JPH0952824A - 末梢血液中の造血幹細胞数を増加するための薬剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】末梢血液中の造血幹細胞数を増加するための薬
剤を提供する。 【解決手段】 【化１】 〔式中Ｘ₀ は−（ＣＨ₂ ）_1-5 −または置換基を有して
もよいフェニレン基、ａは３ないし７の整数を示し、Ａ
は−ＣＯＮＨ−あるいは−ＮＨＣＯ−を示す。Ａが−Ｃ
ＯＮＨのとき、Ｘ₁ はα−アミノ酸のα−アミノ基およ
びα−カルボキシル基を除いた残基またはω−アミノ酸
のω−アミノ基およびα−カルボキシル基を除いた残基
で、残基中に官能基を有していてもよいものを示す。Ａ
が−ＮＨＣＯ−のとき、Ｘ₁ は、単結合、ＣＨ₂ ＮＨ、
ＣＨ₂ Ｏあるいはハロゲン、水酸基、アルコキシル基で
置換されていてもよい低級アルキレン基を示す。Ｘ₂ は
−ＮＨ（ＣＨ₂ ）₄ ＮＨ−（ＣＨ₂ ）₃ −ＮＨ−Ｒ
₀₂（式中Ｒ₀₂は水素、アミノ酸もしくはペプチドのカル
ボキシル基より水酸基を除いた残基を示す。）〕で表さ
れるスパガリン関連化合物およびそれらの薬理学的に許
容される塩を有効成分として含有する末梢血液中の造血
幹細胞数を増加するための薬剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、スパガリン関連化
合物を有効成分とする末梢血液中の造血幹細胞数を増加
する目的で用いられる薬剤に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】骨髄移植術に必要な自己再生能を有する
造血幹細胞を骨髄中から採取する際の全身麻酔等による
ドナーの負担は大きい。そこで、末梢血液中から採取す
る方法が現在注目されている。しかし、末梢血液中の造
血幹細胞の割合は、骨髄中の１００分の１と言われてお
り、末梢血液中の造血幹細胞の割合を出来る限り高める
ことが好ましい。そのために、自家末梢血幹細胞移植又
は同種末梢血幹細胞移植では、末梢血液中の造血幹細胞
数を増加させる目的で、造血刺激因子の投与が行なわれ
ており、特に癌患者における自家末梢血幹細胞移植で
は、シスプラチン、シクロホスファミド，Ａｒａ−Ｃ、
エトポシド等の制癌剤と造血刺激因子との併用投与が行
なわれている。（Ｒｕｔｈ Ｐｅｔｔｅｎｇｅｌｌ ｅ
ｔ ａｌ．，Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎ
ａｌ ｏｆ Ｈｅｍａｔｏｌｏｇｙ ｖｏｌ．６０ Ｎ
ｏ．１（１９９５）１−１５，Ｌｕｃｉａｎａ Ｔｅｏ
ｆｉｌｉ ｅｔ ａｌ．，ＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＨ
ｅｍａｔｏｌｏｇｙ ２２：９９０−９９５（１９９
４）Ｂｌｏｏｄ，Ｖｏｌ．８５，Ｎｏ．６（Ｍａｒｃｈ
１５），１９９５：ｐｐ１４１３−１４１５，１６６６
−１６７２） スパガリン関連化合物はバチルス属の生産菌より単離さ
れたスパガリンの誘導体で、誘導体の種類により抗腫瘍
活性、免疫増強活性、免疫抑制活性のあることが知られ
ている（特開昭５８年第６２１５２号、特開昭６１年第
１２９１１９号、特開昭６４年第９０１６４号）。後記
一般式〔１〕の化合物の多くはこれらの公報に開示さ
れ、更に、〔Ｂ−１〕で示される化合物の多くは特開昭
５９年第４２３５６号に、〔Ｂ−２〕で示される化合物
の多くは特開平２年第１３１４５８号に、〔Ｂ−３〕で
示される化合物の多くは特開昭６３年第４５２４７号お
よび特開平６年第２９３７２８号に開示されている。

【０００３】

【発明が解決しようとする課題】現在、末梢血液中の造
血幹細胞数を増加する目的で用いられる薬剤は副作用や
効果の点で不十分で、新規な安全性の高い薬剤の開発が
切望されている。

【０００４】

【課題を解決するための手段】そこで、本発明者らはス
パガリン関連化合物もしくはその塩が、末梢血液中の造
血幹細胞の割合を顕著に高めることを発見し、末梢血液
への造血幹細胞数の増加薬として有望であることを見出
した。

【０００５】すなわち、本発明は一般式〔１〕 Ｇｕ−Ｘ₀ −（ＣＨ₂ ）_a −Ａ−Ｘ₁ −ＣＯ−Ｘ₂

【０００６】〔式中Ｇｕはグアニジノ基、Ｘ₀ は−（Ｃ
Ｈ₂ ）_1-5 −または置換基を有してもよいフェニレン
基、ａは３ないし７の整数を示し、Ａは−ＣＯＮＨ−あ
るいは−ＮＨＣＯ−を示し、Ａが−ＣＯＮＨのとき、Ｘ
₁ はα−アミノ酸のα−アミノ基およびα−カルボキシ
ル基を除いた残基またはω−アミノ酸のω−アミノ基お
よびα−カルボキシル基を除いた残基で、残基中に官能
基を有していてもよいものを示す。Ａが−ＮＨＣＯ−の
とき、Ｘ₁ は、単結合、ＣＨ₂ ＮＨ、ＣＨ₂ Ｏ、あるい
はハロゲン、水酸基、アルコキシル基で置換されていて
もよい低級アルキレン基を示す。Ｘ₂ は−ＮＨ（Ｃ
Ｈ₂ ）₄ ＮＨ−（ＣＨ₂ ）₃ −ＮＨ−Ｒ₀₂（式中Ｒ₀₂は
水素、アミノ酸もしくはペプチドのカルボキシル基より
水酸基を除いた残基を示す。）〕で表されるスパガリン
関連化合物およびそれらの薬理学的に許容される塩を有
効成分として含有する末梢血液中の造血幹細胞数を増加
するための薬剤に関する。本発明でいう末梢血液中の造
血幹細胞数を増加するための薬剤とは、末梢血液への造
血幹細胞の動員作用を有する薬剤をも含めている。

【０００７】上記一般式〔１〕に含まれる化合物として
は、たとえば一般式〔Ｂ−１〕

【化５】

【０００８】〔式中Ｘは−（ＣＨ₂ ）_1-5 −または−Ｃ
₆ Ｈ₄ ─を示し、ｒは３〜７の整数を示し、Ｒ₆ はα−
アミノ酸のα−アミノ基から水素原子１個およびα−カ
ルボキシル基からヒドロキシル基を除いた残基またはω
−アミノ酸のω−アミノ基から水素原子１個およびα−
カルボキシル基からヒドロキシル基を除いた残基で、残
基中に官能基を有していてもよいものを示す。〕で表さ
れるスパガリン関連化合物、一般式〔Ｂ−２〕

【化６】

【０００９】〔式中Ｙは−（ＣＨ₂ ）_1-5 −または−Ｃ
₆ Ｈ₄ −を示し、Ｗは水素原子またはアミノ酸もしくは
ペプチドのカルボキシル基より水酸基を除いた残基を示
し、またｍは０、１または２を示し、ｎは１または２、
ｓは３〜７の整数を示す。〕で表されるスパガリン関連
化合物および

【００１０】一般式〔Ｂ−３〕

【化７】

【００１１】〔式中Ｕは−（ＣＨ₂ ）_1-3 −または−Ｃ
₆ Ｈ₄ −を示し、Ｂは−ＣＯＮＨ−あるいは−ＮＨＣＯ
−を示し、Ｒ₂ は−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣＨ₃ 、−ＯＣＨ
₂ ＣＨ₃ または−ＣＨ₂ を示し、Ｒ₄ は水素原子または
アミノ酸もしくはペプチドのカルボキシル基より水酸基
を除いた残基、ｔは３〜７の整数を示す。ただし、Ｒ₄
が水素原子のとき、Ｂが−ＣＯＮＨである化合物を除
く。〕で表されるスパガリン関連化合物などがあげられ
る。これらの全ての一般式〔１〕に含まれる化合物をま
とめて、以下「本化合物」という。

【００１２】一般式〔１〕のＸ₀ がフェニレン基を表す
場合には、そのフェニレン基は置換基を有していてもよ
い。置換基としては、塩素、フッ素、臭素などのハロゲ
ン原子、そして、メチル、エチル、プロピル、ｔ−ブチ
ル、ペンチルなどのＣ_1-5 の低級アルキル基やメトキ
シ、エトキシ、プロポキシ、ｔ−ブトキシ、ペントキシ
などのＣ_1-5 の低級アルコキシ基などが挙げられる。ま
た、Ｘ₀ の−（ＣＨ₂ ）_1-5 −としては、−（ＣＨ₂ ）
₃ −または−（ＣＨ₂ ）₅ −が好ましい。

【００１３】一般式〔１〕のＡが−ＣＯＮＨ−とき、Ｘ
₁ はα−アミノ酸のα−アミノ基およびα−カルボキシ
ル基を除いた残基またはω−アミノ酸のω−アミノ基お
よびα−カルボキシル基を除いた残基で、残基中に官能
基を有していてもよいものであり、公知のα−またはω
−アミノ酸から誘導される残基であれば特に制限はな
い。

【００１４】また、α−またはω−アミノ酸から誘導さ
れる残基において、光学活性炭素を有するものは、Ｌ
−、Ｄ−及びＤＬ−型のいずれでも使用することができ
る。

【００１５】Ａが−ＣＯＮＨのときＸ₁ の代表的な具体
例としては、グリシン、α−メトキシグリシン、アラニ
ン、α−アミノ酪酸、プロリン、バリン、ノルバリン、
イソロイシン、アロイソロイシン、ロイシン、ノルロイ
シン、セリン、ホモセリン、スレオニン、アロスレオニ
ン、ｏ−メチルセリン、ｏ−エチルセリン、ｏ−メチル
ホモセリン、ｏ−エチルホモセリン、ｏ−メチルスレオ
ニン、ｏ−エチルスレオニン、ｏ−メチルアロスレオニ
ン、ｏ−エチルアロスレオニン、オルニチン、リジン、
アスパラギン酸、グルタミン酸、アスパラギン、グルタ
ミン、アルギニン、フェニルアラニン、チロシン、ヒス
チジン、トリプトファン、システイン、ホモシステイ
ン、Ｓ−メチルシステイン、Ｓ−エチルシステイン、メ
チオニン、エチオニンなどのα−アミノ酸のα−アミノ
基およびα−カルボキシル基を除いた残基およびβ−ア
ラニン、γ−アミノ酪酸、δ−アミノ吉草酸、ε−アミ
ノカプロン酸などのアミノ酸のω−アミノ基およびα−
カルボキシル基を除いた残基などが挙げられる。

【００１６】一般式〔１〕のＡが−ＮＨＣＯ−のとき、
Ｘ₁ は単結合、ＣＨ₂ ＮＨ、ＣＨ₂ Ｏあるいは置換また
は非置換低級アルキレン基を示す。低級アルキレン基と
しては例えば、メチレン基、エチレン基、プロピレン基
などがあげられ、その置換基としては例えばフッ素、塩
素、臭素などのハロゲンや、メトキシル基、エトキシル
基などの低級アルコキシル基や、水酸基があげられる。
本発明で低級といった場合、炭素数１〜６程度のもの、
好ましくは１〜３程度のものを意味する。

【００１７】一般式〔１〕で表される化合物は、酸と塩
を形成してもよいが、塩を形成するための酸として非毒
性であれば無機酸、有機酸のいずれでもよい。無機酸と
しては特に制限はないが、塩酸、硫酸、硝酸などが好ま
しい。有機酸も特に制限はないが、メタンスルホン酸、
エタンスルホン酸、プロパンスルホン酸などが好まし
い。

【００１８】次に、一般式〔Ｂ−１〕のスパガリン関連
化合物において、Ｒ₆ はα−アミノ酸のα−アミノ基か
ら水素原子１個およびα−カルボキシル基からヒドロキ
シル基を除いた残基またはω−アミノ酸のω−アミノ基
から水素原子１個およびα−カルボキシル基からヒドロ
キシル基を除いた残基で、残基中に官能基を有していて
もよいものであり、公知のα−またはω−アミノ酸から
誘導される残基であれば特に制限はない。

【００１９】また、α−またはω−アミノ酸から誘導さ
れる残基において、光学活性炭素を有するものはＬ−、
Ｄ−及びＤＬ−型のいずれでも使用することができる。

【００２０】Ｒ₆ の残基のためのアミノ酸の代表的な具
体例としては、前記一般式〔１〕のＸ₁ のところで挙げ
たα−およびω−アミノ酸が挙げられる。

【００２１】一般式〔Ｂ−１〕のスパガリン関連化合物
の代表的な具体例を表１〜２に列挙する。なお、一般式
〔Ｂ−１〕のＲ₆ が不斉炭素原子を有する場合、その立
体配置はＳ、ＲまたはＳＲのいずれでもよい。

【００２２】

【表１】

【００２３】

【表２】

【００２４】本発明の一般式〔Ｂ−２〕において、Ｗと
しては例えば水素原子または下記アミノ酸もしくは下記
ペプチドのカルボキシル基から水酸基を除いた残基など
が挙げられる。なお、アミノ酸残基の立体配置はグリシ
ン、β−アラニンおよびγ−アミノ酪酸を除き、Ｓ、Ｒ
またはＳＲ型を示す。

【００２５】（１）アミノ酸 アラニン、アルギニン、オルニチン、アスパラギン酸、
アスパラギン、システイン、シスチン、グルタミン酸、
グルタミン、ピログルタミン酸、ヒスチジン、リジン、
グリシン、プロリン、ヒドロキシプロリン、イソロイシ
ン、ロイシン、メチオニン、フェニルアラニン、フェニ
ル置換フェニルアラニン、セリン、ホモセリン、スレオ
ニン、チロシン、トリプトファン、バリン、フェニルグ
リシン、パラヒドロキシフェニルグリシン、４−ヒドロ
キシメチル−３−ヒドロキシフェニルグリシン、β−ア
ラニン、γ−アミノ酪酸、α−アミノ酪酸、３−アミノ
−２−ヒドロキシ−４−フェニル酪酸など

【００２６】（２）ペプチド 上記（１）のアミノ酸が単独あるいは組み合った２〜３
個のアミノ酸が縮合したジあるいはトリペプチドなどが
望ましい。

【００２７】例えばアラニルアラニン、ロイシルロイシ
ン、バリルバリン、フェニルアラニルフェニルアラニ
ン、チロシルチロシン、フェニルグリシルフェニルグリ
シン、グリシルグリシン、イソロイシルイソロイシン、
ロイシルフェニルアラニン、フェニルアラニルロイシ
ン、ロイシルフェニルグリシン、フェニルグリシルロイ
シン、グリシルグリシルグリシン、フェニルグリシルフ
ェニルグリシルフェニルグリシン、フェニルアラニルフ
ェニルアラニルフェニルアラニンおよびロイシルロイシ
ルロイシンなどが挙げられる。

【００２８】好ましいアミノ酸もしくはペプチドとして
は、フェニルグリシン、フェニルアラニン、ロイシン、
アスパラギン酸、トリプトファン、アラニンおよびこれ
らのアミノ酸が２〜３個縮合したペプチドなどである。
より好ましいものとしては、フェニルグリシン、ロイシ
ルロイシンなどである。

【００２９】本発明の一般式〔Ｂ−２〕の代表的化合物
としては、例えば以下の表３〜５に示した化合物が挙げ
られる。一般式〔Ｂ−２〕において＊印を付した炭素原
子の立体配置はＳ、ＲまたはＳＲのいずれでもよい。

【００３０】

【表３】

【００３１】

【表４】

【００３２】

【表５】

【００３３】但し、表中のｐｈＧはＣ₆ Ｈ₅ −ＣＨ（Ｎ
Ｈ₂ ）ＣＯ−を、Ｌｅｕ−Ｌｅｕは（ＣＨ₃ ）₂ ＣＨＣ
Ｈ₂ ＣＨ（ＮＨ₂ ）ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ₂ ＣＨ（Ｃ
Ｈ₃ ）₂）ＣＯ−を示す。

【００３４】本発明の一般式〔Ｂ−３〕におけるＲ₄ と
しては水素原子または前記一般式〔Ｂ−２〕のところで
挙げたアミノ酸もしくはペプチドのカルボキシル基より
水酸基を除いた残基が挙げられる。尚、一般式〔Ｂ−
３〕で示される化合物は、Ｒ₄が水素原子で、Ｂが−Ｃ
ＯＮＨ−である化合物を含まない。

【００３５】以下にＲ₄ の代表的な基を示す。 式 Ｒ₀₁、Ｒ₀₂−Ｃ₆ Ｈ₄ −（ＣＨ₂ ）_r −ＣＨ（Ｎ
Ｈ₂ ）ＣＯ− 〔式中のｒは０または１、Ｒ₀₁およびＲ₀₂はフェニル基
上の置換基を示し、Ｒ₀₁は−Ｈまたは−ＯＨ、Ｒ₀₂は−
Ｈまたは−ＣＨ₂ ＯＨを示す。〕で示される基、

【００３６】式 Ｒ₀₃−（ＣＨ₂ ）_b −ＣＨ（Ｒ₀₄）
ＣＯ− 〔式中のｂは０〜４の整数、Ｒ₀₃は−Ｈ、−ＣＯＯＨ、
−ＯＨ、−ＮＨ₂ または−ＣＯＮＨ₂ 、Ｒ₀₄は−Ｈまた
は−ＮＨ₂ を示し、すくなくともＲ₀₃およびＲ₀₄のいず
れか一方は−ＮＨ₂ を示す。〕で示される基、

【００３７】式 Ｈ−（Ｚ）_y − 〔式中のｙは１または２、Ｚは−ＮＨＣＨ（ＣＨ₂ ＣＨ
（ＣＨ₃ ）₂ ）−ＣＯ−または−ＮＣ₄ Ｈ₇ −ＣＯ−を
示し、ｙ＝２のとき、両者はペプチド結合をしているも
のとする。ただし、−ＮＣ₄ Ｈ₇ −は１，２−ピロリジ
ニレン基を示す。〕で示される基または、

【００３８】式 Ｃ₆ Ｈ₅ −ＣＨ₂ ＣＨ（ＮＨ₂ ）−
ＣＨ（ＯＨ）ＣＯ− で示される基などである。

【００３９】一般式〔Ｂ−３〕の化合物の中で好ましい
化合物としては、一般式〔Ｂ−３〕におけるＵが−Ｃ₆
Ｈ₄ −、Ｂが−ＣＯＮＨ−、Ｒ₂ が−ＣＨ₂ ＯＨ、、Ｒ
₄ が（ＬまたはＤ）Ｃ₆ Ｈ₅ −ＣＨ（ＮＨ₂ ）ＣＯ−、
（Ｌ）Ｃ₆ Ｈ₅ ＣＨ₂ ＣＨ（ＮＨ₂ ）ＣＯ−、（Ｌ）ｐ
−ＨＯ−Ｃ₆ Ｈ₄ −ＣＨ₂ ＣＨ（ＮＨ₂ ）ＣＯ−、
（Ｌ）ＣＨ₃ ＣＨ（ＮＨ₂ ）ＣＯ−、（Ｌ）（ＣＨ₃ ）
₂ ＣＨＣＨ₂ ＣＨ（ＮＨ₂）ＣＯ−、または（Ｌ，Ｌ）
（ＣＨ₃ ）₂ ＣＨＣＨ₂ ＣＨ（ＮＨ₂ ）ＣＯＮＨＣＨ
（ＣＨ₂ ＣＨ（ＣＨ₃ ）₂ ）ＣＯ−である化合物または
その薬理学的に許容される塩などが挙げられる。

【００４０】一般式〔Ｂ−３〕の化合物の例示 本発明の一般式〔Ｂ−３〕におけるＢが−ＣＯＮＨ−で
ある化合物としては、例えば表６〜１０の化合物が挙げ
られる。

【００４１】

【表６】

【００４２】

【表７】

【００４３】

【表８】

【００４４】

【表９】

【００４５】

【表１０】

【００４６】〔Ｂ−３〕において、Ｂが−ＮＨＣＯ−の
化合物としては、表５−表１０に対応する化合物が同様
にあげられる。

【００４７】本化合物は酸と塩を形成し、そして、塩を
形成するための酸は薬理学的に許容されるものであれば
無機酸、有機酸のどちらでもよい。無機酸としては、例
えば塩酸、硫酸、硝酸、燐酸などが好ましい。有機酸と
しては、例えば酢酸、プロピオン酸、コハク酸、フマル
酸、マレイン酸、リンゴ酸、酒石酸、グルタル酸、クエ
ン酸、ベンゼンスルホン酸、トルエンスルホン酸、メタ
ンスルホン酸、エタンスルホン酸、プロパンスルホン
酸、アスパラギン酸、グルタミン酸などが好ましい。

【００４８】本化合物はいずれも公知化合物あるいはそ
の類縁化合物で公知の方法もしくはそれに準じた方法で
製造することができる。

【００４９】上記〔Ｂ−１〕〜〔Ｂ−３〕の化合物の中
で好ましい化合物としては、一般式〔１〕において、Ｘ
₀ が−（ＣＨ₂ ）_3-5 −またはフェニレン基、ａは３な
いし７の整数、Ａが−ＣＯＮＨ−、Ｘ₁ が−ＣＨ（Ｏ
Ｈ）−、−ＣＨ（ＯＣＨ₃ ）−、−ＣＨ₂ ＣＨ（ＯＨ）
ＣＨ₂ −または−ＣＨ（ＣＨ₂ ＯＨ）−、Ｘ₂ が−ＮＨ
（ＣＨ₂ ）₄ ＮＨ（ＣＨ₂ ）₃ ＮＨ₂ または−ＮＨ（Ｃ
Ｈ₂ ）₄ ＮＨ（ＣＨ₂ ）₃ ＮＨ−Ｌｅｕであるスパガリ
ン関連化合物が挙げられる。

【００５０】これらの化合物の中でより活性の高いもの
としては下記化合物およびそれらの薬理学的に許容され
る塩が挙げられる。 Ｇｕ−（ＣＨ₂ ）₆ −ＣＯＮＨＣＨ（ＯＨ）ＣＯＮＨ
（ＣＨ₂ ）₄ ＮＨ（ＣＨ₂）₃ −ＮＨ₂ （化合物番号Ｂ
−１−９） Ｇｕ−Ｃ₆ Ｈ₄ −（ＣＨ₂ ）₃ −ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ₂
ＯＨ）ＣＯＮＨ（ＣＨ₂）₄ ＮＨ（ＣＨ₂ ）₃ ＮＨ
₂ （化合物番号Ｂ−１−５） Ｇｕ−Ｃ₆ Ｈ₄ −（ＣＨ₂ ）₃ ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ₂ Ｏ
Ｈ）ＣＯＮＨ（ＣＨ₂ ）₄ ＮＨ（ＣＨ₂ ）₃ ＮＨ−Ｌｅ
ｕ（化合物番号Ｂ−３−２） Ｇｕ−（ＣＨ₂ ）₈ −ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ₂ ＯＨ）ＣＯ
ＮＨ（ＣＨ₂ ）₄ ＮＨ（ＣＨ₂ ）₃ −ＮＨ₂ （化合物番
号Ｂ−１−２） Ｇｕ−（ＣＨ₂ ）₁₀−ＣＯＮＨＣＨ₂ ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ
₂ ＣＯＮＨ（ＣＨ₂ ）₄ＮＨ（ＣＨ₂ ）₃ ＮＨ₂ （化合
物番号Ｂ−２−４０） Ｇｕ−（ＣＨ₂ ）₆ −ＣＯＮＨＣＨ（ＯＣＨ₃ ）ＣＯＮ
Ｈ（ＣＨ₂ ）₄ ＮＨ（ＣＨ₂ ）₃ ＮＨ₂ （化合物番号Ｂ
−１−１０） 〔式中Ｇｕはグアニジノ基（Ｈ₂ ＮＣ（ＮＨ）ＮＨ
−）、Ｌｅｕはロイシル残基（（ＣＨ₂ ）₂ ＣＨＣＨ₂
ＣＨ（ＮＨ₂ ）ＣＯ−）を表す。）

【００５１】本化合物が末梢血液中の造血幹細胞数を増
加するための薬剤として使用される場合は単独または賦
形剤あるいは担体と混合して注射剤、経口剤または座剤
などとして投与される。賦形剤および担体としては、薬
剤学的に許容されるものが選ばれ、その種類および組成
は投与経路や投与方法によって決まる。例えば液状担体
として水、アルコール類もしくは大豆油、ピーナッツ
油、ゴマ油、ミネラル油などの動植物油または合成油が
用いられる。固体担体としては、乳糖、マルトース、シ
ュクロースなどの糖類、アミノ酸類、ヒドロキシセルロ
ースなどのセルロース誘導体、ステアリン酸マグネシウ
ムなどの有機酸塩などが使用される。

【００５２】注射剤で用いる賦形剤としては、マンニト
ール、マルトース、デキストラン、乳糖、シクロデキス
トリン、コンドロイチン硫酸、ゼラチン、ヒト血清アル
ブミンが挙げられ、その中で、マルトース、乳糖、コン
ドロイチン硫酸、ゼラチン、ヒト血清アルブミンが好ま
しい。これらの賦形剤と共に凍結乾燥製剤とし、それを
投与時に注射用の適当な溶剤、例えば滅菌水、生理食塩
水、ブドウ糖液、電解質液、アミノ酸液などの静脈投与
用液体に溶解して投与することもできる。

【００５３】また、本発明における製剤の組成中にｐＨ
調製等の目的で、酸やアルカリまたは適量の緩衝剤を加
えてもよい。

【００５４】製剤中における本化合物の含量は製剤によ
り種々異なるが、通常０．１〜１００重量％、好ましく
は１〜９８重量％である。例えば注射液では、通常０．
１〜３０重量％、好ましくは１〜１０重量％の有効成分
を含むようにする。経口投与する場合には、前記固体担
体もしくは液状担体と共に錠剤、カプセル剤、粉剤、顆
粒剤、液剤、ドライシロップ剤などの形態で用いられ
る。一般に、錠剤、カプセル剤、粉剤、顆粒剤は５〜１
００重量％、好ましくは２５〜９８重量％の有効成分を
含む。

【００５５】投与量は患者の年齢、体重、症状、治療目
的などにより決定されるが、治療量は一般的に、非経口
投与で１〜１００mg／kg・日、経口投与で５〜５００mg
／kg・日である。本化合物は比較的低毒性で、しかも、
連続投与による重症な臓器障害がないことが特徴であ
る。

【００５６】〔作用〕一般式〔Ｂ−１〕、〔Ｂ−２〕お
よび〔Ｂ−３〕で表されるスパガリン関連化合物が末梢
血液中の造血幹細胞の割合を高める作用について実験例
で示す。

【００５７】実験例 本化合物の投与によるマウスにお
ける末梢血幹細胞数の増加 実験方法 ＲＡＤＩＡＴＩＯＮ ＲＥＳＥＡＣＨ １４，２１３−
２２２（１９６１）のＴｉｌｌとＭｃＣｕｌｌｏｃｈの
方法に準じて行なった。具体的には以下の通りである。
実験には、雌性Ｃ３Ｈ／ＨｅＮマウスを用いた。本化合
物は、１０ｍｇ／ｋｇを１日３回、３日間連日腹腔内投
与し、投与終了後５日目に採血を行った。対照群は無投
与群とした。末梢血中の単核細胞は、マウスリンパ球比
重分離液Ｍ−ＳＭＦ（商品名、日本抗体研究所製）で分
離し、多分化能造血幹細胞（ｃｏｌｏｎｙ−ｆｏｒｍｉ
ｎｇ−ｕｎｉｔｓ ｉｎ ｓｐｌｅｅｎ，ＣＦＵ−Ｓ）
数を以下のように肉眼で測定した。致死線量（９２０ｒ
ａｄ）のＸ線を照射した同系マウスに、上記のとおり分
離した細胞を１〜１０×１０⁵ 個移植し、移植後１１日
目に、脾臓を取り出しその脾コロニー数をＢｏｕｉｎ氏
液で固定し、肉眼で測定した。脾コロニー数はＣＦＵ−
Ｓ数と等数とみなし、１０⁶ 個単核細胞中のＣＦＵ−Ｓ
数を算出した。結果を表１１に示す。

【００５８】

【表１１】 本化合物の投与によるマウスにおける末梢血幹細胞数の増加 ────────────────────────────── 化合物番号 １０⁶ 個単核細胞中の ＣＦＵ−Ｓ数 ────────────────────────────── 対照群 ０．６ ± ０．２ Ｂ─１− ９ １６ ± ４．３＊＊ Ｂ─１─ ２ ９ ± １．５＊＊ Ｂ─１─ ５ ９ ± ３．６＊ Ｂ─３─ ２ ７ ± ２．２＊＊ Ｂ─２─４０ ４ ± ２．１＊ Ｂ─１─１０ ３ ± １．３＊ ────────────────────────────── ＊ｐ＜０．００５ ，＊＊ｐ＜０．００１ （ｔ−検定）

【００５９】

【実施例】以下に本発明の実施例を具体的に示すが、本
発明はこれらに限定されるものではない。 実施例１ 注射剤 化合物番号Ｂ−１−９ １０重量部、乳糖２０重量部、
１Ｎ−塩酸および注射用蒸留水（適量）によりｐＨ４．
０に調製した薬液５００重量部を得る。この調製した薬
液をメンブランフィルターで除菌ろ過した後、注射用ガ
ラス容器に分注し、凍結乾燥する。凍結乾燥終了後、１
バイアルに化合物番号Ｂ−１−９ １００mgを含む凍結
乾燥注射用製剤を得る。

【００６０】実施例２ 顆粒剤 化合物番号Ｂ−１−９ ５０重量部、乳糖６００重量
部、結晶セルロース３３０重量部およびヒドロキシプロ
ピルセルロース２０重量部をよく混和し、ロール型圧縮
機（ローラーコンパクター登録商標）を用いて圧縮し、
破砕して、１６メッシュと６０メッシュの間に入るよう
に篩過し、顆粒とした。

【００６１】実施例３ 錠剤 化合物番号Ｂ−１−９ ３０重量部、結晶乳糖１２０重
量部、結晶セルロース１４７重量部およびステアリン酸
マグネシウム３重量部をＶ型混合機で混合した後、打錠
し、１錠３００mgの錠剤を得た。

【００６２】実施例４ １０−｛Ｎ−（１１−グアニジノウンデカノイル）−γ
−アミノ−β−（Ｓ）−ヒドロキシブタノイル｝−１，
５，１０−トリアザデカン・３塩酸塩（化合物番号Ｂ−
２−４０）の合成

【００６３】（イ）１０−｛Ｎ−（１１−グアニジノウ
ンデカノイル）−γ−アミノ−β−（Ｓ）−ヒドロキシ
ブタノイル｝−１，５−ジ−ベンジルオキシカルボニル
−１，５，１０−トリアザデカン・塩酸塩 １１−グアニジノウンデカン酸・塩酸塩３．３ｇ（１
１．７１ｍｍｏｌ）をジメチルホルムアミド４０ｍｌに
溶かし、氷冷下Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミド１．６３
ｍｇ（１４．０５ｍｍｏｌ）とＮ，Ｎ’−ジシクロヘキ
シルカルボジイミド２．９２ｇ（１４．０５ｍｍｏｌ）
を加え、室温で一夜反応される。析出物をろ別し、ろ液
はそのまま次の反応に使用する。

【００６４】油状の１０−（γ−アミノ−β−（Ｓ）−
ヒドロキシブタノイル）−１，５−ジ−ベンジルオキシ
カルボニル−１，５，１０−トリアザデカン・塩酸塩
５．５ｇ（９．７６ｍｍｏｌ相当）をジメチルホルムア
ミド４０ｍｌに溶かし、氷冷下トリエチルアミン１．１
９ｇ（１１．７１ｍｍｏｌ）を加え、次いで上述の１１
−グアニジノウンデカン酸塩酸塩Ｎ−ヒドロキシコハク
酸イミドエステルのジメチルホルムアミド溶液を加え、
室温で一夜反応させる。反応液を減圧濃縮し、油状の残
渣をｎ−ヘキサン１００ｍｌで２回洗浄したのち減圧濃
縮する。

【００６５】得られた油状物をシリカゲル６０（メルク
社製）によるカラムクロマトグラフィーに付し、クロロ
ホルム−メタノール−１７％アンモニア水（６：２．
５：０．５ｖ／ｖ）の混液で展開すると油状物４．９ｇ
（収率６４．７２％）が得られる。

【００６６】ＮＭＲ（ＣＤ₃ ＯＤ＋Ｄ₂ Ｏ、ｅｘｔｅｒ
ｎａｌ ＴＭＳ） δ＝１．２〜２．２（ｍ、２２Ｈ）、２．２〜２．８
（ｍ、４Ｈ）、３．１〜３．８（ｍ、１２Ｈ）、４．０
〜４．６（ｍ、Ｈ）、５．２５（ｓ、２Ｈ）、５．２８
（ｓ、２Ｈ）、７．５６（ｓ、１０Ｈ）． ＴＬＣ（クロロホルム：メタノール：１７％アンモニア
水＝６：２．５：０．５％） Ｒｆ＝０．４２

【００６７】（ロ）１０−｛Ｎ−（１１−グアニジノウ
ンデカノイル）−γ−アミノ−β−（Ｓ）−ヒドロキシ
ブタノイル｝−１，５−ジ−ベンジルオキシカルボニル
−１，５，１０−トリアザデカン・塩酸塩４．７ｇ
（６．０５ｍｍｏｌ）をメタノール６０ｍｌに溶かし、
酢酸１．３ｇとパラジウム黒０．７ｇを加えて室温、常
圧で４時間接触還元を行う。

【００６８】反応後触媒をろ別し、ろ液を減圧濃縮する
と油状物４．０ｇ（収率定量的）が得られる。この油状
物を蒸留水６０ｍｌに溶かし、ＣＭ−セファデックス
（登録商標）Ｃ−２５（Ｎａ⁺ ）３５０ｍｌを充填した
カラムに付し、蒸留水１８００ｍｌと０．８Ｍ塩化ナト
リウム水溶液１８００ｍｌとの間のグラジェント溶出法
で溶出し、目的物を含むフラクションを集め減圧で濃縮
乾固し、乾固物にメタノールを加えて不溶物の塩化ナト
リウムをろ別する。得られた油状物からの目的物の精製
は、次のようにして行う。

【００６９】残存する少量の塩化ナトリウムを除去する
ために得られた油状物をメタノール２０ｍｌに溶かし、
セファッデクス（登録商標）ＬＨ−２０ ２００ｍｌを
充填したカラムに付し、メタノールで溶出し、目的物を
含むフラクションを集め、減圧で濃縮する。得られた油
状物を蒸留水３５ｍｌに溶かし、不溶物をろ別後凍結乾
燥すると目的物２．６３ｇ（収率７４．９３％）が得ら
れる。

【００７０】ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ、２００ＭＨｚ） δ＝１．１８〜１．４６（ｍ、１２Ｈ）、１．４７〜
１．８３（ｍ、８Ｈ）、１．９８〜２．１９（ｍ、２
Ｈ）、２．２１〜２．５４（ｍ、４Ｈ）、３．０３〜
３．４（ｍ、１２Ｈ）、４．０３〜４．２０（ｍ、
Ｈ）． ＩＲ（ＫＢｒ） ν（ｃｍ^- ）＝３３１０、３１６０、２９３０、２８５
０、１６４０、１５４５、１４５５、１４１０． 〔α〕²⁰ _D ＋１．４°（Ｃ＝１．００、Ｈ₂ Ｏ）

【００７１】実施例５ １０−｛Ｎ−（１１−グアニジノウンデカノイル）−γ
−アミノ−β−（Ｓ）−ヒドロキシブタノイル｝−１−
Ｌ−ロイシル−Ｌ−ロイシル−１，５，１０−トリアザ
デカン・３塩酸塩（化合物番号Ｂ−２−３９）の合成

【００７２】（イ）１０−｛Ｎ−（１１−グアニジノウ
ンデカノイル）−γ−アミノ−β−（Ｓ）−ヒドロキシ
ブタノイル｝−１−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカル
ボニル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−ロイシル）−１，５，１０
−トリアザデカン・２塩酸塩の合成 １０−｛Ｎ−（１１−グアニジノウンデカノイル）−γ
−アミノ−β−（Ｓ）−ヒドロキシブタノイル｝−１，
５，１０−トリアザデカン・３塩酸塩 １．２８ｇ
（２．２２ｍｍｏｌ）をメタノール４０ｍｌに溶かし、
氷冷下トリエチルアミン０．２５ｇ（２．４７ｍｍｏ
ｌ）を加える。次いで、Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカ
ルボニル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−ロイシルとＮ−ヒドロキ
シコハク酸イミドとのエステル０．９９ｇ（２．２４ｍ
ｍｏｌ）を加え、氷冷下で２時間反応させる。反応液を
減圧濃縮し、残渣をアセトンで２回デカンテーションし
たのち減圧濃縮すると白色結晶２．１ｇ（収率定量的）
が得られる。

【００７３】ＩＲ（ＫＢｒ） ν（ｃｍ^- ）＝３２７０、２９３０、１６４５、１５４
０、１４５０、１３６０、１２４０、１１６５．

【００７４】（ロ）１０−｛Ｎ−（１１−グアニジノウ
ンデカノイル）−γ−アミノ−β−（Ｓ）−ヒドロキシ
ブタノイル｝−１−（Ｎ−ｔｅｒｔ−ブチルオキシカル
ボニル−Ｌ−ロイシル−Ｌ−ロイシル）−１，５，１０
−トリアザデカン ２．１ｇ（２．２２ｍｍｏｌ相当）
をメタノール１０ｍｌと水１０ｍｌの混合溶媒に溶か
し、氷冷下４Ｎ−塩酸−ジオキサン溶液１０ｍｌを加
え、室温で３〜５時間反応させる。反応液を減圧で濃縮
し、得られた油状物を蒸留水３０ｍｌに溶かし、ＣＭ−
セファデックス（登録商標）Ｃ−２５（Ｎａ⁺ ）２００
ｍｌを充填したカラムに付し、蒸留水１０００ｍｌと
１．０Ｍ塩化ナトリウム水溶液１０００ｍｌとの間のグ
ラジェント溶出法で溶出し、目的物を含むフラクション
を集め減圧で濃縮乾固し、乾固物にメタノールを加えて
不溶物の塩化ナトリウムをろ別する。得られた油状物か
らの目的物の精製は、次のようにして行う。

【００７５】残存する少量の塩化ナトリウムと不純物を
除去するために得られた油状物を蒸留水３０ｍｌに溶解
し、三菱化成ＨＰ−２０（登録商標）１２０ｍｌを充填
したカラムに付し、蒸留水１２０ｍｌと２０％メタノー
ル水溶液１２０ｍｌとの間のグラジェント溶出法で溶出
し、目的物を含むフラクションを集め減圧濃縮した。得
られた油状物を蒸留水１０ｍｌに溶かし、不溶物をろ別
後凍結乾燥すると、目的物０．６２２ｇ（収率３４．５
４％）が得られる。

【００７６】ＮＭＲ（Ｄ₂ Ｏ、２００ＮＨｚ） δ＝０．８５〜１．０４（ｍ、１２Ｈ）、１．１８〜
１．４５（ｍ、１２Ｈ）、１．４６〜１．８２（ｍ、１
４Ｈ）、１．８２〜２．０２（ｍ、２Ｈ）、２．２１〜
２．５３（ｍ、４Ｈ）、２．９６〜３．４１（ｍ、１２
Ｈ）、３．９１〜４．２０（ｍ、２Ｈ）、４．２７〜
４．３９（ｍ、Ｈ）． ＩＲ（ＫＢｒ） ν（ｃｍ^- ）＝３２７０、３０７０、２９３０、２８６
０、１６４５、１５４０、１４５５、１３６５．

【００７７】

【発明の効果】本発明のスパガリン関連化合物は、末梢
血液中の多分化能造血幹細胞に対し優れた増加効果を示
したことにより、末梢血液への造血幹細胞動員作用薬あ
るいは造血幹細胞の増加薬として有用であり、末梢造血
幹細胞移植等に応用することができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 5/062 Ａ６１Ｋ 37/02

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】一般式〔１〕 【化１】 〔式中Ｘ₀ は−（ＣＨ₂ ）_1-5 −または置換基を有して
   もよいフェニレン基、ａは３ないし７の整数を示し、Ａ
   は−ＣＯＮＨ−あるいは−ＮＨＣＯ−を示す。Ａが−Ｃ
   ＯＮＨのとき、Ｘ₁ はα−アミノ酸のα−アミノ基およ
   びα−カルボキシル基を除いた残基またはω−アミノ酸
   のω−アミノ基およびα−カルボキシル基を除いた残基
   で、残基中に官能基を有していてもよいものを示す。Ａ
   が−ＮＨＣＯ−のとき、Ｘ₁ は単結合、ＣＨ₂ ＮＨ、Ｃ
   Ｈ₂ Ｏ、あるいはハロゲン、水酸基、アルコキシル基で
   置換されていてもよい低級アルキレン基を示す。、Ｘ₂
   はＮＨ（ＣＨ₂ ）₄ ＮＨ−（ＣＨ₂ ）₃ −ＮＨ−Ｒ
   ₀₂（式中Ｒ₀₂は水素、アミノ酸もしくはペプチドのカル
   ボキシル基より水酸基を除いた残基を示す。）。〕で表
   されるスパガリン関連化合物およびそれらの薬理学的に
   許容される塩を有効成分として含有する末梢血液中の造
   血幹細胞数を増加するための薬剤。
2. 【請求項２】一般式〔Ｂ−１〕 【化２】 〔式中Ｘは−（ＣＨ₂ ）_1-5 または−Ｃ₆ Ｈ₄ −を示
   し、ｒは３〜７の整数を示し、Ｒ₆ はα−アミノ酸のα
   −アミノ基から水素原子１個およびα−カルボキシル基
   からヒドロキシル基を除いた残基またはω−アミノ酸の
   ω−アミノ基から水素原子１個およびα−カルボキシル
   基からヒドロキシル基を除いた残基で、残基中に官能基
   を有していてもよいものを示す。）で表されるスパガリ
   ン関連化合物およびそれらの薬理学的に許容される塩を
   有効成分として含有する請求項１の末梢血液中の造血幹
   細胞数を増加するための薬剤。
3. 【請求項３】一般式〔Ｂ−２〕 【化３】 〔式中Ｙは−（ＣＨ₂ ）_1-5 −または−Ｃ₆ Ｈ₄ −を示
   し、Ｗは水素原子またはアミノ酸もしくはペプチドのカ
   ルボキシル基より水酸基を除いた残基を示し、またｍは
   ０、１または２を示し、ｎは１または２、ｓは３〜７の
   整数を示す。〕で表されるスパガリン関連化合物およ
   び、それらの薬理学的に許容される塩を有効成分として
   含有する請求項１の末梢血液中の造血幹細胞数を増加す
   るための薬剤。
4. 【請求項４】一般式〔Ｂ−３〕 【化４】 〔式中Ｕは−（ＣＨ₂ ）_1-5 −または−Ｃ₆ Ｈ₄ −を示
   し、Ｂは−ＣＯＮＨ−あるいは−ＮＨＣＯ−を示す。Ｒ
   ₂ は−Ｈ、−ＯＨ、−ＯＣＨ₃ 、−ＯＣＨ₂ ＣＨ₃ また
   は−ＣＨ₂ ＯＨを示し、Ｒ₄ は水素原子またはアミノ酸
   もしくはペプチドのカルボキシル基より水酸基を除いた
   残基、ｔは３〜７の整数を示す。ただし、Ｒ₄ が水素原
   子のとき、Ｂが−ＣＯＮＨ−である化合物を除く。〕で
   表されるスパガリン関連化合物およびそれらの薬理学的
   に許容される塩を有効成分として含有する請求項１の末
   梢血液中の造血幹細胞数を増加するための薬剤。
5. 【請求項５】一般式〔１〕において、Ｘ₀ が−（Ｃ
   Ｈ₂ ）_3-5 −またはフェニレン基、ａは３ないし７の整
   数、Ａは−ＣＯＮＨ−あるいは−ＮＨＣＯ−を示し、Ｘ
   ₁ が−ＣＨ（ＯＨ）−、−ＣＨ（ＯＣＨ₃ ）−、−ＣＨ
   ₂ ＣＨ（ＯＨ）ＣＨ₂または−ＣＨ（ＣＨ₂ ＯＨ）−、
   Ｘ₂ は−ＮＨ（ＣＨ₂ ）₄ ＮＨ（ＣＨ₂ ）₃ ＮＨ₂ また
   は、−ＮＨ（ＣＨ₂ ）₄ ＮＨ（ＣＨ₂ ）₃ ＮＨ−Ｌｅｕ
   であるスパガリン関連化合物またはそれらの薬理学的に
   許容される塩を有効成分として含有する請求項１の末梢
   血液中の造血幹細胞数を増加するための薬剤。
6. 【請求項６】式 Ｇｕ−（ＣＨ₂ ）₆ −ＣＯＮＨＣＨ（ＯＨ）ＣＯＮＨ
   （ＣＨ₂ ）₄ ＮＨ（ＣＨ₂）₃ −ＮＨ₂ 〔式中Ｇｕはグアニジノ基を示す。〕で表されるスパガ
   リン関連化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩
   を有効成分として含有する末梢血液中の造血幹細胞数を
   増加するための薬剤。
7. 【請求項７】式 Ｇｕ−Ｃ₆ Ｈ₄ （ＣＨ₂ ）₃ −ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ₂ Ｏ
   Ｈ）ＣＯＮＨ（ＣＨ₂ ） ₄ −ＮＨ（ＣＨ₂ ）₃ ＮＨ₂ 〔式中Ｇｕはグアニジノ基を示す。〕で表されるスパガ
   リン関連化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩
   を有効成分として含有する末梢血液中の造血幹細胞数を
   増加するための薬剤。
8. 【請求項８】式 Ｇｕ−Ｃ₆ Ｈ₄ （ＣＨ₂ ）₃ −ＣＯＮＨＣＨ（ＣＨ₂ Ｏ
   Ｈ）ＣＯＮＨ（ＣＨ₂ ）₄ −ＮＨ（ＣＨ₂ ）₃ ＮＨ−Ｌ
   ｅｕ 〔式中Ｇｕはグアニジノ残基、Ｌｅｕはロイシル残基を
   示す。〕で表されるスパガリン関連化合物またはそれら
   の薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する末
   梢血液中の造血幹細胞数を増加するための薬剤。
9. 【請求項９】式 Ｇｕ−（ＣＨ₂ ）₆ −ＮＨＣＯ−ＣＨ₂ −ＣＯＮＨ（Ｃ
   Ｈ₂ ）₄ −ＮＨ（ＣＨ₂）₃ −ＮＨ₂ 〔式中Ｇｕはグアニジノ基を示す。〕で表されるスパガ
   リン関連化合物またはそれらの薬理学的に許容される塩
   を有効成分として含有する末梢血液中の造血幹細胞数を
   増加するための薬剤。