JPH11266858A - 新規低栄養性微生物および該微生物を用いた石油あるいは芳香族化合物汚染物質の浄化方法 - Google Patents
新規低栄養性微生物および該微生物を用いた石油あるいは芳香族化合物汚染物質の浄化方法Info
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- JPH11266858A JPH11266858A JP10095439A JP9543998A JPH11266858A JP H11266858 A JPH11266858 A JP H11266858A JP 10095439 A JP10095439 A JP 10095439A JP 9543998 A JP9543998 A JP 9543998A JP H11266858 A JPH11266858 A JP H11266858A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 栄養塩類を添加することなしに、低栄養条件
である自然環境の浄化、あるいは製油所や化学工場など
の低栄養排水の処理に有用な微生物および該微生物を使
用した浄化技術の提供。 【解決手段】 微生物がリン５ｐｐｍ以下および窒素５
０ｐｐｍ以下の条件で生育可能なＲａｌｓｔｏｎｉａ
属、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ属およびＡｕｒｅｏｂａ
ｓｉｄｉｕｍ属に属する低栄養性微生物および該低栄養
性微生物で石油汚染物質、石油汚染土壌または製油所排
水、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族化合物汚
染物質、例えば芳香族化合物汚染土壌または芳香族化合
物を含有する排水等を処理する浄化方法。
である自然環境の浄化、あるいは製油所や化学工場など
の低栄養排水の処理に有用な微生物および該微生物を使
用した浄化技術の提供。 【解決手段】 微生物がリン５ｐｐｍ以下および窒素５
０ｐｐｍ以下の条件で生育可能なＲａｌｓｔｏｎｉａ
属、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ属およびＡｕｒｅｏｂａ
ｓｉｄｉｕｍ属に属する低栄養性微生物および該低栄養
性微生物で石油汚染物質、石油汚染土壌または製油所排
水、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族化合物汚
染物質、例えば芳香族化合物汚染土壌または芳香族化合
物を含有する排水等を処理する浄化方法。
Description
【０００１】
【技術分野】本発明はリン、窒素等の栄養塩濃度のみが
低い低栄養条件で生育し、環境汚染物質を分解すること
のできる微生物及び該微生物を用いた環境浄化、特に芳
香族化合物、例えばベンゼン、トルエンおよびキシレン
を含有する排水処理技術に関するものである。
低い低栄養条件で生育し、環境汚染物質を分解すること
のできる微生物及び該微生物を用いた環境浄化、特に芳
香族化合物、例えばベンゼン、トルエンおよびキシレン
を含有する排水処理技術に関するものである。
【０００２】
【従来技術】自然環境は一般的に低栄養条件であると考
えられており、また製油所や化学工場などの排水は、リ
ンや窒素に乏しい低栄養排水であるので、通常知られて
いる微生物は生育できない。従来の環境浄化技術では、
汚染環境に（ＮＨ4）2ＳＯ4、ＮＨ4Ｃｌ、Ｎａ3ＰＯ4、
Ｎａ2ＨＰＯ4等の栄養塩類を添加し、微生物の活性を高
める方法が行われている[（Ｄ．Ａ．Ｇｒａｖｅｓら、
Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ
Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．２８，Ｐ８１３
（１９９１）:原山 重明、「地球をまもる小さな生き
物たち」、技報堂出版、Ｐ１０９（１９９５）:西村
実、土と微生物、Ｎｏ４６、Ｐ１９（１９９５）：Ｃ．
Ｈ．Ｎｅｌｓｏｎら、「Ｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎ Ｂｉ
ｏｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎ」、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ、Ｐ
１２５（１９９４））]。また排水処理においても、微
生物の生育と活性を保つために炭素：リン：窒素の割合
を制御することが必要であると考えられている。炭素：
リン：窒素の割合を制御するためには、排水に栄養塩を
添加する方法が一般的である[「廃水処理技術指導
書」、石油連盟、Ｐ１２９（１９７５）:「公害防止の
技術と法規」、財団法人産業公害防止協会、Ｐ２１５
（１９９２）]。さらに特開平６−５００４９５では汚
染環境に栄養塩を効率よく持続的に与えるための方法が
記されており、また特開平７−５０７２０８ではリン酸
エステルを添加することにより、栄養物質の供給と同時
に汚染物質を乳化させる方法が記されている。
えられており、また製油所や化学工場などの排水は、リ
ンや窒素に乏しい低栄養排水であるので、通常知られて
いる微生物は生育できない。従来の環境浄化技術では、
汚染環境に（ＮＨ4）2ＳＯ4、ＮＨ4Ｃｌ、Ｎａ3ＰＯ4、
Ｎａ2ＨＰＯ4等の栄養塩類を添加し、微生物の活性を高
める方法が行われている[（Ｄ．Ａ．Ｇｒａｖｅｓら、
Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ
Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ｖｏｌ．２８，Ｐ８１３
（１９９１）:原山 重明、「地球をまもる小さな生き
物たち」、技報堂出版、Ｐ１０９（１９９５）:西村
実、土と微生物、Ｎｏ４６、Ｐ１９（１９９５）：Ｃ．
Ｈ．Ｎｅｌｓｏｎら、「Ｈｙｄｒｏｃａｒｂｏｎ Ｂｉ
ｏｒｅｍｅｄｉａｔｉｏｎ」、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ、Ｐ
１２５（１９９４））]。また排水処理においても、微
生物の生育と活性を保つために炭素：リン：窒素の割合
を制御することが必要であると考えられている。炭素：
リン：窒素の割合を制御するためには、排水に栄養塩を
添加する方法が一般的である[「廃水処理技術指導
書」、石油連盟、Ｐ１２９（１９７５）:「公害防止の
技術と法規」、財団法人産業公害防止協会、Ｐ２１５
（１９９２）]。さらに特開平６−５００４９５では汚
染環境に栄養塩を効率よく持続的に与えるための方法が
記されており、また特開平７−５０７２０８ではリン酸
エステルを添加することにより、栄養物質の供給と同時
に汚染物質を乳化させる方法が記されている。
【０００３】前記のように自然、環境浄化や低栄養排水
の処理には栄養塩類を添加して微生物の活性を高めるこ
とが必要である。しかし汚染環境や排水に添加する栄養
塩類は、環境浄化や排水処理にかかるコストの１つであ
る。特に浄化しようとする汚染場所が広い範囲であった
り、あるいは処理をしようとする排水量が多い場合には
添加する栄養塩類にかかる費用は莫大なものとなる。さ
らに過剰に添加した栄養塩類は、地下水の硝酸汚染や環
境の富栄養化等の二次汚染の原因となるので、添加方法
や添加量の制御は重要である。
の処理には栄養塩類を添加して微生物の活性を高めるこ
とが必要である。しかし汚染環境や排水に添加する栄養
塩類は、環境浄化や排水処理にかかるコストの１つであ
る。特に浄化しようとする汚染場所が広い範囲であった
り、あるいは処理をしようとする排水量が多い場合には
添加する栄養塩類にかかる費用は莫大なものとなる。さ
らに過剰に添加した栄養塩類は、地下水の硝酸汚染や環
境の富栄養化等の二次汚染の原因となるので、添加方法
や添加量の制御は重要である。
【０００４】すなわち、窒素源は、土壌微生物の作用に
より酸化されて硝酸体となる。したがって窒素源を過剰
に与えると土壌や地下水中の硝酸イオン濃度が高くな
る。硝酸イオンは、発ガン性が指摘されており、飲料水
への混入が問題となっている（鶴巻 道二、「地下水汚
染・土壌汚染の現状と浄化対策」、工業技術会、Ｐ９８
（１９９３））。また、過剰に添加した栄養塩類、特に
リンおよび窒素源が雨水や地下水によって河川や湖沼に
流入すると環境の富栄養化を引き起こす。環境の富栄養
化はアオコの異常発生や飲料水のカビ臭の原因となるた
め、生活排水中のリンや窒素を除去する方法が数多く提
案されている[中村 和憲、「微生物の生態１７」、学
会出版センター、Ｐ３１（１９９１）:深瀬 哲朗、
「地球をまもる小さな生き物たち」、技報堂出版、Ｐ１
３３（１９９５）]。Ｐ．Ｍｏｒｇａｎらは土壌環境に
栄養塩類を添加することが土着微生物の有機物質の分解
活性を阻害することを指摘している（Ｗａｔ．Ｓｃｉ．
Ｔｅｃｈ．，ｖｏｌ．６，Ｐ６３（１９９０））。添加
した栄養塩類による二次汚染を回避するには、栄養塩類
をコントロールしながら添加することが必要である。し
かしこの様な制御装置を排水処理設備に設置すること
は、設備をより高価なものとし、排水の処理コストを増
大させる。さらに汚染土壌や地下水等の汚染環境は解放
系であるため、栄養塩類をコントロールしながら効率よ
く添加するには、何らかの方法で汚染環境を閉鎖する必
要がある。しかし汚染環境を土木的方法によって閉鎖す
るには、多額な資金が必要であり、特に汚染環境が広い
場合には技術的に困難である。したがって汚染環境にお
いて、添加した栄養塩類による二次汚染を防ぐことは事
実上不可能と言わざるを得ない。
より酸化されて硝酸体となる。したがって窒素源を過剰
に与えると土壌や地下水中の硝酸イオン濃度が高くな
る。硝酸イオンは、発ガン性が指摘されており、飲料水
への混入が問題となっている（鶴巻 道二、「地下水汚
染・土壌汚染の現状と浄化対策」、工業技術会、Ｐ９８
（１９９３））。また、過剰に添加した栄養塩類、特に
リンおよび窒素源が雨水や地下水によって河川や湖沼に
流入すると環境の富栄養化を引き起こす。環境の富栄養
化はアオコの異常発生や飲料水のカビ臭の原因となるた
め、生活排水中のリンや窒素を除去する方法が数多く提
案されている[中村 和憲、「微生物の生態１７」、学
会出版センター、Ｐ３１（１９９１）:深瀬 哲朗、
「地球をまもる小さな生き物たち」、技報堂出版、Ｐ１
３３（１９９５）]。Ｐ．Ｍｏｒｇａｎらは土壌環境に
栄養塩類を添加することが土着微生物の有機物質の分解
活性を阻害することを指摘している（Ｗａｔ．Ｓｃｉ．
Ｔｅｃｈ．，ｖｏｌ．６，Ｐ６３（１９９０））。添加
した栄養塩類による二次汚染を回避するには、栄養塩類
をコントロールしながら添加することが必要である。し
かしこの様な制御装置を排水処理設備に設置すること
は、設備をより高価なものとし、排水の処理コストを増
大させる。さらに汚染土壌や地下水等の汚染環境は解放
系であるため、栄養塩類をコントロールしながら効率よ
く添加するには、何らかの方法で汚染環境を閉鎖する必
要がある。しかし汚染環境を土木的方法によって閉鎖す
るには、多額な資金が必要であり、特に汚染環境が広い
場合には技術的に困難である。したがって汚染環境にお
いて、添加した栄養塩類による二次汚染を防ぐことは事
実上不可能と言わざるを得ない。
【０００５】低栄養性微生物の存在は古くから知られて
おり、多くの研究がなされている。これまで低栄養性微
生物は生育条件の中の有機炭素量でのみ論じられてお
り、有機炭素濃度が１から１５ｐｐｍ以下で生育可能な
微生物が低栄養性微生物と称されて研究されている
[（畝本 力、「特殊環境に生きる細菌の巧みなライフ
スタイル」、共立出版、Ｐ７（１９９３）:江口 充、
「海洋微生物とバイオテクノロジー」、技報堂出版、Ｐ
６８（１９９１）:諏訪 裕一ら、「微生物の分離
法」、Ｒ＆Ｄプランニング、Ｐ５４５（１９９０）]。
しかしながら自然汚染環境あるいは製油所や化学工場の
排水は、汚染物質である有機炭素の濃度が高く、その他
のリン、窒素等の栄養塩濃度のみが低い状態にある。こ
の様な有機炭素の濃度が高く、その他のリン、窒素等の
栄養塩濃度のみが低い条件で生育し汚染物質を分解する
微生物は、従来の低栄養性微生物の概念に当てはまらな
いものであり、これまでに報告がない。
おり、多くの研究がなされている。これまで低栄養性微
生物は生育条件の中の有機炭素量でのみ論じられてお
り、有機炭素濃度が１から１５ｐｐｍ以下で生育可能な
微生物が低栄養性微生物と称されて研究されている
[（畝本 力、「特殊環境に生きる細菌の巧みなライフ
スタイル」、共立出版、Ｐ７（１９９３）:江口 充、
「海洋微生物とバイオテクノロジー」、技報堂出版、Ｐ
６８（１９９１）:諏訪 裕一ら、「微生物の分離
法」、Ｒ＆Ｄプランニング、Ｐ５４５（１９９０）]。
しかしながら自然汚染環境あるいは製油所や化学工場の
排水は、汚染物質である有機炭素の濃度が高く、その他
のリン、窒素等の栄養塩濃度のみが低い状態にある。こ
の様な有機炭素の濃度が高く、その他のリン、窒素等の
栄養塩濃度のみが低い条件で生育し汚染物質を分解する
微生物は、従来の低栄養性微生物の概念に当てはまらな
いものであり、これまでに報告がない。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、栄養
塩類を添加することなしに、低栄養条件である自然環境
の浄化、あるいは製油所や化学工場などの低栄養排水の
処理に有用な微生物および該微生物を使用した浄化技術
を提供することにある。
塩類を添加することなしに、低栄養条件である自然環境
の浄化、あるいは製油所や化学工場などの低栄養排水の
処理に有用な微生物および該微生物を使用した浄化技術
を提供することにある。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、栄養塩類
を添加することなしに、低栄養条件である自然環境の浄
化あるいは製油所や化学工場などの低栄養排水の処理技
術を提供することを目的として多くの実験を行った。普
通の自然環境は低栄養状態と考えられているが、本発明
者らは、微生物の生育に特に重要なリンと窒素に注目
し、自然環境中のリンと窒素の濃度を測定した結果、土
壌や地下水では次表１に示すように窒素濃度が約６０ｐ
ｐｍ以下、リン濃度が約３ｐｐｍ以下である。海洋では
更に栄養成分濃度は低く、窒素濃度が約１．０ｐｐｍ以
下、リン濃度が約０．１ｐｐｍ以下である。前記自然環
境中のリンと窒素の濃度の測定値に基づき、目的とする
有機炭素の濃度が高く、その他のリンと窒素の栄養塩濃
度のみが低い条件で生育し、汚染物質を分解することの
できる微生物を得るための培地は、リン濃度が約５ｐｐ
ｍ以下で、かつ窒素濃度が約５０ｐｐｍ以下のものであ
ることを見出し、本発明の完成に至った。したがって、
本発明の特徴の第１は、リン５ｐｐｍ以下でかつ窒素５
０ｐｐｍ以下の条件で生育可能な微生物に関する。本発
明の特徴の第２は、自然環境の浄化、あるいは製油所や
化学工場などの低栄養排水の処理に有用な微生物および
該微生物を使用した浄化技術に関する。
を添加することなしに、低栄養条件である自然環境の浄
化あるいは製油所や化学工場などの低栄養排水の処理技
術を提供することを目的として多くの実験を行った。普
通の自然環境は低栄養状態と考えられているが、本発明
者らは、微生物の生育に特に重要なリンと窒素に注目
し、自然環境中のリンと窒素の濃度を測定した結果、土
壌や地下水では次表１に示すように窒素濃度が約６０ｐ
ｐｍ以下、リン濃度が約３ｐｐｍ以下である。海洋では
更に栄養成分濃度は低く、窒素濃度が約１．０ｐｐｍ以
下、リン濃度が約０．１ｐｐｍ以下である。前記自然環
境中のリンと窒素の濃度の測定値に基づき、目的とする
有機炭素の濃度が高く、その他のリンと窒素の栄養塩濃
度のみが低い条件で生育し、汚染物質を分解することの
できる微生物を得るための培地は、リン濃度が約５ｐｐ
ｍ以下で、かつ窒素濃度が約５０ｐｐｍ以下のものであ
ることを見出し、本発明の完成に至った。したがって、
本発明の特徴の第１は、リン５ｐｐｍ以下でかつ窒素５
０ｐｐｍ以下の条件で生育可能な微生物に関する。本発
明の特徴の第２は、自然環境の浄化、あるいは製油所や
化学工場などの低栄養排水の処理に有用な微生物および
該微生物を使用した浄化技術に関する。
【０００８】
【表１】 １ 発明者の測定による ２ 微生物の生態１２、Ｐ１０、学会出版センター（１９８９）より ３ 西村実、土と微生物、Ｎｏ．４６、Ｐ１９（１９９５）より ４ 微生物の生態３、Ｐ４、学会出版センター（１９８７）より また、製油所や化学工場の排水等は、汚染物質である有
機炭素の濃度が高く、その他のリン、窒素等の栄養塩濃
度のみが低い状態にある。これに対して微生物の研究で
通常用いられている培地成分は、下表２に示すように高
栄養条件である。従ってこれまでの研究の培地で得られ
た微生物を環境浄化や排水処理に用いる場合には、これ
ら環境汚染物質を分解することができないので、微生物
の生育のために栄養源、特にリン源や窒素源を与える必
要がある。
機炭素の濃度が高く、その他のリン、窒素等の栄養塩濃
度のみが低い状態にある。これに対して微生物の研究で
通常用いられている培地成分は、下表２に示すように高
栄養条件である。従ってこれまでの研究の培地で得られ
た微生物を環境浄化や排水処理に用いる場合には、これ
ら環境汚染物質を分解することができないので、微生物
の生育のために栄養源、特にリン源や窒素源を与える必
要がある。
【０００９】
【表２】 １ 発明者の測定による ４ 微生物の生態３、Ｐ４、学会出版センター（１９８７）より ＊ 極東製薬工業製 ＊＊ 日本製薬工業製
【００１０】有機炭素の濃度が高く、その他のリン、窒
素等の栄養塩濃度のみが低い条件で生育し汚染物質を分
解する微生物は、リン濃度５ｐｐｍ以下でかつ窒素濃度
５０ｐｐｍ以下の培地を用いて、例えベンゼン、トルエ
ン、キシレン等の芳香族化合物１００ｐｐｍを炭素源と
した条件で検索することによって得られる。炭素源は分
解しようとする有機物であれば何でも良く、フェノー
ル、クレゾール等の芳香族化合物、トリクロロエチレン
の様な有機塩素化合物、ナフタレン、ビフェニルのよう
な多環芳香族化合物等をあげることができる。リン源は
実質的に微生物がリン源として利用可能な物質であれば
なんでも良く、リン酸一アンモニウム、リン酸一ナトリ
ウム、リン酸一カリウム、リン酸水素アンモニウムカリ
ウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素二カリウ
ム、リン酸二水素アンモニウム、リン酸二水素ナトリウ
ム、リン酸二水素カリウム等の無機のリン酸塩およびこ
れらの塩の水和物、酵母エキス、肉汁エキス等のリンを
含む天然物やリン酸エステル等の有機リン化合物等をあ
げることができる。同様に窒素源も実質的に微生物が窒
素源として利用可能な物質であればなんでも良く、硫酸
アンモニウム、リン酸一アンモニウム、硝酸アンモニウ
ム、リン酸水素アンモニウムカリウム、塩化アンモニウ
ム等のアンモニウム塩およびこれらの塩の水和物、硝酸
アンモニウム、硝酸ナトリウム、硝酸カリウム等の硝酸
塩、亜硝酸ナトリウム等の亜硝酸塩、尿素、アミノ酸、
酵母エキス、肉汁エキス、ペプトン等の窒素を含む天然
物やアミド化合物等の有機含窒素化合物等をあげること
ができる。
素等の栄養塩濃度のみが低い条件で生育し汚染物質を分
解する微生物は、リン濃度５ｐｐｍ以下でかつ窒素濃度
５０ｐｐｍ以下の培地を用いて、例えベンゼン、トルエ
ン、キシレン等の芳香族化合物１００ｐｐｍを炭素源と
した条件で検索することによって得られる。炭素源は分
解しようとする有機物であれば何でも良く、フェノー
ル、クレゾール等の芳香族化合物、トリクロロエチレン
の様な有機塩素化合物、ナフタレン、ビフェニルのよう
な多環芳香族化合物等をあげることができる。リン源は
実質的に微生物がリン源として利用可能な物質であれば
なんでも良く、リン酸一アンモニウム、リン酸一ナトリ
ウム、リン酸一カリウム、リン酸水素アンモニウムカリ
ウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素二カリウ
ム、リン酸二水素アンモニウム、リン酸二水素ナトリウ
ム、リン酸二水素カリウム等の無機のリン酸塩およびこ
れらの塩の水和物、酵母エキス、肉汁エキス等のリンを
含む天然物やリン酸エステル等の有機リン化合物等をあ
げることができる。同様に窒素源も実質的に微生物が窒
素源として利用可能な物質であればなんでも良く、硫酸
アンモニウム、リン酸一アンモニウム、硝酸アンモニウ
ム、リン酸水素アンモニウムカリウム、塩化アンモニウ
ム等のアンモニウム塩およびこれらの塩の水和物、硝酸
アンモニウム、硝酸ナトリウム、硝酸カリウム等の硝酸
塩、亜硝酸ナトリウム等の亜硝酸塩、尿素、アミノ酸、
酵母エキス、肉汁エキス、ペプトン等の窒素を含む天然
物やアミド化合物等の有機含窒素化合物等をあげること
ができる。
【００１１】本発明の微生物は、リン５ｐｐｍ以下でか
つ窒素５０ｐｐｍ以下と言う低栄養条件下で生育するこ
とができるので、栄養塩類を添加しない環境調和型の環
境浄化や排水処理に応用することが可能である。ただ
し、本発明の微生物がリン５ｐｐｍ以下でかつ窒素５０
ｐｐｍ以下と言う低栄養条件下で生育することができる
と言う性質を有することは、該微生物がリン５ｐｐｍ以
上あるいは窒素５０ｐｐｍ以上の条件で生育できないこ
とを意味するのではなく、本発明の微生物には、低栄養
条件下でしか生育できない偏性低栄養性微生物と低栄養
条件下でも高栄養条件下でも生育できる通性低栄養性微
生物が含まれる。また、本発明の微生物には、真性細菌
（プロトバクテリア）、古細菌（アーキア）を含む原核
微生物および酵母やカビを含む真核微生物が含まれ、該
微生物は１種類の微生物を単独で用いても、あるいは数
種類を混合して用いても良い。本発明の微生物の使用形
態は、浮遊状態で用いても良いが、菌体濃度を高めるた
めに適当な担体に固定化して用いることもできる。固定
化する場合の担体としては、活性炭やガラスビーズ等の
無機物、ポリスチレンやポリプロピレン等の樹脂担体、
アルギン酸ゲルやポリビニルアルコールゲル等の有機物
を挙げることができる。
つ窒素５０ｐｐｍ以下と言う低栄養条件下で生育するこ
とができるので、栄養塩類を添加しない環境調和型の環
境浄化や排水処理に応用することが可能である。ただ
し、本発明の微生物がリン５ｐｐｍ以下でかつ窒素５０
ｐｐｍ以下と言う低栄養条件下で生育することができる
と言う性質を有することは、該微生物がリン５ｐｐｍ以
上あるいは窒素５０ｐｐｍ以上の条件で生育できないこ
とを意味するのではなく、本発明の微生物には、低栄養
条件下でしか生育できない偏性低栄養性微生物と低栄養
条件下でも高栄養条件下でも生育できる通性低栄養性微
生物が含まれる。また、本発明の微生物には、真性細菌
（プロトバクテリア）、古細菌（アーキア）を含む原核
微生物および酵母やカビを含む真核微生物が含まれ、該
微生物は１種類の微生物を単独で用いても、あるいは数
種類を混合して用いても良い。本発明の微生物の使用形
態は、浮遊状態で用いても良いが、菌体濃度を高めるた
めに適当な担体に固定化して用いることもできる。固定
化する場合の担体としては、活性炭やガラスビーズ等の
無機物、ポリスチレンやポリプロピレン等の樹脂担体、
アルギン酸ゲルやポリビニルアルコールゲル等の有機物
を挙げることができる。
【００１２】
【実施例】実施例１ 低リン濃度、低窒素濃度条件（自然環境）で生育するベ
ンゼン資化性菌の検索 （検索用培地の作成）検索用培地として、下表３に示し
た培地（以下、Ｅ−培地）を１／１０に希釈したもの
（１／１０Ｅ−培地：リン約５ｐｐｍ、窒素約５０ｐｐ
ｍ）を用いた。これに、炭素源としてベンゼン１００ｐ
ｐｍを加えた。また、各培地のｐＨは７．０とした。
ンゼン資化性菌の検索 （検索用培地の作成）検索用培地として、下表３に示し
た培地（以下、Ｅ−培地）を１／１０に希釈したもの
（１／１０Ｅ−培地：リン約５ｐｐｍ、窒素約５０ｐｐ
ｍ）を用いた。これに、炭素源としてベンゼン１００ｐ
ｐｍを加えた。また、各培地のｐＨは７．０とした。
【００１３】
【表３】
【００１４】（分解菌の取得方法）分離源としては、厚
木市周辺の土壌約２０種類を用い、直接前記１／１０Ｅ
−培地に加えて行った。すなわち、前記土壌サンプル約
１ｇを５００ｍｌの前記１／１０Ｅ−培地を加えた５０
０ｍｌ容のネジロ付き三角フラスコに加え、約３０℃に
て約１週間培養を行なった。生育の見られたものについ
ては、さらに前記５０ｍｌの前記１／１０Ｅ−培地を加
えた５００ｍｌ容のネジロ付き三角フラスコ３０℃にて
約１週間培養してから、前記１／１０Ｅ−培地に電気泳
動用アガロース（和光純薬製ａｇａｒｏｓｅ）を１．２
重量％添加した平板を用いてコロニーを取得した。平板
培地においては、ベンゼンは、シャーレ内に置いたガラ
スろ紙にｌ０μｌ染み込ませてべーパー法により与え
た。ベンゼン資化性菌として、２種類のベンゼン資化性
菌Ｂ２およびＢ１０が分離された。下表４〜５にＢ２の
科学的性質および分類学上の情報を示す。
木市周辺の土壌約２０種類を用い、直接前記１／１０Ｅ
−培地に加えて行った。すなわち、前記土壌サンプル約
１ｇを５００ｍｌの前記１／１０Ｅ−培地を加えた５０
０ｍｌ容のネジロ付き三角フラスコに加え、約３０℃に
て約１週間培養を行なった。生育の見られたものについ
ては、さらに前記５０ｍｌの前記１／１０Ｅ−培地を加
えた５００ｍｌ容のネジロ付き三角フラスコ３０℃にて
約１週間培養してから、前記１／１０Ｅ−培地に電気泳
動用アガロース（和光純薬製ａｇａｒｏｓｅ）を１．２
重量％添加した平板を用いてコロニーを取得した。平板
培地においては、ベンゼンは、シャーレ内に置いたガラ
スろ紙にｌ０μｌ染み込ませてべーパー法により与え
た。ベンゼン資化性菌として、２種類のベンゼン資化性
菌Ｂ２およびＢ１０が分離された。下表４〜５にＢ２の
科学的性質および分類学上の情報を示す。
【００１５】
【表４】
【００１６】
【表５】 前表の科学的性質および分類学上の情報と細胞膜脂肪酸
は、Ｒａｌｓｔｏｎｉａ ｅｕｔｒｏｐｈａの特徴的な
ものであることから、前記分解菌の取得方法で取得した
ベンゼン資化性菌株のＢ２はＲａｌｓｔｏｎｉａ ｅｕ
ｔｒｏｐｈａＢ２（ＦＥＲＭ Ｐ− １６６７２）であ
ると同定された。
は、Ｒａｌｓｔｏｎｉａ ｅｕｔｒｏｐｈａの特徴的な
ものであることから、前記分解菌の取得方法で取得した
ベンゼン資化性菌株のＢ２はＲａｌｓｔｏｎｉａ ｅｕ
ｔｒｏｐｈａＢ２（ＦＥＲＭ Ｐ− １６６７２）であ
ると同定された。
【００１７】また、他方のベンゼン資化性菌種類Ｂ１０
の特性は、以下の通りであった。これら特性から、前記
分解菌の取得方法で取得したベンゼン資化性菌株のＢ１
０はＡｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ
Ｂ１０（ＦＥＲＭ Ｐ−１６６７４）であると同定さ
れた。以下に前記ベンゼン資化性菌株Ｂ１０の特性を記
載する。 （１）コロニー性状 培養初期に培地中に透明な菌糸の侵入が観察された。コ
ロニーは酵母様で培養初期は乳白色、そして後期になる
とコロニー周辺より茶色がかった黒色に変化し、最終的
には緑がかった黒色になった。 （２）顕微鏡観察下での形態 菌糸は培養初期にはφ５〜７μｍの透明であり、培養後
期には短い間隔で隔壁を有する細胞壁の厚い茶色がかっ
たφ１０μｍ以上の形態へと変化した。分生子は培養後
期から終期に未分化菌糸と同時に形成された。分生子の
大きさはバラツキが大きく、平均的には７〜１０×３μ
ｍであった。
の特性は、以下の通りであった。これら特性から、前記
分解菌の取得方法で取得したベンゼン資化性菌株のＢ１
０はＡｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｐｕｌｌｕｌａｎｓ
Ｂ１０（ＦＥＲＭ Ｐ−１６６７４）であると同定さ
れた。以下に前記ベンゼン資化性菌株Ｂ１０の特性を記
載する。 （１）コロニー性状 培養初期に培地中に透明な菌糸の侵入が観察された。コ
ロニーは酵母様で培養初期は乳白色、そして後期になる
とコロニー周辺より茶色がかった黒色に変化し、最終的
には緑がかった黒色になった。 （２）顕微鏡観察下での形態 菌糸は培養初期にはφ５〜７μｍの透明であり、培養後
期には短い間隔で隔壁を有する細胞壁の厚い茶色がかっ
たφ１０μｍ以上の形態へと変化した。分生子は培養後
期から終期に未分化菌糸と同時に形成された。分生子の
大きさはバラツキが大きく、平均的には７〜１０×３μ
ｍであった。
【００１８】実施例２ 低リン濃度、低窒素濃度条件（自然環境）で生育するト
ルエン資化性菌の検索 （検索用培地の作成）検索用培地として、前記１／１０
Ｅ−培地を用いた。これに、炭素源としてトルエン１０
０ｐｐｍを加えた。また、各培地のｐＨは７．０とし
た。分解菌の取得方法としては、ベンゼンに代えトルエ
ンを用いた以外は、実施例１の取得方法を採用した。ト
ルエン資化性菌としてＴ２３、Ｔ２６が分離された。下
表６〜７にＴ２３の科学的性質および分類学上の情報、
また下表８〜９にＴ２６の科学的性質および分類学上の
情報を示す。
ルエン資化性菌の検索 （検索用培地の作成）検索用培地として、前記１／１０
Ｅ−培地を用いた。これに、炭素源としてトルエン１０
０ｐｐｍを加えた。また、各培地のｐＨは７．０とし
た。分解菌の取得方法としては、ベンゼンに代えトルエ
ンを用いた以外は、実施例１の取得方法を採用した。ト
ルエン資化性菌としてＴ２３、Ｔ２６が分離された。下
表６〜７にＴ２３の科学的性質および分類学上の情報、
また下表８〜９にＴ２６の科学的性質および分類学上の
情報を示す。
【００１９】
【表６】
【００２０】
【表７】 前表の科学的性質および分類学上の情報と細胞質脂肪酸
のプロフィールがＲａｌｓｔｏｎｉａ ｅｕｔｒｏｐｈ
ａの典型であることから、前記分解菌の取得方法で取得
したトルエン資化性菌株のＴ２３はＲａｌｓｔｏｎｉａ
ｅｕｔｒｏｐｈａ Ｔ２３（ＦＥＲＭ Ｐ− １６６
７１）であると同定された。
のプロフィールがＲａｌｓｔｏｎｉａ ｅｕｔｒｏｐｈ
ａの典型であることから、前記分解菌の取得方法で取得
したトルエン資化性菌株のＴ２３はＲａｌｓｔｏｎｉａ
ｅｕｔｒｏｐｈａ Ｔ２３（ＦＥＲＭ Ｐ− １６６
７１）であると同定された。
【００２１】
【表８】
【００２２】
【表９】 前表の科学的性質および分類学上の情報と細胞質脂肪酸
のプロフィールがＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｙｒｒ
ｏｃｉｎｉａに近似していると記載されているＢｕｒｋ
ｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａと類似していること
から、前記分解菌の取得方法で取得したトルエン資化性
菌株の前記Ｔ２６はＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｙｒ
ｒｏｃｉｎｉａ Ｔ２６（ＦＥＲＭ Ｐ− １６６６
９）であると同定された。
のプロフィールがＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｙｒｒ
ｏｃｉｎｉａに近似していると記載されているＢｕｒｋ
ｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａと類似していること
から、前記分解菌の取得方法で取得したトルエン資化性
菌株の前記Ｔ２６はＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｙｒ
ｒｏｃｉｎｉａ Ｔ２６（ＦＥＲＭ Ｐ− １６６６
９）であると同定された。
【００２３】実施例３ 低リン濃度、低窒素濃度条件（自然環境）で生育するキ
シレン資化性菌の検索 （検索用培地の作成）検索用培地として、前記１／１０
Ｅ−培地を用いた。これに、炭素源としてキシレン１０
０ｐｐｍを加えた。また、各培地のｐＨは７．０とし
た。分解菌の取得方法としては、ベンゼンに代えキシレ
ンを用いた以外は、実施例１の取得方法を採用した。キ
シレン資化性菌としてＸ３、Ｘ４が分離された。下表１
０〜１１にＸ３の科学的性質および分類学上の情報、ま
た下表１２〜９にＴ２６の科学的性質および分類学上の
情報を示す。下表１０〜１１にＸ３の科学的性質および
分類学上の情報、また、下表１２〜１３にＸ４の科学的
性質および分類学上の情報を示す。
シレン資化性菌の検索 （検索用培地の作成）検索用培地として、前記１／１０
Ｅ−培地を用いた。これに、炭素源としてキシレン１０
０ｐｐｍを加えた。また、各培地のｐＨは７．０とし
た。分解菌の取得方法としては、ベンゼンに代えキシレ
ンを用いた以外は、実施例１の取得方法を採用した。キ
シレン資化性菌としてＸ３、Ｘ４が分離された。下表１
０〜１１にＸ３の科学的性質および分類学上の情報、ま
た下表１２〜９にＴ２６の科学的性質および分類学上の
情報を示す。下表１０〜１１にＸ３の科学的性質および
分類学上の情報、また、下表１２〜１３にＸ４の科学的
性質および分類学上の情報を示す。
【００２４】
【表１０】
【００２５】
【表１１】 前表の科学的性質および分類学上の情報と細胞質脂肪酸
の組成がＲａｌｓｔｏｎｉａ ｅｕｔｒｏｐｈａの典型
であることから、前記分解菌の取得方法で取得したキシ
レン資化性菌株のＸ３はＲａｌｓｔｏｎｉａ ｅｕｔｒ
ｏｐｈａ Ｘ３（ＦＥＲＭ Ｐ− １６６７３）である
と同定された。
の組成がＲａｌｓｔｏｎｉａ ｅｕｔｒｏｐｈａの典型
であることから、前記分解菌の取得方法で取得したキシ
レン資化性菌株のＸ３はＲａｌｓｔｏｎｉａ ｅｕｔｒ
ｏｐｈａ Ｘ３（ＦＥＲＭ Ｐ− １６６７３）である
と同定された。
【００２６】
【表１２】
【００２７】
【表１３】 前表の科学的性質および分類学上の情報と細胞質脂肪酸
のプロフィールがＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｙｒｒ
ｏｃｉｎｉａに近似していると記述されているＢｕｒｋ
ｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａの典型であることか
ら、前記分解菌の取得方法で取得したキシレン資化性菌
株の前記Ｘ４はＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｙｒｒｏ
ｃｉｎｉａ Ｘ４（ＦＥＲＭ Ｐ− １６６７０）であ
ると同定された。
のプロフィールがＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｙｒｒ
ｏｃｉｎｉａに近似していると記述されているＢｕｒｋ
ｈｏｌｄｅｒｉａ ｃｅｐａｃｉａの典型であることか
ら、前記分解菌の取得方法で取得したキシレン資化性菌
株の前記Ｘ４はＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｙｒｒｏ
ｃｉｎｉａ Ｘ４（ＦＥＲＭ Ｐ− １６６７０）であ
ると同定された。
【００２８】実施例４ 前記各実施例の菌株の資化性の確認 下表１４の培地（リン、窒素共に５ｐｐｍ）５０ｍｌを
５００ｍｌ容量のネジロ付三角フラスコに加え、これに
ベンゼン、トルエン、キシレン各々を１００ｐｐｍにな
るように添加した。供試菌株としてＢ２株、Ｔ２３株、
Ｘ３株をそれぞれ用いた。３０℃で３日間の振とう培養
を行い生育を肉眼で観察した。その結果を下表１５に示
した。
５００ｍｌ容量のネジロ付三角フラスコに加え、これに
ベンゼン、トルエン、キシレン各々を１００ｐｐｍにな
るように添加した。供試菌株としてＢ２株、Ｔ２３株、
Ｘ３株をそれぞれ用いた。３０℃で３日間の振とう培養
を行い生育を肉眼で観察した。その結果を下表１５に示
した。
【００２９】
【表１４】
【００３０】
【表１５】 前表１５の結果、Ｂ２株、Ｘ３株は、ベンゼン、トルエ
ン、キシレンをすべて資化可能であることおよびＴ２３
株はトルエン、キシレンを資化可能であることが明らか
になった。
ン、キシレンをすべて資化可能であることおよびＴ２３
株はトルエン、キシレンを資化可能であることが明らか
になった。
【００３１】実施例５ １／１０Ｅ培地に１．２％のアガロースと１００ｐｐｍ
のフェノールを添加した平板培地にＢ２株、Ｘ４株、Ｔ
２３株を植菌し、生育を肉眼で確認した。
のフェノールを添加した平板培地にＢ２株、Ｘ４株、Ｔ
２３株を植菌し、生育を肉眼で確認した。
【表１６】 この結果供試菌すべてにフェノール資化性があることが
明らかになった。
明らかになった。
【００３２】
【効果】自然汚染環境や製油所や化学工場などからの低
栄養排水にリン源や窒素源等の栄養塩類を添加すること
なく、低コストで二次汚染の心配のない環境浄化あるい
は排水処理することのできる微生物、および該微生物を
用いた環境浄化あるいは排水処理方法が提供された。
栄養排水にリン源や窒素源等の栄養塩類を添加すること
なく、低コストで二次汚染の心配のない環境浄化あるい
は排水処理することのできる微生物、および該微生物を
用いた環境浄化あるいは排水処理方法が提供された。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｂ０９Ｂ 3/00 ＺＡＢＥ //(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:01） (Ｃ１２Ｎ 1/14 Ｃ１２Ｒ 1:645）
Claims (14)
- 【請求項１】 リン５ｐｐｍ以下および窒素５０ｐｐｍ
以下の条件で生育可能な微生物。 - 【請求項２】 微生物がＲａｌｓｔｏｎｉａ属に属する
請求項１記載の低栄養性微生物。 - 【請求項３】 微生物がＲａｌｓｔｏｎｉａ ｅｕｔｒ
ｏｐｈａに属するものである請求項２記載の低栄養性微
生物。 - 【請求項４】 微生物がＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ属に
属するものである請求項１記載の低栄養性微生物。 - 【請求項５】 微生物がＢｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐ
ｙｒｒｏｃｉｎｉａに属するものである請求項４記載の
低栄養性微生物。 - 【請求項６】 微生物がＡｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ属
に属する低栄養性微生物。 - 【請求項７】 微生物がＡｕｒｅｏｂａｓｉｄｉｕｍ
ｐｕｌｌｕｌａｎｓに属するものである請求項６記載の
低栄養性微生物。 - 【請求項８】 微生物が芳香族化合物を分解することが
可能なものである請求項１〜７のいずれかに記載の低栄
養性微生物。 - 【請求項９】 芳香族化合物がベンゼン、トルエンおよ
びキシレンよりなる群から選ばれた少なくとも一種以上
を含有するものである請求項８記載の低栄養性微生物。 - 【請求項１０】 請求項８または９記載の微生物で石油
汚染物質を処理することを特徴とする石油汚染物質の浄
化方法。 - 【請求項１１】 石油汚染物質が石油汚染土壌または製
油所排水である請求項１０記載の石油汚染物質の浄化方
法。 - 【請求項１２】 請求項８または９記載の微生物で芳香
族化合物汚染物質を処理することを特徴とする芳香族化
合物汚染物質の浄化方法。 - 【請求項１３】 芳香族化合物汚染物質が芳香族化合物
汚染土壌または芳香族化合物を含有する排水である請求
項１２記載の芳香族化合物汚染物質の浄化方法。 - 【請求項１４】 芳香族化合物汚染物質がベンゼン、ト
ルエンおよびキシレンよりなる群から選ばれた少なくと
も一種以上のもので汚染された汚染物質である請求項１
２または１３記載の芳香族化合物汚染物質の浄化方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10095439A JPH11266858A (ja) | 1998-03-24 | 1998-03-24 | 新規低栄養性微生物および該微生物を用いた石油あるいは芳香族化合物汚染物質の浄化方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP10095439A JPH11266858A (ja) | 1998-03-24 | 1998-03-24 | 新規低栄養性微生物および該微生物を用いた石油あるいは芳香族化合物汚染物質の浄化方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11266858A true JPH11266858A (ja) | 1999-10-05 |
Family
ID=14137741
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP10095439A Pending JPH11266858A (ja) | 1998-03-24 | 1998-03-24 | 新規低栄養性微生物および該微生物を用いた石油あるいは芳香族化合物汚染物質の浄化方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH11266858A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005095782A1 (en) * | 2004-04-01 | 2005-10-13 | Jung-Yeoul Hwang | Apparatus for fluid or gas magnetization |
| JP2007252285A (ja) * | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Petroleum Energy Center | 新規微生物 |
| JP2009500008A (ja) * | 2005-07-01 | 2009-01-08 | アンスティテュ ドゥ ルシェルシェ プール ル デヴロップマン（イエールデ） | 炭化水素の分解方法の実施のための、好熱性硫酸還元性古細菌の使用 |
| JP2009090183A (ja) * | 2007-10-05 | 2009-04-30 | Japan Organo Co Ltd | 土壌、地下水の浄化方法、微生物の培養方法及び栄養剤 |
-
1998
- 1998-03-24 JP JP10095439A patent/JPH11266858A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2005095782A1 (en) * | 2004-04-01 | 2005-10-13 | Jung-Yeoul Hwang | Apparatus for fluid or gas magnetization |
| JP2009500008A (ja) * | 2005-07-01 | 2009-01-08 | アンスティテュ ドゥ ルシェルシェ プール ル デヴロップマン（イエールデ） | 炭化水素の分解方法の実施のための、好熱性硫酸還元性古細菌の使用 |
| JP2007252285A (ja) * | 2006-03-24 | 2007-10-04 | Petroleum Energy Center | 新規微生物 |
| JP2009090183A (ja) * | 2007-10-05 | 2009-04-30 | Japan Organo Co Ltd | 土壌、地下水の浄化方法、微生物の培養方法及び栄養剤 |
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