JPH0987296A - サイクリックａｄｐ−リボース類縁体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 サイクリックＡＤＰ−リボース類縁体及びそ
の合成中間体であるヌクレオシド誘導体を提供する。 【解決手段】 本発明のサイクリックＡＤＰ−リボース
類縁体は、細胞内カルシウムイオン動員に関与するセカ
ンドメッセンジャーであるサイクリックＡＤＰ−リボー
スの類縁体であり、細胞内情報伝達系の研究や、医薬品
開発のリード化合物として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明はサイクリックＡＤＰ
−リボース類縁体及びその合成中間体であるヌクレオシ
ド誘導体に関する。より詳細には、新しいセカンドメッ
センジャーであるサイクリックＡＤＰ−リボースの類縁
体及びそれを合成する際に使用されるヌクレオシド誘導
体に関する。

【０００２】

【従来の技術】細胞はホルモン、神経伝達物質、成長因
子等の細胞外の情報（ファーストメッセンジャー）に反
応して、的確な細胞応答を示す機構をもっている。細胞
外情報のあるものは、生理的な作用によって細胞膜上の
受容体（Ｇ蛋白連関型）を活性化して、次いでエフェク
ターであるホスホリパーゼ（ＰＬＣ）を活性化してホス
ファチジルイノシトール（ＰＩ）の代謝回転を促進す
る。イノシトール−１，４，５−トリスホスフェート
（以下、ＩＰ３という）は、このＰＩ代謝回転で産生さ
れる細胞内で情報を伝える物質(セカンドメッセンジャ
ー)の一つである。ＩＰ３シグナルは細胞内のカルシウ
ム貯蔵部位（小胞体等）に存在するＩＰ３受容体に作用
してカルシウムの放出を誘導し、細胞質内のカルシウム
の一過性の上昇を導き、種々のカルシウム依存性の蛋白
質や酵素等の機能を調節して多様な細胞応答を誘導す
る。従来、細胞内カルシウムイオン動員物質としては、
上記のＩＰ３が唯一が知られていたが、最近、ウニ卵や
ホ乳類の脳、心筋や肝臓等に、ＩＰ３以外にカルシウム
イオン動員に関与するセカンドメッセンジャーが存在す
ることが明らかとなった。その構造は、UV, NMR, Mass
スペクトルデータからNAD⁺の環状代謝産物であると推定
され(Lee, H. C. ; Walseth, T. F. ; Bratt, G. T. ;
Hayes, R. N.; Clapper, D. L. ; (1989) J . Biol. Ch
em. 264 , 1608-1615)、サイクリックADP-リボース（cA
DPR)と命名された。さらに1994年になって２次元NMRとX
線結晶解析により、その立体構造を含め下記式で示され
るような構造であることが明らかにされた(Lee, H. C.
; Aarhus, R. ; Levitte, D . ; (1994) Nature Struc
ture biology 1 , 143-144)。

【０００３】

【化３】

【０００４】cADPRはIP3と比べ約50分の1の濃度で細胞
を活性化し、例えばランゲルハンス島β細胞からのイン
スリン分泌を促進する(Takasawa, S. ; Nata, K. ; Yon
ekura, H. ; Okamoto, H. ; (1993) Science 259, 370-
373)などの生理作用を持つことが報告されている。その
作用機序としては、細胞内外の伝達物質の刺激を受け(B
erridge, M. J. ; (1993) Nature 365, 388-389)、NAD⁺
がミクロゾーム中でADP-シクラーゼによりcADPRへ変換
され、これが細胞内カルシウムプールのリアノジン受容
体に結合することによりカルシウムイオン動員をひきお
こし、細胞が活性化される。作用発現後、cADPRは速や
かにcADPR水解酵素によりADP-リボースに分解され不活
化されることが解明されている(Lee, H. C. ; Aarhus,
R. ; (1993) Biochimica et Biophysica Acta 1164, 68
-74)。

【０００５】しかし、活性化-不活化酵素に関しては、
その本体は補体系CD38因子ではないかという説（Takasa
wa, S. ; Tohgo, A. ; Noguti, N. ; Koguma, T. ; Nat
a, K. ; Sugimoto, T. ; Yonekura, H. ; Okamoto, H.
; (1993) J. Biol. Chem. 268 , 26052-26054)がある
ことや、リアノジン受容体蛋白の１次構造は明らかにな
っている（Takeshima, H. ; Nishimura, S. ; Matsumot
o, T. ; Ishida, H. ; Kangawa, K. ; Minamino, N. ;
Matsuo, H. ; Ueda, M. ; Hanaoka, M. ; Hirose, T. ;
Numa, S. ; (1989) Nature 339, 439-445)ものの、そ
の２、３次元構造はまだ解明されていないなど不明な点
が多い。一方、IP3の阻害剤であるヘパリンがcADPRの作
用を全く阻害しない(Galione, A. ; Mcdougall, A. ; B
usa, W. B. ; Willmott, N. ; Gillot, I. ; Whitaker,
M. ; (1993) Science 261, 348-351)ことからも明らか
なようにcADPRとIP3とは独立かつ相補的に作用するの
で、cADPRは非常に興味の持たれる化合物である。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】cADPRの薬理、生理学
的作用を解明し、また医薬として利用するにはこれを有
機化学的に合成し供給することが有用と思われる。しか
しcADPR自体は環状グリコシル結合を有するため不安定
であり、pH5から7の水溶液中でも容易に加水分解を受け
てADP-リボースとなり、その半減期も40時間と短い。本
発明はかかる問題点を解消するためになされたもので、
本発明者等はcADPRのリボース環の１つの酸素原子をメ
チレンに置き換えたカーボサイクリック型誘導体はcADP
Rの安定等価体として作用し得ると考え、当該化合物の
合成を行なったところ、所期の目的を達成し得ることを
見出した。本発明はかかる知見に基づいてなされたもの
で、本発明は安定性に優れたｃADPR類縁体及びその合成
中間体を提供することを目的とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】上記の課題を解決するた
めになされた本発明の要旨は、 下記一般式（Ａ）、（Ｂ）又は（Ｃ）で表されるサイ
クリックＡＤＰ−リボース類縁体及びその塩；

【化４】 下記一般式（Ｄ）、（Ｅ）又は（Ｆ）で表されるヌク
レオシド誘導体及びその塩；

【化５】 である。

【発明の実施の態様】

【０００８】本発明の目的化合物である一般式（Ａ）、
（Ｂ）又は（Ｃ）で表される化合物は、ｃADPRの重要と
思われる官能基を全て備えており、又そのコンホメーシ
ョンもｃADPRと類似しているが、環の不安定化をひき起
こすN-グリコシド結合を持たないため、安定で生物学的
にも化学的にも安定な等価体となる。よって本発明の目
的化合物は細胞内情報伝達系の研究への利用価値が高
く、また医薬品あるいは医薬品開発のリード化合物とし
ての利用も期待される。また、一般式（Ｄ）、（Ｅ）又
は（Ｆ）で表される化合物は、上記一般式（Ａ）、
（Ｂ）又は（Ｃ）で表される化合物を合成する際の中間
体として有用な化合物である。

【０００９】一般式（Ａ）、（Ｂ）又は（Ｃ）で表され
る化合物の塩としては、例えば、ナトリウム塩、カリウ
ム塩等のアルカリ金属塩、カルシウム塩、マグネシウム
塩等のアルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、アルキル
アンモニウム塩、ピリジン塩、ピコリン塩、モルホリン
塩等の有機塩基塩などの無機又は有機塩基付加塩が例示
される。また、一般式（Ｄ）、（Ｅ）又は（Ｆ）で表さ
れる化合物において、ＲはＨ又は水酸基の保護基を示
し、水酸基の保護基としては、例えば、アセチル基、ピ
バロイル基等のアシル基、トリメチルシリル基、ジメチ
ルテキシルシリル基等のシリル基、メチレン基、イソプ
ロピリデン基等のようなアセタール又はケタール基、テ
トラヒドロピラニルエーテル、テトラヒドロフラニルエ
ーテル等のエーテル基などが例示される。また、Ｒ¹又
はＲ²は水酸基又は保護基を有していてもよいリン酸基
を示し、リン酸の保護基としては、例えば、アニリンな
どのアミン類とのモノ又はジアミド、チオフェノールな
どのフェノール類とのモノ又はジエステル等が例示でき
る。一般式（Ｄ）、（Ｅ）又は（Ｆ）で表される化合物
の塩としては、上述の塩基付加塩の他、塩酸塩、臭化水
素酸塩、硝酸塩、過塩素酸塩等の無機酸塩、酢酸塩、ク
エン酸塩、メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩
等の有機酸塩などの無機又は有機酸付加塩が例示され
る。

【００１０】本明細書において、一般式（Ａ）、（Ｂ）
又は（Ｃ）で表される化合物及び一般式（Ｄ）、（Ｅ）
又は（Ｆ）で表される化合物の略号として、便宜上、下
記表１及び表２に示される略号を用いる。

【００１１】

【表１】

【００１２】

【表２】

【００１３】本発明の目的化合物である一般式（Ａ）、
（Ｂ）又は（Ｃ）で表される化合物は種々の方法で合成
することができるが、その一例として、ヌクレオシド部
分がイノシン（Ｘ＝Ｎ，Ｙ＝Ｏ）である化合物１ｂの合
成方法をもって説明する。この化合物の合成にあたり、
本発明者等は下記の式に示されるような逆合成経路を考
えた。下記の式に示されるように、最終的にはリン酸ジ
エステル結合部位で閉環を行うこととし、N-1部のアル
キル結合はイノシン誘導体とカーボサイクリック体との
縮合反応で合成できる。また、このカーボサイクリック
部はアリルジオール体からパラジウム転移反応を経て容
易に構築できる。

【００１４】

【化６】

【００１５】以下、より詳細に説明する。まず、五員環
部位は下記の反応式にそって合成を行った。ジシクロペ
ンタジエンとグリオキシル酸から容易に得られるヒドロ
キシラクトン体3を出発原料とし、まずリパーゼにより
エステル化して光学分割を行った後3工程でジオール体5
へと導いた(Mackeith, R. A. ; McCague, R. C. ; Oliv
o, H. F. ; Palmer, C. F.; Roberts, S. M. ; (1993)
J. Chem. Soc. Perkin Trans 1 313-314)。次に１級水
酸基を選択的にシリル化し、アリル位の水酸基をアセチ
ル化した後、２価パラジウムによるアリル転移反応で化
合物7を得た。この後に５工程を経てカーボサイクリッ
クユニットである化合物8へと導いた。

【００１６】

【化７】

【００１７】次にヌクレオシドユニット10については、
イノシン9を原料として下記の反応式の方法で合成した
(Sekine, M. ; Hata, T. ; (1985) J. Am. Chem. Soc.
107, 5813-5815)。

【００１８】

【化８】

【００１９】ついで、下記の反応式により、化合物8と
化合物10を反応させて化合物12とし、化合物12の脱シリ
ル化を行なった後、ビスフェニルチオリン酸エステル化
することにより、化合物13に導く。なお、化合物8と化
合物10との縮合反応を種々検討した結果、化合物8をト
リフレート体11とした後、化合物10とクラウンエーテル
（より具体的には18-クラウン-6）の存在下、ジメトキ
シエタン中、炭酸カリウムの条件で反応させると化合物
12が得られることがわかった。次いで、化合物12のシリ
ル基をテトラブチルアンモニウム フルオリド(TBAF)な
どを用いて脱保護後、S,S'-ジフェニルホスホロジチオ
エート(PSS)を用いてビスフェニルチオリン酸エステル
化することにより化合物13とした。

【００２０】

【化９】

【００２１】次いで、下記の反応式に従い、化合物13を
脱保護した後、閉環し、更にイソプロビリデン基を脱離
することにより化合物１ｂを得た。即ち、化合物13より
まず亜硝酸イソアミルでアニリノ基を脱離して化合物14
とし、次いで次亜リン酸によりチオフェニル基のうち一
つを脱保護して化合物15を得た。化合物15に対し、硝酸
銀にてチオフェニル基を活性化することで分子内環状ジ
リン酸を形成し、次いで酸処理しイソプロビリデン基を
脱離させることにより化合物１ｂが得られる。なお、化
合物15を酸処理してイソプロビリデン基を脱離させた
後、硝酸銀にてチオフェニル基を活性化し、分子内環状
ジリン酸を形成させることにより化合物１ｂを得ること
もできる。

【００２２】

【化１０】

【００２３】上述の反応工程において、原料のイノシン
に代えてアデノシン(又はその６位のアミノ基を保護し
た化合物)を用いることにより化合物１ａが、また３−
デアザアデノシン(又はその６位のアミノ基を保護した
化合物)を用いることにより化合物１ｃが、更に３−デ
アザイノシンを用いることにより１ｄを得ることができ
る。なお、上記のアミノ保護基としては、例えば、アセ
チル、クロロアセチル、ジクロロアセチル、トリクロロ
アセチル、ジフルオロアセチル、トリフルオロアセチル
等のアシル基、ベンシルオキシカルボニル基、t-ブトキ
シカルボニル基などの慣用のアミノ保護基を用いること
ができる。同様に、化合物8に代えて、下記の化合物
（Ｇ）を用いることにより化合物２ａ〜２ｄを、また化
合物（Ｈ）を用いることにより化合物３ａ〜３ｄを得る
ことができる。なお、化合物（Ｇ）は前記化合物7の二
重結合を還元した後、アシル基を脱離させ、更に第２級
水酸基を反転させることにより得ることができる。ま
た、化合物（Ｈ）は、化合物7のアシル基を脱離させ、
更に第２級水酸基を反転させることにより得ることがで
きる。

【００２４】

【化１１】

【００２５】

【実施例】以下、実施例に基づいて本発明をより詳細に
説明する。 実施例１4-ヒドロキシ-2-オキサビシクロ[3, 3, 0]オクタ-7-エ
ン-3-オン [4-Hydroxy-2-oxabicyclo[3, 3, 0]oct-7-en
-3-one] (3) 50%グリオキシル酸溶液(100 ml, 0.89 mmol)を水(280 m
l)で希釈し、氷冷下シクロペンタジエン(100 ml, 1.2 m
mol)を加え室温で４日間撹拌した。反応液にヘキサン(1
20 ml×2)を加えて分液操作を行い、水層を酢酸エチル
(200 ml×12)で抽出した。有機層を全体で300 mlになる
まで濃縮し、これを飽和重曹水(100 ml×2)で洗浄し
た。水層から更にクロロホルム(200 ml×3)で逆抽出
し、すべての有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶
媒を減圧下留去しジアステレオマー混合物を得た。これ
にt-ブチルメチルエーテル(400 ml)を加えてトリチレー
ションし、生じた固体を濾過して白色固体として標記化
合物(63 g, 450 mmol, 51%)を得た。¹ H-NMR(500 MHz, CDCl₃): δ; 6.27-6.21(m, 1 H, H-
7), 5.96-5.89(m, 1 H, H-8), 5.27(dt, 1 H, H-1, J
_1,5 = 6.3 Hz, J_1,8 = 2.2 Hz), 4.62(d, 1 H, H-4,J
_4,5 = 2.4 Hz), 3.30(br s, 1 H, 1-OH), 3.14-3.02(m,
1 H, H-5), 2.82-2.71(m, 1 H, H-6a), 2.32(m, 1 H,
H-6b)

【００２６】実施例２(1S, 4S, 5R)-4-アセトキシ-2-オキサビシクロ[3, 3,
0]オクタ-7-エン-3-オン[(1S, 4S, 5R)-4-Acetoxy-2-ox
abicyclo[3, 3, 0]oct-7-en-3-one] ヒドロキシラクトン体 3 (25 g, 180 mmol)を酢酸ビニ
ル(160 ml)に溶解しlipase Amano PS (3.8 g)を加え37
℃で42時間撹拌した。室温に戻してから酵素を濾去し溶
媒を減圧下留去した。残渣を酢酸エチルに溶解しシリカ
ゲル(400 g)を加えて減圧下乾固させシリカゲルカラム
クロマトグラフィー(φ7.5×(3+15) cm,ヘキサン:酢酸
エチル=5:1-1:1にて溶出)で精製し、無色油状物質とし
て光学活性なアセチル体(14.0 g, 77.3 mmol, 43%)を得
た。¹ H-NMR(270 MHz, CDCl₃): δ; 6.24-6.20(m, 1 H, H-
8), 5.98-5.93(m, 1 H, H-7), 5.63(d, 1 H, H-4, J_4,5
= 9.6 Hz), 5.37(dt, 1 H, H-1, J_1,8 = 6.5 Hz,J_1,5
= 2.1 Hz), 3.43-3.31(m, 1 H, H-5), 2.63-2.50(m, 1
H, H-6a), 2.49-2.37(m, 1 H, H-6b) 元素分析：計算値（C₉H₁₀O₄として）: C, 59.34; H, 5.53 実測値 : C, 59.28; H, 5.63

【００２７】実施例３(1S, 4S, 5R)-4-ヒドロキシ-2-オキサビシクロ[3, 3,
0]オクタ-7-エン-3-オン[(1S, 4S, 5R)-4-Hydroxy-2-ox
abicyclo[3, 3, 0]oct-7-en-3-one] (4) 前反応で得た光学活性アセチル体(23.0 g, 127 mmol)を
メタノール(500 ml)に溶解し、無水炭酸カリウム(10 .0
g, 76.0 mmol)を加え室温で30分撹拌した。反応液を4N
塩酸で中和し生じた塩を濾去し濾液の溶媒を減圧下留去
した。残渣をメタノールに溶解しシリカゲル(400 g)を
加え減圧下乾固後シリカゲルカラムクロマトグラフィー
(φ7.5×10 cm, ヘキサン:酢酸エチル= 2:1-0:1にて溶
出)で精製し、白色固体として化合物4 (13.7 g, 99.0 m
mol, 78%)を得た。¹ H-NMR(270 MHz, CDCl₃): δ; 6.27-6.21(m, 1 H, H-
7), 5.96-5.89(m, 1 H, H-8), 5.27(dt, 1 H, J_1,5 =
6.3 Hz, J_1,8 = 2.2 Hz, H-1), 4.62(d, 1 H, J_4,5= 2.
4 Hz, H-4), 3.30(br, 1 H, 1-OH), 3.14-3.02(m, 1 H,
H-5), 2.82-2.71(m, 1 H, H-6a), 2.32(m, 1 H, H-6b) [α]_D ²⁰ = -71.0゜(c 1.01, MeOH)

【００２８】実施例４(1S, 5R)-5-ヒドロキシメチル-2-シクロペンテノール
[(1S, 5R)-5-Hydroxymethyl-2-cyclopentenol] (5) 水素化アルミニウムリチウム(9.20 g, 250 mmol)をアル
ゴン気流下0℃で特級THF(200 ml)に懸濁させておき、こ
こにヒドロキシラクトン体4 (17.6 g, 127 mmol)を特級
THF(200 ml) に溶解したものを３時間かけて滴下し、こ
れを室温で48時間撹拌した。反応液に0℃で水(9.2 ml)
をゆっくり加え、つづいて15%水酸化ナトリウム水溶液
(9.2 ml)をすこしずつ加えた。室温で更に水(27 ml)を
加え30分撹拌し、生じた白沈をセライトを用いて濾去
し、固体をエタノール(300 ml×3)で洗浄し、濾液の溶
媒を減圧下留去した。残渣をメタノール(400 ml)に溶解
し、氷冷下過ヨウ素酸ナトリウム(35.3 g, 165 mmol)の
水溶液(250 ml)を30分かけて滴下し、そのままさらに30
分撹拌した後、生じた塩をセライトを用いて濾去した。
濾液に氷冷下水素化ホウ素ナトリウム(7.20 g, 190 mmo
l)を少しずつ加え、そのまま30分撹拌した。反応液を4N
塩酸で中和し、生じた塩をセライトを用いて濾去し溶媒
を減圧下留去し、ボランをメタノール(200 ml×2)で共
沸した。残渣をシリカゲルに吸着させシリカゲルカラム
クロマトグラフィー(φ7.5 ×(3+18) cm, クロロホル
ム:エタノール= 100:0-100:10にて溶出)で精製し、黄色
油状物質として化合物5 (9.20 g, 80.7 mmol, 63.5%)を
得た。¹ H-NMR(270 MHz; CDCl₃): δ; 5.94(d, 1 H, H-2, J_2,1
= 5.6 Hz), 5.78(m, 1H, H-3), 4.85(d, 1 H, H-1, J
_1,2 = 5.6 Hz), 3.73(d, 2 H, H-6, J_6,4 = 5.9Hz), 3.
32及び 3.26(各 br s, 各 1 H, 1-OH, 6-OH), 2.45-2.1
2(m, 3 H, H-4,H-5) EI-MS m/z 114 (M⁺)

【００２９】実施例５(1S, 5R)-5-[(1, 1, 2)-トリメチルプロピル]ジメチル
シロキシメチル-2-シクロペンテノール [(1S, 5R)-5-
[(1, 1, 2)-Trimethylpropyl]dimethylsiloxymethyl-2-
cyclopentenol] 化合物 5 (5.00 g, 43.0 mmol), DMAP(0.300 g, 2.50 m
mol)をCH₂Cl₂(150 ml)とDMF(70 ml)の混合液に溶解し、
氷冷下トリエチルアミン(15.0 ml, 105 mmol)を加えた
後、室温でジメチルテキシルシリル クロライド(DTSCl,
19.0 ml, 96.4mmol)を8時間ごとに5回に分けて加え、
アルゴン気流下室温で40 時間撹拌した。反応液に水(10
0 ml)を加え10分撹伴した後さらにCHCl₃(500 ml)、飽和
食塩水(300 ml)を加えて分液操作を行い、水層よりさら
にCHCl₃(300 ml×3)で抽出した。有機層を集めて無水硫
酸ナトリウムで乾燥後溶媒を減圧下留去した。残渣をシ
リカゲルカラムクロマトグラフィー(φ5.5 × 20 cm,
ヘキサン:酢酸エチル= 1:0-20:1にて溶出)で精製し、黄
色油状物質として標記化合物(8.00g, 31.1 mmol,70.9%)
を得た。¹ H-NMR(270 MHz, CDCl₃): δ; 5.97-5.92(m, 1 H, H-
2), 5.86-5.80(m, 1 H, H-3), 4.90-4.83(m, 1 H, H-
1), 3.85(dd, 1 H, H-6a; J_6a,6b = 10.0, J_6a,5 =4.6
Hz), 3.76(dd, 1 H, H-6b; J_6b,6a =10.0, J_6b,5 = 7.
5 Hz), 2.48-2.38(m,1 H, H-4a), 2.35-2.29(m, 1 H,
H-5), 2.23-2.13(m, 1 H, H-4b), 1.62(m, 1H, (CH₃)₂C
H-, J = 6.8 Hz), 0.88(d, 6 H, (CH₃ )₂CH-, J = 6.8 H
z), 0.86(s,6 H, -C(CH₃ )₂-), 0.11及び0.10(s, 各 3
H, CH₃× 2)

【００３０】実施例６(1S, 5R)-1-アセトキシ-5-[(1, 1, 2)-トリメチルプロ
ピル]ジメチルシロキシメチル-2-シクロペンテン [(1S,
5R)-1-Acetoxy-5-[(1, 1, 2)-trimethylpropyl]dimeth
ylsiloxymethyl-2-cyclopentene] (6) 前反応で得たシリル体 (4.11 g, 16.0 mmol)をアセトニ
トリル(300 ml)に溶解し、DMAP(100 mg, 0.98 mmol)、
トリエチルアミン(7.80 ml, 56.0 mmol)を加えて撹拌
し、氷冷下で無水酢酸(4.9 ml, 52 mmol)を加え1時間撹
拌した。反応液にエタノール(50 ml)を加えて5分撹拌後
溶媒を減圧下留去した。残渣に酢酸エチル(300 ml)と水
(150 ml)を加え分液操作をし、有機層を飽和食塩水(150
ml)で洗浄してから無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を
減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラ
フィー(φ3.6 ×18 cm, ヘキサン:酢酸エチル= 20:1に
て溶出)で精製し、黄色油状物質として化合物6 (4.6 g,
15.6 mmol, 98%)を得た。¹ H-NMR(500 MHz, CDCl₃): δ;6.12-6.06(m, 1 H, H-2),
5.85(ddd, 1 H, H-3, J_3,2= 2.1, J_3,4a= 4.2, J_3,4b
= 5.8 Hz), 5.68(ddd, 1 H, H-1, J_1,2 = 6.9, J_1,4 =
6.9, J_1,5 = 2.1 Hz), 3.76(dd, 1 H, H-6a, J_6a,5 =
7.3, J_6a,6b = 9.9Hz), 3.57(dd, 1 H, H-6b, J_6b,5 =
7.2, J_6b,6a = 9.9 Hz), 2.59-2.42(m, 1H, H-5), 2.40
-2.35(m, 1 H, H-4a), 2.28-2.15(m, 1 H, H-4b), 2.01
(s, 3 H,CH₃ CO-), 1.60(d, 1 H, (CH₃)₂CH-, J = 6.8 H
z), 0.86(d, 6 H, (CH₃ )₂CH-, J= 6.8 Hz), 0.83(s, 6
H, -C(CH₃ )₂-), 0.080及び0.070(s, 各 3 H, CH₃× 2) ¹³ C-NMR(67.8 MHz, CDCl₃): δ; 170, 137, 130, 78.6,
61.6, 43.3, 34.6, 34.2, 24.9, 21.1, 20.4, 20.2, 2
0.2, 18.5, -3.30, -3.50 EI-MS m/z 213(M⁺), 169(M⁺-Ac) 元素分析：計算値(C₁₆H₃₀O₃Siとして): C, 64.38; H, 10.13 実測値 : C, 64.36; H, 10.09

【００３１】実施例７(1R, 4S)-1-アセトキシ-4-(1, 1, 2-トリメチルプロピ
ル)ジメチルシロキシメチル-2-シクロペンテン [(1R, 4
S)-1-Acetoxy-4-(1, 1, 2-trimethylpropyl)dimethylsi
loxymethyl-2-cyclopentene] (7) 化合物 6 (7.01 g, 23.9mmol)をTHF(250 ml)に溶解し、
p-ベンゾキノン(891 mg, 8.20 mmol)を加えアルゴンガ
スを5分間通気した。そこにPdCl₂(CH₃CN)₂(180mg, 0.69
0 mmol)を加え、アルゴン気流下50℃で30分撹拌した。
室温で放冷後、反応液の溶媒を減圧下留去した。残渣を
シリカゲルカラムクロマトグラフィー(φ5.5 ×15 cm,
ヘキサン:酢酸エチル= 20:1にて溶出)で精製し、黄色油
状物質として化合物7 (4.20 g, 14.0 mmmol, 60%)を得
た。¹ H-NMR(500 MHz, CDCl₃): δ;6.05-6.02(m, 1 H, H-2),
5.83(dt, 1 H, H-3, J= 2.1, J = 5.6 Hz), 5.67-5.62
(m, 1 H, H-1), 3.51(d, 2 H, 2×H-6, J_4,6 =6.8 Hz),
2.84-2.77(m, 1 H, H-4), 2.42(ddd, 1 H, H-5a, J
_5a,1 = 8.0, J_5a,4= 8.0, J_5a,5b = 14 Hz), 2.00(s, 3
H, CH₃ CO-), 1.63(d, 1 H, (CH₃)₂CH-, J= 6.8 Hz),
1.50(ddd, 1 H, H-5b, J_5b,1 = 8.0, J_5b,4 = 8.0, J
_5b,5a = 14 Hz), 0.88(d, 6 H, (CH₃ )₂CH-, J = 6.8 H
z), 0.82(s, 6 H, -C(CH₃ )₂-), 0.09(s, 6 H, CH₃× 2) FAB-MS m/z 299(MH⁺), 154(M-DTS⁺)

【００３２】実施例８(1R, 2S, 3R, 4R)-1-アセトキシ-4-[(1, 1, 2-トリメチ
ルプロピル)ジメチルシロキシメチル]シクロペンタン-
2, 3-ジオール [(1R, 2S, 3R, 4R)-1-Acetoxy-4-[(1,
1, 2-trimethylpropyl)dimethylsiloxymethyl]cyclopen
tane-2, 3-diol] 化合物 7 (4.20 g, 14.1 mmol)をアセトン(60 ml), 水
(3 ml)、t-ブタノール(10 ml)の混合液に溶解しN-メチ
ルモルホリンN-オキシド(1.98 g, 16.9 mmol)を加えた
のちアルゴン気流下水浴(20℃)で冷却しながらOsO₄のt-
ブタノール溶液(5mg/ml, 3 ml)を加え、室温で8時間撹
伴した。反応液にNa₂S₂O₄(1g), タルク(2g)を加えて20
分撹伴したのち固体を濾去し濾液を減圧下留去した。残
渣をシリカゲルに吸着させシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィー(φ4.2 ×(2+15)cm, ヘキサン:酢酸エチル= 3:
2にて溶出)で精製し、黄色油状物質としてシスジオール
体(4.30 g, 12.9 mmol, 92%)を得た。¹ H-NMR(500 MHz, CDCl₃): δ; 4.96-4.92(m, 1 H, H-
1), 3.96(dd, 1 H, H-3, J_3,4= 5.3, J_3,2 = 9.4 Hz),
3.95(dd, 1 H, H-2, J_2,1 = 4.1, J_2,3 = 9.4 Hz),3.72
(dd, 1 H, H-6a, J_6a,4 = 4.7 Hz, J_6a,6b = 9.9 Hz),
3.55(dd, 1 H, H-6b, J_6b,4 = 6.3, J_6b,6a = 9.9 Hz),
3.10(br, 2 H, 2,3-OH), 2.31(ddd, 1 H,H-5a, J_5a,1
= 8.4, J_5a,4 = 8.4, J_5a,5b = 13.7 Hz), 2.20-2.12
(m, 1 H, H-4), 2.05(s, 3 H, CH₃ CO-), 1.61(d, 1 H,
(CH₃)₂CH-, J = 6.8 Hz), 1.39(ddd,1 H, H-5b, J_5b,1
= 8.3, J_5b,4 =4.6, J_5b,5a= 13.7 Hz), 0.87(d, 6 H,
(CH₃ )₂CH-, J = 6.8 Hz), 0.83(s, 6 H, -C(CH₃ )₂-),
0.09(s, 6 H, CH₃× 2) FAB-MS m/z 333(MH⁺) 元素分析：計算値(C₁₆H₃₂O₅Siとして) : C, 57.80; H, 9.70 実測値 : C, 57.70; H, 9.52

【００３３】実施例９(1R, 2S, 3R, 4R)-1-アセトキシ-2,3-イソプロピリデン
ジオキシ-4-(1, 1, 2-トリメチルプロピル)ジメチルシ
ロキシメチルシクロペンタン [(1R, 2S, 3R, 4R)-1-Ace
toxy-2,3-isopropylidenedioxy-4-(1, 1, 2-trimethylp
ropyl)dimethylsiloxymethylcyclopentane] 前反応で得たシスジオール体 (5.0 g, 15.3 mmol)をア
セトン(120 ml)に溶解し、2, 2-ジメトキシプロパン(1
8.8 ml, 150 mmol)、p-トルエンスルホン酸1水和物(290
mg, 1.53 mmol)を加えアルゴン気流下、室温で3時間撹
伴した反応液を飽和重曹水で中和し、溶媒を減圧下留去
した。残渣に酢酸エチル(300 ml)と水(150 ml)を加え分
液操作をし、有機層を飽和食塩水(150 ml)で洗浄してか
ら無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を減圧下留去した。
残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー(φ4.6×10
cm, ヘキサン:酢酸エチル= 7:1にて溶出)で精製し、黄
色油状物質としてイソプロピリデン体 (5.1 g, 13.7 mm
ol, 89.6%)を得た。¹ H-NMR(500 MHz, CDCl₃): δ; 5.05-5.00(m, 1 H, H-
1), 4.50(d, 1 H, H-2, J_2,3 = 6.1 Hz), 4.47(d, 1 H,
H-3, J_3,2 = 6.1 Hz), 3.52(dd, 1 H, H-6a, J_6a,4 =
7.0 Hz, J_6a,6b = 10.1 Hz), 3.52(dd, 1 H, H-6b, J
_6b,4 = 6.4, J_6b,6a =10.1 Hz), 2.32-2.25(m, 2 H, H-
4 and H-5a), 2.05(s, 3 H, CH₃ CO-), 1.69(m, 1 H, H-
5b), 1.61(d, 1 H, (CH₃)₂CH-, J = 6.8 Hz), 1.46及び
1.28(各 s, 各3 H, イソプロピリデン CH₃), 0.88(d, 6
H, (CH₃ )₂CH-, J = 6.8 Hz), 0.84(s, 6 H, -C(CH₃ )
₂-), 0.09(s, 6 H, CH₃× 2) FAB-MS m/z 373(MH⁺) 元素分析：計算値(C₁₉H₃₆O₅Siとして) : C, 61.25; H, 9.74 実測値 : C, 61.06; H, 9.77

【００３４】実施例１０(1R, 2S, 3R, 4R)-2,3-イソプロピリデンジオキシ-4-
(1, 1, 2-トリメチルプロピル)ジメチルシロキシメチル
-1-シクロペンタノール [(1R, 2S, 3R, 4R)-2,3-Isopro
pylidenedioxy-4-(1, 1, 2-trimethylpropyl)dimethyls
iloxymethyl-1-cyclopentanol] 前反応で得たイソプロピリデン体 (5.00 g, 13.6 mmol)
をメタノール(120 ml)に溶解し、あらかじめ乳鉢で粉末
化した炭酸カリウム(500 mg, 4.1 mmol)を加え室温で1
時間撹伴した。反応液を1N酢酸ベンゼン溶液で中和し、
溶媒を減圧下留去した。残渣をメタノールに溶解しシリ
カゲル(200 g)を加えて減圧下乾固後シリカゲルカラム
クロマトグラフィー(φ4.6×(3+10) cm, ヘキサン:酢酸
エチル=6:1にて溶出)で精製し、無色油状物質として脱
アセチル体 (4.0 g, 12.1 mmol,89%)を得た。¹ H-NMR(500 MHz, CDCl₃): δ; 4.55(d, 1 H, H-3, J_3,4
= 5.7 Hz), 4.39(d, 1H, H-2, J_2,3 = 5.2 Hz), 4.07
(d, 1 H, H-1, J_1,2 = 5.2 Hz),4.07(br s, 1 H,1-OH),
3.83(dd, 1 H, H-6a, J_6a,4 = 3.4, J_6a,6b = 10.1 H
z), 3.62(dd, 1 H, H-6b, J_6b,4 = 2.9, J_6b,6a = 10.1
Hz), 2.45(ddd, 1 H, H-5a, J_5a,1 = 5.2, J_5a,4 = 9.
7, J_5a,5b = 14.4 Hz), 2.31(br d, 1 H, H-4, J_4,5a =
9.6 Hz),1.64(d, 1 H, (CH₃)₂CH-, J = 6.8 Hz), 1.55
(br d, 1 H, H-5b, J_5b,5a = 14.4Hz), 1.42及び1.28
(s, 各 3 H, イソプロピリデン CH₃), 0.88(d, 6 H, (C
H₃ )₂CH-, J = 6.8 Hz), 0.87(s, 各 3 H, -C(CH₃ )₂-),
0.16及び0.15(s, 各 3 H, CH₃× 2) FAB-MS m/z 331(MH⁺) 元素分析：計算値(C₁₇H₃₄O₄Siとして) : C, 61.77; H, 10.37 実測値 : C, 61.65; H, 10.32

【００３５】実施例１１(2S, 3R, 4R)-2,3-イソプロピリデンジオキシ-4-[(1,
1, 2-トリメチルプロピル)ジメチルシロキシメチル]-1-
シクロペンタノン [(2S, 3R, 4R)-2,3-Isopropylidene
dioxy-4-[(1,1,2-trimethylpropyl)dimethylsiloxymeth
yl]-1-cyclopentanone] 前反応で得た脱アセチル体 (4.00 g, 12.1 mmol)をジク
ロロメタン(300 ml)に溶解し、粉末のモレキュラーシー
ブス4A(4.00 g)とPDC(9.10 g, 24.2 mmol)を加え、アル
ゴン気流下室温で撹伴した。3時間後PDC(1.00 g, 2.60
mmol)を加え更に3時間撹伴した。反応液をエーテル(700
ml)で希釈し、30分撹伴した後シリカゲルを通して濾過
し、溶媒を減圧下留去した。残渣をシリカゲルカラムク
ロマトグラフィー(φ3.6×7 cm, ヘキサン:酢酸エチル=
10:1にて溶出)で精製し、無色油状物質としてケトン体
(3.66 g, 10.9 mmol, 90%)を得た。¹ H-NMR(500 MHz, CDCl₃): δ; 4.61(d, 1 H, H-2, J_2,3
= 5.4 Hz), 4.22(d, 1H, H-3, J_3,2 = 5.4 Hz), 3.81
(dd, 1 H, H-6a, J_6a,4 = 2.6, J_6a,6b = 9.8 Hz), 3.6
1(dd, 1 H, H-6b, J_6b,4 = 2.9, J_6b,6a = 9.8 Hz), 2.
71(dd, 1 H, H-5a,J_5a,4 = 9.1, J_5a,5b = 18.2 Hz),
2.50(br d, 1 H, H-4, J_4,5a=9.1 Hz), 2.08(br d, 1
H, H-5b, J_5b,5a = 18.2 Hz), 1.56(d, 1 H, (CH₃)₂CH
-, J = 6.8 Hz), 1.42及び1.34(s, 各 3 H, イソプロピ
リデン CH₃), 0.83(d, 6 H, (CH₃ )₂CH-, J = 6.8 Hz),
0.80及び0.79(s, 各 3 H, -C(CH₃ )₂-), 0.07及び0.06
(s, 各 3H, CH₃× 2) FAB-MS m/z 329(MH⁺) 元素分析：計算値(C₁₇H₃₂O₄Siとして) : C, 62.15; H, 9.82 実測値 : C, 62.13; H, 9.66

【００３６】実施例１２(1S, 2S, 3R, 4R)-2,3-イソプロピリデンジオキシ-4-
(1, 1, 2-トリメチルプロピル)ジメチルシロキシメチル
-1-シクロペンタノール [(1S, 2S, 3R, 4R)-2,3-Isopro
pylidenedioxy-4-(1, 1, 2-trimethylpropyl)dimethyls
iloxymethyl-1-cyclopentanol] (8) 前反応で得たケトン体 (3.60 g, 12.0 mmol)をメタノー
ル(100 ml)に溶解し-20℃で水素化ホウ素ナトリウム(49
3 mg, 13.0 mmol)を少しずつ加え、そのまま30分撹拌し
た。反応液を1N酢酸ベンゼン溶液で中和し、溶媒を減圧
下留去した。残渣をシリカゲルに吸着させシリカゲルカ
ラムクロマトグラフィー(φ4.5×(3+8)cm, ヘキサン:酢
酸エチル=10:1にて溶出)で精製し、無色油状物質として
化合物8(3.17 g, 9.60 mmol, 88%)を得た。¹ H-NMR(500 MHz, CDCl₃): δ; 4.48(br d, 1 H, H-3, J
= 6.3 Hz), 4.43(dd, 1H, H-2, J_2,3 = 5.8, J_2,1 =
5.8 Hz), 4.22-4.17(m, 1 H, H-1), 3.59(dd, 1H, H-6
a, J_6a,4 = 4.7, J_6a,6b = 10.0 Hz), 3.47(dd, 1 H, H
-6b, J_6b,4 = 4.7, J_6b,6a = 10.1 Hz), 2.40(br, 1 H,
-OH), 2.23-2.17(m, 1 H, H-5a), 1.87-1.83(m, 2 H,
H-4 and H-5b), 1.60(d, 1 H, (CH₃)₂CH-, J = 6.8 H
z), 1.49, 1.34(s, 各 3 H, イソプロピリデン CH₃),
0.86(d, 6 H, (CH₃ )₂CH-, J = 6.8 Hz), 0.83(s, 各 3
H, -C(CH₃ )₂-), 0.08, 0.07(s, 各 3 H, CH₃× 2) [α]_D ²⁰ = -11.10゜(c 0.842, CHCl₃) FAB-MS m/z 331(MH⁺) 元素分析：計算値(C₁₇H₃₄O₄Siとして) : C, 61.77; H, 10.37 実測値 : C, 61.67; H, 10.42

【００３７】実施例１３2',3'-O-イソプロピリデンイノシン (2',3'-O-Isopropy
lideneinosine) (9) イノシン (20 g, 77 mmol) をアセトン (800 ml) に懸
濁し、氷冷下70% 過塩素酸水溶液(15 ml) を滴下し室温
で6時間撹伴した。アンモニア水で中和した後溶媒を減
圧下留去した。残渣の白色固体を水から結晶化を行い、
化合物 9 (17 g, 56 mmol, 72 %) を白色結晶として得
た。¹ H-NMR (270 MHz, DMSO-d₆) δ; 12.4 (br, 1 H, 1-N
H), 8.30 (s, 1 H, H-2),8.09 (s, 1 H, H-8), 6.10
(d, 1 H, H-1', J_1',2' = 2.9 Hz), 5.27 (dd, 1 H,H-
2', J_2',1' = 2.9, J_2',3'= 6.2 Hz), 5.09 (dd, 1 H,
5'-OH, J = 5.4, 5.7Hz), 4.93 (dd, 1H, H-3', J_3',2'
= 6.2, J_3',4' = 2.5 Hz), 4.22 (m, 1 H,H-4'), 3.53
(dd, 2 H, H-5', J = 5.4, 5.7 Hz), 1.53及び1.32
(各 s, 各 3 H, イソプロピリデン CH₃) FAB-MS m/z 309 (MH⁺)

【００３８】実施例１４2', 3'-O-イソプロピリデンイノシン 5'-ホスホロジア
ニリデート (2', 3'-O-Isopropylideneinosine 5'-Phos
phorodianilidate) (10) 化合物 9 (1.54 g, 5.00 mmol)、テトラゾール (525 m
g, 1.50 mmol)をジクロロエタン(20 ml)に懸濁し、トリ
ス(ジメチルアミノ)ホスフィン (2.0 ml)を加えアルゴ
ン気流下、室温で1時間撹拌した。つぎにテトラゾール
(1.40 g, 20.0 mmol) とアニリン (1.83 ml, 20.0 mmo
l) を加え更に2時間撹拌した。反応液を氷冷しヨウ素
(1.80 g, 7.50 mmol) のピリジン溶液 (10 ml) を滴下
し (ヨウ素の色が消えなくなるまで)、室温で10分撹伴
した。反応液に10% Na₂SO₃ 水溶液 (100 ml) とクロロ
ホルム (100 ml) を加えて分液し、有機層を飽和食塩水
(80 ml)で洗浄してから無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶
媒を減圧下留去しさらにトルエン (30 ml×3) で共沸し
てピリジンを除去した。残渣をシリカゲルカラムクロマ
トグラフィー (φ2.2×10 cm, クロロホルム:エタノー
ル=1:0-100:6にて溶出)で精製し、黄色あわ状物質とし
て化合物10 (1.90 g, 3.51 mmol, 70%) を得た。 FAB-MS m/z 539 (MH⁺)¹ H-NMR (CDCl₃) δ; 12.8 (br, 1 H, 1-NH), 8.03 (s,
1 H, H-2), 7.91 (s, 1H ,H-8), 7.27-7.00 (m, 10 H,
Ph× 2), 6.82-6.77 (br, 2 H, PhNH×2), 5.98(d, 1
H, H-1', J_1',2' = 1.8 Hz), 5.04 (br d, 1 H, H-3',
J = 5.3 Hz), 4.94 (dd, 1H, H-2', J_2',1' = 1.6 J
_2',3' = 5.9 Hz), 4.50 (br d, 1 H, H-4',J = 2.1 H
z), 4.36-4.27 (m, 2 H, H-5'), 1.55及び1.28 (各 s,
各 3 H, イソプロピリデン CH₃)³¹ P-NMR (CDCl₃): δ;3.69 (s)

【００３９】実施例１５1-[(1R, 2S, 3R, 4R)-2,3-イソプロピリデンジオキシ-4
-(1, 1, 2-トリメチルプロピル)ジメチルシロキシメチ
ル-シクロペンチル]-2', 3'-O-イソプロピリデンイノシ
ン 5'-ホスホロジアニリデート [1-[(1R, 2S, 3R, 4R)-
2,3-Isopropylidenedioxy-4-(1, 1, 2-trimethylpropy
l)dimethylsiloxymethyl-cyclopentyl]-2',3'-O -isopr
opylideneinosine 5'-Phosphorodianilidate] (12) 化合物8 (990 mg, 3.00 mmol)及びDMAP (916 mg, 7.50
mmol) をジクロロメタン (60 ml) に溶解し、アルゴン
気流下-20℃でトリフルオロメタンスルホニルクロリド
(TFCl, 1.00 ml, 6.00 mmol) を滴下し、室温で30分撹
拌した。水 (20 ml) を加えて10分間撹伴後、更にジク
ロロメタン (50 ml) と水 (50 ml) を加え分液し、有機
層を0.5 N HCl水溶液 (50 ml)、飽和食塩水 (50 ml) で
洗浄してから無水硫酸ナトリウムで乾燥後溶媒を減圧下
留去し、残渣として得られたトリフルオロメタンスルホ
ニル(Tf)体11をこのまま用いた。別に、化合物10 (3.24
g, 6.00 mmol)、炭酸カリウム (834 mg, 6.00 mmol)及
び18-Crown-6 (300 mg, 1.13 mmol) をDME (20 ml) に
懸濁し、アルゴン気流下50℃で40分間撹拌しておき、こ
こに先のTf体11をDME (2 ml) に溶解したものを30分間
かけてゆっくり滴下し50℃で30時間加熱撹拌した。室温
まで冷却した後、沈澱をセライトを用いて濾去し、更に
沈澱をクロロホルムで洗浄し濾液を減圧下留去した。残
渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (φ3.6×18
cm, クロロホルム:エタノール= 1:0-10:1にて溶出) で
精製し、黄色あわ状物質として化合物12 (949 mg, 1.11
mmol, 38.0 %) を黄色あわ状物質として得た。 FAB-MS m/z 851 (MH⁺) FAB-HRMS 計算値(C₄₂H₅₉N₆O₉PSiとして) 851.3928; 実
測値 851.3961.¹ H-NMR (CDCl₃) δ; 7.80 (s, 1 H, H-2), 7.75 (s, 1
H, H-8), 7.11-6.78 (m,10 H, Ph× 2), 5.93 (d, 1 H,
H-1', J_1',2' = 2.2 Hz), 5.71 (br, 2 H, PhNH×2),
4.93 (dd, 1 H, H-2', J_2',1' =2.2, J_2',3' = 6.2 H
z), 4.90 (dd, 1 H, H-3', J_3',2' = 6.2, J_3',4' = 2.
7 Hz), 4.84 (m, 1 H, H-2"), 4.65-4.59 (m, 1 H, H-
1"), 4.51-4.48 (m, 1 H, H-3"), 4.44-4.40 (m, 1 H,
H-4'), 4.35-4.28 (m, 1 H, H-5'), 4.24-4.19 (m, 1
H, H-5'), 3.69 (dd, 1 H, H-6"a, J_{6" a,6"b} = 10, J
_6"a,4" = 4.0 Hz), 3.58 (dd, 1 H, H-6"b, J_6"b,6"a =
10, J_6"b,4" = 5.9 Hz), 2.25-2.12 (m, 3 H, H-4", H
-5"), 1.53 (m, 1 H, (CH₃)₂CH-,J = 6.8 Hz), 1.49,
1.44, 1.23及び1.18 (各 s, 各 3 H, イソプロピリデン
CH₃), 0.78 (d, 6 H, (CH₃ )₂CH-, J = 6.8 Hz), 0.75
(s, 6 H, -C(CH₃ )₂-), 0.03(s, 6 H, CH₃× 2) NOE 8.17% (1"-2)

【００４０】実施例１６1-[(1R, 2S, 3R, 4R)-2,3-イソプロピリデンジオキシ-4
-ヒドロキシメチルシクロペンチル]-2', 3'-O-イソプロ
ピリデンイノシン 5'-ホスホロジアニリデート[1-[(1R,
2S, 3R, 4R)-2,3-Isopropylidenedioxy-4-hydroxymeth
ylcyclopentyl]-2', 3'-O -isopropylideneinosine 5'-
Phosphorodianilidate] 化合物12 (963 mg, 1.11 mmol) をTHF (15 ml) に溶解
し、室温で酢酸 (50 ml)、1 N TBAFを含むTHF溶液 (2.0
0 ml, 2.00 mmol) を加え撹拌した。3時間後 1N TBAFを
含むTHF溶液 (3.00 ml, 3.00 mmol) を加え更に17時間
撹拌した。反応液の溶媒を減圧下留去し、残渣を少量の
エタノールに溶解しシリカゲル (10 g)に吸着させた後
減圧下濃縮乾固し、シリカゲルカラムクロマトグラフィ
ー (φ2.6×(2.5+15) cm, クロロホルム:エタノール=
1:0-10:1にて溶出) で精製し、白色あわ状物質として標
記化合物 (750 mg, 1.07 mmol, 98%)を得た。 FAB-MS m/z 709 (MH⁺)¹ H-NMR (500 MHz, CDCl₃) δ; 8.06 (s, 1 H, H-2), 7.
88 (s, 1 H, H-8), 7.13-6.83 (m, 10 H, Ph× 2), 6.7
2-6.62 (m, 2 H, PhNH×2), 5.97 (br s, 1 H, H-1'),
5.06-4.99 (m, 2 H, H-2', H-1"), 4.92 (br d, 1 H, H
-3', J3', 2' = 6.1 Hz), 4.73-4.66 (m, 2 H, H-2", H
-3"), 4.50 (br s, 1 H, H-4'), 4.34-4.29 (m, 2 H, H
-5'), 3.84-3.75 (m, 2 H, H-6"), 2.77 (br s, 1 H,
6"-OH), 2.44-2.30 (m, 3 H, H-4", H-5"), 1.57, 1.5
5, 1.29及び1.28 (各 s, 各 3 H, イソプロピリデン CH
₃)

【００４１】実施例１７1-N-[(1R, 2S, 3R, 4R)-2,3-イソプロピリデンジオキシ
-4-O- ビス(フェニルチオ)ホスホロキシメチル-シクロ
ペンチル]-2', 3'-O-イソプロピリデンイノシン5'-ホス
ホロジアニリデート [1-N-[(1R, 2S, 3R, 4R)-2,3-Isop
ropylidenedioxy-4-O- bis(phenylthio)phosphoroxy me
thyl-cyclopentyl]-2', 3'-O -isopropylideneinosine
5'-Phosphorodianilidate] (13) 前反応で得た脱シリル体 (708 mg, 1.00 mmol)及びテト
ラゾール (140 mg, 2.00 mmol)をピリジン (10 ml×2)
共沸したのちピリジン (15 ml) に溶解し、室温でS, S-
ジフェニルホスホロ-ジチオエート シクロヘキシルアン
モニウム塩 (PSS, 571 mg, 1.50 mmol)、TPSCl (604 m
g, 2.00 mmol)の順に加え、アルゴン気流下で30分間撹
拌した。氷を加えて反応を停止後、クロロホルム (60 m
l)、水 (30 ml) を加えて分液し、有機層を飽和食塩水
(50 ml) で洗浄した。水層を集めさらにクロロホルム
(40 ml× 2) で逆抽出した後、総ての有機層を集め無水
硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧下留去しさらに
トルエン (30 ml×3) で共沸してピリジンを除去した。
残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー (φ2.2×1
0 cm, クロロホルム:エタノール= 1:0-100:5にて溶出)
で精製し、黄色あわ状物質として化合物13 (865 mg, 0.
890 mmol, 89.0 %) を得た。 UV (MeOH) λmax 240 nm FAB-MS m/z 973(MH⁺) FAB-HR 計算値(C₄₆H₅₁O₁₀N₆P₂S₂として) 973.2583; 実
測値 973.2618¹ H-NMR(500 MHz, CDCl₃) δ; 7.88 (s, 1 H, H-2), 7.7
9 (s, 1 H, H-8), 7.57-7.56 (br d, 4 H, m -PhS-),
7.38-7.34 (m, 6 H, o, p -PhS-), 7.27-6.82 (m,10 H,
PhNH-), 6.22-6.13 (m, 2 H, PhNH), 6.01 (d, 1 H, H
-1', J_1',2' = 2.2 Hz), 5.07-5.02 (m, 1 H, H-2'),
5.01-4.93 (m, 2 H, H-3', H-1"), 4.58-4.47 (m, 3 H,
H-2", H-3", H-4'), 4.43-4.36 (m ,2 H, H-6"), 4.35
-4.26 (m, 2H, H-5'), 2.46-2.40 (m, 1 H, H-4"), 2.1
7 (t 様, 2 H, H-5"), 1.57, 1.53,1.31及び1.25 (各
s, 各 3 H, イソプロピリデン CH₃)³¹ P-NMR (500 MHz, D₂O) δ; 50.1(s), 2.94 (s)

【００４２】実施例１８1-N-[(1R, 2S, 3R, 4R)-2,3-イソプロピリデンジオキシ
-4-S-チオフェニルホスホロキシメチル-シクロペンチ
ル]-2', 3'-O-イソプロピリデン-5'-O-ホスホリルイノ
シン [1-N-[(1R, 2S, 3R, 4R)-2,3-Isopropylidenediox
y-4-S-thiophenylphosphoroxymethyl-cyclopentyl]-2',
3'-O -isopropylidene-5'-O-phosphorylinosine] (1
5) 化合物13 (204 mg, 0.210 mmol) をピリジン:酢酸:無水
酢酸=1:1:1混合液 (3ml) に溶解し、水浴 (15℃) で冷
却しながら亜硝酸イソアミル (600 μl, 4.4 mmol) を
加え、アルゴン気流下室温で24時間撹拌した。反応液の
溶媒を留去し、エタノール (5 ml×3)で酸を共沸した後
更にピリジン (10 ml×2) 共沸した。残渣に予めピリジ
ン (5 ml×2) 共沸したH₃PO₂ (210 μl, 4.2 mmol), Et
₃N (270μl, 2.1 mmol), ピリジン (5 ml) の順に加え
アルゴン気流下室温で24時間撹拌した。反応液の溶媒を
留去しトルエン (5 ml×2) で共沸した。残渣にクロロ
ホルム (30 ml)、水 (30 ml)を加えて分液し、さらに有
機層から水で逆抽出した後、水層を併せて留去した。残
渣をC18逆相シリカゲルカラムクロマトグラフィー(φ1.
8×13 cm, 0-40% CH₃CNを含む0.1 N TEAA 緩衝液を用い
た直線勾配法 (pH7.0), 700 ml) で溶出し各フラクショ
ンの250 nmでの吸光度を測定し、主要画分についてHPLC
にてその組成を確認後、目的物を含むフラクションの溶
媒を減圧下留去し塩を水 (30 ml×3) で共沸して除い
た。この残渣を少量の水に溶解して三菱化成CH2POP樹脂
(70 g, φ1.8×22 cm) にマウントし、水 (150 ml)で
洗浄した後、20% CH₃CN を含む水で溶出した。溶媒を留
去し残渣を少量の CH₃CNに溶解し激しく撹拌しながらジ
エチルエーテル (50 ml) 中に滴下して粉末化し、遠心
分離 (2000 rpm, 10分) して上清をデカントして除き、
得られた固体を風乾して淡黄色固体として化合物15 (10
0 mg, 0.136 mmol, 65%)を得た。 UV (H₂O) λmax 235, 285(sh) nm. FAB-MS (ネガティブ)m/z 729 (M-H^-) FAB-HRMS 計算値(C₂₈H₃₅O₁₃N₄P₂Sとして) 729.1396;
実測値 729.1423¹ H-NMR(500 MHz, D₂O) δ; 8.12 (br s, 1 H, H-8), 8.
03 (s, 1 H, H-2), 7.35-7.32 (m, 2 H, m-Ph), 7.03
(d, 2 H, o-Ph, J = 7.7 Hz), 6.96-6.93 (m, 1 H, p-P
h), 6.03 (d, 1 H, H-1', J_1',2' = 3.0 Hz), 5.15 (d
d, 1 H, H-2', J_{2', 1'} = 3.0, J_2',3' = 6.1 Hz), 4.92
(dd, 1 H, H-3', J_3',2' = 6.1, J_3',4' =2.0 Hz), 4.
77-4.70 (m, 2 H, H-1", H-2"), 4.44-4.38 (m, 1 H, H
-3"), 4.32(m, 1 H, H-4'), 3.82-3.75 (m, 4 H, H-5',
H-6"), 2.20-2.12 (m, 1 H, H-5"a), 2.01-1.95 (m, 1
H, H-4"), 1.72-1.63 (m, 1 H, H-5"b), 1.40, 1.28,
1.18及び1.02 (各 s, 各 3 H, イソプロピリデン CH₃)³¹ P-NMR (500 MHz, D₂O) δ; 17.2 (s), 0.115 (s)

【００４３】実施例１９1-N-[(1R, 2S, 3R, 4R)-2,3-イソプロピリデンジオキシ
-4-ホスホロキシメチル-シクロペンチル]-2', 3'-O-イ
ソプロピリデンジオキシ-5'-O-ホスホリルイノシン 無
水物 2ナトリウム塩 [Disodium 1-N-[(1R, 2S, 3R, 4R)
-2,3-Isopropylidenedioxy-4-phosphoroxymethyl-cyclo
pentyl]-2', 3'-O -isopropylidene-5'-O-phosphorylin
osine anhydride] (16) 硝酸銀 (108 mg, 640 μmol), Et₃N (83 μl, 640 μmo
l)、ピリジン (100 μl)を MPD(メチルピロリドン) : H
MPA=3:1溶液 (15 ml)に溶解し遮光してアルゴン気流下
室温で20分間撹拌した。これに化合物15 (15 mg, 21.3
μmol) をピリジン (5 ml×3) 共沸したのちMPD: HMPA=
3:1溶液 (15 ml) に溶解したものをシリンジポンプを用
いて15時間かけて滴下し、さらに10時間撹拌した。反応
液を氷冷し、硫化水素ガスを10 分間通気した後生じたA
g₂Sを遠心分離 (2500 rpm, 10分) して除いた。上清に
クロロホルム (100 ml)、水 (200 ml)を加えて分液し、
有機層から水で逆抽出した後水層を併せて溶媒を留去し
た。残渣に水を加え全量を100 ml とし、これをDEAE-セ
ルロファイン(Cellulofine) A-200樹脂 (HCO₃-型, 50 m
l, φ1.1×18 cm) にマウントし、樹脂を水 (200 ml)で
洗浄後、0-0.4 NTEAB 緩衝液 (pH 8.0, 600 ml) の直線
勾配法で溶出した。各フラクションの250nmでの吸光度
を測定し、主要画分についてHPLCにてその組成を確認
後、目的物を含むフラクションの溶媒を減圧下留去し塩
を水 (30 ml×3) で共沸して除いた。この残渣を少量の
水に溶解して下記の条件で逆相HPLCにて分取を行い、溶
媒を減圧下留去し塩を水 (30 ml×3) で共沸して除い
た。この残渣をダイアイオン(DIAION) WK-2 (Na⁺ 型,
φ0.7×2 cm) にマウントし水で溶出した。凍結乾燥し
て化合物16 (6.0 OD₂₅₀ ユニット)を得た。

【００４４】逆相HPLC条件 カラム: Inertsil ODS-2 ( φ10.0×250 mm) (GL Scien
ces社製) A 溶液: 5% CH₃CN を含む 0.1 N TEAA 緩衝液 B 溶液: 80% CH₃CN を含む 0.1 N TEAA 緩衝液 B conc. 10-40% (30 分); 流量: 2.5 ml/分; 260 nmの
吸光度で検出。 UV (H₂O): λmax 252 nm¹ H-NMR(500 MHz, D₂O) δ; 8.47 (s, 1 H, H-2 or H-
8), 8.38 (s, 1 H, H-2 orH-8), 6.34 (d, 1 H, H-1',
J_1',2' = 3.5 Hz), 5.39 (m, 1 H, H-1''), 5.32(dd, 1
H, H-3', J_3',2' = 6.1, J_3',4' = 2.1 Hz), 5.29 (d
d, 1 H, H-2', J_2',1' = 3.5, J_2',3' = 6.1 Hz), 5.00
-4.95 (m, 1 H, H-2''), 4.90-4.82 (m, 1H, H-4'), 4.
83-4.79 (m, 1 H, H-3''), 4.47-4.44 (m, 2 H, H-5'),
4.30-4.20(m, 2 H, H-6''), 2.73-2.65 (m, 1 H, H-
4''), 2.59-2.53 (m, 1 H, H-5''a),2.28 (m, 1 H, H-
5''b), 1.84, 1.71, 1.57及び1.39 (各 s, 各 3 H, イ
ソプロピリジン CH₃)³¹ P-NMR(500 MHz, D₂O) δ; -10.8 (d), -11.4 (d)

【００４５】実施例２０1-N-[(1R, 2S, 3R, 4R)-2,3-ジヒドロキシ-4-ホスホロ
キシメチル-シクロペンチル]-5'-O-ホスホリルイノシン
無水物 2ナトリウム塩 [Disodium 1-N-[(1R, 2S,3R, 4
R)-dihydroxy-4-phosphoroxymethyl-cyclopentyl]-5'-O
-phosphorylinosine anhydride] (１ｂ) イソプロビリデン保護体 16 (1.4 OD₂₅₀ ユニット)を60
%ギ酸 (1ml) に溶解し室温で16時間撹拌した。反応液の
溶媒を減圧下に留去し、水 (1ml×3)で酸を共沸して除
去した。残渣を少量の水に溶解して、以下の条件で逆相
HPLCに付して精製した。目的物含有画分の溶媒を減圧下
に留去し、さらに塩を水 (5ml×3)で共沸して除いた。
この残渣をダイアイオン WK-2 イオン交換樹脂 (Na⁺
型, φ0.7×1 cm) にマウントし、水で溶出した。目的
物含有画分を凍結乾燥して最終目的物 (0.48 OD₂₅₀ ユ
ニット, 35%)をナトリウム塩として得た。 逆相HPLC条件 カラム: Inertsil ODS-2 ( φ10.0×250 mm)(GL Scienc
es社製) A 溶液: 0.1 N TEAA 緩衝液 B 溶液: 50% CH₃CN を含む 0.1 N TEAA 緩衝液 B conc. 0-50% (30 分); 流量: 2.5 ml/分; 260 nmの吸
光度で検出。 溶出時間: 14.9 分 UV (H₂O): λmax 252 nm³¹ P-NMR(500 MHz, D₂O) δ; -10.8 (d), -11.3 (d)

【００４６】

【発明の効果】本発明の目的化合物はｃADPRの安定等価
体であるので、細胞内情報伝達系の研究に利用すること
ができ、また医薬品開発のリード化合物としても有用で
ある。また、本発明のヌクレオシド誘導体は、本発明の
目的化合物を合成する際の中間体として有用な化合物で
ある。

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記一般式（Ａ）、（Ｂ）又は
   （Ｃ）で表されるサイクリックＡＤＰ−リボース類縁体
   及びその塩。 【化１】
2. 【請求項２】 下記一般式（Ｄ）、（Ｅ）又は
   （Ｆ）で表されるヌクレオシド誘導体及びその塩。 【化２】