JPH11155558A - 原虫の培養方法及び免疫測定試薬 - Google Patents
原虫の培養方法及び免疫測定試薬Info
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- JPH11155558A JPH11155558A JP9341932A JP34193297A JPH11155558A JP H11155558 A JPH11155558 A JP H11155558A JP 9341932 A JP9341932 A JP 9341932A JP 34193297 A JP34193297 A JP 34193297A JP H11155558 A JPH11155558 A JP H11155558A
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- Japan
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- protozoan
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 本発明は、ホローファイバーを用いて培養を
行う原虫の培養方法及び該培養方法により培養された原
虫を処理することによって得られた抗原を不溶性担体に
感作してなる免疫測定試薬である。 【効果】 本発明の培養方法により、夾雑物の少ない原
虫を効率良く培養することができ、該原虫を処理して得
られた抗原を免疫測定試薬に用いることにより、高感度
の免疫測定試薬を提供することができる。
行う原虫の培養方法及び該培養方法により培養された原
虫を処理することによって得られた抗原を不溶性担体に
感作してなる免疫測定試薬である。 【効果】 本発明の培養方法により、夾雑物の少ない原
虫を効率良く培養することができ、該原虫を処理して得
られた抗原を免疫測定試薬に用いることにより、高感度
の免疫測定試薬を提供することができる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ホローファイバー
を用いる原虫の培養方法及び該培養方法により得られた
原虫を処理して得られる抗原を用いた免疫測定試薬に関
する。本発明の原虫の培養方法により抗原性の高い原虫
を得ることができ、さらに得られた原虫を免疫測定試薬
に適用することによって、従来より感度の高い免疫測定
試薬を提供することができる。
を用いる原虫の培養方法及び該培養方法により得られた
原虫を処理して得られる抗原を用いた免疫測定試薬に関
する。本発明の原虫の培養方法により抗原性の高い原虫
を得ることができ、さらに得られた原虫を免疫測定試薬
に適用することによって、従来より感度の高い免疫測定
試薬を提供することができる。
【０００２】
【従来の技術】原虫は一つの細胞からなり、その一つの
細胞で総ての生活機能を営んでいる動物である。つま
り、運動性のある従属栄養の動物性単細胞真核生物とい
うことができる。そして、その一つの細胞によって、摂
食・運動・代謝・生理等の生活に必要な全ての機能を行
っている。現在、地球上には約６５０００種という多種
の様々な原虫が知られている。しかし、その中でヒトに
病原性を発揮する種類は３０種類程度であり、トリパノ
ソーマやリーシュマニア等が挙げられる。
細胞で総ての生活機能を営んでいる動物である。つま
り、運動性のある従属栄養の動物性単細胞真核生物とい
うことができる。そして、その一つの細胞によって、摂
食・運動・代謝・生理等の生活に必要な全ての機能を行
っている。現在、地球上には約６５０００種という多種
の様々な原虫が知られている。しかし、その中でヒトに
病原性を発揮する種類は３０種類程度であり、トリパノ
ソーマやリーシュマニア等が挙げられる。
【０００３】このようなヒトに病原性を有する原虫は感
染性の高いものが多く、その感染ルートとしては、動物
や昆虫が媒介となる自然感染の他、血液による輸血感染
等が挙げられる。輸血のような人為的な作業による感染
を防止することは無用な感染を防止するために効果的で
あり、感染を拡大させないためにも重要である。そこ
で、免疫反応を利用した臨床診断試薬により感染血液の
スクリーニングが、検体中に存在する原虫の抗原に特異
的な抗体を測定することにより行われている。この試薬
としては、原虫を処理して得られる画分を抗原として不
溶性担体に感作したものを用いるものである。
染性の高いものが多く、その感染ルートとしては、動物
や昆虫が媒介となる自然感染の他、血液による輸血感染
等が挙げられる。輸血のような人為的な作業による感染
を防止することは無用な感染を防止するために効果的で
あり、感染を拡大させないためにも重要である。そこ
で、免疫反応を利用した臨床診断試薬により感染血液の
スクリーニングが、検体中に存在する原虫の抗原に特異
的な抗体を測定することにより行われている。この試薬
としては、原虫を処理して得られる画分を抗原として不
溶性担体に感作したものを用いるものである。
【０００４】従来、該試薬に用いる原虫の抗原は、培地
と原虫をフラスコ中に静置させ培養を行うフラスコ培養
又はファーメンターベッセル中に培地と原虫とを存在さ
せ、攪拌することにより大量培養を行うことができるフ
ァーメンター培養により培養された原虫を処理すること
で得られていた。
と原虫をフラスコ中に静置させ培養を行うフラスコ培養
又はファーメンターベッセル中に培地と原虫とを存在さ
せ、攪拌することにより大量培養を行うことができるフ
ァーメンター培養により培養された原虫を処理すること
で得られていた。
【０００５】
【発明が解決する課題】原虫を臨床診断試薬の抗原とし
て用いる場合には、前記した培養によりある程度の量を
得た後、処理することによって抗原を得ていたが、従来
の培養により得られた原虫は夾雑物を多量に含んでお
り、得られた抗原にもその夾雑物が混ざる。このため、
この抗原を試薬として用いた場合には夾雑物の影響によ
る感度の低下がみられた。そこで、本発明は、原虫の感
染を検査することができる、より高感度な免疫測定試薬
及びその原料を得るための原虫の培養方法を提供するこ
とを目的とする。
て用いる場合には、前記した培養によりある程度の量を
得た後、処理することによって抗原を得ていたが、従来
の培養により得られた原虫は夾雑物を多量に含んでお
り、得られた抗原にもその夾雑物が混ざる。このため、
この抗原を試薬として用いた場合には夾雑物の影響によ
る感度の低下がみられた。そこで、本発明は、原虫の感
染を検査することができる、より高感度な免疫測定試薬
及びその原料を得るための原虫の培養方法を提供するこ
とを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本願発明者らは、鋭意検
討した結果、ホローファイバーを用い原虫の培養を行う
ことによって、夾雑物の少ない原虫を効率良く得ること
ができることを見出し、本発明を完成するに至った。
討した結果、ホローファイバーを用い原虫の培養を行う
ことによって、夾雑物の少ない原虫を効率良く得ること
ができることを見出し、本発明を完成するに至った。
【０００７】以下、本発明を詳細に説明する。本発明
は、ホローファイバーを用いて培養を行うことを特徴と
する原虫の培養方法及び該培養方法により培養された原
虫を処理することにより得られた抗原を用いた免疫測定
試薬である。
は、ホローファイバーを用いて培養を行うことを特徴と
する原虫の培養方法及び該培養方法により培養された原
虫を処理することにより得られた抗原を用いた免疫測定
試薬である。
【０００８】本発明の培養方法は、複数の中空子からな
るホローファイバーを培養槽として用いることを必須の
要件とするものである。該培養槽は中空糸の束からなっ
ており、中空糸の外側（中空糸と他の中空糸との間）に
は培養する原虫と接触培地とを存在させ、中空糸の内側
には培養液及び培養ガスを含む循環培地を通すものであ
る。該循環培地は中空子を通過する際、原虫の存在する
接触培地へ栄養物及び培養ガスを供給し、またこれと同
時に接触培地から老廃物と不用ガスを除去することがで
きるため、本発明の培養方法は連続培養が可能な原虫の
培養方法である。
るホローファイバーを培養槽として用いることを必須の
要件とするものである。該培養槽は中空糸の束からなっ
ており、中空糸の外側（中空糸と他の中空糸との間）に
は培養する原虫と接触培地とを存在させ、中空糸の内側
には培養液及び培養ガスを含む循環培地を通すものであ
る。該循環培地は中空子を通過する際、原虫の存在する
接触培地へ栄養物及び培養ガスを供給し、またこれと同
時に接触培地から老廃物と不用ガスを除去することがで
きるため、本発明の培養方法は連続培養が可能な原虫の
培養方法である。
【０００９】前記培養槽に用いる中空子は、培養に使用
する多孔質の各種中空子を用いることができ、例えば、
ポリプロピレン、セルロースジアセテート、シリコーン
ゴム等の高分子化合物を材料として製造されるものであ
る。この中空子の細孔は培養する原虫の種類によって適
宜選択することができるが、通常０．０５〜０．１５μ
ｍであることが好ましい。また、中空子の数、直径、長
さ等は培養槽の容量、原虫の種類等により変更すること
ができる。
する多孔質の各種中空子を用いることができ、例えば、
ポリプロピレン、セルロースジアセテート、シリコーン
ゴム等の高分子化合物を材料として製造されるものであ
る。この中空子の細孔は培養する原虫の種類によって適
宜選択することができるが、通常０．０５〜０．１５μ
ｍであることが好ましい。また、中空子の数、直径、長
さ等は培養槽の容量、原虫の種類等により変更すること
ができる。
【００１０】本発明の培養方法に用いることができる循
環培地及び接触培地は、天然培地、ウシ胎児血清等の血
清を含んだ血清添加培地、血清以外の栄養物、例えばア
ミノ酸類、ビタミン類、無機塩類、糖類等、を含んだ無
血清培地のいずれでも用いることができる。
環培地及び接触培地は、天然培地、ウシ胎児血清等の血
清を含んだ血清添加培地、血清以外の栄養物、例えばア
ミノ酸類、ビタミン類、無機塩類、糖類等、を含んだ無
血清培地のいずれでも用いることができる。
【００１１】また、本発明の免疫測定試薬は、前記培養
方法により培養された原虫を処理することによって得ら
れた抗原を、固相に結合することにより提供される免疫
測定試薬である。抗原を得るための原虫の処理方法とし
ては、例えば可溶化処理、超音波処理、凍結融解処理等
の方法を挙げることができる。また、免疫測定試薬の固
相としては、例えばプラスチック製の試験管、マイクロ
プレートウェル、各種メンブレン、動物赤血球、人工固
体粒子等を挙げることができる。
方法により培養された原虫を処理することによって得ら
れた抗原を、固相に結合することにより提供される免疫
測定試薬である。抗原を得るための原虫の処理方法とし
ては、例えば可溶化処理、超音波処理、凍結融解処理等
の方法を挙げることができる。また、免疫測定試薬の固
相としては、例えばプラスチック製の試験管、マイクロ
プレートウェル、各種メンブレン、動物赤血球、人工固
体粒子等を挙げることができる。
【００１２】この抗原を試薬として用いる測定方法は、
試薬に用いる抗原が検体中の抗体と免疫反応を行う測定
方法であれば、公知である免疫測定方法を用いることが
できる。免疫測定方法としては、例えば、凝集法、比濁
法、サンドイッチ法、競合法等を挙げることができる。
また、これらの免疫測定において標識物を使用する場合
にはその標識として、酵素、蛍光物質、発光物質、放射
性物質、着色粒子、コロイド粒子等を用いることができ
るが、これらに限定されるものではない。
試薬に用いる抗原が検体中の抗体と免疫反応を行う測定
方法であれば、公知である免疫測定方法を用いることが
できる。免疫測定方法としては、例えば、凝集法、比濁
法、サンドイッチ法、競合法等を挙げることができる。
また、これらの免疫測定において標識物を使用する場合
にはその標識として、酵素、蛍光物質、発光物質、放射
性物質、着色粒子、コロイド粒子等を用いることができ
るが、これらに限定されるものではない。
【００１３】例えば、凝集法である間接凝集免疫測定方
法を用いて検体中の抗体を測定する場合、本発明により
得られた該抗原を適当な不溶性担体に固定化して測定試
薬とすることができ、この測定方法は該試薬を検体中の
抗体と反応させ、凝集反応の有無によって検体中の抗体
が存在するか否かを判定する測定方法である。この場
合、不溶性担体としては、例えば、ヒト、羊、ニワト
リ、山羊等の動物赤血球、ゼラチン、ラテックス、磁性
粒子等の人工固体粒子等の免疫学的に不活性な粒子を用
いることができる。
法を用いて検体中の抗体を測定する場合、本発明により
得られた該抗原を適当な不溶性担体に固定化して測定試
薬とすることができ、この測定方法は該試薬を検体中の
抗体と反応させ、凝集反応の有無によって検体中の抗体
が存在するか否かを判定する測定方法である。この場
合、不溶性担体としては、例えば、ヒト、羊、ニワト
リ、山羊等の動物赤血球、ゼラチン、ラテックス、磁性
粒子等の人工固体粒子等の免疫学的に不活性な粒子を用
いることができる。
【００１４】また、抗原を不溶性担体に結合させる方法
としては、物理吸着法又は化学結合法を適用することが
できる。物理吸着法は、適当な緩衝溶液中で前記担体と
抗原とを反応させることによって行うものである。緩衝
液としては、リン酸緩衝液、トリス−塩酸緩衝液、炭酸
緩衝液等を用いることができ、反応は両者を混合させる
ことによって容易に進行し、目的とする固定化抗原を得
ることができる。
としては、物理吸着法又は化学結合法を適用することが
できる。物理吸着法は、適当な緩衝溶液中で前記担体と
抗原とを反応させることによって行うものである。緩衝
液としては、リン酸緩衝液、トリス−塩酸緩衝液、炭酸
緩衝液等を用いることができ、反応は両者を混合させる
ことによって容易に進行し、目的とする固定化抗原を得
ることができる。
【００１５】化学結合法は、例えばグルタールアルデヒ
ド法、過ヨウ素酸法、マレイミド法、ピリジル・スルフ
ィド法、その他公知の各種架橋剤を用いる方法等により
行うものである。（例えば、「蛋白質核酸酵素」別冊３
１号、３７〜４５頁（１９８７）参照）。この方法で
は、モノクローナル抗体に存在する官能基を利用するこ
とができるほか、抗体にチオール基、アミノ基、カルボ
キシル基、水酸基等の官能基を導入した後、前記と同様
の反応により抗体を不溶性担体に固定化することも可能
である。
ド法、過ヨウ素酸法、マレイミド法、ピリジル・スルフ
ィド法、その他公知の各種架橋剤を用いる方法等により
行うものである。（例えば、「蛋白質核酸酵素」別冊３
１号、３７〜４５頁（１９８７）参照）。この方法で
は、モノクローナル抗体に存在する官能基を利用するこ
とができるほか、抗体にチオール基、アミノ基、カルボ
キシル基、水酸基等の官能基を導入した後、前記と同様
の反応により抗体を不溶性担体に固定化することも可能
である。
【００１６】また、この凝集法においては、反応容器内
で検体中の抗体と固定化された抗原とを反応させ、その
容器底部への粒子の凝集パターンの違いによる凝集反応
の有無により検体の陽性・陰性を判定するものである。
で検体中の抗体と固定化された抗原とを反応させ、その
容器底部への粒子の凝集パターンの違いによる凝集反応
の有無により検体の陽性・陰性を判定するものである。
【００１７】
【実施例】実施例及び参考例により本発明をより詳細に
説明する。
説明する。
【００１８】（参考例１） Ｔ．ｃｒｕｚｉ原虫のフラスコ培養 Ｔ．ｃｒｕｚｉ原虫の維持継代は、次の操作により行っ
た。培地として、ＬＩＴ培地５％ウシ血清を用い、初濃
度５×１０6 ／ｍＬの割合で４日〜７日の間隔でフラス
コ培養により継代を行った。なお、培養温度は２５℃に
て行った。
た。培地として、ＬＩＴ培地５％ウシ血清を用い、初濃
度５×１０6 ／ｍＬの割合で４日〜７日の間隔でフラス
コ培養により継代を行った。なお、培養温度は２５℃に
て行った。
【００１９】（参考例２） フラスコ培養により得られた原虫の膜可溶化分画の調整 参考例１において得られた培養４日目の原虫を、リン酸
緩衝溶液にて３回遠心洗浄した後、１．０％Ｔｒｉｔｏ
ｎＸ１００を用いて室温にて１時間静置処理し、３００
０ｒｐｍで１０分間遠心して得られた上清を、さらに１
００００ｒｐｍで１時間遠心し、その上清を０．４５μ
ｍのフィルターに通して膜可溶化分画を得た。
緩衝溶液にて３回遠心洗浄した後、１．０％Ｔｒｉｔｏ
ｎＸ１００を用いて室温にて１時間静置処理し、３００
０ｒｐｍで１０分間遠心して得られた上清を、さらに１
００００ｒｐｍで１時間遠心し、その上清を０．４５μ
ｍのフィルターに通して膜可溶化分画を得た。
【００２０】（実施例１） Ｔ．ｃｒｕｚｉ原虫のホローファイバー培養 培養装置としてＴＥＣＮＯＭＯＵＳＥ（ＩＮＴＥＧＲＡ
社製）、ホローファイバーとしてＣｕｌｔｕｒｅ Ｃａ
ｓｅｔｔｅ（ＩＮＴＥＧＲＡ社製）を用いた。Ｃｕｌｔ
ｕｒｅ Ｃａｓｅｔｔｅの膜表面積は６００ｃｍ2 でＥ
ＣＳ容量は７．５ｍＬ、膜の透過分子量は１００００ダ
ルトンである。培養に用いた培地は、循環培地にＰＦＨ
Ｍ−２（ＧＩＢＣＯ社）を、接種培地にはＬＩＴ培地を
用いた。Ｔ．ｃｒｕｚｉ原虫を０．５−１０10／５ｍＬ
で接種、３７℃にて７日間培養し原虫を回収した。
社製）、ホローファイバーとしてＣｕｌｔｕｒｅ Ｃａ
ｓｅｔｔｅ（ＩＮＴＥＧＲＡ社製）を用いた。Ｃｕｌｔ
ｕｒｅ Ｃａｓｅｔｔｅの膜表面積は６００ｃｍ2 でＥ
ＣＳ容量は７．５ｍＬ、膜の透過分子量は１００００ダ
ルトンである。培養に用いた培地は、循環培地にＰＦＨ
Ｍ−２（ＧＩＢＣＯ社）を、接種培地にはＬＩＴ培地を
用いた。Ｔ．ｃｒｕｚｉ原虫を０．５−１０10／５ｍＬ
で接種、３７℃にて７日間培養し原虫を回収した。
【００２１】（実施例２） ホローファイバー培養により得られた原虫の膜可溶化分
画の調整 実施例１において得られた培養７日目の原虫を、リン酸
緩衝溶液にて３回遠心洗浄した後、１．０％Ｔｒｉｔｏ
ｎＸ１００を用い室温にて１時間静置処理した。その
後、３０００ｒｐｍで１０分間遠心して得られた上清
を、さらに１００００ｒｐｍで１時間遠心し、その上清
を０．４５μｍのフィルターに通して膜可溶化分画を得
た。
画の調整 実施例１において得られた培養７日目の原虫を、リン酸
緩衝溶液にて３回遠心洗浄した後、１．０％Ｔｒｉｔｏ
ｎＸ１００を用い室温にて１時間静置処理した。その
後、３０００ｒｐｍで１０分間遠心して得られた上清
を、さらに１００００ｒｐｍで１時間遠心し、その上清
を０．４５μｍのフィルターに通して膜可溶化分画を得
た。
【００２２】（実施例３） 抗原感作粒子の調整 特開昭５８−１１３７５４号公報実施例１に記載の方法
に従って製造したゼラチン粒子を粒子濃度５％となるよ
うに５ｐｐｍタンニン酸含有リン酸緩衝溶液に分散させ
３７℃で１０分間加温処理を３回行い、実施例２及び参
考例２で得られた膜可溶化分画を加えそれぞれ１０μｇ
／ｍＬの濃度とし、３７℃、１時間反応させ、各々の抗
原が感作された２種の感作ゼラチン粒子を得た。
に従って製造したゼラチン粒子を粒子濃度５％となるよ
うに５ｐｐｍタンニン酸含有リン酸緩衝溶液に分散させ
３７℃で１０分間加温処理を３回行い、実施例２及び参
考例２で得られた膜可溶化分画を加えそれぞれ１０μｇ
／ｍＬの濃度とし、３７℃、１時間反応させ、各々の抗
原が感作された２種の感作ゼラチン粒子を得た。
【００２３】（実施例４） 抗原感作粒子による測定 実施例３により得られたそれぞれの抗原を感作した粒子
を用いてＢＣＰ社より購入した管理検体との反応性を間
接凝集免疫測定方法により確認したところ、フラスコ培
養分画に比べホローファイバー培養抗原を感作した粒子
の方が２〜３管感度が高かった。このときの測定結果を
図１に示す。また、ホローファイバー培養において、３
０℃、３５℃、４０℃の培養温度においても実施例１と
同一の操作で培養を行い、得られた原虫を同様に処理し
反応性を調べたところ、ほぼ同程度の感度が得られた。
を用いてＢＣＰ社より購入した管理検体との反応性を間
接凝集免疫測定方法により確認したところ、フラスコ培
養分画に比べホローファイバー培養抗原を感作した粒子
の方が２〜３管感度が高かった。このときの測定結果を
図１に示す。また、ホローファイバー培養において、３
０℃、３５℃、４０℃の培養温度においても実施例１と
同一の操作で培養を行い、得られた原虫を同様に処理し
反応性を調べたところ、ほぼ同程度の感度が得られた。
【００２４】（実施例５） 膜可溶化分画中の脂肪分析 実施例２及び参考例２により得られた膜可溶化分画から
それぞれＢｌｉｇｈ−Ｄｙｅｒ法により脂質を抽出し、
薄層クロマトグラフィーに展開した。中性脂質及び極性
脂質の２条件により展開を行い、分析を行った。展開溶
媒としては、中性脂質の分析にはヘキサン：ジエチルエ
ーテル：酢酸＝８０：３０：１を、極性脂質の分析には
クロロホルム：メタノール：水＝６５：１６：２を用い
た。この結果をそれぞれ図２及び図３に示す。フラスコ
培養分画とホローファイバー培養分画とを比較すると、
中性脂質分析ではトリアセルグリセリド及びジアシルグ
リセリドの脂肪の割合がフラスコ培養の方が多く、極性
脂質分析では原虫の虫体膜成分であるリン酸の割合がそ
れぞれ異なっており、これらの違いが試薬に用いたとき
の反応性に関与しているものと判断される。
それぞれＢｌｉｇｈ−Ｄｙｅｒ法により脂質を抽出し、
薄層クロマトグラフィーに展開した。中性脂質及び極性
脂質の２条件により展開を行い、分析を行った。展開溶
媒としては、中性脂質の分析にはヘキサン：ジエチルエ
ーテル：酢酸＝８０：３０：１を、極性脂質の分析には
クロロホルム：メタノール：水＝６５：１６：２を用い
た。この結果をそれぞれ図２及び図３に示す。フラスコ
培養分画とホローファイバー培養分画とを比較すると、
中性脂質分析ではトリアセルグリセリド及びジアシルグ
リセリドの脂肪の割合がフラスコ培養の方が多く、極性
脂質分析では原虫の虫体膜成分であるリン酸の割合がそ
れぞれ異なっており、これらの違いが試薬に用いたとき
の反応性に関与しているものと判断される。
【００２５】（実施例６）実施例１及び参考例１で得ら
れた虫体の形状をギムザ染色により顕微鏡下で確認した
ところ、フラスコ培養虫体は寸胴で、ホローファイバー
培養虫体は細長く虫体内の夾雑物が少なかった。キネト
プラストの位置から判断すると、両者とも形態学的には
ｅｐｉｍａｓｔｉｇｏｔｅであった。
れた虫体の形状をギムザ染色により顕微鏡下で確認した
ところ、フラスコ培養虫体は寸胴で、ホローファイバー
培養虫体は細長く虫体内の夾雑物が少なかった。キネト
プラストの位置から判断すると、両者とも形態学的には
ｅｐｉｍａｓｔｉｇｏｔｅであった。
【００２６】
【発明の効果】本発明の培養方法により、夾雑物の少な
い原虫を効率良く培養することができ、該原虫を処理し
て得られた抗原を免疫測定試薬に用いることにより、高
感度の免疫測定試薬を提供することができる。
い原虫を効率良く培養することができ、該原虫を処理し
て得られた抗原を免疫測定試薬に用いることにより、高
感度の免疫測定試薬を提供することができる。
【図１】 Ｔ．ｃｒｕｚｉの感染検体をフラスコ培養抗
原感作粒子及びホローファイバー培養抗原感作粒子とそ
れぞれ反応させた時の凝集反応結果である。
原感作粒子及びホローファイバー培養抗原感作粒子とそ
れぞれ反応させた時の凝集反応結果である。
【図２】 フラスコ培養及びホローファイバー培養にお
ける膜可溶化分画の中性脂質を分析した図である。
ける膜可溶化分画の中性脂質を分析した図である。
【図３】 フラスコ培養及びホローファイバー培養にお
ける膜可溶化分画の極性脂質を分析した図である。
ける膜可溶化分画の極性脂質を分析した図である。
フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ //(Ｃ１２Ｎ 1/00 Ｃ１２Ｒ 1:90）
Claims (5)
- 【請求項１】 ホローファイバーを用いて培養を行うこ
とを特徴とする原虫の培養方法。 - 【請求項２】 原虫がトリパノソーマクルーズであるこ
とを特徴とする請求項１に記載の原虫の培養方法。 - 【請求項３】 ホローファイバーを用いて培養した原虫
を処理することによって得られた抗原を固相に結合して
なる免疫測定試薬。 - 【請求項４】 原虫がトリパノソーマクルーズである請
求項３に記載の免疫測定試薬。 - 【請求項５】 免疫測定試薬が間接凝集免疫測定試薬で
ある請求項３乃至４に記載の免疫測定試薬。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34193297A JP3463548B2 (ja) | 1997-11-28 | 1997-11-28 | 原虫の培養方法及び免疫測定試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34193297A JP3463548B2 (ja) | 1997-11-28 | 1997-11-28 | 原虫の培養方法及び免疫測定試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11155558A true JPH11155558A (ja) | 1999-06-15 |
| JP3463548B2 JP3463548B2 (ja) | 2003-11-05 |
Family
ID=18349878
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP34193297A Expired - Fee Related JP3463548B2 (ja) | 1997-11-28 | 1997-11-28 | 原虫の培養方法及び免疫測定試薬 |
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Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0998769A (ja) * | 1995-10-04 | 1997-04-15 | Fujirebio Inc | 細胞培養装置及び細胞培養方法 |
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1997
- 1997-11-28 JP JP34193297A patent/JP3463548B2/ja not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0998769A (ja) * | 1995-10-04 | 1997-04-15 | Fujirebio Inc | 細胞培養装置及び細胞培養方法 |
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| Publication number | Publication date |
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| JP3463548B2 (ja) | 2003-11-05 |
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