JPH10504535A

JPH10504535A - 血小板活性化因子レセプターを含む細胞標的への肺炎球菌粘着のモジュレーター及びその使用

Info

Publication number: JPH10504535A
Application number: JP8502513A
Authority: JP
Inventors: エレインアイトゥオマネン; ダイアナアールカンデル; ノーマピージェラード
Original assignee: ザロックフェラーユニヴァーシティ; ベスイスラエルホスピタルアソシエイション
Priority date: 1994-06-20
Filing date: 1995-06-19
Publication date: 1998-05-06
Also published as: WO1995035112A2; EP0762884A1; AU701347B2; CA2193362A1; US5455240A; KR970703775A; WO1995035112A3; AU2775895A

Abstract

(57)【要約】本発明は、肺炎球菌感染症を予防するための組成物及び方法に関する。特に、本発明は、活性化ヒト細胞上のストレプトコッカス・ニューモニエの主要な受容体の同定及びそれに基づく治療用組成物及び方法に関する。特に、本発明は、血小板活性化因子（ＰＡＦ）レセプターが活性化肺上皮及び静脈内皮（即ち、宿主）細胞への肺炎球菌粘着の粘着性リガンドであるという発見に関する。従って、本発明は、血小板活性化因子レセプター拮抗剤を投与することによるストレプトコッカス・ニューモニエによる感染症の予防又は治療方法に関する。本発明は、更に、活性化細胞への粘着がかかる活性化細胞上に見られる糖質リガンドを含むという認識に関する。従って、肺炎球菌粘着の阻害方法は、更に、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンモチーフを含む糖質量を投与することを特徴とするものである。静止肺上皮細胞及び静止静脈内皮細胞は、異なる糖質モチーフを含む２種類のレセプターを有することがわかった。従って、本発明は、更に、二糖Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ１−４Ｇａｌモチーフ、二糖Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ１−３Ｇａｌモチーフ及びその混合物を含む糖質からなる群より選ばれた第２糖質量を投与することを提供する。更に、本発明は、肺炎球菌のヒト細胞への結合を阻害するような物質を含む医薬組成物を提供する。個々の実施態様においては、血小板活性化因子レセプター拮抗剤及び二糖が、活性化した肺上皮細胞及び静脈内皮細胞並びに試験管内で該血小板活性化因子レセプターをトランスフェクトした細胞への肺炎球菌の結合を阻害することが示されている。

Description

【発明の詳細な説明】血小板活性化因子レセプターを含む細胞標的への肺炎球菌粘着のモジュレーター及びその使用本発明に至る研究は、国立予防衛生研究所から与えられた補助金第A1-27913号によって一部支えられたものである。従って、本発明のある一定の権利は政府が所有する。発明の分野本発明は、肺炎球菌感染症を予防するための組成物及び方法に関する。特に、本発明は、活性化ヒト細胞上のストレプトコッカス・ニューモニエ(Streptococc us pneumoniae)に対する主要な受容体の同定及びそれに基づく診断及び治療用組成物及び方法に関する。発明の背景ストレプトコッカス・ニューモニエ(Streptococcus pneumoniae)は、大葉性肺炎、敗血症及び髄膜炎の主因であるグラム陽性病原体である(Burmanら，1985，R ev．Infect．Dis．7:133)。その病原菌は、発展途上国の子供たちにおいて細菌性肺炎の最も高頻度の原因であり、成人においては７６％までの原因とみなされている(Pennington，1986，Am．Fam．Physician 33：53; Johnston，1991，Revs ．Infect．Dis．13(Suppl．6):S509; Musher，1992，Clin．Infect．Dis．14:80 1)。肺炎球菌は、一般に、そこで上皮細胞に付着する鼻咽腔を通って宿主に入り、ある場合には、数ヵ月間持続する（Andersonら，1981，Infect．Immun．32:31 1）。実験モデルにおいては、肺炎への進行は、肺炎球菌のエアゾル化による拡散及び鼻咽腔から下部気道への輸送に起因する。肺炎の初期の病変は、肺炎球菌を含む液体の充満した肺胞が特徴であり、肺炎球菌が肺胞壁に並んでいるのがよく見られ、特定の相互作用を暗示する分布が肺胞間隙の保持を促進する(Wood，1941，J．Exp．Med．73:222)。肺炎球菌は、肺胞間隙から血液循環に接近しやすく、肺胞毛細血管の血管上皮細胞を交差する攻撃力を示している(Rake，1936，J．Exp．Med．63:191)。真核細胞への細菌粘着には、一般に、宿主細胞の複合糖質を認識する特定の細菌タンパク質（接着物）が必要である。肺炎球菌のヒト口腔上皮への粘着は、二糖Ｎ−アセチル−グルコサミン−β１−３−ガラクトース（ＧｌｃＮＡｃβ１− ３Ｇａｌ）の存在下に阻止され、その糖質はおそらく鼻咽頭輸送に適切なレセプターとして働くことができることを示している（Andersonら，1983，J．Exp．Me d．158:559）。細胞の種類が肺胞間隙において肺炎球菌粘着を支持することは正確には依然として不明である。肺炎球菌は、末端又は内部ＧａｌＮＡｃβ１−４Ｇａｌを含む精製複合糖質、肺分泌物及び肺組織において一般的な構造に結合することが報告された(Krivanら，1988，Proc．Natl．Acad．Sci．USA 85:6157)。その構造は、鼻咽頭レセプターとして提唱したものと立体化学が著しく異なっている。鼻咽腔、肺及び血管上皮細胞への付着を仲介することができる肺炎球菌接着物の同定は不明である。実験菌血症を引き起こしやすい能力と一致して、血管内皮細胞への肺炎球菌粘着は、用量依存性であり、迅速でありかつ莢膜型に依存しないことが示された(Geelenら，1993，Infec．Immunol．61:1538)。細胞壁成分とタンパク質成分の双方がほぼ等しくその会合に寄与するが、特定の肺炎球菌リガンドは依然として同定されていない(Tuomanenら，1985，J．Infect．Dis．151:8 59)。侵入性肺炎球菌感染症は、主として肺炎球菌細胞壁成分によって引き起こされる特に激しい炎症が特徴である(Tuomanenら，1985，J．Infect．Dis．151:535; 上記Tuomanenら，1985; Tuomanenら，1987，Am．Rev．Respir．Dis．135:869)。肺炎球菌テイコ酸及びリポテイコ酸は細胞壁成分全ての中で最も高い炎症能を有し(Cabellosら，1992，J．Clin．Invest．90:612)、その生物活性は特異な成分: ホスホリルコリンの存在に決定的に依存することが示された(Tomasz & Saukkone n，1989，Paediatr．Infect．Dis．J．8:902)。ホスホリルコリンは、また、炎症性伝達因子の生物活性の重要な決定因子、血小板活性化因子（ＰＡＦ）であり (Wissnerら，1986，J．Med．Chem．29:329)、髄膜炎及び肺炎の発病において肺炎球菌とＰＡＦとのユニークな炎症前の関係が示されている（上記、Cabellosら）。上述したように、肺炎球菌は、静止血管内皮細胞及び静止肺ＩＩ型上皮細胞の精製した形の或いはそれらの表面に存在するＮ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン β１−４ガラクトース（ＧａｌＮＡｃβ１−４Ｇａｌ）又はＧａｌＮＡｃβ１− ３Ｇａｌを含む複合糖質に付着する(Krivanら，1988，Proc．Natl．Acad．Sci． USA 85:6157)。しかしながら、感染過程で腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）及びインターロイキン−１（ＩＬ−１）のような炎症性サイトカインの局所的生成は細胞上の潜在的レセプターの提示を劇的に変えることができる(Rozdzinskiら，1993，J． Exp．Med．178:917; van de Kar ら，1992，Blood 11:2725)。例えば、血管内皮細胞のＴＮＦ及びＩＬ−１による活性化は、ＰＡＦ合成を刺激し(Bussolinoら， 1988，Biochim．Biophys．Acta 927:43; Chao & Olson，1993，Biochem．J．292 :617; Zimmermanら，1992，Immunol．Today 13:93-100)、Ｅ−セレクチン（上記、Rozdzinskiら）及びグロボトリオシルセラミド（上記、van de Karら）を含む種々の細胞表面レセプターの発現を亢進する。従って、細胞粘着のリガンドを同定する技術が求められている。炎症性伝達因子によって活性化された細胞上のかかるリガンドを同定する技術が特に求められている。肺炎球菌感染症に伴う炎症過程における肺炎球菌の役割を確認することも更に求められている。本明細書中の参考文献の引用は、本発明に対する従来技術であることを許容するものとして解釈されるべきではない。発明の要約本発明は、血小板活性化因子（ＰＡＦ）レセプターが活性化肺上皮細胞及び静脈内皮（即ち、宿主）細胞への肺炎球菌粘着のリガンドであるという発見に関する。また、ＰＡＦレセプターへの肺炎球菌結合がレセプターを活性化し、炎症を亢進することができることがわかった。従って、本発明は、ストレプトコッカス・ニューモニエによる感染症の予防又は治療方法であって、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害しかつかかる結合に続いて起こるＰＡＦレセプターの活性化を阻害するのに有効な量の血小板活性化因子レセプターの拮抗剤をかかる治療を必要としていると思われる患者に投与することを特徴とする方法に関する。更に好ましくは、ＰＡＦレセプター拮抗剤は、粘着肺炎球菌を宿主細胞から溶離（即ち、除去又は剥離）するのに有効である。個々の実施態様においては、血小板活性化因子レセプターの拮抗剤は、Ｌ６５９,９８９、Ｌ６５２,７３１、ＷＥＢ２０８６、カドスレノン及びＦＲ７２１１２からなる群より選ばれる。追加の拮抗剤は、Hwang & Lam，1991，Lipids 26:1148-53，Hwang ら，1989，Mol．P harmacol．35:48-58に記載されており、参考として本明細書に全て特に引用する。肺炎球菌のＰＡＦへの結合の阻害は、肺炎球菌の上皮組織及び内皮細胞を横切る移動を防止することが重要である。細菌の鼻咽腔及び肺から血液への移動は、菌血症、敗血症及び髄膜炎を引き起こす全身性細菌感染症をまねくことがある。ＰＡＦレセプターによる活性化は、特に血管透過性を亢進することになる炎症を引き起こすか或いは悪化させることによるこれらの病理学的経路を更に複雑にしている(例えば、Tuomanenら，1985，J．Infect．Dis．151:535-540)。本発明は、更に、活性化細胞への粘着がかかる活性化細胞上に見られた糖質リガンドを含むという認識に関する。従って、肺炎球菌粘着を阻害する方法は、S. ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量のＮ−アセチル−Ｄ− グルコサミンモチーフを含む糖質を投与することを特徴とする方法である。個々の実施態様においては、糖質はＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンである。好ましくは、かかる方法はＰＡＦレセプター拮抗剤の投与と共に用いられる。静止肺上皮細胞及び静止静脈内皮細胞は、異なる糖質モチーフを含む２種類のレセプターを有することがわかった。即ち、本発明は、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量の二糖Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ １−４Ｇａｌモチーフを含む糖質、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ１−３Ｇａｌモチーフを含む糖質及びその混合物からなる群より選ばれた第２糖質を投与することを提供する。個々の実施態様においては、第２糖質は、フォスマン糖脂質、グロボシド、アシアロ−ＧＭ１及びアシアロ−ＧＭ２からなる群より選ばれる。肺炎球菌の宿主細胞への結合を阻害する方法は、更に、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量のマンノース、Ｎ−アセチル−ガラクトース、マンノース−Ｄ−マンノース及びメチル−α−Ｄ−マンノピラノシドからなる群より選ばれた糖質を投与することを特徴とする方法である。好適態様においては、糖質が本発明の方法に用いられる場合、１種又は複数種の糖質は多価性である。１実施態様においては、投与は噴霧及び吸入を含む。例えば、噴霧化は微粒化により行われる。また、本発明は、非経口投与、例えば、静脈注射を提供する。他の実施態様においては、ＰＡＦレセプター拮抗剤は経口投与される。本発明は、更に、ＰＡＦレセプター発現がサイトカイン腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）及びインターロイキン−１（ＩＬ−１）のような炎症性伝達因子で活性化された宿主細胞において亢進することを確認する。肺炎球菌は、特に、肺炎球菌壁成分テイコ酸及びリポテイコ酸の活性により炎症応答を直接刺激する。即ち、本発明は、更に、血小板活性化因子レセプターの発現を阻害するのに有効な炎症阻害剤を投与することを企図する。個々の態様においては、炎症阻害剤は、腫瘍壊死因子に対する中和抗体、可溶性腫瘍壊死因子中和レセプター、インターロイキン −１に対する中和抗体及び可溶性インターロイキン−１中和レセプターからなる群より選ばれる。治療方法のほかに、本発明は、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量の血小板活性化因子レセプター拮抗剤、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量のＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンモチーフを含む糖質及び薬学的に許容しうる担体を含む医薬組成物を提供する。血小板活性化因子レセプターの拮抗剤は、Ｌ６５９,９８９、Ｌ６５２,７３１、カドスレノン、ＦＲ７２１１２及びＷＥＢ２０８６からなる群より選ばれる；糖質はＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンとすることができる。別の実施態様においては、医薬組成物は、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量の二糖Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ１−３Ｇａｌモチーフを含む糖質及び二糖Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ１−４Ｇａｌモチーフを含む糖質からなる群より選ばれた第２糖質を含む。第２糖質は、フォスマン糖脂質、グロボシド、アシアロ−ＧＭ１及びアシアロ−ＧＭ２からなる群より選ばれる。別の実施態様においては、医薬組成物は、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量のマンノース、Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトース、マンノース−Ｄ−マンノース及びメチル−α−Ｄ−マンノピラノシドからなる群より選ばれた糖質を含む。好ましくは、１種又は複数種の糖質を含む医薬組成物においては、１種又は複数種の糖質は多価性である。個々の態様においては、本発明は、特に、医薬組成物が分散媒を含むエアゾル剤である医薬組成物を提供する。例えば、分散媒は、界面活性剤とすることができる。１実施態様においては、医薬組成物は、ＰＡＦレセプターの拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質が微細粉末で存在する乾燥粉末エアゾル剤である。乾燥粉末エアゾル剤は、更に、増量剤を含むことができる。他の実施態様においては、医薬組成物は、薬学的に許容しうる希釈剤を更に含む液体エアゾル剤である。希釈剤は、滅菌水、食塩水、緩衝化食塩水及びデキストロース液からなる群より選ばれる。個々の態様においては、本発明は、ＰＡＦレセプターの拮抗剤を含むエアゾル剤の医薬組成物を提供する。かかる製剤は、乾燥粉末エアゾル剤又は液体エアゾル剤とすることができる。かかるエアゾル剤は、更に、Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミンモチーフを含む糖質を含むことができる。他の実施態様においては、本組成物は、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な二糖Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ１−３Ｇａｌモチーフを含む糖質及び二糖Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ１−４Ｇａｌモチーフを含む糖質からなる群より選ばれた第２糖質を含むことができる。本発明の主要な目的は、活性化宿主細胞、特に肺上皮細胞及び静脈内皮細胞への肺炎球菌粘着を阻害するための方法及び関連組成物を提供することである。本発明の目的は、更に、ＰＡＦレセプターの肺炎球菌活性化を阻害することである。本発明のこれらの及び他の目的は、図面及び下記の詳細な説明によって更に完全に理解されるであろう。図面の簡単な説明図１肺炎球菌のサイトカイン刺激ヒト培養ＩＩ型肺細胞（Ａ）及び血管内皮細胞（Ｂ）への粘着。６０ウェルテラサキ皿中の単層を、ＩＬ−１α(ＩＩ型肺細胞；５ ng/ml、３７℃で４時間；Rozdzinskiら，1993，J．Exp．Med．178:917 )及びＴＮＦα（血管内皮細胞；１０ ng/ml、３７℃で３時間；Elias ら，1990 ，Am．J．Respir．Cell．Mol．Biol．3:13）で刺激した。肺炎球菌Ｒ６及びＡＩＩを３％ヒツジ血を含有するトリプチカーゼ大豆寒天上で１８時間培養し、フルオレセインイソチオシアネートで標識し、１０⁵〜１０⁷cfu/mlに調整し（Geelen ら，1993，Infect．Immun．61:1538）、単層と共インキュベートした。サイトカイン非存在下の対照粘着は破線(-----)で示されている。サイトカイン刺激（● ）及び静止（○）単層へ粘着する細菌を、１００肺細胞又は内皮細胞あたりの付着細菌数として求めた。結果は、少なくとも６回の独立した実験の２ウェルずつの平均±ＳＤである。図２ＩＬ−１α刺激培養ヒトＩＩ型肺細胞（Ａ）及びＴＮＦα刺激血管内皮細胞（Ｂ）への肺炎球菌粘着に関するＰＡＦレセプター拮抗剤の影響。サイトカー拮抗剤Ｌ６５９,９８９（◆）及びＷＥＢ２０８６（■）とインキュベート（１０分、３７℃）し、Ｒ６肺炎球菌（１０⁷cfu/ml）を３７℃で３０分間単層に付着させた。サイトカイン刺激の非存在下の対照粘着は破線(-----)で示されている。粘着細菌は、１００肺細胞又は内皮細胞あたりの付着細菌数として求めた。結果は、少なくとも６回の独立した実験の２ウェルずつの平均±ＳＤである。＊ｐ＜０.０５は、拮抗剤の非存在下のサイトカイン刺激と比較した。図３ＰＡＦレセプター、レセプター脱グリコシル、拮抗剤ＷＥＢ２０８６及びＬ６５９,９８９(１μM)への肺炎球菌粘着及び肺炎球菌細胞壁からホスホリルコリンの除去に関する影響(Tuomanenら，1985，J．Infect．Dis．151:859)。図４Ｒ６の静止及びサイトカイン刺激ヒト培養ＩＩ型肺細胞（Ａ）及び血管内皮細胞（Ｂ）への粘着に関する単糖の影響。Ｒ６（１０⁷cfu/ml）を種々の単糖に曝露（１５分、室温）し、次に静止単層（□）或いはサイトカイン刺激単層（■）と３０分間共インキュベートした。指定した糖への肺炎球菌粘着は、糖の非存在下の１００宿主細胞への細菌粘着−糖の存在下の１００宿主細胞への細菌粘着として定義した。結果は、少なくとも６回の独立した実験における２ウェルずつの平均±ＳＤである。Ｇｌｃ＝Ｄ−グルコース；Ｇａｌ＝Ｄ−ガラクトース、Ｆｕｃ＝Ｌ−フコース、ＧａｌＮＡｃ＝Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミン、ＧｌｃＮＡｃ＝Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン、Ｍａｎ＝Ｄ−マンノース、ＮＡＮＡ＝シアル酸、Ｌａｃ＝ラクトース及び２−ＡＤＧＧ＝２−アセトアミド− ２−デオキシ−３−Ｏ−Ｂ−Ｄ−ガラクトピラノシル−Ｄ−ガラクトピラノース。図５サイトカイン刺激単層上の肺炎球菌複合糖質レセプター。ＧａｌＮＡｃ β１−４Ｇａｌ集団に粘着する肺炎球菌数は、アシアロ−ＧＭ２（□）で定義し、ＧａｌＮＡｃβ１−３Ｇａｌ集団に粘着する肺炎球菌数は、グロボシド（◇）で定義した。１種以上のレセプターにおいて糖質特異性が含まれるかを定義するために、ＧｌｃＮＡｃ（○）＋グロボシド（◆）或いはアシアロ−ＧＭ２（■）の２成分混合物の各々の糖質単独より大きい程度まで肺炎球菌粘着を減じる能力を評価した。最終濃度は、試験した単糖又は同量の２種の糖から構成された。ＴＮＦα刺激単層への対照粘着は、破線(-----)で示されている。＊ｐ＜０.０５はアシアロ−ＧＭ２又はＧｌｃＮＡｃ単独と比較した。各々の指定した糖への肺炎球菌粘着は、糖の非存在下の１００宿主細胞への細菌粘着−糖存在下の１００宿主細胞への細菌粘着から求めた。結果は、少なくとも６回の独立した実験における２ウェルずつの平均±ＳＤである。図６肺炎球菌はＰＡＦレセプターを活性化する。単層内のＣＯＳ細胞を、対照、血小板活性化因子（１００mM）、肺炎球菌（１０⁸細菌／ml）、エタノールアミン培養肺炎球菌（１０⁸細菌／ml）、ＰＡＦ＋Ｌ６５９,９８９及び肺炎球菌＋Ｌ６５９,９８９で処理した。Ｈ³のイノシトールトリホスフェートへの取り込みレベルを検出することにより活性化を測定した。バックグラウンドより大きい率として示されている。発明の詳細な説明肺炎及び菌血症の過程で、肺炎球菌が肺上皮細胞及び血管内皮細胞に付着し活性化することは既知である。ヒト静脈内皮細胞及びＩＩ型肺細胞のサイトカイン活性化は、肺炎球菌粘着の著しい亢進を引き起こす。本発明は、一部には、肺炎球菌の活性化肺上皮及び血管内皮への結合亢進が血小板活性化因子（ＰＡＦ）レセプター拮抗剤の存在下に消失したという予期しない発見に基づく。一例として、ＰＡＦレセプターをトランスフェクトするときに、ヒト腎上皮細胞が特定のレセプター活性と一致した肺炎球菌粘着支持能を獲得した。ＰＡＦ、ＧｌｃＮＡｃ、ＰＡＦレセプター拮抗剤の存在又はトランスフェクトしたＰＡＦレセプターについて単一のグリコシル化部位を消失する部位特異的変異が肺炎球菌結合の劇的な低下をもたらすことも見出された。活性化ＩＩ型肺細胞、血管内皮及びトランスフェクト細胞への粘着は、細菌表面上のホスホリルコリンに依存し、ＰＡＦのホスホリルコリン部分のようなテイコ酸のユニークな成分が肺炎球菌のＰＡＦレセプターへの標的であることが示された。従って、本発明は、S.ニューモニエによる感染症を治療又は予防するための組成物及び方法に関する。上述したように、本発明は、肺炎球菌が腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）及びインターロイキン（ＩＬ−１）のような炎症性伝達因子で活性化された肺上皮細胞及び静脈内皮細胞によって発現される血小板活性化因子レセプターを認識、結合及び活性化するという発見に基づく。本発明は、更に、かかる細胞の活性化が肺炎球菌粘着を仲介するＧｌｃＮＡｃ糖質部分の発現に付随するという発見に基づくものであり、ＧｌｃＮＡｃの特性は本発明の以前には認識されていなかった。本発明は、更に、肺炎球菌が少なくとも２種の他の異なる糖質モチーフと結合するという認識に関し、そのうちの１種は最近認識されたばかりである。本発明のその後者の態様は、Tuomanen & Cundellによる“肺細胞及び血管細胞への肺炎球菌粘着のモジュレーター並びに診断及び治療上の適用”と称する 1994年６月６日出願の同時係属出願第08/254,577号、代理人整理番号第 600-1-0 84号、以後“Tuomanen & Cundell”、で更に十分に開発されており、この出願を参考として本明細書に全て特に引用する。個々の実施態様においては、本発明は、肺炎球菌の粘着を阻害すること又は粘着肺炎球菌を肺上皮細胞及び静脈内皮細胞から溶離することを提供する。本発明者らは、血小板活性化因子（ＰＡＦ）レセプターが肺炎球菌内のホスホリルコリン物質--細菌細胞壁のテイコ酸及びリポテイコ酸部分と相互作用することを発見した。本発明者らは、更に、肺炎球菌の肺上皮細胞及び血管内皮細胞のような宿主細胞細胞への粘着においてＧａｌＮＡｃβ１−３Ｇａｌ含有糖質及びＰＡＦレセプターの糖質群の役割を発見した。更に、本発明者らは、細菌のインターナリゼーションがＰＡＦレセプターへの結合と関連があることを見出した。そのインターナリゼーションは、内皮及び上皮への又はそれらを横切る移動経路を細菌に与えると考えられ、全身感染を引き起し、菌血症、敗血症及び髄膜炎をまねくことがある。従って、本発明は、抗生物質耐性菌及び抗生物質感受性菌に対して効果的な肺炎球菌感染症及び発病を予防する強力な手段を提供する。本発明をより理解するために、いくつかの語句の定義が下記に示される；本発明の態様−−ＰＡＦレセプター拮抗剤；ＰＡＦレセプター発現阻害剤；糖質；治療用組成物及び方法；及び実施例も示される。本発明は、一部には、当該技術の範囲内で慣用の分子生物学、微生物学及び組換えＤＮＡ技術に関するので、かかる技術は文献に十分に説明されている。例えば、Sambrook，Fritsch & Maniatis，分子クローニング：実験マニュアル，Sec ．Ed．(1989)Cold Spring Harbor Laboratory Press，Cold Spring Harbor，ニューヨーク(本明細書では“Sambrookら，1989”); ＤＮＡクローニング：実際的方法，Vol．I & II(D.N．Glovered．1985): オリゴヌクレオチド合成(M.J．Gait ed．1984);核酸ハイブリド形成[B.D．Hames & S.J．Higgins eds．(1985)];転写と翻訳[B.D．Hames & S.J．Higgins eds．(1984)]; 動物細胞培養[R.I.Freshney ，ed．(1986)]; 固定化細胞と酵素[IRL Press，(1986)]; B．Perbal，分子クローニングの実際の手引き（1984）参照。 “Ａ”(ここで“Ａ”はＰＡＦレセプター拮抗剤、タンパク質、糖質等の単一分子である)を含む組成物は、組成物中組成物の成分（Ａ及びＢが属する種類のカテゴリーに左右される）の少なくとも約７５重量％が“Ａ”である場合、実質的に“Ｂ”(ここで“Ｂ”は１種以上の混入する分子を含む)を含まない。“Ａ” は、組成物中Ａ＋Ｂの物質の好ましくは少なくとも約９０重量％、最も好ましくは少なくとも約９９重量％を含んでいる。また、実質的に混入を含まない組成物は、問題の物質の活性又は特性を有する単一の分子量物質のみを含むことが好ましい。 “薬学的に許容しうる”という語は、生理的に許容しかつヒトに投与した場合に典型的には胃の不調、めまい等のアレルギー又は同様の困った反応を生じない分子物質及び組成物を意味する。好ましくは、本明細書に用いられる“薬学的に許容しうる”という語は、連邦政府又は州政府の統制機関によって承認された又は米国薬局方又は動物、特にヒトに使用するための他の一般に認知された薬種に載っていることを意味する。“担体”という語は、化合物が投与される希釈剤、アジュバント、賦形剤又は伝達体を意味する。かかる医薬担体は、水及び石油、動物、植物又は合成由来のものを含む落花生油、大豆油、鉱油、ごま油等の油のような滅菌液体とすることができる。水又は水溶液の塩類溶液並びにデキストロース及びグリセロール水溶液は、特に注射用溶液の担体として用いられることが好ましい。本明細書に用いられる“宿主細胞”という語は、肺炎球菌によってコロニーを形成することができる細胞、例えば、肺上皮細胞及び静脈内皮細胞を意味する。本明細書に用いられる“肺投与”という語は、本発明の製剤の吸入による肺への投与を意味する。本明細書に用いられる“吸入”という語は、空気の肺胞への吸い込みを意味する。個々の例においては、吸入しつつ本発明の製剤の自己投与又はレスピレーターを介して、例えば、レスピレーターによる患者への投与によって吸い込みが生じる。本発明の製剤について用いられる“吸入”という語は、“肺投与”と同義である。本明細書に用いられる“エアゾル”という語は、空気中の浮遊を意味する。特に、エアゾルは、本発明の製剤の粒子化及び空気中の浮遊を意味する。本発明によれば、エアゾル剤は、吸入又は肺投与のためにエアゾル化、即ち、噴霧して空気に浮遊させるＰＡＦレセプター拮抗剤及びおそらくは糖質をも含む製剤である。本明細書に用いられる“非経口”という語は、肺炎球菌の哺乳動物細胞への結合又は粘着を阻害する血小板活性化因子の拮抗剤及びおそらくは糖質の体内への導入及び特に口腔、静脈内(i.v.)、動脈内(i.a.)、腹腔内(i.p.)、筋肉内(i.m.) 、室内及び皮下(s.c.)経路を意味する。静脈内及び口腔経路が好ましい。本明細書に用いられる“全身性”という語は、疾病もしくは障害又は肺から離れた又は生物体の全身に関係する最初の損傷部位を意味する。従って、“局所” という語は、本明細書では肺に関して用いられる。即ち、全身感染は、S.ニューモニエが血液中に見られるものであり、菌血症、敗血症及び髄膜炎をまねくことがある。局所感染は、肺炎球菌が肺まで移動するだけのものであり、肺炎をまねくことがある。本発明の組成物又は組成物の投与は、動物の患者をS.ニューモニエ感染から防御又は治療するために用いられる。即ち、本発明の組成物は、ニワトリ、シチメンチョウ及びペットのような鳥類；本発明の組成物は哺乳動物種以外にも使用が企図されるが、愛がん動物(イヌ及びネコ);家畜(ウシ、メンヨウ、ウマ、ヤマヒツジ、ブタ等);げっ歯類；及び野生哺乳動物を含むがこれらに限定されない哺乳動物、好ましくはヒトに用いられる。ＰＡＦレセプター拮抗剤その主要な態様においては、本発明は、肺炎球菌による感染及びＰＡＦレセプター活性化を阻害又は予防する方法であって、肺炎球菌のＰＡＦレセプターへの結合を阻害すること又は粘着肺炎球菌をＰＡＦレセプターから溶離すること又はその双方を特徴とする方法に関する。本発明の１態様においては、ＰＡＦレセプター拮抗剤は、かかる結合を阻害するために又は粘着細菌を溶離するために用いられる。本明細書に用いられる“血小板活性化因子拮抗剤”という語は、肺炎球菌の血小板活性化因子への結合を拮抗的に阻害する分子を意味する。好ましくは、作動剤はＰＡＦレセプターを活性化しないが、かかる分子が肺炎球菌のＰＡＦレセプターへの粘着を効果的に阻害することができる場合にも活性化しない。例えば、ＰＡＦは肺炎球菌のレセプターへの結合を拮抗的に阻害する。そのような拮抗剤又はＰＡＦレセプターへの結合の拮抗阻害剤としては、ホスホリルコリンを含む分子を含むがこれに限定されない(例えば、Tenceら，1983，血小板活性化因子と構造上の関連エーテル脂質， INSERMシンポジウム No．23，J．Benveniste & B．Arnoux(eds.)，Elsevier Sci ence Publishers: アムステルダム，pp．41-48)。特に、ＰＡＦレセプター拮抗剤は、Ｌ６５９,９８９、Ｌ６５２,７３１、ＷＥＢ２０８６、カドスレノン及びＦＲ７２１１２からなる群より選ばれる、例えば、Hwang & Lam，1991 脂質，26 :1148-53; Hwangら，1989，Mol．Pharmacol．35:48-58、これらの文献を参考として本明細書に引用する。下記の個々の実施例においては、ＰＡＦレセプター拮抗剤はＬ６５９,９８９（Merck & Co製，ニュージャージー州ラーウェイ）及びＷＥＢ２０８６(Boehringer Ingleheim製，インディアナ州インディアナポリス) が含まれるがこれらに限定されない。ＰＡＦレセプター発現阻害剤実施態様においては、更に、ＰＡＦレセプター活性化阻害剤を患者へ投与する方法が細菌の結合及びインターナリゼーションを阻害するために用いられる。本明細書に用いられるＰＡＦレセプター活性化阻害剤は、非ステロイド系抗炎症剤（アスピリン、サリチル酸、イブプロフィン等であるがこれらに限定されない）、ステロイド系抗炎症剤（コルチゾン等）、及びＴＮＦ及びＩＬ−１のような炎症性サイトカイン阻害剤を含むがこれらに限定されない免疫抑制剤とすることができる。本明細書に用いられる“炎症性サイトカイン阻害剤”という語は、炎症性サイトカインの活性を中和する分子を意味する。かかる分子は、サイトカインに結合し、直接に（サイトカインのレセプターへの結合を立体障害することによる）或いは間接に（抗体仲介クリアランス経路によるサイトカインの急速なクリアランスを与えることによる）サイトカインの活性を阻害する抗体とすることができる（例えば、Dinarello & Wolff，1993，New Engl．J．Med．328:106-113参照）。かかる抗体は、市販で又は他の供給源から得られるか又は調製される。かかる抗体としては、ポリクロナール抗体、モノクロナール抗体、キメラ抗体、単鎖、Ｆａｂフラグメント及びＦａｂ発現ライブラリーが含まれるがこれらに限定されない。従って、本明細書に用いられる“抗体”という語は、広く免疫グロブリン又はその抗原結合フラグメントに関する。また、炎症性サイトカインに対する可溶性レセプターは、サイトカインの活性を阻害するために用いられる（上記、Dina rello & Wolff 参照）。肺炎球菌に結合する糖質モチーフ態様においては、本発明は、更に、肺炎球菌の宿主細胞、特に肺上皮細胞（ＩＩ型肺細胞）及び静脈内皮細胞への粘着を仲介する糖質モチーフの同定に関する。特に、本発明者らは、肺炎球菌が腫瘍壊死因子（ＴＮＦ）、インターロイキン（ＩＬ−１）等の炎症性サイトカインと結合する宿主細胞の刺激が以前には不明であった糖質特異性：Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン（ＧｌｃＮＡｃ）を誘導することを発見した。また、このＧｌｃＮＡｃ糖質特異性はＧａｌＮＡｃβ １−３Ｇａｌレセプター集団と会合することもわかった。従って、ＧａｌＮＡｃ β１−３Ｇａｌモチーフ及びＧｌｃＮＡｃモチーフを有する糖質（両方のモチーフは共に同じオリゴ糖又は２種類の異なるオリゴ糖に見られる）を含む組成物は、肺炎球菌の宿主細胞への粘着を防止するために又は粘着肺炎球菌を宿主細胞から溶離するために用いられる。従って、本明細書に用いられる“肺炎球菌糖質結合モチーフ”という語は、肺炎球菌接着複合体又はかかる結合又は粘着の最小単位によって認識される糖質の構造を意味する。糖タンパク質についての糖質（オリゴ糖又はサッカリドとも呼ばれる）が種々の結合で配置される一組の単糖（糖質）サブユニットによって形成される非常に複雑な構造にすることができることは周知である（例えば、Darn ell ら，細胞分子生物学，Scientific American Books，1986，pp．957-964参照）。本発明のモチーフは、化合物について見出される“修飾”(追加のサッカリドサブユニット)と無関係の最小レセプター単位、即ち、肺炎球菌と結合することができる最小構造である。即ち、肺炎球菌が結合する糖質モチーフは、複雑なオリゴ糖に位置されているか又はモチーフ構造を有する可能な最も簡単なオリゴ糖であることができる。更に、モチーフは、本明細書で肺炎球菌結合を仲介することが示された特定のサッカリド群の誘導体とすることができる。本発明のモチーフの機能上の定義は、実施例に記載されるように肺炎球菌結合及び溶離特性を示すことができるということである。本明細書に用いられる“糖質”という語は、サッカリドサブユニットを含む化合物及び本明細書に記載された高分子と会合又は複合した化合物の双方を意味する。態様においては、本発明は、更に、以前には肺炎球菌結合を仲介することが不明であった肺炎球菌が結合する糖質モチーフの同定を利用する。本モチーフは、二糖Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ１−３Ｇａｌ群（ＧａｌＮＡｃβ１− ３Ｇａｌ）を含む。本モチーフは、マンノースに結合されるが必要なものではない。本モチーフを含む糖質の例は、フォルスマン糖脂質、グロボシド等が挙げられるが、これらに限定されない。粘着肺炎球菌の宿主細胞からの定量的又はほぼ定量的溶離が、細菌と以前には肺炎球菌が付着することが不明であったＧａｌＮＡｃβ１−３Ｇａｌモチーフ及び第２モチーフとを接触させることにより達成されることが発見された。本第２モチーフは、二糖Ｎ−アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ１−４Ｇａｌ群（ＧａｌＮＡｃβ１−４Ｇａｌ）を含む糖質である。本モチーフは、マンノースに結合されるが必要なものではない。本第２モチーフを含む糖質の例としては、アシアロ −ＧＭ１、アシアロ−ＧＭ２等が挙げられるがこれらに限定されない。肺炎球菌の非刺激肺上皮細胞（ＩＩ型肺細胞）及び静脈内皮細胞からの定量的溶離は、これらの細胞と両モチーフを有する糖質を含む組成物とを接触させることにより達成される（前記Tuomanen & Cundell）。最適実施態様においては、３種全てのモチーフを表す糖質を含む組成物がＰＡＦレセプター拮抗剤と共に用いられる。かかる組成物は、免疫系が活性化されかつ炎症性伝達因子が放出された初期の段階、進行中の感染を治療するのに特に望ましい。好ましくは、かかる組成物は、肺炎球菌のインターナリゼリーション前に及び肺炎球菌が血液中に移動する前に投与される。本発明は、肺炎球菌と宿主細胞との結合又は粘着を妨害することが判明した追加の糖質部分を含むことを企図する。かかる糖質の例としては、マンノース、Ｎ −アセチル−Ｄ−ガラクトサミン、マンノース−Ｄ−マンノース及びメチル−α −Ｄ−マンノピラノシドが挙げられるがこれらに限定されない。本発明は、更に、薬剤の効力を増強するために多価糖質又は多価糖質含有構造の使用を企図する。１実施態様においては、１モチーフは、本発明に有用な化合物に多コピーで見られる。他の実施態様においては、１を超えるモチーフは、本発明に有用な化合物に単一又は多コピーで見られる。多価糖質は、概念的に樹木又はブラシに似ているその各分枝又は毛が肺炎球菌結合モチーフを含む分枝複合糖質を調製することにより製造される。また、一価の糖質は、共有結合又は非共有結合で高分子と結合される（例えば、Langerら，1994年２月17日公開の国際特許公報第94/03184号を参考として本明細書に特に引用する）。適切な高分子としては、タンパク質、ポリリシン、デキストラン、グリコサミノグリカン、シクロデキストリン、アガロース、セファロース及びポリアクリルアミドが挙げられるがこれらに限定されない。本発明の肺炎球菌結合モチーフを有する糖質は、いかなる供給源からも入手することができる。例えば、かかる糖質は、市販されているものから入手することができる。また、該糖質は、既知の化学又は酵素プロセスを用いて合成で製造することもできる。肺炎球菌結合モチーフを含む糖質（即ち、サッカリド）の合成のためのグリコシルトランスフェラーゼ酵素は、国際特許公報第93/13198号（19 93年７月８日公開）に記載されているように調製され、この特許を参考として本明細書に引用する。サッカリド組成物の調製装置があるように（Rothら，1994年２月22日発行の米国特許第 5,288,637号）、かかる組成物のグリコシルトランスフェラーゼ触媒調製も記載された(Roth，1993 年１月19日発行の米国特許第 5,1 80,674号及び1991年10月31日公開の国際特許公報第91/16449号)(これらの文献の各々を参考として本明細書に全て特に引用する)。治療用組成物及び方法本発明は、肺炎球菌感染及び結果として生じる菌血症、髄膜炎及び肺炎を含むがこれらに限定されない病態を予防及び治療するために肺又は非経口、特にi.v. 又は口腔投与するためのＰＡＦレセプター拮抗剤を、好ましくは上記の肺炎球菌結合モチーフを含む糖質と共に含む製剤を企図する。以後、便宜上、単数又は複数形の“糖質”という語は、他の意味が特に示されない限り肺炎球菌結合モチーフを含む糖質を意味するように解釈されなければならない。従って、本発明は、ＰＡＦレセプター拮抗剤を好ましくは肺炎球菌結合モチーフを含む１種以上の糖質と共に及び上記で定義された薬学的に許容しうる担体又は賦形剤を含む医薬組成物を提供する。Ｌ６５９,９８９のようなある種のＰＡＦレセプター拮抗剤は、口腔的に活性であるので、本発明は、かかる化合物の口腔投与を企図する(Hwang & Lam，1991 ，脂質 26:1148-53 参照)。初期の肺炎球菌感染又は全身感染の治療については、本発明の治療用組成物は、感染をまねく肺上皮細胞のコロニー形成を予防するために又は粘着細菌を肺上皮細胞から溶離するために吸入により投与される。肺投与は、薬剤が肺胞から毛細血管に容易に進むので血流に対する有効な投与方法でもある。更に、肺炎球菌全身感染が一般に肺上皮細胞のコロニー形成で始まるので、肺を通る治療剤の投与はその感染を治療するために合理的な経路である。同様に、薬剤は、毛細血管から肺胞に交差する非経口、例えば、i.v.で投与することも可能である。従って、本発明は、全身及び肺（局所）の双方の肺炎球菌感染を治療するために本発明の医薬組成物を非経口投与、特にi.v.投与することを企図する。従って、医薬組成物及び治療用製剤の気道への送達又は非経口送達に設計される種々の装置が本発明のこの態様において用いられる。本発明の肺投与の好ましい経路は、エアゾル又は吸入方式である。分散剤又は分散媒と混合したＰＡＦレセプター拮抗剤は、好ましくは本発明の１種又は複数種の糖質と共に、乾燥粉末として又は希釈剤による溶液又は懸濁液としてエアゾル剤で投与される。しかしながら、上記のように、本発明の組成物は、非経口的にも投与される。本明細書に用いられる“分散媒”という語は、ＰＡＦレセプター拮抗剤、好ましくは糖質とのエアゾル化又は肺組織におけるその物質の吸収又はその双方を援助する物質を意味する。分散媒は、薬学的に許容しうることが好ましい。例えば、液体エアゾルを形成する溶液の噴霧化によるＰＡＦレセプター拮抗剤又はＰＡＦレセプター拮抗剤及び糖質の凝集を生じた表面を減じるために当該技術において一般に用いられる界面活性剤が用いられる。かかる界面活性剤の限定されない例は、ポリオキシエチレン脂肪酸エステルとアルコール及びポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステルのような界面活性剤である。界面活性剤の使用量は変動し、通常はその範囲又は製剤の０.００１〜４重量％の範囲内である。適切な界面活性剤は、当該技術において周知であり、所望の特性に基づいて選ばれ、個々の製剤、ＰＡＦレセプター及び存在する場合には１種又は複数種の糖質の濃度、希釈剤（液体製剤において）又は粉末形（乾燥粉末製剤において）等に左右される。更に、ＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質（例えば、二糖又は複合オリゴ糖）の使用、所望の治療効果、肺組織の性状（例えば、疾患のある肺又は健康な肺）及び他の多くの要因によって、液体又は乾燥製剤は下記に述べられるように追加成分を含むことができる。液体エアゾル剤は、生理的に許容しうる希釈剤中にＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質及び分散剤を含有する。本発明の乾燥粉末エアゾル剤は、ＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質及び分散剤の微細固体形態からなる。非経口製剤は、注射に適切な担体中にＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質を含有する。液体或いは乾燥粉末エアゾル剤においては、製剤はエアゾル化されなければならない。即ち、エアゾル化された用量が実際に肺胞に達することを行わせるために液体又は固体粒子に分解されなければならない。一般に、マスメジアン動的直径は、薬剤粒子が肺胞に達することを行わせるために５マイクロメートル以下とする(Wearley，L.L.，1991，Crit．Rev．Ther．Drug Carrier Systems 8:333)。 “エアゾル粒子”という語は、肺投与に適切な、即ち肺胞に達する液体又は固体粒子を記載するために本明細書において用いられる。送達装置の構成、製剤中の追加成分及び粒子特性のような他の検討も重要である。薬剤の肺投与のこれらの態様は、当該技術において周知であり、製剤の取り扱い、エアゾル化手段及び送達装置の構成には、当業者による通常の実験が必要なだけである。送達装置の構成に関しては、液体製剤の微粒化(nebulization)、煙霧化(atomi zation)又はポンプエアゾル化及び乾燥粉末製剤のエアゾル化を含むがこれらに限定されない当該技術において既知のエアゾル化の形が本発明の実施において用いられる。たいてい、液体又は乾燥粉末製剤のエアゾル化には噴射剤が必要となる。噴射剤は、当該技術において通常用いられる噴射剤であってもよい。かかる有効な噴射剤の個々の限定されない例は、クロロフルオロカーボン、ヒドロフルオロカーボン、ヒドロクロロフルオロカーボン、又はトリフルオロメタン、ジクロロジフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタノール及び1,1,1,2−テトラフルオロエタンを含む炭化水素又はその組合わせである。本発明の具体的な態様においては、エアゾル化の装置は、定量投与吸入器である。定量投与吸入器は、投与に左右される可変の用量というより投与される際に特定の用量を与える。かかる定量投与吸入器は、液体或いは乾燥粉末エアゾル剤と用いられる。定量投与吸入器は、当該技術において周知である。ＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質が吸入により肺に達すると、多くの製剤依存性因子が結合活性を与える。肺炎球菌全身感染を治療するにあたり、ＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質の循環レベル、エアゾル粒径、エアゾル粒子の形、ＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には糖質の吸収に影響することができる肺疾患又は塞栓の有無、肺のｐＨ又は医薬担体のような要因等が必要であることは理解されるであろう。本明細書に記載される製剤の各々については、ある種の滑沢剤、吸収増強剤、安定剤又は懸濁剤が適するものである。これらの追加物質の使用は、目標によって変動する。ＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質の局所送達が所望又は探索される場合には、吸収増強のような可変物質が重要というほどでないことは理解されるであろう。実施態様においては、本発明のエアゾル剤又は非経口製剤は、更に、ＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質のほかに他の有効成分を含むことができる。好適実施態様においては、かかる有効成分は、肺疾患の治療に用いられるものである。例えば、かかる追加の有効成分としては、肺の状態の治療に有効な気管支拡張剤、抗ヒスタミン剤、エピネフリン等が挙げられるがこれらに限定されない。好適実施態様においては、追加の有効成分は、例えば、肺炎の治療には抗生物質とすることができる。好適実施態様においては、抗生物質はペンタミジンである。好適態様において本発明の組成物は抗生物質と共に投与されるが、抗生物質耐性肺炎球菌の治療方法を与えることが本発明の具体的な利点である。これは、ビルレント細菌の間の抗生物質耐性の最近の増大、容易でない公衆衛生に係わる現象を考えると重要な問題である。肺炎球菌がＰＡＦレセプターを活性化するという認識は、肺炎球菌感染症の治療においてＰＡＦレセプター拮抗剤を用いる動機を加えた。かかる阻害剤の使用は、細菌のコロニー形成及びインターナリゼーションを防止することができるだけでなく、細菌への曝露に伴う炎症応答を緩和することができる。一般に、本発明のＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質は、哺乳動物の体重１kgあたり０.０１〜約１００mgの量でエアゾル又は非経口で患者に加えられる。個々の実施態様においては、投薬は１日あたりの用量である。当業者は、本発明のエアゾル剤又は非経口製剤中のＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質の濃度に基づいてその用量に対応するエアゾルの容量又は重量を容易に求めることができる；また、当業者によって容易に理解されるように、投与されるべき容量中ＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質の適量を含むエアゾル剤を調製することができる。用量は、また、肺におけるＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質の局所濃度が肺投与と共に非常に高くなるので、肺炎球菌全身感染の吸入治療の場合には大きくなり、肺のみの感染を治療する場合には小さくてよいことは明らかである。ＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質を肺に直接投与すると標的にした薬剤送達が可能でありコスト及び望まない副作用の両面が抑えられることが本発明の利点である。本製剤は、感染の程度又は予防の必要性によって１回の投与量又は多回投与量で投与される。例えば、肺炎球菌感染に対する防御（レスピレーターによる長期治療の常用の結果）としてレスピレーターにより患者に投与される場合、少量の組成物で有効である。感染が始まる場合には、粘着細菌の溶離を促進するために並びに在住細菌による接着及びコロニー形成を防止するために多量の組成物が与えられる。当業者は、用いられるべき予防又は治療剤の正確な量が、疾患の段階及び程度、患者の身体の状態及び医師によって容易に求められる他の多くの要因に左右されることは理解されるであろう（例えば、Langerら，1994年２月17日公開の国際特許公報第 9403184号参照、この特許を参考として本明細書に特に引用する）。加圧定量投与吸入器及び乾燥粉末吸入器のようなエアゾル送達装置は、Newman ，S.P.，エアゾル剤と肺，Clarke，S.W．& Davia，D．ed.，pp.197-22 に開示されており、本発明に関連して用いられる。液体エアゾル剤本発明は、肺炎球菌感染に罹っている患者又は肺炎球菌感染に罹る危険のある患者を治療するのに有用な液体エアゾル剤及び剤形を提供する。一般に、かかる剤形は、薬学的に許容しうる希釈剤中にＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種以上の糖質を含有する。薬学的に許容しうる希釈剤としては、滅菌水、食塩水、緩衝化食塩水、デキストロース溶液等が挙げられるがこれらに限定されない。個々の実施態様においては、本発明又は本発明の医薬製剤に用いられる希釈剤は、リン酸塩緩衝化食塩水又は通常ｐＨ７.０〜８.０の緩衝化塩類溶液又は水である。本発明の液体エアゾル剤は、任意成分として、薬学的に許容しうる担体、希釈剤、可溶化又は乳化剤、界面活性剤及び賦形剤を含めることができる。本発明の液体エアゾル剤は、典型的にはネブライザーで用いられる。ネブライザーは、圧縮空気式或いは超音波ネブライザーとすることができる。本発明と共にウルトラベント，Mallinckrodt社(ミズーリ州セントルイス);アコーンIIネブライザー(Marquest Medical Products，コロラド州エングルウッド)のようなこれらに限定されない当該技術において既知のネブライザーが用いられる。本発明と共に有効な他のネブライザーは、1986年11月25日発行の米国特許第4,624,251 号; 1972年11月21日発行の同第 3,703,173号; 1971年２月９日発行の同第3,561, 444 号及び1971年１月13日発行の同第 4,635,627号に記載されている。本製剤は、担体を含めることができる。担体は、循環系に可溶でありかつ生理的に許容しる高分子であり、ここで生理的許容とは当業者が前記担体を治療法の一部として患者に注入することを許容することを意味する。担体は、クリアランスの許容しうる血漿半減期で循環系において相対的に安定であることが好ましい。かかる高分子としては、大豆レシチン、オレイン酸及びソルビタントリオレエートが挙げられるがこれらに限定されず、ソルビタントリオレエートが好ましい。本実施態様の製剤は、安定化又は浸透圧の制御に有効な他の物質を含めることもできる。その物質の例としては、塩化ナトリウム又は塩化カリウムのような塩及びグルコース、ガラクトース又はマンノースのような炭水化物等が挙げられるがこれらに限定されない。乾燥粉末エアゾル剤本医薬製剤を、微細な粉末状のＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種又は複数種の糖質及び分散媒を含む乾燥粉末吸入剤として用いることも企図される。その形のＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には糖質は、通常、凍結乾燥粉末とする。凍結乾燥形のＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には糖質は、標準手法で得られる。他の実施態様においては、乾燥粉末製剤は、ＰＡＦレセプター拮抗剤及び存在する場合には１種以上の糖質、分散剤、更に充填剤を含有する微細な乾燥粉末を含む。本製剤と共に有効な充填剤は、ラクトース、ソルビトール、スクロース又はマンニトールのような物質が該粉末の装置からの分散を容易にする量で含まれる。本発明は、その展開及び確認で実施した構成及び手順の詳細を示す下記の具体的な説明の検討から更によく理解されるであろう。実施例１本実施例においては、肺炎球菌の標的気道上皮細胞及び血管内皮細胞への粘着に関するＴＮＦ及びＩＬ−１の意味深い作用が記載され、ＰＡＦレセプターとして活性化細胞上の主要なレセプター特異性が同定される。真核細胞をＩＬ−１又はＴＮＦで刺激した前後に、S.ニューモニエの莢膜のあるＡＩＩ（血清型２）株及び同質遺伝子の莢膜のないＲ６株のヒト静脈内皮細胞（ＥＣ）及びＩＩ型肺上皮細胞（ＬＣ）への粘着を定量した。ＥＣへの粘着は、ＴＮＦα刺激により〜７０％上昇した（図１）。ＩＬ−１刺激は、肺炎球菌粘着のあまり大きくない亢進を生じた（２４０±１０から３６３±１３細菌／１００ＥＣに増加；２７０±１５から３５５±１８細菌／１００ＬＣに増加）。粘着は、ＩＩ型莢膜の存在で影響されなかった。１０⁷cfu/mlの供給濃度において、ＡＩＩ及びＲ６の１００ＴＮＦα刺激ＥＣへの粘着は、各々４０５±１４及び４００±１０であった。新規なレセプター活性の同定は、２つの所見により示された。精製した肺炎球菌細胞壁(５０μg/ml; Tuomanenら，1985，J．Infect．Dis．151:859)は、活性化ＥＣ（４１５±２５は２８９±１１細菌／１００ＥＣに低下した）及びＬＣ（３５５±１８は２４９±１３細菌／１００ＬＣに低下した）への肺炎球菌粘着の亢進を拮抗的に阻害した。更に、粘着の在進は、培養基中のアミノアルコール置換による肺炎球菌細胞壁上のコリンのエタノールアミンによる置換時に大きく減弱した(上記、Tuomanenら，1985)(４１５±２５から１２１±１１細菌／１００ＥＣに低下；３５５±１８から１３５±１３細菌／１００ＬＣに低下)(各々７１及び６２％低下)。コリンは、血小板活性化因子（ＰＡＦ）の生物活性の重要な決定因子であり、ＰＡＦは、肺炎球菌の肺炎及び髄膜炎での炎症応答に特に大きな役割を果たすことが示された(Cabllosら，1992，J．Clin．Invest．90: 612)。肺炎球菌粘着におけるＰＡＦレセプターの直接関与は、肺炎球菌の活性化細胞への粘着亢進をほとんど消失する２種のＰＡＦレセプター拮抗剤の能力によって示された（図２）。ＰＡＦ拮抗剤Ｌ６５９,９８９（上記、Cabellosら）及びＷＥＢ２０８６（Kunzら，1992，J．Biol．Cem．267:9101）は、各々ＥＤ₅₀５×１０^-8M 及び１×１０^-8M で粘着を阻害した。同様のＥＤ₅₀値が、Ｌ６５９,９８９について動物モデル（上記、Cabellosら）で及びＷＥＢ２０８６について試験管内ＰＡＦレセプタートランスフェクト細胞で示された（上記、Kunzら）。いずれのレセプター拮抗剤も、静止ＥＣ（１μM のＷＥＢ２０８６及びＬ６５９,９８９の存在下２４０±１５に対して各々２２４±１２及び２３７±９細菌／ＥＣ）又はＬＣ（２７０±１０細菌に対して各々２６４±８及び２７２±８）への肺炎球菌粘着に影響しなかった。ＰＡＦの特異的なレセプターは、肺及び脳膜、血小板、好中球、好酸球及びマクロファージを含む多数の組織及び細胞で同定された(Chao & Olson，1993，Bio chem，J．292:617)。ＰＡＦレセプターは、細胞質外アミノ末端領域、７に及ぶ推定膜ドメイン及び細胞質カルボキシル末端からなる約３９,０００Ｄａタンパク質である（上記、Chao & Olson）。これらの特徴は、７部分のロドプシンレセプターファミリーに特有である（上記，Kunzら）。ＰＡＦレセプターは、種間で十分に保存されると考えられる。ヒト配列とモルモット配列を比較すると、共に３４２アミノ酸からなり、７に及ぶ推定膜ドメイン内に組織され、アミノ酸レベルで約８３％の配列類似性を有する（上記，Kunzら）。しかしながら、この種類の分子の中でヒトＰＡＦレセプターにユニークなことは、アミノ酸１６９と１７１間の推定３番目の細胞外ループの単一のグリコシル化部位の存在である（上記，Kunzら）。ＰＡＦグリコシル化部位は、他の種では位置及び数が異なる。例えば、モルモットＰＡＦレセプターは２つのグリコシル化部位を有し、１つはアミノ酸１６９と１７１間にあり２番目はＮ末端細胞外ループである。ＰＡＦのＰＡＦレセプターへの高親和性結合によりトランスメンブランシグナルが得られ、Ｇ −タンパク質を含みホスホリパーゼＡ₂及びホスホリパーゼＣに結合されると考えられる（上記、Chao & Olson）。最近、ＰＡＦレセプターが、ヒト白血球からクローン化され、腎上皮細胞に巧くトランスフェクトされた（上記，Kunzら）。肺炎球菌がＰＡＦレセプターに直接付着することができるかを求めるために、ヒトＵ９３７細胞（ATCC CRL 1593; 胚腎上皮細胞にＳＶ４０ｌａｒｇｅＴ抗原を安定にトランスフェクトした）及びＣＯＳ−７細胞（ATCC CRL 1651;サル腎）にヒトＰＡＦレセプターｃＤＮＡ(Ger ard & Gerard，1994，J．Immunol 152:793)又はＦｌａｇ構築物を含むｃＤＮＡ（上記，Kunzら）を電気穿孔法（上記，Kunzら）又はカチオンリポソームの添加 (上記、Gerard & Gerard)によりトランスフェクトした。これらのレセプターへのリガンド結合は、温度依存性であり、ＰＡＦレセプター拮抗剤に感受性であり、レセプターの急速なインターナリゼーションを生じ、未変性レセプター担持細胞に匹敵する(上記、Gerard & Gerard)。対照細胞にベクター単独をトランスフェクトした。トランスフェクトした単層及び対照細胞を６０ウェルテラサキ皿で調製した。ＣＯＳ−７及びＵ９３７細胞の単層は、ＥＣ及びＬＣについて以前に記載された方法を用いて４８ウェル培養皿で調製される（Geelenら，1993，Infe ct．Immun．61:1538）。ＰＡＦレセプターの発現は、Ｆｌａｇ−ＰＡＦレセプター遺伝子産物に対するモノクローナル抗体を用いる免疫組織化学染色によって確認した（上記，Kunzら）。対照ＣＯＳ−７及びＵ９３７細胞への肺炎球菌粘着は、おそらく腎臓が本来肺炎球菌感染の標的でないために低かった（図３）。これらの細胞にＰＡＦレセプターをトランスフェクトするときに、粘着は６倍より大きく亢進した（図３）。粘着は、ＩＩ型莢膜の存在によって影響されなかった。１０⁷cfu/mlの供給濃度において、Ｒ６及びＡＩＩ細胞によるＵ９３７細胞への粘着は、各々２９６±３０及び２７７±３８であった。エタノールアミン中で増殖した肺炎球菌の粘着は、コリン含有培地中で増殖した細菌の約１／１０であった。１０⁷cfu/mlの供給濃度において、Ｕ９３７細胞への粘着は、Ｒ６細菌を増殖したコリンの２９６± ３０に比べてＲ６細菌を増殖したエタノールアミンの２５±１０であった。更に、肺炎球菌がＰＡＦレセプターを標的にすることの確認は、ＰＡＦ及びＰＡＦ拮抗剤ＷＥＢ２０８６及びＬ６５９,９８９の肺炎球菌粘着阻害能に由来した（図３）。肺炎球菌がコリン依存方法で厳密にＰＡＦを認識するか又はＰＡＦレセプターの単一のグリコシル決定因子がレセプター認識に寄与するかを求めることは興味深いことであった。上述したように、ヒトＰＡＦレセプターは、推定ＮＨ₂末端細胞外配列のＮ結合グリコシル化の非存在下及び位置１６９〜１７１の１つだけの細胞外グリコシル化部位の存在下に他の種からのＰＡＦレセプターと異なる（上記，Kunzら）。この単一のグリコシル化部位を、トリプレットアミノ酸グリコシル化部位の部位特定突然変異誘発により除去した。非グリコシル化ＰＡＦレセプターは、ＣＯＳ−７及びＵ９３７細胞双方への肺炎球菌粘着を約７５％だけ低下させた（図３）。１０⁷cfu/mlの供給濃度において、非グリコシル化ＰＡＦレセプターを発現するＵ９３７細胞へのＲ６粘着は、２９６±３０から７４±２０に低下した。単糖類（１〜５０mM）又は複合糖質（０.００３〜２mM）の存在下に行われた競合分析を用いて、サイトカイン刺激ＥＣ及びＬＣへの肺炎球菌粘着に対する糖質認識の寄与を試験した。肺炎球菌粘着における糖質認識の役割は、Tkuomanen & Cundell による“肺細胞及び血管細胞への肺炎球菌粘着のモジュレーター並びに診断及び治療上の適用”と称する1994年６月６日出願の同時係属出願第08/254 ,577号、代理人整理番号第 600-1-084号; 以後 Tuomanen & Cundell に更に十分に開示されている。細菌を、最終濃度の記述した糖質と室温で１５分間前インキュベートし、遠心（３,０００ rpm、３分）して非結合糖質を除去し、アルブミンバッファーに１×１０⁷cfu/mlまで再懸濁し、粘着分析に加えた。単糖(Tuoman en ら，J．Exp．Med．168:267)の粘着阻止能と比較すると、ＧａｌＮＡｃ及びＤ −マンノースは静止細胞への粘着を阻止するのに効果的であり、ＧｌｃＮＡｃは活性化細胞で効果的であることが示された（図４）。ＧｌｃＮＡｃは、ホスホリルコリンを欠く肺炎球菌の粘着に効果がないことを示し、知見はＰＡＦレセプターへの肺炎球菌の標的にするのにコリンの提案された役割と一致した。ＧｌｃＮＡｃの存在及び非存在下のコリンを欠く細菌の活性化細胞への粘着は、各々１２１±１１と１１９±５／１００ＥＣ及び１３７±７と１３５ ±１３／１００ＬＣであった。トランスフェクトしたＣＯＳ−７及びＵ９３７細胞への肺炎球菌粘着もＧｌｃＮＡｃの存在下に約４０％だけ低下した（図３）。静止ＥＣ及びＬＣは、２種類の肺炎球菌レセプター：マンノースコア上のＧａｌＮＡｃβ１−４Ｇａｌ又はＧａｌＮＡｃβ１−３Ｇａｌを発現する（上記Tuom anen & Cundell）。これら２種のレセプター特異性は、β１−４レセプターについては複合糖質アシアロ−ＧＭ２及びβ１−３レセプターについてはグロボシドの阻止活性によってもっも良く定義される。しかしながら、ＧｌｃＮＡｃにおいての結果と対照的に、グロボシドもアシアロ−ＧＭ２もトランスフェクトしたＰＡＦレセプターへの肺炎球菌粘着を低下させなかった。１０⁷cfu/mlの供給濃度において、グロボシド及びアシアロ−ＧＭ２の存在下のＲ６のＵ９３７への粘着は、複合糖質の非存在下の２９６±３０と比べて３１８±３０及び３２７±３９であった。それにもかかわらず、ＥＣ及びＬＣのサイトカイン刺激は、これらの双方の多数の静止細胞レセプター（表１）及び新規なＧｌｃＮＡｃ特異性の発現をもたらした。その後者の特異性は、阻害剤が加成的であるのでＧａｌＮＡｃβ１−４Ｇａｌ特異性と独立しており、ＧｌｃＮＡｃは、それらの阻害剤が加成的でないので、ＧａｌＮＡｃβ１−３Ｇａｌレセプター集団に関係した（図５）。糖質の作用が加成的でない場合には、同じレセプターか又は結合したレセプターを占有すると考えられた；加成的である場合には、別個のレセプターに存在すると解釈された。以前の実験は、ＰＡＦレセプター拮抗剤が実験用肺炎球菌肺炎での炎症を著しく減弱したが、肺炎球菌テイコ酸化成分は試験管内細胞培養系モデルでのＰＡＦレセプターを活性化せず、レセプターのＰＡＦ活性化を防止しないことを示した（上記、Cabellosら）。しかしながら、下記の実施例に示されるように、これらの実験は間違っていた。実際に、肺炎球菌はＰＡＦレセプターの強力な活性化因子であると考えられる。これらの結果は、ＰＡＦレセプターが肺炎球菌を標的細胞にコリン依存及び糖質依存方式でつなぎ止めることを示している。その固定化は、シグナル導入カスケードの引き金になると考えられる。更に、ＰＡＦレセプターは、細胞表面上の発現後に急速に内在化されることが既知であり（上記Gerad & Gerard）、その付着が、細菌に内皮細胞又は上皮細胞内に又は横切って移動する経路を与えることができることを示している。肺炎球菌は、試験管内血管内皮細胞内で可視化された。ＰＡＦレセプターを有する細胞の肺炎球菌吸収能を、細菌防御分析で直接試験した。その実験では、ＰＡＦレセプター或いは非グリコシル化ＰＡＦレセプターをトランスフェクトしたＵ９３７及びＣＯＳ−７細胞を１０⁷cfu/mlのＲ６と３７℃で２時間インキュベートした。次に、細胞を１９９培養液で２回洗浄し、５０μg/mlゲンタマイシンで３７℃において９０分間処理した。ゲンタマイシンは、哺乳動物細胞におけるインターナリゼーションによって防御されない細菌を破壊する。細胞を１９９培養液で２回洗浄し、０.５mlの０.１％トリトン X-100 に再懸濁することにより溶解した。１００倍の連続希釈度の細胞浮遊液を血液平板上に播種し、３７℃で２４時間後にcfu/mlを求めた。単層に最初に粘着する１〜２×１０⁴細菌のうちの３００をゲンタマイシンで２時間処理した細胞の溶解物から回収し、〜３％の粘着細菌が時間につれて入り細胞外抗生物質から防御されることを示した。ＰＡＦレセプターの非グリコシル化は、内在化肺炎球菌数の１／１０の低下をもたらした。我々は、ヒトＩＩ型肺細胞及び血管内皮細胞への肺炎球菌粘着が標的細胞のサイトカイン及び肺炎球菌活性化によって定性的に及び定量的に影響されると結論する。これは、肺炎球菌のウイルス感染した細胞への粘着亢進及びウイルス感染での肺炎球菌疾患に対する感受性の増大の所見と一致する(Plotowskiら，Am．Re v．Respir．Dis．134:1040)。静止ＬＣ及びＥＣは、ＧａｌＮＡｃβ１−４Ｇａｌ及びＧａｌＮＡｃβ１−３Ｇａｌを含む２種類のレセプターを有する。サイトカイン刺激は、ＰＡＦレセプターへ標的にされている肺炎球菌粘着の亢進したレセプター拡大をもたらした。本実施例は、病原体がこのレセプターに結合することがわかったことを初めて報告している。また、適当な細菌細胞壁に存在する粘着性リガンドに対するレセプター、この場合には肺炎球菌にユニークなコリン含有テイコ酸化物質の最初の同定である。ＰＡＦ及び肺炎球菌テイコ酸／リポテイコ酸の双方において生物活性決定因子としてのコリンの存在は、ＰＡＦレセプターへの肺炎球菌の標的の根拠としての模擬リガンドを示している。ＰＡＦレセプター拮抗剤の存在下の肺炎球菌炎症の大きな減弱は、肺炎での肺炎球菌とＰＡＦレセプターとの会合の生理的重要性を示し、真核細胞への肺炎球菌付着を妨害するＰＡＦレセプター拮抗剤の新規な使用を提案する。実施例２：肺炎球菌はＰＡＦレセプターを活性化するＰＡＦレセプターをトランスフェクトしたＣＯＳ−７細胞の活性化を分析した。細胞を、培地（対照）、血小板活性化因子（１００mM）、肺炎球菌（１０⁸細菌／ml）及びエタノールアミン培養肺炎球菌（１０⁸細菌／ml）に曝露した。ＰＡＦ及び肺炎球菌による活性化のＰＡＦレセプター拮抗剤Ｌ６５９,９８９（２ μg/ml）による阻害を測定した。イノシトールトリホスフェート（ＩＰ３）への³ Ｈの取り込みを検出することにより細胞活性化を測定した。本分析の結果を図６に示す。対照細胞では又はエタノールアミン培養肺炎球菌への曝露後には³Ｈ標識ＩＰ３がほどんど検出されなかった。上述したように、エタノールアミン培養肺炎球菌はコリンを欠き、ＰＡＦレセプターに認めうるほど結合しない。予想されたように、ＰＡＦ処理は、ＩＰ３への著しい³Ｈ取り込みをもたらした。しかしながら、驚くべきことに、トランスフェクトしたＣＯＳ細胞と肺炎球菌との接触は、極めて強い応答を生じ、１００mMＰＡＦで見られたものより³Ｈ −ＩＰ３が非常に多かった。ＰＡＦ仲介及び肺炎球菌仲介活性化の双方がＰＡＦレセプター拮抗剤Ｌ６５９,９８９でほぼ完全に阻害された。これらの結果は、ＣＯＳ細胞の肺炎球菌による活性化がＰＡＦレセプターを介して進行することを示している。エタノールアミン培養細菌のレセプター活性化不能は、更に、ＰＡＦレセプターへの結合及び活性化におけるテイコ酸の役割を示している。本発明は、その真意又は本質的な特徴から逸脱することなく他の形で具体化され、他の方法でも行われる。従って、本開示は全ての点で例示であり限定するものとしてみなされるべきでなく、本発明の範囲は下記の請求の範囲によって示され、等価の意味及び範囲内に入る変化は全てその中に包含されるものである。種々の参考文献が本明細書全体に引用されており、各々を参考として本明細書に全て引用する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 38/00 Ｃ０７Ｈ 13/06 39/395 15/04 Ｅ // Ｃ０７Ｈ 13/06 Ａ６１Ｋ 9/14 Ｕ 15/04 37/02 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＫ，ＴＭ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者トゥオマネンエレインアイアメリカ合衆国ニューヨーク州 10021 ニューヨークイーストシックスティサードストリート 430 アパートメント 12シー (72)発明者カンデルダイアナアールアメリカ合衆国ニューヨーク州 10021 ニューヨークイーストシックスティサードストリート 430 アパートメント５ケイ (72)発明者ジェラードノーマピーアメリカ合衆国マサチューセッツ州 02030 ドーヴァーウォルポールストリート 117

Claims

【特許請求の範囲】１．ストレプトコッカス・ニューモニエによる感染症の予防又は治療方法であって、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量の血小板活性化因子レセプター拮抗剤をかかる治療を必要としていると思われる患者に投与することを特徴とする方法。２．更に、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量のＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンモチーフを含む糖質を投与することを特徴とする請求項１記載の方法。３．更に、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量の二糖Ｎ −アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ１−４Ｇａｌモチーフ、二糖Ｎ−アセチル− Ｄ−ガラクトサミンβ１−３Ｇａｌモチーフ及びその混合物を含む糖質からなる群より選ばれた第２糖質を投与することを特徴とする請求項２記載の方法。４．該血小板活性化因子拮抗剤が、Ｌ６５９,９８９、Ｌ６５２,７３１、ＷＥＢ２０８６、カドスレノン及びＦＲ７２１１２からなる群より選ばれる請求項１記載の方法。５．該糖質がＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンである請求項２記載の方法。６．該第２糖質が、フォルスマン糖脂質、グロボシド、アシアロ−ＧＭ１及びアシアロ−ＧＭ２からなる群より選ばれる請求項３記載の方法。７．更に、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量のマンノース、Ｎ−アセチル−ガラクトース、マンノース−Ｄ−マンノース及びメチル− α−Ｄ−マンノピラノシドからなる群より選ばれた糖質を投与することを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。８．１種又は複数種の該糖質が多価性である請求項２又は３記載の方法。９．該投与が噴霧及び吸入を含む請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。 10．該噴霧が微粒化である請求項９記載の方法。 11．該投与が静脈注射を含む請求項１〜３のいずれか１項に記載の方法。 12．更に、血小板活性化因子レセプターの発現を阻害するのに有効な炎症阻害剤を投与することを特徴とする請求項１記載の方法。 13．該炎症阻害剤が、腫瘍壊死因子に対する中和抗体、可溶性腫瘍壊死因子中和レセプター、インターロイキン−１に対する中和抗体及び可溶性インターロイキン−１中和レセプターからなる群より選ばれる請求項12記載の方法。 14．S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量の血小板活性化因子レセプター、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量のＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンモチーフを含む糖質及び薬学的に許容しうる担体を含む医薬組成物。 15．更に、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量の二糖Ｎ −アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ１−３Ｇａｌモチーフを含む糖質及び二糖Ｎ −アセチル−Ｄ−ガラクトサミンβ１−４Ｇａｌモチーフを含む糖質からなる群より選ばれた糖質を含む請求項14記載の医薬組成物。 16．該血小板活性化因子レセプター拮抗剤が、Ｌ６５９,９８９、Ｌ６５２,７３１、ＷＥＢ２０８６、カドスレノン及びＦＲ７２１１２からなる群より選ばれる請求項14記載の医薬組成物。 17．該糖質がＮ−アセチル−Ｄ−グルコサミンである請求項14記載の医薬組成物。 18．該第２糖質が、フォルスマン糖脂質、グロボシド、アシアロ−ＧＭ１及びアシアロ−ＧＭ２からなる群より選ばれる請求項15記載の医薬組成物。 19．更に、S.ニューモニエの宿主細胞への結合を阻害するのに有効な量のマンノース、Ｎ−アセチル−ガラクトース、マンノース−Ｄ−マンノース及びメチル− α−Ｄ−マンノピラノシドからなる群より選ばれた糖質を含む請求項14又は15記載の医薬組成物。 20．１種又は複数種の該糖質が多価性である請求項14又は15記載の医薬組成物。 21．該医薬組成物が、分散媒を含むエアゾル剤である請求項14又は15記載の医薬組成物。 22．該分散媒が界面活性剤である請求項21記載の医薬組成物。 23．１種又は複数種の該糖質が微細な粉末で存在する乾燥粉末エアゾル剤である請求項21記載の医薬組成物。 24．充填剤を更に含む請求項23記載の医薬組成物。 25．薬学的に許容しうる希釈剤を更に含む液体エアゾル剤である請求項21記載の医薬組成物。 26．該希釈剤が、滅菌水、食塩水、緩衝化食塩水及びデキストロース溶液からなる群より選ばれる請求項25記載の医薬組成物。 27．該宿主細胞が、肺上皮細胞及び血管内皮細胞からなる群より選ばれる請求項 14又は15記載の医薬組成物。