本発明のＰｅｒ３を認識する抗体（以降、
Ｐｅｒ３抗体ということがある）は、Ｐｅｒ３をＰｅｒ
３が由来する動物およびヒト以外の動物に免疫感作する
ことにより得られる抗体であって、該抗体が本発明のＰ
ｅｒ３を認識することがウェスタンブロット法、ＥＬＩ
ＳＡ法や免疫染色法（例えばＦＡＣＳでの測定）等によ
り確認される抗体をその範囲内に含む。

【００３７】また、免疫原として、蛋白質の一部であっ
ても該蛋白質の一部をウシ血清アルブミンなどの他のキ
ャリアー蛋白質に結合させたものを用いることは、よく
用いられる方法である。該蛋白質の一部は、例えばペプ
チド合成機を用いて合成してもよい。なお、蛋白質の一
部としては、８アミノ酸残基以上であることが好まし
い。免疫感作によってポリクローナル抗体が得られるな
らば、該免疫した動物のリンパ球を用いたハイブリドー
マによりモノクローナル抗体が産生されることはよく知
られている（『Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ Ａ Ｌａｂｏｒ
ａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ』（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ
Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、
１９８８）Ｃｈａｐｔｅｒ６）。したがって本発明のＰ
ｅｒ３抗体はモノクローナル抗体もその範囲内に含むも
のである。

【００３８】本発明においては、抗体は活性フラグメン
トをも包含するものである。活性フラグメントとは、抗
原抗体反応活性を有する抗体のフラグメントを意味し、
具体的には、Ｆ（ａｂ′）₂ 、Ｆａｂ′、Ｆａｂ、Ｆｖ
などを挙げることができる。例えば、本発明の抗体をペ
プシンで分解するとＦ（ａｂ’）₂ が得られ、パパイン
で分解するとＦａｂが得られる。Ｆ（ａｂ’）₂ を２−
メルカプトエタノールなどの試薬で還元して、モノヨー
ド酢酸でアルキル化するとＦａｂ’が得られる。Ｆｖは
重鎖可変領域と軽鎖可変領域とをリンカーで結合させた
一価の抗体活性フラグメントである。これらの活性フラ
グメントを保持し、その他の部分を他の動物のフラグメ
ントに置換することでキメラ抗体が得られる。

【００３９】Ｐｅｒ３の検出については、抗体を用いる
方法、酵素反応を利用する方法が挙げられる。抗体を用
いる方法としては具体的には、標識されたＰｅｒ３抗
体を用いてＰｅｒ３を検出する方法、Ｐｅｒ３抗体お
よび該抗体の標識二次抗体を用いてＰｅｒ３を検出する
方法が挙げられる。標識としては、例えば放射性同位元
素（ＲＩ）、酵素、アビジン又はビオチン、もしくは蛍
光物質（ＦＩＴＣやローダミン等）が利用される。

【００４０】酵素反応を利用する方法としては、例え
ば、ＥＬＩＳＡ法、免疫凝集法、ウェスタンブロット
法、フローサイトメトリーを用いた免疫反応分子の同定
方法又はそれらに類似する方法が挙げられる。が挙げら
れる。

【００４１】

【実施例】以下に実施例を挙げて、より詳細に本発明を
説明するが、本発明は以下の実施例に限定されるもので
はない。

【００４２】＜実施例１＞ Ｉ．ＥＳＴデータベースの検索 インターネットのＥＳＴデータベース（ｍＲＮＡの断片
の配列を登録してあるデータベース、ｈｔｔｐ：／／ｗ
ｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ．／ｉ ｈｔ
ｍｌ）に登録された配列（ＥＳＴ）から、マウスＰｅｒ
２遺伝子がコードするアミノ酸配列とホモロジーのある
アミノ酸配列をコードする塩基配列を、インターネット
のゲノムネットＷＷＷサーバー中のＴＢＬＡＳＴＮ（ｈ
ｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｂｌａｓｔ．ｇｅｎｏｍｅ．ａ
ｄ．ｊｐ）を使用して、ｄｂＥＳＴから検索した。その
結果、ＨＳ４６７Ｌ１の番号で登録されているＥＳＴ
（ヒトＤＮＡ）およびＡＡ４５１５２３の番号で登録さ
れているＥＳＴ（マウスＤＮＡ）を抽出した。

【００４３】Ｉ．ヒトＰｅｒ３ＤＮＡの単離および塩基
配列の決定 １．プライマーの合成 ＨＳ４６７Ｌ１の塩基配列より以下の４種類のプライマ
ーをＤＮＡ合成機（ＡＢＩ社製、モデル３９２）を使用
して作製した。 １）５’プライマー Ｒ１：５’−ＡＣＴ ＧＧＣ ＣＴＣ ＡＣＴ ＧＧＡ
ＧＧＡ ＧＧＣ ＧＡＴ−３’（配列表の配列番号５
に記載の塩基配列） Ｒ２：５’−ＣＣ ＧＣＴ ＧＧＡ ＣＡＣ ＧＣＴ
ＣＡＣ ＧＴＧ ＡＡＣＴ−３’（ネステッドプライマ
ー）（配列表の配列番号６に記載の塩基配列） ２）３’プライマー ｆ１：５’−Ａ ＴＣＧ ＡＴＣ ＣＴＡ ＡＧＣ Ｔ
ＡＣ ＣＴＧ ＣＡＣＣＣＴ ＧＡＡ−３’（配列表の
配列番号７に記載の塩基配列） ｆ２：５’−ＣＡＣ ＣＡＡ ＡＡＡ ＧＧＧ ＣＡＴ
ＣＣＴ ＣＣＣ ＴＴＴ ＧＡＡ Ｃ−３’（ネステ
ッドプライマー）（配列表の配列番号８に記載の塩基配
列） 合成したプライマーは、蒸留水で２０ｐｍｏｌ／μｌに
調製した。これをＰＣＲプライマーとして用いて、以下
のＰＣＲ操作を行った。

【００４４】２．ＰＣＲ（１） ｃＤＮＡライブラリーには、ヒト視床下部マラソンｃＤ
ＮＡ（クローンテック社製）を用いて、以下の条件でＰ
ＣＲを行った。プライマーとしてＲ１プライマーのみを
使用し、５’方向への一方向のみのＰＣＲを行った。Ｐ
ＣＲ操作は、マラソンｃＤＮＡアンプリフィケーション
キット（クローンテック社製）を使用して以下の条件で
行った。９５℃に１０分間おいた。次いで「９４℃で１
５秒間続いて６８℃で１分間」を２５回繰り返した。次
いで７２℃で１０分間反応させて、断片の伸長反応を行
いＰＣＲ操作を完了した。

【００４５】その後、前記で得たＰＣＲ産物を鋳型とし
て、Ｒ２プライマーを用いて２度目のＰＣＲ操作を行っ
た。２度目のＰＣＲ操作は、前記と同様に行った。

【００４６】３．塩基配列の決定（１） 前記で得た５’伸長反応によるＤＮＡ断片（以降、フラ
グメントＡということがある）をミニゲル電気泳動
（０．７５％アガロースゲル）させて、フラグメントＡ
のバンドをゲルから切り出した。ＧｅｎｅＣｌｅａｎ
（バイオ１０１社製）でフラグメントＡを回収して、ミ
ニゲル電気泳動でバンドをチェックした。

【００４７】フラグメントＡを１μｌ取り、９９μｌの
ＴＥにて希釈した。２６０ｎｍでの吸光度（Ａ２６０）
を測定し、ＤＮＡ濃度を計算した（Ａ２６０が１．０の
ときのＤＮＡ濃度を５０μｌ／ｍｌとした。）。ＤＮＡ
濃度が１μｇ／μｌになるようにＴＥでフラグメントＡ
を希釈した。

【００４８】この希釈液について、Ｔ７プライマーを用
いて、ダイターミネーター法により、オートシークエン
サー（ＡＢＩモデル３７３Ａ）を用いて、ＤＮＡシーク
エンスを行い、フラグメントＡの塩基配列を決定した。 ４．ＰＣＲ（２） ３’側への伸長反応を３．の５’側への伸長反応と同様
の手法を用いて行った。プライマーは、３’プライマー
としてｆ１プライマーのみを使用して前記と同様にして
ＰＣＲを行った。その後、前記で得たＰＣＲ産物を鋳型
として、ｆ２プライマーを用いて２度目のＰＣＲ操作を
行った。ＰＣＲ操作は、前記と同様に行った。

【００４９】５．塩基配列の決定 フラグメントＡとフラグメントＢの塩基配列から全長の
ヒトＰｅｒ３ＤＮＡの塩基配列を決定した。この塩基配
列を配列表の配列番号１に示す。フラグメントＡはこの
うちの１番目から１５５１番目までの塩基配列からな
り、フラグメントＢは１５１７番目から４００１番目ま
での塩基配列からなるものであった。

【００５０】６．アミノ酸配列の決定 ヒトＰｅｒ３の塩基配列より、ヒトＰｅｒ３のアミノ酸
配列を決定した。このアミノ酸配列を配列表の配列番号
２に示す。

【００５１】７．形質転換体の作製 前記のフラグメントＡおよびフラグメントＢをｐＧＥＭ
Ｔイージー（プロメガ社製）ベクターに挿入した。フラ
グメントＡを挿入したベクターを大腸菌ＪＭ１０９に組
み込んで形質転換体を作製した。また、フラグメントＢ
を挿入したベクターを大腸菌ＸＬ１０ゴールドに組み込
んで形質転換体を作製した。これらの形質転換体をそれ
ぞれｈＰｅｒ３−Ａ、ｈＰｅｒ３−Ｂと名付け、平成１
０年５月２０日に工業技術院生命工学工業技術研究所に
寄託した。受託番号は、ｈＰｅｒ−ＡがＦＥＲＭ Ｐ−
１６８１３であり、ｈＰｅｒ−ＢがＦＥＲＭ Ｐ−１６
８１４である。

【００５２】ＩＩ．マウスＰｅｒ３ＤＮＡの単離および
塩基配列の決定 １．プライマーの作製 ＡＡ４５１５２３の塩基配列より以下の４種類のプライ
マーをＤＮＡ合成機（ＡＢＩ社製、モデル３９２）を使
用して作製した。 １）５’プライマー Ｒ３：５’−ＧＣＡ ＣＴＴ ＴＣＴ ＴＴＴ ＣＡＡ
ＧＧＣ ＣＧＧ ＧＡ−３’（配列表の配列番号９に
記載の塩基配列） Ｒ４：５’−Ｇ ＴＴＣ ＡＴＣ ＴＧＣ ＴＧＡ Ｔ
ＡＧ ＧＡＣ ＧＡＧＣＴＧ−３’（ネステッドプライ
マー）（配列表の配列番号１０に記載の塩基配列） ２）３’プライマー ｆ３：５’−ＴＧＣ ＡＧＣ ＡＧＧ ＴＣＴ ＡＴＧ
ＣＣＡ ＧＴＧ ＴＡ−３’（配列表の配列番号１１
に記載の塩基配列） ｆ４：５’−ＣＡＴ ＧＧＡ ＧＴＣ ＣＡＴ ＧＧＣ
ＣＡＧ ＡＴＣ ＡＴＣ−３’（ネステッドプライマ
ー）（配列表の配列番号１２に記載の塩基配列）

【００５３】２．ＰＣＲおよび塩基配列の決定 前記のヒトＰｅｒ３ＤＮＡを単離し、その塩基配列を決
定した場合と同様にしてＰＣＲによりマウスＰｅｒ３Ｄ
ＮＡを単離し、その塩基配列を決定した。ただし、ｃＤ
ＮＡライブラリーには、本発明者自らマウスの脳からｍ
ＲＮＡを抽出してｃＤＮＡを作ったものを用いた。ま
た、ＰＣＲの条件は以下のようにした。９４℃に１分間
おいた。次いで「９４℃で３０秒間続いて６８℃で４分
間」を２５回繰り返した。次いで７２℃で１０分間反応
させて、断片の伸長反応を行いＰＣＲ操作を完了した。
５’伸長反応で得られたＤＮＡ断片をフラグメントＣ、
３’伸長反応で得られたＤＮＡ断片をフラグメントＤと
呼ぶ。フラグメントＣとフラグメントＤの塩基配列から
決定されたマウスＰｅｒ３ＤＮＡの塩基配列を配列表の
配列番号３に示す。

【００５４】フラグメントＣおよびフラグメントＤをそ
れぞれ、両者に共通のＮｃｏＩサイトで酵素切断し、配
列表の配列番号３の塩基配列の１６２４番目でライゲー
トし、全長のマウスＰｅｒ３ ｃＤＮＡを作製した。こ
のｃＤＮＡをｐＧＥＭＴイージー（プロメガ社製）ベク
ターに挿入し、大腸菌ＸＬ１０ゴールドに組み込んで形
質転換体を作製した。この形質転換体をｍＰｅｒ３と名
付け、平成１０年５月２０日に工業技術院生命工学工業
技術研究所に寄託した。受託番号は、ＦＥＲＭ Ｐ−１
６８１５である。

【００５５】＜実施例２＞Ｐｅｒ３の各組織における発
現 各組織のポリＡ＋ＲＮＡ（ｍＲＮＡ）について、各２μ
ｇをブロットしたメンブレンに、標識化したＰｅｒ３Ｄ
ＮＡを、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ＣｌｏｎｉｎｇＡ Ｌａ
ｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ Ｓｅｃｏｎｄ Ｅｄ
ｉｔｉｏｎ７．３９ページないし７．５２ページの記載
にしたがってハイブリダイズさせ、ノーザンブロットハ
イブリダイゼーション法による解析を行った。ヒトの場
合については、メンブレンにＨｕｍａｎ Ｔｉｓｓｕｅ
Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ Ｉおよび同ＩＩ（クロ
ーンテック社製）を用い、標識化したヒトＰｅｒ３ＤＮ
Ａ（フラグメントＢ）をハイブリダイズさせた。マウス
の場合については、メンブレンにＭｏｕｓｅ Ｔｉｓｓ
ｕｅ Ｎｏｒｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ （クローンテック
社製）を用い、標識化した全長のマウスＰｅｒ３ＤＮＡ
をハイブリダイズさせた。）

【００５６】Ｐｅｒ３遺伝子の標識化は以下の操作によ
り行った。 １）Ｔａｋａｒａ ＭＥＧＡ ＬＡＢＥＬキット（登録
商標、宝酒造社製）を用いて取扱説明書の通りに標識し
た。 ２）次に、下記の組成のＤＮＡ反応液を調製し、この液
を３７℃で３０分間インキュベートした後、７０℃で１
０分間熱処理し、酵素を失活させた。 ＤＮＡプローブ（２ｐｍｏｌ／μｌ） ２μｌ １０倍ホスホライレイション緩衝液 ２μｌ 〔γ−３２Ｐ〕ＡＴＰ（３７０ＭＢｑ／ｍｌ）（アマシャム製） ５μｌ Ｔ４ ポリヌクレオチドキナーゼ １μｌ 合計１０μｌ

【００５７】３）Ｔ５０Ｅ（５０ｍＭ Ｔｒｉｓ−Ｃｌ
ｐＨ８．０，１ｍＭ ＥＤＴＡ）で平衡化されたＳｅ
ｐｈａｄｅｘＧ−２５（登録商標、ファルマシア社製）
を１．５ｍｌポリプレップカラム（バイオラッド社製）
にベッドボリュームが１ｍｌになるように詰め、２）で
熱処理をしたＤＮＡ反応液を該カラムに載せた。 ４）その後、２００μｌＴ５０Ｅをカラムに４回流し、
２回目の２００μｌで溶出した画分から標識化ＤＮＡプ
ローブを得た。

【００５８】解析の結果、ヒトについては、心臓、脳、
肺、肝臓、骨格筋、腎臓、膵臓において、約７．５ｋｂ
の位置にバンドが観察され、ヒトＰｅｒ３遺伝子はこれ
らの組織で発現していることが分かった。また、マウス
については、心臓、脳、肺、肝臓、腎臓、精巣に約６．
５および９．５ｋｂの位置にバンドが観察され、マウス
Ｐｅｒ３遺伝子はこれらの組織で発現していることが分
かった。

【００５９】＜実施例３＞染色体マッピングヒトＰｅｒ
３の遺伝子をＰｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．
ＵＳＡ，８９，９５０９−９５１３（１９９２）および
Ｃｈｒｏｍｏｓｏｍａ，１０２，３２５−３３２（１９
９３）に記載の方法にしたがって、染色体マッピングを
行った（シーＤＮＡバイオテック社（Ｓｅｅ ＤＮＡ
Ｂｉｏｔｅｃｈ、カナダ、トロント）にて実施）。その
結果、ヒトＰｅｒ３は染色体１ｐ３６．１−３６．２に
位置づけられた。

【００６０】

【発明の効果】本発明のＰｅｒ３ＤＮＡ、該ＤＮＡがコ
ードする蛋白質、該蛋白質を認識する抗体はヒトまたは
マウスにおけるサーカディアンリズムの解明およびその
リズムの異常の調整に有効である。

【００６１】

【配列表】 配列番号：１ 配列の長さ：４００１ 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ｃＤＮＡ ｔｏ ｍＲＮＡ 配列 TGAATTCGGC GTCGGACTGT CTGTTCCACT TGTCCCTTGT CACCCTTGTC TCCTCCCCCT 60 AGGCCGGAGT CCTGAAAGTC GAGCGAGCTC CGGGTTTTGA AAATGTTGGA GGGAAAAGCT 120 CCTCGGAGAT GAGCGTGACC CCCTGGCTCG TGGTGGCCGC CTGTTCTCAC TAACGCCATG 180 GCGGGGACCG GAGTGAGAAA CCGGTGTCTG TCACTGACTG CAAAGTGAGC GAGAAGCAGG 240 CTGCGGGCCG TCCCAGCACG ACGTGGAGCC CCGCGGAGAC CTCGAG ATG CCC CGC 295 GGG GAA GCT CCT GGC CCC GGG AGA CGG GGG GCT AAG GAC GAG GCC CTG 343 GGC GAA GAA TCG GGG GAG CGG TGG AGC CCC GAG TTC CAT CTG CAG AGG 391 AAA TTG GCG GAC AGC AGC CAC AGT GAA CAG CAA GAT CGA AAC AGA GTT 439 TCT GAA GAA CTT ATC ATG GTT GTC CAA GAA ATG AAA AAA TAC TTC CCC 487 TCG GAG AGA CGC AAT AAA CCA AGC ACT CTA GAT GCC CTC AAC TAT GCT 535 CTC CGC TGT GTC CAC AGC GTT CAA GCA AAC AGT GAG TTT TTC CGG ATT 583 CTC AGT CAG AAT GGA GCA CCT CAG GCA GAT GTG AGC ATG TAC AGT CTT 631 GAG GAG CTG GCC ACT ATC GCT TCA GAA CAC ACT TCC AAA AAC ACA GAT 679 ACC TTT GTG GCA GTA TTT TCA TTT CTG TCT GGA AGG TTA GTG CAC ATT 727 TCT GAA CAG GCT GCT TTG ATC CTG AAT CGT AAG AAA GAT GTC CTG GCG 775 TCT TCT CAC TTT GTT GAC CTG CTT GCA CCT CAA GAC ATG AGG GTA TTC 823 TAC GCG CAC ACT GCC AGA GCT CAG CTT CCT TTC TGG AAC AAC TGG ACC 871 CAA AGA GCT GCA CGG TAT GAA TGT GCT CCG GTG AAA CCT TTT TTC TGC 919 AGG ATC CGT GGA GGT GAA GAC AGA AAG CAA GAG AAG TGT CAC TCC CCA 967 TTC CGG ATC ATC CCC TAT CTG ATT CAT GTA CAT CAC CCT GCC CAG CCA 1015 GAA TTG GAA TCG GAA CCT TGC TGT CTC ACT GTG GTT GAA AAG ATT CAC 1063 TCT GGT TAT GAA GCT CCT CGG ATC CCA GTG AAT AAA AGA ATC TTC ACC 1111 ACC ACA CAC ACC CCA GGG TGT GTT TTT CTT GAA GTA GAT GAA AAA GCA 1159 GTG CCT TTG CTG GGT TAC CTA CCT CAG GAC CTG ATT GGA ACA TCG ATC 1207 CTA AGC TAC CTG CAC CCT GAA GAT CGT TCT CTG ATG GTT GCC ATA CAC 1255 CAA AAA GTT TTG AAG TAT GCA GGG CAT CCT CCC TTT GAA CAT TCT CCC 1303 ATT CGA TTT TGT ACT CAA AAC GGA GAC TAC ATC ATA CTG GAT TCC AGT 1351 TGG TCC AGC TTT GTG AAT CCC TGG AGC CGG AAG ATT TCT TTC ATC ATT 1399 GGT CGG CAT AAA GTT CGA ACG AGC CCA CTA AAT GAG GAT GTT TTT GCT 1447 ACC AAA ATT AAA AAG ATG AAC GAT AAT GAC AAA GAC ATA ACA GAA TTA 1495 CAA GAA CAA ATT TAC AAA CTT CTC TTA CAG CCA GTT CAC GTG AGC GTG 1543 TCC AGC GGC TAC GGG AGC CTG GGG AGC AGC GGG TCG CAG GAG CAG CTT 1591 GTC AGC ATC GCC TCC TCC AGT GAG GCC AGC GGG CAC CGT GTG GAG GAG 1639 ACG AAG GCG GAG CAG ATG ACC TTG CAG CAG GTC TAT GCC AGT GTG AAC 1687 AAA ATT AAA AAT CTG GGT CAG CAG CTC TAC ATT GAG TCA ATG ACC AAA 1735 TCA TCA TTC AAG CCA GTG ACG GGG ACA CGC ACA GAA CCG AAT GGT GGT 1783 GGT GAA TGT AAG ACC TTT ACT TCC TTC CAC CAA ACA CTG AAA AAC AAT 1831 AGT GTG TAC ACT GAG CCC TGT GAG GAT TTG AGG AAC GAT GAG CAC AGC 1879 CCA TCC TAT CAA CAG ATC AAC TGT ATC GAC AGT GTC ATC AGA TAC CTG 1927 AAG AGC TAC AAC ATT CCA GCT TTG AAA AGA AAG TGT ATC TCC TGT ACA 1975 AAT ACA ACT TCT TCC TCC TCA GAA GAA GAC AAA CAG AAC CAC AAG GCA 2023 GAT GAT GTC CAA GCC TTA CAA GCT GGT TTG CAA ATC CCA GCC ATA CCT 2071 AAA TCA GAA ATG CCA ACA AAT GGA CGG TCC ATA GAC ACA GGA GGA GGA 2129 GCT CCA CAG ATC CTG TCC ACG GCG ATG CTG AGC TTG GGG TCG GGC ATA 2167 AGC CAA TGC GGT TAC AGC AGC ACC ATT GTC CAT GTC CCA CCC CCA GAG 2215 ACA GCC AGG GAT GCT ACC CTC TTC TGT GAG CCC TGG ACC CTG AAC ATG 2263 CAG CCA GCC CCT TTG ACC TCG GAA GAA TTT AAA CAC GTG GGG CTC ACA 2311 GCG GCT GTT CTG TCA GCG CAC ACC CAG AAG GAA GAG CAG AAT TAT GTT 2369 GAT AAA TTC CGA GAA AAG ATC CTG TCA TCA CCC TAC AGC TCC TAT CTT 2407 CAG CAA GAA AGC AGG AGC AAA GCT AAA TAT TCA TAT TTT CAA GGA GAT 2455 TCT ACT TCC AAG CAG ACG CGG TCG GCC GGC TGC AGG AAA GGG AAG CAC 2503 AAG CGG AAG AAG CTG CCG GAG CCG CCA GAC AGC AGC AGC TCG AAC ACC 2551 GGC TCT GGT CCC CGC AGG GGA GCG CAT CAG AAC GCA CAG CCC TGC TGC 2699 CCC TCC GCG GCC TCC TCT CCG CAC ACC TCG AGC CCG ACC TTC CCA CCT 2647 GCC GCC ATG GTG CCC AGC CAG GCC CCT TAC CTC GTC CCA GCT TTT CCC 2695 CTC CCA GCC GCG ACC TCA CCC GGA AGA GAA TAC GCA GCC CCC GGA ACT 2743 GCA CCT GAA GGC CTG CAT GGG CCG CCC TTG TCC GAG GGC TTG CAG CCT 2791 TAC CCA GCT TTC CCT TTT CCT TAC TTG GAT ACT TTT ATG ACC GTT TTC 2849 CTG CCT GAC CCC CCT GTC TGT CCT CTG TTG TCG CCA TCG TTT TTG CCA 2887 TGT CCA TTC CTG GGG GCG ACA GCC TCT TCT GCG ATA TCA CCC TCA ATG 2935 TCG TCA GCA ATG AGT CCA ACT CTG GAC CCA CCC CCT TCA GTC ACC AGC 2983 CAA AGG AGA GAG GAG GAA AAG TGG GAG GCA CAA AGC GAG GGG CAC CCG 3031 TTC ATT ACT TCG AGA AGC AGC TCA CCC TTG CAG TTA AAC TTA CTT CAG 3089 GAA GAG ATG CCC AGA CCC TCT GAA TCT CCA GAT CAG ATG AGA AGG AAC 3127 ACG TGC CCA CAA ACT GAG TAT TGT GTT ACA GGC AAC AAT GGC AGT GAG 3175 AGC AGT CCT GCT ACT ACC GGT GCA CTG TCC ACG GGG TCA CCT CCC AGG 3223 GAG AAT CCA TCC CAT CCT ACT GCC AGC GCT CTG TCC ACA GGA TCG CCT 3271 CCC ATG AAG AAT CCA TCC CAT CCT ACT GCC AGC ACA CTG TCC ACG GGA 3319 TTG CCT CCC AGC AGG ACT CCA TCC CAT CCT ACT GCC ACT GTT CTG TCC 3367 ACG GGG TCA CCT CCC AGC GAA TCC CCA TCC AGA ACT GGT TCA GCA GCA 3415 TCA GGA AGC AGC GAC AGC AGT ATA TAC CTT ACT AGT AGT GTT TAT TCT 3463 TCT AAA ATC TCC CAA AAT GGG CAG CAA TCT CAG GAC GTA CAG AAA AAA 3511 GAA ACA TTT CCT AAT GTC GCC GAA GAG CCC ATC TGG AGA ATG ATA CGG 3559 CAG ACA CCT GAG CGC ATT CTC ATG ACA TAC CAG GTA CCT GAG AGG GTT 3607 AAA GAA GTT GTA CTA AAA GAA GAC CTG GAA AAG CTA GAA AGT ATG AGG 3655 CAG CAG CAG CCC CAG TTT TCT CAT GGG CAA AAG GAG GAG CTG GCT AAG 3703 GTG TAT AAT TGG ATT CAA AGC CAG ACT GTC ACT CAA GAA ATC GAC ATT 3751 CAA GCC TGT GTC ACT TGT GAA AAT GAA GAT TCA GCT GAT GGT GCG GCC 3799 ACA TCC TGT GGT CAG GTT CTG GTA GAA GAC AGC TGT TGA GTGACTGTGA 3848 GGATGAACCT TCATACCCTT TCCAAGACGT GTTACACAGA CAGACCTTTT TAAGTCCTGG 3908 ACTTTTAAAT GACCATGAAG TTATCATTGA ATGTTAAGAT TTTTTCTTCT TGATTTTTTA 3968 ATACACGTAA TCTTTTTGAA GCAGACATTG TAT 4001

【００６２】 配列番号：２ 配列の長さ：１１８３ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：蛋白質 配列 Met Pro Arg Gly Glu Ala Pro Gly Pro Gly Arg Arg Gly Ala Lys Asp 1 5 10 15 Glu Ala Leu Gly Glu Glu Ser Gly Glu Arg Trp Ser Pro Glu Phe His 20 25 30 Leu Gln Arg Lys Leu Ala Asp Ser Ser His Ser Glu Gln Gln Asp Arg 35 40 45 Asn Arg Val Ser Glu Glu Leu Ile Met Val Val Gln Glu Met Lys Lys 50 55 60 Tyr Phe Pro Ser Glu Arg Arg Asn Lys Pro Ser Thr Leu Asp Ala Leu 65 70 75 80 Asn Tyr Ala Leu Arg Cys Val His Ser Val Gln Ala Asn Ser Glu Phe 85 90 95 Phe Arg Ile Leu Ser Gln Asn Gly Ala Pro Gln Ala Asp Val Ser Met 100 105 110 Tyr Ser Leu Glu Glu Leu Ala Thr Ile Ala Ser Glu His Thr Ser Lys 115 120 125 Asn Thr Asp Thr Phe Val Ala Val Phe Ser Phe Leu Ser Gly Arg Leu 130 135 140 Val His Ile Ser Glu Gln Ala Ala Leu Ile Leu Asn Arg Lys Lys Asp 145 150 155 160 Val Leu Ala Ser Ser His Phe Val Asp Leu Leu Ala Pro Gln Asp Met 165 170 175 Arg Val Phe Tyr Ala His Thr Ala Arg Ala Gln Leu Pro Phe Trp Asn 180 185 190 Asn Trp Thr Gln Arg Ala Ala Arg Tyr Glu Cys Ala Pro Val Lys Pro 195 200 205 Phe Phe Cys Arg Ile Arg Gly Gly Glu Asp Arg Lys Gln Glu Lys Cys 210 215 220 His Ser Pro Phe Arg Ile Ile Pro Tyr Leu Ile His Val His His Pro 225 230 265 240 Ala Gln Pro Glu Leu Glu Ser Glu Pro Cys Cys Leu Thr Val Val Glu 245 250 255 Lys Ile His Ser Gly Tyr Glu Ala Pro Arg Ile Pro Val Asn Lys Arg 260 265 270 Ile Phe Thr Thr Thr His Thr Pro Gly Cys Val Phe Leu Glu Val Asp 275 280 285 Glu Lys Ala Val Pro Leu Leu Gly Tyr Leu Pro Gln Asp Leu Ile Gly 290 295 300 Thr Ser Ile Leu Ser Tyr Leu His Pro Glu Asp Arg Ser Leu Met Val 305 310 315 320 Ala Ile His Gln Lys Val Leu Lys Tyr Ala Gly His Pro Pro Phe Glu 325 330 335 His Ser Pro Ile Arg Phe Cys Thr Gln Asn Gly Asp Tyr Ile Ile Leu 340 345 350 Asp Ser Ser Trp Ser Ser Phe Val Asn Pro Trp Ser Arg Lys Ile Ser 355 360 365 Phe Ile Ile Gly Arg His Lys Val Arg Thr Ser Pro Leu Asn Glu Asp 370 375 380 Val Phe Ala Thr Lys Ile Lys Lys Met Asn Asp Asn Asp Lys Asp Ile 385 390 395 400 Thr Glu Leu Gln Glu Gln Ile Tyr Lys Leu Leu Leu Gln Pro Val His 405 410 415 Val Ser Val Ser Ser Gly Tyr Gly Ser Leu Gly Ser Ser Gly Ser Gln 420 425 430 Glu Gln Leu Val Ser Ile Ala Ser Ser Ser Glu Ala Ser Gly His Arg 435 440 445 Val Glu Glu Thr Lys Ala Glu Gln Met Thr Leu Gln Gln Val Tyr Ala 450 455 460 Ser Val Asn Lys Ile Lys Asn Leu Gly Gln Gln Leu Tyr Ile Glu Ser 465 470 475 480 Met Thr Lys Ser Ser Phe Lys Pro Val Thr Gly Thr Arg Thr Glu Pro 485 490 495 Asn Gly Gly Gly Glu Cys Lys Thr Phe Thr Ser Phe His Gln Thr Leu 500 505 510 Lys Asn Asn Ser Val Tyr Thr Glu Pro Cys Glu Asp Leu Arg Asn Asp 515 520 525 Glu His Ser Pro Ser Tyr Gln Gln Ile Asn Cys Ile Asp Ser Val Ile 530 535 540 Arg Tyr Leu Lys Ser Tyr Asn Ile Pro Ala Leu Lys Arg Lys Cys Ile 545 550 555 560 Ser Cys Thr Asn Thr Thr Ser Ser Ser Ser Glu Glu Asp Lys Gln Asn 565 570 575 His Lys Ala Asp Asp Val Gln Ala Leu Gln Ala Gly Leu Gln Ile Pro 580 585 590 Ala Ile Pro Lys Ser Glu Met Pro Thr Asn Gly Arg Ser Ile Asp Thr 595 600 605 Gly Gly Gly Ala Pro Gln Ile Leu Ser Thr Ala Met Leu Ser Leu Gly 610 615 620 Ser Gly Ile Ser Gln Cys Gly Tyr Ser Ser Thr Ile Val His Val Pro 625 630 635 640 Pro Pro Glu Thr Ala Arg Asp Ala Thr Leu Phe Cys Glu Pro Trp Thr 645 650 655 Leu Asn Met Gln Pro Ala Pro Leu Thr Ser Glu Glu Phe Lys His Val 660 665 670 Gly Leu Thr Ala Ala Val Leu Ser Ala His Thr Gln Lys Glu Glu Gln 675 680 685 Asn Tyr Val Asp Lys Phe Arg Glu Lys Ile Leu Ser Ser Pro Tyr Ser 690 695 700 Ser Tyr Leu Gln Gln Glu Ser Arg Ser Lys Ala Lys Tyr Ser Tyr Phe 705 710 715 720 Gln Gly Asp Ser Thr Ser Lys Gln Thr Arg Ser Ala Gly Cys Arg Lys 725 730 735 Gly Lys His Lys Arg Lys Lys Leu Pro Glu Pro Pro Asp Ser Ser Ser 740 745 750 Ser Asn Thr Gly Ser Gly Pro Arg Arg Gly Ala His Gln Asn Ala Gln 755 760 765 Pro Cys Cys Pro Ser Ala Ala Ser Ser Pro His Thr Ser Ser Pro Thr 770 775 780 Phe Pro Pro Ala Ala Met Val Pro Ser Gln Ala Pro Tyr Leu Val Pro 785 790 795 800 Ala Phe Pro Leu Pro Ala Ala Thr Ser Pro Gly Arg Glu Tyr Ala Ala 805 810 815 Pro Gly Thr Ala Pro Glu Gly Leu His Gly Pro Pro Leu Ser Glu Gly 820 825 830 Leu Gln Pro Tyr Pro Ala Phe Pro Phe Pro Tyr Leu Asp Thr Phe Met 835 840 845 Thr Val Phe Leu Pro Asp Pro Pro Val Cys Pro Leu Leu Ser Pro Ser 850 855 860 Phe Leu Pro Cys Pro Phe Leu Gly Ala Thr Ala Ser Ser Ala Ile Ser 865 870 875 880 Pro Ser Met Ser Ser Ala Met Ser Pro Thr Leu Asp Pro Pro Pro Ser 885 890 895 Val Thr Ser Gln Arg Arg Glu Glu Glu Lys Trp Glu Ala Gln Ser Glu 900 905 910 Gly His Pro Phe Ile Thr Ser Arg Ser Ser Ser Pro Leu Gln Leu Asn 915 920 925 Leu Leu Gln Glu Glu Met Pro Arg Pro Ser Glu Ser Pro Asp Gln Met 930 935 940 Arg Arg Asn Thr Cys Pro Gln Thr Glu Tyr Cys Val Thr Gly Asn Asn 945 950 955 960 Gly Ser Glu Ser Ser Pro Ala Thr Thr Gly Ala Leu Ser Thr Gly Ser 965 970 975 Pro Pro Arg Glu Asn Pro Ser His Pro Thr Ala Ser Ala Leu Ser Thr 980 985 990 Gly Ser Pro Pro Met Lys Asn Pro Ser His Pro Thr Ala Ser Thr Leu 995 1000 1005 Ser Thr Gly Leu Pro Pro Ser Arg Thr Pro Ser His Pro Thr Ala Thr 1010 1015 1020 Val Leu Ser Thr Gly Ser Pro Pro Ser Glu Ser Pro Ser Arg Thr Gly 1025 1030 1035 1040 Ser Ala Ala Ser Gly Ser Ser Asp Ser Ser Ile Tyr Leu Thr Ser Ser 1045 1050 1055 Val Tyr Ser Ser Lys Ile Ser Gln Asn Gly Gln Gln Ser Gln Asp Val 1060 1065 1070 Gln Lys Lys Glu Thr Phe Pro Asn Val Ala Glu Glu Pro Ile Trp Arg 1075 1080 1085 Met Ile Arg Gln Thr Pro Glu Arg Ile Leu Met Thr Tyr Gln Val Pro 1090 1095 1100 Glu Arg Val Lys Glu Val Val Leu Lys Glu Asp Leu Glu Lys Leu Glu 1105 1110 1115 1120 Ser Met Arg Gln Gln Gln Pro Gln Phe Ser His Gly Gln Lys Glu Glu 1125 1130 1135 Leu Ala Lys Val Tyr Asn Trp Ile Gln Ser Gln Thr Val Thr Gln Glu 1140 1145 1150 Ile Asp Ile Gln Ala Cys Val Thr Cys Glu Asn Glu Asp Ser Ala Asp 1155 1160 1165 Gly Ala Ala Thr Ser Cys Gly Gln Val Leu Val Glu Asp Ser Cys 1170 1175 1180

【００６３】 配列番号：３ 配列の長さ：３８２０ 配列の型：核酸 鎖の数：二本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ｃＤＮＡ ｔｏ ｍＲＮＡ 配列 AGGCTGACCG CGCTCCCTGA GAGCCCCGCT GGTGGTCCGT CCAGCCAGCT TCCGCCATCG 60 AGCTGTCGCT GTAGCTCGTC ACCCCAGCAG AGTCTGTGGA AATGCTGAGG AGAAAAGTGC 120 CCCTCAGATG AGCGTGGTCG GCGACCAGTC TTTCCCGAAG GCGATGGCAG GGACCAAAAC 180 AAGCCGGGTT TGGTTGCTAG CTGCAAACTG AGAGAAGCAG GCTGAGGGCT GCCAGGCGGG 240 ATG GAT CCC TGT GGA GAC CCG GCA GTA CTT GGT GGC GAC TGT CCC CAG 288 ACT AGG GGA CCG GGG CTC CAG GGG GCG TCT GGC CAG GAG GGT CCT CTG 336 CAG GGC ACT TGC GTG GAC AGC AGC CAC AGT GAA CAC GAA GAC CGA AAC 384 AGA ATG TCT GAA GAG CTT ATA ATG GTT GTC CAA GAA ATG AAA AAG TAT 432 TTC CCA GCC GAG AGG CAC ACT GAG CCC AGT ACC CTA GAT GCT CTT AAC 480 TAT GCC CTG CGC TGT GTA CAC AGT GTG CAA GCA AAC AGT GAC TTT TTC 528 CAG AGT CTC GGT CCA CGC GGA GCA CGC CAG GCA GAT GTG ACT GTA TAC 576 AGT CTT GAG GAC CTC ACC GCT CTG GCT TCT GAA CAT ACT TCT AAG AAC 624 ACA GAT ACC TTC GCG GCC GTG TTT TCG TTT CTG TCT GGA AGG TTA GTG 672 CAC ATT TCT GAG CAG GCT GCT TTG ATC CTG AAT TCT AAG AGG GGT TTC 720 CTC AAG AGC GTG CAC TTT GTC GAC CTG CTT GCC CCT CAA GAC GTG AGG 768 GCG TTC TAC GCG CAC ACT GCT CCA ACT CAG CTT CCT TTC TGG AAC AAC 816 TGG ACC CAA AGA GCC TCG CAG TAT GAA TGT GCA CCA GCG AAA CCC TTT 864 TTC TGC AGA ATC TGT GGA GGT GGA GAC AGA GAG AAG AGG CAT TAC TCC 912 CCA TTC CGG ATC CTC CCC TAT TTG GTT CAT GTA CAT AGC TCT GCC CAG 960 CCA GAA CCA GAG CCT TGC TGT CTA ACA CTG GTT GAA AAG ATT CAC TCT 1008 GGT TAC GAA GCT CCT CGA ATC CCT GTA GAT AAA AGA ATT TTT ACC ACA 1056 ACA CAC ACT CCA GGA TGT GTG TTT CTT GAA GCA GAT GAA AGA GCA GTG 1104 CCT TTG CTG GGT TAC CTA CCT CAG GAT CTG ATT GGA ACA TCG ATC TTA 1152 ACA TAC TTG CAC CCA GAA GAT CGG CCT CTG ATG GTT GCC ATA CAC CAA 1200 AAA GTT TTA AAG TAT GCC GGC CAC CCT CCG TTT GAA CAC TCG CCC GTC 1248 AGA TTC TGC ACT CAG AAC GGA GAG TAT GTC ATT CTG GAT TCC AGC TGG 1296 TCC AGC TTT GTC AAC CCC TGG AGC CGG AAG GTC TCC TTC ATC ATT GGT 1344 CGA CAT AAA GTC CAA ACG AGT CCA TTA AAT GAA GAT GTT TTT GCC ACC 1392 AGA ATA AAA AAG GCA GCC AGT AAC GAC AAA GAC ATA GCA GAA TTA CAA 1440 GAA CAA ATT CAC AAA CTT CTC TTG CAG CCG GTT CAT GCT AGT GCT TCC 1488 AGT GGC TAC GGG AGC CTG GGC AGC AGC GGC TCA CAG GAG CAG CAC GTC 1536 AGC ATC ACC TCT TCG AGT GAG TCC AGC GGG CAC TGT CCG GAG GAA GGC 1584 CAG CAT GAG CAG ATG ACC CTG CAG CAG GTC TAT GCC AGT GTA AAC AAA 1632 ATT AAG AAT GTG GGC CAA CAG CTC TAC ATC GAG TCC ATG GCC AGA TCA 1680 TCA GTG AAG CCA GTG GCA GAG ACG TGC GTG GAA CCG CAG GGT GGT GAT 1728 GAG CAG AAG GAC TTA TCT TCC TCT CAG ACA CTG AAA AAT AAA AGC ACC 1776 ACG GAT ACT GGC TCC GGT GGC AAT CTG CAG CAA GAG CAG CCC AGC TCG 1824 TCC TAT CAG CAG ATG AAC TGT ATC GAC AGT GTC ATC AGG TAC CTG ACA 1872 AGC TAC AGC CTC CCG GCC TTG AAA AGA AAG TGC ATC TCC TGC ACA AAC 1920 ACA TCT TCA TCC TCA GAA GAA GCC AAG CCA ATC CCG GAG GTG GAC AGC 1968 AGC CAG AGA GAC ACG GAA CAG CTC CTG GAC ATA CGG AAA CAG GAA ACA 2016 ACT GGA CCA TCC ACA GAC ATC GAA GGA GGT GCT GCT CGG ACC CTG TCC 2064 ACC GCC GCA CTG AGC GTG GCG TCT GGT ATC AGC CAG TGC AGC TGC AGC 2112 AGC ACC TCT GGC CAC GCT CCG CCC CTA CAG TCA GAA AGT GTT GCC GTG 2160 GCG TGT AAG CCG TGG GCC CTG AGA ACG AAG GCC TCT CAC CTG GCT GCA 2208 GGA GGA TTT AAG CAC GTG GGG CTC ACA GCA GCT GTC CTC TCT GCA CAC 2256 ACA CAG AAG GAA GAG CAG AAC TAC GTT GAC AGG TTC CGG GAA AAG ATC 2304 CTG ACC TCG CCC TAC GGT TGC TAT CTT CAG CAA GAG AGC AGA AAC CGT 2352 GCT CAG TAC TCC TGT GTT CAA GCA GGG TCC ACT GCT AAG CAC AGC AGA 2400 TGT GCT GGA AGC GAG AGG CAG AAG CAC AAA CGA AAG AAG TTG CCA GCA 2448 CCT GTG GAC ACC AGC AGC CCC GGT GCC CAC CTC TGT CCC CAT GTC ACA 2496 GGA CTC CTC CCG GAT GAG CAG CAC TGG GGC CCA TCC GCT AGC CCC TCC 2544 CCC CTC GGC GCA GGC TTA GCA TTC CCC TCG GCC CTG GTA GTT CCC AGC 2592 CAG ACC CCT TAT CTC CTC CCC TCT TTT CCC CTC CAA GAT ATG GCC TCT 2640 CAG GGA GTG GGG GTC TCG GCA GCC TGG GGA GCT GCA GCC GGA TGT CCA 2688 CCT CTG TCC GCC GGC CCC CAG GCT GTT GCC GCG TTC CCC TCC GCT TAC 2736 GTG GAT ACT TTG ATG ACC ATC TTC CTG CAC AAC GCC CCT CTC TTC CCT 2784 CTG TGG CCG CCC TCG TTC TCC CCA TAC CCA TCC CTG GGG GCC GCA GGG 2832 TCT TCT GAA CTG GCA CCC TTA GTA CCA GCA ATG GCT CCA AAC CCG GAA 2880 CCA ACC ACT TCA GGC CAC AGC CAA AGG AGA GTG GAG GAG AAC TGG GAG 2928 GCA CAC AGT GAA GAG CTT CCG TTC ATT AGC TCA CGG AGC AGT TCA CCG 2976 TTA CAG TTA AAT TTA CTC CAG GAA GAA ATG CCT GCG CCG TCA GAG TCC 3024 GCA GAC GCA GTG AGA AGA GGC GCT GGG CCA GAC GCT AAG CAT CAC TGT 3072 GTT ACA GGT CCC AGT GGC AGT AGG AGC CGT CAC TGC ACC TCT GGT GAG 3120 CTG GCC ACG GCA ACA GCG CAG CAG GAG TGT CCG TCT GCT GCT GCC TCA 3168 GGA AGC AGT GCC AGC AGT ATA TAC TTC AGT AGC ACT GAC TAT GCT TCT 3216 GAA GTC TCT GAA AAC AGA CAG AGG CCA CAG GAT AGA CAG AGA GAC GAA 3264 GCC CCT CCC GGG GCG GCT GAA GAG TCC ATC TGG AGA ATG ATA GAG CGG 3312 ACA CCA GAG TGT GTT CTC ATG ACA TAC CAG GTG CCC GAG AGG GGT CGA 3360 GAG GAG GTG CTG AAG CAG GAC CTG GAG AAG CTC CAG AGC ATG GAA CAG 3408 CAG CAG CCC CTG TTC TCT CCC GCG CAG AGG GAG GAG CTG GCC AAG GTG 3456 CGC TCC TGG ATC CAC AGC CAC ACA GCC CCT CAG GAG GGA CAC CTC CAG 3504 AGC TGT GTC GCC TGT GAA GAC AGA GGT TCA GTG GGT GAC ACT GCA GAG 3552 GTC CTG GAA CAG CAC CCA GCA GAA GAC ACC AGT TGA GCAGCTGTAA 3598 AGATGTCACA CCCCCTCCAG GTCACGTGGA ACACAGAGCC GTGCGTTACC TCACCACAGT 3658 CTAACTCTGA AACGCCAGTT ATTGACATTA AGGTCTTCCC TGGCTTTGTC CTGGTTTGGT 3718 TTTGGTGGCG CTGGGGATCA AACCCAGGGC CTCACATCCA CTAGGCTGGC ACTCTCCACT 3778 GCTGACCTGT CTCCCCAGGT CTCCCTTCTT GGTTTTCCCA AA 3820

【００６４】 配列番号：４ 配列の長さ：１１１５ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：蛋白質 配列 Met Asp Pro Cys Gly Asp Pro Ala Val Leu Gly Gly Asp Cys Pro Gln 1 5 10 15 Thr Arg Gly Pro Gly Leu Gln Gly Ala Ser Gly Gln Glu Gly Pro Leu 20 25 30 Gln Gly Thr Cys Val Asp Ser Ser His Ser Glu His Glu Asp Arg Asn 35 40 45 Arg Met Ser Glu Glu Leu Ile Met Val Val Gln Glu Met Lys Lys Tyr 50 55 60 Phe Pro Ala Glu Arg His Thr Glu Pro Ser Thr Leu Asp Ala Leu Asn 65 70 75 80 Tyr Ala Leu Arg Cys Val His Ser Val Gln Ala Asn Ser Asp Phe Phe 85 90 95 Gln Ser Leu Gly Pro Arg Gly Ala Arg Gln Ala Asp Val Thr Val Tyr 100 105 110 Ser Leu Glu Asp Leu Thr Ala Leu Ala Ser Glu His Thr Ser Lys Asn 115 120 125 Thr Asp Thr Phe Ala Ala Val Phe Ser Phe Leu Ser Gly Arg Leu Val 130 135 140 His Ile Ser Glu Gln Ala Ala Leu Ile Leu Asn Ser Lys Arg Gly Phe 145 150 155 160 Leu Lys Ser Val His Phe Val Asp Leu Leu Ala Pro Gln Asp Val Arg 165 170 175 Ala Phe Tyr Ala His Thr Ala Pro Thr Gln Leu Pro Phe Trp Asn Asn 180 185 190 Trp Thr Gln Arg Ala Ser Gln Tyr Glu Cys Ala Pro Ala Lys Pro Phe 195 200 205 Phe Cys Arg Ile Cys Gly Gly Gly Asp Arg Glu Lys Arg His Tyr Ser 210 215 220 Pro Phe Arg Ile Leu Pro Tyr Leu Val His Val His Ser Ser Ala Gln 225 230 235 240 Pro Glu Pro Glu Pro Cys Cys Leu Thr Leu Val Glu Lys Ile His Ser 245 250 255 Gly Tyr Glu Ala Pro Arg Ile Pro Val Asp Lys Arg Ile Phe Thr Thr 260 265 270 Thr His Thr Pro Gly Cys Val Phe Leu Glu Ala Asp Glu Arg Ala Val 275 280 285 Pro Leu Leu Gly Tyr Leu Pro Gln Asp Leu Ile Gly Thr Ser Ile Leu 290 295 300 Thr Tyr Leu His Pro Glu Asp Arg Pro Leu Met Val Ala Ile His Gln 305 310 315 320 Lys Val Leu Lys Tyr Ala Gly His Pro Pro Phe Glu His Ser Pro Val 325 330 335 Arg Phe Cys Thr Gln Asn Gly Glu Tyr Val Ile Leu Asp Ser Ser Trp 340 345 350 Ser Ser Phe Val Asn Pro Trp Ser Arg Lys Val Ser Phe Ile Ile Gly 355 360 365 Arg His Lys Val Gln Thr Ser Pro Leu Asn Glu Asp Val Phe Ala Thr 370 375 380 Arg Ile Lys Lys Ala Ala Ser Asn Asp Lys Asp Ile Ala Glu Leu Gln 385 390 395 400 Glu Gln Ile His Lys Leu Leu Leu Gln Pro Val His Ala Ser Ala Ser 405 410 415 Ser Gly Tyr Gly Ser Leu Gly Ser Ser Gly Ser Gln Glu Gln His Val 420 425 430 Ser Ile Thr Ser Ser Ser Glu Ser Ser Gly His Cys Pro Glu Glu Gly 435 440 445 Gln His Glu Gln Met Thr Leu Gln Gln Val Tyr Ala Ser Val Asn Lys 450 455 460 Ile Lys Asn Val Gly Gln Gln Leu Tyr Ile Glu Ser Met Ala Arg Ser 465 470 475 480 Ser Val Lys Pro Val Ala Glu Thr Cys Val Glu Pro Gln Gly Gly Asp 485 490 495 Glu Gln Lys Asp Leu Ser Ser Ser Gln Thr Leu Lys Asn Lys Ser Thr 500 505 510 Thr Asp Thr Gly Ser Gly Gly Asn Leu Gln Gln Glu Gln Pro Ser Ser 515 520 525 Ser Tyr Gln Gln Met Asn Cys Ile Asp Ser Val Ile Arg Tyr Leu Thr 530 535 540 Ser Tyr Ser Leu Pro Ala Leu Lys Arg Lys Cys Ile Ser Cys Thr Asn 545 550 555 560 Thr Ser Ser Ser Ser Glu Glu Ala Lys Pro Ile Pro Glu Val Asp Ser 565 570 575 Ser Gln Arg Asp Thr Glu Gln Leu Leu Asp Ile Arg Lys Gln Glu Thr 580 585 590 Thr Gly Pro Ser Thr Asp Ile Glu Gly Gly Ala Ala Arg Thr Leu Ser 595 600 605 Thr Ala Ala Leu Ser Val Ala Ser Gly Ile Ser Gln Cys Ser Cys Ser 610 615 620 Ser Thr Ser Gly His Ala Pro Pro Leu Gln Ser Glu Ser Val Ala Val 625 630 635 640 Ala Cys Lys Pro Trp Ala Leu Arg Thr Lys Ala Ser His Leu Ala Ala 645 650 655 Gly Gly Phe Lys His Val Gly Leu Thr Ala Ala Val Leu Ser Ala His 660 665 670 Thr Gln Lys Glu Glu Gln Asn Tyr Val Asp Arg Phe Arg Glu Lys Ile 675 680 685 Leu Thr Ser Pro Tyr Gly Cys Tyr Leu Gln Gln Glu Ser Arg Asn Arg 690 695 700 Ala Gln Tyr Ser Cys Val Gln Ala Gly Ser Thr Ala Lys His Ser Arg 705 710 715 720 Cys Ala Gly Ser Glu Arg Gln Lys His Lys Arg Lys Lys Leu Pro Ala 725 730 735 Pro Val Asp Thr Ser Ser Pro Gly Ala His Leu Cys Pro His Val Thr 740 745 750 Gly Leu Leu Pro Asp Glu Gln His Trp Gly Pro Ser Ala Ser Pro Ser 755 760 765 Pro Leu Gly Ala Gly Leu Ala Phe Pro Ser Ala Leu Val Val Pro Ser 770 775 780 Gln Thr Pro Tyr Leu Leu Pro Ser Phe Pro Leu Gln Asp Met Ala Ser 785 790 795 800 Gln Gly Val Gly Val Ser Ala Ala Trp Gly Ala Ala Ala Gly Cys Pro 805 810 815 Pro Leu Ser Ala Gly Pro Gln Ala Val Ala Ala Phe Pro Ser Ala Tyr 820 825 830 Val Asp Thr Leu Met Thr Ile Phe Leu His Asn Ala Pro Leu Phe Pro 835 840 845 Leu Trp Pro Pro Ser Phe Ser Pro Tyr Pro Ser Leu Gly Ala Ala Gly 850 855 860 Ser Ser Glu Leu Ala Pro Leu Val Pro Ala Met Ala Pro Asn Pro Glu 865 870 875 880 Pro Thr Thr Ser Gly His Ser Gln Arg Arg Val Glu Glu Asn Trp Glu 885 890 895 Ala His Ser Glu Glu Leu Pro Phe Ile Ser Ser Arg Ser Ser Ser Pro 900 905 910 Leu Gln Leu Asn Leu Leu Gln Glu Glu Met Pro Ala Pro Ser Glu Ser 915 920 925 Ala Asp Ala Val Arg Arg Gly Ala Gly Pro Asp Ala Lys His His Cys 930 935 940 Val Thr Gly Pro Ser Gly Ser Arg Ser Arg His Cys Thr Ser Gly Glu 945 950 955 960 Leu Ala Thr Ala Thr Ala Gln Gln Glu Cys Pro Ser Ala Ala Ala Ser 965 970 975 Gly Ser Ser Ala Ser Ser Ile Tyr Phe Ser Ser Thr Asp Tyr Ala Ser 980 985 990 Glu Val Ser Glu Asn Arg Gln Arg Pro Gln Asp Arg Gln Arg Asp Glu 995 1000 1005 Ala Pro Pro Gly Ala Ala Glu Glu Ser Ile Trp Arg Met Ile Glu Arg 1010 1015 1020 Thr Pro Glu Cys Val Leu Met Thr Tyr Gln Val Pro Glu Arg Gly Arg 1025 1030 1035 1040 Glu Glu Val Leu Lys Gln Asp Leu Glu Lys Leu Gln Ser Met Glu Gln 1045 1050 1055 Gln Gln Pro Leu Phe Ser Pro Ala Gln Arg Glu Glu Leu Ala Lys Val 1060 1065 1070 Arg Ser Trp Ile His Ser His Thr Ala Pro Gln Glu Gly His Leu Gln 1075 1080 1085 Ser Cys Val Ala Cys Glu Asp Arg Gly Ser Val Gly Asp Thr Ala Glu 1090 1095 1100 Val Leu Glu Gln His Pro Ala Glu Asp Thr Ser 1105 1110 1115

【００６５】 配列番号：５ 配列の長さ：２４ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他の核酸 配列 ACTGGCCTCA CTGGAGGAGG CGAT 24

【００６６】 配列番号：６ 配列の長さ：２４ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類： 配列 CCGCTGGACA CGCTCACGTG AACT 24

【００６７】 配列番号：７ 配列の長さ：２８ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他の核酸 配列 ATCGATCCTA AGCTACCTGC ACCCTGAA 28

【００６８】 配列番号：８ 配列の長さ：２８ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他の核酸 配列 CACCAAAAAG GGCATCCTCC CTTTGAAC 28

【００６９】 配列番号：９ 配列の長さ：２３ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他の核酸 配列 GCACTTTCTT TTCAAGGCCG GGA 23

【００７０】 配列番号：１０ 配列の長さ：２５ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他の核酸 配列 GTTCATCTGC TGATAGGACG AGCTG 25

【００７１】 配列番号：１１ 配列の長さ：２３ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他の核酸 配列 TGCAGCAGGT CTATGCCAGT GTA 23

【００７２】 配列番号：１２ 配列の長さ：２４ 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他の核酸 配列 ＣＡＴＧＧＡＧＴＣＣ ＡＴＧＧＣＣＡＧＡＴ ＣＡＴＣ
２４

Claims (12)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 配列表の配列番号１に記載の塩基配列の
   ２８７番目のＡから３８３５番目のＴまでの塩基配列か
   らなるＤＮＡ。
2. 【請求項２】 配列表の配列番号３に記載の塩基配列の
   ２４１番目のＡから３５８５番目のＴまでの塩基配列か
   らなるＤＮＡ。
3. 【請求項３】 請求項１に記載のＤＮＡとハイブリダイ
   ズするポリヌクレオチド。
4. 【請求項４】 請求項２に記載のＤＮＡとハイブリダイ
   ズするポリヌクレオチド。
5. 【請求項５】 配列表の配列番号２に記載のアミノ酸配
   列からなる蛋白質。
6. 【請求項６】 配列表の配列番号４に記載のアミノ酸配
   列からなる蛋白質。
7. 【請求項７】 請求項３に記載のポリヌクレオチドがコ
   ードする蛋白質。
8. 【請求項８】 請求項４に記載のポリヌクレオチドがコ
   ードする蛋白質。
9. 【請求項９】 配列表の配列番号１に記載の塩基配列か
   らなるＤＮＡにハイブリダイズする１２塩基以上の塩基
   からなるポリヌクレオチド。
10. 【請求項１０】 配列表の配列番号３に記載の塩基配列
    からなるＤＮＡにハイブリダイズする１２塩基以上の塩
    基からなるポリヌクレオチド。
11. 【請求項１１】 化学修飾された請求項９または１０に
    記載のポリヌクレオチド。
12. 【請求項１２】 請求項５または６に記載の蛋白質を認
    識する抗体。