JPH11100402A - 毛管電気泳動を用いる、荷電シクロデキストリン類での薬学的化合物のキラル分離 - Google Patents
毛管電気泳動を用いる、荷電シクロデキストリン類での薬学的化合物のキラル分離Info
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- C08B37/0012—Cyclodextrin [CD], e.g. cycle with 6 units (alpha), with 7 units (beta) and with 8 units (gamma), large-ring cyclodextrin or cycloamylose with 9 units or more; Derivatives thereof
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 毛管電気泳動によって広い範囲のキラル化合
物を分割（分析）するために用いられる新規な一連の荷
電シクロデキストリン類を提供する。 【解決手段】 ａ）アルファシクロデキストリン、ｂ）
少なくとも約１２個の修飾されたヒドロキシル基を有す
るベータシクロデキストリン、及びｃ）ガンマシクロデ
キストリンからなる群から選ばれ、二級ヒドロキシルの
少なくとも１つの修飾を含んでなる荷電シクロデキスト
リン。
物を分割（分析）するために用いられる新規な一連の荷
電シクロデキストリン類を提供する。 【解決手段】 ａ）アルファシクロデキストリン、ｂ）
少なくとも約１２個の修飾されたヒドロキシル基を有す
るベータシクロデキストリン、及びｃ）ガンマシクロデ
キストリンからなる群から選ばれ、二級ヒドロキシルの
少なくとも１つの修飾を含んでなる荷電シクロデキスト
リン。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、一般に、毛管電気
泳動によって光学異性体を分離するためにシクロデキス
トリン類を使用することに関する。
泳動によって光学異性体を分離するためにシクロデキス
トリン類を使用することに関する。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】薬学的
製剤に使用される多くの化学的化合物は、それらの薬学
的性質に強く影響を与えることができる光学活性の原因
となる非対称中心を有する。２種の鏡像異性体の１種が
異なった薬学的性質を有する合成薬剤の例がよく知られ
ている。例えば、（−）−プロプラノロールは、（＋）
プロプラノロールよりも１００倍の薬効がある。加え
て、同じ薬剤の２種の鏡像異性体の１種が、より毒性が
強い場合があり、例えばサリドマイドやケタミン等が挙
げられる。従って、高いラセミ体の分割能力（分解能）
と高い効率で鏡像異性体を分離する分析的方法が増々重
要になってきている。立体化学的に純粋な薬と、現存す
るラセミ化合物の念入りな試験との必要性から、効率的
で、迅速で、鋭敏でしかも精確なキラル分析法の開発が
必要とされている。クロマトグラフィー技術、特に高性
能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、が鏡像異性体
の分析用に普通に使用されている。かなり最近、毛管電
気泳動（ＣＥ）がキラルセレクターとともに使用するも
のとして採用されている。使用される最も普通の戦略
は、鏡像異性体対の差別的なホスト−ゲスト複合体形成
のためのシクロデキストリン類の使用である〔Ｓ．ファ
ナリー，Ｊ．，Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，７３５：７７
−１２１（１９９６）；Ｈ．ニシ及びＳ．テラベ，
Ｊ．，Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，６９４：２４５−２７
６（１９９５）；Ａ．ガットマン，「シクロデキストリ
ン配列キラル分析による鏡像異性体の毛管電気泳動分
離」、毛管電気泳動のハンドブック第２版、Ｊ．ランダ
ース編、１９９７、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．，Ｂ
ｏｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬ．の７５〜１００頁〕。固体
支持体に結合した溶解剤を含む多種多様の入手可能なカ
ラムから入念に選択しなければならないＨＰＬＣ分離と
は対照的に、キラルＣＥ分析は、一般にシクロデキスト
リンのようなキラルセレクターを分離緩衝剤中に溶解せ
しめることによって簡素化される。
製剤に使用される多くの化学的化合物は、それらの薬学
的性質に強く影響を与えることができる光学活性の原因
となる非対称中心を有する。２種の鏡像異性体の１種が
異なった薬学的性質を有する合成薬剤の例がよく知られ
ている。例えば、（−）−プロプラノロールは、（＋）
プロプラノロールよりも１００倍の薬効がある。加え
て、同じ薬剤の２種の鏡像異性体の１種が、より毒性が
強い場合があり、例えばサリドマイドやケタミン等が挙
げられる。従って、高いラセミ体の分割能力（分解能）
と高い効率で鏡像異性体を分離する分析的方法が増々重
要になってきている。立体化学的に純粋な薬と、現存す
るラセミ化合物の念入りな試験との必要性から、効率的
で、迅速で、鋭敏でしかも精確なキラル分析法の開発が
必要とされている。クロマトグラフィー技術、特に高性
能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）、が鏡像異性体
の分析用に普通に使用されている。かなり最近、毛管電
気泳動（ＣＥ）がキラルセレクターとともに使用するも
のとして採用されている。使用される最も普通の戦略
は、鏡像異性体対の差別的なホスト−ゲスト複合体形成
のためのシクロデキストリン類の使用である〔Ｓ．ファ
ナリー，Ｊ．，Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，７３５：７７
−１２１（１９９６）；Ｈ．ニシ及びＳ．テラベ，
Ｊ．，Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ．，６９４：２４５−２７
６（１９９５）；Ａ．ガットマン，「シクロデキストリ
ン配列キラル分析による鏡像異性体の毛管電気泳動分
離」、毛管電気泳動のハンドブック第２版、Ｊ．ランダ
ース編、１９９７、ＣＲＣ Ｐｒｅｓｓ Ｉｎｃ．，Ｂ
ｏｃａ Ｒａｔｏｎ，ＦＬ．の７５〜１００頁〕。固体
支持体に結合した溶解剤を含む多種多様の入手可能なカ
ラムから入念に選択しなければならないＨＰＬＣ分離と
は対照的に、キラルＣＥ分析は、一般にシクロデキスト
リンのようなキラルセレクターを分離緩衝剤中に溶解せ
しめることによって簡素化される。
【０００３】シクロデキストリン類（ＣＤ）は、α−、
β−又はγ−シクロデキストリンの名前に対応する６、
７、又は８個のグルコースユニットからなる環状オリゴ
糖類である。ＣＤは、そのへりに二級ヒドロキシル基を
もち、開口部がより大きな直径をした、先端を切り取っ
たトーモロコシの形をしている。内部のキャビティー
は、ヒドロキシ官能を含まず、疎水性の特性を発揮す
る。この疎水性の性質は、ＣＤが芳香族基又はアルキル
基と高度に選択的な封入複合体を形成するのを可能にす
る。ＣＤとそのゲスト分子との間の複合体形成定数の差
が、構造的に類似した光学異性体の相対的電気泳動移動
度に差を生ぜしめ、その結果、鏡像異性体を明確に分離
できる。酸性及び塩基性化合物のキラル分離において、
このＣＤ複合体はイオン性の被検体の電荷の影響の下に
移動する。しかしながら中性の被検体に関しては、荷電
がないシクロデキストリン類は、被検体、シクロデキス
トリン及び複合体が全く電気泳動移動度を有さないため
に、適用できない。荷電シクロデキストリン類の使用
は、そのため中性の化合物のキラル分離の問題を解決す
るために考案された。
β−又はγ−シクロデキストリンの名前に対応する６、
７、又は８個のグルコースユニットからなる環状オリゴ
糖類である。ＣＤは、そのへりに二級ヒドロキシル基を
もち、開口部がより大きな直径をした、先端を切り取っ
たトーモロコシの形をしている。内部のキャビティー
は、ヒドロキシ官能を含まず、疎水性の特性を発揮す
る。この疎水性の性質は、ＣＤが芳香族基又はアルキル
基と高度に選択的な封入複合体を形成するのを可能にす
る。ＣＤとそのゲスト分子との間の複合体形成定数の差
が、構造的に類似した光学異性体の相対的電気泳動移動
度に差を生ぜしめ、その結果、鏡像異性体を明確に分離
できる。酸性及び塩基性化合物のキラル分離において、
このＣＤ複合体はイオン性の被検体の電荷の影響の下に
移動する。しかしながら中性の被検体に関しては、荷電
がないシクロデキストリン類は、被検体、シクロデキス
トリン及び複合体が全く電気泳動移動度を有さないため
に、適用できない。荷電シクロデキストリン類の使用
は、そのため中性の化合物のキラル分離の問題を解決す
るために考案された。
【０００４】メーヤーら〔Ｊ．Ｍｉｃｒｏｃｏｌ，Ｓｅ
ｐ．，６：４３−４８（１９９４）〕とタイトら〔Ａｎ
ａｌ．Ｃｈｅｍ．，６６：４０１３−４１０１８（１９
９４）〕が最初にＣＥキラル分離のためにスルホブチル
エーテル β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−βＣＤ）
の使用を報告した。それに続く報告書には、キラルセレ
クターとしてＳＢＥＣＤを用いるアミン類と中性化合物
の分析が記載されている〔デッテら、Ｅｌｅｃｔｒｏｐ
ｈｏｒｅｓｉｓ、１５：７９９−８０３（１９９４）；
チャンクベタッゼら、Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉ
ｓ、１５：８０４−８０７（１９９４）；ルーリーら、
Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，６６：４０１９−４０２６（１
９９４）〕。ヴィンセントら（１９９７年４月１５日に
Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙへ提
出された、「毛管電気泳動用の新規な単一異性体のキラ
ル溶解剤のファミリー、第２部：ヘプタキス−６−スル
ファト−β−シクロデキストリン）は、バケット形のシ
クロデキストリン分子の狭い末端の６−位にサルフェー
トエステル類を単独に有するサルフェート化されたβ−
ＣＤ（７ＳβＣＤ）を合成するために、モリヤら〔Ｊ．
Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３６：１６７４−１６７７（１９
３３）〕の選択的保護及び脱保護法を採用した。この合
成スキームは、キャビティーの幾何学、及び天然のβ−
シクロデキストリンの複合体形成性を保持するように設
計された。スタルカップとその協力者〔Ａ．スタルカッ
プ等、Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，６８：１３６０−１３６
８（１９９６）；Ｗ．ウー等、Ｃｈｒｏｍａｔｏｇ
ｒ．，１８：１２８９−１３１５（１９９５）〕は、未
処理の溶融シリカ毛管中での中性化合物とアミン類のラ
セミ体分離のために、シクロデキストリンサルフェート
エステル類の混合物を使用することが、調査した４０の
化合物にとって有効であったことを、最近報告した。
ｐ．，６：４３−４８（１９９４）〕とタイトら〔Ａｎ
ａｌ．Ｃｈｅｍ．，６６：４０１３−４１０１８（１９
９４）〕が最初にＣＥキラル分離のためにスルホブチル
エーテル β−シクロデキストリン（ＳＢＥ−βＣＤ）
の使用を報告した。それに続く報告書には、キラルセレ
クターとしてＳＢＥＣＤを用いるアミン類と中性化合物
の分析が記載されている〔デッテら、Ｅｌｅｃｔｒｏｐ
ｈｏｒｅｓｉｓ、１５：７９９−８０３（１９９４）；
チャンクベタッゼら、Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉ
ｓ、１５：８０４−８０７（１９９４）；ルーリーら、
Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，６６：４０１９−４０２６（１
９９４）〕。ヴィンセントら（１９９７年４月１５日に
Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙへ提
出された、「毛管電気泳動用の新規な単一異性体のキラ
ル溶解剤のファミリー、第２部：ヘプタキス−６−スル
ファト−β−シクロデキストリン）は、バケット形のシ
クロデキストリン分子の狭い末端の６−位にサルフェー
トエステル類を単独に有するサルフェート化されたβ−
ＣＤ（７ＳβＣＤ）を合成するために、モリヤら〔Ｊ．
Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，３６：１６７４−１６７７（１９
３３）〕の選択的保護及び脱保護法を採用した。この合
成スキームは、キャビティーの幾何学、及び天然のβ−
シクロデキストリンの複合体形成性を保持するように設
計された。スタルカップとその協力者〔Ａ．スタルカッ
プ等、Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，６８：１３６０−１３６
８（１９９６）；Ｗ．ウー等、Ｃｈｒｏｍａｔｏｇ
ｒ．，１８：１２８９−１３１５（１９９５）〕は、未
処理の溶融シリカ毛管中での中性化合物とアミン類のラ
セミ体分離のために、シクロデキストリンサルフェート
エステル類の混合物を使用することが、調査した４０の
化合物にとって有効であったことを、最近報告した。
【０００５】これらの勇気づける結果にもかかわらず、
ＣＥによるキラル分離を行うための普遍的なシステムが
ない。これは、ＣＥ分離が特定のシクロデキストリンと
の複合体形成の範囲に非常に依存しているためである。
ＣＤのキャビティーの大きさに加えて、溶質とＣＤのへ
り上の官能基との相互作用がキラル選択性（分離度）に
影響を与えうる。従って、特定のキラル対の分離にとっ
て最も適した特定の荷電又は中性のシクロデキストリン
の選択はなお、試行錯誤による経験的なプロセスとなっ
たままである。上述の理由のために、毛管電気泳動によ
って広い範囲のキラル化合物を分割（分析）するために
用いられる新規な一連の荷電シクロデキストリン類が必
要とされている。理想的には、新規なシクロデキストリ
ン類が簡単な手順によって合成され、そして鏡像異性体
の再現可能な分離を可能にしうる。
ＣＥによるキラル分離を行うための普遍的なシステムが
ない。これは、ＣＥ分離が特定のシクロデキストリンと
の複合体形成の範囲に非常に依存しているためである。
ＣＤのキャビティーの大きさに加えて、溶質とＣＤのへ
り上の官能基との相互作用がキラル選択性（分離度）に
影響を与えうる。従って、特定のキラル対の分離にとっ
て最も適した特定の荷電又は中性のシクロデキストリン
の選択はなお、試行錯誤による経験的なプロセスとなっ
たままである。上述の理由のために、毛管電気泳動によ
って広い範囲のキラル化合物を分割（分析）するために
用いられる新規な一連の荷電シクロデキストリン類が必
要とされている。理想的には、新規なシクロデキストリ
ン類が簡単な手順によって合成され、そして鏡像異性体
の再現可能な分離を可能にしうる。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明は、毛管電気泳動
によって広範囲のキラル化合物を分離することへの要求
を満足させる一連の荷電シクロデキストリン類に向けら
れている。好ましいキラルセレクターは、高度にスルフ
ェート化されたα−、β−及びγ−シクロデキストリン
類である。これらの荷電シクロデキストリン類は、商業
的に入手可能なシクロデキストリン類よりも高度のサル
フェート化と、もっと狭い異質性（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎ
ｅｉｔｙ）を有する。高度にサルフェート化されたシク
ロデキストリン類を用いるＣＥ分析は、他のキラルセレ
クターに比べて多種多様のキラル薬剤の分析（分割）を
改良できる。更に、高度にサルフェート化されたα−、
β−、及びγ−シクロデキストリン類は、互いに補完し
合う分離を生じさせ、広い範囲であっても中性及び塩基
性薬剤の分析を可能にする。本発明の荷電シクロデキス
トリン類は、二級ヒドロキシルの少なくとも１つの水素
原子を荷電置換基で置換した、α−シクロデキストリ
ン、β−シクロデキストリン、又はγ−シクロデキスト
リンでありうる。好ましい荷電シクロデキストリン類
は、次のような一般式を有する：
によって広範囲のキラル化合物を分離することへの要求
を満足させる一連の荷電シクロデキストリン類に向けら
れている。好ましいキラルセレクターは、高度にスルフ
ェート化されたα−、β−及びγ−シクロデキストリン
類である。これらの荷電シクロデキストリン類は、商業
的に入手可能なシクロデキストリン類よりも高度のサル
フェート化と、もっと狭い異質性（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎ
ｅｉｔｙ）を有する。高度にサルフェート化されたシク
ロデキストリン類を用いるＣＥ分析は、他のキラルセレ
クターに比べて多種多様のキラル薬剤の分析（分割）を
改良できる。更に、高度にサルフェート化されたα−、
β−、及びγ−シクロデキストリン類は、互いに補完し
合う分離を生じさせ、広い範囲であっても中性及び塩基
性薬剤の分析を可能にする。本発明の荷電シクロデキス
トリン類は、二級ヒドロキシルの少なくとも１つの水素
原子を荷電置換基で置換した、α−シクロデキストリ
ン、β−シクロデキストリン、又はγ−シクロデキスト
リンでありうる。好ましい荷電シクロデキストリン類
は、次のような一般式を有する：
【０００７】
【化２】
【０００８】ｎが６又は８であるシクロデキストリンに
関しては、少なくとも約１個のＲ1基は修飾されたヒド
ロキシルであり、かつ約ｎ個未満のＲ1基はヒドロキシ
ルである。ｎが７であるシクロデキストリンに関して
は、少なくとも約５個のＲ1基が修飾されたヒドロキシ
ルであり、かつ約３個未満のＲ1基はヒドロキシルであ
る。修飾されたヒドロキシルの水素原子は、好ましくは
サルフェート、カルボキシレート、ホスフェート、又は
四級アミン置換基によって置換される。最も好ましい置
換基はサルフェートである。好ましい高度にサルフェー
ト化されたアルファシクロデキストリン類は少なくとも
約７個のサルフェート置換基を有しており、好ましい高
度にサルフェート化されたベータシクロデキストリン類
は少なくとも約１２個のサルフェート置換基を有してお
り、そして好ましい高度にサルフェート化されたガンマ
シクロデキストリン類は少なくとも約９個のサルフェー
ト置換基を有している。
関しては、少なくとも約１個のＲ1基は修飾されたヒド
ロキシルであり、かつ約ｎ個未満のＲ1基はヒドロキシ
ルである。ｎが７であるシクロデキストリンに関して
は、少なくとも約５個のＲ1基が修飾されたヒドロキシ
ルであり、かつ約３個未満のＲ1基はヒドロキシルであ
る。修飾されたヒドロキシルの水素原子は、好ましくは
サルフェート、カルボキシレート、ホスフェート、又は
四級アミン置換基によって置換される。最も好ましい置
換基はサルフェートである。好ましい高度にサルフェー
ト化されたアルファシクロデキストリン類は少なくとも
約７個のサルフェート置換基を有しており、好ましい高
度にサルフェート化されたベータシクロデキストリン類
は少なくとも約１２個のサルフェート置換基を有してお
り、そして好ましい高度にサルフェート化されたガンマ
シクロデキストリン類は少なくとも約９個のサルフェー
ト置換基を有している。
【０００９】本発明の荷電シクロデキストリン類は、毛
管電気泳動によって小さな分子の鏡像異性体を分離する
方法において用いることができる。この方法は、下記の
諸工程を含む：ａ）毛管を、荷電シクロデキストリンと
電解質とを含む電気泳動緩衝剤で満たす工程；ｂ）キラ
ル化合物の鏡像異性体を含む試料を前記毛管に注入する
工程；ｃ）鏡像異性体の電気泳動分離を行う工程；及び
ｄ）キラル化合物の鏡像異性体を検出する工程。電気泳
動分離は、電気浸透フローを抑制する条件下で行われる
のが好ましい。例えば、被覆毛管を用いてもよいし、或
いは電気泳動緩衝剤が酸性であってもよい。試料は一般
に小さなキラル分子（ＭＷ＜５，０００）であり、これ
は好ましくは中性又は基性の化合物である。１，３，
６，８−ピレネテトラスルホン酸の塩等の内標準が、時
間に関して標準化することを可能にするために任意に試
料に添加される。本発明の試薬は、毛管電気泳動によっ
てキラル化合物を分離するのに使用するためのキットと
して便利よく一体とすることができる。このキットには
以下のａ）〜ｃ）からなる群から選ばれる少なくとも２
つの高度にサルフェート化されたシクロデキストリン類
が含まれるであろう：ａ）少なくとも約７個のサルフェ
ート置換基を有するアルファシクロデキストリン、ｂ）
少なくとも約１２個のサルフェート置換基を有するベー
タシクロデキストリン、及びｃ）少なくとも約９個のサ
ルフェート置換基を有するガンマシクロデキストリン。
更に、このキットは任意に、電気泳動緩衝剤、ｐＨ調節
剤、内標準、及び／又は毛管を含むことができる。本発
明のこれらの、及び他の特徴、様相、及び利点は、以下
の記述、添付の特許請求の範囲、及び付随した図面によ
って、より良く理解されよう。
管電気泳動によって小さな分子の鏡像異性体を分離する
方法において用いることができる。この方法は、下記の
諸工程を含む：ａ）毛管を、荷電シクロデキストリンと
電解質とを含む電気泳動緩衝剤で満たす工程；ｂ）キラ
ル化合物の鏡像異性体を含む試料を前記毛管に注入する
工程；ｃ）鏡像異性体の電気泳動分離を行う工程；及び
ｄ）キラル化合物の鏡像異性体を検出する工程。電気泳
動分離は、電気浸透フローを抑制する条件下で行われる
のが好ましい。例えば、被覆毛管を用いてもよいし、或
いは電気泳動緩衝剤が酸性であってもよい。試料は一般
に小さなキラル分子（ＭＷ＜５，０００）であり、これ
は好ましくは中性又は基性の化合物である。１，３，
６，８−ピレネテトラスルホン酸の塩等の内標準が、時
間に関して標準化することを可能にするために任意に試
料に添加される。本発明の試薬は、毛管電気泳動によっ
てキラル化合物を分離するのに使用するためのキットと
して便利よく一体とすることができる。このキットには
以下のａ）〜ｃ）からなる群から選ばれる少なくとも２
つの高度にサルフェート化されたシクロデキストリン類
が含まれるであろう：ａ）少なくとも約７個のサルフェ
ート置換基を有するアルファシクロデキストリン、ｂ）
少なくとも約１２個のサルフェート置換基を有するベー
タシクロデキストリン、及びｃ）少なくとも約９個のサ
ルフェート置換基を有するガンマシクロデキストリン。
更に、このキットは任意に、電気泳動緩衝剤、ｐＨ調節
剤、内標準、及び／又は毛管を含むことができる。本発
明のこれらの、及び他の特徴、様相、及び利点は、以下
の記述、添付の特許請求の範囲、及び付随した図面によ
って、より良く理解されよう。
【００１０】
【発明の実施の形態】ここに記載された方法や試薬に
は、中性及び塩基性の薬剤の鏡像異性体を分離するため
の簡素で一般化された手順を要する。広範囲のキラル分
子“ゲスト”に対して“ホスト”として作用する一連の
新規な荷電シクロデキストリン類が、鏡像異性体対の間
で区別するために用いられる。鏡像異性体間での区別的
な複合体形成が、電気泳動の移動度に変化を生じさせ、
毛管電気泳動中に当該鏡像異性体対の分離を起こさせ
る。ＣＤ類は、互いにα（１，４）−グリコシド結合を
介して結合したグルコース単位から構成されるオリゴ糖
の環である。６個から１２個までのグルコース単位のＣ
Ｄが単離されているけれども、６個、７個、及び８個の
単位を持ったもの、即ちそれぞれα−、β−、及びγ−
ＣＤと呼ばれるものが好ましい。このＣＤ類の形は、被
検体のホストとなることができる相対的に疎水性のキャ
ビティーをもった、先端が切り取られたトーモロコシ形
に似ている。天然のＣＤ類は、グリコピラノース分子の
２，３及び６位にヒドロキシル基ををもつ親水性の外面
領域を有する。
は、中性及び塩基性の薬剤の鏡像異性体を分離するため
の簡素で一般化された手順を要する。広範囲のキラル分
子“ゲスト”に対して“ホスト”として作用する一連の
新規な荷電シクロデキストリン類が、鏡像異性体対の間
で区別するために用いられる。鏡像異性体間での区別的
な複合体形成が、電気泳動の移動度に変化を生じさせ、
毛管電気泳動中に当該鏡像異性体対の分離を起こさせ
る。ＣＤ類は、互いにα（１，４）−グリコシド結合を
介して結合したグルコース単位から構成されるオリゴ糖
の環である。６個から１２個までのグルコース単位のＣ
Ｄが単離されているけれども、６個、７個、及び８個の
単位を持ったもの、即ちそれぞれα−、β−、及びγ−
ＣＤと呼ばれるものが好ましい。このＣＤ類の形は、被
検体のホストとなることができる相対的に疎水性のキャ
ビティーをもった、先端が切り取られたトーモロコシ形
に似ている。天然のＣＤ類は、グリコピラノース分子の
２，３及び６位にヒドロキシル基ををもつ親水性の外面
領域を有する。
【００１１】本発明のＣＤ類は、シクロデキストリン上
の各グルコース単位の６位に荷電置換基を含む修飾され
たヒドロキシルを有する。更に、２位及び／または３位
（最もありそうには２位において）の二級ヒドロキシル
少なくとも１個もまた荷電された基で置換されている。
このことは、先端を切り取ったトーモロコシの狭いほう
の開口部に荷電された基を持つことに加えて、荷電され
た基がシクロデキストリンバケットの広いほう開口部の
へりにもまた存在することを意味する。この幅の広いほ
うのへりは、被合体形成を通じて“ゲスト”分子をくる
む部分であるから、バケットの収容末端は、天然のシク
ロデキストリンのそれに対して混乱（摂動）させられて
いる。二級ヒドロキシルの変化によるバケットの混乱
は、選択的な複合体形成プロセスにとって有益であるこ
とがわかった。そして、このことは予想外にもＣＤによ
るより良いキラル差別の結果を生じる。ＨＳＣＤの好ま
しい態様の構造式は以下の通りである：
の各グルコース単位の６位に荷電置換基を含む修飾され
たヒドロキシルを有する。更に、２位及び／または３位
（最もありそうには２位において）の二級ヒドロキシル
少なくとも１個もまた荷電された基で置換されている。
このことは、先端を切り取ったトーモロコシの狭いほう
の開口部に荷電された基を持つことに加えて、荷電され
た基がシクロデキストリンバケットの広いほう開口部の
へりにもまた存在することを意味する。この幅の広いほ
うのへりは、被合体形成を通じて“ゲスト”分子をくる
む部分であるから、バケットの収容末端は、天然のシク
ロデキストリンのそれに対して混乱（摂動）させられて
いる。二級ヒドロキシルの変化によるバケットの混乱
は、選択的な複合体形成プロセスにとって有益であるこ
とがわかった。そして、このことは予想外にもＣＤによ
るより良いキラル差別の結果を生じる。ＨＳＣＤの好ま
しい態様の構造式は以下の通りである：
【００１２】
【化３】
【００１３】ｎが６又は８のシクロデキストリンに関し
ては、少なくとも約１個のＲ1基が修飾されたヒドロキ
シルであり、かつ約ｎ個未満のＲ1基がヒドロキシルで
ある。ｎが７であるシクロデキストリンに関しては、少
なくとも約５個のＲ1基が修飾されたヒドロキシルであ
り、かつ約３個未満のＲ1基がヒドロキシルである。ヒ
ドロキシル基を修飾する荷電置換基は、好ましくはマイ
ナスに荷電され、例えば、カルボキシレート、ホスフェ
ート、又はサルフェート基が挙げられる。或いは、この
置換基としてはプラスに荷電されたものでもよく、例え
ば４級アミンで荷電されたものが挙げられる。最も好ま
しい置換基は、サルフェート基である。
ては、少なくとも約１個のＲ1基が修飾されたヒドロキ
シルであり、かつ約ｎ個未満のＲ1基がヒドロキシルで
ある。ｎが７であるシクロデキストリンに関しては、少
なくとも約５個のＲ1基が修飾されたヒドロキシルであ
り、かつ約３個未満のＲ1基がヒドロキシルである。ヒ
ドロキシル基を修飾する荷電置換基は、好ましくはマイ
ナスに荷電され、例えば、カルボキシレート、ホスフェ
ート、又はサルフェート基が挙げられる。或いは、この
置換基としてはプラスに荷電されたものでもよく、例え
ば４級アミンで荷電されたものが挙げられる。最も好ま
しい置換基は、サルフェート基である。
【００１４】α−ＣＤ類に関しては、少なくとも約７個
のヒドロキシル基が置換され、そして好ましくは約１０
〜１２個が置換される。もっとも好ましいα−ＣＤはサ
ルフェート置換基で修飾された約１１個のヒドロキシル
基を有する。β−ＣＤに関しては、ＣＤの少なくとも約
１２個のヒドロキシル基が荷電置換基で修飾されてお
り、そして好ましくは約１２〜１５個が置換される。最
も好ましいβ−ＣＤはサルフェート置換基で修飾された
約１２個のヒドロキシル基を有する。γ−ＣＤ類に関し
ては、少なくとも約９個のヒドロキシル基が置換されて
おり、そして好ましくは約１２〜１６個が置換される。
最も好ましいγ−ＣＤはサルフェート置換基で修飾され
た約１３個のヒドロキシル基を有する。好ましいサルフ
ェート化されたＣＤ類の合成には、乾燥したα−、β
−、又はγ−シクロデキストリンと、１９モル当量の三
酸化硫黄−トリメチルアミン複合体（錯体）とを官能基
の何らの保護もなしに、ＤＭＦ中で反応させることが含
まれる。この反応は高度のサルフェート化に一致したシ
クロデキストリンを生成する。従って、この合成による
生成物は、高度にサルフェート化されたα−、β−、又
はγ−シクロデキストリン類（それぞれ、ＨＳαＣＤ、
ＨＳβＣＤ、又はＨＳγＣＤ）と呼ばれる。
のヒドロキシル基が置換され、そして好ましくは約１０
〜１２個が置換される。もっとも好ましいα−ＣＤはサ
ルフェート置換基で修飾された約１１個のヒドロキシル
基を有する。β−ＣＤに関しては、ＣＤの少なくとも約
１２個のヒドロキシル基が荷電置換基で修飾されてお
り、そして好ましくは約１２〜１５個が置換される。最
も好ましいβ−ＣＤはサルフェート置換基で修飾された
約１２個のヒドロキシル基を有する。γ−ＣＤ類に関し
ては、少なくとも約９個のヒドロキシル基が置換されて
おり、そして好ましくは約１２〜１６個が置換される。
最も好ましいγ−ＣＤはサルフェート置換基で修飾され
た約１３個のヒドロキシル基を有する。好ましいサルフ
ェート化されたＣＤ類の合成には、乾燥したα−、β
−、又はγ−シクロデキストリンと、１９モル当量の三
酸化硫黄−トリメチルアミン複合体（錯体）とを官能基
の何らの保護もなしに、ＤＭＦ中で反応させることが含
まれる。この反応は高度のサルフェート化に一致したシ
クロデキストリンを生成する。従って、この合成による
生成物は、高度にサルフェート化されたα−、β−、又
はγ−シクロデキストリン類（それぞれ、ＨＳαＣＤ、
ＨＳβＣＤ、又はＨＳγＣＤ）と呼ばれる。
【００１５】多種多様な被検体のいずれをも本発明に従
って評価することができる。適した被検体としては、任
意の“ゲスト”、例えば荷電ＣＤ“ホスト”と複合体
（錯体）を形成しうる、光学異性体、鏡像異性体対、ラ
セミ薬剤混合物が挙げられる。実際、荷電ＣＤ類との異
なった複合体形成平衡定数を有する任意のキラル対を、
ここに述べられているように、分析することができる。
試料は一般に、光学活性なキラル中心を有する小さな分
子（ＭＷ＜５，０００）であろう。本発明の好ましい実
施態様において、試料は、例えば本願の実施例に於いて
挙げられたもの等の薬学的化合物である。最も好ましい
試料は中性化合物、又はアミン類である。時間に関して
標準化ができるように、少なくとも１つの内部指標を試
料に添加してもよい。この指標は、鏡像異性体の相対的
移動時間を比較するためのタイム・ゼロ出発点を提供す
る分析物成分より先に移動することが好ましい。ピレネ
−１，３，６，８−テトラスルホン酸（ＰＴＳ）四ナト
リウム塩が、大部分の分離にとって信頼できる指標とし
て働きうる好ましい内標準である。酸性条件の下では、
ＰＴＳはその電気泳動の移動度にだけ主として依存する
短い移動時間をもったピークを生じる。その大きな分子
サイズとその四つのマイナス電荷により、ＰＴＳはサル
フェート化されたシクロデキストリン類と全く相互作用
を有しない。
って評価することができる。適した被検体としては、任
意の“ゲスト”、例えば荷電ＣＤ“ホスト”と複合体
（錯体）を形成しうる、光学異性体、鏡像異性体対、ラ
セミ薬剤混合物が挙げられる。実際、荷電ＣＤ類との異
なった複合体形成平衡定数を有する任意のキラル対を、
ここに述べられているように、分析することができる。
試料は一般に、光学活性なキラル中心を有する小さな分
子（ＭＷ＜５，０００）であろう。本発明の好ましい実
施態様において、試料は、例えば本願の実施例に於いて
挙げられたもの等の薬学的化合物である。最も好ましい
試料は中性化合物、又はアミン類である。時間に関して
標準化ができるように、少なくとも１つの内部指標を試
料に添加してもよい。この指標は、鏡像異性体の相対的
移動時間を比較するためのタイム・ゼロ出発点を提供す
る分析物成分より先に移動することが好ましい。ピレネ
−１，３，６，８−テトラスルホン酸（ＰＴＳ）四ナト
リウム塩が、大部分の分離にとって信頼できる指標とし
て働きうる好ましい内標準である。酸性条件の下では、
ＰＴＳはその電気泳動の移動度にだけ主として依存する
短い移動時間をもったピークを生じる。その大きな分子
サイズとその四つのマイナス電荷により、ＰＴＳはサル
フェート化されたシクロデキストリン類と全く相互作用
を有しない。
【００１６】本発明に従って、毛管電気泳動（ＣＥ）
が、キラル化合物の分離の仲立ちをつとめるように用い
られる。一般に、ＣＥは、毛管、即ち内径が約２〜２，
０００ミクロン（μｍ）の管に、試料成分を導入するこ
と、および前記毛管に電界をかけることを含む。電界の
電位は、毛管を通して分析物成分を引き離し、かつそれ
らの電気泳動の移動度に従ってそれらを分離する。本発
明のＣＥ法は、好ましくは電気浸透フロー（ＥＯＦ）を
抑制する条件下で行われる。“オープン”ＣＥフォーマ
ットを使用するときには、溶融シリカ毛管はポリマーと
ゲルを欠く電気伝導性緩衝剤で充填される。この溶融シ
リカ毛管は、約５．０よりも大きなｐＨで著しくマイナ
スに荷電されるようになり、このことが緩衝剤から陽イ
オンの層を引きつける。これらのイオンは、電位の影響
下で、陰極に向かって流れるので、緩衝液と分析される
試料は同じ方向で運ばれる。その結果として生じたＥＯ
Ｆは、中性の種とイオン性の種の両方を、荷電の有無に
かかわらず、陰極の方に押し動かす定速成分を与える。
このように、電気浸透フローを抑制しない条件下では、
試料成分の移動速度は主として基底のＥＯＦ（このもの
は試料成分の電気泳動の移動度を圧倒できる）によって
決定される。試料成分の電気泳動の移動度に主として基
づいて分離させるに十分なようにＥＯＦを抑制できる多
くの方法がある。最も簡単なアプローチは、酸性のｐＨ
を有する電気泳動緩衝剤を用いることである。従って、
本発明の好ましい緩衝剤は、約７未満のｐＨを有する。
最も好ましい緩衝剤は約１〜約５のｐＨ範囲を有し、こ
の範囲はたいていの適用においては約２．５〜４のｐＨ
で最適化される。
が、キラル化合物の分離の仲立ちをつとめるように用い
られる。一般に、ＣＥは、毛管、即ち内径が約２〜２，
０００ミクロン（μｍ）の管に、試料成分を導入するこ
と、および前記毛管に電界をかけることを含む。電界の
電位は、毛管を通して分析物成分を引き離し、かつそれ
らの電気泳動の移動度に従ってそれらを分離する。本発
明のＣＥ法は、好ましくは電気浸透フロー（ＥＯＦ）を
抑制する条件下で行われる。“オープン”ＣＥフォーマ
ットを使用するときには、溶融シリカ毛管はポリマーと
ゲルを欠く電気伝導性緩衝剤で充填される。この溶融シ
リカ毛管は、約５．０よりも大きなｐＨで著しくマイナ
スに荷電されるようになり、このことが緩衝剤から陽イ
オンの層を引きつける。これらのイオンは、電位の影響
下で、陰極に向かって流れるので、緩衝液と分析される
試料は同じ方向で運ばれる。その結果として生じたＥＯ
Ｆは、中性の種とイオン性の種の両方を、荷電の有無に
かかわらず、陰極の方に押し動かす定速成分を与える。
このように、電気浸透フローを抑制しない条件下では、
試料成分の移動速度は主として基底のＥＯＦ（このもの
は試料成分の電気泳動の移動度を圧倒できる）によって
決定される。試料成分の電気泳動の移動度に主として基
づいて分離させるに十分なようにＥＯＦを抑制できる多
くの方法がある。最も簡単なアプローチは、酸性のｐＨ
を有する電気泳動緩衝剤を用いることである。従って、
本発明の好ましい緩衝剤は、約７未満のｐＨを有する。
最も好ましい緩衝剤は約１〜約５のｐＨ範囲を有し、こ
の範囲はたいていの適用においては約２．５〜４のｐＨ
で最適化される。
【００１７】この好ましいｐＨ範囲で適当な緩衝能を有
する電解質が、電気泳動緩衝剤の成分として含有され
る。酸性ｐＨにおいて使用されるに適した電解質として
は、有機もしくは無機の、リン酸塩、酢酸塩、又はクエ
ン酸塩が挙げられる。好ましい電気泳動緩衝剤の電解質
はリン酸トリエチルアンモニウム塩である。緩衝剤中の
電解質のモル濃度は一般に約５〜２００ｍＭ、好ましく
は１０〜１００ｍＭであり、そして最も好ましくは約２
５〜５０ｍＭである。電解質のより高い濃度を有する緩
衝剤のイオン強度は望ましくないジュール熱効果を生じ
させる場合がある。ＥＯＦを抑制するための他の方法
は、被覆毛管を使用することである。毛管の表面は、緩
衝剤系に界面活性剤、双性イオン塩、又は親水性綿状ポ
リマー等の添加剤を含有させることによってダイナミッ
クに被覆することができる。しかしながら、好ましい毛
管コーティングは、毛管表面に化学的に結合した、ポリ
アクリルアミド、ポリエチレングリコール、又はジオー
ルエポキシコーティング等のポリマーであろう。最も好
ましいポリマーコーティングは、簡単にＰＶＡとして知
られるポリ（ビニルアルコール）である。
する電解質が、電気泳動緩衝剤の成分として含有され
る。酸性ｐＨにおいて使用されるに適した電解質として
は、有機もしくは無機の、リン酸塩、酢酸塩、又はクエ
ン酸塩が挙げられる。好ましい電気泳動緩衝剤の電解質
はリン酸トリエチルアンモニウム塩である。緩衝剤中の
電解質のモル濃度は一般に約５〜２００ｍＭ、好ましく
は１０〜１００ｍＭであり、そして最も好ましくは約２
５〜５０ｍＭである。電解質のより高い濃度を有する緩
衝剤のイオン強度は望ましくないジュール熱効果を生じ
させる場合がある。ＥＯＦを抑制するための他の方法
は、被覆毛管を使用することである。毛管の表面は、緩
衝剤系に界面活性剤、双性イオン塩、又は親水性綿状ポ
リマー等の添加剤を含有させることによってダイナミッ
クに被覆することができる。しかしながら、好ましい毛
管コーティングは、毛管表面に化学的に結合した、ポリ
アクリルアミド、ポリエチレングリコール、又はジオー
ルエポキシコーティング等のポリマーであろう。最も好
ましいポリマーコーティングは、簡単にＰＶＡとして知
られるポリ（ビニルアルコール）である。
【００１８】本発明を実施するのに用いられる毛管は一
般に、約１０μｍ〜約２００μｍのサイズ範囲の内径を
有する。最も好ましくは、約２５μｍの内径を有する毛
管が鏡像異性体のＣＥ分離用に使用される。毛管の好ま
しい長さは、約１０〜約１００ｃｍであり、最も好まし
くは約２７ｃｍである。検出窓は、好ましくはカラムの
出口から約６．５ｃｍの毛管中に位置する。特定の被検
体“ゲスト”とともに用いるためのα−、β−、又はγ
−シクロデキストリン“ホスト”の選択は、一般に経験
に基づく事柄である。ＣＤ誘導体を選択するための大ま
かな指針は、α−ＣＤでの分離は１つの芳香族環をもっ
た化合物に関して好ましく、β−ＣＤは置換芳香族環を
もった化合物に関して好ましく、そしてγ−ＣＤは複数
の環をもった化合物に関して好ましい。しかしながら、
図４と５に示したように、実際の結果ではこの一般的な
経験則から実質的に逸脱することがある。
般に、約１０μｍ〜約２００μｍのサイズ範囲の内径を
有する。最も好ましくは、約２５μｍの内径を有する毛
管が鏡像異性体のＣＥ分離用に使用される。毛管の好ま
しい長さは、約１０〜約１００ｃｍであり、最も好まし
くは約２７ｃｍである。検出窓は、好ましくはカラムの
出口から約６．５ｃｍの毛管中に位置する。特定の被検
体“ゲスト”とともに用いるためのα−、β−、又はγ
−シクロデキストリン“ホスト”の選択は、一般に経験
に基づく事柄である。ＣＤ誘導体を選択するための大ま
かな指針は、α−ＣＤでの分離は１つの芳香族環をもっ
た化合物に関して好ましく、β−ＣＤは置換芳香族環を
もった化合物に関して好ましく、そしてγ−ＣＤは複数
の環をもった化合物に関して好ましい。しかしながら、
図４と５に示したように、実際の結果ではこの一般的な
経験則から実質的に逸脱することがある。
【００１９】同様に、電気泳動分離中の、毛管内におけ
る荷電α−、β−、又はγ−シクロデキストリンの濃度
は、各キラル化合物に関して経験的な手法で最適化され
うる。一般に、荷電シクロデキストリンの濃度は、試料
成分に対して相対的に過剰のモル数であるべきである。
最適化のための適したＣＤ濃度範囲は、約１％〜約２０
％であり、好ましくは約２％〜約１０％の狭められた範
囲である。荷電ＣＤの最も好ましい濃度は約５％であ
る。
る荷電α−、β−、又はγ−シクロデキストリンの濃度
は、各キラル化合物に関して経験的な手法で最適化され
うる。一般に、荷電シクロデキストリンの濃度は、試料
成分に対して相対的に過剰のモル数であるべきである。
最適化のための適したＣＤ濃度範囲は、約１％〜約２０
％であり、好ましくは約２％〜約１０％の狭められた範
囲である。荷電ＣＤの最も好ましい濃度は約５％であ
る。
【００２０】ＣＤ類は好ましくは電気泳動緩衝剤に添加
され、そして毛管中に導入される。分離緩衝液は水中２
０％ＨＳＣＤ１部中、電気泳動緩衝剤（例えば５０ｍＭ
リン酸トリエチルアンモニウム塩、ｐＨ２．５）の２Ｘ
溶液２部、及び水１部を混合することによって調製する
ことができる。毛管を２０ｐｓｉの圧力で、１分間、分
離緩衝液を用いてすすぐ。試料の注入後、毛管の入口と
出口が分離緩衝液中に浸漬され、そしてそれから電圧が
かけられて電気泳動を開始する。好ましさの点では比較
的劣る代替方法として、ＣＤ類を毛管壁に結合させる方
法やＣＤ類をゲル母体に含有させる方法がある。試料
は、水中メタノール０〜５０％中に被検体を検出可能な
濃度、一般的には約０．１〜１０ｍＭ、そして好ましく
は約１ｍＭで溶解させることによって調製される。更に
ＰＴＳ等の内標準が、被検体の約半分の濃度、好ましく
は約０．５ｍＭで試料に添加されうる。試料はそれか
ら、界面動電注入、水圧、真空、又はシリンジポンプに
よって導入されうる。好ましくは、試料は、０．５〜約
１５ｐｓｉの範囲、最も好ましくは約０．５ｐｓｉの圧
力で、かつ約１〜９９秒の期間中で、最も好ましくは約
２〜５秒で、圧力注入によって毛管カラムに導入され
る。
され、そして毛管中に導入される。分離緩衝液は水中２
０％ＨＳＣＤ１部中、電気泳動緩衝剤（例えば５０ｍＭ
リン酸トリエチルアンモニウム塩、ｐＨ２．５）の２Ｘ
溶液２部、及び水１部を混合することによって調製する
ことができる。毛管を２０ｐｓｉの圧力で、１分間、分
離緩衝液を用いてすすぐ。試料の注入後、毛管の入口と
出口が分離緩衝液中に浸漬され、そしてそれから電圧が
かけられて電気泳動を開始する。好ましさの点では比較
的劣る代替方法として、ＣＤ類を毛管壁に結合させる方
法やＣＤ類をゲル母体に含有させる方法がある。試料
は、水中メタノール０〜５０％中に被検体を検出可能な
濃度、一般的には約０．１〜１０ｍＭ、そして好ましく
は約１ｍＭで溶解させることによって調製される。更に
ＰＴＳ等の内標準が、被検体の約半分の濃度、好ましく
は約０．５ｍＭで試料に添加されうる。試料はそれか
ら、界面動電注入、水圧、真空、又はシリンジポンプに
よって導入されうる。好ましくは、試料は、０．５〜約
１５ｐｓｉの範囲、最も好ましくは約０．５ｐｓｉの圧
力で、かつ約１〜９９秒の期間中で、最も好ましくは約
２〜５秒で、圧力注入によって毛管カラムに導入され
る。
【００２１】Ｐ／ＡＣＥ２０００シリーズ、Ｐ／ＡＣＥ
５０００シリーズ、又はＰ／ＡＣＥＭＤＱ毛管電気泳動
システム（ベックスマン・インスツルメンツ・インコー
ポレーテッド、フラートン、ＣＡ）。加えて、ベックマ
ン システム ゴールドTM（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｓｙｓｔ
ｅｍ ＧｏｌｄTM）ソフトウェアー、ベックマンＰ／Ａ
ＣＥTMソフトウエァー、又はＩＢＭ ＰＳ／２、ＩＢＭ
３５０ ４６６ＤＸ２もしくはＩＢＭ３５０−Ｐ９０Ｐ
Ｃによって制御されたベックマンＰ／ＡＣＥTMステーシ
ョンソフトウェアを本発明を実施する際に用いることが
できる。試料は、１ｋＶ〜約１００ｋＶ、好ましくは５
ｋＶ〜約２０ｋＶ、そして最も好ましくは約７．５ｋＶ
〜約１２ｋＶの範囲の電圧で電気泳動にかけられる。検
出は好ましくはＵＶ吸収によって、好ましくは、試料成
分と内標準を検出するが荷電ＣＤは検出しない波長で行
われる。検出のための好ましい波長は、約１８０ｎｍ〜
約３８０ｎｍの範囲であり、最も好ましい検出波長は約
２１４ｎｍである。
５０００シリーズ、又はＰ／ＡＣＥＭＤＱ毛管電気泳動
システム（ベックスマン・インスツルメンツ・インコー
ポレーテッド、フラートン、ＣＡ）。加えて、ベックマ
ン システム ゴールドTM（Ｂｅｃｋｍａｎ Ｓｙｓｔ
ｅｍ ＧｏｌｄTM）ソフトウェアー、ベックマンＰ／Ａ
ＣＥTMソフトウエァー、又はＩＢＭ ＰＳ／２、ＩＢＭ
３５０ ４６６ＤＸ２もしくはＩＢＭ３５０−Ｐ９０Ｐ
Ｃによって制御されたベックマンＰ／ＡＣＥTMステーシ
ョンソフトウェアを本発明を実施する際に用いることが
できる。試料は、１ｋＶ〜約１００ｋＶ、好ましくは５
ｋＶ〜約２０ｋＶ、そして最も好ましくは約７．５ｋＶ
〜約１２ｋＶの範囲の電圧で電気泳動にかけられる。検
出は好ましくはＵＶ吸収によって、好ましくは、試料成
分と内標準を検出するが荷電ＣＤは検出しない波長で行
われる。検出のための好ましい波長は、約１８０ｎｍ〜
約３８０ｎｍの範囲であり、最も好ましい検出波長は約
２１４ｎｍである。
【００２２】ＣＥが、電気浸透フローを抑制する条件
下、例えば酸性ｐＨで行われるとき、ＣＥは検出窓口の
最も近くに置かれた陽極とともに、反対の極性を用いて
好ましく行われる。これらの条件下で、被検体は陽極の
方に移動するマイナスに荷電されたシクロデキストリン
との複合体形成によって陽極に引っぱられる。しかしな
がら、より速く移動する大きな（メジャー）ピークの末
尾が小さな（マイナー）ピークをおおい隠すならば、ピ
ークの移動順序を逆にすることが望ましいことがある。
一般に、好ましい分離条件は、小さな汚染物質が主成分
に向かって移動する条件である。移動順序の逆転は、緩
衝剤のｐＨを約７より大きく、好ましくは約ｐＨ８に緩
衝剤のｐＨを上げることによって、しかも陰極が検出窓
口に最も近くなるように極性を変えることによって達成
することができる。そのような条件下では、ＥＯＦは、
遊離の、被検体を結合した荷電シクロデキストリン類を
含めて全化合物を陰極へ運び去るのに十分強い。
下、例えば酸性ｐＨで行われるとき、ＣＥは検出窓口の
最も近くに置かれた陽極とともに、反対の極性を用いて
好ましく行われる。これらの条件下で、被検体は陽極の
方に移動するマイナスに荷電されたシクロデキストリン
との複合体形成によって陽極に引っぱられる。しかしな
がら、より速く移動する大きな（メジャー）ピークの末
尾が小さな（マイナー）ピークをおおい隠すならば、ピ
ークの移動順序を逆にすることが望ましいことがある。
一般に、好ましい分離条件は、小さな汚染物質が主成分
に向かって移動する条件である。移動順序の逆転は、緩
衝剤のｐＨを約７より大きく、好ましくは約ｐＨ８に緩
衝剤のｐＨを上げることによって、しかも陰極が検出窓
口に最も近くなるように極性を変えることによって達成
することができる。そのような条件下では、ＥＯＦは、
遊離の、被検体を結合した荷電シクロデキストリン類を
含めて全化合物を陰極へ運び去るのに十分強い。
【００２３】ＣＥによるキラル分析を最適化するための
系統的な機構を促進するために、本発明の試薬を便利よ
く一体化してキットとすることができる。最適なシクロ
デキストリン“ホスト”を選択するのを助けるために、
キットには以下のａ）〜ｃ）からなる群から選ばれた少
なくとも二つの高度にサルフェート化されたシクロデキ
ストリン類が含められるであろう：ａ）少なくとも約７
個のサルフェート置換基を有するアルファシクロデキス
トリン；ｂ）少なくとも約１２個のサルフェート置換基
を有するベータシクロデキストリン；及びｃ）少なくと
も約９個のサルフェート置換基を有するガンマシクロデ
キストリン。更に、キットは、少なくとも一つの電気泳
動緩衝剤を、好ましくは酸性のｐＨで任意に含んでもよ
い。しかしながら、もっと高いｐＨで用いるための別の
緩衝剤を、ＮａＯＨ又はリン酸等のｐＨ調節剤に加えて
含有してもよい。緩衝剤の組成及び／又はｐＨを変える
ことで、分析（分割）性能を改良したり及び／又は分析
を受けているキラル対の移動順序を逆転させることがで
きる。キットヘの更なる添加物としては、ＰＴＳ等の内
部標準、被覆もしくは未被覆毛管が挙げられる。
系統的な機構を促進するために、本発明の試薬を便利よ
く一体化してキットとすることができる。最適なシクロ
デキストリン“ホスト”を選択するのを助けるために、
キットには以下のａ）〜ｃ）からなる群から選ばれた少
なくとも二つの高度にサルフェート化されたシクロデキ
ストリン類が含められるであろう：ａ）少なくとも約７
個のサルフェート置換基を有するアルファシクロデキス
トリン；ｂ）少なくとも約１２個のサルフェート置換基
を有するベータシクロデキストリン；及びｃ）少なくと
も約９個のサルフェート置換基を有するガンマシクロデ
キストリン。更に、キットは、少なくとも一つの電気泳
動緩衝剤を、好ましくは酸性のｐＨで任意に含んでもよ
い。しかしながら、もっと高いｐＨで用いるための別の
緩衝剤を、ＮａＯＨ又はリン酸等のｐＨ調節剤に加えて
含有してもよい。緩衝剤の組成及び／又はｐＨを変える
ことで、分析（分割）性能を改良したり及び／又は分析
を受けているキラル対の移動順序を逆転させることがで
きる。キットヘの更なる添加物としては、ＰＴＳ等の内
部標準、被覆もしくは未被覆毛管が挙げられる。
【００２４】本発明のこれまでに述べた態様には多くの
利点、例えば合成の簡単なワン・ステップ法、多種多様
な光学異性体の再現性のよい分離、並びに数多くの中性
及び塩基性キラル化合物の改善された分割分析等があ
る。この方法は費用が安く、しかも作業を最適化するた
めに多数の異なった固定相カラムを必要とするＨＰＬＣ
を使用するキラル分析法に比べて万能である。本発明の
試薬、方法、及びキットは、薬剤、食物栄養物、環境汚
染物質、殺虫剤、又はそれ以外のラセミ体混合物の立体
化学的純度を監視するための品質管理システムに容易に
適合させることができる。
利点、例えば合成の簡単なワン・ステップ法、多種多様
な光学異性体の再現性のよい分離、並びに数多くの中性
及び塩基性キラル化合物の改善された分割分析等があ
る。この方法は費用が安く、しかも作業を最適化するた
めに多数の異なった固定相カラムを必要とするＨＰＬＣ
を使用するキラル分析法に比べて万能である。本発明の
試薬、方法、及びキットは、薬剤、食物栄養物、環境汚
染物質、殺虫剤、又はそれ以外のラセミ体混合物の立体
化学的純度を監視するための品質管理システムに容易に
適合させることができる。
【００２５】
【実施例】本発明の材料や方法は、以下の例を参照する
ことでより良く理解されよう。
ことでより良く理解されよう。
【００２６】例１ ＨＳＣＤ類の合成 この最初の一連の例は、結果として得られる生成物の一
貫して高度のサルフェート化のみならず、サルフェート
化された、α−、β−、又はγ−シクロデキストリン類
を合成するために使用されうる簡単かつ単一工程法を説
明している。高度にサルフェート化したα−シクロデキ
ストリンの合成は、機械的な攪拌器を装備し、乾燥した
２リットル反応器に、オーブンで乾燥したα−シクロデ
キストリン１００ｇ（１０２．８ｍｍｏｌ）と無水ジメ
チルホルムアミド（ＤＭＦ）９００ｍｌを添加すること
で行った。この容器をオイルバス中で５０℃で撹絆しな
がら加熱して大部分の固体を溶解した。３００ｍｌのＤ
ＭＦ中での三酸化硫黄トリメチルアミン複合体（２７２
ｇ、１９５３ｍｍｏｌ）の部分溶解混合物を、反応器に
ゆっくりと注ぎ、５０℃で激しく攪拌した。ガム状の生
成物が３５分後に形成され、そし攪拌を中断した。室温
に冷却した後、溶媒をデカンテーションによって除去
し、ガム状の生成物を３００ｍｌの試薬アルコールで２
回洗浄し、そして溶媒を再びデカンテーションによって
除去した。同様に、高度にサルフェート化されたβ−シ
クロデキストリンの合成を、機械的な攪拌器を装備し、
乾燥された２リットル反応器に、オーブン乾燥したβ−
シクロデキストリン１００ｇ（８８．１ｍｍｏｌ）と５
００ｍｌの無水ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を添加
することによって行った。この容器をオイル浴中で５０
℃で攪拌しながら加熱し、固体の大部分を溶解した。３
００ｍｌのＤＭＦ中での三酸化硫黄トリメチルアミン複
合体（２４０ｇ、１７２４ｍｌ）の部分溶解混合物を、
この反応器にゆっくりと注ぎ、５０℃で１時間、激しく
攪拌した。ガム状の生成物が形成され、そして攪拌が中
断された。溶媒を熱いうちにデカンテーションによって
除去し、このガム状の生成物を３００ｍｌの試薬アルコ
ールで２回洗浄し、そして溶媒を再びデカンテーション
によって除去した。
貫して高度のサルフェート化のみならず、サルフェート
化された、α−、β−、又はγ−シクロデキストリン類
を合成するために使用されうる簡単かつ単一工程法を説
明している。高度にサルフェート化したα−シクロデキ
ストリンの合成は、機械的な攪拌器を装備し、乾燥した
２リットル反応器に、オーブンで乾燥したα−シクロデ
キストリン１００ｇ（１０２．８ｍｍｏｌ）と無水ジメ
チルホルムアミド（ＤＭＦ）９００ｍｌを添加すること
で行った。この容器をオイルバス中で５０℃で撹絆しな
がら加熱して大部分の固体を溶解した。３００ｍｌのＤ
ＭＦ中での三酸化硫黄トリメチルアミン複合体（２７２
ｇ、１９５３ｍｍｏｌ）の部分溶解混合物を、反応器に
ゆっくりと注ぎ、５０℃で激しく攪拌した。ガム状の生
成物が３５分後に形成され、そし攪拌を中断した。室温
に冷却した後、溶媒をデカンテーションによって除去
し、ガム状の生成物を３００ｍｌの試薬アルコールで２
回洗浄し、そして溶媒を再びデカンテーションによって
除去した。同様に、高度にサルフェート化されたβ−シ
クロデキストリンの合成を、機械的な攪拌器を装備し、
乾燥された２リットル反応器に、オーブン乾燥したβ−
シクロデキストリン１００ｇ（８８．１ｍｍｏｌ）と５
００ｍｌの無水ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）を添加
することによって行った。この容器をオイル浴中で５０
℃で攪拌しながら加熱し、固体の大部分を溶解した。３
００ｍｌのＤＭＦ中での三酸化硫黄トリメチルアミン複
合体（２４０ｇ、１７２４ｍｌ）の部分溶解混合物を、
この反応器にゆっくりと注ぎ、５０℃で１時間、激しく
攪拌した。ガム状の生成物が形成され、そして攪拌が中
断された。溶媒を熱いうちにデカンテーションによって
除去し、このガム状の生成物を３００ｍｌの試薬アルコ
ールで２回洗浄し、そして溶媒を再びデカンテーション
によって除去した。
【００２７】高度にスルフェート化されたγ−シクロデ
キストリンを製造するための類似した合成スキームを、
機械的な攪拌器を装備し、乾燥された２リットル反応器
に、オーブン乾燥したγ−シクロデキストリン１００ｇ
（７７．１ｍｍｏｌ）と９００ｍｌの無水ジメチルホル
ムアミド（ＤＭＦ）を添加することによって行った。こ
の容器をオイル浴中で５０℃で攪拌しながら加熱し、固
体の大部分を溶解した。３００ｍｌのＤＭＦ中での三酸
化硫黄トリメチルアミン複合体（２０４ｇ、１４６０ｍ
ｍｏｌ）の部分溶解混合物をこの反応器にゆっくりと注
ぎ、５０℃で激しく攪拌した。ガム状の生成物が３５分
後に形成され、そして攪拌が中断された。室温に冷却し
た後、溶媒をデカンテーションによって除去し、ガム状
の生成物を３００ｍｌの試薬アルコールで２回洗浄して
から、再び溶媒をデカンテーションによって除去した。
上述の合成スキームから、このガム状の生成物を３７５
ｍｌの４Ｎ水酸化ナトリウムに溶解し、そして攪拌し
た。この溶液を約１０のｐＨに維持し、２リットルの丸
底フラスコに移して、それから回転蒸発して減圧下で少
量の水とともにトリメチルアミンを除去した。それか
ら、このフラスコを一晩中、冷室に置いた。残りの溶液
（約６００ｍｌ）から析出した固体をろ過によって集め
た。約８００ｍｌのアセトンをろ液の各々に添加し、そ
してこの各々が軟らかなガムを形成した。この混合物を
１０分間、激しく攪拌し、それからアセトンをデカンテ
ーションによって除去した。次いで、別に８００ｍｌの
アセトンを添加し、１０分間攪拌してからデカンテーシ
ョンによって除去した。このガム状の生成物を各々、５
００ｍｌの脱イオン水に溶解し、この溶液を激しく攪拌
しながら２リットルのメタノール中にゆっくりと注い
だ。この結果生成した灰色がかった白色固体をろ過によ
って集め、３００ｍｌのメタノールで３回洗浄し、一
晩、高真空下１１０℃で乾燥した。
キストリンを製造するための類似した合成スキームを、
機械的な攪拌器を装備し、乾燥された２リットル反応器
に、オーブン乾燥したγ−シクロデキストリン１００ｇ
（７７．１ｍｍｏｌ）と９００ｍｌの無水ジメチルホル
ムアミド（ＤＭＦ）を添加することによって行った。こ
の容器をオイル浴中で５０℃で攪拌しながら加熱し、固
体の大部分を溶解した。３００ｍｌのＤＭＦ中での三酸
化硫黄トリメチルアミン複合体（２０４ｇ、１４６０ｍ
ｍｏｌ）の部分溶解混合物をこの反応器にゆっくりと注
ぎ、５０℃で激しく攪拌した。ガム状の生成物が３５分
後に形成され、そして攪拌が中断された。室温に冷却し
た後、溶媒をデカンテーションによって除去し、ガム状
の生成物を３００ｍｌの試薬アルコールで２回洗浄して
から、再び溶媒をデカンテーションによって除去した。
上述の合成スキームから、このガム状の生成物を３７５
ｍｌの４Ｎ水酸化ナトリウムに溶解し、そして攪拌し
た。この溶液を約１０のｐＨに維持し、２リットルの丸
底フラスコに移して、それから回転蒸発して減圧下で少
量の水とともにトリメチルアミンを除去した。それか
ら、このフラスコを一晩中、冷室に置いた。残りの溶液
（約６００ｍｌ）から析出した固体をろ過によって集め
た。約８００ｍｌのアセトンをろ液の各々に添加し、そ
してこの各々が軟らかなガムを形成した。この混合物を
１０分間、激しく攪拌し、それからアセトンをデカンテ
ーションによって除去した。次いで、別に８００ｍｌの
アセトンを添加し、１０分間攪拌してからデカンテーシ
ョンによって除去した。このガム状の生成物を各々、５
００ｍｌの脱イオン水に溶解し、この溶液を激しく攪拌
しながら２リットルのメタノール中にゆっくりと注い
だ。この結果生成した灰色がかった白色固体をろ過によ
って集め、３００ｍｌのメタノールで３回洗浄し、一
晩、高真空下１１０℃で乾燥した。
【００２８】水に再懸濁されたときには、全種のＨＳＣ
Ｄの溶液は、三酸化硫黄−トリメチルアミン複合体に由
来する不純物により明るい茶褐色を呈している。この溶
液は、脱色化する活性炭（アルドリッチＣａｔ．Ｎｏ．
１６，１５５−１）で処理することによって容易に脱色
され、そしてそれから遠心分離と０．４５μｍの注射器
型フィルターを通してのろ過によって浄化した。４つの
異なったロットのＨＳβＣＤ、１ロットのＨＳαＣＤ、
及び１ロットのＨＳγＣＤが元素分析にかけられ、ヴイ
ンセント等によって採用されたモリヤ等の方法によって
合成された多数の７ＳβＣＤと比較された。サルフェー
ト化の程度を表１にまとめて示したように、各ロットに
関して測定した。
Ｄの溶液は、三酸化硫黄−トリメチルアミン複合体に由
来する不純物により明るい茶褐色を呈している。この溶
液は、脱色化する活性炭（アルドリッチＣａｔ．Ｎｏ．
１６，１５５−１）で処理することによって容易に脱色
され、そしてそれから遠心分離と０．４５μｍの注射器
型フィルターを通してのろ過によって浄化した。４つの
異なったロットのＨＳβＣＤ、１ロットのＨＳαＣＤ、
及び１ロットのＨＳγＣＤが元素分析にかけられ、ヴイ
ンセント等によって採用されたモリヤ等の方法によって
合成された多数の７ＳβＣＤと比較された。サルフェー
ト化の程度を表１にまとめて示したように、各ロットに
関して測定した。
【００２９】
【表１】
【００３０】表１に示したように、本発明のＨＳＣＤ類
を製造するのに用いられる合成手順では、平均値でグル
コース１分子当り、少なくとも約ｌ．６個のサルフェー
ト分子という高度のサルフェート化（＞１１）が一貫し
て達成された。
を製造するのに用いられる合成手順では、平均値でグル
コース１分子当り、少なくとも約ｌ．６個のサルフェー
ト分子という高度のサルフェート化（＞１１）が一貫し
て達成された。
【００３１】例２ 間接ＵＶ検出によるサルフェート化されたβ−ＣＤ類の
特徴づけ この例は、本発明のＨＳＣＤ類がヴィンセント等のサル
フェート化されたＣＤよりも、もっと高度にサルフェー
ト化され、しかも商業的に入手できる数種のサルフェー
ト化されたＣＤ類よりも異成分がより少ないことを示し
ている。シクロデキストリン１つ当り平均値で４のサル
フェート化度をもったスルホブチルエーテルβ−シクロ
デキストリン類（ＳＢＥ−βＣＤ）がパーキンエルマー
／ＡＢＩ（フォスター市、ＣＡ）から購入された。更
に、サルフェート化されたβ−ＣＤ類（サルフェート化
度（平均値）＝４）の混合物をセレスター（ハモンド、
インディアナ）から供給を受け、またβ−ＣＤ１つ当り
７〜１０のサルフェート化度（平均値）を有するサルフ
ェート化されたシクロデキストリンをアルドリッチ（ミ
ルウォーキー、ウィスコンシン）から入手した。これら
の商業的に入手できる荷電ＣＤ類を、ヴィンセント等の
６−シクロデキストリンのＣ−６サルフェートエステル
（７ＳβＣＤ、ｂ−ＣＤ当り７のサルフェート基）や、
例１に従って合成されたα−、β−、及びγ−ＨＳＣＤ
類と比較した。
特徴づけ この例は、本発明のＨＳＣＤ類がヴィンセント等のサル
フェート化されたＣＤよりも、もっと高度にサルフェー
ト化され、しかも商業的に入手できる数種のサルフェー
ト化されたＣＤ類よりも異成分がより少ないことを示し
ている。シクロデキストリン１つ当り平均値で４のサル
フェート化度をもったスルホブチルエーテルβ−シクロ
デキストリン類（ＳＢＥ−βＣＤ）がパーキンエルマー
／ＡＢＩ（フォスター市、ＣＡ）から購入された。更
に、サルフェート化されたβ−ＣＤ類（サルフェート化
度（平均値）＝４）の混合物をセレスター（ハモンド、
インディアナ）から供給を受け、またβ−ＣＤ１つ当り
７〜１０のサルフェート化度（平均値）を有するサルフ
ェート化されたシクロデキストリンをアルドリッチ（ミ
ルウォーキー、ウィスコンシン）から入手した。これら
の商業的に入手できる荷電ＣＤ類を、ヴィンセント等の
６−シクロデキストリンのＣ−６サルフェートエステル
（７ＳβＣＤ、ｂ−ＣＤ当り７のサルフェート基）や、
例１に従って合成されたα−、β−、及びγ−ＨＳＣＤ
類と比較した。
【００３２】間接ＵＶ検出によるＣＥ分析が、ベックマ
ン・インスツルメンツ・インコーポレーテッドから入手
した５０μm×２７ｃｍのＰＶＡで共有結合的に被覆さ
れた毛管を用い、２５４ｎｍで検出するＵＶ検出器（Ｐ
／Ｎ ２２３２１１１）を装備した、ベックマン・イン
スツルメンツ・インコーポレーテッド（フラートン、Ｃ
Ａ）によるＰ／ＡＣＥ ５０００ ＣＥシステムにおい
て遂行された。分離緩衝剤は、ＴｒｉｓでｐＨ８．０に
調節された４０ｍＭのｐ−トルエンスルホン酸（ＴＳ
Ａ）から構成された。この方法では、非吸収性のスルフ
ェート化されたシクロデキストリン類が、陽極に電気泳
動的に移動するイオン性の発色団、ＴＳＡにとって替
り、より近いＵＶ吸収帯をつくる。その結果、アニオン
性の被検体が、それらが検出器を通過するときにネガテ
ィブな吸収の信号を生ずる。そのピークは直接ＵＶ吸収
検出で得られたものよりも広く、これは恐らく、サルフ
ェート化されたシクロデキストリン被検体とＴＳＡをバ
ックグラウンドとする発色団との間の移動度の不完全な
適合によるのであろう。
ン・インスツルメンツ・インコーポレーテッドから入手
した５０μm×２７ｃｍのＰＶＡで共有結合的に被覆さ
れた毛管を用い、２５４ｎｍで検出するＵＶ検出器（Ｐ
／Ｎ ２２３２１１１）を装備した、ベックマン・イン
スツルメンツ・インコーポレーテッド（フラートン、Ｃ
Ａ）によるＰ／ＡＣＥ ５０００ ＣＥシステムにおい
て遂行された。分離緩衝剤は、ＴｒｉｓでｐＨ８．０に
調節された４０ｍＭのｐ−トルエンスルホン酸（ＴＳ
Ａ）から構成された。この方法では、非吸収性のスルフ
ェート化されたシクロデキストリン類が、陽極に電気泳
動的に移動するイオン性の発色団、ＴＳＡにとって替
り、より近いＵＶ吸収帯をつくる。その結果、アニオン
性の被検体が、それらが検出器を通過するときにネガテ
ィブな吸収の信号を生ずる。そのピークは直接ＵＶ吸収
検出で得られたものよりも広く、これは恐らく、サルフ
ェート化されたシクロデキストリン被検体とＴＳＡをバ
ックグラウンドとする発色団との間の移動度の不完全な
適合によるのであろう。
【００３３】ＨＳαＣＤ、ＨＳβＣＤ、及びＨＳγＣＤ
についての得られた電気泳動図を、それぞれ図１、２、
及び３に示す。このα−、β−及びγ−ＨＳＣＤ類の全
てが７ＳβＣＤよりも短い移動時間をもったピークを生
じるが、このことはサルフェート化の度合いが各ＨＳＣ
Ｄの７よりも高いことを示唆している。ＨＳＣＤと７Ｓ
βＣＤの混合物が２つの明確に区別されるピークを生じ
るという事実は、べックマンＨＳＣＤ類は、完全にラン
ダムにサルフェート化されたスピーシーズのグロスな混
合物ではないことを暗示している。更には、仮にこの混
合物が８、９、又は１０個のサルフェート基をもつＨＳ
ＣＤ分子を含むとしたら、予期される電気泳動図はＨＳ
ＣＤと７ＳβＣＤの各ピークの間に明確な分離を示すこ
とはないであろう。したがって、これらの結果は、ＨＳ
ＣＤ類のサルフェート化の平均の度合が１０より大きい
ことを確証している。ＨＳＣＤ類のピークが７ＳβＣＤ
のピークよりもずっと広くはないという事実は、ＨＳＣ
Ｄ類の分子の不均一性（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ）
が広くないことを示唆している。比較として、ＳＢＥ−
βＣＤ、セレスターのサルフェートシクロデキストリ
ン、及びアルドリツチのサルフェート化されたβ−ＣＤ
の電気泳動図（図４）は、幾つかのはっきりと区別され
るピークからなり、もっとずっと複雑である。比較によ
って、このＨＳＣＤは、商業的に入手できる他のサルフ
ェート化されたシクロデキストリン類に比べて、サルフ
ェート化の度合がより高く、かつ不均一性がより狭いシ
クロデキストリン類の混合物である。
についての得られた電気泳動図を、それぞれ図１、２、
及び３に示す。このα−、β−及びγ−ＨＳＣＤ類の全
てが７ＳβＣＤよりも短い移動時間をもったピークを生
じるが、このことはサルフェート化の度合いが各ＨＳＣ
Ｄの７よりも高いことを示唆している。ＨＳＣＤと７Ｓ
βＣＤの混合物が２つの明確に区別されるピークを生じ
るという事実は、べックマンＨＳＣＤ類は、完全にラン
ダムにサルフェート化されたスピーシーズのグロスな混
合物ではないことを暗示している。更には、仮にこの混
合物が８、９、又は１０個のサルフェート基をもつＨＳ
ＣＤ分子を含むとしたら、予期される電気泳動図はＨＳ
ＣＤと７ＳβＣＤの各ピークの間に明確な分離を示すこ
とはないであろう。したがって、これらの結果は、ＨＳ
ＣＤ類のサルフェート化の平均の度合が１０より大きい
ことを確証している。ＨＳＣＤ類のピークが７ＳβＣＤ
のピークよりもずっと広くはないという事実は、ＨＳＣ
Ｄ類の分子の不均一性（ｈｅｔｅｒｏｇｅｎｅｉｔｙ）
が広くないことを示唆している。比較として、ＳＢＥ−
βＣＤ、セレスターのサルフェートシクロデキストリ
ン、及びアルドリツチのサルフェート化されたβ−ＣＤ
の電気泳動図（図４）は、幾つかのはっきりと区別され
るピークからなり、もっとずっと複雑である。比較によ
って、このＨＳＣＤは、商業的に入手できる他のサルフ
ェート化されたシクロデキストリン類に比べて、サルフ
ェート化の度合がより高く、かつ不均一性がより狭いシ
クロデキストリン類の混合物である。
【００３４】例３ 高度にサルフェート化されたβ−シクロデキストリン
（ＨＳβＣＤ）を用いるキラル分離 ＣＥのためのキラルセレクターの選択において最も重要
な因子は、最も多種多様な被検体を分割分析する能力で
ある。従って、我々は、ＨＳβＣＤを用いた中性及び塩
基性薬剤のエナンチオマー分離が、ＡＢＩからのＳＢＥ
ＣＤ（β−ＣＤ当り平均４個のスルホブチルエーテル
基）、セレスターからのサルフェート化されたβ−ＣＤ
類（β−ＣＤ当り可変数のサルフェート基）、及びヴィ
ンセント等のβ−シクロデキストリンのＣ−６サルフェ
ートエステル（７ＳβＣＤ、β−ＣＤ当り７個のサルフ
ェート基）を用いたキラル分離に好適にも匹敵すること
を立証するための比較研究を行った。
（ＨＳβＣＤ）を用いるキラル分離 ＣＥのためのキラルセレクターの選択において最も重要
な因子は、最も多種多様な被検体を分割分析する能力で
ある。従って、我々は、ＨＳβＣＤを用いた中性及び塩
基性薬剤のエナンチオマー分離が、ＡＢＩからのＳＢＥ
ＣＤ（β−ＣＤ当り平均４個のスルホブチルエーテル
基）、セレスターからのサルフェート化されたβ−ＣＤ
類（β−ＣＤ当り可変数のサルフェート基）、及びヴィ
ンセント等のβ−シクロデキストリンのＣ−６サルフェ
ートエステル（７ＳβＣＤ、β−ＣＤ当り７個のサルフ
ェート基）を用いたキラル分離に好適にも匹敵すること
を立証するための比較研究を行った。
【００３５】ホスフェート緩衝剤は、リン酸を、トリエ
チルアミン又はＮａＯＨ溶液等の対応する塩基で滴定す
ることで調製した。サルフェート化されたβ−ＣＤを、
２５ｍＭのリン酸トリエチルアンモニウム中でｐＨ２．
５で溶解した。サルフェート含量の不正確な性格によ
り、サルフェート化されたβ−ＣＤ類の濃度は、体積当
りの重量の基準で表現した。アミノベースのラセミ体は
水に溶解されたけれども、中性のラセミ体の試料は水中
５０％のメタノールに溶解された。毛管に注入された全
試料は、１ｍＭのラセミ体混合物と、内標準として０．
５ｍＭの１，３，６，８−ピレネテトラスルホン酸ナト
リウム塩（ＰＴＳ）を含有した。ＰＴＳは、その４つの
マイナス電荷のために、混合物中の任意の化合物に向か
って移動した。中性化合物やアミン類の多数のラセミ体
が、実質上同じ分離条件の下で毛管電気泳動にかけられ
た。分離は、２５μｍ×２７ｃｍの未処理の溶融シリカ
毛管を用いる、２１４ｎｍでのＵＶ検出器を装備した、
ベックマン・インスツルメンツ・インコーポレーテッド
（フラートン、ＣＡ）によるＰ／ＡＣＥ ５０００ Ｃ
Ｅシステム上で遂行された。サルフェート化されたシク
ロデキストリン類の濃度が変えられた（表２Ａと２Ｂ参
照）。電気泳動が、逆極性の条件下、１０又は１２ｋＶ
適用電圧で行われた。その結果を表２Ａと２Ｂにまとめ
て示す。カッコ内に示されたパーセントの値は、最適の
分離を生じさせた分離緩衝剤中のサルフェート化された
シクロデキストリンの濃度を示している。
チルアミン又はＮａＯＨ溶液等の対応する塩基で滴定す
ることで調製した。サルフェート化されたβ−ＣＤを、
２５ｍＭのリン酸トリエチルアンモニウム中でｐＨ２．
５で溶解した。サルフェート含量の不正確な性格によ
り、サルフェート化されたβ−ＣＤ類の濃度は、体積当
りの重量の基準で表現した。アミノベースのラセミ体は
水に溶解されたけれども、中性のラセミ体の試料は水中
５０％のメタノールに溶解された。毛管に注入された全
試料は、１ｍＭのラセミ体混合物と、内標準として０．
５ｍＭの１，３，６，８−ピレネテトラスルホン酸ナト
リウム塩（ＰＴＳ）を含有した。ＰＴＳは、その４つの
マイナス電荷のために、混合物中の任意の化合物に向か
って移動した。中性化合物やアミン類の多数のラセミ体
が、実質上同じ分離条件の下で毛管電気泳動にかけられ
た。分離は、２５μｍ×２７ｃｍの未処理の溶融シリカ
毛管を用いる、２１４ｎｍでのＵＶ検出器を装備した、
ベックマン・インスツルメンツ・インコーポレーテッド
（フラートン、ＣＡ）によるＰ／ＡＣＥ ５０００ Ｃ
Ｅシステム上で遂行された。サルフェート化されたシク
ロデキストリン類の濃度が変えられた（表２Ａと２Ｂ参
照）。電気泳動が、逆極性の条件下、１０又は１２ｋＶ
適用電圧で行われた。その結果を表２Ａと２Ｂにまとめ
て示す。カッコ内に示されたパーセントの値は、最適の
分離を生じさせた分離緩衝剤中のサルフェート化された
シクロデキストリンの濃度を示している。
【００３６】
【表２】
【００３７】
【表３】
【００３８】試験された中性化合物の内の７つ及びアミ
ン類の全ては、公知の薬剤である。分析されたアミン類
の２つ、フルオキセチン及びヴェラパミルは市販されて
いる薬剤（それぞれＰｒｏｚａｃ（登録商標）及びＶｅ
ｒｅｌａｎ(登録商標)）のカプセルから入手した。表２
Ａと２Ｂの結果は、ピーク中心間の差△×と４σ、ピー
クの２つの標準偏差の平均値の指標として定義される、
複数のピークの分割（分割能）Ｒを示している。これら
の結果は、簡単な１工程合成において調製されたＨＳβ
ＣＤは、１８個の中性ラセミ体及び１１個のアミン鏡像
異性体対に関して良好な分解能（＞１）を与えたことを
示している。ラセミ体の幾つか（グルテチミド、ロラゼ
パム、プラズィクワンテル、ヒドロベンゾイン、α−シ
クロプロピルベンジルアルコール及び１，１′−ビ−２
−ナフトール）は、ＨＳβＣＤを用いて著しく大きな分
解能の値（＞７）を生じた。これと比べて、７ＳβＣＤ
は、もっとずっと少数のキラル対（８個の中性化合物、
及び８個のアミン類）に関して適当な分離を生じた。
ン類の全ては、公知の薬剤である。分析されたアミン類
の２つ、フルオキセチン及びヴェラパミルは市販されて
いる薬剤（それぞれＰｒｏｚａｃ（登録商標）及びＶｅ
ｒｅｌａｎ(登録商標)）のカプセルから入手した。表２
Ａと２Ｂの結果は、ピーク中心間の差△×と４σ、ピー
クの２つの標準偏差の平均値の指標として定義される、
複数のピークの分割（分割能）Ｒを示している。これら
の結果は、簡単な１工程合成において調製されたＨＳβ
ＣＤは、１８個の中性ラセミ体及び１１個のアミン鏡像
異性体対に関して良好な分解能（＞１）を与えたことを
示している。ラセミ体の幾つか（グルテチミド、ロラゼ
パム、プラズィクワンテル、ヒドロベンゾイン、α−シ
クロプロピルベンジルアルコール及び１，１′−ビ−２
−ナフトール）は、ＨＳβＣＤを用いて著しく大きな分
解能の値（＞７）を生じた。これと比べて、７ＳβＣＤ
は、もっとずっと少数のキラル対（８個の中性化合物、
及び８個のアミン類）に関して適当な分離を生じた。
【００３９】ＨＳβＣＤを用いるときの中性ラセミ体の
電気泳動図からの１つの観察結果は、移動時間は一般に
７ＳβＣＤ分離に関して対応する時間よりもっと遅かっ
たということであった。このことは、７ＳβＣＤと中性
化合物の大部分との間の複合体形成平衡定数は、ＨＳβ
ＣＤの対応する値よりも高いことを示唆している。この
高い親和力は、７ＳβＣＤが試験した中性化合物の大部
分に関して粗悪な分離を生じさせる、即ち複合体形成が
両鏡像異性体に関して強すぎるために、その結果キラル
識別ができないことの主な理由と符合しているものと思
われる。キラルアミン類に関しては、逆の傾向が観察さ
れた。ＨＳβＣＤによって生じた移動時間は、７ＳβＣ
Ｄを用いて得られたものよりも殆ど全てに関して短かっ
た。この結果の理由の１つは、ＨＳβＣＤのサルフェー
ト化の度合いが高いほど、もっとマイナスに荷電される
ために陽極の方への電気泳動の移動度を高くするという
ことである。マイナスの増大した電荷が、サルフェート
化されたシクロデキストリンとプロトン化されたアミン
類との間に、より高い静電引力をも生じさせるというこ
とが言えそうである。より高い複合体形成定数がより低
い分解能を生じさせてしまったと思われる中性被検体の
ケースと違って、アミン類に関するベックマンのＨＳβ
ＣＤの明らかに高い親和力が、７ＳβＣＤよりも数多く
の好結果のキラルアミン分離を生じさせた。これらの結
果は、種々の荷電ＣＤ類の中に分解能(分割力)に大きな
差があることを示している。７よりも大きな平均スルフ
ェート化の程度を有するこれらのＣＤ類は、より広い範
囲の分子種(表２Aと２B参照)について実質的により良い
キラル分割を示した。これに関して、ここに述べられた
簡単な、一工程での、高収率な合成を用いて調製された
ＨＳβＣＤは、試験した種々のサルフェート化シクロデ
キストリン類のいずれとも好適にも匹敵するものであっ
た。
電気泳動図からの１つの観察結果は、移動時間は一般に
７ＳβＣＤ分離に関して対応する時間よりもっと遅かっ
たということであった。このことは、７ＳβＣＤと中性
化合物の大部分との間の複合体形成平衡定数は、ＨＳβ
ＣＤの対応する値よりも高いことを示唆している。この
高い親和力は、７ＳβＣＤが試験した中性化合物の大部
分に関して粗悪な分離を生じさせる、即ち複合体形成が
両鏡像異性体に関して強すぎるために、その結果キラル
識別ができないことの主な理由と符合しているものと思
われる。キラルアミン類に関しては、逆の傾向が観察さ
れた。ＨＳβＣＤによって生じた移動時間は、７ＳβＣ
Ｄを用いて得られたものよりも殆ど全てに関して短かっ
た。この結果の理由の１つは、ＨＳβＣＤのサルフェー
ト化の度合いが高いほど、もっとマイナスに荷電される
ために陽極の方への電気泳動の移動度を高くするという
ことである。マイナスの増大した電荷が、サルフェート
化されたシクロデキストリンとプロトン化されたアミン
類との間に、より高い静電引力をも生じさせるというこ
とが言えそうである。より高い複合体形成定数がより低
い分解能を生じさせてしまったと思われる中性被検体の
ケースと違って、アミン類に関するベックマンのＨＳβ
ＣＤの明らかに高い親和力が、７ＳβＣＤよりも数多く
の好結果のキラルアミン分離を生じさせた。これらの結
果は、種々の荷電ＣＤ類の中に分解能(分割力)に大きな
差があることを示している。７よりも大きな平均スルフ
ェート化の程度を有するこれらのＣＤ類は、より広い範
囲の分子種(表２Aと２B参照)について実質的により良い
キラル分割を示した。これに関して、ここに述べられた
簡単な、一工程での、高収率な合成を用いて調製された
ＨＳβＣＤは、試験した種々のサルフェート化シクロデ
キストリン類のいずれとも好適にも匹敵するものであっ
た。
【００４０】例４ ＣＥ分離の再現性に関する、異なった合成ロットの効果 キラルセレクターに関する他の重要な評価基準は、異な
った合成ロット間での性能の再現性である。三つの異な
った型のヒドロキシル(各グルコース単位における２
−、３、及び６−位)の直接スルフェート化が、７SβＣ
Ｄ化合物の５段工程合成よりももっとランダムな置換を
生じさせると予想されたから、ＨＳＣＤの異なったロッ
ト内での変動は考慮されなければならない可能な手段で
あった。この点から考えて、５つの合成から得られた５
つの異なったロットのＨＳＣＤ（ＧＳ４７４７−６５、
ＧＳ４７４７−７０、ＧＳ４７４７−８２、ＧＳ４７４
７−８５及びＧＳ４７４７−９０）を、５−(４−メチ
ルフェニル)−５−フェニルヒダントイン、α−メチル
−α−フェニルサクシンイミド、及びサリドマイドラセ
ミ体の分離について試験した。表３の結果は、移動時間
と分解能(分割力)の再現性が合成ロットのうちの４つに
関して非常に良好であることを示している。ロット８５
だけが速い移動と低い分解能を生じさせて、他のものと
は多少違っていた。これらの結果は、保護されていない
β−ＨＳＣＤの直接スルフェート化の簡単な手順を用い
て繰返し合成することがＣＥのキラルセレクターとして
再現可能性に優れた性能と一致する生成物を産すること
を示している。
った合成ロット間での性能の再現性である。三つの異な
った型のヒドロキシル(各グルコース単位における２
−、３、及び６−位)の直接スルフェート化が、７SβＣ
Ｄ化合物の５段工程合成よりももっとランダムな置換を
生じさせると予想されたから、ＨＳＣＤの異なったロッ
ト内での変動は考慮されなければならない可能な手段で
あった。この点から考えて、５つの合成から得られた５
つの異なったロットのＨＳＣＤ（ＧＳ４７４７−６５、
ＧＳ４７４７−７０、ＧＳ４７４７−８２、ＧＳ４７４
７−８５及びＧＳ４７４７−９０）を、５−(４−メチ
ルフェニル)−５−フェニルヒダントイン、α−メチル
−α−フェニルサクシンイミド、及びサリドマイドラセ
ミ体の分離について試験した。表３の結果は、移動時間
と分解能(分割力)の再現性が合成ロットのうちの４つに
関して非常に良好であることを示している。ロット８５
だけが速い移動と低い分解能を生じさせて、他のものと
は多少違っていた。これらの結果は、保護されていない
β−ＨＳＣＤの直接スルフェート化の簡単な手順を用い
て繰返し合成することがＣＥのキラルセレクターとして
再現可能性に優れた性能と一致する生成物を産すること
を示している。
【００４１】
【表４】
【００４２】例５ 高度にサルフェート化されたα−、β−、及びγ−シク
ロデキストリン類を用いるキラル分離 この例は、分離することができるキラル化合物の範囲
が、ＣＥ−ベースキラル分離に高度にサルフェート化さ
れたα−及びγ−シクロデキストリン類（それぞれＨＳ
αＣＤ及びＨＳγＣＤ）を含めることによって拡大され
ることを示している。表４の結果は、３つの異なったＨ
ＳＣＤ類によって引き起こされる分離は、多種多様な中
性及び塩基性の薬剤を網羅するように互いに補完し合っ
ていることを示している。ＨＳγＣＤは、薬学的に重要
なフェネチルアミン類の鏡像異性体を分離するのに特に
効果的であることが判明した。アンフェタミンとサリド
マイドのキラルＣＥ分析の例が、それぞれ図５と６に示
されている。アンフェタミンについての最適な分解能
（分割）（Ｒ＝２１．６８）がＨＳγＣＤを用いて得ら
れたのに対して、ＨＳβＣＤはサリドマイドの最良の分
解能(分割)（Ｒ＝３．３７）を生じさせた。
ロデキストリン類を用いるキラル分離 この例は、分離することができるキラル化合物の範囲
が、ＣＥ−ベースキラル分離に高度にサルフェート化さ
れたα−及びγ−シクロデキストリン類（それぞれＨＳ
αＣＤ及びＨＳγＣＤ）を含めることによって拡大され
ることを示している。表４の結果は、３つの異なったＨ
ＳＣＤ類によって引き起こされる分離は、多種多様な中
性及び塩基性の薬剤を網羅するように互いに補完し合っ
ていることを示している。ＨＳγＣＤは、薬学的に重要
なフェネチルアミン類の鏡像異性体を分離するのに特に
効果的であることが判明した。アンフェタミンとサリド
マイドのキラルＣＥ分析の例が、それぞれ図５と６に示
されている。アンフェタミンについての最適な分解能
（分割）（Ｒ＝２１．６８）がＨＳγＣＤを用いて得ら
れたのに対して、ＨＳβＣＤはサリドマイドの最良の分
解能(分割)（Ｒ＝３．３７）を生じさせた。
【００４３】
【表５】
【００４４】本発明を、その幾つかの好ましい態様を参
照して著しく詳しく述べたけれども、他の態様も可能で
ある。例えば、シクロデキストリン類は、ホスフェート
等の他のマイナスに荷電された置換基、或いは４級アミ
ンのようなプラスに荷電された置換基で修飾することも
できる。更には、ＣＥ分離は、荷電ＣＤ複合体の分解能
(分割力)を改良するために、異なった緩衝剤、又はｐＨ
条件を用いて実施してもよい。そのため、添付の特許請
求の範囲の精神及び範囲は、ここに記載されている好ま
しい態様の記載に制限すべきものではない。
照して著しく詳しく述べたけれども、他の態様も可能で
ある。例えば、シクロデキストリン類は、ホスフェート
等の他のマイナスに荷電された置換基、或いは４級アミ
ンのようなプラスに荷電された置換基で修飾することも
できる。更には、ＣＥ分離は、荷電ＣＤ複合体の分解能
(分割力)を改良するために、異なった緩衝剤、又はｐＨ
条件を用いて実施してもよい。そのため、添付の特許請
求の範囲の精神及び範囲は、ここに記載されている好ま
しい態様の記載に制限すべきものではない。
【００４５】
【発明の効果】本発明のシクロデキストリン類は、高度
にサルフェート化されたα−、β−及びγ−シクロデキ
ストリン類であって、キラルセレクターとして好適なも
のであり、例えば毛管電気泳動（ＣＥ）に用いることに
より、化合物の鏡像異性体対の分離分割能力に優れるも
のである。本発明の荷電シクロデキストリン類は、従来
のシクロデキストリン誘動体よりも高度のサルフェート
化とより狭い不均一性を有し、鏡像異性体の分割に好適
なものである。また、高度にサルフェート化されたシク
ロデキストリン類を用いる本発明の毛管電気泳動（Ｃ
Ｅ）分析法によれば、多種多様のキラル薬剤、特に中性
の化合物及びアミン類の分解能、分割力に優れた分析が
可能となる。さらに、本発明の高度にサルフェート化さ
れたα−、β−、及びγ−シクロデキストリン類は、毛
管電気泳動によって解析されうる中性及び塩基性薬剤の
数を更に拡大させるべく対象とする化合物の範囲を互い
に補完するものであり、より広範囲の鏡像異性体の分離
分割を可能とするものである。また、本発明の組成物及
びキットは、このような毛管電気泳動分析に好適に用い
られるものである。
にサルフェート化されたα−、β−及びγ−シクロデキ
ストリン類であって、キラルセレクターとして好適なも
のであり、例えば毛管電気泳動（ＣＥ）に用いることに
より、化合物の鏡像異性体対の分離分割能力に優れるも
のである。本発明の荷電シクロデキストリン類は、従来
のシクロデキストリン誘動体よりも高度のサルフェート
化とより狭い不均一性を有し、鏡像異性体の分割に好適
なものである。また、高度にサルフェート化されたシク
ロデキストリン類を用いる本発明の毛管電気泳動（Ｃ
Ｅ）分析法によれば、多種多様のキラル薬剤、特に中性
の化合物及びアミン類の分解能、分割力に優れた分析が
可能となる。さらに、本発明の高度にサルフェート化さ
れたα−、β−、及びγ−シクロデキストリン類は、毛
管電気泳動によって解析されうる中性及び塩基性薬剤の
数を更に拡大させるべく対象とする化合物の範囲を互い
に補完するものであり、より広範囲の鏡像異性体の分離
分割を可能とするものである。また、本発明の組成物及
びキットは、このような毛管電気泳動分析に好適に用い
られるものである。
【図１】７ＳβＣＤ（Ａ）、ＨＳαＣＤ（Ｂ）、及び７
ＳβＣＤとＨＳαＣＤの混合物の電気泳動図を示す。
ＳβＣＤとＨＳαＣＤの混合物の電気泳動図を示す。
【図２】７ＳβＣＤ（Ａ）、ＨＳβＣＤ（Ｂ）、及び７
ＳβＣＤとＨＳβＣＤの混合物の電気泳動図を示す。
ＳβＣＤとＨＳβＣＤの混合物の電気泳動図を示す。
【図３】７ＳβＣＤ（Ａ）、ＨＳγＣＤ（Ｂ）、及び７
ＳβＣＤとＨＳγＣＤの混合物の電気泳動図を示す。
ＳβＣＤとＨＳγＣＤの混合物の電気泳動図を示す。
【図４】（Ａ）ＡＢＩ ＳＢＥＣＤを含む荷電シクロデ
キストリン類、並びに（Ｂ）セレスター、及び（Ｃ）ア
ルドリッチのサルフェート化されたシクロデキストリン
類の電気泳動図を示す。
キストリン類、並びに（Ｂ）セレスター、及び（Ｃ）ア
ルドリッチのサルフェート化されたシクロデキストリン
類の電気泳動図を示す。
【図５】ＨＳαＣＤ（Ａ）、ＨＳβＣＤ（Ｂ）、及びＨ
ＳγＣＤ（Ｃ）を用いて得られるアムフェタミンの電気
泳動分離を示すグラフである。
ＳγＣＤ（Ｃ）を用いて得られるアムフェタミンの電気
泳動分離を示すグラフである。
【図６】ＨＳαＣＤ（Ａ）、ＨＳβＣＤ（Ｂ）、及びＨ
ＳγＣＤ（Ｃ）を用いて得られるラセミ体のサリドマイ
ドの電気泳動分離を示すグラフである。
ＳγＣＤ（Ｃ）を用いて得られるラセミ体のサリドマイ
ドの電気泳動分離を示すグラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (71)出願人 591028256 4300Ｎ．Ｈａｒｂｏｒ Ｂｏｕｌｅｖａｒ ｄ Ｆｕｌｌｅｒｔｏｎ，Ｃａｌｉｆｏｒ ｎｉａ 92834−3100 Ｕ．Ｓ．Ａ. (72)発明者 ジーン ジー ワイ シェン アメリカ合衆国 91765 カリフォルニア 州 ダイアモンド バー、 イースト ベ ンフィールド プレイス 24192 (72)発明者 ラモン エイ エヴァンゲリスタ アメリカ合衆国 92870 カリフォルニア 州 プラセンチア ロヨラ ウェイ 401 (72)発明者 チャン エス オー アメリカ合衆国 91709 カリフォルニア 州 チノ ヒルズ エクイリム ドライヴ 15962
Claims (27)
- 【請求項１】 ａ）アルファシクロデキストリン、 ｂ）少なくとも約１２個の修飾されたヒドロキシル基を
有するベータシクロデキストリン、及び ｃ）ガンマシクロデキストリンからなる群から選ばれ、
二級ヒドロキシルの少なくとも１つの修飾を含んでなる
ことを特徴とする荷電シクロデキストリン。 - 【請求項２】 下記一般式 【化１】 を有し、 ａ）ｎが６又は８であり、少なくとも約１個のR1基が修
飾されたヒドロキシルであり、かつ約ｎ個未満のＲ1基
がヒドロキシルであるシクロデキストリン、及び ｂ）ｎが７であり、少なくとも約５個のＲ1基が修飾さ
れたヒドロキシルであり、かつ約３個未満のＲ1基がヒ
ドロキシルであるシクロデキストリンからなる群から選
ばれ、ここで前記修飾されたヒドロキシルがサルフェー
ト、カルボキシレート、ホスフェート、又は４級アミン
置換基を含むことを特徴とする荷電シクロデキストリ
ン。 - 【請求項３】 修飾されたヒドロキシル基がサルフェー
ト化されている請求項１又は２記載の荷電されたシクロ
デキストリン。 - 【請求項４】 アルファシクロデキストリンが少なくと
も約７個のサルフェート置換基を有することを特徴とす
る高度にサルフェート化されたアルファシクロデキスト
リン。 - 【請求項５】 ベータシクロデキストリンが少なくとも
約１２個のサルフェート置換基を有することを特徴とす
る高度にサルフェート化されたベータシクロデキストリ
ン。 - 【請求項６】 ガンマシクロデキストリンが少なくとも
約９個のサルフェート置換基を有することを特徴とする
高度にサルフェート化されたガンマシクロデキストリ
ン。 - 【請求項７】 請求項１記載の荷電シクロデキストリン
および電気泳動緩衝剤を含んでなることを特徴とする組
成物。 - 【請求項８】 前記シクロデキストリンの濃度が約１％
〜２０％である請求項７記載の組成物。 - 【請求項９】 電気泳動緩衝剤が酸性である請求項７記
載の組成物。 - 【請求項１０】 酸性緩衝剤のｐＨ範囲が約１〜５であ
る請求項９記載の組成物。 - 【請求項１１】 電気泳動緩衝剤がリン酸塩、酢酸塩及
びクエン酸塩からなる群から選ばれた電解質を含む請求
項７記載の組成物。 - 【請求項１２】 試料、請求項１記載の荷電シクロデキ
ストリン、及び電気泳動緩衝剤を含んでなり、前記試料
が小さなキラル分子であることを特徴とする組成物。 - 【請求項１３】 試料が中性化合物又はアミンを含む請
求項１２記載の組成物。 - 【請求項１４】 試料の濃度が約０．１〜１０ｍＭであ
る請求項１２記載の組成物。 - 【請求項１５】 シクロデキストリンが試料に対して相
対的に過剰なモル数で存在する請求項１５記載の組成
物。 - 【請求項１６】 試料が薬剤又は薬学的化合物を含む請
求項１２記載の組成物。 - 【請求項１７】 内標準をさらに含んでなる請求項１２
記載の組成物。 - 【請求項１８】 内標準が１，３，６，８−ピレネテト
ラスルホン酸又はその塩である請求項１３記載の組成
物。 - 【請求項１９】 ａ）（１）アルファシクロデキストリ
ン、 （２）少なくとも約１２個の修飾されたヒドロキシル基
を有するベータシクロデキストリン、及び （３）ガンマシクロデキストリン からなる群から選ばれ、二級ヒドロキシルの少なくとも
１つの修飾を含むシクロデキストリンを含んでなる緩衝
剤で毛管を満たす工程； ｂ）キラル化合物の鏡像異性体を含んでなる試料を前記
毛管に注入する工程； ｃ）鏡像異性体の電気泳動分離を行う工程；及び ｄ）キラル化合物の分離された鏡像異性体を検出する工
程を含んでなることを特徴とする小さな分子の鏡像異性
体の分離方法。 - 【請求項２０】 電気泳動分離が電気浸透フローを抑制
する条件下で行われる請求項１９記載の方法。 - 【請求項２１】 毛管が被覆された毛管である請求項２
０記載の方法。 - 【請求項２２】 緩衝剤が酸性である請求項２０記載の
方法。 - 【請求項２３】 （ａ）少なくとも約７個のサルフェー
ト置換基を有するアルファシクロデキストリン； （ｂ）少なくとも約１２個のサルフェート置換基を有す
るベータシクロデキストリン；及び （ｃ）少なくとも約９個のサルフェート置換基を有する
ガンマシクロデキストリンからなる群から選ばれた少な
くとも２つの、高度にサルフェート化されたシクロデキ
ストリンを含んでなるキラル化合物の分離用キット。 - 【請求項２４】 少なくとも一つの電気泳動緩衝剤をさ
らに含んでなる請求項２３記載のキット。 - 【請求項２５】 内標準をさらに含んでなる請求項２３
記載のキット。 - 【請求項２６】 少なくとも一つの毛管をさらに含んで
なる請求項２３記載のキット。 - 【請求項２７】 少なくとも１つのｐＨ調節剤をさらに
含んでなる請求項２４記載のキット。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/910483 | 1997-07-25 | ||
| US08/910,483 US6316613B1 (en) | 1997-07-25 | 1997-07-25 | Chiral separation of pharmaceutical compounds with charged cyclodextrins using capillary electrophoresis |
Related Child Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2009296197A Division JP2010132907A (ja) | 1997-07-25 | 2009-12-25 | 毛管電気泳動を用いる、荷電シクロデキストリン類での薬学的化合物のキラル分離 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11100402A true JPH11100402A (ja) | 1999-04-13 |
| JP4503715B2 JP4503715B2 (ja) | 2010-07-14 |
Family
ID=25428852
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP20965698A Expired - Lifetime JP4503715B2 (ja) | 1997-07-25 | 1998-07-24 | 毛管電気泳動を用いる、荷電シクロデキストリン類での薬学的化合物のキラル分離 |
| JP2009296197A Withdrawn JP2010132907A (ja) | 1997-07-25 | 2009-12-25 | 毛管電気泳動を用いる、荷電シクロデキストリン類での薬学的化合物のキラル分離 |
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|---|---|---|---|
| JP2009296197A Withdrawn JP2010132907A (ja) | 1997-07-25 | 2009-12-25 | 毛管電気泳動を用いる、荷電シクロデキストリン類での薬学的化合物のキラル分離 |
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|---|---|
| US (1) | US6316613B1 (ja) |
| EP (1) | EP0893453B1 (ja) |
| JP (2) | JP4503715B2 (ja) |
| DE (1) | DE69822934T2 (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2017525806A (ja) * | 2014-08-22 | 2017-09-07 | サイデックス・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | 分画アルキル化シクロデキストリン組成物ならびにその調製方法および使用方法 |
| US11208500B2 (en) | 2012-02-15 | 2021-12-28 | Cydex Pharmaceuticals, Inc. | Manufacturing process for cyclodextrin derivatives |
| US11806402B2 (en) | 2008-04-28 | 2023-11-07 | Cydex Pharmaceuticals, Inc. | Sulfoalkyl ether cyclodextrin compositions |
Families Citing this family (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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