JPH10505862A

JPH10505862A - Ｎｏシンターゼ阻害剤としてのイソチオ尿素誘導体

Info

Publication number: JPH10505862A
Application number: JP8510813A
Authority: JP
Inventors: マクドナルド，ジエイムズ・エドウイン
Original assignee: アストラ・アクチエボラーグ
Priority date: 1994-09-20
Filing date: 1995-09-20
Publication date: 1998-06-09
Also published as: GB9418912D0; WO1996009286A1; US5721247A; AU3582095A; DK0782567T3; GR3031321T3; ES2135769T3; DE69510553D1; DE69510553T2; DE69510553T3; EP0782567A1; ATE181731T1; EP0782567B1; EP0782567B2

Abstract

(57)【要約】Ｄ、R¹、R²、R³、Ｘおよびｐが明細書に記載の通りである式(Ｉ)り新しい化合物、並びにその調製方法、それを含有する組成物および治療におけるその使用方法に関する。このNOシンターゼ阻害剤としてのイソチオ尿素誘導体である式(Ｉ)の化合物は神経変性性疾患の治療に特に有用であることが期待される。

Description

【発明の詳細な説明】 NOシンターゼ阻害剤としてのイソチオ尿素誘導体本発明は、新しいイソチオ尿素誘導体、その製造方法、それを含有する組成物および治療におけるその使用に関する。チオ尿素およびイソチオ尿素が種々の治療用途のために報告されている。WO 9 4/12165(Wellcome)はとり分け全身性低血圧、敗血症性ショックおよび炎症症状の治療に用いるための単純なイソチオ尿素誘導体を記載しており、WO 95／09619 (Wellcome)(本出願の優先日後に公開)は脳虚血の治療のための置換尿素およびイソチオ尿素の誘導体を記載しており、英国特許178242号（Wellcome）は抗炎症活性を有するビスイソチオ尿素を記載しており、欧州特許411615号(Warner Lamber t)は認識力低下の症状の治療において用いるチオ尿素誘導体を開示しており、欧州特許出願392802号(Beecham)は気管支、脳血管またはニューロンの障害の治療において用いるチオ尿素誘導体を開示している。イソチオ尿素誘導体はまたグアニジン誘導体の調製における中間体として知られている（化合物４−ジメチルアミノフェニルカルバミミドチオイック酸メチルエステルを開示してる米国特許4,211,867号(McNeil Laboratories)およびSynthe sis(1988)6，460-466(Rasmissen)および米国特許5,223,498号(Boots)参照)。国際特許出願WO 94／21621号およびWO 95／05363号（Fisons Corporation）( 共に本出願の優先日後に公開)は特に神経変性性疾患の治療を意図したグアニジンおよびアミジン化合物をそれぞれ開示している。今回我々は、新しい有用な一群のイソチオ尿素誘導体を発見した。本発明の第１の態様によれば、下記式〔式中、ＤはC1〜6アルキルであり； R¹は水素、C1〜6アルキルまたはハロゲンであり； R²およびR³は独立して水素、C1〜6アルキル、-(CH₂)_rAまたは-(CH₂)_mOAであるか；または-NR²R³は一緒になって１−インダニルまたは1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリニルであるか；またはフェニルまたはC1〜6アルキルで場合により４− 置換されたピペラジニルであり；ＡはフェニルまたはＯ、ＳおよびＮ−から選択されるヘテロ原子１〜４個を有する５員のヘテロ芳香環であり、その２つの基はC1〜6アルキル、ハロゲンおよびトリフルオロメチルから選択される基の１つ以上で場合により置換されており；ｐ、ｒおよびｍは独立して０〜４の整数を示し；そして、ＸはＯまたは結合であるが；ただし（a）ＸがＯである場合は、ｐは０または１ではなく；（b）R¹が水素であり、Ｄがメチルであり、Ｘがパラ位でフェニル環に連結した結合であり、そして、ｐが０である場合は、R²およびR³の両者はメチルではない〕の化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。好ましくはR²およびR³が独立して、水素、C1〜6アルキルまたは -(CH₂)_rAであるか、または-NR²R³が一緒になって1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリニルを表わす。好ましくはＡはC1〜6アルキル、ハロゲンおよびトリフルオロメチルから選択される基１つ以上で場合により置換されたフェニルを表わす。特に好ましくはＡはフェニルまたは塩素で置換されたフェニルを表わす。好ましくはＸは結合である。好ましくはR¹は水素である。好ましくはＸはイソチオ尿素部分のＮに対してパラ配位したものである。好ましくはｐは１〜３の整数、特に２である。好ましくはＤはプロピルまたはエチル、特に好ましくはイソプロピルまたはエチル、特にエチルである。本発明によれば、更に、次の工程：（a）下記式II 〔式中R¹、R²、R³、ｐおよびＸは上記した通りである〕の化合物を下記式III D-L III 〔式中Ｄは上記の通り定義され、Ｌは脱離基である〕の化合物と反応させ、（b）R²およびR³が共に水素である式Ｉの相当する化合物を下記式IV R⁴-L IV 〔式中R⁴はC1〜6アルキル、-(CH₂)_rAまたは-(CH₂)_mOAであり、Ｌは脱離基である〕の化合物と反応させることによりR²およびR³の少なくとも一方がC1〜6アルキル、-(CH₂)_rAまたは-(CH₂)_mOAである式Ｉの化合物を製造し、（c）下記式Ｖ〔式中Ｄ、Ｘ、R¹、R²、R³およびｐは上記の通りである〕の化合物を還元することによりｐが１〜４の整数である式Ｉの化合物を製造し、（d）下記式VI 〔式中R¹、Ｄ、ｐおよびＸは上記の通りである〕の相当する化合物を還元することによりR²およびR³の両方が水素である式Ｉの化合物を製造し、（e）下記式VII 〔式中R¹、R³、Ｄ、Ｘおよびｐは上記の通りである〕の化合物を還元することによりR²が水素でありｐが２〜４の整数である式Ｉの化合物を製造し、（f）下記式VIII 〔式中Ｘ、R¹、Ａ、Ｄ、ｒおよびｐは上記の通りである〕の化合物を還元することによりR²およびR³の一方が水素であり、他方が-(CH₂)_rA〔ｒは１〜４の整数〕である式Ｉの化合物を製造し、（g）下記式IX 〔式中Ｘ、R¹、Ａ、Ｄ、ｐおよびｍは上記の通りである〕の化合物を還元することによりR²およびR³の一方が水素であり、他方が-(CH₂)_mOA〔ｍは２〜４の整数〕である式Ｉの化合物を製造し、（h）下記式Ｘ〔式中Ｘ、R¹、Ａ、Ｄ、ｐおよびｒは上記の通りである〕の化合物を還元することによりR²およびR³の一方が水素であり、他方が-(CH₂)_rA〔ｒは１〜４の整数〕である式Ｉの化合物を製造し、（i）下記式XI 〔式中Ｘ、R¹、Ａ、Ｄ、ｐおよびｍは上記の通りである〕の化合物を還元することによりR²およびR³の一方が水素であり、他方が-(CH₂)_mA〔ｍは２〜４の整数〕である式Ｉの化合物を製造し、そして、所望により、得られた式Ｉの化合物またはその塩を、薬学的に許容される別の塩に変換するか、またはその逆の変換を行なうことを包含する式Ｉの化合物および薬学的に許容されるその塩の製造方法が提供される。工程(a)においては、反応は不活性溶媒、例えばアセトン中、２つの反応体を合体することにより進行する。Ｌが示す適当な脱離基はチオアルキル、スルホン酸、４フッ化炭素スルホン酸、ハロゲン基、アルキルおよびアリールアルコール類およびトシル基を包含し、他の例はAdvanced Organic Chemistry，J．March（ 1985）第３版、McGraw-Hill，315ページに記載されており、当該分野で良く知られたものである。好ましくはヨウ化物、トルエンスルホネートまたはメタンスルホネートの誘導体を用いる。工程(b)においては、反応は標準的な条件下、例えば、12時間までの時間室温で塩基性条件下不活性溶媒中２つの物質を反応させることにより行う。式IIの化合物を反応させる前に水素化ナトリウムでアミンを処理することが望ましい場合が多いことが解った。好ましくはＬはハロゲン基、特にブロミドである。工程(c)においては、還元は不活性溶媒、例えば、THF中、ジボランで処理することにより行ないうる。好適度は低いが使用に適する別の試薬としては、リチウムアルミニウムハイドライドおよび接触還元用の試薬、例えばPd/C上の水素が挙げられる。これらの反応の使用のための反応条件の更なる詳細は、J．MarchのAdvanced Organic Chemi stry，1099ページ、並びにその参考文献の参照により得られる。工程(d)においては、還元反応は多くの条件下、例えばJ．MarchのAdvanced Or ganic Chemistry，1103〜1104ページに記載されている条件下で行ないうる。これらには、接触還元、金属Zn、SnまたはFeの使用、AlH₃-AlCl₃、スルフィド類、その他の使用が包含される。好ましくはPd/C触媒の存在下３〜６時間常圧下水素化することにより反応を行なう。工程(e)、(f)および(g)においては、還元は標準的な条件下ナトリウムボロハイドライドで化合物を処理することにより行ないうる。工程(h)および(i)においては、反応は上記工程(c)について記載したものと同様の条件下で行ないうる。式IIの化合物は、Synthesis(1988)6，460-466(Rasmussen)に開示されている化合物１つを除いて新しいものである。従って、本発明の更なる態様として、式II の化合物、またはその塩、ただし、R¹が水素であり、Ｘがパラ位でフェニル環に連結して結合であり、そしてｐが０である場合は、R²およびR³の両方がメチルではないものが提供される。式IIの化合物はSynthesis(1988)456-459に記載のRasmussen等の方法に従って製造されうる。即ち、式IIの化合物は、場合により酸（例えばトリフルオロ酢酸）の存在下アセトンのような有機溶媒中でベンゾイルイソチオシアネートと下記式XII 〔式中、R¹、R²、R³、ｐおよびＸは上記の通りである〕の化合物を反応させ、次いで、得られたベンゾイルチオ尿素の誘導体を水性アルカリ分解することにより製造することができる。式IIの化合物はまた、水中でナトリウムチオシアネートと式XIIの化合物とを反応させることにより製造しうる。式III、IV、VIおよびXIIの化合物は、既知のものを用いるか、またはそれ自体知られた従来の方法で製造してよい。例えば、式XIIの化合物は相当するニトロフェニル誘導体の還元により製造してよい。これらのニトロフェニル誘導体は既知のものを用いるか、または上記工程(ｃ)〜(ｉ)の何れかに類似の工程に従ってより単純な側鎖を有する別のニトロフェニル誘導体から製造してもよい。例えば、ＸがＯである式XIIの化合物は、下記式ＸIII R²R³N(CH₂)_pL ＸIII 〔式中、R²、R³およびｐは前に定義した通りであり、Ｌは上記した種類の脱離基である〕の化合物にヒドロキシニトロフェノールを反応させることにより製造しうる。この反応のために適する条件は当該分野で良く知られたものである。式VII、VIII、IX、Ｘ、XIおよびＸIIIの化合物は、既知のものを用いるか、またはそれ自体知られた従来の方法で製造しうる。例えば、式ＸおよびXIのアミドは相当する酸または活性化された酸を相当するアミンと反応させることにより製造しうる。式VII、VIIIおよびIXのイミンは相当するアルデヒドを相当するアミンと反応させることにより製造しうる。式Ｉの化合物の塩は、適当な塩基または酸の一当量またはそれ以上に遊離の酸、塩基またはその塩、エナンチオマー、互変異体または保護された誘導体を反応させることで形成されうる。反応は、真空下であるかまたは凍結乾燥により除去できる、生成する塩が不溶である溶媒または媒体中で、または、塩が可溶であるような溶媒中の、例えば、水、ジオキサン、エタノール、テトラヒドロフランまたはジエチルエーテル中で、または溶媒の混合物中で行ないうる。反応は複分解工程で行なうか、またはイオン交換樹脂上で行なってよい。当業者の知るとおり、GreeneとWutsによる標準的なテキストであるProtecting groups in Organic Synthesis，第２版(1991)に記載の通り、保護基を用いて中間体化合物にあるアミンまたは他の反応性の基を保護することが望ましい。挙げられるアミン保護基にはC2〜7のアルキルオキシカルボニル、例えばｔ−ブチルオキシカルボニル、C8〜13のフェニルアルキルオキシカルボニル、例えばベンジルオキシカルボニル、または、好ましくはトリフルオロアセテートが包含される。脱保護は通常は水性の塩基で処理することにより行なわれる。本発明の化合物および中間体は標準的な方法でその反応混合物から単離してよい。 C1〜6アルキルという用語は、炭素原子１〜６個を有する直鎖または分枝鎖の、飽和または不飽和の、脂肪族および環状のアルキル基を包含する。式Ｉの化合物は互変異体、エナンチオマーまたはジアステレオマー型で存在してよく、これらの形態全ては本発明の範囲に包含される。種々の光学異性体は、従来の方法、例えば、分別結晶またはHPLCを用いて化合物のラセミ混合物を分離することにより単離してよい。別法として個々のエナンチオマーは、ラセミ化を起こさない反応条件下で適切な光学活性出発物質を反応させることにより製造してよい。中間体化合物もまたエナンチオマー型で存在してよく、精製されたエナンチオマー、ジアステレオマー、ラセミ体、または混合物として用いてよい。式Ｉの化合物は動物において有用な薬理学的活性を有する。特にこれらの有用な酸化窒素シンターゼ阻害活性を有しており、酸化窒素の合成または過剰合成が原因となるヒトの疾患または症状の治療または予防において有用であることが期待され、その適応症の例としては、例えば心臓発作、卒中および新生児低酸素症の場合の低酸素症、例えば、虚血、低酸素症、低血糖症、癲癇のような疾患における、そして外傷（脊椎や頭部の障害）における神経変性および／または神経壊死を含む神経変性性症状、hypebaric酸素痙攣および毒性、痴呆症、例えば老年前痴呆症、アルツハイマー病およびエイズ性痴呆症、Sydenhamの舞踏病、パーキンソン病、ハンチントン病、筋萎縮性側索硬化症、コルサコフ病、脳血管障害、睡眠障害、分裂症、不安、抑鬱、季節性情緒障害、時差ボケ、月経前症候群（PM S）に伴う抑鬱または他の症状、不安および敗血症性ショックが包含される。式Ｉの化合物にはまた、アヘン類およびジアゼピン類への寛容性形成の防止および退行、薬物中毒の治療、疼痛の緩解および偏頭痛や他の血管性頭痛の治療において活性を示すことが期待される。本発明の化合物はまた、有用な免疫抑制活性を示し、炎症の治療または予防、胃腸運動性障害の治療および分娩誘発において有用である。化合物はまた酸化窒素シンターゼを発現する癌の治療において有用である。式Ｉの化合物は、神経変性性疾患または偏頭痛の治療または予防、またはアヘン類またはジアゼピン類への寛容性形成の防止および退行、または、薬物中毒の治療において、そして特に神経変性性疾患の治療または予防において、特に有用であることが期待される、特に低酸素症、虚血、卒中および筋萎縮性側索硬化症よりなる群から選択される症状において有益である。即ち、本発明の別の態様によれば、薬剤として使用するための条件(b)の伴わない式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩が提供される。本発明の更に別の態様によれば、上記した疾患または症状の治療または予防のための薬剤の製造における条件(b)の伴わない式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩の使用；およびこのような疾患または症状を有する、またはそれらの疾患または症状に感受性の人に条件(b)の伴わない式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩の治療有効量を投与することを包含する上記疾患または症状の治療または予防のための方法が提供される。上記した治療の適応症に対しては、投与量は当然ながら、使用する化合物、投与方法および所望の治療内容により変化する。しかしながら、一般的には、１mg 〜2000mg／日（固体形態で計量）の一日当たり用量でヒトに化合物を投与する場合に満足できる結果が得られる。式Ｉの化合物および薬学的に許容されるその塩はそのまま、または経腸または非経腸投与に適する製剤の形態で使用してよい。本発明によれば、薬学的に許容される希釈剤または担体との混合物中に、条件 (b)の伴わない式Ｉの化合物または薬学的に許容されるその塩を好ましくは80％未満、更に好ましくは50％未満含む薬学的製剤が提供される。更にまた、成分を混合することを包含するこのような薬学的製剤の製造方法も提供される。上記した希釈剤および担体の例には、錠剤および糖衣剤の場合は乳糖、澱粉、タルク、ステアリン酸、カプセルの場合は、酒石酸または乳糖、注射溶液の場合は、水、アルコール、グリセリン、植物油、坐薬の場合は、天然または硬化油またはワックスが挙げられる。経口投与、即ち食道投与に適する形態の組成物には錠剤、カプセルおよび糖衣剤が包含され、徐放性組成物には樹脂の放出特性を変えるための拡散障壁で場合によりコーティングされたイオン交換樹脂に活性成分が結合したものが包含される。酸素である酸化窒素シンターゼは多くのイソフォームを有しており、式Ｉの化合物および薬学的に許容されるその塩は、以下に示すとおり、BredtとSynderの方法(Proc．Natl．Acad．Sci．(1990)87，682-685)およびForstermann等の方法( Eur．J．Pharm．（1992）225，161-165)に基づく方法により、酸化窒素シンターゼ阻害活性を有するものがスクリーニングされる。酸化窒素シンターゼは³H-L− アルギニンを³H-L−シトルリンに変換し、後者は、陽イオン交換クロマトグラフィーにより分離でき、シンチレーション計数により定量できる。スクリーニングＡ（A）ニューロン酸化窒素シンターゼ阻害活性のスクリーニング酸素はラットの海馬または小脳から単離した。雄性Sprague-Dawleyラット（25 0〜275ｇ）の小脳または海馬を二酸化窒素麻酔と断首の後に単離した。消耗または海馬の上澄みは、50mMトリス塩酸＋１mM EDTA緩衝液（25℃でpH 7.2）中でホモゲナイズし、20000Ｇで遠心分離することにより製造した。残存するＬ−アルギニンをDowex AG-50W-X8ナトリウム型および水素型のカラムを順次通すクロマトグラフィーにより上澄みから分離し、更に30秒間1000Ｇで遠心分離した。検定のために、最終上澄み液25μlを、22℃の緩衝液中、Ｌ−アルギニン溶液( 濃度は18μM ¹H-L-アルギニン、96nM ³H-L-アルギニン)25μlおよび検定緩衝液（50mM HEPES、１mM EDTA、1.5mM CaCl₂、pH 7.4）25μlまたは被験化合物25μl の何れかの入った試験管12本の各々に添加した。各試験管に、完全検定緩衝液(5 0mM HEPES、１mM EDTA、1.5mM CaCl₂、１mM DTT、100μM NADPH、10μg／mlカルモジュリン、pH 7.4)75μlを添加いることにより反応を開始し、10分後停止緩衝液(20mM HEPES、２mM EDTA、pH 5.5)２mlを添加することにより反応を停止した。標識されたＬ−シトルリンをDowex AG-50W-X8 200〜400メッシュカラム上のクロマトグラフィーにより標識Ｌ−アルギニンから分離した。各停止反応混合物１ mlを個々の１mlカラムに適用し、溶離液を２回の１ml蒸留水洗浄により得られたものおよびシンチレーションカクテル16mlに合せた。次にＬ−シトルリンをシンチレーション計数により定量した。小脳上澄みを用いた典型的な実験においては、基礎活性は7,000dpm／mlの放射能を有する試薬ブランクよりも試料は20,000dpm／mlだけ増大する。１μMの濃度で酸化窒素シンターゼの60％阻害をもたらす標識物質Ｎ−ニトロ−Ｌ−アルギニンを検定に付すことにより方法の有効性を確認した。スクリーニングＢ（B）マクロファージ酸化窒素シンターゼ阻害活性のスクリーニングネズミマクロファージ細胞系統Ｊ774Ａ−１（Imperial Cancer Research Fund より入手）から誘導後に酵素を製造した。Ｊ774Ａ−１細胞を10％ウシ胎児血清、４mM Ｌ−グルタミンおよび抗生物質(100単位／mlペニシリンＧ、100μ／mlストレプトマイシン＋0.25μg／mlアンホテリシンＢ)を添加したDulbeccoの変性イーグル培地（DMEM）中で培養した。細胞は通常通り、５％二酸化炭素含有湿潤雰囲気中、37℃に維持した培地35mlの入った225cm³のフラスコ中で生育させた。酸化窒素シンターゼインターフェロン−γ(IFNγ)およびリポ多糖類(LPS)への応答として細胞により生産される。全面培養に達したフラスコの培地を取り出し、１μg／ml LPSおよび10単位／mlIFNγを含有する新しい培地25mlと交換した。 17〜20時間培養した後、培地中にフラスコ表面から細胞シートを掻き出すことにより細胞を回収した。細胞を遠心分離（1000Ｇ、10分間）により採取し、細胞ペレットに50mMトリス塩酸（pH 7.5、20℃）、10％(v/v)グリセロール、0.1％（v/v）トリトン−Ｃ−100、0.1μMジチオスレイトールおよびロイペプチン(２μg／ml)、大豆トリプシン阻害剤(10μg／ml)、アプロチニン（５μg／l）およびフェニルメチルスルホニルフロリド(50μg／ml)を含有するプロテアーゼ阻害剤のカクテルを含有する溶液に添加することにより、細胞溶解物を調製した。検定のために、基質カクテル(50mMトリス塩酸(pH 7.5、20℃)、400μM NADPH 、20μMフラビンアデニンジヌクレオチド、20μMフラビンモノヌクレオチド、４ μMテトラヒドロビオプテリン、12μM Ｌ−アルギニンおよび0.025μCi Ｌ−〔³ H〕アルギニン)25μlを50mMトリス塩酸中の被験化合物の溶液25μLの入った96穴のフィルタープレート（0.4μm孔径）のウエルに添加した。細胞溶解物(前述の通り調製)50μlを添加することにより反応を開始し、室温で１時間インキュベートした後に、３mMニトロアルギニンおよび21mM EDTAの水溶液50μlを添加することにより反応を終了した。標識したＬ−シトルリンをDowex AG-50Wを用いて標識したＬ−アルギニンから分離した。Dowex 50W(Na⁺型)の25％スラリー150μlを検定材料に加え、その後、全体を濾過して96穴のプレートに入れた。濾液70μlを採取し、固体シンチラントの入った96穴プレートのウエルに入れた。試料を放置して乾燥させた後、Ｌ− シトルリンをシンチレーション計数により定量した。典型的な実験においては、基礎活性は、試薬ブランクでは1900dpmのところが、300dpm／70μl試料となる。10μMのIC₅₀(50％阻害濃度)を示すアミノグアニジンを標準物質として検定に付すことにより方法の有効性を確認した。スクリーニングＣ（C）内皮細胞酸化窒素シンターゼ阻害活性のスクリーニング Pollockら(1991，Proc．Nat．Acad．Sci.，88，10480-10484)の方法に基づいた手法によりヒト臍静脈内皮細胞(HUVEC)から酵素を単離した。HUVECはClonetic s Corp(San Diego，CA，USA)から購入し、全面培養状態となるまで培養した。細胞を35〜40代まで継代培養したが、酸化窒素シンターゼの収量の顕著な損失はなかった。細胞が全面培養状態に達した段階で、Dulbeccoのリン酸塩緩衝生理食塩水に再懸濁し、10分間800rpmで遠心分離し、細胞ペレットを氷冷50mMトリス塩酸、１mM EDTA、10％グリセロール、１mMフェニルメチルスルホニルフロリド、２ μMロイペプチン、pH 4.2中でホモゲナイズした。60分間34,000rpmで遠心分離した後、ペレットを更に20mM CHAPSを含有するホモゲナイズ用緩衝液中に溶解した。30分間氷上でインキュベートした後、懸濁液を30分間34,000rpmで遠心分離した。得られた上澄みを使用時まで−80℃で保存した。検定のために、最終上澄み液25μlを、22℃の緩衝液中、Ｌ−アルギニン溶液（濃度は12μM ¹H-L−アルギニン、64μM ³H-L−アルギニン）25μlおよび検定緩衝液（50mM HEPES、１mM EDTA、1.5mM CaCl₂、pH 7.4）25μlまたは被験化合物25μlの何れかの入った試験管12本の各々に添加した。各試験管に、完全検定緩衝液(50mM HEPES、１mM EDTA、1.5mM CaCl₂、１mM DTT、100μM NADPH、10μg ／mlカルモジュリン、12μMテトラヒドロビオプテリン、pH 7.4)25μlを添加いることにより反応を開始し、10分後停止緩衝液（20mM HEPES、２mM EDTA、pH 5. 5）２mlを添加することにより反応を停止した。標識されたＬ−シトルリンをDowex AG-50W-X8 200〜400メッシュカラム上のクロマトグラフィーにより標識Ｌ−アルギニンから分離した。各停止反応混合物１mlを個々の１mlカラムに適用し、溶離液を２回の１ml蒸留水洗浄により得られたものおよびシンチレーションカクテル16mlに合せた。次にＬ−シトルリンをシンチレーション計数により定量した。典型的な実験においては、基礎活性は1500dpm／mlの放射能を有する試薬ブランクよりも5,000dpm／ml試料増大する。１μMの濃度で酸化窒素シンターゼの70 〜90％阻害をもたらす標準物質Ｎ−ニトロ−Ｌ−アルギニンを検定に付すことにより方法の有効性を確認した。更に化合物をex vivo検定に付すことにより脳貫通の程度を調べた。スクリーニングＤ（D）ニューロン酸化窒素シンターゼ阻害活性のex vivo試験雄性Sprague-Dowleyラット(250〜275ｇ)に0.9％食塩水に溶解した被験化合物1 0mg／kgまたは対照群として食塩水のみを静脈内投与した。投与後所定の時間（典型的には２〜24時間）に供試動物を屠殺し、前記スクリーニングＡで記載した通り、小脳を摘出し、上澄みを調製し、酸化窒素シンターゼ活性を評価した。更に確認のために、小脳上澄みの一部を2′-5′-ADPセファロースカラム(酸化窒素シンターゼを吸着する)に適用し、その後NADPHで溶離した。スクリーニングＡの方法に従って溶出液の酸化窒素シンターゼ活性を調べた。ラット脳に透入してニューロン酸化窒素シンターゼを阻害するような化合物は、上澄み調製物と2′-5′-ADPセファロースカラム溶出液の両方で酸化窒素シンターゼ活性を低下させた。酸化窒素シンターゼ阻害活性のスクリーニングにおいて、化合物の活性をIC₅₀ （検定において50％酵素阻害をもたらす薬剤の濃度）として標示した。被験化合物のIC₅₀値はまず化合物の１、10および100μM溶液の阻害活性から推定した。10 μMで少なくとも50％酵素を阻害した化合物をIC₅₀の測定ができるような更に適切な濃度を用いて再試験した。上記したスクリーニングＡ（酸化窒素シンターゼのニューロンイソフォームに対抗する活性のスクリーニング）において、以下に示す実施例１の化合物は10μ Mより低値のIC₅₀を示し、有用な治療活性を有することが期待された。スクリーニングＢおよびＣ（酸化窒素シンターゼのマクロファージおよび内皮のイソフォームに対抗する活性のスクリーニング）において、実施例１の化合物はスクリーニングＡで観察されたものより10倍高値のIC₅₀値を示し、望ましい選択性を有することが解った。実施例２〜４の化合物もまたスクリーニングＡで試験し、やはり10μMよりひくい値のIC₅₀値を示した。即ち、これらの化合物はまた有用な治療活性を有することが期待された。従来の化合物と比較した場合、式Ｉの化合物および薬学的に許容されるその塩は、毒性がより低く、薬効がより高く、より長時間作用し、活性の範囲がより広く、より強力であり、酸化窒素シンターゼ酵素のニューロンイソフォームに対してより高い選択性を示し、副作用がより少なく、より容易に吸収され、また他の有用な薬理学的特性を有する点において有利である。本発明を以下の実施例により説明する。実施例１Ｎ−(４−(２−((フェニルメチル)(メチル)アミノ)エチル)フェニル)カルバミミドチオイック酸エチルエステル（a）４−ニトロフェニルアセチルクロリドチオニルクロリド(50ml、0.685モル)中の４−ニトロフェニル酢酸(25ｇ、0.13 8モル)の撹拌混合物を２時間還流下に加熱し、次に、濃縮して褐色の固体として４−ニトロフェニルアセチルクロリド（27.55ｇ）を得た。（b）Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチル−４−ニトロフェニルアセトアミド塩化メチレン（400ml）中のＮ−ベンジルメチルアミン(47.6ml、0.369モル)の撹拌溶液に、アイスバスで冷却しながら温度を20〜28℃に維持できるような速度で、塩化メチレン(100ml)に溶解した４−ニトロフェニルアセチルクロリド（工程(a)、24.86ｇ、0.125モル）を添加した。２時間撹拌した後、反応混合物を順次、1.25Ｎ塩酸、水、１Ｎ水酸化ナトリウムそして最後に水で洗浄した。塩化メチレン溶液を無水硫酸マグネシウム上に乾燥し、ロータリーエバポレーターで濃縮して油状物とした。油状物をエーテル(100ml)に溶解し、これより急速にＮ− ベンジル−Ｎ−メチル−４−ニトロフェニルアセトアミドが晶出した。収量31.5 ｇ(89％）。（c）Ｎ−ベンジル−Ｎ−メチル〔２−（４−ニトロフェニル）エチル〕アミン窒素下テトラヒドロフラン(270ml)中のＮ−ベンジル−Ｎ−メチル−４−ニトロフェニルアセトアミド(工程(b)、24.9ｇ、87.6ミリモル)の撹拌溶液に、1.0Ｍボラン−テトラヒドロフラン(245ml、 245ミリモル)を滴下添加した。反応混合物を２時間還流下に加熱し、次にメタノール（53ml）を滴下添加し、次に、水性2.5Ｎ塩酸（100ml）を慎重に添加した。得られた混合物を１時間還流し、次に、ロータリーエバポレーターで濃縮して有機溶媒を除去した。残存物に水を添加し、混合物を2.5Ｎ水酸化ナトリウム水溶液でpH 11まで塩基性化した。次に生成物を塩化メチレン中に３回抽出した。合せた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮してＮ− ベンジル−Ｎ−メチル〔２−（４−ニトロフェニル）エチル〕アミン23.7ｇ(100 ％)を得た。メタノール中に製造し、95％エタノール−エーテルから再結晶させた塩酸塩の融点は222〜４℃(分解)であった。（d）４−（２−((フェニルメチル)(メチル)アミノ)エチル）フェニルアミン 85％酢酸(250ml)中のＮ−ベンジル−Ｎ−メチル〔２−（４−ニトロフェニル）エチル〕アミン(3.9ｇ、14.4ミリモル)の溶液に、亜鉛粉（9.4ｇ、144ミリモル）を１回で添加した。反応混合物を30分間撹拌し、濾過し、濃縮した。残存物を水(50ml)に溶解し、溶液を2.5Ｎ水酸化ナトリウム水溶液で塩基性化し、混合物を塩化メチレンで数回抽出した。合せた有機層を硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して４−（２−((フェニル)(メチル)アミノ)エチル）フェニルアミン（3.41ｇ、98％）を得た。メタノール−酢酸エチルから形成した２塩酸塩の融点は275℃（分解）であった。（e）３−(４−（２−((フェニルメチル)(メチル)アミノ)エチル）フェニル)− １−ベンゾイル−２−チオ尿素極めて穏やかな還流下に予め加熱した乾燥アセトン（10ml）中のベンゾイルイソチオシアネート（1.67ml、12.4ミリモル）の溶液に、激しい還流を抑制できる程度の速度で急速に乾燥アセトン（5.0ml）中に溶解した工程(d)の生成物(2.23ｇ、9.28ミリモル)を添加した。反応混合物を30分間還流し、次に、激しく撹拌しながら氷上に注ぎこんだ。得られた固体を採取し、水で洗浄し、イソプロパノール（35ml）から再結晶させて３−（４−（２−((フェニルメチル)( メチル)アミノ)エチル）フェニル）−１−ベンゾイル−２−チオ尿素（2.2ｇ）を得た。（f）１−（４−（２−((フェニルメチル)(メチル)アミノ)エチル）フェニル） −２−チオ尿素３−(４−（２−(ベンジルメチルアミノ)エチル）フェニル)−１−ベンゾイル −２−チオ尿素（工程(e)、2.4ｇ、5.95ミリモル）および2.5Ｎ水酸化ナトリウム水溶液(20ml)の混合物を撹拌しながら35分間90℃に加熱した。次に温反応混合物を撹拌しながら水（60ml）に注ぎこんだ。生成物を塩化メチレンで３回抽出した。合せた抽出液を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上に乾燥し、濃縮乾固させて、組成の１−（４−（２−((フェニルメチル)(メチル)アミノ)エチル）フェニル）−２−チオ尿素1.71ｇを得た。生成物をベンゼンから結晶化させた。融点119 〜21.5℃。（g）Ｎ−（４−（２−((フェニルメチル)(メチル)アミノ)エチル）フェニル）カルバミミドチオイック酸エチルエステル１−（４−（２−((フェニルメチル)(メチル)アミノ)エチル）フェニル）−２ −チオ尿素（工程(f)、0.30ｇ）を200エタノール（2.5ml）に懸濁し、混合物をメタンスルホン酸（0.065ml）次いでエチルメタンスルホネート(0.12ml)で処理した。100℃で３時間の後、80％メタノール／20％水＋0.8％酢酸アンモニウムを用いたC18シリカ上のTL Cによれば生成物への変換は不完全であった。この時点で更にエチルメタンスルホネート（0.20ｇ）を添加し、混合物を１時間還流した。一夜撹拌した後、粗製の反応生成物を酢酸エチル（50ml）および水（50ml）で処理した。水層を炭酸ナトリウム（50ml）で処理し、ジエチルエーテル（20ml）で抽出した。残存する水層を重炭酸ナトリウム（１ｇ）で処理し、ジエチルエーテル(20ml)で抽出した。エーテル層はTLCによれば同一であり、これらを合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、蒸発させて、得られた遊離の塩基を、メタノール（１ml）中のマレイン酸（ 0.24ｇ）で処理し、酢酸エチル（４ml）次いでジエチルエーテル（25ml）で希釈し、油状物とした。溶媒を傾瀉し、得られた固体を熱イソプロパノール（20ml）に溶解し、−20℃に冷却した。得られた固体を採取し、風乾し、Ｎ−（４−（２ −((フェニルメチル)(メチル)アミノ)エチル）フェニル）カルバミミドチオイック酸エチルエステル0.34ｇを得た。融点136〜137℃。実施例２Ｎ−（４−（２−((フェニルメチル)(メチル)アミノ)エチル）フェニル）カルバミミドチオイック酸イソプロピルエステルジマレエート実施例１(f)の化合物（250mg、0.835ミリモル）およびイソプロパノール（6.0 ml）の撹拌混合物に、メタンスルホン酸(54.2μl、0.835ミリモル)を添加した。数分間撹拌した後、２−ヨードプロパン（250μl、2.51ミリモル）を添加した。反応混合物を24時間撹拌しながら還流した。エーテル(100ml)を冷却した反応混合物に添加し、生成物の塩を析出させた。透明な上澄み液を傾瀉して油状の残存物から分離させた。次に残存物を水（15ml）に溶解し、溶液をセライトに通して浄化した。透明な水溶液を重炭酸ナトリウムの飽和溶液で塩基性化した。生成物の遊離の塩基を塩化メチレン中に抽出し、溶液を無水硫酸マグネシウム上に乾燥し、溶媒を真空下に除去して油状物として生成物0.2688ｇ（94.3％）を得た。これをエタノール（3.0ml）に溶解し、マレイン酸（0.201ｇ）を添加し、混合物を加温して完全な溶液とした。エーテル(4.0ml)を添加し、結晶化を開始し、Ｎ−（４−（２ −((フェニルメチル)(メチル)アミノ)エチル）フェニル）カルバミミドチオイック酸イソプロピルエステルジマレエート338mgを得た。融点125〜7℃。実施例３Ｎ−（４−（２−(３−クロロベンジルアミノ)エチル）フェニル）カルバミミドチオイック酸エチルエステルジメタンスルホネート（a）３−クロロベンジル〔２−（４−ニトロフェニル）エチル〕アミンこの物質は実施例１の工程(a)〜(c)と類似の方法により製造した。（b）Ｎ−（３−クロロベンジル）−Ｎ−（２−（４−ニトロフェニル）エチル）トリフルオロアセトアミド塩化メチレン（15ml）中の工程(a)の生成物(5.82ｇ、20.0ミリモル)およびトリエチルアミン（3.21ml、23.0ミリモル）の撹拌溶液に、冷却し撹拌しながら無水トリフルオロ酢酸(4.63ｇ、22.0ミリモル)を滴下添加した。室温で1.5時間撹拌した後、反応混合物を水で洗浄し、無水硫酸マグネシウム上に乾燥し、濾過し、濃縮して濃厚な油状物としてＮ−（３−クロロベンジル）−Ｎ−(２−(４−ニトロフェニル )エチル)トリフルオロアセトアミド7.7ｇを得た。（c）Ｎ−（３−クロロベンジル）−Ｎ−（２−（４−アミノフェニル）エチル）トリフルオロアセトアミド酢酸エチル（100ml）中の工程(b)の生成物(3.89ｇ、10.05ミリモル)の溶液に、５％Pd/Cを添加した。理論値の量の水素が取り込まれるまで1.5時間50psigで混合物を水素化した。触媒を濾過し、濾液を濃縮して油状物とした。これをクロマトグラフィー(シリカゲル、塩化メチレン：ｎ−ヘキサン(１：１))で精製し、濃厚な油状物として純粋なＮ−(３−クロロベンジル)−Ｎ−(２−（４−アミノフェニル）エチル)トリフルオロアセトアミド2.33ｇを得た。（d）Ｎ−（２−（４−（３−ベンゾイルチオウレイド）フェニル）エチル）− Ｎ−（３−クロロベンジル）トリフルオロアセトアミドこの物質は実施例１の工程(e)の方法と類似の方法により工程(c)の生成物から製造した。生成物は濃厚な油状物として単離した。（e）１−（４−（２−（３−クロロベンジルアミノ）エチル）フェニル）−２ −チオ尿素この物質は実施例１の工程(f)の方法と類似の方法により工程(d)の生成物から製造した。生成物はクロマトグラフィー(シリカゲル、エーテル中２％アンモニア飽和メタノール)により精製し、純粋な１−（４−（２−（３−クロロベンジルアミノ）エチル）フェニル）−２−チオ尿素0.5ｇを得た。これをベンゼンから再結晶させた。融点132〜４℃。（f）Ｎ−（４−（２−(３−クロロベンジルアミノ)エチル）フェニル）カルバミミドチオイック酸エチルエステルジメタンスルホネート工程(e)の生成物（272.5mg、0.852ミリモル）およびエタノール（2.6ml）の撹拌混合物にメタンスルホン酸(81.88mg、0.852ミリモル)を添加した。数分間撹拌した後、エチルメタンスルホネート(211.6mg、1.70ミリモル)を添加した。３時間撹拌しながら反応混合物を還流した。更にエチルメタンスルホネート(117mg) を添加し、還流を２時間継続して反応を終了させた。冷却により、生成物は結晶化して濃厚な塊となった。エーテルを添加し、生成物を濾過して単離し、エタノール−エーテルから再結晶させて、Ｎ−（４−（２−(３−クロロベンジルアミノ)エチル）フェニル）カルバミミドチオイック酸エチルエステルジメタンスルホネート407.3mgを得た。融点173〜５℃。実施例４Ｎ−(４−（２−(1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−２−イル)エチル）フェニル)カルバミミドチオイック酸エチルエステルジマレエート（a）２−(４−ニトロフェニル)−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン本化合物は、実施例１の工程(a)〜(c)の方法と類似の方法を用いて1,2,3,4− テトラヒドロイソキノリンから製造した。（b）２−（４−アミノフェネチル）−1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン２塩酸塩 95％エタノール（150ml）中の工程(a)の生成物(11.0g、39.0ミリモル)、濃塩酸（7.5ml）および水（50ml）よりなる溶液に、10％ Pd/C(1.0ｇ)を添加した。理論値の量の水素が取り込まれるまで、混合物を2.5時間50psigで水素化した。触媒を濾過し、濾液を濃縮して固体残存物とした。これを無水エタノール（75ml）中で分解し、冷却し、濾過し、風乾した。２塩酸塩11 .4ｇ(90％)が得られた。（c）１−（４−（２−(1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−２−イル)エチル）フェニル）−２−チオ尿素本化合物は、実施例１の工程(e)〜(f)の方法と類似の方法を用いて工程(b)の生成物(遊離塩基)から製造した。生成物を塩化メチレンから結晶化させた。融点 165〜９℃。（d）Ｎ−（４−（２−(1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−２−イル)エチル）フェニル）カルバミミドチオイック酸エチルエステルジマレエート本化合物は、実施例３の工程(f)の方法と類似の方法を用いて工程(c)の生成物から製造した。反応混合物を後処理して遊離の塩基として油状物を得た。これをクロマトグラフィー（シリカゲル、塩化メチレン中20％アンモニウム飽和エーテル）で精製した。ジマレエート塩をエタノール中に製造し、エーテルで析出させた。融点123〜５℃。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＣ０７Ｄ 217/18 Ｃ０７Ｄ 217/18 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．下記式Ｉ〔式中、ＤはC1〜6アルキルであり； R¹は水素、C1〜6アルキルまたはハロゲンであり； R²およびR³は独立して水素、C1〜6アルキル、-(CH₂)_rAまたは-(CH₂)_mOAであるか；または-NR²R³は一緒になって１−インダニルまたは1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリニルであるか；またはフェニルまたはC1〜6アルキルで場合により４ −置換されたピペラジニルであり；ＡはフェニルまたはＯ、ＳおよびＮ−から選択されるヘテロ原子１〜４個を有する５員のヘテロ芳香環であり、その２つの基はC1〜6アルキル、ハロゲンおよびトリフルオロメチルから選択される基の１つ以上で場合により置換されており；ｐ、ｒおよびｍは独立して０〜４の整数を示し；そして、ＸはＯまたは結合であるが；ただし（a）ＸがＯである場合は、ｐは０または１ではなく；（b）R¹が水素であり、Ｄがメチルであり、Ｘがパラ位でフェニル環に連結した結合であり、そして、ｐが０である場合は、R²およびR³の両者はメチルではない〕の化合物または薬学的に許容されるその塩。２．Ｘが結合である請求項１記載の式Ｉの化合物。３．Ｄがエチルまたはプロピルである請求項１または２記載の式Ｉの化合物。４．Ｄがエチルである請求項３記載の式Ｉの化合物。５．ｐが１〜３の整数である前記請求項の何れか１項に記載の式Ｉの化合物。６．R²およびR³が独立して、水素、C1〜6アルキルまたは-(CH₂)_rAであるか、または-NR²R³が一緒になって1,2,3,４−テトラヒドロイソキノリニルを表わす前記請求項の何れか１項に記載の式Ｉの化合物。７．Ｎ−（４−（２−((フェニルメチル)(メチル)アミノ)エチル）フェニル）カルバミミドチオイック酸エチルエステル；Ｎ−（４−（２−((フェニルメチル)(メチル)アミノ)エチル）フェニル）カルバミミドチオイック酸イソプロピルエステル；Ｎ−（４−（２−（３−クロロベンジルアミノ）エチル）フェニル）カルバミミドチオイック酸エチルエステル；Ｎ−（４−（２−（1,2,3,4−テトラヒドロイソキノリン−２−イル）エチル）フェニル）カルバミミドチオイック酸エチルエステル；または薬学的に許容されるその塩である式Ｉの化合物。８．薬剤として使用する条件(ｂ)を伴わない前記請求項の何れか１項に記載の式Ｉの化合物。９．薬学的に許容される希釈剤または担体との混合物としての、条件(ｂ)を伴わない、前記請求項１〜７の何れか１項に記載の式Ｉの化合物を含有する薬学的組成物。 10．神経変性性疾患または偏頭痛の治療または予防、またはアヘン類またはジアゼピン類への寛容性形成の防止および退行、または、薬物中毒の治療のための薬剤の製造における、条件(ｂ)を伴わない請求項１〜７の何れか１項に記載の式Ｉの化合物の使用。 11．患者に条件(ｂ)を伴わない請求項１〜７の何れか１項に記載の式Ｉの化合物の治療有効量を投与することを包含する、神経変性性疾患または偏頭痛の治療または予防、またはアヘン類またはジアゼピン類への寛容性形成の防止および退行、または、薬物中毒の治療のための方法。 12．下記工程：（a）下記式II 〔式中R¹、R²、R³、ｐおよびＸは請求項１に記載の通りである〕の化合物を下記式III D-L III 〔式中Ｄは請求項１に記載の通り定義され、Ｌは脱離基である〕の化合物と反応させ、（b）R²およびR³が共に水素である式Ｉの相当する化合物を下記式IV R⁴-L IV 〔式中R⁴はC1〜6アルキル、-(CH₂)_rAまたは-(CH₂)_mOAであり、Ｌは脱離基である〕の化合物と反応させることによりR²およびR³の少なくとも一方がC1〜6アルキル、-(CH₂)_rAまたは-(CH₂)_mOAである式Ｉの化合物を製造し、（c）下記式Ｖ〔式中Ｄ、Ｘ、R¹、R²、R³およびｐは請求項１に記載の通りである〕の化合物を還元することによりｐが１〜４の整数である式Ｉの化合物を製造し、（d）下記式VI 〔式中R¹、Ｄ、ｐおよびＸは請求項１に記載の通りである〕の相当する化合物を還元することによりR²およびR³の両方が水素である式Ｉの化合物を製造し、（e）下記式VII 〔式中R¹、R₃、Ｄ、Ｘおよびｐは請求項１に記載の通りである〕の化合物を還元することによりR²が水素でありｐが２〜４の整数である式Ｉの化合物を製造し、（f）下記式VIII 〔式中Ｘ、R¹、Ａ、Ｄ、ｒおよびｐは請求項１に記載の通りである〕の化合物を還元することによりR²およびR³の一方が水素であり、他方が-(CH₂)_rA〔ｒは１〜４の整数〕である式Ｉの化合物を製造し、（g）下記式IX 〔式中Ｘ、R¹、Ａ、Ｄ、ｐおよびｍは請求項１に記載の通りである〕の化合物を還元することによりR²およびR³の一方が水素であり、他方が-(CH₂)_mOA〔ｍは２〜４の整数〕である式Ｉの化合物を製造し、（h）下記式Ｘ〔式中Ｘ、R¹、Ａ、Ｄ、ｐおよびｒは請求項１に記載の通りである〕の化合物を還元することによりR²およびR³の一方が水素であり、他方が-(CH₂)_rA〔ｒは１〜４の整数〕である式Ｉの化合物を製造し、（i）下記式XI 〔式中Ｘ、R¹、Ａ、Ｄ、ｐおよびｍは請求項１に記載の通りである〕の化合物を還元することによりR²およびR³の一方が水素であり、他方が-(CH₂ )_mA〔ｍは２〜４の整数〕である式Ｉの化合物を製造し、そして、所望により、得られた式Ｉの化合物またはその塩を、薬学的に許容される別の塩に変換するか、またはその逆の変換を行なうこと、を包含する請求項１記載の式Ｉの化合物および薬学的に許容されるその塩の調製方法。 13．下記式〔式中R¹、R²、R³、ｐおよびＸは請求項１に記載の通りである〕の化合物、またはその塩。ただしR¹が水素であり、Ｘがパラ位でフェニル環に連結した結合であり、そして、ｐが０である場合は、R²およびR³が共にメチルではないものとする。