JPH09507469A

JPH09507469A - 眼に適用される合成粘弾性組成物

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Publication number: JPH09507469A
Application number: JP6524279A
Authority: JP
Inventors: シーウェブ，ブラッドフォード
Original assignee: シーウェブ，ブラッドフォード
Priority date: 1993-04-30
Filing date: 1994-04-06
Publication date: 1997-07-29
Anticipated expiration: 2014-11-10
Also published as: CA2161774A1; USRE42243E1; HK1019005A1; EP0732913A1; KR100246016B1; AU6700894A; DK0732913T3; DE69432188D1; CA2161774C; JP2976350B2; ES2192560T3; US5422376A; WO1994025004A1; AU681146B2; ATE233083T1; EP0732913B1; DE69432188T2; RU2145882C1

Abstract

(57)【要約】生理塩溶液に溶解している約２．０〜２．５％のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スを主成分として含む、人の眼に注入される粘弾性組成物であって、その組成物の粘度が、約１５、０００〜約４０、０００センチポイズで、ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの分子量が、約２２０、０００〜約２０、０００未満ドルトン(Daltons)で、組成物が０．５μｍ以上の汚染物質、或いはゲルを含まない。また清澄で、高分子量のヒドロキシプロピルメチルセルロ−ス組成物を製造する方法をも提供する。

Description

【発明の詳細な説明】発明の名称眼に適用される合成粘弾性組成物発明の背景本発明は、医療用粘弾性組成物に関する。本発明の粘弾性組成物は、眼の手術の間、眼の中に入れて、眼の形状を保持し、眼の内壁の繊細な組織を保護するために使用されるものである。水晶体が混濁する白内障は、視力に著しい影響を与え、果ては失明させる場合もあり、従来長年にわたって外科手術によって水晶体を摘出していた。最先端の方法の一つは、いわゆるカウチング法（白内障圧下法）で、長い針を使用して、混濁した水晶体を摘出する方法である。しかし、１９７０年代になって、人工水晶体を眼内に装着することができるようになり、安全で、しかも効果的に白内障を摘出する技術が実用化されている。それ以前は、混濁した水晶体を摘出した患者は、ある程度の視力を得るためには、厚い眼鏡を使用しなければならなかった。現在、米国における水晶体の摘出と、人工水晶体の眼内装着例は、毎年１００万件以上になっている。水晶体の摘出と、人工水晶体の眼内装着の危険性の一つは、角膜の内面の細胞層（角膜内皮）とその他の内部組織が、剥離、或いは不注意な接触に対して非常に過敏になっていることである。特に、角膜細胞に対する損傷、或いは角膜細胞の摘出が、角膜生理に悪影響を与え、角膜水腫、混濁を引起し、その結果、角膜が完全に損壊することがある。そのため、白内障手術の間、角膜内皮を保護することが試みられている。特に、眼の前方部へ種々の物質を注入する療法が採用されている。このような物質としては、平衡食塩水、及び空気ボ−ラス、並びに粘弾性組成物がある。但し、平衡食塩水、及び空気ボ−ラスは、眼から分散し易いので、使用面で制約がある。種々の天然物、或いは実験室で合成される物質から製造される粘弾性組成物には、ヒアルウロン酸ナトリウム、硫酸コンドロイチン、及びこれら両者の組合せ、セルロ−ス物質、並びにアクリルアミド系ポリマ−がある。粘弾性組成物は、眼の中に残留して眼の組織を保護するが、従来使用されている粘弾性組成物には、色々と不都合な点がある。この不都合な点とは、アレルギ−反応を引起すこと、神経中毒性の不純物を含むこと、粘度、或いは粘弾性が不足していること、分子粒度が許容できないほど大きいこと、疎線維性結合組織（櫛状靭帯）に浸入して、そこを栓塞し、その結果、眼内圧の上昇を招くに至るゲル、或いは塊状ポリマ− であること、天然物を原料とするため、生産バッチによって品質にばらつきがあること、及びコスト高であることである。これらの物質は、眼内圧の上昇を引起すので、通常、洗浄して眼から除去される。さらに、ヒアルウロン酸系物質は、冷蔵保存が必要であり、しかも貯蔵寿命が限られている。従来のヒドロキシプロピルメチルセルロ−ス溶液の動物による毒性テストにより、これらの物質は、種々の動物組織内に摂取された場合でも、或いは注射された場合でも、局所的にも、全身系にも、通常毒性がないことが分かっている。また、従来のＨＰＭＣ系薬剤の眼内投与の結果でも、内皮細胞に対して非毒性であること、及び眼内圧を極くわずか、しかも一時的にしか上昇させないこと、並びに眼の混濁を急速に清浄にすることが分かっている。ダウ・ケミカル・カンパニ−(Dow Chemical Company)は、自社の「メソセル(M ethocel)」（HPMCの商標名）の使用の可能性を根拠付けるために、HPMCポリマ− の毒性と代謝作用について広範に研究してきた。そして、動物による代謝の拡大研究の結果、HPMCポリマ−が、非発熱性であること、非免疫原性であること、非細胞毒性性であること、非毒性であること、及び新陳代謝を受けず、摂取後急速に排出されるということが分かった。これらの研究報告の大部分は、給餌研究による、HPMCに対する動物体系の耐溶性に関するものである。しかし、毒性に関するデ−タを参照すると、マイスとラットにHPMCポリマ−を、皮内、或いは血管内注射しても、毒性、催奇形性、或いはその他の代謝の陰性副作用がないことが認められている。これらの報告から、HPMCポリマ−は、正常な動物代謝の障害にならないこと、それ自体代謝転換されないこと、及び腎臓への血流から濾過され、動物体系に悪影響を与えずに排泄されるということが結論を下すことができる。これらの研究を確認して、食品・医薬局（ＦＤＡ）は、ダウ・ケミカル・カンパニ−(Dow Chemical Company)のHPMCの「メソセル(Methocel)」（商品名）について、ドラッグ・マスタ−(Drug Master)ファイルNo.７６に掲載した。。ロバ−ト（Ｒｏｂｅｒｔ）等が提出した資料で、家兎の眼に２％のHPMC溶液を注射したことによる全身系毒性に関するデ−タが不足していた［ロバ−ト・ワイ・グル−ア(Robert,Y.,Gloor,),ビ−・ワッスマッス、イ−・ディ−・(B.,Wachs muth,E.D.,),ハ−スト、エム、(Herbst,M.,),“ディ−・ウ−バ−プルフンク・デア・フェルトグリフカイト・フォン・イントラアオクラ−・インジザ−タ−・ヒドロザイプロピルメチルセルロ−ズ・イン・ティア−フェアズッフ”(Die Ube rprufung der Vertrasmuch von intraokular injizerter Htdroxypropylmethylc ellulose im Tierversuc),クリンモナ−トブルアンゲンハイルクト(Klin Mo natsbl Augenheikd ),１９２：３３７−３３９、１９８８．)。これらの研究者達は、分画したHPMCの２％溶液を、家兎の前眼房、及び後眼房に注射し、眼内、及び全身の変化について１２日間テストした。彼らは、眼内変化も全身変化も見出さなかった。これらの結果により、HPMCポリマ−が、動物の眼には非毒性で、家兎には、全身系に非毒性であることが明らかである。これらの文献の中の有効な証拠によって、HPMCは、哺乳動物系により新陳代謝を受けないということ、経口、皮内、眼内、及び血管内投与によても非毒性であるということ、及び尿中排出によって系から安全に排出されるということが証明されている。従って、これらの報告から、HPMC溶液は、人の眼内適用、及び全身性適用しても安全であるということが推断される。 HPMC溶液は、ヨ−ロッパ、及び米国等で、ここ数年来、眼内適用可能な外科用粘弾性液体として使用されている。HPMC溶液の臨床使用に関する文献は、これらのポリマ−が安全で効果的な眼科外科用粘弾性液体であること、使用し易いこと、及び発熱反応や手術後の眼内圧を過剰に上昇させないが、白内障手術の間、眼房を維持し内皮を保護するという点では、ヒアルウロン酸生成物とかろうじて均等であるということを記載している。しかし、眼内手術にHPMC溶液を使用することは、ロ−ゼン(Rosen)により批判されている。［ロ−ゼン、イ−・エス(Rosen,E.S.),グレゴリ−、ア−ル・ピ −・エフ(Gregpry,R.P.F.)、サ−ネット、エフ(Sernett,F.)“イズ２％ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スアセイフソリウションフォア− イントラオペラティブクリニカルアプリケ−ションズ（Is 2% hydroxyppylmethu lcellulose a safe solution for intraoperative clinical applications?”) ，ジェ−・カタラクト・アンド・リフラクティブサ−ジェリ−（J.Cataract a nd Refractive Surgery ,)12:679(1986);ロ−ゼン、イ−・エス(Rosen,E.S.)“ザウ−スオブヒドロキシプロピルメチルセルロ−スインエクストラキャプスラカタラクトエクストラクションウイズイントラオクラ− レンズインプランテ−ション”(The use of hydroxypropyl methylcellulose in ext racapsular cataract extraction with intraocular lens implantation),アムジェ− オフサルモロジ (Am J.Ophthalmology,),103:727(1987)］。ロ−ゼン( Rosen)の批判は、ヨ−ロッパの病院の薬局で調剤されたHPMCの顕微鏡検査に基づいている。ロ−ゼンは、これらの病院の薬局で調剤されたHPMC、及び市販のHPMC には、かなりの量の汚染物質と粒状物質が混入されていること、そしてこのことが、外科療法に使用する間に問題を引起すということを報告している。さらに、ロ−ゼンは、HPMCを濾過しようとする現在の試みは効果が無いこと、及び「植物性粒状物質を含有しないHPMCの臨床用溶液を製造することは不可能であろう。」と述べている。しかし、モモ−ス(Momose)等は、自動レ−ザ粒子カウンタで粒状物質の数を測定したところ、彼の研究所で製造した２％メチルセルロ−ス製剤は、市販のヒアルウロン酸製剤に比べて、大きな粒子は殆ど含有していなかったと報告している［モモ−スエイ(Momose A.),ババ、ティ−(Baba,T.),カサハラエイ(Kasahara,A.)“パ−ティクルズインビスコサ−ジカルマテリアルズ ”(Particles in Viscosurgical Materials,)、ジャ−ナルオブジアイ(Jo urnal of the Eye,)5:314(1988)］。フェルナンド−ビゴ(Fernandez-Vigo)等は、１９８９年、HPMC溶液の種々の濃縮物と粘度が、家兎の眼から除去される半減時間は、３乃至４．５時間であったと報告している［フェルナンド−ビゴ(Fernandez-Vigo)、ジェ−・エフ・、レフォ−ジョ(J.F.,Refojo),ジャンブラエム(Jumblatt,M.),“エリミネ−ションオブヒドロキシプロピルメチルセルロ−スフロムジアンテリア−チヤンバオブザラビッド”(Elimination of hydroxypropylmethylcellulose fro m the anterior chamber of the rabbit,),ジェ−・カタラクト・リフラクティブ(J.Cataract Refractive Syrgery,)15:191(1989)］。彼等の実験は、比較的低分子量のHPMC（８６、０００、或いは１２０、０００ドルトン(Daltons) ）溶液を大量に家兎の眼に投与すること、及び単位時間毎の残留HPMCを測定することを含んでいた。彼等は、２４時間後、家兎の眼から取出した房水サンプル中に検出可能な量のHPMCは残存していないことを発見した。彼等は、HPMCは２４時間以内に完全に除去されると断定した。また、彼等は、通常の櫛状靭帯洗浄法によって、眼内での代謝分解を起こさずに、眼からHPMCを除去することができると報告している。彼等は、内皮細胞に損傷が発見されなかったこと、HPMC溶液を眼内へ注入した後で眼内圧が極く一時的に上昇したこと、及び発熱反応時間が長時間ではなかったことを報告している。ジャコビ(Jacobi)等は、HPMC溶液の家兎の眼内投与（前眼房、及び硝子体内）に関する研究により、発熱反応が起こらなかったこと、眼内圧が極く一時的に上昇したこと、及び眼から急速に除去されたことが分かったことを報告している。［ジャコビケイ、ダブリュウ(Jacobi,K.W.,),スコット、ケイ(Schott,K),グル −アビ−，(G1oor，Ｂ.,),“コングレスデア− ドイッチェンゲゼルシャフトヒュアイントラオクラリ−ゼンインプランタチオン”(Kongress der Deutshen Cesellschaft fur Intraokularlinsen Implantation,)、Berlin,Sprin ger-Verlag,1987 pp86-89.)］。彼等は、HPMCが、通常の流出機序により、眼から除去されること、及び血流中に希釈されることを推断した。 HPMCポリマ−が眼から急速に除去されるとするこれらの報告は、このポリマ− が、櫛状靭帯を通して行なう水溶液による通常の清澄処置に悪影響を与えないこと、及びそのポリマ−の分子量と粘度が高いので、眼内圧が一時的に上昇することを証明している。しかしながら、これらの溶液は、依然として、不必要な量の粒状汚染物質を含有している。しかも、従来の溶液は、低分子量のHPMC系物質を主成分としているので、所定の粘度にするためにはHPMCを高濃度で使用する必要がある。このことが、汚染物質が高比率で混入する原因になっている。さらに、このポリマ−は、低分子量であるので、その溶液は適性粘度を保持していない。従来の眼疾治療用のHPMC溶液は、低分子量の物質で製造されていたので、その粘度は、２５℃で約４、０００〜５、０００CPSである。その結果、これらの物質も、粘弾性はそれ程高くはない。また、これらの物質は、可なりの量の粒状物質を含んでいる。したがって、これらの物質を濾過しようとすると、濾材の細孔が、直ぐにふさがってしまうので、０．５μｍのフィルタ−で濾過することは不可能である。従来のHPMC溶液のさらなる問題点は、１００℃以上の温度でオ−トクレ−ブ処理すると、脱水する傾向があり、その結果、非晶質の大きな凝集体が形成されることである。これらの凝集体の大部分は、冷却すると直ちに再水和されるが、かなりの量が、溶解しないまま残存ずる。従来採用しているオ−トクレ−ブ処理、及びその後続工程の冷却処理の結果、生成されたゲルの中に気泡が形成されたり、懸濁される。そのため、生成された組成物の粘度分布は均一ではなく、粘凋になればなる程、より分子量が大きい物質が、容器の下部に沈降する。上述した理由により、眼の外科療法に使用される、低コストで、安定な、高粘度の物質が要求されている。さらに、この物質は、非毒性で、アレルギ−を引起さないこと、及び眼内圧を上昇させる粒状物質、或いはゲルを含まないことが要求されている。特に、有害な粒状物質を含んでいない高分子量の物質から製造された高粘度のHPMCの低濃度溶液が要求されている。要約これらの要求を満足させる本発明は、ヒドロキシルプロピル−メチルセルロ− スの生理的水溶液を主成分とする粘弾性組成物、及びその製造方法に関するものである。本発明の水溶液は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、及びマグネシウムをも含んでいる。それらの濃度は、重量浸透圧濃度が、人の眼房水のそれより僅かに高く、カルシウム濃度が人の眼房水のそれと殆ど同じで、pHが生理的ｐＨに近い値になるように調整される。また、生成された組成物を精製して発熱性物質を除去し、平均分子量を、３７５、０００〜４２０、０００の範囲に調整し、２５ ℃で細管粘度計で測定した静粘度を２５、０００〜４０、０００センチポアズの範囲に調整される。本発明の特徴、目的、及び利点は、以下の説明と特許請求の範囲を参照することによって、一層よく理解されよう。解説本発明は、ヒドロキシプロピルメチルセルロ−ス(HPMC)の粘凋な眼疾治療用水溶液、及びその製造方法に関する。本発明の溶液の他の成分は、NaCl,KCl,CaCl,MgCl,Naを基礎にした緩衝剤で、N aC₂H₃O，或いはNa₃C₆HO₇である。HPMC溶液の成分濃度を調整して、重量浸透圧濃度、及びpHを、人の眼房水のそれらに近付ける。人の眼房水の重量浸透圧濃度は、約３０５mosm／kg（＋２０mosm/kg）である。従って、粘凋溶液中のNaClの濃度を、約３２５mosm／kg（＋２５mosm/kg）に調整して、それを眼に適用している間、角膜内皮が膨潤するのを極力押さえる。人の眼房水のpHは約７．４であるので、HPMC溶液の最終pHを、約７．２＋０．２に調整する。その他の塩類、及び緩衝剤の濃度を調整して、市販の眼内注入溶液、及び外科療法用粘弾性液のそれらに近付ける。本発明の溶液を調剤する際に留意すべき重要な点の一つは、使用中の沈殿物の形成である。このことは、市販の硫酸コンドロイチン／ヒアウロン酸ナトリウム溶液に関する報告がある［ウ−ルマンエス、(Ullman,S.),リヒテンシュタイン (Lichtenstein),ヒアラインケ−(Heerlein,K)，“コ−ニアルオパシテイ− スセカンダリ− ツ− ビスコ−ト（Corneal Opacities Secondary to Visco at,),ジェ−。カタラクトアンドリフラクティブサ−ジェリ−(J.Cataract and Refractive Surgery,)12:489 (1986)］。この現象は、カルシウム濃度を人の眼房水の濃度とほぼ同じに維持すること、及び緩衝剤としてリン酸塩の使用しないことによって回避される。この事によって、Ca₃(PO₄)が形成されなくなる。家兎の眼でテストして、沈殿物がないことを検証した。本発明の溶液を製造する際、特に留意すべきことは、溶液、特にHPMCの中に、不純物、或いは粒状汚染物質を混入させないことである。それらが混入していると、たとえ極微量でも、発熱反応を引起すからである。このことは、本発明にとって致命的な欠陥になる。そのため、あらゆる手段を講じて、極微量の汚染物質を除去する。すなわち、多段濾過法、及び分離法を利用して好ましい分子量を有するＨＰＭＣを生成し、溶液の高温滅菌に起因する分子量の変動を回避する。従来のＨＰＭＣ溶液の粘度は、２５℃で４、０００〜５、０００cps.である。これに対し、高分子量と低高分子量のＨＰＭＣ物質を混合して使用することによって、粘度を１５、０００〜４０、０００の範囲に調整することができる。高分子量物質によって、粘弾性度が高くなる。平均分子量が２２０、０００の物質と、平均分子量が８５、０００の物質を２：１で混合することが好ましく、初期組成のＨＰＭＣの量は約３％である。以下に述べる処理をすることによって、低分子量物質の濃度を著しく低くして、残留物質の平均分子量を２５０、０００〜約４２０、０００の範囲に調整することができる。溶液中に残留しているＨＰＭＣの平均分子量の好ましい範囲は、約３７５、０００〜約４２０、０００ドルトンで、溶液粘度は、約２５、０００〜約４０、０００cpsの範囲が好ましい。非毒性で、粒状物質を含まない本発明の高粘度溶液を製造するための出発物質は、ダウ・ケミカル・カンパニ−(Dow Chemical Company)から、「メソセル(Met hocel)」なる商品名で販売されているＨＰＭＣポリマ−が好ましい。従来のＨＰＭＣ溶液の場合とは異なり、特に好ましい出発物質は、低分子量のＨＰＭＣ（Me thocel Ｅ１０Ｍ）と高分子量のＨＰＭＣ（Methocel Ｋ１００Ｍ）を、２：１の比率で初期混合した混合物である。これら二つの物質は、下記の粘度を有していると報告されている。 Methocel Ｅ１０Ｍ：２％粘度＝１４、０００cps Methocel Ｋ１００Ｍ：２％粘度＝１００、９００cps ＨＰＭＣ物質の初期混合濃度は、約３．０％であるが、濾過処理後、溶液中のＨＰＭＣ物質の濃度は、約２．０〜２．５％に低下する。本発明の溶液の特性を発揮させる処理工程を、次に説明する。粒状汚染物質の除去ＨＰＭＣ溶液を濾過するための従来技術は、溶液を０．５μｍのフィルタ−を使用し、高圧で強制濾過するものであった。しかし、除去しようとする物質の大部分がゼラチン状であるので、加圧すると、ゲルが再形成され、それらがフィルタ−の細孔を無理に通過しようとする。さらに、高圧下では、フィルタ−は目詰まりし、塩類の溶液だけがフィルタ−を通過する。溶液温度を約４０−４５℃に上昇させて、粘度を低下させることによって、低圧でも可能になるので、濾過処理が大幅に改良されることが分かった。第２に、溶液を小孔径の連続多段フィルタ−を通過させることにより、大きなゲルと粒子が最小の孔径のフィルタ−に達する前に、それらを除去することができた。適性な濾過方法は、５０μｍ、２５μｍ、１０μｍ、５μｍ、１μｍ、及び０．５μ ｍのフィルタ−で構成されるカスケ−ドを２回通過させることである。この濾過方法を採用することにより、濾過工程中、過剰の圧力が不用となり、事実上、０．５μｍ以上のあらゆる物質が除去される。以下に述べる方法によると、低分子量物質の濃度は著しく低下させられる。精製工程不用な低分子量物質を完全に除去するために、ＨＰＭＣの乾燥混合物を、塩溶液中で６０℃で継続攪拌して懸濁させる。この６０℃は、従来の文献が、溶液形成温度として推薦している１００℃より低い。この処理によって、ＨＰＭＣのポリマ−粒径孔構造が拡張され、低分子量の物質が溶媒化する。ＨＰＭＣが高温で溶媒化すると、低分子量物質は、形成されたゲルの中に包摂され、容易に分離しなくなる。一旦、低分子量物質が溶媒化すると、１００℃近傍で継続して攪拌すると、組成物がゆっくりと上昇してくる。ついで、攪拌を停止すると、高分子量物質が混合容器の底に沈降する。沈降が停止すると、不用な低分子量物質を含んでいる上澄み液を、注意深く除去して、廃棄する。この処理工程を数回反復するが、４回が最適であると思われる。この処理工程によって、低分子量の汚染物質と発熱物質が除去され、高粘度の最終溶液が生成される。オ−トクレ−ブ処理による凝集体の除去中間処理としてのオ−トクレ−ブ処理、及び濾過処理は、再水和されにくい凝集体を除去するためのものである。この処理は、オ−トクレ−ブの中で、組成物を１１５℃に加熱し、急速攪拌して９５℃に冷却して凝集体を破壊し、均質な再水和物とし、さらに４０℃に冷却し、１．０μｍのフィルタ−を通過させて、不溶解性のＨＰＭＣ凝集体を除去する段階を含んでいる。この処理によって、最終オ−トクレ−ブ工程で形成される凝集体が除去される。また、この処理によって、バクテリア汚染に起因する溶液の貯蔵問題が解消される。非均質性の粘度部分の除去注射器内での最終オ−トクレ−ブ処理が終了した後、生成物を急速に冷却すると、粘凋な物質が注射器の底に沈降し、組成物の層が形成される。一方、溶液を満たした注射器を、１時間に約６℃というゆっくりとした速度で、９０℃から室温に冷却すると、非常に均質なゲルが生成される。気泡の除去処理工程中に発生して、溶解している気体が、粘凋溶液中に取込まれている。最終生成物を包装する前に、この気体を除去しておかないと、最終生成物が気泡を含んでいるため、医師が眼の手術を行なう際、手術部位を目視しにくくなる。実施例１図１は、本発明の特徴を説明する実施例１の工程を表すフロ−チャ−トである。ａ）ＮａＣｌ−１７４グラム、ＫＣｌ−２２．５グラム、ＣａＣｌ−２Ｈ₂Ｏ −１４．４グラム、ＭｇＣｌ−６Ｈ₂Ｏ−９．０グラム、ＮａＣ₂Ｈ₃Ｏ₂−３Ｈ₂ Ｏ−１１７グラム、及びＮａ₃Ｃ₆ＨＯ₇−２Ｈ₂Ｏ−５１．０グラムを、蒸留水に添加し、ＮａＯＨを使用して、ｐＨを８．７０に調整して、３０リットルの塩溶液を製造した。ｂ）次いで、塩溶液５リットルを６０℃に加熱し、メソセル(Methocel)E10M ３００グラムとメソセル(Methocel)K100M １５０グラムの混合物を塩溶液中で攪拌し、２０分間その温度を維持した。次いで、生成した組成物を９５℃に攪拌して、２０分間維持した。攪拌を停止し、溶液を約１５分間沈降させ、上澄み液を吸引した。Ｃ）次いで、上澄み液を除去した後に残存しているポリマ−を、４リットルの塩溶液中で、１００℃で再懸濁させ、１０分間攪拌した。溶液を１０分間沈降させた後、上澄み液を吸引した。次いで、３．０リットルの塩溶液を使用して、さらに再懸濁を２回繰り返した。ｄ）上澄み液を除去した後、３回再懸濁を繰り返し、残存しているポリマ−を、１５リットルの塩溶液中で、１００℃で再懸濁し、ゆっくりと冷却しながら５時間攪拌して４０℃にまで降下させた。ついで、溶液を５時間静置したところ、粘凋なゲルが生成された。ｅ）４０℃に維持しながら、多孔度が５０μｍ、２５μｍ、１０μｍ、５μｍ、１μｍ、及び０．５μｍの連続フィルタ−を使用してゲルを濾過した。同じサイズのフィルタ−は少なくとも２枚使用した。ｆ）最終フィルタ−を通過した物質を加圧(１２psi.)オ−トクレ−ブ中で、１１５℃で２５分間加熱し、約３０分間、ゆっくりと冷却して９９℃に降下させた。ついで、オ−トクレ−ブから取出して、５時間かけて４０℃に冷却し、無菌状態下で、５時間その温度で維持した。ｇ）無菌状態を維持しながら、溶液を１．０μｍのフィルタ−を通過させ、１０リットルの容器に採取した。温度を４０℃に維持して、１０時間減圧して溶解している窒素ガスを脱気した。ついで、脱気した無菌溶液を、無菌的に貯蔵容器に分配し、０〜４℃で貯蔵した。ｈ）この工程は、貯蔵した溶液を注射器に無菌的に、計量分配することによって終了する。ただし、注射器は、あらかじめ、１２１℃で２０分間オ−トクレ− ブ処理し、１時間６℃の降下速度で室温まで冷却し、ついで２４時間２０psi.で加圧処理してある。生成物は、清澄な、粘凋溶液で、ゼロズレ粘度が４０、０００cps.、平均分子量が４０９、８００、ＨＰＭＣ濃度が２．３２％，屈折率が１．３３３であった。実施例１で製造した溶液の生物学的、及び動物テストを行なった。家兎の眼内に投与し、眼内圧、内皮細胞の状態、及び全身発熱反応を評価して、単品としての最大投与量を評価した。家兎の眼は、内皮細胞、眼内圧、及び粘弾性物質に対する発熱反応、並びに内皮細胞に対する急性毒性の研究モデルとしてよく使用される。全身抗原性、細胞毒性、及び動物モデルによる感応性（被剌激性）、並びに試験管内モデルによる突然変異誘発性、及び溶血性を評価するテストも行なった。それらの結果を以下にまとめる。テスト結果細胞毒性（寒天オ−バ−レイ）非毒性細胞毒性（ＭＥＭ溶離）非毒性家兎の眼内感応性（眼圧計、鏡面写真）非感応性、非毒性突然変異誘発性、（Ames可溶性試薬）非誘発性感作（最大化法、モルモット）非感作性溶血性（試験管内直接接触）非溶血性全身抗原性（モルモット）非抗原性表皮感応性（家兎）非感応性経口急性毒性非毒性腹腔内急性毒性（マウス）非毒性これらの研究から、ＨＰＭＣ溶液は、眼内細胞に対して、非毒性、非突然変異誘発性、非抗原性、非溶血性、非感作性、非発熱性であること、及び危険な眼内圧上昇を引起さないことが証明された。さらに、本発明の物質は、細胞の正常な有核分裂、及びその後の細胞の正常な成長に悪影響を与えない。最大投与量による、家兎の眼内圧上昇は一時的な現象で、あらゆる場合において、２４時間正常範囲内にあった。以上、好ましい態様に関して、本発明をかなり詳細に説明してきたが、他の変形も可能である。例えば、粘弾性溶液を眼科治療用として説明してきたが、関節の潤滑剤（肘関節、股関節等）、外科手術後の組織の癒着防止、或いは栄養剤、若しくは化粧品の担体等の生理学的用途がある。また、本発明において、種々の分子量を有する出発物質を選択すること、或いはそれらを異なる比率で混合すること、若しくは高濃度の出発物質を使用することによって、溶液の粘度を変えることができる。ＨＰＭＣの特定混合物に関して説明したが、特定の組合せ、及び濃度は最終目的生成物の所定の物性に依存して決定される。したがって、種々の異なるＨＰＭＣを使用することができる。２つの異なる物質を使用する必要はない。１種類のＨＰＭＣ物質を、上述した方法で処理し、或いは２つ以上の物質の混合物を使用することができる。種々の塩、及び緩衝剤を、様々な適用方法で使用することができ、また特別の目的のために、他の物質を溶液に添加してもよい。さらに、汚染物質を除去するために、組成物中の汚染物質の大きさ、及び性状に応じて、１つ以上のフィルタ −を組み合わせて使用できることは、当業者の理解するところである。処理工程の順序は組み替えてもよい。従って、請求の範囲の精神、及び範囲は、本発明の好ましい態様に関する上記記載に限定して理解されるべきではない。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＨＵ，ＪＰ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＧ，ＭＮ，ＭＷ，ＮＬ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＫ，ＵＡ，ＵＺ，ＶＮ

Claims

【特許請求の範囲】１．ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの生理塩溶液を含む生理的に適用される粘弾性溶液であって、直径が０．５μｍ以上の粒状物質とゲルを含まず、治療上効果的な量を人の眼に注入した時発熱せず、かつ非毒性である粘弾性溶液。２．ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スが、約２．０〜２．５％の濃度で含まれている請求項１に記載の粘弾性溶液。３．溶液の粘度が、約２５、０００〜約４０、０００センチポアズである請求項１に記載の粘弾性溶液。４．ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの平均分子量が、約３７５、０００以上、４２０、０００未満である請求項１に記載の粘弾性溶液。５．第１の分子量を有する第１のヒドロキシプロピルメチルセルロ−ス、及び第１のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スより分子量が大きい第２のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スとの混合物であって、粒状物質を含まない、非発熱性の、非毒性溶液を生成するように処理されている混合物から製造される請求項１に記載の粘弾性溶液。６．混合物が、濾過、再溶解、及び低分子量物質の除去、中間オ−トクレ−ブ処理、並びに溶解気体の除去処理をされている請求項５に記載の粘弾性溶液。７．粘弾性溶液中に含まれる処理後のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの平均分子量が、第１、或いは第２のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの平均分子量より大きい請求項６に記載の粘弾性溶液。８．第１のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの平均分子量が、約８５、０００で、第２のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの平均分子量が、約２２０、０００である請求項５に記載の粘弾性溶液。９．処理後のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの平均分子量が、３７５、０００以上で４２０、０００未満である請求項７に記載の粘弾性溶液。１０．ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの濃度が約２．３％である請求項５に記載の粘弾性溶液。１１．ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの平均分子量が約４１０、０００である請求項５に記載の粘弾性溶液。１２．ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの生理塩溶液を含む粘弾性溶液であって、直径が０．５μｍ以上の粒状物質、及びゲルを含まず、治療上効果的な量を人の眼に注入した時に非発熱性で、かつ非毒性である粘弾性溶液を製造する方法であって、（ａ）ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スを塩溶液中に分散して懸濁液を形成する工程、（ｂ）工程ａの懸濁液を約９５℃に加熱し、溶解しない物質を沈降させ、そして溶解していない物質より上の上澄み液を廃棄する工程、（ｃ）溶解しない物質を再懸濁してヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの第２の懸濁液を形成する工程、（ｄ）ゲルを、孔の大きさが０．５μｍの最終フィルタ−を含む連続フィルタ− を通過させて清澄溶液を形成する工程、（ｅ）清澄溶液をオ−トクレ−ブ処理する工程、（ｆ）オ−トクレ−ブ処理した清澄な溶液を冷却し、冷却した溶液を濾過する工程、及び（ｇ）濾過した冷却溶液を脱気する工程を含む粘弾性溶液を製造する方法。１３．生理塩溶液が、約８．７のｐＨを有し、かつNaCl,KCl,CaCl・2H₂O,MgCl・ 6h₂O,NaC₂H₃O₂・3H₂O,Na₃C₆HO₇・2H₂Oを含む請求項１２に記載の方法。１４．塩の水溶液中に分散しているヒドロキシプロピルメチルセルロ−スが、第１の分子量を有する第１のヒドロキシプロピルメチルセルロ−ス、及び第１のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの分子量より大きな分子量を有する第２のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スとの混合物である請求項１２に記載の方法。１５．第１のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スが、約８５、０００ダルトン(Daltons)の分子量を有し、かつ第２のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スが、約２２０、０００ドルトン(Daltons)の分子量を有している請求項１４に記載の方法。１６．懸濁液中の第１のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの量が、第２のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの量と略同じである請求項１４に記載の方法。１７．懸濁液中のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スが、約３重量％である請求項１４に記載の方法。１８．脱気した溶液中のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの濃度が、約２．０〜約２．５％である請求項１２に記載の方法。１９．脱気した溶液中のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの濃度が、約２．３％である請求項１２に記載の方法。２０．脱気した溶液中のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの粘度が、約２５、０００〜約４０、０００センチポイズである請求項１２に記載の方法。２１．脱気した溶液中のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの粘度が、約４０、０００センチポイズである請求項１２に記載の方法。２２．脱気した溶液中のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの分子量が、約３７５、０００以上、約４２０、０００未満である請求項１２に記載の方法。２３．脱気した溶液中のヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの分子量が、約４１０、０００である請求項１２に記載の方法。２４．人の眼に注入される粘弾性組成物であって、前記組成物が、ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの塩溶液から成り、ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スが、約３７５、０００以上、約４２０、０００未満の分子量を有し、かつ約２．０〜約２．５％の濃度で含有され、組成物が、約２５、０００〜約４０、０００センチポイズの粘度を有し、直径が０．５μｍ以上の粒状物質、及びゲルを含まず、そして非発熱性で、かつ非毒性である、人の眼に注入される粘弾性組成物。２５．ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの濃度が約２．３％で、ヒドロキシプロピルメチルセルロ−スの平均分子量が約４０９、８００で、かつ組成物のゼロズレ粘度が、約４０、０００センチポイズである請求項２４の粘弾性組成物。