JPH08510207A

JPH08510207A - ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターフラグメント

Info

Publication number: JPH08510207A
Application number: JP6522361A
Authority: JP
Inventors: ヒビノ，トシヒコ; タカハシ，タダヒト; ホリイ，イズミ; エフ．ゲーティンク，ポール
Original assignee: Shiseido Co Ltd
Current assignee: Shiseido Co Ltd
Priority date: 1993-04-02
Filing date: 1994-03-30
Publication date: 1996-10-29
Also published as: JPH11514352A; WO1994022464A1; EP0857174A4; AU3951995A; CA2159637A1; EP0692968A1; US6120765A; AU6418794A; EP0692968A4; EP0857174A1

Abstract

(57)【要約】ｕＰＡのペプチド断片。

Description

【発明の詳細な説明】ウロキナーセプラスミノーゲンアクチベーターフラグメント発明の背景この発明は、一般に、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーター及びその断片に関するものである。２つの型のプラスミノーゲンアクチベーター、組織型プラスミノーゲンアクチベーター（ｔＰＡ）及びウロキナーゼ即ちウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーター（ｕＰＡ）が知られている。ｔＰＡは、フィブリンクロットに直接結合してプラスミノーゲンのプラスミンへの変換を活性化する。ｕＰＡは、全身的活性を有するセリンプロテアーセである。それは、多くの細胞型において見出されるレセプターに結合して、その細胞表面でプラスミノーゲンをプラスミンに変換する。発明の要約ｕＰＡは、約５５Ｋｄの分子であって、（Ｎ末端から始まる）ＥＧＦ様ドメイン（ＥＧＦ）（１〜４５残基に対応）クリングルドメイン（４６〜１５７残基に対応）及びトリプシン様プロテアーセドメイン（１５８〜４１１残基に対応）からなる。ＥＧＦ及びクリングルドメインは、アミノ末端断片（ＡＦＦ）を形成し、それはヒトケラチノサイトに対して有糸分裂誘発性である。ｕＰＡは、そのＥＧＦ様ドメインによって、多くの細胞型において発現されている特異的膜レセプター（ｕＰＡＲ）に結合する。ＥＧＦ様ドメインは、しばしば、成長因子ドメイン（ＧＦＤ）として言及される。ここで用いるアミノ酸残基の番号付けは、ｕＰＡのＮ末端の残基１から始まる。本発明者は、ｕＰＡのＥＧＦ様ドメインの６アミノ酸程の少数のアミノ酸を含むペプチドが有糸分裂誘発性を有し且つウロキナーセプラスミノーゲンアクチベーターレセプター（ｕＰＡＲ）に結合すると考えられることを発見した。一般に、この発明は、ｕＰＡペプチド好ましくは精製したペプチド（ｕＰＡＲを有する細胞例えば上皮細胞、ケラチノサイトに結合するか又はそれらにおける有糸分裂性を誘導する能力の何れか若しくは両方を有する）であって、本質的に、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターの成長因子ドメイン例えば１６〜３３残基（一層好ましくは、１４〜３３残基）からの５より多く１５より少ない（一層好ましくは、５より多く１９より少ない）隣接したアミノ酸残基からなるか又はそれらを含むペプチドを特徴とする。好適具体例において、ペプチドは、５より多く１３より少ない（一層好ましくは、５より多く１６より少ない）隣接したアミノ酸残基を含み、該残基は、成長因子ドメインを含む；ペプチドは、アミノ酸配列Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（SEQ ID N O:６）を含む；ペプチドは、５より多く１０より少ない隣接したアミノ酸残基を含み、該残基はドメイン成長因子を含む；ペプチドは、アミノ酸配列Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（SEQ ID NO: １）を含む；ペプチドは、ドメイン成長因子の６個の隣接したアミノ酸残基を含む；ペプチドは、アミノ酸配列Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ（SEQ ID NO:２）を含む。好適具体例において、ペプチドは、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性である；ペプチドは、ｕＰＡＲに結合するが、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性ではない。他の面において、この発明は、本質的に、ｕＰＡのアミノ末端フラグメント、例えば、成長因子ドメイン、例えば１５〜３０残基由来の５より多く１２より少ない隣接アミノ酸残基からなり又はそれらを含むｕＰＡペプチド好ましくは精製したペプチド（ｕＰＡＲを有する細胞例えば上皮細胞、ケラチノサイトに結合するか又は有糸分裂誘発性を誘導する能力の何れか若しくは両方を有する）を含む。好適具体例において、ペプチドは、５より多く１０より少ない隣接アミノ酸残基を含み、該残基はウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターのアミノ末端フラグメントを含む；ペプチドは、アミノ酸配列Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ −Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（SEQ ID NO:１）を含む；ペプチドは、６個の隣接アミノ酸残基を含み、該残基はウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターのアミノ末端フラグメントを含む；ペプチドは、アミノ酸配列Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ（SEQ ID NO:２）を含む。好適具体例において、ペプチドは、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性である；ペプチドは、ｕＰＡＲに結合するが、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性でない。他の面において、この発明は、好ましくは精製した調製物として、ペプチドＡｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ（SE Q ID NO:４）を含む。他の面において、この発明は、２３位のアミノ酸残基がＬ−リジン以外のアミノ酸であるｕＰＡペプチド（好ましくは、精製したペプチド）を特徴とする。好適具体例において、２３位のアミノ酸残基は、生理的ｐＨ例えばｐＨ７において正味の正電荷を有する側鎖を有するアミノ酸である；２３位のアミノ酸残基は、リジンの側鎖よりも一層正に帯電した側鎖を有するアミノ酸である；２３位のアミノ酸は残基は、塩基性アミノ酸である；２３位のアミノ酸残基は、アルギニン、ヒスチジン又は正に帯電した若しくは塩基性の非天然アミノ酸の何れかである。他の好適具体例において、２３位のアミノ酸残基は、生理的ｐＨ例えばｐＨ７において正味の負の電荷を有する側鎖を有するアミノ酸である；２３位のアミノ酸残基は、リジンの側鎖よりも一層負に帯電した側鎖を有するアミノ酸である；２３位のアミノ酸残基は、酸性アミノ酸である；２３位のアミノ酸残基は、アスパラギン酸、グルタミン酸又は負に帯電した若しくは酸性の非天然アミノ酸の何れかである。好適具体例において、ペプチドは、完全長のｕＰＡペプチドである。他の面において、この発明は、ｕＰＡペプチド（好ましくは、精製したペプチド）を特徴とし、該ペプチドは下記式の配列を含む：ｎ−Ｒ²−Ａｓｎ−Ｒ¹−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｒ³−ｃ（式中、Ｒ¹は、Ｌ−リジン以外のアミノ酸残基であり、Ｒ²は、１〜２１残基長の配列であって、そのカルボキシ末端としてｕＰＡのＳｅｒ²¹を有し且つＳｅｒ²¹を含めてｕＰＡのＮ末端方向で１〜２１アミノ酸残基に及び、そしてＲ³は、１〜２５残基長の配列であって、そのアミノ末端としてｕＰＡのＳｅｒ²⁶を有し且つＳｅｒ²⁶を含めてｕＰＡのＣ末端方向で１〜２５アミノ酸残基に及び、ｃは、このペプチドのカルボキシ末端方向を示し且つｎは、このペプチドのアミノ末端方向を示す）。好適具体例において、Ｒ¹は生理的ｐＨ例えばｐＨ７で正味の正の電荷を有する側鎖を有するアミノ酸である；Ｒ¹は塩基性アミノ酸である；Ｒ¹はアルギニン、ヒスチジン又は正に帯電した若しくは非天然アミノ酸の何れかである。好適具体例において、Ｒ²は次の何れかである：ｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ− Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:９）；ｎ−Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ− Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１０）；ｎ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− ｃ（SEQ ID NO:１１）；ｎ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１２）；ｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１３）；ｎ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１４）；ｎ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１５）；ｎ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ；ｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ；又はｎ−Ｓｅｒ−ｃ。好適具体例において、Ｒ³は次の何れかである：ｎ−Ｓｅｒ−ｃ；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−ｃ；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−ｃ；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−ｃ（SEQ ID NO:１６）；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−ｃ（SEQ ID NO:１７）；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−ｃ（SEQ ID NO:１８）；又はｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）。好適具体例において、Ｒ²はｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:９）であり且つＲ³ は、ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）である；Ｒ²は、ｎ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ− Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１１）；であり、且つＲ³は、ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）である；Ｒ²は、ｎ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１５）であり且つＲ³はｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ− ｃ（SEQ ID NO:１９）である；Ｒ²は、ｎ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１５）であり且つＲ³はｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−ｃ（SEQ ID NO:１６）である；Ｒ²は、ｎ−Ｓｅｒ−ｃであり、且つＲ³はｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−ｃ（SEQ ID NO:１６）である；或はＲ²は、ｎ−Ｓｅｒ−ｃであり、且つＲ³はｎ−Ｓｅｒ−ｃである；Ｒ¹はＡｒｇである。他の面において、この発明は、ｕＰＡペプチド、好ましくは精製したペプチドを特徴とし、該ペプチドは、次式の配列を含む：ｎ−Ｒ²−Ａｓｎ−Ｒ¹−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｒ³−ｃ（式中、Ｒ¹はＬ−リジン以外のアミノ酸残基であり、Ｒ²は１〜２１残基長の配列であって、そのカルボキシ末端としてｕＰＡのＳｅｒ²¹を有し且つＳｅｒ²¹を含めてｕＰＡのＮ末端方向で１〜２１アミノ酸残基に及び、そしてＲ³は１〜２５残基長の配列であって、そのアミノ末端としてｕＰＡのＳｅｒ²⁶を有し且つＳｅｒ²⁶を含めてｕＰＡのＣ末端方向で１〜２５アミノ酸残基に及び、ｃはこのペプチドのカルボキシ末端方向を示し且つｎはこのペプチドのアミノ末端方向を示す）。好適具体例において、Ｒ¹は、生理的ｐＨ例えばｐＨ７において正味の負の電荷を有する側鎖を有するアミノ酸である；Ｒ¹は、リジンの側鎖よりも一層負に帯電した側鎖を有するアミノ酸である；Ｒ¹は、酸性アミノ酸である；Ｒ¹は、アスパラギン酸、グルタミン酸、又は負に帯電した若しくは非天然アミノ酸の何れかである。好適具体例において、Ｒ²は次の何れかである：ｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ− Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:９）；ｎ−Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ− Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１０）；ｎ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− ｃ（SEQ ID NO:１１）；ｎ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１２）；ｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO：１３）；ｎ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１４）；ｎ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１５）；ｎ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ；ｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ；又はｎ−Ｓｅｒ−ｃ。好適具体例において、Ｒ³は次の何れかである：ｎ−Ｓｅｒ−ｃ；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−ｃ；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−ｃ；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−ｃ（SEQ ID NO:１６）；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−ｃ（SEQ ID NO:１７）；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−ｃ（SEQ ID NO:１８）；又はｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）。好適具体例において、Ｒ²はｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:９）であり且つＲ³ はｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）である；Ｒ²はｎ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID N0:）であり且つＲ³はｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ −Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）である；Ｒ²はｎ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１５）であり且つＲ³はｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）である；Ｒ²はｎ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１５）であり且つＲ³はｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−ｃ（SEQ ID NO:１６）である；Ｒ²はｎ−Ｓｅｒ−ｃであり且つＲ³はｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ −ｃ（SEQ ID NO:１６）である；或はＲ²はｎ−Ｓｅｒ−ｃであり且つＲ³はｎ−Ｓｅｒ−ｃである；Ｒ¹はグルタミン酸である。他の面において、この発明は、この発明のｕＰＡペプチドと製薬上許容し得るキャリアーを含む治療用組成物を特徴とする。好適具体例において、ペプチドはｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性である；ペプチドはｕＰＡＲを有する細胞における有糸分裂誘発活性を阻害する；ペプチドはｕＰＡＲに結合するが、ｕＰＡＲを有する細胞対して有糸分裂誘発性でない。他の面において、この発明は、例えばウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターレセプターを発現している細胞例えば上皮細胞、ケラチノサイト若しくは造骨細胞の成長若しくは増殖を例えば促進し若しくは阻害する制御方法を特徴とする。この方法は、細胞に成長制御量のこの発明のｕＰＡペプチドを投与することを含む。好適具体例において、ペプチドは、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性である；ペプチドは、ｕＰＡＲを有する細胞における有糸分裂誘発活性を阻害する；ペプチドはｕＰＡＲに結合するが、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性でない。好適具体例において、ｕＰＡペプチドは細胞成長又は増殖を促進し、更に、この方法は、ｕＰＡペプチド以外の成長促進化合物を投与することを含む。この化合物は、例えば、ペプチド成長因子例えは上皮成長因子若しくはインシュリン、複雑な混合物若しくは抽出物例えば下垂体抽出物、又は非ペプチド化合物例えばヒドロコーチゾンであってよい。他の面において、この発明は、外傷、例えば、病気（例えば、上皮組織の潰瘍を生成する病気）から生じた外傷、外科的切開、怪我（例えば、切断等の機械的怪我）若しくは火傷を受けた患者の上皮組織の成長若しくは増殖を制御する方法例えば促進し若しくは阻害する方法を特徴とする。この方法は、組織に成長制御量のこの発明のｕＰＡペプチドを投与することを含む。好適具体例において、ペプチドはｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性である；ペプチドはｕＰＡＲを有する細胞における有糸分裂誘発活性を阻害する；ペプチドはｕＰＡＲに結合するが、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性でない。好適具体例において、ｕＰＡペプチドは細胞成長若しくは増殖を促進し、更に、この方法は、ｕＰＡペプチド以外の成長促進化合物を投与することを含む。この化合物は、例えば、ペプチド成長因子例えば上皮成長因子若しくはインシュリン、複雑な混合物若しくは抽出物例えば下垂体抽出物、又は非ペプチド化合物例えばヒドロコーチゾンであってよい。他の面において、この発明は、例えば、イン・ビトロにおける細胞例えば細胞のシート例えば上皮細胞（例えば、ケラチノサイト）のシートの成長を、例えば促進し若しくは阻害する制御方法を特徴とする。この方法は、有効量のこの発明のｕＰＡペプチドの存在下で細胞を培養することを含む。好適具体例において、ペプチドはｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性である；ペプチドはｕＰＡＲを有する細胞における有糸分裂誘発活性を阻害する；ペプチドはｕＰＡＲに結合するが、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性でない。好適具体例において、ｕＰＡペプチドは細胞成長若しくは増殖を促進し、更に、この方法は、ｕＰＡペプチド以外の成長促進化合物を投与することを含む。この化合物は、例えば、ペプチド成長因子例えば上皮成長因子若しくはインシュリン、複雑な混合物若しくは抽出物例えば下垂体抽出物、又は非ペプチド化合物例えばヒドロコーチゾンであってよい。他の面において、この発明は、例えば火傷、怪我又は外科処置により生じた患者の表皮剥脱された皮膚領域を治療する方法を特徴とする。この方法は、この発明により生成した細胞例えば上皮細胞（例えば上皮細胞のシート）を適用して、それらの細胞を患者の下にある真皮へ有効に付着させることを含む。この方法は、ｕＰＡペプチド例えばこの発明の成長促進ペプチドを、このシートを患者に適用する前若しくは後に投与することを含むことが出来る。好適具体例において、ｕＰＡペプチドは細胞成長若しくは増殖を促進し、更に、この方法は、ｕＰＡペプチド以外の成長促進化合物を投与することを含む。この化合物は、例えば、ペプチド成長因子例えば上皮成長因子若しくはインシュリン、複雑な混合物若しくは抽出物例えば下垂体抽出物、又は非ペプチド化合物例えばヒドロコーチゾンであってよい。他の面において、この発明は、ｕＰＡの（例えば、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターの有糸分裂誘発活性の）アンタゴニストを同定する方法を含む。この方法は、細胞例えばｕＰＡＲを有する細胞例えば上皮細胞をこの発明のｕＰＡペプチドの存在下で培養すること；細胞を候補化合物と接触させること；及び候補化合物の存在下での有糸分裂誘発活性のレベルを候補化合物の不在における有糸分裂誘発活性のレベルと比較することを含み、化合物の存在下での活性の一層低いレベルはその化合物がアンタゴニストであることを示している。候補化合物は、例えは、抗体好ましくはモノクローナル抗体例えばｕＰＡＲ又はペプチドに対する抗体であってよく、有糸分裂誘発活性は、例えば［³Ｈ］−チミジン取り込みのレベルにより測定することが出来る。他の面において、この発明は、ｕＰＡの（例えば、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターの有糸分裂誘発活性の）アゴニストを同定する方法を含む。この方法は、細胞例えばｕＰＡＲを有する細胞例えば上皮細胞をｕＰＡペプチド（例えば、有糸分裂誘発活性を阻害するｕＰＡペプチド）の存在下で培養すること、それらの細胞を候補化合物と接触させること；及び候補化合物の存在下での有糸分裂誘発活性のレベルを候補化合物の不在における有糸分裂誘発活性のレベルと比較することを含み、化合物の存在下での活性の一層高いレベルはその化合物がアゴニストであることを示している。他の面において、この発明は、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターとウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターレセプターとの相互作用を阻害する方法を特徴とする。この方法は、レセプターをこの発明のｕＰＡペプチドと接触させて相互作用を阻害することを含む。好適具体例において、ペプチドは、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性である；ペプチドは、ｕＰＡＲを有する細胞における有糸分裂誘発活性を阻害する；ペプチドは、ｕＰＡＲに結合するが、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性でない。他の面において、この発明は、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターがｕＰＡＲを発現する細胞に結合するのを阻害する方法を特徴とする。この方法は、細胞をこの発明のｕＰＡペプチドと接触させて相互作用を阻害することを含む。好適具体例において、ペプチドは、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性である；ペプチドはｕＰＡＲを有する細胞における有糸分裂誘発活性を阻害する；ペプチドは、ｕＰＡＲに結合するが、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性でない。他の面において、この発明は、細胞例えばケラチノサイトの成長段階を測定する方法を特徴とし、細胞により発現されたウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターのレベルを（例えば、抗体又は核酸プローブの利用により）測定することを含む。他の面において、この発明は、病気、例えば、望ましくない細胞の増殖例えばｕＰＡＲを有する細胞の望ましくない増殖を特徴とする病気、例えば、上皮の病気（例えば、乾癬又は癌）を有する動物を治療する方法を特徴とする。この方法は、病気の危険を有する動物例えばヒトを同定すること；及び治療上有効な量のこの発明のｕＰＡペプチドをその動物に投与することを含む。好適具体例において、ペプチドは、ｕＰＡＲを有する細胞の有糸分裂誘発性を阻害する；ペプチドはｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性である；ペプチドはｕＰＡＲに結合するが、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性でない。好適具体例において、ｕＰＡペプチドは、細胞成長若しくは増殖を促進し、更に、この方法は、ｕＰＡペプチド以外の成長促進化合物を投与することを含む。この化合物は、例えば、ペプチド成長因子例えば上皮成長因子若しくはインシュリン、複雑な混合物若しくは抽出物例えば下垂体抽出物、又は非ペプチド化合物例えばヒドロコーチゾンであってよい。他の面において、この発明は、ｕＰＡＲを有する細胞例えばケラチノサイト細胞を有糸分裂誘発的に刺激する方法を特徴とし、細胞を有効量のこの発明のｕＰＡペプチド、例えばＧＦＤからの少なくとも６個の隣接する残基を有するｕＰＡのＡＦＦの断片と接触させることを含む。他の面において、この発明は、ｕＰＡＲを有する細胞例えばケラチノサイト細胞における有糸分裂誘発性を阻害する方法を特徴とし、細胞を有効量のこの発明のｕＰＡペプチド、例えばＧＦＤからの少なくとも６個の隣接する残基を有するｕＰＡのＡＦＦの断片と接触させることを含む。他の面において、この発明は、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターとウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターレセプターとのケラチノサイト上での相互作用を阻害する方法を特徴とし、レセプターをウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターレセプターに対する抗体と接触させて相互作用を阻害することを含む。他の面において、この発明は、ｕＰＡＲを有する細胞例えば真皮の細胞例えばケラチノサイト細胞の成長若しくは増殖を阻害する方法を特徴とし、細胞をウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターレセプターに対する抗体と接触させて成長を阻害することを含む。他の面において、この発明は、化合物例えば毒素例えばペプチドトキシンをｕＰＡＲを有する細胞まで送達する方法を特徴とし、共有結合例えばペプチド結合により少なくとも６残基長のｕＰＡのＡＦＦの断片例えばここに開示したｕＰＡペプチドに結合した化合物を含むキメラ分子を供給することを含む。他の面において、この発明は、ｕＰＡＲを有する細胞を含む細胞外蛋白質マトリックス例えば基底膜の蛋白質分解による破壊を阻止する方法を特徴とし、ｕＰＡＲを有する細胞をこの発明のｕＰＡペプチドと接触させることを含む。好適具体例において、ｕＰＡペプチドは、細胞成長若しくは増殖を促進し、更に、この方法は、ｕＰＡペプチド以外の成長促進化合物を投与することを含む。この化合物は、ペプチド成長因子例えば上皮成長因子若しくはインシュリン、複雑な混合物若しくは抽出物例えば下垂体抽出物、又は非ペプチド化合物例えばヒドロコーチゾンであってよい。好適具体例において、ペプチドは、ｕＰＡＲを有する細胞における有糸分裂誘発性を阻害する；ペプチドは、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性である；ペプチドは、ｕＰＡＲに結合するが、ｕＰＡＲを有する細胞に対して有糸分裂誘発性でない。他の面において、この発明は、この発明のｕＰＡペプチドをコードする配列を含む精製したＤＮＡ；この発明のペプチドをコードするＤＮＡ配列を含むベクター；精製ＤＮＡを含む細胞例えばペプチドを発現することの出来る細胞；それぞれが単離したＤＮＡを含む本質的に均一な細胞集団；組換えにより生成したこの発明のペプチド；及び細胞を培地中で培養してこの発明のペプチドを発現させることを含むこの発明のペプチドの製造方法を特徴とする。この発明は又、リジン及びリジンのアナログがｕＰＡＲを有する細胞の有糸分裂誘発性を刺激することをも発見した。従って、他の面において、この発明は、イン・ビトロ若しくはイン・ビボでの細胞例えばｕＰＡＲを有する細胞例えばケラチノサイトの成長を制御する方法を特徴とし、細胞を、例えばその細胞に局所的に投与した成長制御量のリジン若しくはリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸若しくはトラネクサミン酸（tranexamic acid）（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸と接触させることを含む。好適具体例において、リジン又はそのアナログを上記の細胞を培養するために用いる成長培地におけるよりも高濃度で供給する；リジンをウシ胎児若しくはウシ血清中に見出されるより高濃度で供給する。他の好適具体例において、細胞は動物細胞例えばヒト細胞例えばケラチノサイトである；リジン又はそのアナログをイン・シトゥーで即ち細胞が動物の一部であるときに細胞と接触させ且つ細胞表面におけるリジン又はそのアナログの濃度は、リジン又は動物に対して有害作用を持たないそのアナログの経口、静脈又はその他の全身投与により細胞表面において達成し得る最大濃度よりも高い；リジン又はアナログの細胞表面における濃度は、リジン又はそのアナログを栄養目的で経口、静脈又はその他の全身投与により投与したときに細胞表面で達成し得る最大濃度よりも高い；リジン又はそのアナログを、経口、静脈又はその他の全身投与により動物に有害な作用を与えずに投与し得る最大の濃度、量又は投薬量よりも高い濃度、量又は投薬量で動物に投与する；リジン又はそのアナログを動物に、栄養目的でリジン又はそのアナログを経口、静脈又はその他の全身投与により投与した最大の濃度、量又は投薬量よりも高い濃度、量又は投薬量で投与する；十分なリジンを投与して、真皮におけるリジンの濃度が、正常個体又は静脈栄養摂取を受けている個体の真皮におけるリジンの濃度よりも少なくとも２０、５０、８０、２００又は４００％高くなるようにする。他の面において、この発明は、外傷を受けた患者の上皮組織の成長を制御する方法を特徴とし、成長制御量のリジン又はリジンのアナログ例えばエプシロン− アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸を例えば外傷を受けた組織へ投与（例えば、局所的投与）することを含む。好適具体例において、リジン又はそのアナログの治療される組織の細胞表面における濃度は、リジン又はそのアナログの経口、静脈又はその他の全身投与により治療される組織の細胞表面において動物に有害作用を与えずに達成され得る最高濃度よりも一層高い；治療される組織の細胞表面におけるリジン又はアナログの濃度は、栄養目的でリジン又はそのアナログを経口、静脈又は他の全身投与により投与したときに治療される組織の細胞表面で達成される最高濃度より一層高い；リジン又はそのアナログを、経口、静脈又はその他の全身投与により動物に有害な作用を与えずに投与し得る最大の濃度、量又は投薬量よりも高い濃度、量又は投薬量で動物に投与する；リジン又はそのアナログを動物に、栄養目的でリジン又はそのアナログを経口、静脈又はその他の全身投与により投与した最大の濃度、量又は投薬量よりも高い濃度、量又は投薬量で投与する；十分なリジンを投与して、真皮におけるリジンの濃度が、正常個体又は静脈栄養摂取を受けている個体の真皮におけるリジンの濃度よりも少なくとも２０、５０、８０、２００又は４００％高くなるようにする。他の面において、この発明は、イン・ビトロでの細胞例えばｕＰＡＲを有する細胞例えば上皮細胞例えばケラチノサイトの成長を制御する方法を特徴とし、細胞を、リジン又はリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸の存在下で培養することを含む。好適具体例において、リジン又はそのアナログを、細胞を培養し、洗い又は別の方法で処理するために用いる培地中の濃度より高濃度で供給する；リジンは、胎児又は仔ウシ血清中で見出されるよりも高濃度で存在する。他の面において、この方法は、患者の表皮剥脱された皮膚領域を治療する方法を特徴とし、ここに記載した方法により生成した細胞例えばｕＰＡＲを有する細胞例えば上皮細胞例えばケラチノサイトを適用して細胞を下の真皮に有効に付着させることを含む。好適具体例において、この方法は、更に、リジン又はそのアナログを細胞とそれらを患者に適用した後に接触させることを含む；リジン又はアナログのそれらの細胞表面における濃度は、リジン又はそのアナログの経口、静脈又はその他の全身投与により患者に有害作用を与えずに細胞表面で達成し得る最高濃度よりも高い；リジン又はそのアナログの細胞表面における濃度は、栄養目的でリジン又はそのアナログを経口、静脈又はその他の全身投与により投与したときに細胞表面において達成される最高濃度よりも高い；リジン又はそのアナログを、経口、静脈又はその他の全身投与により患者に有害な作用を与えずに投与し得る最大の濃度、量又は投薬量よりも高い濃度、量又は投薬量で患者に投与する；リジン又はそのアナログを患者に、栄養目的でリジン又はそのアナログを経口、静脈又はその他の全身投与により投与した最大の濃度、量又は投薬量よりも高い濃度、量又は投薬量で投与する；十分なリジンを投与して、真皮におけるリジンの濃度が、正常個体又は静脈栄養摂取を受けている個体の真皮におけるリジンの濃度よりも少なくとも２０、５０、８０、２００又は４００％高くなるようにする。他の面において、この発明は、細胞例えばｕＰＡＲレセプターを有する細胞例えば真皮細胞例えばケラチノサイト（患者の部位例えば病気の部位例えば皮膚病又は怪我の部位に移したもの）の成長を促進する方法を特徴とし、細胞を供給すること、細胞を部位に適用すること及び患者に、例えばその部位への局所的適用により、成長促進量のリジン又はリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸を投与することを含む。好適具体例において、リジン又はそのアナログを上記の細胞を培養するために用いる成長培地において供給するよりも一層高濃度で供給する；リジンを仔ウシ又はウシ血清中で見出されるよりも一層高濃度で供給する。他の好適具体例において、リジン又はそのアナログの細胞表面における濃度は、患者に有害作用を与えずに経口、静脈又はその他の全身投与により細胞表面で達成し得る最高濃度よりも一層高い；リジン又はそのアナログの細胞表面における濃度は、栄養目的でリジン又はそのアナログを経口、静脈又はその他の全身投与により投与したときに細胞表面において達成される最高濃度よりも高い；リジンを、経口、静脈又はその他の全身投与により患者に有害な作用を与えずに投与し得る最大の濃度、量又は投薬量よりも高い濃度、量又は投薬量で患者に投与する；リジン又はそのアナログを患者に、栄養目的でリジン又はそのアナログを経口、静脈又はその他の全身投与により投与した最大の濃度、量又は投薬量よりも高い濃度、量又は投薬量で投与する；十分なリジンを投与して、真皮におけるリジンの濃度が、正常個体又は静脈栄養摂取を受けている個体の真皮におけるリジンの濃度よりも少なくとも２０、５０、８０、２００又は４００％高くなるようにする。他の面において、この発明は、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターの有糸分裂誘発活性のアンタゴニストを同定する方法を特徴とし、ｕＰＡＲを有する細胞をリジン又はリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸の存在下で培養すること、上記の細胞を候補化合物と接触させること及び候補化合物の存在下での有糸分裂誘発活性のレベルを候補化合物の不在における有糸分裂誘発活性のレベルと比較することを含み、化合物の存在下での一層低レベルの上記活性はその化合物がアンタゴニストであることを示している。他の面において、この発明は、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターのアゴニストを同定する方法を特徴とし、ｕＰＡＲを有する細胞をリジン又はリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸の存在下で培養すること、細胞を候補化合物と接触させること及び候補化合物の存在下での有糸分裂誘発活性のレベルを候補化合物の不在における有糸分裂誘発活性のレベルと比較することを含み、化合物の存在下での一層高い活性レベルはその化合物がアゴニストであることを示している。他の面において、この発明は、ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターとウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターレセプターとの相互作用を阻害する方法を特徴とし、レセプターをリジン又はリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸と接触させて相互作用を阻害することを含む。他の面において、この発明は、病気を有する動物を治療する方法を特徴とし、病気の危険にある動物を同定すること及び、例えば、局所的に、治療上有効な量のリジン又はリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸をその動物に投与することを含む。好適具体例において、動物に投与したリジン又はアナログの濃度、量又は投薬量は、動物に有害作用を与えずに、経口、静脈又は全身投与により細胞表面において達成し得る最高濃度よりも一層高い動物のケラチノサイト表面におけるリジン又はそのアナログの濃度を生じる；動物に投与したリジン又はそのアナログの濃度、量又は投薬量は、栄養目的でリジン又はそのアナログを経口、静脈又は他の全身投与により投与したときに細胞表面において達成し得る最高濃度よりも一層高い動物のケラチノサイト表面におけるリジン又はそのアナログの濃度を生じる；十分なリジンを投与して、真皮におけるリジンの濃度が、正常個体又は静脈栄養摂取を受けている個体の真皮におけるリジンの濃度よりも少なくとも２０、５０、８０、２００又は４００％高くなるようにする。他の面において、この発明は、細胞例えばｕＰＡＲを有する細胞例えばケラチノサイトを有糸分裂誘発的に刺激する方法を特徴とし、細胞を有効量のリジン又はリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸と接触させることを含む。好適具体例において、リジン又はそのアナログを上記の細胞を培養するために用いる成長培地中に供給するよりも高濃度で供給する；リジンをウシ胎児又はウシ血清中に見出されるよりも高濃度で供給する。他の面において、この発明は、化合物をｕＰＡＲを有する細胞に送達する方法を特徴とし、リジン又はリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸に結合された化合物を含むキメラ分子を供給することを含む。他の面において、この発明は、ｕＰＡＲを有する細胞を含む細胞外蛋白質マトリックスの蛋白質分解による破壊を阻止する方法を特徴とし、ｕＰＡＲを有する細胞をリジン又はリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸と接触させることを含む。他の面において、この発明は、治療用組成物例えば局所的適用に適した治療用組成物を特徴とし、活性成分としてのリジン又はリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸及び製薬上許容し得るキャリアーを含む。好適具体例において、組成物中のリジン又はアナログの量は、患者へのその組成物の１、２、３、５又は１０回未満の投与が、患者のケラチノサイト表面において、経口、静脈又はその他の全身投与により動物に有害作用を与えずに達成し得る最高濃度よりも一層高いリジン又はそのアナログの濃度を生じ、患者のケラチノサイト表面において、リジン又はそのアナログを栄養目的で経口、静脈又はその他の全身投与により投与したときに細胞表面において達成される最高濃度よりも一層高いリジン又はそのアナログの濃度を生じるのに十分である。実質的に純粋又は精製したＤＮＡとは、この発明のＤＮＡが導かれた生物の天然のゲノム中において直接隣接する両コード鎖配列（即ち５’末端側の配列及び３’末端側の配列）と直接隣接しないＤＮＡである。従って、この用語は、例えば、ベクター、自律的に複製するプラスミッド若しくはウイルス、又は原核生物若しくは真核生物のゲノムＤＮＡ中に取り込まれた組換えＤＮＡ、又は他のＤＮＡ配列とは独立の別個の分子（例えば、ＰＣＲ又は制限エンドヌクレアーゼ処理により生成したｃＤＮＡ又はゲノムＤＮＡ断片）として存在する組換えＤＮＡを含む。それは又、更なるポリペプチド配列をコードするハイブリッド遺伝子の部分である組換えＤＮＡをも含む。相同とは、２つのポリペプチド分子間又は２つの核酸分子間の配列類似性のことをいう。２つの比較される配列の両者におけるある位置が同じ塩基又はアミノ酸モノマー単位で占められる場合、例えば２つのＤＮＡ分子のそれぞれにおけるある位置がアデニンにより占められるならば、それらの分子はその位置において相同である。２つの配列間の相同性は、その２つの配列に共有される一致する又は相同な位置の数の関数である。例えば、２つの配列中の１０個の位置の内の６個が一致し又は相同であるならば、これらの２つの配列は６０％の相同である。例えば、ＤＮＡ配列ATTGCCとTATGGCとは５０％の相同性を共有する。ペプチドの実質的に純粋若しくは精製した調製物とは、そのペプチドが細胞中において天然状態で共存しているペプチド又は蛋白質（或は、合成ｕＰＡペプチドの場合には、完全長ｕＰＡ等、ペプチドが誘導された蛋白質）を実質的に含まない調製物である。本発明者は、ｕＰＡＲに結合する能力及びｕＰＡの有糸分裂誘発活性が９量体（ＧＦＤ２１〜２９）という小さいｕＰＡペプチド（即ち、ＧＦＤのｕＰＡ残基２１〜２９）であってその配列はＳｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（SEQ ID NO:１）であるもの及び６量体（ＧＦＤ２１〜２６）であってその配列はＳｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ（SEQ ID NO:２）であるものと供に保存されていることを見出した。これらのペプチドは、組織出血の副作用を伴わずにケラチノサイトの成長を刺激することが出来る。この発明は、傷ついた組織の修復を、上皮細胞を刺激して成長させそうして傷を修復することにより促進することを可能にする。この発明の小さいサイズのｕＰＡペプチド例えば９量体及び６量体は、小さいペプチド程早く基底層（正常表皮において有糸分裂活性を有する層）まで浸透して一層効果的に上皮細胞を局所的に刺激して成長させるであろうという点において重要である。この発明のペプチド及び方法を用いて、イン・ビトロ又はイン・ビボで上皮のシートの成長を刺激することが出来る。これらの細胞のシートを用いて、例えば、火傷等で広い範囲を表皮剥脱した皮膚を覆うことが出来る。この発明は、上皮シートを一層迅速且つ効果的に生成するために上皮細胞を刺激するだけでなく、一度負傷した組織上に置いた上皮細胞の継続した成長を刺激する方法をも提供する。この発明は、イン・ビトロで成長させて患者に適用した上皮シートの、更に成長して下の真皮に有効に付着するための基底膜成分を生成する能力を増大させるであろう。この発明のｕＰＡペプチドは又、ｕＰＡのｕＰＡＲへの結合をブロックし、従って、ｕＰＡの活性を阻害するのにも有用である。有糸分裂誘発活性を有するｕＰＡペプチド、ｕＰＡＲに結合するが有糸分裂誘発活性を刺激しないｕＰＡペプチド、又は有糸分裂誘発性を阻害するｕＰＡペプチドを用いることが出来る。有糸分裂誘発活性を有するペプチドは、結合して、ｕＰＡの蛋白質分解効果を伴わずに細胞を増殖させるであろう。有糸分裂誘発活性を有しないペプチドはｕＰＡをブロックするが、有糸分裂誘発活性も蛋白質分解活性も示さないであろう。本発明者は又、ｕＰＡのアミノ酸残基２３がｕＰＡペプチドの活性において重要な役割を果たしていることをも発見した。下記するように、増大した有糸分裂誘発活性を有するｕＰＡペプチド及び阻害特性を有するｕＰＡペプチドを、通常２３位に見出されるリジンを置換することによって合成することが出来る。置換したペプチドは、細胞の成長若しくは増殖を阻害し若しくは増大させるために及びレセプター結合の研究に有用である。この発明の他の特徴及び利点は、以下の説明及び請求の範囲から明らかとなろう。詳細な説明先ず、図面を簡単に説明する。図面図１は、ケラチノサイトにおけるＤＮＡ合成に対する種々のｕＰＡペプチドの効果を表す棒グラフである。有糸分裂誘発活性を比較するために、種々の濃度のＧＦＤペプチドを試験した。ペプチド及び³Ｈ−チミジンと共に２４時間インキュベートした後に、取り込まれた放射能をここに記載したようにして測定した。各ペプチドについて５種類の濃度を用いた。所定のペプチドについて、５つの内で一番上の棒は、０．１μＭを表し、その次の棒は０．３３μＭ、その次の棒は１μＭ、その次の棒は３．３μＭを表し、一番下の棒は１０μＭを表す。図２は、種々の成長培地における６量体ペプチドの付加的効果を表す棒グラフである。ＫＢＭは、ケラチノサイト基礎培地（上皮成長因子、インシュリン、ヒドロコーチゾン又はウシ下垂体抽出物を含まないケラチノサイト成長培地）であり、ＫＧＭ−ＢＰＥは、ウシ下垂体抽出物を含まないケラチノサイト成長培地であり、ＢＭ＋Insは、インシュリンを加えたケラチノサイト基礎培地であり、ＢＭ＋ＥＧＦは、上皮成長因子を加えたケラチノサイト基礎培地であり、ＢＭ＋ＢＰＥは、ウシ下垂体抽出物を加えたケラチノサイト基礎培地であり、ＫＧＭは、ケラチノサイト成長培地（カリフォルニア、Clonetics）である。図３は、２２日間に及ぶケラチノサイト培養におけるｕＰＡ活性のグラフ表示である。実線は、全細胞数を表し、点線は、培地中の全ｕＰＡ活性を表し、且つ破線は、細胞当りのｕＰＡ活性を表す。ケラチノサイトにおけるｕＰＡ断片の有糸分裂誘発活性ｕＰＡは、ＥＧＦ様ドメイン、クリングルドメイン及びトリプシン様プロテアーゼドメインを有する５５Ｋｄａの蛋白質である（ｕＰＡはクローン化されており、Riccio等、1985，Nucleic Acids Research 13:No.８を参照されたい）。ｕＰＡは、ＥＧＦ様ドメインによって特異的細胞レセプター（ｕＰＡＲ）に結合する（ｕＰＡＲはクローン化されており、Roldan等、1990 EMBO Journal 9:467を参照されたい）。ＥＧＦ様ドメイン及びクリングルドメインを含むウロキナーゼの１８Ｋｄａのアミノ末端領域は、造骨細胞系統において有糸分裂誘発性を誘導することが見出されている（Rablani等、Biochem. Biophys.Res.Commun．173:1058，1990）。ｕＰＡの有糸分裂誘発活性を保持するがフィブリン溶解活性を有しない低分子を得るために、種々の長さの多くのペプチドをデザインして有糸分裂誘発活性に対して必要とされるｕＰＡ分子の部分を決定した。これらのペプチドの合成及び分析を以下に説明する。ペプチドの調製種々の長さの合成ペプチドを、標準的方法により、ペプチド合成機（Research Genetics,Inc.）を用いて合成した。ペプチドを、逆相ＨＰＬＣ（Toso，Inc.）により精製した。これらのアミノ酸配列を表１に与える。有糸分裂誘発性のアッセイ有糸分裂誘発性に対するペプチドの効果を、下記のように、ＤＮＡ合成の関数として測定した。ペプチド（リン酸緩衝塩溶液（ＰＢＳ）中）を単層（ここに記載のように成長させたもの）に加えて終濃度０．１ μＭ、０．３３μＭ、１．０μＭ、３．３μＭ又は１０μＭの何れかとした。１５０μＬのＫＧＭ中の³Ｈ−チミジン（１０μＣｉ／ｍｌ：イリノイ、Arlington Hei ghts在、Amersham）５μＬをこれらのペプチドを伴う培養に加え、Tomtecセルハーベスターを用いて細胞を採取して蒸留Ｈ₂Ｏ中で３７℃で２４時間後に溶解させ且つ７０％エタノール中で固定した。次いで、溶解した細胞をナイロンフィルター（イリノイ、Arlington Heights在、Amerham）にトランスファーし、ベータプレートシンチレーション液を加えて（ＬＫＢ）、放射能をWallac 1205ベータプレートカウンターを用いて測定した。リン酸緩衝塩溶液（ＰＢＳ）及び³Ｈ−チミジンの存在下でインキュベートした対照試料は、対照レベルの放射能約４００ｃｐｍを与えた。細胞培養初代ヒトケラチノサイト（カリフォルニア、Clonetics）を、９６ウェルプレート（ニューヨーク、Corning）中の無血清培地（ＫＧＭ培地、）中で、７０〜８０％集密まで、５％ＣＯ₂中の３７℃での単層培養にて培養した。短いｕＰＡペプチドは有糸分裂誘発活性を有する幾つかの短いｕＰＡペプチドを合成して、ここに記載したように有糸分裂誘発活性について試験した。これらのペプチドを表１に示す。図１に示したように、試験したすべてのペプチドは、チミジンの取り込みを刺激した。６量体ペプチドは、３．３μＭ以下の濃度では何らの測定可能な活性を示さなかったが、１０μＭの濃度では³Ｈ−チミジンの取り込みの有意の刺激を生じた。９量体ペプチドは、０．３３μＭの低濃度で有糸分裂誘発性を有効に刺激したが、最大の有糸分裂誘発活性は１μＭにおいてであった。１２量体は、１μＭでのみ有糸分裂誘発活性を示し、他の濃度ではケラチノサイトの刺激について、あるにしても、僅かの効果しか有しなかった。１５量体により生じた最高レベルの有糸分裂誘発活性は、３．３μＭの濃度にて生じた。３．３μＭ及び１０μＭの濃度において、２１量体及び１８量体は、ケラチノサイトにおける有糸分裂誘発性の刺激に対して類似の効果を示した。ＰＢＳ対照は、約４００ｃｐｍの取り込みを示した。完全なＡＦＦも又、ケラチノサイトの有糸分裂誘発性を刺激することが見出された。６量体ペプチド（ＧＦＤ２１〜２６）と他の成長因子との相互作用更に、６量体ペプチド（ＧＦＤ２１〜２６）を、他の因子の不在におけるそのケラチノサイト刺激に対する効果を測定するために研究した。ケラチノサイトを、通常ＫＧＭ（完全培地）中に存在する種々の成長因子を欠く種々の成長培地において、６量体の存在下若しくは不在にて２４時間培養して（図２）、下記のように³Ｈ−チミジンの取り込みを測定した。図２に示したように、６量体（Ｐ−８）は、種々の成長因子例えばウシ下垂体抽出物（ＢＰＥ）、インシュリン及びヒドロコーチゾンを含む完全ケラチノサイト成長培地の存在下において、³Ｈ−チミジンの取り込みを大いに刺激した。更に、６量体は、この研究において試験したすべての成長因子に対して、常に、付加的効果を示した。増殖中のケラチノサイトにおけるウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターレセプター（ｕＰＡＲ）の発現ノーザンブロット分析を用いて、種々の成長段階のケラチノサイトにおけるｕＰＡＲ発現のレベルを決定した。簡単にいえば、ｕＰＡＲのエクトドメインをコードする０．４ｋｂのプローブを、ＲＴ−ＰＣＲ技術（Invitrogen，cDNA cycle kit）によって、プライマー5'-GGGGATTGCCGTGTGGAAGA-3'（SEQ ID NO:７）及び 5'-GGAATTCGAAGGTAGCCACAGCCACGGAG-3'（SEQ ID NO:８）を用いて調製した。メッセンジャーＲＮＡを、単層培養中で培養したケラチノサイトから、５０％集密、８０％集密、１００％集密及び集密後（１２０％集密）の段階にて精製した。次いで、各培養段階のケラチノサイトからの約２μｇの精製ｍＲＮＡをアガロース中での電気泳動にかけ、ナイロン膜（Hybond N）にトランスファーした。６× ＳＳＣ、５×Denhardt's、０．５％ＳＤＳ、１００μｇ／ｍｌ超音波処理したサケ精子ＤＮＡ及び５０％脱イオン化ホルムアミド中での予備ハイブリダイゼーションの後に、［³²Ｐ］−標識したｕＰＡＲプローブを加え、５０％ホルムアミドの存在下で４２℃で一晩ハイブリダイゼーションを行なった。次いで、ナイロン膜を０．１％ＳＤＳを含む２×ＳＳＣで２回洗い、その後に、０．１×ＳＳＣ、０．１％ＳＤＳにて３７℃で３０分間洗い、次いで５５℃で３０分間洗った。オートラジオグラフィーを−７０℃でKodak XRRフィルムに露出することにより行なった。ノーザンブロット分析のデータは、ｕＰＡＲｍＲＮＡが対数増殖段階（例えば、５０％集密度）において高度に発現されることを示した。更に、このデータは又、集密度が５０％を超えるとｕＰＡＲｍＲＮＡの発現が減少し、１００％集密では殆ど検出不能であることをも示している。これらの結果は、ｕＰＡＲｍＲＮＡの発現とケラチノサイト増殖との間に直接的相関関係があることを示している。ケラチノサイトにおけるウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーター活性正常ヒトケラチノサイト（カリフォルニア、Clonetics）を、９６ウェルプレートにて、無血清ケラチノサイト成長培地を用いて培養し、細胞数を２日毎に血球計によりモニターした。ｕＰＡ活性も又、２日毎に２段階アッセイを用いて測定した。簡単に言えば、ケラチノサイト培養からの５０μｌの調整培地を、０．１％ツイーン２０を含む０．１Ｍトリス−ＨＣｌ（ｐＨ８．５）及び５０ μｌの０．１ｍｇ／ｍｌ精製プラスミノーゲン（ＰＢＳ中）と混合して、３０分間３０℃でインキュベートした。次いで、４ｍＭの基質Ｓ−２２５１（Ｖａｌ− Ｌｅｕ−Ｌｙｓ−ｐ−ニトロアニリド、Stockholm在、Kabi Diagnostics）と混合した１．４ＭＮａＣｌを、Ｓ−２２５１の終濃度が０．８ｍＭとなるまで含有する０．２Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ７．２）を５０μｌ加えた。インキュベーションの後に、各試料の吸光度を４０５ｎｍで測定し且つｕＰＡ活性をウロキナーゼの国際標準を用いて測定した。図３には、正常ヒト上皮ケラチノサイトにおけるｕＰＡ活性を要約してある。実線は、２２日間にわたる培養におけるケラチノサイトの細胞数を表し、細胞数が６日目から急速に増加して８日目には１００％集密度に接近し、１２日目に１００％集密度を超えて増加を続け、約１４日目に減衰し始めることを示している。点線は、同じ２２日間にわたるｕＰＡ活性を表している。全ｕＰＡ産生は、ほぼ１２日目まで増加してその後減少している。破線は、細胞当りのｕＰＡ活性を表しており、細胞当りのｕＰＡ活性が集密前には増加し、次いで、集密に達すると減少することを示している。これらのデータは、更に、ｕＰＡ活性とケラチノサイト増殖との間に直接的相関関係があることを実証するものである。改変された活性を有するｕＰＡペプチドｕＰＡ領域の構造のコンピューター分析は、ＧＦＤのＬｙｓ²³にターン構造（turn-structure）の存在を示唆した。ｕＰＡペプチドにおいてＬｙｓ²³の置換の効果を評価した。Ｌｙｓ²³をアラニンで置換した９量体Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ａｌａ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（ SEQ ID NO:２０）（Ａ−ＧＦＤ）；アルギニンで置換した９量体Ｓｅｒ−Ａｓｎ −Ａｒｇ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（SEQ ID NO:２１）（Ｒ−ＧＦＤ）；及びグルタミン酸で置換した９量体Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｇｌｕ −Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（SEQ ID NO:２２）（Ｅ− ＧＦＤ）を合成した。これらの置換したペプチドの有糸分裂誘発性を刺激する能力を³Ｈチミジンの取込みにより測定した。予想されたように、陽性対照の９量体Ｓｅｒ−Ａｓｎ− Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（SEQ ID NO:１）（Ｋ−ＧＦＤ）は、未処理細胞と比較して取込みが増加した。Ａ−ＧＦＤで処理した細胞における³Ｈ−チミジンの取込みは、陰性対照細胞（ペプチドを与えない）と殆ど差異がなかった。Ｒ−ＧＦＤは、Ｋ−ＧＦＤ処理した陽性対照細胞と比較して大いに³Ｈ−チミジンの取込みを増大させた。他方、Ｅ−ＧＦＤは有糸分裂誘発性を阻害し、³Ｈ−チミジンの取込みは、陰性対照細胞（ペプチドを与えない）で見られるよりも少なかった。これらの結果は、２３位のアミノ酸残基がケラチノサイト刺激において重要な役割を演じていることを示す。更に、この活性は、一層塩基性の残基への移動が有糸分裂誘発活性を増大させ、他方、負に帯電したＧｌｕでの置換が阻害活性を生じるので、電荷に依存する。他の有用なペプチドは、ｕＰＡペプチド例えば表１に示したペプチドを、２３位（若しくは他の位置）の種々の置換及びそれらの有糸分裂誘発性に対する効果の測定によって、合成することによって見出すことが出来る。利用この発明の配合物は、局所投与に特に有用であるが、他の様式例えば非経口、静脈、皮下又は筋肉経由によって投与することも出来る。治療上有効な量（例えば、患者の病的状態を除去し若しくは軽減する量）のこの発明のペプチドをヒト又は他の哺乳動物に投与して、細胞成長の阻害若しくは刺激が望ましい病気若しくは障害を治療し若しくは阻止することが出来る（例えば、ケラチノサイトの成長の促進が望ましい病気において）。ここで提供されたこれらの化合物は、任意の製薬上許容し得る非毒性賦形剤及びキャリアーと混合することにより医薬組成物中に配合することが出来る。上記のように、かかる組成物は、非経口投与用に特に溶液若しくは懸濁液の形態で；経口投与用に特に錠剤若しくはカプセル形態で；又は局所用に軟膏、クリーム若しくはゲルの形態で調製することが出来る。これらの組成物は、単位投薬形態にて便利に投与することが出来、製薬技術において周知の任意の方法により調製することが出来る。非経口投与用の配合物は、一般的賦形剤として、滅菌した水若しくは塩溶液、ポリアルキレングリコール例えばポリエチレングリコール、植物起源の油、水素化ナフタレン等を含むことが出来る。特に、生体適合性、生物分解性ラクチド（lactide）ポリマー、ラクチド／グリコシドコポリマー又はポリオキシエチレン−ポリオキシプロピレンコポリマーは、これらのペプチドの放出を制御するのに有用な賦形剤であり得る。これらのペプチド用の他の潜在的に有用な非経口送達システムは、エチレン−酢酸ビニルコポリマー粒子、浸透圧ポンプ、移植可能な浸出液システム、及びポリソームを含む。非経口投与用の配合物は又、口内投与用のグリココレート、直腸投与用のメトキシサリチレート、又は腟投与用のクエン酸をも含んでよい。この発明の物質は、医薬組成物において単独活性剤として用いることが出来、或は、他の活性成分（例えば、細胞成長若しくは阻害を促進する他の化合物又はペプチダーゼ若しくはプロテアーゼ阻害剤）との組合せにおいて用いることが出来る。ここに記載した化合物の治療用組成物中の投薬量は、投与経路、病気の型及び状態、並びに特定の患者の全体的健康状態を含む幾つかの因子に依って変化する。この発明のペプチドは又、イン・ビトロで用いて、例えば培養上皮細胞の成長を刺激することが出来る。他の具体例この発明は、ここに記載したｕＰＡペプチドと実質的に相同で且つ生物学的活性を有する任意のペプチドを含む。「生物学的に活性」とは、ｕＰＡＲを有する細胞例えばケラチノサイトに特異的に結合する能力、又はｕＰＡＲを有する細胞例えばケラチノサイトの成長（有糸分裂誘発性）を促進し若しくは阻害する能力（ここに記載したアッセイ若しくは当業者に公知の他のアッセイにより測定）を意味する。最も好ましくは、実質的に相同なペプチド、断片又はアナログは、成長促進性ペプチドの場合には、表１の９量体の活性の１０％、好ましくは４０％、一層好ましくは少なくとも９０、９５若しくは９９％を有し；阻害性ペプチドの場合には、Ｅ−ＧＦＤの阻害活性の１０％、好ましくは４０％、一層好ましくは少なくとも９０、９５若しくは９９％を有する。結合するが有糸分裂誘発性に効果を有しないペプチドは、それらがSEQ ID NO:１のペプチドの１０％、好ましくは４０％、又は一層好ましくは少なくとも９０、９５若しくは９９％で結合するならば生物学的活性を有する。この発明は又、ここに記載したｕＰＡペプチドを含むキメラペプチドをも含む。この発明は又、ここに記載したｕＰＡペプチドの任意の生物学的に活性な断片又はアナログをも含む。好適アナログは、配列が野生型配列（即ち、天然のｕＰＡの相同部分の配列）と保存的アミノ酸置換好ましくは１、２若しくは３つの置換例えば１つのアミノ酸の他の類似の性質を有するアミノ酸との置換（例えば、グリシンに対するバリン、リジンに対するアルギニン等）又はポリペプチドの生物学的活性を破壊しない１つ以上の非保存的アミノ酸置換、欠失又は挿入によってのみ異なるペプチドを含む。表２に、幾つかの保存的アミノ酸置換を列挙する。他の有用な改変は、ペプチドの安定性を増大させるようなものを含み、かかるアナログは、例えば、１つ以上の（ペプチド結合に置き換わる）非ペプチド結合又はＤ−アミノ酸をペプチド配列中に含んでよい。アナログは、天然のｕＰＡ配列と、アミノ酸配列において異なってよく又は配列と関係しない方法で改変することが出来、或はその両者で異なってよい。この発明のアナログは、一般に、天然のｕＰＡ配列又はここに記載したｕＰＡ配列と、少なくとも４０％、一層好ましくは５０％、更に好ましくは６０％、更に好ましくは７０％、更に好ましくは８０％、更に好ましくは９０％、最も好ましくは９５％の相同性を示し又は９９％の相同性さえ示す。配列以外の改変は、イン・ビボ又はイン・ビトロでのペプチドの化学的誘導体化例えばアセチル化、メチル化、リン酸化、カルボキシル化又はグリコシル化を含む。天然のＬ−アミノ酸以外の残基例えばＤ−アミノ酸又は非天然アミノ酸即ち合成のアミノ酸（例えば、β若しくはγアミノ酸）を含むアナログも又含まれる。或は、増大した安定性は、ペプチド分子を環化することによって付与され得る。アナログ例えば、ここに開示したペプチドと１、２、３若しくはそれ以上の残基だけ異なるペプチドは、当業者に公知の方法により製造することが出来、当業者に公知の若しくはここに開示した方法によって生物学的活性を試験することが出来る。他の具体例は、以下の請求の範囲内にある。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号庁内整理番号ＦＩＣ０７Ｈ 21/04 8517−4ＨＣ０７Ｋ 7/06 Ｃ０７Ｋ 5/103 8517−4Ｈ 7/08 7/06 9452−4ＢＣ１２Ｐ 21/02 Ｃ 7/08 9455−4ＣＡ６１Ｋ 37/02 ＡＤＳＣ１２Ｎ 5/10 ＡＤＡ 15/09 9162−4ＢＣ１２Ｎ 15/00 ＡＣ１２Ｐ 21/02 9281−4Ｂ 5/00 Ｂ //(Ｃ１２Ｐ 21/02 Ｃ１２Ｒ 1:91） (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＡＵ，ＣＡ，ＪＰ (72)発明者タカハシ，タダヒトアメリカ合衆国 02129 マサチューセッツ，チャールズタウン，サーティーンスストリート，ビルディング 149，シービーアールシー（番地なし) (72)発明者ホリイ，イズミアメリカ合衆国 02129 マサチューセッツ，チャールズタウン，サーティーンスストリート，ビルディング 149，シービーアールシー（番地なし) (72)発明者ゲーティンク，ポールエフ. アメリカ合衆国 02116 マサチューセッツ，ボストン，マールボロストリート 282，アパートメントナンバー２

Claims

【特許請求の範囲】１．ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターの残基１４〜３３よりなるドメインからの５より多く１９より少ない隣接するアミノ酸残基を含むペプチド。２．ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターの残基１６〜３３よりなるドメインからの５より多く１５より少ない隣接するアミノ酸残基を含むペプチド。３．前記のペプチドが、前記のドメインを含めて、５より多く１３より少ないアミノ酸残基を含む、請求項２に記載のペプチド。４．アミノ酸配列Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ− Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（SEQ ID NO:６）を含む、請求項３に記載のペプチド。５．前記のペプチドが、前記のドメインを含めて、５より多く１０より少ないアミノ酸残基を含む、請求項２に記載のペプチド。６．アミノ酸配列Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ− Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（SEQ ID NO:１）を含む、請求項５に記載のペプチド。７．前記のペプチドが前記のドメインの６個の隣接するアミノ酸残基を含む、請求項２に記載のペプチド。８．アミノ酸配列Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ（SEQ ID N O:２）を含む、請求項７に記載のペプチド。９．ウロキナーセプラスミノーゲンアクチベーターのアミノ末端断片からの５より多く１２より少ない隣接するアミノ酸残基を含むペプチド。１０．前記のペプチドが、前記のウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターのアミノ末端断片を含めて、５より多く１０より少ない隣接するアミノ酸残基を含む、請求項９に記載のペプチド。１１．アミノ酸配列Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ −Ｉｌｅ−Ｈｉｓ（SEQ ID NO:１）を含む、請求項１０に記載のペプチド。１２．前記のペプチドが、前記のウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターのアミノ末端断片を含めて、６個の隣接するアミノ酸残基を含む、請求項９に記載のペプチド。１３．アミノ酸配列Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ（SEQ ID NO:２）を含む、請求項１２に記載のペプチド。１４．ペプチドＡｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｌｙｓ−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ（SEQ ID NO:４）。１５．２３位のアミノ酸残基がＬ−リジン以外のアミノ酸である、精製したｕＰＡペプチド。１６．２３位のアミノ酸残基がｐＨ７で正味の正電荷を有する側鎖を有するアミノ酸である、請求項１５に記載の精製したｕＰＡペプチド。１７．２３位のアミノ酸残基が、リジンの側鎖より一層正に帯電した側鎖を有するアミノ酸である、請求項１５に記載の精製したｕＰＡペプチド。１８．２３位のアミノ酸残基が塩基性アミノ酸である、請求項１５に記載の精製したｕＰＡペプチド。１９．前記の２３位のアミノ酸残基が、アルギニン、ヒスチジン、又は正に帯電した若しくは塩基性の非天然アミノ酸の何れかである、請求項１５に記載の精製したｕＰＡペプチド。２０．２３位のアミノ酸残基がｐＨ７で正味の負電荷を有する側鎖を有するアミノ酸である、請求項１５に記載の精製したｕＰＡペプチド。２１．２３位のアミノ酸残基が、リジンの側鎖より一層負に帯電した側鎖を有するアミノ酸である、請求項１５に記載の精製したｕＰＡペプチド。２２．２３位のアミノ酸残基が酸性アミノ酸である、請求項１５に記載の精製したｕＰＡペプチド。２３．前記の２３位のアミノ酸残基が、アスパラギン酸、グルタミン酸、又は負に帯電した若しくは酸性の非天然アミノ酸の何れかである、請求項１５に記載の精製したｕＰＡペプチド。２４．前記のペプチドが完全長のｕＰＡペプチドである、請求項１５に記載の精製したｕＰＡペプチド。２５．下記式の配列を含む精製したｕＰＡペプチド：ｎ−Ｒ²−Ａｓｎ−Ｒ¹−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｒ³−ｃ（式中、Ｒ¹は、Ｌ−リジン以外のアミノ酸残基であり、Ｒ²は、１〜２１残基長の配列であって、そのカルボキシ末端としてｕＰＡのＳｅｒ²¹を有し且つＳｅｒ²¹を含めてｕＰＡのＮ末端方向で１〜２１アミノ酸残基に及び、そしてＲ³は、１〜２５残基長の配列であって、そのアミノ末端としてｕＰＡのＳｅｒ²⁶を有し且つＳｅｒ²⁶を含めてｕＰＡのＣ末端方向で１〜２５アミノ酸残基に及び、ｃは、このペプチドのカルボキシ末端方向を示し且つｎは、このペプチドのアミノ末端方向を示す）。２６．Ｒ¹がｐＨ７で正味の正電荷を有する側鎖を有するアミノ酸である、請求項２５に記載の精製したｕＰＡペプチド。２７．Ｒ¹が塩基性アミノ酸である、請求項２５に記載の精製したｕＰＡペプチド。２８．Ｒ¹がアルギニン、ヒスチジン、又は正に帯電した若しくは塩基性の非天然アミノ酸の何れかである、請求項２５に記載の精製したｕＰＡペプチド。２９．Ｒ¹がアルギニンである、請求項２５に記載の精製したｕＰＡペプチド。３０．Ｒ²が次の何れかである、請求項２５に記載の精製したｕＰＡペプチド：ｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ −Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ −Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:９）；ｎ− Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ −Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１０）；ｎ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− ｃ（SEQ ID NO:１１）；ｎ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１２）；ｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１３）；ｎ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１４）；ｎ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１５）；ｎ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ；ｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ；又はｎ−Ｓｅｒ−ｃ。３１．Ｒ³が下記の何れかである、請求項２５に記載の精製したｕＰＡペプチド：ｎ−Ｓｅｒ−ｃ；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−ｃ；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−ｃ；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−ｃ（SEQ ID NO:１６）；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−ｃ（SEQ ID NO:１７）；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−ｃ（SEQ ID NO:１８）；又はｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）。３２．Ｒ²がｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ− Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:９）であり且つＲ³が、ｎ−Ｓｅｒ− Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）であるか；Ｒ²が、ｎ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ− Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１１）；であり、且つＲ³が、ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）であるか；Ｒ²が、ｎ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１５）であり且つＲ³がｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ− ｃ（SEQ ID NO:１９）であるか；Ｒ²が、ｎ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１５）であり且つＲ³がｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−ｃ（SEQ ID NO:１６）であるか；Ｒ²が、ｎ−Ｓｅｒ−ｃであり、且つＲ³がｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−ｃ（SEQ ID NO:１６）であるか；或はＲ²が、ｎ−Ｓｅｒ−ｃであり、且つＲ³がｎ−Ｓｅｒ−ｃである、請求項２５に記載の精製したｕＰＡペプチド。３３．前記のＲ¹がＡｒｇである、請求項３２に記載の精製したｕＰＡペプチド。３４．下記式の配列を含む精製したｕＰＡペプチド：ｎ−Ｒ²−Ａｓｎ−Ｒ¹−Ｔｙｒ−Ｐｈｅ−Ｒ³−ｃ（式中、Ｒ¹はＬ−リジン以外のアミノ酸残基であり、Ｒ²は１〜２１残基長の配列であって、そのカルボキシ末端としてｕＰＡのＳｅｒ²¹を有し且つＳｅｒ²¹を含めてｕＰＡのＮ末端方向で１〜２１アミノ酸残基に及び、そしてＲ³は１〜２５残基長の配列であって、そのアミノ末端としてｕＰＡのＳｅｒ²⁶を有し且つＳｅｒ²⁶を含めてｕＰＡのＣ末端方向で１〜２５アミノ酸残基に及び、ｃはこのペプチドのカルボキシ末端方向を示し且つｎはこのペプチドのアミノ末端方向を示す）。３５．Ｒ¹がｐＨ７で正味の負電荷を有する側鎖を有するアミノ酸である、請求項３４に記載の精製したｕＰＡペプチド。３６．Ｒ¹が、リジンの側鎖よりも一層負に帯電した側鎖を有するアミノ酸である、請求項３４に記載の精製したｕＰＡペプチド。３７．Ｒ¹が、酸性アミノ酸である、請求項３４に記載の精製したｕＰＡペプチド。３８．Ｒ¹が、アスパラギン酸、グルタミン酸、又は負に帯電した若しくは非天然アミノ酸の何れかである、請求項１に記載の精製したｕＰＡペプチド。３９．Ｒ¹がアルギニンである、請求項３８に記載の精製したｕＰＡペプチド。４０．Ｒ²が次の何れかである、請求項３４に記載の精製したｕＰＡペプチド：ｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ− Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:９）；ｎ−Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ− Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１０）；ｎ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ− ｃ（SEQ ID NO:１１）；ｎ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１２）；ｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１３）；ｎ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１４）；ｎ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１５）；ｎ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ；ｎ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ；又はｎ−Ｓｅｒ−ｃ。４１．Ｒ³が次の何れかである、請求項３４に記載の精製したｕＰＡペプチド：ｎ−Ｓｅｒ−ｃ；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−ｃ；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−ｃ；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−ｃ（SEQ ID NO:１６）；ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−ｃ（SEQ ID NO:１７）ｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−ｃ（SEQ ID NO:１８）；又はｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）。４２．Ｒ²がｎ−Ａｓｐ−Ｃｙｓ−Ｌｅｕ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ− Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:９）であり且つＲ³がｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）であるか；Ｒ²がｎ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１１）であり且つＲ³がｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ− Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）であるか；Ｒ²がｎ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１５）であり且つＲ³がｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ−Ｃｙｓ−Ａｓｎ−ｃ（SEQ ID NO:１９）であるか；Ｒ²がｎ−Ｔｈｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｓｅｒ−ｃ（SEQ ID NO:１５）であり且つＲ³がｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ−ｃ（SEQ ID NO:１６）であるか；Ｒ²がｎ−Ｓｅｒ−ｃであり且つＲ³がｎ−Ｓｅｒ−Ａｓｎ−Ｉｌｅ−Ｈｉｓ −ｃ（SEQ ID NO:１６）であるか；或はＲ²がｎ−Ｓｅｒ−ｃであり且つＲ³がｎ−Ｓｅｒ−ｃである、請求項３４に記載の精製したｕＰＡペプチド。４３．Ｒ¹がグルタミン酸である、請求項４２に記載の精製したｕＰＡペプチド。４４．活性成分としてのこの発明のペプチドと製薬上許容し得るキャリアーを含む治療用組成物。４５．細胞の成長を制御する方法であって、該細胞に成長制御量の請求項２又は１５に記載のペプチドを投与することを含む上記の方法。４６．外傷を受けた患者の上皮組織の成長を制御する方法であって、該組織に成長制御量の請求項２又は１５に記載のペプチドを投与することを含む、上記の方法。４７．イン・ビトロで上皮細胞の成長を制御する方法であって、上皮細胞を請求項２又は１５に記載のペプチドの存在下で培養することを含む、上記の方法。４８．患者の上皮剥脱された皮膚領域を治療する方法であって、請求項４７に記載の方法により生成した上皮細胞を適用して前記のシートを下の真皮に有効に付着させることを含む、上記の方法。４９．細胞の成長段階を測定する方法であって、該細胞により発現されたウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターのレベルを測定することを含む、上記の方法。５０．病気を有する動物を治療する方法であって、該病気の危険のある動物を同定し、そして治療上有効な量の請求項２又は１５に記載のペプチドを該動物に投与することを含む、上記の方法。５１．ケラチノサイト細胞を有糸分裂誘発的に刺激する方法であって、該細胞をＧＦＤからの少なくとも６個の隣接する残基を有するｕＰＡのＡＦＦの断片の有効量と接触させることを含む、上記の方法。５２．ケラチノサイト細胞の有糸分裂誘発性を阻害する方法であって、該細胞をＧＦＤからの少なくとも６個の隣接する残基を有するｕＰＡのＡＦＦの断片の有効量と接触させることを含む、上記の方法。５３．ウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターとケラチノサイト上のウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターレセプターとの相互作用を阻害する方法であって、該レセプターをウロキナーゼプラスミノーゲンアクチベーターレセプターに対する抗体と接触させて該相互作用を阻害することを含む、上記の方法。５４．ｕＰＡＲを有する細胞の成長を阻害する方法であって、該細胞をウロキナーセプラスミノーゲンアクチベーターレセプターに対する抗体と接触させて該成長を阻害することを含む、上記の方法。５５．ｕＰＡＲを有する細胞を含む細胞外蛋白質マトリックスの蛋白質分解による破壊を阻止する方法であって、ｕＰＡＲを有する細胞を請求項２又は１５に記載のペプチドと接触させることを含む、上記の方法。５６．請求項２又は１５に記載のペプチドをコードする配列を含む精製したＤＮＡ。５７．請求項２又は１５に記載のペプチドをコードするＤＮＡ配列を含むベクター。５８．請求項４１に記載の単離したＤＮＡを含む細胞。５９．請求項５８に記載の単離したＤＮＡの発現により生成したペプチド。６０．請求項２又は１５に記載のペプチドの製造方法であって、請求項５８に記載の細胞を培地中で培養して該ペプチドを発現させることを含む、上記の方法。６１．外傷を受けた患者の上皮組織の成長を制御する方法であって、該組織に成長制御量のリジンを局所的に投与することを含む、上記の方法。６２．外傷を受けた患者の上皮組織の成長を制御する方法であって、該患者に成長制御量のリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸を投与することを含む、上記の方法。６３．イン・ビトロでの上皮細胞の成長を制御する方法であって、上皮細胞をリジンの存在下で培養することを含み、該細胞の表面におけるリジンの濃度が該細胞の成長培地中で見出されるリジンの濃度又はウシ胎児若しくはウシ血清中で見出されるリジンの濃度より高い、上記の方法。６４．イン・ビトロでの上皮細胞の成長を制御する方法であって、上皮細胞をリジンのアナログの存在下で培養することを含む、上記の方法。６５．前記のアナログがエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸である、請求項６４に記載の方法。６６．患者の上皮剥脱された皮膚領域を治療する方法であって、請求項６３又は６４に記載の方法により生成した上皮細胞を適用して前記のシートを下の真皮に有効に付着させることを含む、上記の方法。６７．患者の部位に移したケラチノサイトの成長を促進する方法であって、該細胞を用意し、該細胞を該部位に適用し且つ該部位に成長促進量のリジンを局所適用することを含む、上記の方法。６８．患者の部位に移したケラチノサイトの成長を促進する方法であって、該細胞を用意し、該細胞を該部位に適用し且つ該患者に成長促進量のリジンのアナログを投与することを含む、上記の方法。６９．前記のアナログがエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸である、請求項６８に記載の方法。７０．活性成分としてのリジン及び製薬上許容し得る局所適用のためのキャリアーを含む局所的治療用組成物。７１．活性成分としてのリジンのアナログ例えばエプシロン−アミノカプロン酸又はトラネクサミン酸（トランス−４−（アミノメチル）シクロヘキサンカルボン酸、及び製薬上許容し得るキャリアーを含む治療用組成物。