JPH09504268A

JPH09504268A - ウリジンの分泌を抑制するための方法及び組成物

Info

Publication number: JPH09504268A
Application number: JP7506981A
Authority: JP
Inventors: ソマドシー，ジャンピエール; コウニー，マームードエイチ．エル
Original assignee: ザユーエイビーリサーチファウンデイション
Priority date: 1993-08-13
Filing date: 1994-07-27
Publication date: 1997-04-28
Also published as: EP0716603A4; EP0716603A1; WO1995005180A1; AU685150B2; KR960703605A; CA2167688C; AU7375094A; CA2167688A1; US5723449A; US5567689A

Abstract

(57)【要約】細胞内及び血漿のウリジン濃度を増加させるのに有効な方法及び製薬組成物を開示する。ある種の組成物及びそのような組成物を使用する方法が患者におけるウリジンの分泌を抑制し、しかしてウリジン濃度を増加させることがわかった。ウリジン濃度を増加させる処置は多くの治療をと対抗させるのに有用であり、またある種の化学療法剤の投与によって誘発される毒性副作用を受ける未感染の及び正常な細胞を保護し又は救済するのに有効である。

Description

【発明の詳細な説明】ウリジンの分泌を抑制するための方法及び組成物発明の背景米国政府は、ＮＩＨ許可Ｎｏ．４２１２５に従って本発明に関して権利を有し得る。本発明は、細胞内及び血漿のウリジンレベルを増加させるための方法及び製薬組成物並びに増加された細胞内及び血漿のウリジンレベルに応答する病理学的及び生理学的障害の治療方法に関する。ウリジンは、心筋や横紋筋のような多くの組織におけるグルコースからのグリコーゲンの産生の際の制限因子であると信じられている。従って、血漿及び細胞内のウリジンレベルの変化を利用して組織の代謝機能を支持することによって多くの病理学的及び生理学的状態を治療することができる。これらの状態には、脳血管性障害及び痙攣を含むＣＮＳ障害、パーキンソン氏病、アルツハイマー病、老人性痴呆症、睡眠障害、筋機能障害、肺障害、糖尿病、心不全及び心筋梗塞、肝臓病又は肝臓損傷が含まれるが、これらに限定されない。ウリジンは、ピリミジン環構造を有する天然産ヌクレオシドである。この化合物は、ＵＤＰ、ＵＴＰ及び核酸のような組織グリコーゲンの合成において必須である。また、ウリジンは、種々の生理学的及び病理学的な状態を治療するのに有用であることが知られている。例えば、ウリジンは、ウサギの心臓組織における心筋の作為、グルコースの取り込み、グリコーゲンの合成及びＡＴＰの分解を増加させることが示された（キプソン氏他、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．，２６：１５８５〜１５９１（１９７７）及びキプソン氏他、Ｊ．Ｍｏｌｅ．ａｎｄＣｅｌｌ．Ｃａｒｄｉｏｌｏｇｙ，１０：５４５〜５６５（１９７８））。また、ウリジンは、カエルやラット（オースデート氏、Ｊ．ＣａｒｄｉｏｖａｓｃｕｌａｒＲｅｓｅａｒｃｈ，１７：１４５〜１５１（１９８３））及びイヌ（バックレイ氏他、ＣｉｒｃｕｌａｔｉｏｎＲｅｓｅａｒｃｈ，Ｖｏｌ．VII（１９５９））の心臓において心筋収縮性を増大させることが示された。血漿ウリジンレベルの増加は、低酸素又は虚血性の心臓組織を患っている患者に対して特に有益であろう。何故ならば、刺激された解糖作用及び糖原分解は心臓低酸素症における重要な補償機構であるからである。これらの利益は、ＵＤＰ−グルコースピロホスホリラーゼ及びＵＤＰ−グルコースグリコーゲントランスグルコシラーゼのような酵素の基質としてのウリジンの役割から又はＵＴＰ、ＵＤＰ又はＵＭＰのような組織ウリジンヌクレオチドの増加のために生じことができた。或いは、増加した活性は、グリコーゲン合成の中間体であるＵＤＰ− グルコースの存在のためであろう。また、解糖性のＡＴＰが虚血症の前期間の後に膜構造を保存するのに主たる役割を果たし、ウリジンが回収期間中にＡＴＰを産生する増加した解糖作用のために必要であると思われる。また、血漿ウリジンレベルの変動は、筋肉の作為において重要な示唆を有する。ウリジンは、単離されたラットの骨格筋においてグルコースの取り込み及びグリコーゲンの合成を増加させることが見出された（キプソン氏他、９１７７）。これらの代謝の増加は、低濃度のウリジン（１０^-4Ｍ）で起こり、しかして効果が受容体を介して生じ得ることを示している。ウリジンのレベルを保持して標的受容体の過負荷を防止する能力は、適当な筋肉の作為を保持するのに最も有用であろう。また、ウリジンレベルは、中枢神経系の機能においても重要である。血液中のウリジン及びシチジンの存在は、単離されたネコの脳についての実験において正常な脳の機能のために必要であることが示された（ガイガー氏他、Ｊ．Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．，１：９２〜１００（１９５６））。さらに、電気的活性は、単純血液媒体を潅流させた単離された脳において約１時間後に停止することが示されたが、その電気的活性はウリジン及びシチジンの添加によって回復する。また、角膜及び瞳孔の反射は、潅流媒体にウリジン及びシチジンを添加すると正常に復帰する。これらの効果は、酸素消費又は血流の増加よりもむしろ炭水化物の代謝が向上するためであると思われる。さらに、癲癇及び癲癇発作は、抑制的神経伝達体であるγ−アミノ酪酸（ＧＡＢＡ）の欠乏に関係している。ウリジンと小脳膜のＧＡＢＡ受容体並びに痙攣と密接に関係する脳の領域におけるＧＡＢＡ受容体との結合の研究から、ウリジンは受容体に対してアゴニスト作用を有し得ることが示された。即ち、ウリジンは、ＧＡＢＡ受容体と結合すると、神経伝達において抑制的な応答を有し得る（ガルネリ他、Ｎｅｕｒｏｃｈｅｍ．Ｒｅｓｅａｒｃｈ．，８：１２（１９８３））。従って、細胞内及び血漿のウリジンレベルを制御することは、脳血管性障害及び痙攣を含むＣＮＳ障害、癲癇、パーキンソン氏病、アルツハイマー病及び老人性痴呆症の治療において重要な示唆を有し得よう。ウリジンの他の面は、肝臓損傷及び肝炎の治療に使用できる可能性である。ウリジンは、ＣＣｌ₄によって損傷させたラットの肝臓において抱合及び排泄の機能を正常化されることが示された（バスマ氏他、Ｂｕｌｌ．Ｅｘｐｔｌ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．，８８：１４８０〜１４８３（１９８９））。さらに、ウリジンは、ピリミジン合成経路における遺伝子欠損の処置に使用することができる。ウリジンの投与は、遺伝性のオロチン酸尿症を患った患者を治療するのに有効であった（ベンセン氏他、Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｇｅｎ．，４１：４２６〜４３１（１９９１））。また、血漿のウリジンレベルの制御は、レトロウイルス性の疾病及び癌の治療において主要な役割を果たすことができる。後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）と称されるタイプのレトロウイルスによる感染の結果であると一般に認められている。最近、多数のＨＩＶ株又は種が同定されているが、ＨＩＶが種々の臨床的発現を示す広範囲の疾病に応答できる類似のゲノムを有する広いファミリーのレトロウイルスの一部であると思われる。ＨＩＶに感染した患者の現在の治療は、典型的には、ピリミジンヌクレオシド類似体、例えば３’−アジド−３’−デオキシチミジン（ＡＺＴ）のような治療剤の投与を包含する。このような化学療法剤は、ＨＩＶ逆転写酵素を阻害し、そして患者の骨髄細胞の生長の抑制を含む細胞変性作用を減少させることによって機能する。この複雑化は、実行できる薬量又は治療期間をしばしば制約する。各種の抗レトロウイルス剤（例えば、ＡＺＴ）及び抗癌剤（例えば、５−フルオルウラシル（５−ＦＵ）及び５−フルオル−２’−デオキシウリジン（ＦｄＵｒｄ））の主な制約の一つは、この骨髄の抑制であった。この毒性からの完全な保護（及び逆転）は、ウリジンの投与によってインビボ及びインビトロで達成することができる。しかし、不幸にして、患者においてウリジンレベルを有効に高めることは困難であることが証明された。従って、上記のような状態及びその他の状態のために血漿ウリジンレベルの上昇という既知の有効性に基づく治療は現在まで実用的ではなかった。ウリジンは各種の血漿中に比較的高い一定の濃度（１〜５μＭ）で存在するが、その血漿中の半減期はほぼ２分間である。肝臓に入るウリジンは、肝ウリジンホスホリラーゼ（ＵｒｄＰａｓｅ）によってウラシルに急速に分解される。門静脈によって肝臓に入る血漿ウリジンの９０％以上が一回の通過で分解されるが、新たな（ｄｅｎｏｖｏ）生合成からの一定量のウリジンが肝静脈に放出される。臨床試験においては、この迅速な分解を克服するためには及び治療剤により誘発される例えば毒性から患者を保護するのに要求される血漿ウリジン濃度を達成するためには高い薬量のウリジン（１〜３ｇ／ｍ² ）を１日当たり数回投与することが要求される。このような高い薬量では、血漿からのウリジンの迅速な除去が認められ、ウリジンの尿からの排泄は薬量の１５〜４０％になる。また、ウラシルは、高い薬量のウリジンを受け取る個体の血漿中で上昇し、薬量の２〜１７％として排泄される。さらに、高い薬量のウリジンの使用は、静脈炎、発熱反応及び下痢を含む毒性の副作用によって妨げられる。また、肝臓においてウリジンからウラシルへのホスホリル化を妨げるウリジンホスホリラーゼ阻害剤（ＵＰＩｓ）は、ウリジンプールを増加させることが示された。しかし、ＵＰＩｓの投与から生じる増加ウリジンの多くは尿中に出てしまい、従って細胞内又は血漿のウリジンの真の累積を達成させない。従って、細胞内及び血漿のウリジンレベルを有効に且つ安全に制御させる治療法及び製薬組成物に対する要望が存在する。従って、本発明の目的は、ある種の病理学的及び生理学的状態を治療するために細胞内及び血漿のウリジンレベルを有効に且つ安全に増加させる方法を提供することである。他の目的は、ある種の化学療法の毒性副作用から患者を保護し且つこの副作用を逆転させるために細胞内及び血漿のウリジンレベルを増加させる方法を提供することである。さらに他の目的は、細胞内及び血漿のウリジンレベルを有効に且つ安全に増加させる製薬組成物を提供することである。その他の目的は、以下の説明から当業者には明らかとなろう。発明の概要本発明によれば、ウリジンの分泌を抑制する化合物を患者に投与することによって細胞内及び血漿のウリジンレベルを増加させる方法が提供される。ウリジンの分泌を抑制する化合物は、次式｛ここで、Ｒ₁及びＲ₃は１〜３個の炭素原子を有する低級アルコキシ基であり、同一であっても異なっていてもよく、ｎは１〜３の整数であり、ｍは２又は３であり、Ｒ₂は次式（ここで、Ｒ₄及びＲ₆はメチル、エチル又はプロピルであり、同一であっても異なっていてもよく、Ｒ₅はメチル、エチル、プロピル又はブチルである）の基であるか、又はＲ²は次式（ここで、ｘは２〜４の整数であり、ｙは２又は３であり、ｘとｙの和は５〜７である）の基である｝を有する化合物並びにこのような化合物の製薬上許容できる塩類である。ウリジンの分泌を抑制する好適な化合物は、ウリジンの腎臓への輸送機構においてウリジンと競合する化合物であり得る。このようなウリジンと競合する化合物には、Ｌ−ウリジン、Ｌ−２’，３’−ジデオキシウリジン及びＤ−２’，３ ’−ジデオキシウリジンが含まれる。前記のタイプのウリジン分泌抑制化合物は、単独で又は有効ウリジンを増加させることができるその他の化合物、例えば、ウリジン、シチジン、ウリジン又はシチジンのプロドラグ、ウリジンヌクレオチド、シチジンヌクレオチド、これらのヌクレオチドのプロドラッグ、ウリジン及びシチジンの二量体、ウリジンホスホリラーゼ阻害剤、特定のジデオキシヌクレオシド化合物及び（又は）ウリジン、シチジン及びウリジンホスホリラーゼ阻害剤のホモ又はヘテロ二量体などと共に投与することができる。また、ウリジン分泌抑制性化合物は、健全な細胞に毒性副作用を生じるさせるある種の治療剤と共に投与することができる。このような治療剤には、ピリミジンヌクレオシドアナログ（例えば、ＡＺＴ、ＦｄＵｒｄ）及びピリミジン塩基（例えば、５−ＦＵ）の類自体が含まれる。別の観点から、本発明は、細胞内及び血漿のウリジンレベルを増加させるのに有効である製薬組成物を包含する。ウリジンの分泌を抑制する化合物又はその塩類と、有効ウリジンを増加させることができるその他の化合物、例えばウリジン、シチジン、ウリジン又はシチジンのプロドラグ、ウリジンヌクレオチド、シチジンヌクレオチド、これらのヌクレオチドのプロドラッグ、ウリジン又はシチジンの二量体、ウリジンホスホリラーゼ阻害剤、特定のジデオキシヌクレオシド化合物及び（又は）ウリジン、シチジン及びウリジンホスホリラーゼ阻害剤のホモ又はヘテロ二量体との組合せである。さらに、製薬組成物は治療剤を含むことができる。呼吸及び筋系統の適切な機能におけるウリジンの既知の役割が示されれば、本発明は、例えば心筋梗塞又は心不全のような心臓の障害、並びに例えば肺や筋の障害の治療に有用性を有し得る。また、本発明は、肝臓病、肝臓損傷又は肝炎のような肝臓障害を治療するのに有用であろう。最後に、ウリジンがオロチン酸尿症の患者を治療するのに使用された事実のために、本発明で具体化された治療方法は、そのような病気を治療するのに有用であることが予期される。本発明のある観点では、ＡＺＴのようなピリミジンヌクレオシド類似体をウリジン分泌抑制性化合物と共に投与して感染を治療し且つそのピリジンヌクレオシド類似体により生じる毒性から未感染の細胞を保護し又は救助することからなる、ＡＩＤＳを含むレトロウイルス病の治療法を開示する。前記のような有効ウリジンを増加させるその他の化合物もこれらの化合物と共に投与することができる。本発明の詳細な説明本発明は、患者の細胞内及び血漿のウリジンレベルを増加させるための方法及び組成物に関する。血漿及び細胞内のウリジンレベルを保持し及び（又は）増加させることは、種々の病理学的及び生理学的状態、例えば、ＣＮＳ障害、パーキンソン氏病、アルツハイマー病、老人性痴呆症、睡眠障害、筋機能障害、肺障害、糖尿病、心不全及び心筋梗塞、肝臓病及び肝臓損傷を治療するのに有用である。また、血漿及び細胞内のウリジンレベルの増加は、ピリミジン塩基（例えば、５−フルオルウラシル）及びピリミジンヌクレオシド（例えば、ＡＺＴ）の類似体のような化学療法剤によって起こされた健全な細胞の損傷を防止し又は逆転させるのに重要である。先述したように、血漿ウリジンは、肝臓に入ると急速に分解する。血漿ウリジン濃度を増加させるウリジン又はその他の化合物の投与は、添加されたウリジンの相当な量が尿排泄により失われるので、増加した血漿ウリジンレベルを保持するのには必ずしも有効ではない。本発明は、有効なウリジン分泌抑制性化合物を患者に投与することによって患者の細胞内及び血漿のウリジンレベルが増加できることを認識するものである。用語「ウリジン分泌抑制性化合物」とは、ウリジンの細胞内及び血漿中濃度を増加させるのに有効である化合物をいう。これらの化合物は、一般に、ウリジンを細胞膜を介して細胞の内部から細胞の外部に輸送するのを抑制するように作用する。さらに詳しく言えば、これらの化合物は、ウリジンの腎浄化を抑制するものと思われる。例えばウリジンとの競合によってウリジンの分泌量を制限するその他の化合物も、ウリジン分泌抑制性化合物とみなすことができる。好適なウリジン分泌抑制性化合物は、次式｛ここで、Ｒ₁及びＲ₃は１〜３個の炭素原子を有する低級アルコキシ基であり、同一であっても異なっていてもよく、ｎは１〜３の整数であり、ｍは２又は３であり、Ｒ₂は次式（ここで、Ｒ₄及びＲ₆はメチル、エチル又はプロピルであり、同一であっても異なっていてもよく、Ｒ₅はメチル、エチル、プロピル又はブチルである）の基であるか、又はＲ²は次式（ここで、ｘは２〜４の整数であり、ｙは２又は３であり、ｘとｙの和は５〜７である）の基である｝を有する化合物並びにこのような化合物の製薬上許容できる塩類である。上記の一般式を有する好ましいウリジン分泌抑制性化合物の例としては、ジラゼプ（Ｎ，Ｎ’−ビス［３−（３，４，５−トリメトキシベンゾイルオキシ）プロピル］ホモピペラジン）及びヘキソベンジン（Ｎ，Ｎ’−ジメチル−Ｎ，Ｎ’ −ビス［３−（３’，４’，５’−トリメトキシベンゾイルオキシ）プロピル］エチレンジアミン）が含まれる。ウリジンの分泌を抑制するのに有用な他の化合物は、ウリジンの腎輸送機構においてウリジンと競合する化合物である。このような化合物にはＬ−ウリジン、Ｌ−２’，３’−ジデオキシウリジン及びＤ−２’，３’−ジデオキシウリジンがある。ウリジン分泌は、式（Ｉ）により前記したタイプの化合物を投与し又は前記したウリジン競合性化合物を投与することによって抑制することができる。式（Ｉ）によって示されるタイプのウリジン分泌抑制性化合物は、典型的には、１回につき体重１ｋｇ当たり約１〜５ｍｇの範囲の好ましい薬量で１日当たり２〜３回で投与される。ウリジン競合性化合物は、１回につき体重１ｋｇ当たり５〜５０ｍｇの範囲の薬量で１日当たり２〜３回で投与される。事実、アカゲザルにジラゼプを１日につき体重１ｋｇ当たり１〜２ｍｇの薬量で投与すると何の毒性もなく血漿ウリジンレベルの７〜８倍の増加があることがわかった。さらに、このような処置は、ウリジンの血漿中の半減期を約４〜５倍増加させた。これらのウリジンレベルは、高い薬量のウリジン（１日につき１〜３ｇ／ｍ²）を投与することにより得られるレベルにほぼ等しく、ウリジン投与と関連した毒性副作用もない。また、ウリジンレベルは、ウリジン分泌抑制性化合物と共に、ウリジンホスホリラーゼを阻害し、しかして有効ウリジンプールを増加させる化合物を同時に投与し又は順次に投与することにより増加又は保持することができる。好適なウリジンホスホリラーゼ阻害性化合物としては、ベンジラシクロウリジン（ＢＡＵ）、ベンジルオキシベンジラシクロウリジン（ＢＢＡＵ）、アミノメチルベンジラシクロウリジン（ＡＭＢＡＵ）、アミノメチルベンジルオキシベンジラシクロウリジン（ＡＭＢ−ＢＡＵ）、ヒドロキシメチルベンジラシクロウリジン（ＨＭＢＡＵ）及びヒドロキシメチルベンジルオキシベンジラシクロウリジン（ＨＭＢＢＡＵ）が含まれる。その他の好適なウリジンホスホリラーゼ阻害剤及びそのような化合物の合成方法は、次の参考文献：・米国特許第４，６１３，６０４号（チュー氏他）、・ニーツイキ氏他、ＢｉｃｈｅｍｉｃａｌＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙＶｏｌ．３０，ｐ．２０９７〜２１０１（１９８１）、・ニーツイキ氏他、ＢｉｃｈｅｍｉｃａｌＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙＶｏｌ．３１，ｐ．１８５７〜１８６１（１９８２）、・リン氏他、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｖｏｌ．２５，ｐ．９７１〜９７３（１９８５）、・米国特許第５，０７７，２８０号（ソマドッシ氏他）に開示されている。これは、ここで参照することにより本明細書に含めるものとする。５−ベンジルバルビツレートもウリジンホスホリラーゼを阻害するのに使用することができる。このような化合物には、米国特許第５，１４１，９４３号（ナギブ氏他、これはここで参照することにより本明細書に含めるものとする）に記載のように、５−ベンジルオキシベンジルバルビツレート、５−ベンジルオキシベンジル−１−［（１−ヒドロキシ−２−エトキシ）メチル］バルビツレート、５−ベンジルオキシベンジルアセチル−１−［（１−ヒドロキシ−２ −エトキシ）メチル］バルビツレート、５−ベンジルオキシベンジル−１−［（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ）メチル］バルビツレート、５−ベンジルオキシベンジル−１−［（１−ヒドロキシ−３−アミノ−２−プロポキシ）メチル］バルビツレート、５−ベンジルオキシベンジル−１−［（２−（３−カルボキシプロピオニルオキシ）エトキシ）メチル］バルビツレート、５−ベンジル −１−［（１−ヒドロキシ−２−エトキシ）メチル］バルビツレート、５−メトキシベンジルアセチルバルビツレート、５−ベンジル−１−［（１，３−ジヒドロキシ−２−プロポキシ）メチル］バルビツレート、５−ベンジル−１−［（１ −ヒドロキシ−３−アミノ−２−プロポキシ）メチル］バルビツレート、５−ベンジル−１−［（２−（３−カルボキシプロピオニルオキシ）エトキシ）メチル］バルビツレートが含まれる。ウリジンホスホリラーセ阻害性化合物として使用されるアシクロウリジン類は、本発明に従えば５〜２００ｍｇ／ｋｇ／日の薬量で投与することができる。本発明に従って投与される５−ベンジルバルビツレート化合物の好ましい薬量は、５〜２００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内にある。さらに、外生ウリジンの利益は、ある種のプロドラッグを投与することによって実現することができる。好適な化合物には、ウリジン及びシチジンのプロドラッグ（例えば、トリフェニルウリジン及びトリフェニルシチジン）、ウリジン５’−モノホスフェートのプロドラッグ（ＵＭＰ）及びシチジン５’−モノホスフェートのプロドラッグ（ＣＭＰ）（例えば、モノ及びジアルキルエステル、アシルオキシアルキルエステル、アルコキシカルボニルメチルエステル、置換エチル及びプロピルエステル、アミドメチルエステル、ベンジルエステル、フェニルエステル、ホスホンアミデート、シクロホスフェートエステル）、ウリジン及びシチジンのホモ二量体及びそのエステル（例えば、Ｕ−Ｐ −ＵＮＵ−Ｐ−Ｃ、Ｃ−Ｐ−Ｃ及びそれらの異性体）、ウリジンホスホリラーゼ阻害剤のホモ二量体、ジデオキシヌクレオシド化合物及びウリジン、シチジン又はウリジンホスホリラーゼ阻害剤のヘテロ二量体（例えば、ＡＺＴ−Ｐ−Ｕ及びＡＺＴ−Ｐ−ＢＡＵ）がある。同様に、ウリジン及びシチジンのヌクレオチド並びにこれらのヌクレオチドのプロドラグも投与することができる。ウリジン及びシチジンのプロドラッグ並びにそれらのヌクレオチドのプロドラッグは、それらがその脂質溶解性及び細胞膜を介する輸送を高めることによってウリジン又はシチジンのバイオアベイラビリテイを向上させるので有用であると思われる。これは、ウリジン及びシチジンの早期分解を防止するように作用する。ヌクレオチドのプロドラッグは、ヌクレオチドの陰電荷がその細胞膜の通過を防止するので特に有用である。プロドラッグによる電荷の遮蔽は細胞膜を介するヌクレオチドの輸送を容易にさせる。細胞内にあれば、細胞エステラーゼが陰電荷を遮蔽からはずし、その後のヌクレオチドの合成に利用できるようにヌクレオチドを細胞内に捕捉させることができる。いくつかの化学療法剤は疾病を治療するのに有用であるが、またその使用及び（又は）有効性を制限し得る重大な副作用を生じさせる恐れがある。このような化学療法剤の例は、癌の治療に使用されるピリミジン塩基（例えば、５−フルオルウラシル）及びＡＩＤＳの治療に使用されるピリミジンヌクレオシド（例えば、ＡＺＴ）である。ピリミジンヌクレオシド類似体は、特定の類似体の効力及び毒性によって、約１０ｍｇ〜約１００ｍｇ／体重ｋｇ／日の範囲の量で投与するとウイルスの複製を阻害することがわかった。このような薬量単位は、体重約７０ｋｇの患者に合計で２４時間で約０．７〜約７ｇのヌクレオシド類似体が投与されるように使用される。例えば、ＡＺＴ治療について現在認められている治療計画は２００ｍｇのＡＺＴを１日当たり３回投与することを要求する。ピリミジン塩基である５− フルオルウラシルは、当業者に周知のように治療的な薬量で投与することができる。本発明に従って有用なピリミジンヌクレオシド類似体の例としては、３’−アジド−３’−デオキシチミジン、３’−フルオル−３’−デオキシチミジン、３ ’−ジデオキシシチジン−２’−エン及び３’−デオキシ−３’−デオキシチミジン−２’−エンがある。前記したタイプの化学療法剤は、本発明のウリジン分泌抑制性化合物と同時に投与し又は順次に投与することができる。さらに、化学療法剤とウリジン分泌抑制性化合物は、ウリジンホスホリラーゼ阻害剤或いはウリジン及びシチジンのプロドラッグ又はヌクレオチドのドプロドラッグと共に投与することができる。薬量は、好ましくは、患者のウリジンレベルを５０μＭ〜１００μＭまで定常状態で上昇させるように調節される。前記した併用治療の投薬レジメは、最適な治療的応答を与えるように調節することができる。例えば、いくつかに分けた薬量を毎日で投与してもよいし、又は薬量を治療状況の事態により示されるように比例して減少させてもよい。明白な実際の利点は、活性化合物が任意の便利な態様で、例えば経口、静脈内、筋肉内又は皮下経路で投与できるということである。ここに開示した活性化合物は、例えば、不活性希釈剤又は同化性の食用できるキャリアーと共に経口投与することができる。また、それらは、硬質又は軟質のスキン層のカプセルに封入することができ、又は錠剤に圧縮し又は食料に直接混合することができる。経口投与による治療のためには、活性化合物は補助剤に配合し、摂取可能な錠剤、口腔錠剤、トローチ、カプセル、エリキシル、懸濁液、シロップ、ウエハースなどの形態で使用することができる。このような治療に有用な組成物における活性化合物の量は、好適な薬量が得られるようなものである。また、錠剤、トローチ、ピル、カプセルなどは、下記の成分：トラガンタガム、アラビアゴム、コーンスターチ又はゼラチンのようなバインダー；りん酸二カルシウムのような補助剤；コーンスターチ、ポテトスターチ、アルギン酸などのような崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムのような滑剤；シュクロース、ラクトース又はサッカリンのような甘味料；ペパーミントオイル又はウインターグリーン、チェリーフレバーのような芳香剤を含有することができる。投薬単位形態がカプセルであるときは、それは、上記の種類の物質の他に、液状キャリアーを含有し得る。種々のその他の物質を被覆として存在させ又は投薬単位の物理的形態を変化させることができる。例えば、錠剤、ピル又はカプセルは、シェラック、糖又はこの両者で被覆することができる。シロップ又はエリキシルは、活性化合物、甘味剤としてのシュクロース、保存剤としてのメチル又はエチルパラベン、染料及びチェリー又はオレンジフレーバーのような香料を含有することができる。もちろん、どの投薬単位形態の製造に使用されるどの物質も、その使用量において製薬学的に純粋であり且つ実質的に無毒性でなければならない。さらに、活性化合物は持効性製剤又は処方剤に混合することができる。また、活性化合物は、非経口的に又は腹腔内経路で投与することができる。遊離塩基又は製薬上許容できる塩としての活性化合物の溶液は、界面活性剤、例えばヒドロキシプロピルセルロースと適当に混合される水で調製することができる。また、分散体も、グリセリン、液状ポリエチレングリコール、それらの混合物、オイルなどで調製することができる。通常の貯蔵及び使用の状態においては、これらの製剤は微生物の生長を防止するため保存剤を含有する。注射用途に好適な投薬形態としては、滅菌水溶液又は分散液、滅菌注射用溶液又は分散液を即座に調製するための滅菌粉末が含まれる。全ての場合に、その形態は無菌でなければならず、また易注射性が存在する程度まで流動性でなければならない。さらに、それは、製造及び貯蔵の条件において安定でなければならず、細菌や菌類のような微生物の汚染作用に対して保存されねばならない。キャリアーは、例えば、水、エタノール、グリセリン、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、植物油を含めて溶媒又は分散媒であってよい。適切な流動性は、例えば、レシチンのような被覆を使用することによって、分散体の場合には所要の粒度を保持することによって、さらに界面活性剤を使用することによって維持することができる。各種の抗細菌剤及び抗菌剤（例えば、パラベン、クロルブタノール、ソルビン酸、チメロサール）を微生物の作用を防止するために使用することができる。多くの場合には、等張剤又は例えば糖類又は塩化ナトリウムを含有するのが好ましい。注射用組成物の長期の吸収は、組成物に、吸収を遅らせる薬剤、例えばアルミニウムモノステアレート及びゼラチンを使用するこによってもたらすことができる。滅菌注射用溶液は、活性化合物を所要の量で適当な溶媒に、所要ならば上で列挙したその他の成分と共に配合し、次いで濾過滅菌することによって調製することができる。一般に、分散液は、主分散媒と前記したタイプの所要の並びに追加の成分とを含有する滅菌したビヒクルに種々の滅菌した活性成分を配合することによって調製することができる。滅菌注射用溶液を調製するのに使用される滅菌粉末は、真空乾燥及び凍結乾燥によって調製することができる。本発明において使用するとき、用語「製薬上許容できるキャリアー」とは、任意の全ての溶媒、分散媒、被覆、抗細菌剤及び抗菌剤、等張剤、吸収遅延剤などを包含する。製薬上活性な物質のためのこのような媒体及び薬剤の使用は斯界において周知である。多くの変更、追加及び削減が本発明の範囲内でなし得ることが明らかとなる。例えば、本発明はその他の化学療法剤又は生物学的応答 −変性剤と併用して使用できることが認められる。例えば、本発明の併用治療は、骨髄刺激因子、例えば、顆粒球マクロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＦＳｓ）、その他のコロニー刺激因子、エリスロポイエチン（ＥＰＯ）及びその他の造血活性を刺激する化合物の投与と密接にして使用することができる。（ＧＭ −ＣＳＦ活性の詳細な検討は、ハンマー氏他のＡｎｔｉｍｉｃｒｏｇｉａｌＡｇｅｎｔｓａｎｄＣｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙＶｏｌ．３１，ｐ．１０４６〜１０５０（１９８７）を参照されたい。）同様に、本発明の併用治療は、免疫系を刺激するための努力と同時に、例えば、インターフェロン（例えば、α−Ａインターフェロン）又はその他のリンフォカインの投与によって行うことができる。本発明を以下の制限的でない実施例によってさらに例示する。実施例下記の実施例で使用したジラゼプは、商業的供給元から得た。化合物の化学純度は、質量スペクトル及び（又は）ＨＰＬＣ分析によって９９％以上であると確認された。未標識のウリジンは、シグマ・ケミカル社（セントルイス、ミズーリー州）から購入した。［５−³Ｈ］−ウリジン（２８Ｃｉ／μモル）は、モラビク・バイオケミカルズ社（ブレア、カルホルニア州）から購入し、ＨＰＬＣにより確認すると９９％以上の純度であった。実施例で使用したその他の薬品の全部は市販の最高純度のものであった。研究に使用した体重が４.２６〜６.２４ｋｇの若いリーサスザルは、動物愛護法及び実験動物の管理使用のための健康指針国立研究所によって確立された指針に従って、エモリ大学のヤークス地域プライメイト研究センターで飼育した。例１ウリジンの一回投薬及びジラゼプの効果サルには５００μＣｉ［５−³Ｈ］−ウリジンをウリジンと共に２５ｍｇ／体重ｋｇ又は８３．３ｍｇ／体重ｋｇの微量の皮下投与を１回受けた。ウリジンはジラゼプと共に及びジラゼプなしで投与した。ジラゼプを与えるときは、それは、１又は２ｍｇ／体重ｋｇの量を滅菌燐酸塩緩衝塩水（ｐＨ７.４）に溶解して投与した。血液試料（３ｍｌ）を、注射してから０、５、１０、１５及び３０分後、そして１、２、４及び６時間後にヘパリン処理した管に集めた。可能な場合には、尿も細胞窄刺法により同様の時間間隔で集めた。血漿及び尿試料を分析まで−２０℃で冷凍した。ジラゼプの一回投薬サルには１又は２ｍｇ／ｋｇ体重の量のジラゼプを滅菌燐酸塩緩衝塩水（ｐＨ７.４）に溶解して皮下投与した。血液試料（３ｍｌ）を、注射してから０、１５及び３０分後、そして１、２、４、６及び２４時間後にヘパリン処理した管に集めた。可能な場合には、尿も細胞窄刺法により同様の時間間隔で集めた。血漿及び尿試料を分析まで−２０℃で冷凍した。試料の分析血漿の非放射性試料（５００μｌ）を１ｍｌの１５％氷冷トリクロル酢酸によって抽出した。たんぱく質を遠心分離によって除去し、試料温度を５℃に保持した。上澄み液を除去し、等量の氷冷トリオクチルアミンと１，１，２−トリクロルトリフルオルエタン（フレオン）との１：１混合物を添加した。相を分離させ、上部相の５０μｌの試料を、手動インゼクター及び定波長分光光度計を備えたヒューレット・パッカードモデル１０５０液体クロマトグラフィー装置を使用してＨＰＬＣによって分析した。また、ハイパーシルＯＤＳ５μｍカラム（ジョンズ・クロマトグラフィー社、リットルトン、コロンビア州）を使用して逆相クロマトグラフィーを行った。尿試料を０.４５μｍ細孔寸法のアルコＬＣ１３フィルター（ゲルマン・サイエンス社、アンナルボー、ミシガン州）によって濾過してたんぱく質を除去し、５０μｌの試料をＨＰＬＣによって分析した。１０ｍＭの燐酸及び１０μＭのヘプタンスルホン酸（ｐＨ３.１）を使用してアイソクラシー溶離を１ｍｌ／ｍｉｎで行った。カラムの温度は２５℃に保持し、吸光度を２５４ｎｍで測定した。これらの条件下で、ウリジンは１４〜１５分で、ウラシルは１０〜１２分で、ジヒドロウラシルは８〜９分で溶離した。カラムからの放射性溶離液を死容積の小さい連結管を介してモデル２１１２レジラック画分捕集器（ＬＫＢインスツルメント社、ロックビル、メリーランド州）に導き、０.５ｍｌの一定時間後の画分をミニシンチュレーション瓶に集めた。５ｍｌのエコノ−セーフシンチレーション螢石（ｆｌｕｏｒ）（リサーチ・プロダクツ・インターナショナル社、マウントプロスペクト、イリノイ州）を添加した後、自動急冷捕集プログラムを備えたベックマンモデルＬＳ５０００ＴＡ液体シンチレーションカウンター（ベックマン・インスツルメント社、フラートン、カルホルニア州）を使用して放射能を測定した。日内及び日間の変化率係数は、４〜４００μＭの間の濃度で１０％未満であった。検出限界は２.０μＭであった。薬物速度論的分析ＳＩＰＨＡＲ／ベースプログラムを使用して区分モデル非依存性の方法によってウリジンの薬物速度論的パラメーターを評価した。データの指数的な当てはめの重み付けした非線形最小二乗法の回帰によって生じる未端配列勾配を使用し、重み付けした二乗係数を二乗した計算濃度の逆数として設定して、時間の無限大まで外挿してＡＵＣを梯形ルールによって決定した。ウリジンの除去半減期を０ .６９３／Ｋから計算した。全血漿浄化値（Ｃｌ）は、薬量をＡＵＣ及びサルの体重で割って計算した。ピーク血漿濃度（Ｃ_ma _x ）値及びピーク血漿濃度までの時間（Ｔ_max）値を実験値から認定した。ウリジンの腎臓浄化値（Ｃｌ_R）は、薬量をＡＵＣで割って計算した。得られたデータを以下の表１及び２に例示する。上で参照した全ての刊行物及び特許は、ここで引用することにより本明細書に含めるものする。種々の変更が以上の説明から本発明の範囲から離れることなくなし得ることが理解される。本発明は、即効性及び持効性処方物も含めて、以上の説明で引用した活性成分及び化学療法剤の全ての使用を包含するものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＡ６１Ｋ 45/06 ＡＡＢ 8415−4ＣＡ６１Ｋ 45/06 ＡＡＢＡＢＮＡＢＮＡＢＳＡＢＳ (72)発明者エルコウニー，マームードエイチ. アメリカ合衆国 35213 アラバマ，バーミンガム，ラウンドフォレストドライブ 4632

Claims

【特許請求の範囲】１．患者に（ａ）ウリジンホスホリラーゼ阻害剤、ウリジン、シチジン、ウリジンのプロドラッグ、シチジンのプロドラッグ、ジデオキシヌクレオシド類似体のヘテロ二量体、及びウリジン、シチジン又はウリジンホスホリラーゼ阻害剤のヘテロ二量体よりなる群から選択される１種以上の化合物と、（ｂ）次式｛ここで、Ｒ₁及びＲ₃は１〜３個の炭素原子を有する低級アルコキシ基であり、同一であっても異なっていてもよく、ｎは１〜３の整数であり、ｍは２又は３であり、Ｒ₂は次式（ここで、Ｒ₄及びＲ₆はメチル、エチル又はプロピルであり、同一であっても異なっていてもよく、Ｒ₅はメチル、エチル、プロピル又はブチルである）の基であるか、又はＲ²は次式（ここで、ｘは２〜４の整数であり、ｙは２又は３であり、ｘとｙの和は５〜７である）の基である｝によって表される有効量のウリジン分泌抑制性化合物又はそれらの製薬上許容できる塩類を同時に投与するか又は順次に投与することによって患者の細胞内及び血漿のウリジンレベルを増加させるための薬剤。２．細胞内及び血漿のウリジンレベルが、増加した細胞内及び血漿のウリジンレベルに応答する生理学的又は病理学的状態を治療するように増加される請求項１に記載の薬剤。３．ウリジン分泌抑制性化合物が１回につき体重１ｋｇ当たり約１〜５ｍｇの薬量で１日当たり２〜３回で投与される請求項１に記載の薬剤。４．ウリジン分泌抑制性化合物がジラゼプ及びヘキソベンジンよりなる群から選択される請求項１に記載の薬剤。５．ウリジンのプロドラグがウリジンヌクレオチド及びウリジンヌクレオチドのプロドラッグよりなる群から選択される請求項１に記載の薬剤。６．ウリジンのプロドラッグがウリジンホモ二量体及びそれらのエステルである請求項１に記載の薬剤。７．シチジンのプロドラグがシチジンヌクレオチド及びシチジンヌクレオチドのプロドラッグよりなる群から選択される請求項１に記載の薬剤。８．シチジンのプロドラッグがシチジンホモ二量体及びそれらのエステルである請求項１に記載の薬剤。９．レトロウイルス感染細胞におけるウイルスの複製を中断させるのに有効な量でピリミジンヌクレオシド化合物を投与し、未感染細胞におけるヌクレオシドの毒性を減少させるのに有効な量のウリジンを投与し、細胞内及び血漿のウリジンレベルを増加させるのに有効な量の、ジラゼプ、ヘキソベンジン、Ｌ−ウリジン、Ｌ−２’，３’−ジデオキシウリジン及びＤ−２ ’，３’−ジデオキシウリジンよりなる群から選択されるウリジン分泌抑制剤を投与することからなるレトロウイルス感染症を治療するための薬剤。１０．血漿及び細胞内のウリジンレベルを増加させるのに有効な量の、次式｛ここで、Ｒ₁及びＲ₃は１〜３個の炭素原子を有する低級アルコキシ基であり、同一であっても異なっていてもよく、ｎは１〜３の整数であり、ｍは２又は３であり、Ｒ₂は次式（ここで、Ｒ₄及びＲ₆はメチル、エチル又はプロピルであり、同一であっても異なっていてもよく、Ｒ₅はメチル、エチル、プロピル又はブチルである）の基であるか、又はＲ²は次式（ここで、ｘは２〜４の整数であり、ｙは２又は３であり、ｘとｙの和は５〜７である）の基である｝によって表されるウリジン分泌抑制性化合物又はそれらの製薬上許容できる塩類を投与することからなる、化学療法剤の投与によって生じる毒性から正常な又は未感染の細胞を保護し及び（又は）救済するための薬剤。１１．ウリジン分泌抑制性化合物が、ジラゼプ及びヘキソベンジンよりなる群から選択され、１回につき体重１ｋｇ当たり約１〜５ｍｇの薬量で１日当たり２〜３回で投与される請求項１０に記載の薬剤。１２．化学療法剤が、３’−アジド−３’−デオキシチミジン、３’−フルオル −３’−デオキシチミジン、３’−ジデオキシシチジン−２’−エン、３’−デオキシ−３’−デオキシチミジン−２’一エン、５−フルオルウラシル及び５− フルオル−２’−デオキシウリジンよりなる群から選択されるピリミジンヌクレオシドである請求項１１に記載の薬剤。１３．患者に（ａ）Ｌ−ウリジン、Ｌ−２’，３’−ジデオキシウリジン及びＤ−２’，３’ −ジデオキシウリジンよりなる群から選択される、ウリジンの腎輸送機構においてウリジンと競合する１種以上の化合物（この化合物は１回につき体重１ｋｇ当たり約５〜５０ｍｇの薬量で１日当たり２〜３回で投与されるものとする）と、（ｂ）次式｛ここで、Ｒ₁及びＲ₃は１〜３個の炭素原子を有する低級アルコキシ基であり、同一であっても異なっていてもよく、ｎは１〜３の整数であり、ｍは２又は３であり、Ｒ₂は次式（ここで、Ｒ₄及びＲ₆はメチル、エチル又はプロピルであり、同一であっても異なっていてもよく、Ｒ₅はメチル、エチル、プロピル又はブチルである）の基であるか、又はＲ²は次式（ここで、ｘは２〜４の整数であり、ｙは２又は３であり、ｘと５ｙの和は５〜７である）の基である｝によって表される有効量のウリジン分泌抑制性化合物又はそれらの製薬上許容できる塩類を同時に投与するか又は順次に投与することによって患者の細胞内及び血漿のウリジンレベルを増加させるための薬剤。１４．患者に（ａ）弗素化抗癌剤を投与し、（ｂ）次式｛ここで、Ｒ₁及びＲ₃は１〜３個の炭素原子を有する低級アルコキシ基であり、同一であっても異なっていてもよく、ｎは１〜３の整数であり、ｍは２又は３であり、Ｒ₂は次式（ここで、Ｒ₄及びＲ₆はメチル、エチル又はプロピルであり、同一であっても異なっていてもよく、Ｒ₅はメチル、エチル、プロピル又はブチルである）の基であるか、又はＲ²は次式（ここで、ｘは２〜４の整数であり、ｙは２又は３であり、ｘとｙの和は５〜７である）の基である｝によって表される、血漿及び細胞内のウリジンレベルを増加させるのに有効な量のウリジン分泌抑制性化合物又はそれらの製薬上許容できる塩類を投与することからなる、化学療法剤の投与によって生じる毒性から正常な又は未感染の細胞を保護し及び（又は）救済するための薬剤。１５．弗素化抗癌剤がピリミジンヌクレオシド及びピリミジン核酸塩基よりなる群から選択される請求項１４に記載の薬剤。１６．ピリミジンヌクレオシドが５−フルオル−２’−デオキシウリジン及びその誘導体であり、ピリミジン核酸塩基がフルオルウラシル及びその誘導体である請求項１５に記載の薬剤。１７．ウリジン分泌抑制性化合物がジラゼプ及びヘキソベンジンよりなる群から選択される請求項１４に記載の薬剤。１８．ウリジン分泌抑制性化合物が１回につき体重１ｋｇ当たり約１〜５ｍｇの薬量で１日当たり２〜３回で投与される請求項１７に記載の薬剤。１９．患者にウリジンホスホリラーゼ阻害剤、ウリジン、シチジン、ウリジンのプロドラッグ、シチジンのプロドラッグ、ジデオキシヌクレオシド類似体のヘテロ二量体、及びウリジン、シチジン又はウリジンホスホリラーゼ阻害剤のヘテロ二量体よりなる群から選択される１種以上の化合物を投与することをさらに含み、該ヘテロ二量体が３’，５’−ホスホジエステル二量体及び５’，５’−ホスホジエステル二量体よりなる群から選択される請求項１４に記載の薬剤。２０．Ｌ−ウリジン、Ｌ−２’，３’−ジデオキシウリジン及びＤ−２’，３’ −ジデオキシウリジンよりなる群から選択される、ウリジンの腎輸送機構においてウリジンと競合するウリジン分泌抑制性化合物を、細胞内及び血漿のウリジンレベルを増加させるのに有効な量で患者に投与することをさらに包含する請求項１４に記載の薬剤。２１．ウリジンのピロドラグがウリジンのホモ二量体及びそれらのエステルであり、該ホモ二量体が３’，５’−ホスホジエステル二量体及び５’，５’−ホスホジエステル二量体よりなる群から選択される請求項１９に記載の薬剤。２２．シチジンのピロドラグがシチジンのホモ二量体及びそれらのエステルであり、該ホモ二量体が３’，５’−ホスホジエステル二量体及び５’，５’−ホスホジエステル二量体よりなる群から選択される請求項１９に記載の薬剤。