JPH0866183A - 細胞活動の制御方法 - Google Patents
細胞活動の制御方法Info
- Publication number
- JPH0866183A JPH0866183A JP6205385A JP20538594A JPH0866183A JP H0866183 A JPH0866183 A JP H0866183A JP 6205385 A JP6205385 A JP 6205385A JP 20538594 A JP20538594 A JP 20538594A JP H0866183 A JPH0866183 A JP H0866183A
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- Japan
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- cells
- cell
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 真核細胞の培養培地に塩化リチウムまたはウ
ォートマンニンを添加し、細胞の細胞外物質取り込み活
動を低下もしくは停止させることを特徴とする細胞活動
の制御方法。 【効果】 細胞の生存および増殖を損なうことなく、エ
ンドサイトーシスを選択的に低下もしくは停止すること
が容易となり、個体生存のための医療技術や有用物質の
生物生産を担う細胞利用に新たな途が拓ける。
ォートマンニンを添加し、細胞の細胞外物質取り込み活
動を低下もしくは停止させることを特徴とする細胞活動
の制御方法。 【効果】 細胞の生存および増殖を損なうことなく、エ
ンドサイトーシスを選択的に低下もしくは停止すること
が容易となり、個体生存のための医療技術や有用物質の
生物生産を担う細胞利用に新たな途が拓ける。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】この発明は、細胞活動の制御方法
に関するものである。さらに詳しくは、この発明は、培
養条件下にある真核細胞のエンドサイトーシスを制御す
るための簡便な方法に関するものである。
に関するものである。さらに詳しくは、この発明は、培
養条件下にある真核細胞のエンドサイトーシスを制御す
るための簡便な方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術とその課題】ヒトをはじめとする真核生物
は、その細胞が分裂増殖を繰り返し、活発な機能発現能
を有する細胞を次々に産生することによって個体が維持
されている。一つの細胞が分裂し、さらにもう一度分裂
するまでの期間を細胞周期と言い、この細胞周期は、染
色体の分離および細胞質の分裂が生じる「分裂期」とそ
れに続く「間期」とに大別される。このうち、間期にあ
る細胞は、細胞に不可欠な蛋白質を産生するためのｍＲ
ＮＡ合成や、染色体ＤＮＡの複製を行うが、また同時
に、細胞外の液相にある高分子物質を受容体を介してあ
るいは液相そのものを小胞体によって細胞内に取り込む
活動（エンドサイトーシス）を普遍的に行っている。こ
のエンドサイトーシスは、細胞の代謝や信号物質伝達等
と共役し、個体の生存および物質産生を支えている重要
な細胞活動であると考えられている。
は、その細胞が分裂増殖を繰り返し、活発な機能発現能
を有する細胞を次々に産生することによって個体が維持
されている。一つの細胞が分裂し、さらにもう一度分裂
するまでの期間を細胞周期と言い、この細胞周期は、染
色体の分離および細胞質の分裂が生じる「分裂期」とそ
れに続く「間期」とに大別される。このうち、間期にあ
る細胞は、細胞に不可欠な蛋白質を産生するためのｍＲ
ＮＡ合成や、染色体ＤＮＡの複製を行うが、また同時
に、細胞外の液相にある高分子物質を受容体を介してあ
るいは液相そのものを小胞体によって細胞内に取り込む
活動（エンドサイトーシス）を普遍的に行っている。こ
のエンドサイトーシスは、細胞の代謝や信号物質伝達等
と共役し、個体の生存および物質産生を支えている重要
な細胞活動であると考えられている。
【０００３】従って、このエンドサイトーシスを制御す
ることは、真核細胞による有用物質の産生、あるいは医
療技術の開発等に大きく寄与するものと期待されてい
る。培養条件下にある真核細胞のエンドサイトーシスを
低下もしくは停止させる方法としては、従来より、ショ
糖などの添加による高浸透圧下で細胞を培養する方法、
細胞質カリウムイオンを低下させる方法、脂溶性酸やア
ミン等によって細胞質ｐＨを低下させる方法等が知られ
ている。しかしながら、これらの方法の場合には、それ
ぞれの作用の標的分子が明らかでなく、効果も一過性で
毒性がある。しかも特殊な細胞培養液を用いる必要があ
り、実際上の応用可能性は乏しいと言わざるを得ない。
ることは、真核細胞による有用物質の産生、あるいは医
療技術の開発等に大きく寄与するものと期待されてい
る。培養条件下にある真核細胞のエンドサイトーシスを
低下もしくは停止させる方法としては、従来より、ショ
糖などの添加による高浸透圧下で細胞を培養する方法、
細胞質カリウムイオンを低下させる方法、脂溶性酸やア
ミン等によって細胞質ｐＨを低下させる方法等が知られ
ている。しかしながら、これらの方法の場合には、それ
ぞれの作用の標的分子が明らかでなく、効果も一過性で
毒性がある。しかも特殊な細胞培養液を用いる必要があ
り、実際上の応用可能性は乏しいと言わざるを得ない。
【０００４】この発明は、以上の通りの事情に鑑みてな
されたものであり、細胞生存を損なうことなく、エンド
サイトーシスを選択的に低下もしくは停止することので
きる簡便な方法を提供することを目的としている。
されたものであり、細胞生存を損なうことなく、エンド
サイトーシスを選択的に低下もしくは停止することので
きる簡便な方法を提供することを目的としている。
【０００５】
【課題を解決するための手段】この発明は、上記の課題
を解決するものとして、真核細胞の培養培地に塩化リチ
ウムを添加し、細胞の細胞外物質取り込み活動を低下も
しくは停止させることを特徴とする細胞活動の制御方法
を提供する。またこの発明は、真核細胞の培養培地にウ
ォートマンニンを添加し、細胞の細胞外物質の取り込み
活動を低下もしくは停止させることを特徴とする細胞活
動の制御方法をも提供する。
を解決するものとして、真核細胞の培養培地に塩化リチ
ウムを添加し、細胞の細胞外物質取り込み活動を低下も
しくは停止させることを特徴とする細胞活動の制御方法
を提供する。またこの発明は、真核細胞の培養培地にウ
ォートマンニンを添加し、細胞の細胞外物質の取り込み
活動を低下もしくは停止させることを特徴とする細胞活
動の制御方法をも提供する。
【０００６】
【作用】この発明の方法においては、分裂能を有する真
核細胞の培養液中に塩化リチウムまたはウォートマンニ
ンを添加するだけの簡単な操作によって、その培養細胞
のエンドサイトーシスを低下もしくは停止させる。活動
低下の程度は、培養液への塩化リチウムまたはウォート
マンニンの添加量によって操作することができるが、塩
化リチウムは１０〜１００ｍＭの範囲で、またウォート
マンニンは２〜２００ｎＭの範囲で添加することによ
り、細胞の生存を損なうことなく、しかも細胞増殖に影
響を及ぼすことなく、エンドサイトーシスを選択的に低
下もしくは停止させることができる。
核細胞の培養液中に塩化リチウムまたはウォートマンニ
ンを添加するだけの簡単な操作によって、その培養細胞
のエンドサイトーシスを低下もしくは停止させる。活動
低下の程度は、培養液への塩化リチウムまたはウォート
マンニンの添加量によって操作することができるが、塩
化リチウムは１０〜１００ｍＭの範囲で、またウォート
マンニンは２〜２００ｎＭの範囲で添加することによ
り、細胞の生存を損なうことなく、しかも細胞増殖に影
響を及ぼすことなく、エンドサイトーシスを選択的に低
下もしくは停止させることができる。
【０００７】エンドサイトーシスを回復させる場合に
は、培養液を交換して塩化リチウムまたはウォートマン
ニンを洗浄除去すればよい。塩化リチウムまたはウォー
トマンニンの添加量に応じて数時間から数十時間後には
エンドサイトーシスが回復する。なお、培養液それ自体
は特別な組成を必要とせず、公知のイーグルＭＥＭ培地
やダルベッコ変法ＭＥＭ培地等を用いればよい。
は、培養液を交換して塩化リチウムまたはウォートマン
ニンを洗浄除去すればよい。塩化リチウムまたはウォー
トマンニンの添加量に応じて数時間から数十時間後には
エンドサイトーシスが回復する。なお、培養液それ自体
は特別な組成を必要とせず、公知のイーグルＭＥＭ培地
やダルベッコ変法ＭＥＭ培地等を用いればよい。
【０００８】以下、実施例を示してこの発明の方法につ
いてさらに詳細かつ具体的に説明するが、この発明は以
下の例に限定されるものではない。
いてさらに詳細かつ具体的に説明するが、この発明は以
下の例に限定されるものではない。
【０００９】
実施例１ ヒト培養細胞株ＨＴ１０８０を直径３ｃｍのプラスティ
ックディシュで常法に従って培養し、その培地であるイ
ーグルＭＥＭ培養液に１Ｍ塩化リチウムを終濃度５０ｍ
Ｍの割合で添加した。塩化リチウムの添加から１、２、
３および１８時間後、培養液に西洋わさびパーオキシダ
ーゼ（ＨＲＰ）を１ｍｇ／ｍｌの濃度で添加し、その２
０分後に新しい培養液で細胞を洗浄し、細胞に取り込ま
れたＨＲＰの酵素活性を測定した。
ックディシュで常法に従って培養し、その培地であるイ
ーグルＭＥＭ培養液に１Ｍ塩化リチウムを終濃度５０ｍ
Ｍの割合で添加した。塩化リチウムの添加から１、２、
３および１８時間後、培養液に西洋わさびパーオキシダ
ーゼ（ＨＲＰ）を１ｍｇ／ｍｌの濃度で添加し、その２
０分後に新しい培養液で細胞を洗浄し、細胞に取り込ま
れたＨＲＰの酵素活性を測定した。
【００１０】結果は、図１に示した通りである。この図
１は、ＨＲＰ活性の測定値を、細胞数を反映する細胞タ
ンパク質量にて規格化し、それを塩化リチウム無添加
（時間０）の活性値と比較した結果を示す。この図１か
ら明らかなように、細胞のＨＲＰ取り込み（エンドサイ
トーシス）は塩化リチウムの添加によって経時的に抑制
され、添加後３時間では対照（時間０）の１５％まで低
下した。
１は、ＨＲＰ活性の測定値を、細胞数を反映する細胞タ
ンパク質量にて規格化し、それを塩化リチウム無添加
（時間０）の活性値と比較した結果を示す。この図１か
ら明らかなように、細胞のＨＲＰ取り込み（エンドサイ
トーシス）は塩化リチウムの添加によって経時的に抑制
され、添加後３時間では対照（時間０）の１５％まで低
下した。
【００１１】なお、５０ｍＭ塩化リチウムの添加による
細胞損傷や増殖阻害は観察されなかった。また、他の高
分子物質の取り込みにおいてもＨＲＰに対するのと同様
の効果が観察された。さらに、蛍光標識化デキストラン
を予め取り込ませた細胞を塩化リチウムを含む培養液で
処理すると、対照（塩化リチウム無添加）の細胞では蛍
光が核周辺に密集する膜小胞に認められたのに対し、塩
化リチウム処理細胞では膜小胞が細胞全体に分散してい
た。一方、受容体に特異的に結合して細胞内に取り込ま
れるトランスフェリンを標識化して取り込ませた細胞の
場合、対照細胞では細長い標識膜器官が観察されたのに
対し、塩化リチウム処理細胞では膜器官が細断小胞化し
ているのが認められた。 実施例２ ヒト培養細胞株ＨＴ１０８０を実施例１と同様に培養
し、その培養液に１Ｍ塩化リチウムを図２に示した各終
濃度で添加した。塩化リチウムの添加から１時間後、培
養液にＨＲＰを１ｍｇ／ｍｌの濃度で添加し、その２０
分後に新しい培養液で細胞を洗浄し、細胞に取り込まれ
たＨＲＰの酵素活性を測定した。
細胞損傷や増殖阻害は観察されなかった。また、他の高
分子物質の取り込みにおいてもＨＲＰに対するのと同様
の効果が観察された。さらに、蛍光標識化デキストラン
を予め取り込ませた細胞を塩化リチウムを含む培養液で
処理すると、対照（塩化リチウム無添加）の細胞では蛍
光が核周辺に密集する膜小胞に認められたのに対し、塩
化リチウム処理細胞では膜小胞が細胞全体に分散してい
た。一方、受容体に特異的に結合して細胞内に取り込ま
れるトランスフェリンを標識化して取り込ませた細胞の
場合、対照細胞では細長い標識膜器官が観察されたのに
対し、塩化リチウム処理細胞では膜器官が細断小胞化し
ているのが認められた。 実施例２ ヒト培養細胞株ＨＴ１０８０を実施例１と同様に培養
し、その培養液に１Ｍ塩化リチウムを図２に示した各終
濃度で添加した。塩化リチウムの添加から１時間後、培
養液にＨＲＰを１ｍｇ／ｍｌの濃度で添加し、その２０
分後に新しい培養液で細胞を洗浄し、細胞に取り込まれ
たＨＲＰの酵素活性を測定した。
【００１２】結果は、図２に示した通りである。この図
２は、図１と同様にＨＲＰ活性の測定値を規格化し、そ
れを塩化リチウム無添加の活性値と比較した結果を示
す。この図２から明らかなように、細胞のエンドサイト
ーシスは塩化リチウムの添加量に依存して低下し、その
効果は１０ｍＭ以上で生じることが確認された。 実施例３ ヒト培養細胞株ＨＴ１０８０を実施例１と同様に培養
し、その培養液に１Ｍ塩化リチウムを終濃度５０ｍＭの
割合で添加した。塩化リチウムの添加から３時間後、新
鮮な培養液で細胞を３度洗浄し、洗浄から図３に示した
時間ののち培養液にＨＲＰを１ｍｇ／ｍｌの濃度で添加
し、その２０分後に細胞に取り込まれたＨＲＰの酵素活
性を測定した。
２は、図１と同様にＨＲＰ活性の測定値を規格化し、そ
れを塩化リチウム無添加の活性値と比較した結果を示
す。この図２から明らかなように、細胞のエンドサイト
ーシスは塩化リチウムの添加量に依存して低下し、その
効果は１０ｍＭ以上で生じることが確認された。 実施例３ ヒト培養細胞株ＨＴ１０８０を実施例１と同様に培養
し、その培養液に１Ｍ塩化リチウムを終濃度５０ｍＭの
割合で添加した。塩化リチウムの添加から３時間後、新
鮮な培養液で細胞を３度洗浄し、洗浄から図３に示した
時間ののち培養液にＨＲＰを１ｍｇ／ｍｌの濃度で添加
し、その２０分後に細胞に取り込まれたＨＲＰの酵素活
性を測定した。
【００１３】結果は、図３に示した通りである。この図
３は、図１と同様にＨＲＰ活性の測定値を規格化し、そ
れを細胞洗浄直後（時間０）の活性値と比較した結果を
示す。この図３から明らかなように、塩化リチウムの添
加によって低下したエンドサイトーシスは、塩化リチウ
ムの除去から経時的に回復し、４時間以降はほぼもとの
水準に達することが確認された。 実施例４ ヒト培養細胞株ＨＴ１０８０を直径３ｃｍのプラスティ
ックディシュで常法に従って培養し、その培地であるダ
ルベッコ変法ＭＥＭ培養液にウォートマンニン終濃度５
０ｎＭの割合で添加した。ウォートマンニンの添加後、
図４の横軸上段に示した時間で培養液にＨＲＰを１ｍｇ
／ｍｌの濃度で添加し、その１０分後に新しい培養液で
細胞を洗浄し、細胞に取り込まれたＨＲＰの酵素活性を
測定した。
３は、図１と同様にＨＲＰ活性の測定値を規格化し、そ
れを細胞洗浄直後（時間０）の活性値と比較した結果を
示す。この図３から明らかなように、塩化リチウムの添
加によって低下したエンドサイトーシスは、塩化リチウ
ムの除去から経時的に回復し、４時間以降はほぼもとの
水準に達することが確認された。 実施例４ ヒト培養細胞株ＨＴ１０８０を直径３ｃｍのプラスティ
ックディシュで常法に従って培養し、その培地であるダ
ルベッコ変法ＭＥＭ培養液にウォートマンニン終濃度５
０ｎＭの割合で添加した。ウォートマンニンの添加後、
図４の横軸上段に示した時間で培養液にＨＲＰを１ｍｇ
／ｍｌの濃度で添加し、その１０分後に新しい培養液で
細胞を洗浄し、細胞に取り込まれたＨＲＰの酵素活性を
測定した。
【００１４】結果は、図４に示した通りである。この図
４は、ＨＲＰ活性の測定値を、細胞数を反映する細胞タ
ンパク質量にて規格化し、それをウォートマンニン無添
加（時間Ｃ）の活性値と比較した結果を示す。また、横
軸下段は細胞がウォートマンニンと接触した時間を示
す。この図４から明らかなように、細胞のＨＲＰ取り込
み（エンドサイトーシス）はウォートマンニンの添加に
よって速やかに抑制され、１０分間の接触で対照の３５
％まで低下した。
４は、ＨＲＰ活性の測定値を、細胞数を反映する細胞タ
ンパク質量にて規格化し、それをウォートマンニン無添
加（時間Ｃ）の活性値と比較した結果を示す。また、横
軸下段は細胞がウォートマンニンと接触した時間を示
す。この図４から明らかなように、細胞のＨＲＰ取り込
み（エンドサイトーシス）はウォートマンニンの添加に
よって速やかに抑制され、１０分間の接触で対照の３５
％まで低下した。
【００１５】なお、５０ｎＭウォートマンニンの添加に
よる細胞損傷や増殖阻害は観察されなかった。また、他
の高分子物質の取り込みにおいてもＨＲＰに対するのと
同様の効果が観察された。さらに、蛍光標識化デキスト
ランを予め取り込ませた細胞を５０ｎＭウォートマンニ
ンを含む培養液で処理すると、対照の細胞では蛍光が核
周辺に密集する膜小胞に認められたのに対し、ウォート
マンニン処理細胞では膜小胞が細胞全体に分散してい
た。一方、受容体に特異的に結合して細胞内に取り込ま
れるトランスフェリンを標識化して取り込ませた細胞の
場合、対照細胞では細長い標識膜器官が観察されたのに
対し、ウォートマンニン処理細胞では膜器官が小胞化し
ているのが認められた。 実施例５ ヒト培養細胞株ＨＴ１０８０を実施例４と同様に培養
し、その培養液にウォートマンニンを図５に示した各終
濃度で添加した。ウォートマンニンの添加から１時間
後、培養液にＨＲＰを１ｍｇ／ｍｌの濃度で添加し、そ
の２０分後に新しい培養液で細胞を洗浄し、細胞に取り
込まれたＨＲＰの酵素活性を測定した。
よる細胞損傷や増殖阻害は観察されなかった。また、他
の高分子物質の取り込みにおいてもＨＲＰに対するのと
同様の効果が観察された。さらに、蛍光標識化デキスト
ランを予め取り込ませた細胞を５０ｎＭウォートマンニ
ンを含む培養液で処理すると、対照の細胞では蛍光が核
周辺に密集する膜小胞に認められたのに対し、ウォート
マンニン処理細胞では膜小胞が細胞全体に分散してい
た。一方、受容体に特異的に結合して細胞内に取り込ま
れるトランスフェリンを標識化して取り込ませた細胞の
場合、対照細胞では細長い標識膜器官が観察されたのに
対し、ウォートマンニン処理細胞では膜器官が小胞化し
ているのが認められた。 実施例５ ヒト培養細胞株ＨＴ１０８０を実施例４と同様に培養
し、その培養液にウォートマンニンを図５に示した各終
濃度で添加した。ウォートマンニンの添加から１時間
後、培養液にＨＲＰを１ｍｇ／ｍｌの濃度で添加し、そ
の２０分後に新しい培養液で細胞を洗浄し、細胞に取り
込まれたＨＲＰの酵素活性を測定した。
【００１６】結果は、図５に示した通りである。この図
５は、図４と同様にＨＲＰ活性の測定値を規格化し、そ
れをウォートマンニン無添加の活性値と比較した結果を
示す。この図５から明らかなように、細胞のエンドサイ
トーシスの低下は、２〜３ｎＭ以上のウォートマンニン
添加で生じることが確認された。 実施例６ ヒト培養細胞株ＨＴ１０８０を実施例４と同様に培養
し、その培養液にウォートマンニンを終濃度５０ｎＭの
割合で添加した。ウォートマンニンの添加から１時間
後、新鮮な培養液で細胞を３度洗浄し、洗浄から図６に
示した時間ののち培養液にＨＲＰを１ｍｇ／ｍｌの濃度
で添加し、その２０分後に細胞に取り込まれたＨＲＰの
酵素活性を測定した。
５は、図４と同様にＨＲＰ活性の測定値を規格化し、そ
れをウォートマンニン無添加の活性値と比較した結果を
示す。この図５から明らかなように、細胞のエンドサイ
トーシスの低下は、２〜３ｎＭ以上のウォートマンニン
添加で生じることが確認された。 実施例６ ヒト培養細胞株ＨＴ１０８０を実施例４と同様に培養
し、その培養液にウォートマンニンを終濃度５０ｎＭの
割合で添加した。ウォートマンニンの添加から１時間
後、新鮮な培養液で細胞を３度洗浄し、洗浄から図６に
示した時間ののち培養液にＨＲＰを１ｍｇ／ｍｌの濃度
で添加し、その２０分後に細胞に取り込まれたＨＲＰの
酵素活性を測定した。
【００１７】結果は、図６に示した通りである。この図
６は、図４と同様にＨＲＰ活性の測定値を規格化し、そ
れを細胞洗浄直後（時間０）の活性値と比較した結果を
示す。この図６から明らかなように、ウォートマンニン
の添加によって低下にたエンドサイトーシスは、ウォー
トマンニンの除去によってもゆっくりとしか回復せず、
１８時間を要しても８０％の水準にしか達しないことが
が確認された。
６は、図４と同様にＨＲＰ活性の測定値を規格化し、そ
れを細胞洗浄直後（時間０）の活性値と比較した結果を
示す。この図６から明らかなように、ウォートマンニン
の添加によって低下にたエンドサイトーシスは、ウォー
トマンニンの除去によってもゆっくりとしか回復せず、
１８時間を要しても８０％の水準にしか達しないことが
が確認された。
【００１８】
【発明の効果】以上詳しく説明した通り、この発明によ
って、細胞の生存および増殖を損なうことなく、エンド
サイトーシスを選択的に低下もしくは停止することので
きる簡便な方法が提供される。これにより、個体生存の
ための医療技術や有用物質の生物生産を担う細胞利用に
新たな途が拓ける。
って、細胞の生存および増殖を損なうことなく、エンド
サイトーシスを選択的に低下もしくは停止することので
きる簡便な方法が提供される。これにより、個体生存の
ための医療技術や有用物質の生物生産を担う細胞利用に
新たな途が拓ける。
【図１】塩化リチウム添加後のＨＲＰ取り込み量の経時
的変化を示す。
的変化を示す。
【図２】塩化リチウムの添加によるＨＲＰ取り込み量の
量依存的変化を示す。
量依存的変化を示す。
【図３】塩化リチウム添加後のＨＲＰ取り込み量回復の
経時的変化を示す。
経時的変化を示す。
【図４】ウォートマンニン添加後のＨＲＰ取り込み量の
経時的変化を示す。
経時的変化を示す。
【図５】ウォートマンニンの添加によるＨＲＰ取り込み
量の量依存的変化を示す。
量の量依存的変化を示す。
【図６】ウォートマンニン添加後のＨＲＰ取り込み量回
復の経時的変化を示す。
復の経時的変化を示す。
Claims (4)
- 【請求項１】 真核細胞の培養培地に塩化リチウムを添
加し、細胞の細胞外物質取り込み活動を低下もしくは停
止させることを特徴とする細胞活動の制御方法。 - 【請求項２】 塩化リチウムの添加量が１０〜１００ｍ
Ｍである請求項１の細胞活動の制御方法。 - 【請求項３】 真核細胞の培養培地にウォートマンニン
を添加し、細胞の細胞外物質の取り込み活動を低下もし
くは停止させることを特徴とする細胞活動の制御方法。 - 【請求項４】 ウォートマンニンの添加量が２〜２００
ｎＭである請求項３の細胞活動の制御方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6205385A JP2991620B2 (ja) | 1994-08-30 | 1994-08-30 | 細胞活動の制御方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6205385A JP2991620B2 (ja) | 1994-08-30 | 1994-08-30 | 細胞活動の制御方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0866183A true JPH0866183A (ja) | 1996-03-12 |
| JP2991620B2 JP2991620B2 (ja) | 1999-12-20 |
Family
ID=16505953
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6205385A Expired - Fee Related JP2991620B2 (ja) | 1994-08-30 | 1994-08-30 | 細胞活動の制御方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2991620B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001007021A3 (en) * | 1999-07-26 | 2001-12-06 | Applied Research Systems | Process for the improvement of spermatozoa fertilization activity |
| US6924141B2 (en) * | 2000-03-31 | 2005-08-02 | The General Hospital Corporation | Methods of modulating hair growth |
| JP2007501622A (ja) * | 2003-08-13 | 2007-02-01 | サンド・アクチエンゲゼルシヤフト | 組換えポリペプチドを精製するための方法 |
| US7476512B2 (en) | 2004-02-27 | 2009-01-13 | The General Hospital Corporation | Methods of identifying dermal papilla cells |
-
1994
- 1994-08-30 JP JP6205385A patent/JP2991620B2/ja not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| WO2001007021A3 (en) * | 1999-07-26 | 2001-12-06 | Applied Research Systems | Process for the improvement of spermatozoa fertilization activity |
| US6924141B2 (en) * | 2000-03-31 | 2005-08-02 | The General Hospital Corporation | Methods of modulating hair growth |
| US7175842B2 (en) | 2000-03-31 | 2007-02-13 | The General Hospital Corporation | Methods of modulating hair growth |
| US7985587B2 (en) | 2000-03-31 | 2011-07-26 | The General Hospital Corporation | Methods of culturing dermal papilla cells |
| JP2007501622A (ja) * | 2003-08-13 | 2007-02-01 | サンド・アクチエンゲゼルシヤフト | 組換えポリペプチドを精製するための方法 |
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| US7981629B2 (en) | 2004-02-27 | 2011-07-19 | The General Hospital Corporation | Methods of isolating dermal papilla cells |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP2991620B2 (ja) | 1999-12-20 |
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