JPH08507210A

JPH08507210A - 診断アッセイにおける使い捨て装置

Info

Publication number: JPH08507210A
Application number: JP6519079A
Authority: JP
Inventors: エー．キャシー，シェリル; シュワルツ，ヘンリー，エル．; ソール，トム; ラングフォード，ジェフリー，ビー．
Original assignee: バイオサーキッツコーポレイション
Priority date: 1993-02-18
Filing date: 1994-02-14
Publication date: 1996-08-06
Also published as: CA2156412A1; US5698406A; US5503985A; EP0686198A1; WO1994019484A1; US5660993A; EP0686198A4

Abstract

(57)【要約】使い捨て診断装置及びその使用方法を提供する。本装置は互いに直交する第１と第２流路を含むハウジングを含んで成る。第１流路はサンプル添加口で始まり、そして毛細管流れによりインキュベーション領域にサンプルをフィードする輸送チャンネルを通して続く。インキュベーション領域は、シグナル生成装置を含んで成り、そして場合により透明な窓の下にある。第１流路は、サンプル及び洗浄液を受容する上部廃リザーバー内で終わる。第２流路は、側試薬リザーバー上の入口においてインキュベーション領域の片側上で始まる。液は、第２流路に沿って側試薬リザーバーからインキュベーション領域を横切って側廃リザーバー内に流れる。インキュベーション領域は、液中への試薬の均一な分散のための撹拌手段を含んで成ることができる。シグナル生成装置のさまざまな試薬が本装置内に含まれることができ、そして必要な液が適当な機器により自動的に添加されて、本検定が熟練者による改良を伴わずに自動的に行われて、高精度・感度の測定を提供する。

Description

【発明の詳細な説明】診断アッセイにおける使い捨て装置関連出願についてのクロスリファレンス本願は1993年2月18日提出の出願第08／019,469号の一部継続出願である。序論技術分野本発明の分野は使い捨て診断装置にある。背景診断試薬及び装置の開発におけるこの20年間において成された数多くの研究にもかかわらず、診断をより高精度、より簡単、そして多種多様な環境における技術者でない者にとってより親しみ易いものとする努力なされ続けている。診療所、病院、家庭、保養所等の如くの場所で技術者でない者によって個人的なアッセイが実施できればという関心が続いている。技術者でない者がこれらのアッセイを正確に実施できるということを保証するため、そのプロトコールは簡単であり、且つあるとしても測定段階数が少ないことが必須である。更に、読取りは比較的自動なものでなければならない。この目的のため、アッセイの測定毎に個所に使用され、そして廃棄されうる使い捨て装置を獲得することが所望される。診療所においては、個人アッセイ測定において分析物を測定する数多くの機会がある。往々にして、特定なアッセイ手順は一日当り数回しか測定できないことがある。かかる状況のもとでは、個人アッセイが特定のアッセイ手順を実施するうえで最も効率的な方法であろう。オペレーターより最少限のインプットを必要とする使い捨てアッセイ装置を採用すると、有意な費用の節約が成し得る。費用の節約はその装置を操作するのに高度な技術者を必要としないであろうという事実に由来する。従って、個人アッセイプロトコールを実施できる使い捨て装置の要望があり続けている。この装置は最少限の測定段階数及びオペレーターによる最少限のインプットで十分であるべきである。即ち、この使い捨て装置は特定のアッセイ決定にとって必要とされる様々な試薬を提供すべきである。この装置は特定のサンプル中の分析物の量の高感度且つ正確な定量も可能とすべきである。使い捨て診断装置に係る長い間の問題には、試薬の非効率的な混合に基づく非特異的な作用、検出領域からの非特異的に結合した試薬の不適切な洗浄、試薬とサンプルとの不均一な混合による不正確な分析物検出の問題、並びにこの装置を流れる流体をコントロールする問題が含まれる。関連文献関連文献には、米国特許第5,096,836；5,164,598；5,053,197；及び5,051,237 号が含まれる。関連文献には、ヨーロッパ特許出願第0,394,041及び0,430,248号も含まれる。発明の概要使い捨て診断装置を利用するサンプル中の分析物の定量のための装置及び方法を提供する。この使い捨て装置は一般に互いに対して直交し合う２本のフローパスを含むハウジングを含んで成る。第一のフローパスはサンプル適用サポートにおいて始まり、輸送キャピラリーチャンネルを伝ってインキュベーション領域を通り、そして上部・廃棄リザーバーで終結する。第二のフローパスは入口ポートから始まり、インキュベーション領域を横切り、側部試薬リザーバーを通って、側部廃棄リザーバーで終結する。この第一フローパスはサンプル液中のドライ試薬の均質な分散のため、このインキュベーション領域の中に撹拌手段を含みうる。特定の分析物についてアッセイするために課題の装置を利用する際、液体サンプルを第一フローパスに導入し、続いて第二フローパスの中に液体を導入する。所定の時間経過後、第一測定、それに続く次の測定を行ってよい。分析物の量は第一測定とそれに続く次の測定との比較により、又はコントロールとの比較により決定する。図面の簡単な説明図１は使い捨て装置の平面図である。図２（ａ）は混合器具抜きの図１の使い捨て装置における線分２−２伝いの断面図である。図２（ｂ）は混合器具を伴う図１の使い捨て装置における線分２−２伝いの断面図である。図３は図１における線分３−３伝いの使い捨て装置の断面図である。図４は図１における線分４−４伝いの使い捨て装置の断面図である。図５は図１に係る使い捨て装置の底部ハウジングプレートの平面図である。図６は図１における使い捨て装置の上部ハウジングプレートの平面図である。図７は混合器具を含んで成る使い捨て装置におけるプラットホームの詳細図である。図８はキャピラリーバルブの頭上三次元図である。特定の態様の詳細分析物の光学的測定、特に蛍光測定のための使い捨て装置及びその利用方法を提供する。この装置は、サンプルインキュベーション領域の中で交差する、互いと直交する２本のフローパスを含むハウジングである。この第一のフローパスはサンプル適用ポートにおいて始まり、輸送キャピラリーチャンネルを伝ってインキュベーション領域を通り、そして上部廃棄リバーバーで終結する。この第二リザーバーフローパスは側部試薬ポートで始まり、側部試薬リザーバーを通り、インキュベーション領域を横断して側部廃棄リザーバーで終結する。この装置は液体サンプル中の特定の分析物の有無及び定量のためのアッセイにおいて有用である。課題の装置及び方法の更なる説明において、この第一及び第二フローパスを順に説明し、続いて課題の装置において利用されるアッセイを説明する。この第一フローパスはサンプルポートにおいて始まる。上壁及び下壁であって、毛細管作用により液体サンプルを輸送するほどに十分に接近し合う壁を有するサンプル輸送チャンネルは、このサンプルポートをインキュベーション領域に接続する。この輸送チャンネルはサンプルの移動のための導管を担う他にいくつかの目的を担いうる。様々な試薬が、壁に対して拡散的に、又は非拡散的に結合して、そのチャンネルの中に存在していてよい。サンプルの１又は複数種の成分、例えば細胞、妨害成分、等を除去するのに働くであろう例えば抗体がその壁に結合していてよい。化学試薬が、サンプルのpH、酸化還元電位又はその他の特徴を変えるために存在していてよい。従って、そのインキュベーション領域の中に導入すべきサンプルは、サンプルポートに導入するサンプルとは別のものであってよい。サンプル輸送チャンネルの下流には、インキュベーション領域を通じてキャピラリーフローが起こるほどに間隔の置かれた上面及び底面を有するサンプルインキュベーション領域がある。その上面の上には光学的に透明な窓が、そして下面の上にはプラットホームがある。インキュベーション領域の片側の上のプラットホームの隣りには側部試薬リザーバーがあり、そして他の側の上には側部廃棄リザーバーがある。インキュベーション領域の上面の上の光学的に透明な窓の真下には、アッセイ測定面がある。この特定のアッセイ測定面は、この使い捨て装置において利用するシグナル生成系に依存するであろう。一のシグナル生成系は、その開示内容を引用することで本明細書に組入れる米国特許第5,156,810号に記載されている。この系は重合化脂質層を採用しており、これは適当な波長域内の光の照射に基づき高度に蛍光性である。この層の片面に隣接しているのは特異的結合性ペアーの一方の構成員であり、ここでこのぺアーはリガンド及びレセプターより成る。この脂質層はアッセイ測定面に施されている。脂質層をアッセイ測定面に施すのに様々な技術が採用されうる。このプラットホームはシグナル生成系の１又は複数種の構成員を支持する。このプラットホーム上に存在しうるシグナル生成系の構成員は、特異的な結合性ペアーの構成員を含んで成るドライ試薬を含む。この特異的に結合性なペアーの一方の構成員は、この脂質層の特異的に結合性なぺアーの他の構成員に対して、交差反応性、即ち、競合的に、又は相補的に、それに結合することができる。この試薬の特異的に結合性のペアーの構成員は、脂質層と一緒になって検出可能なシグナルを供するラベルにコンジュゲートされている。脂質層由来のシグナルが光学的シグナルのとき、ラベル化コンジュゲートは、液体サンプルの中にある分析物の量に相関して、この光学シグナルを直接又は間接的に調節するであろう。好適な態様において、このラベルは基質に作用して、膜層と相互作用しうる生成物を生成する酵素であろう。この生成物はサンプル中の分析物の量に相関して観察される光学シグナルを調節するのに働きうる蛍光物質、クエンチャー、照射波長域において光を吸収する色素、又はその他の化合物であってよい。適時、基質をこの側部試薬リザーバーからこのインキュベーション領域に、この第二フローパス伝いのサンプルの流れの方向に対して直交する状況において導入して、プラットホームを洗い、且つ基質を提供することができる。他方、酵素以外のラベルを使用してよい。他のラベルの選択は所望する感度、検出の方法、サンプルの種類及び分析物の種類等に依存するであろう。即ち、膜のラベルから蛍光物質に至るエネルギーのチャンネリングを担いうる蛍光ラベルを使用して有意義なストークスシフトを供し、これにより、放射される光を、膜により吸収される光及び膜から放射されるであろう何らかの光から実質的にずらすことができる。有意に遅れた時間を有する蛍光物質、例えばキレート化ラタニドを使用し、照射に基づき、測定を遅らせて他の蛍光物質を消失させてもよい。更に、このラベルは、基質に作用して分析物の量の光学的シグナルの指標を供する酵素であってよい。一の態様において、このプラットホームは、プラットホームの水平面から側部試薬リザーバーに一般に90゜の角度で傾斜する壁により、側部試薬リザーバーと隔てられている。このプラットホームは、その水平面から側部廃棄リザーバーの床に至るまでよりゆるやかな角度、一般には50゜で傾斜している壁により、この側部廃棄リザーバーから隔てられている。本発明の一の態様において、適当な時においてインキュベーション領域の中に存在している液体の均一な混合を保証するために撹拌手段が設けられていてよい。撹拌手段は、インキュベーション領域の中に存在しているドライ試薬が液体サンプル全体にわたって均一に分散されるよう、そのインキュベーション領域において十分なる撹流を作りあげる任意の好適な手段を含んで成りうる。撹拌手段はエアーフロー、振盪、超音波技術又は機械的混合器具を含みうる。撹拌手段が機械的撹拌手段であるとき、一の態様において、インキュベーション領域中のプラットホーム上に、この機械的混合器具を収める少なくとも一のトラフがあるであろう。このトラフはプラットホーム全長にわたって広がっていてよい。このトラフの深さ及び幅は採用する特定の機械的混合器具により指定されるであろう。このトラフは、その混合器具がそのトラフの中に完全に収容されるほどに十分に深いであろう。例えば、混合器具として直径0.39in.のスチールボールを使用するとき、このトラフの深さは0.42in.であってよい。このトラフは混合器具の自由可動を担うほどに十分な幅であろう。この混合器具のトラフは、混合器具に加えてシグナル生成系のドライ試薬を含んで成ってよい。混合器具トラフのいづれかの側面上にあり、且つこの混合器具トラフと平行に走っているのは、このシグナル生成系のドライ試薬を含んで成るトラフでありうる。混合器具トラフと同様に、これらのトラフはインキュベーション領域全長にわたって広がっていてよい。この機械的混合器具は、インキュベーション領域の内容物の混合物を供するように動きうる任意の好適な手段でありうる。撹拌手段としての利用にとって適当な機械的混合器具の例には、マグネチックピン、マグネチックダンベル、穴付きマグネチックシート及びフィンを有するマグネチックディスクが含まれる。好ましくは、２個のステンレススチールボールが混合器具を担うであろう。この混合器具はインキュベーション領域の上面によりトラフの中に拘束されているであろう。この混合器具の寸法を規定するうえで、この混合器具はインキュベーション領域の中に嵌合するほどに十分に小さくあるべきである。更に、この混合器具の動きは、インキュベーション領域からこの装置の別の領域に至る流体の移動をもたらさないものであるべきである。この機械的混合器具は任意の慣用の手段によって動きうる。一般に、強磁性材料により、この装置の上方又は下方で動く適用磁場が、混合器具を動かすのに十分な力を供するであろう。他方、この装置を定常磁場の上で動いてよい。混合器具を含んで成るプラットホームは側部試薬リザーバーから、上壁又は天井の底面の真下の位置にまで及ぶ長方形断面形状リッジにより隔てられているであろう。即ち、側部試薬リザーバーとインキュベーション領域との間での流体の流れのためにキャピラリーフロー空間が設けられている。このプラットホームは側部廃棄リザーバーから、これもインキュベーション領域の上の天井の真下の位置にまで及ぶ台形断面形状のリッジにより隔てられており、これによりこの台形断面形状壁の上を超えて側部廃棄リザーバーに至る流体の流れが供されている。好適な態様において、このインキュベーション領域の天井の真下にまで及ぶ側部リッジを有する代わりに、このプラットホームは混合器具の移動経路のいづれかの側の上に、より浅いリッジを有してよい。このような浅いリッジは、混合器具がインキュベーション領域の縦方向に動く際のそのガイドを担うであろう。インキュベーション領域の下流には上部廃棄リザーバーがあってよく、それはサンプルポートに導入され、輸送チャンネルを流れ、そしてインキュベーション領域の上にくるサンプル及び洗浄溶液を受容するのを担うであろう。ほとんどのアッセイ測定にとって、この上部廃棄リザーバーの容積は約30μｌ〜約２mlに範囲する。即ち、この上部廃棄リザーバーはインキュベーション領域から流体を受容し、そしてその液体にとっての貯蔵リザーバーを担う。この装置の第二フローパスは入口ポートから始まり、側部試薬リザーバーを通過し、インキュベーション領域を横断し、そして側部廃棄リザーバーにおいて終結する。この側部試薬液体添加ポートは側部試薬リザーバーの上に横たわっており、そして側部試薬リザーバーに至る液体の導入を担う。この側部試薬リザーバーは一般に約10μｌ〜500μｌの容積を有するであろう。側部試薬リザーバーの１又は複数の壁を覆っているのは、シグナル生成系の一方の構成員、例えば基質であってよく、この場合、そのラベルは酵素である。他方、この側部試薬リザーバーの床の上には、この試薬を含んで成るトラフがあってよい。このトラフは任意の慣用の形状、例えば楕円形、長方形等であってよい。流体は、側部試薬リザーバーを隔てているリッジの上を超え、そしてインキュベーション領域のプラットホームの上に流れる。そのフローパスはインキュベーション領域を横断し、そして側部試薬リザーバーで終結する。この側部廃棄リザーバーは約10μｌ〜１mlの範囲の容積を有する。即ち、この装置の第二フローパスは第一フローパスと直交し、インキュベーション領域の上で第一フローパスと交差する。側部廃棄リザーバーは第二フローパスの終点を担い、更に第二フローパスを流れ通った流体にとってのリザーバーを担う。この装置は、インキュベーション領域を流れ通る液体の高められたコントロールのための、この第一及び第二フローパス伝いの様々な位置にある、このインキュベーション領域に隣接して置かれたキャピラリーバルブをも含んで成りうる。即ち、このキャピラリーバルブは、側部試薬リザーバーからインキュベーション領域に至る液体の流れをコントロールするよう、この側部試薬リザーバーとインキュベーション領域との間で、第二フローパスに配置されていてよい。更に、キャピラリーバルブはインキュベーション領域の中に人り込む及び／又は出ていく流体の流れをコントロールするように、この第一フローパスに配置されていてよい。このキャピラリーバルブは、課題のフローパスと、好都合には直角で交差するコントロールキャピラリーより成る。このコントロールキャピラリーの深さは交差するフローパスの深さよりも深いであろう。このコントロールキャピラリーは、その中でのキャピラリーフローがフローパスとの交差点において断ち切れることがないようにデザインされている。しかしながら、フローパスにおけるキャピラリーフローは、そのコントロールキャピラリーの液体が空となっているときにはその交差点において断ち切れており、その理由はこのフローパスの深い所における鋭利な障害部による。コントロールキャピラリーが一杯のときのみ、交差フローパスにおけるキャピラリーフローは断ち切られていない。即ち、この装置を流れる流体フローはそのコントロールキャピラリーを液体で充填するか又は空にすることによってコントロールされうる。採用する装置はサイズを変えることができ、通常は約１cm×３cm以上約４cm× ８cm以下であり、好ましくは約１〜３cmの範囲における小さめの寸法及び約３〜８cmの長めの寸法を有する。たいていはこの装置は任意の慣用の形態であってよく、好都合にはそれは長方形であって縁が丸まっている、角が切られていることによって改質された形態であるか、又は操作のし易さ及びこの装置が自動化装置と一緒に使用できるようにすることを可能とするであろうその他の改良形態であろう。この装置の厚みは一般に約１〜５mm、より通常には約１.５〜３mmであろう。この装置のハウジングは通常、互いにシールされ合った２枚のプレートより成るであろう。好都合には、上部ハウジングプレートは主にカバーを担い、且つポート及び光学窓が設けられているであろう。底部ハウジングプレートはこの装置に一体化したリザーバー及びチャンネルにとって必要な様々な構造を担うであろう。従って、様々なリザーバー及びチャンネルが中で成形されているこのプレートは通常カバープレートより厚く、一般にはカバープレートよりも約１.５〜２倍厚い。これらのプレートは、妥当な精度寛容を可能にし、関与する様々な化学薬品に耐え、且つ光学的に透明な領域の存在を可能にする様々なプラスチックから成形されうる。これらの要件を満たすプラスチックにはアクリレート、ポリスチレン、ポリカーボネート、SAN,ABS等が含まれる。この装置の２本のフローパスを説明してきたが、この装置において利用するのに適当なアッセイをこれより説明する。アッセイを実施するうえで、課題の液体及び分析物の種類に応じて、往々にして直接使用するか、又は前処理にかけてから使用する任意のタイプの液体がアッセイできうる。この液体はサンプルを含みうるか、又は任意の起源、例えば生理学的起源、例えば血液、血清、血漿、尿、唾液、髄液、溶解物等に由来するサンプル；生態学的対象サンプル、例えば水、土壌、廃棄流、生物等；食品、例えば肉類、乳製品、植物製品等；薬品又は加工における薬品夾雑物；等であってよい。この分析物は任意のタイプの化合物、例えば小さな有機分子、ペプチド及びタンパク質、糖類、核酸、脂質及びそれらの組合せ、天然もしくは合成物又はそれらの組合せであってよいが、ただしそれらは相補結合性構成員であるに限る。この分析物は検出できる任意の化合物であってよく、そして特異的な結合性ペアーの構成員、即ちリガンド又はリセプターのいづれかであってよい。「レセプター」なる語は任意に使用しており、なぜならその語源は表層膜タンパク質にあり、この場合にその表層膜タンパク質に結合する化合物はリガンドと呼ばれている。レセプターには天然レセプター、例えば酵素、レクチン、表層膜タンパク質、抗体、組換タンパク質等、合成レセプター、核酸等が含まれる。本発明の目的にとって、二分子が互いに対して有意な親和性を有していれば十分であり、この場合の結合定数は通常約10⁷mol^-1以上であり、そしてレセプターとしてはいづれかの構成員を選べばよい。課題の化合物は様々なサンプル起源を指定することによってある程度指定される。この分析物には往々にして、天然及び合成薬品；動物、例えばヒトの様々な成分、例えば血液成分、組織成分、等；微生物、例えば細菌、菌類、原生生物、ウィルス、等；廃棄流又は製品の成分又は商業的加工におけるかかる製品の夾雑物；環境中の成分、特に汚染物、例えば殺虫剤、微生物等が含まれるであろう。サンプルの種類に応じて、このサンプルは前処理、例えば抽出、蒸留、クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、透析、溶解、遠心、濾過、細胞分離等にかけてよい。血液に関し、血漿又は血清を供するために赤血球を除去することが所望されうるが、しかしその除去は必須でない。様々な媒体であって、対象の装置に使用でき、サンプルの溶解又は分散を担うであろうものが採用できうる。必要ならば適宜前処理後、液状のサンプルをサンプルポートに導入する。この装置はサンプルとしての広域な容積を受容するようにデザインされていてよい。即ち、そのサンプルの容量は約１μｌ〜約0.5ml、より通常には約1 0μｌ〜約250μｌ、好ましくは約25μｌ〜170μｌに範囲しうる。サンプルはサンプル適用ポートから毛細管作用を介してサンプル輸送チャンネルを通じて引き抜かれ、その輸送チャンネル中に存在する任意の試薬を溶解及び／又はそれと反応する。サンプルがインキュベーション領域の中に流入する際、それはインキュベーション領域中のドライ試薬と組合さる。このドライ試薬は輸送チャンネルの中に施されていてよいが、しかし通常は、少なくとも部分的に、インキュベーション領域に存在するであろう。ドライ試薬、即ち、ラベル化コンジュゲートはサンプルによって溶解され、そして相補性構成員間（一方の構成員は蛍光脂質膜の上に載っている）の反応が起こるであろう。このアッセイプロトコールは競合又は共同にかかわる。競合の場合、コンジュゲートは分析物又は膜表層上の結合部位のいづれかに結合するであろう。一定数のコンジュゲート分子を有することにより、膜に結合できるコンジュゲート分子の数はサンプル中の分析物の分子数に反比例するであろう。即ち、表層に結合するラベルの数はサンプル中の分析分子の数に反比例するであろう。この手法は小分析物、特にハプテン系の分析物であって、分析物が一個のレセプターとしか結合できない場合に通常採用されるであろう。反対に、ポリエピトープ系である大型分析物では、２つのレセプターが同時に結合する機会がある。この場合、分析物は、膜に結合した相補結合性構成員とラベル化されている相補結合性構成員との間の橋を担いうる。膜に対する結合に関して分析物と競合することのできるコンジュゲートの特異的に結合性なペアーの構成員により、競合プロトコールを利用することもできうる。サンプル中に存在する特異的に結合性なペアーの構成員、即ち分析物が、膜の相補性構成員又は試薬と結合できるよう、インキュベーション領域中の分析物の実質的に完全な反応にとって十分な時間が経過した後、インキュベーション領域、特に脂質膜を洗ってよい。この特異的に結合性なペアーの構成員の結合を保つのに適当な緩衝水性溶液を使用してよい。通常、洗浄溶液の容量は少なくともサンプルの容量と同等とし、そして10倍以上、通常は約７倍以下、又はそれより多く、そして好ましくは約２倍以上でよい。酵素がラベルであるとき、膜により供される蛍光シグナルを調節するため、酵素生成物を供する酵素にとっての基質を用意する必要がある。このインキュベーション領域の片側にある側部試薬リザーバーがこの基質を一般に保持するであろう。この側部試薬リザーバーは入口ポートへの液体の添加によりあふれ、これにより基質を溶かし、そして溶解した基質を含んで成る液体を第二フローパス伝いでインキュベーション領域まで運び、且つある程度上部廃棄リザーバーまで運ぶ。この時に上部廃棄リザーバーに至る流れに対する抵抗が、そのリザーバーの中に既に存在している流体を移動させることの必要性に基づき存在することがあり、このことは事前の洗浄の際のリザーバーの実質的に完全な充填をもたらす。更に、上部リザーバーの深さはインキュベーションポートの最先端において若干深くなっていてよい。この深さの深まりは上部廃棄リザーバーの容量を増大させる。しかしながら、上部廃棄リザーバーの最先端を流体が充満するとき、その駆動力は深さが深まるに従い減少し、この領域に至るまで液体を運ぶ毛細管力を下げる。上部廃棄リザーバーに向う流れに対する強まった抵抗及び上部廃棄の方向における毛細管駆動力の低下は、側部廃棄リザーバーに至る流れの毛細管力の低下を相殺し、そして流体は50 °の傾斜を乗り超える側部廃棄リザーバーへと流れる。この側方流はインキュベーション領域の縁にある全ての残留サンプルを洗い出し、そしてそのインキュベーション領域を基質で満たす。このインキュベーション領域の中に存在する酵素は脂質膜に結合し、そして基質と反応して適当なシグナルを供しうる。このアッセイ測定面は、そのインキュベーション領域の上にある光学的に透明な窓を通じて照射され、膜が励起される。光学シグナル、例えばインキュベーション領域から放射される蛍光の量を集め、そしてカウントする。所望するなら、この光学シグナルを、分析物を含まないものを含む、既知量の分析物によるコントロール値と対比させる。他方、バッファー洗浄工程の後、フィルムの光学的特性の初期測定を行い、そして側部試薬リザーバー来の試薬に対する曝露を経たフィルムの光学的特性と対比させる。この対比は、次にサンプル中の分析物の量に換算できる。レートを決定する一回の測定又は数回の測定を行ってよい。この装置がインキュベーション領域において撹流をもたらす撹拌手段を含むとき、そのアッセイ手順はアッセイプロトコール中の様々な時間においてそのインキュベーション領域の中に撹流を生み出す追加の工程を含んで成る。即ち、第一フローパス伝いに流れるサンプルがインキュベーション領域に到達するとき、そのサンプルを、サンプル液に至るドライ試薬の均一な分散を供するのに十分な時間撹拌する。例えば、撹拌手段が、適用磁場の適用を通じて可動式の２個のスチールボールを含んで成る機械的手段であるとき、このスチールボールは互いを中心に回転し、そして液体中の試薬を分散するのに十分なほどにトラフの縦方向で動く。同様に、洗浄液がインキュベーション領域内に存在するとき、非特異的に結合した試薬及び分析物を充分に分散させるためにその洗浄液中で乱れが行われることができる。その洗浄液がその第一流路に沿って上部廃リザーバーに進むとき、非特異的に結合した分析物及び試薬はそのインキュベーション領域から取り出されるであろう。本使い捨て装置が混合手段（implement）を含んで成る場合、その液体は、そのインキュベーション領域からその側試薬リザーバーを分ける垂直の側のリッジ及びそのインキュベーション領域からその側廃リザーバーを分ける台形断面リッジにより、そのプラットホーム上で拘束される。本使い捨て装置への液体のさまざまな適用は、便利には、適当な機器により自動的に行われることができる。従って、この機器は、適宜、本装置に導入されたサンプル及び洗浄液の容量を測定し、そのインキュベーションを計時し、一定温度を維持し、そして読みを記録することができる。酵素反応により、普通には、読みが計時されるであろうし、又は２以上の読みが所定間隔で記録されるであろう。便利には、本使い捨て装置の適用が自動機器内で行われるとき、本使い捨て装置は、実際の分析物検定手順を走らせる前にその機器内での導管（conduits）をプライムするために使用されたプライミング液を受容するための追加のトラフ（trough）を含んで成ることができる。本装置が本装置内での液流に対する制御を強化するためのキャピラリー・バルブを含んで成る場合、この制御キャピラリーは、適当な時に満たされ、そして空にされるであろう。この制御キャピラリーを満たし、そして空にすることは、本使い捨て装置が使用される機器により達成されることができる。本検定測定表面上の膜は、各セクションが同一又は異なる特異的結合性対合メンバーをもつことができるところの複数のセクションに分けられることができる。この方法で、サンプルは、多数の異なる分析物について同時に検定されることができる。異なる分析物の性質に依存して、同一又は異なる結合体が、そのインキュベーション領域内に存在するであろう。本検定は、読みの時刻を除き同一の方法で行われることができるであろうし、ある者は、別個の領域のそれぞれから生じる蛍光を同定するためにその膜の異なる領域を特に指定するであろう。本発明のさらなる理解のために、これから図面について検討する。図１中、装置（10）は、ハウジング（12）をもつ。本装置は、第１及び第２検定部材、14と16をもつことが示される。各部材は、鏡像として示されることを除き同一であることが理解されよう。その故、左手の部材（14）だけについて討議する。本装置内の第１流路は、輸送チャンネル（20）と接続するサンプル口（18）において開始する。この輸送チャンネル（20）内の空間は、一般的に、約0.001〜0 .100インチ、普通には約0.002〜0.020インチであろう。この輸送チャンネル（20 ）は、サンプル口（18）内に導入されたサンプル又は他の液体を輸送する。インキュベーション領域（22）は、多くの機能を提供する。それは、化学反応が生じ、ある者が、上部表面（24）上に光学的応答層をもつような部位である。この上部表面の反対の、底部表面上に、その上部表面（24）から離れて配置されているインキュベーション・プラットホーム（23）がある。プラットホーム（23 ）は、膜に結合するようになる試薬の量がそのサンプル中の分析物の量に関係付けられるであろうように、その分析物と反応し、又は競合するために役立つ乾燥試薬（単数又は複数）によりコートされることができる。インキュベーション領域内の間隔は、約0.002〜0.050インチ、一般的には、約0.005〜0.015インチであろう。基質が必要な場合、この基質は、側試薬リザーバー（26）内に保存されるであろう。この側試薬リザーバー（26）と反対側のプラットホーム（23）の側上に、側廃リザーバー（28）があるであろう。それ故、第１流路を含んで成る主キャピラリー・チャンネルは、サンプル口（18）に始まり、そして輸送チャンネル（20 ）及びインキュベーション領域（22）を通して延び、そして上部廃リザーバー（ 30）内で終わる。図２（ａ）は、混合手段トラフ（mixing implement trough）を含まない使い捨て装置の、図１中の２−２線に沿っての断面である。可溶性試薬を保存することができる側試薬リザーバー（26）は、プラットホーム（23）及び試薬リザーバー（26）の底に対して急な角度、便利には90°の角度において固定された壁（33 ）をもつ。これに対して、プラットホーム（23）と側廃リザーバー（28）との間の壁（35）は、その側廃リザーバー（28）の床に対してより浅い角度、便利には約50°であろう。図２（ｂ）は、機械的混合手段を含んで成る本使い捨て装置の、図１中の２− ２線に沿った断面である。側試薬リザーバー（26）は、基質のための保存場所として役立つ基質トラフ（27）を含んで成る。この側試薬リザーバーは、プラットホーム（23）及び側試薬リザーバー（26）の底に対して急な角度、便利には90° の角度にある垂直リッジ（32）をもつ。この側試薬リザーバーの反対側の側廃リザーバー（28）は、台形断面をもつリッジによりそのプラットホーム（23）から分けられており、ここで、側廃リザーバーの床に降りるリッジの側は、より浅い角度、便利には約50°にあるであろう。プラットホーム（23）は、混合手段トラフ（94）と、乾燥試薬トラフ（92と96）に分けられる。乾燥試薬トラフからの混合手段トラフの分離は、第１流路に沿って前方への液流を妨害しないように、高さ約0.005〜0.01インチのレンジにあるリッジ（36（ａ）と36（ｂ））である。図２（ａ）中のように、使い捨て装置が混合手段を含まない場合、そのキャピラリー・フロー・チャンネルの深さが増加するとき、その流れを駆動する毛細管力が増加する。50°の傾きにより、このキャピラリーの深さは、短い距離にわたり非常に速く増加し、それ故、同一の短かい距離にわたりかなりドラスティックにその毛細管力を減少させる。90°の傾きにより、そのキャピラリーの深さは即座に変化し、それ故、その端の上でその流れを有効に停止させる毛細管力における中断を引き起こす。従って、液体の流れは、毛細管力における急な減少によりプラットホーム（23）のいずれかの側の上で拘束される。しかしながら、キャピラリー・チャンネルの深さは、（上部廃リザーバーへ向う）その前方において変化せず、そうしてその方向におけるキャピラリー駆動力は、一定のままである。従って、サンプルの流れは、前方において拘束されない。バッファー洗浄溶液がサンプル口（18）を通して導入されるとき、そのバッファーは、そのサンプルを置換し、そしてサンプルとバッファーが、上部廃リザーバー（30）に流れる。再び、その流れは、毛細管力における降下のためにそのプラットホームの両側において拘束されるが、前方においては拘束されない。サンプル適用口内へのバッファーの添加は、そのサンプルのほとんどを上部リザーバー内に洗い流す。バッファーが、入口を通して側試薬リザーバーに添加されるとき、その試薬は、再水和され、そしてプラットホーム領域の上を流れ、そして上部及び側廃リザーバーの両方に液体を流す。この液は、サンプル添加段階の間の初期ではなくこの点において側廃リザーバーに50°の角度上で流れる。なぜなら、このリザーバーが充満又はほとんど充満しているという事実により、この時上部廃リザーバー内に流れることに対する抵抗が付加されるからである。この上部廃リザーバー内への流れに対する抵抗性におけるこの増加は、その上部廃リザーバー内に既に存在する液体を置換するのに必要な追加のエネルギーに部分的に起因する。さらに、これから討議するが、上部廃リザーバーの深さは、サンプル適用口から離れた遠くの端においてわずかに増加し、そしてその液体がその遠くの端を満たす時、毛細管駆動力は、その増加する深さに従って減少する。上部廃リザーバーの増加する深さに図３中に示す。この図は、図１中の３−３線に沿った断面図である。上部廃リザーバー（30）の床（36）は、上部廃リザーバー（30）の裏壁（38）へ下方にわずかな角度において傾いている。便利には、約3.7°の角度が、毛細管力における所望の減少を提供するのに役立つ。上部リザーバーが満たされるとき、上部廃リザーバーの方への流れに対する付加された抵抗性及び毛細管駆動力における減少は、側廃リザーバー（28）内への流れの毛細管駆動力における減少を相殺（offset）し始め、そしてその液は、50 °の傾きの上を側廃リザーバー内に流れ始める。この横方向の流れは、プラットホーム（23）の端にあった残りのサンプルのいずれをも洗い流し、そして基質でインキュベーション領域（22）を満たす。次に、反応がインキュベーション領域（22）内で生じ、そして適宜、機器により読まれることができる。本使い捨て装置が混合手段を含んで成る場合、インキュベーション領域のいずれかの側上への垂直及び水平リッジの設置は、そのインキュベーション領域内の液体を拘束するのに役立つ。従って、本装置内の液流に影響を及ぼす毛細管力は、再び、上部廃リザーバーの方へ、前方において一定のままである。液体が側試薬リザーバーに添加されるとき、その液体は、垂直リッジ上を、インキュベーション領域を横切って、そして台形断面をもつリッジの上で側廃リザーバー内に、流れる。図４は、第１流路を含んで成る主キャピラリー・チャンネル内の傾き（slope ）を示す、図１中の本装置の断面図である。輸送チャンネル（20）は、45°の角度において、サンプル添加口（図示せず）の下の輸送チャンネルの始まりから、プラットホーム（23）上のサンプル・インキュベーション領域（22）まで傾いている。第１流路の残りは、次に、プラットホーム（23）から上部廃リザーバー（ 30）まで、水平である。図５中、本使い捨て装置の底ハウジング・プレート（40）の平面図を示す。入口領域（42）は、棚（ledge 44）と凹（46）をもつ。輸送チャンネル（48）は、上部廃リザーバー（52）内に空になるまでプラットホーム反応領域（50）を通して一定の深さで維持される。輸送チャンネルは、一般的に、底ハウジング（40）の表面からへこんでいるであろう。プラットホーム領域（50）の片側上に、側試薬リザーバー（54）がある。他の側の上に、側廃リザーバー（56）がある。先に討議したように、上部廃リザーバーは、その上部廃リザーバー（52）の端壁（60 ）に近づく領域（58）内の底ハウジング（40）の上部表面の平面から遠くに、徐々に降下する。第１及び第２止め（detents）、（62と64）は、底ハウジングと上部ハウジングのレジストリー（registry）のために提供される。本使い捨て装置が、上記機器内に位置する導管の液体プライミングを要求する機器と共に使用されるとき、その機器からのプライミング液を集めるのに役立つトラフ（60）が提供される。例えば、いくつかの機器が、本使い捨て装置内へ液を導入するためにその後に使用される機器の導管内で使用されるプライミング液を使用する。このようなプライミング液が使用されるとき、その液は、本装置のトラフ（66）内の機器から集められる。この方法で、その中で本使い捨て装置が使用される機器は、内部リザーバーをもつ必要がない。なぜなら、各使い捨て装置は、実際の検定に先立って特定の機器内で使用されるプライミング液を担持するであろう。トラフ（66）の裏は、図示しないが、カートリッジが容易に保持されるようにすることに役立つリッジをもつ。ノッチ（68）は、スプリング入りボール・ベアリングが本装置をその場にロックすることができる場合に、その結果を読むための機器内に本装置をレジスターするのに役立つ。図６中、止め（62）ト（64）を受容するための、それぞれ第１と第２穴（72と 74）をもつ上部ハウジング・プレート（70）を示す。先に記載したように、このハウジング内の２つの検定部材は同一なので、本検定部材の中の１の成分についてのみ記載する。サンプル口（76）は、入口領域（42）と凹（46）の上のレジスター内にあるように提供される。サンプル口（76）は、それが液をチャンネル内にフィードするときその液サンプルを保持することができるように、逆切断円錐を形成する。光学窓（78）は、その窓が損傷を受け又はひっかかれないようにするために上部プレートの上部表面のプレートからへこんでいる。望ましくは、この窓（78）を除いて、底及び上部ハウジングの外側表面は、半透明になるように、質感を与えられる。光学窓（78）は、インキュベーション領域（50）の上に直接的に置かれ、一方、片側上に、そして試薬リザーバー（54）の上に、バッファー溶液を添加するための手段にフィットする三角形の開口をもつスロットのような形状である添加口（82）がある。空気口又はベント（84）は、プラットホーム領域（50）上の試薬リザーバー（54）から側廃リザーバー（56）に液が通過するとき空気の逃げを許容するために提供される。口ベントとしてのスロットの使用は、液のスムーズで、均一な拡がりを確保するのに役立つ。第２空気口（86）は、上部廃リザーバー（52）からの空気の逃げのために提供される。ノッチ口（88）は、トラフ（66）へのアクセスを提供し、これも空気口（90）をもつ。底ハウジングのノッチ（68）とは異なる形状をもつノッチ（92）は、ノッチ（68）とのレジストリー内にあり、そして本装置をその場にロックするためのボール・ベアリングのための空間を提供する。図７は、インキュベーション領域内に撹拌（agitation）手段を含んで成る使い捨て装置の第２流路の平面図であ。この第２流路は、側試薬リザーバー（26）に始まる。この側試薬リザーバー内の試薬は、そのリザーバーの床の上のへこんだトラフ（27）内に特に保存される。垂直リッジ（32）を横切って、第１乾燥試薬トラフ（92）が横たわる。乾燥試薬トラフ（92）は、リッジ（36（ａ））により混合手段トラフ（94）から分離される。この混合手段トラフ（94）は、機械的混合手段（図示せず）を収納する。リッジ（36（ｂ））を横切って、第２乾燥試薬トラフ（96）が横たわる。最後に、台形断面をもつリッジ（34）を横切って、側廃リザーバー（28）が横たわる。図８中、インキュベーション領域を通しての流れを制御するためにそのインキュベーション領域の隣りに置かれることができるキャピラリー・バルブの、上からの、３次元図を示す。キャピラリー・バルブ（100）は、制御キャピラリー（1 04）が交差（106）において液キャピラリー・チャンネル（102）を横切るように、互いに直角において、液流キャピラリー・チャンネル（102）と制御キャピラリー（1 04）を含んで成る。この交差は、制御キャピラリー（104）が空のとき、流キャピラリー・チャンネル（102）内の液流を遮断するが、それが満たされているとき、流キャピラリー・チャンネル（102）を通しての液流を妨害しない。このキャピラリー・チャンネルは、本装置を通しての液流の制御を強化するために本装置の液流路内のさまざまな位置に置かれることができる。例えば、側試薬リザーバーからのインキュベーション領域への液流の強化された制御が望ましい場合、このキャピラリー・バルブ（106）は、側試薬リザーバーとインキュベーション領域との間の本使い捨て装置内に置かれるであろう。流キャピラリー・チャンネル（102）は、側試薬リザーバーとインキュベーション領域との間のチャンネルに対応するであろうし、一方、制御キャピラリー（104）は、インキュベーション領域の端に平行して走り、これ故、流れキャピラリー・チャンネル（ 102）を横切るであろう。本装置を組み立てるために、適当な試薬を、例えば、乾燥試薬トラフの表面をコーティングするそれらの適当な部位に置く。膜は、適宜、基質、インキュベーション上部表面領域内に、側試薬リザーバー内に、置かれ、そして結合体（乾燥試薬）は、窓の真下のトラフ・プラットホーム床上に置かれ、又は適宜、トラフ表面上にコートされる。膜は、慣用の手段により窓の下の上部ハウジング表面に容易に移される。試薬が置かれた後、その上部ハウジングは、底ハウジングの上にレジストリー内に置かれることができ、そしてその端は、いずれかの適当な手段、例えば超音波溶接、接着剤、等によりシールされる。次に、この装置は、その後の使用のために保存されるべく準備される。２検定を走らせることができるので、この２検定部材は、１の検定及びＩの対照のため、２サンプルのための同一検定のため、又は、同一又は異なるサンプルのための２つの異なる検定のために使用されることができる。従って、さまざまな形態のプロトコールが、所望の検定の性質に依存して使用されることができる。さらに、ある者は、１の検定又は２以上の複数の検定による装置をもつことができ、そしてある者は、関係する多くの検定に従って、適宜、そのサイズを変化させることができる。検定が実質的に自動で行われることができるように、ある者がサンプル及び洗浄液の自動的添加を提供することができる場合、便利な使い捨て検定装置が提供されることが、先の記載から自明である。従って、その操作の技術的要求は、操作にとってかなり小さいものであり、そしてある者は、非常な高感度をもって再現性及び精度を得ることができる。本装置は、装置の大きな包装が容易に輸送されることができるように、平たく、かつ、薄くあって、保存が容易である。試薬は、特に、本装置に入る水分及び空気が実質的に存在しないことを確保するように、本装置が巻かれることができる場合に、汚染から保護される。本明細書中に引用する刊行物及び特許出願の全てを、あたかも各個々の刊行物又は特許出願が引用により取り込まれるべく特別に、かつ、個々に意図されるように、引用により本明細書中に取り込む。これまで、本発明を、理解の明確さを目的に説明及び実施例によりいくぶん詳細に説明してきたけれども、特定の変更及び修正が添付クレームの核心又は範囲から外れずに本発明になされることは、本発明の技術分野における当業者には自明であろう。

【手続補正書】特許法第１８４条の８【提出日】１９９５年２月１３日【補正内容】請求の範囲１．分析物を測定するための検定における使用のための使い捨て装置であって：ハウジングであって、そのハウジングが：インキュベーション領域であってそのインキュベーション領域を通しての毛細管流れを提供するための分離された上部及び底部表面をもつようなインキュベーション領域を含んで成るハウジング；そのハウジングの１端に近い、サンプル入口；上記サンプル入口に上記インキュベーション領域を接続する輸送チャンネル；上記インキュベーション領域のそれぞれの側上のリザーバーであって側試薬リザーバー及び上記インキュベーション領域の反対側上の側廃リザーバーを含んで成るもの、並びに上記輸送チャンネルの反対側の上部廃リザーバー、その上部及び側廃リザーバーがガス放出口をもち、その側試薬リザーバーが上記キャピラリー・チャンネルにより定められる流れ方向と直行する液の流れを許容する入口をもつようなもの；及び見るための上記インキュベーション領域上の光学的に透明な窓、を含んで成る、診断用使い捨て装置。２．前記インキュベーション領域内に撹拌手段をさらに含んで成る、請求項１に記載の診断用使い捨て装置。３．底部表面が、撹拌手段をインキュベーション領域内の限定された領域に位置決めするための手段を含んで成る、請求項２に記載の診断用使い捨て装置。４．インキュベーション領域を通して毛細管流れを制御するためのそのインキュベーション領域に隣接するキャピラリー・バルブをさらに含んで成る、請求項１に記載の診断用使い捨て装置。５．分析物を測定するための検定における使用のための使い捨て装置であって：ハウジングであって、蛍光脂質膜を含んで成る検定装置を含んで成り、特異的結合対膜がその膜の１外面に近づいており；そのハウジング内のインキュベーション領域であって上部及び底部表面をもち；その上部表面が上記蛍光脂質膜を支持し；底部表面が試薬を支持することができ、それらの表面がそのインキュベーション領域を通しての毛細管流れを提供するために分離されているようなインキュベーション領域；そのハウジングのＩ端に近い、サンプル入口；上記サンプル入口に上記インキュベーション領域を接続する輸送チャンネル；上記インキュベーション領域のそれぞれの側上の側リザーバーであって入口をもつ側試薬リザーバー及び側廃リザーバーであるもの、並びに上記輸送チャンネルと反対側の上記インキュベーション領域から下流の上部廃リザーバー、その上部及び側廃リザーバーがガス放出口をもつ；及び見るための上記蛍光脂質の上の場合により透明な窓、を含んで成る診断用使い捨て装置。６．底部表面から延びた底部表面の両方の側壁が、毛細管力を実質的に減少させるために側リザーバーに急に下がる、請求項５に記載の診断用使い捨て装置。７．底部表面がその表面上に試薬をコートされており、その試薬が検定の間に蛍光脂質膜と相互作用する、請求項５に記載の使い捨て装置。８．底部表面が、撹拌手段であって混合手段トラフ内に置かれているものを含んで成る、請求項５に記載の診断用使い捨て装置。９．底部表面が、混合手段トラフと平行して走る乾燥試薬トラフを含んで成り、そして乾燥試薬トラフの壁が乾燥試薬によりコートされている、請求項８に記載の診断用使い捨て装置。 10．ハウジングがトラフをもち、そのトラフの入口及びガス放出口が、プライミング又は他の廃液を受容するための検定装置と接続されていない、請求項５に記載の診断用使い捨て装置。 11．上部廃リザーバーの深さが、インキュベーション領域から遠くで増す、請求項５に記載の診断用使い捨て装置。 12．インキュベーション領域を通しての毛細管流れを制御するためにそのインキュベーション領域の隣りに置かれたキャピラリー・バルブをさらに含んで成る、請求項５に記載の診断用使い捨て装置。 13．診断用使い捨て装置であって：ハウジングであって、それが互いに固定された上部プレート及び底部プレートを含んで成り、１のプレートが止めをもち、そして他のプレートがそれらのプレートをインデックス（indexing）するためのオリフィスをもち、それが蛍光脂質膜を含んで成る検定装置を含む、ようなハウジング；そのハウジング内のインキュベーション領域であって上部及び底部表面をもち；その上部表面が上記蛍光脂質膜を支持し、ここで、特異的結合対膜がその膜の一外面に近く、そしてその第２表面が試薬を支持することができ、それらの表面がそのインキュベーション領域を通しての毛細管流れを提供するために分離されており；その第２表面が混合手段トラフ内に撹拌手段を含んで成り、そして２つの乾燥試薬トラフがその混合手段トラフに平行して走り、ここで、乾燥試薬がそれらのトラフの表面をコートしている、ようなインキュベーション領域；そのハウジングの１端に近い、サンプル入口；上記サンプル入口に上記インキュベーション領域を接続する輸送チャンネル；上記インキュベーション領域のそれぞれの側上の側リザーバーであって側試薬リザーバー及びそのインキュベーション領域の反対側上の側廃リザーバーであるもの、並びに上記輸送チャンネルと反対側の上記インキュベーション領域から下流の上部廃リザーバー、その上部及び側廃リザーバーがガス放出口をもち、その側試薬リザーバーが入口をもち、そのガス放出口がその上部及び側廃リザーバーの１つの側に沿って延びたスロットである、ようなリザーバー；及び見るための上記蛍光脂質の上の場合により透明な窓、を含んで成る診断用使い捨て装置。 14．乾燥試薬が、蛍光脂質膜と相互作用する、請求項13に記載の診断用使い捨て装置。 15．試薬が酵素結合体であり、そして側試薬保存リザーバーが、酵素基質を含む、請求項14に記載の診断用使い捨て装置。 16．ハウジングが複数の検定装置を含んで成る、請求項13に記載の診断用使い捨て装置。 17．ハウジングがトラフをもち、そのトラフのための入口及びガス放出口が診断用使い捨て装置内に収納された検定装置と接続されておらず、そのトラフがその診断用使い捨て装置を収納する機器からのプライミング又は他の廃液を受容するのに役立ち、そしてその機器との液採取関係にあるような、請求項13に記載の診断用使い捨て装置。 18．主廃リザーバーの深さが、インキュベーション領域から遠くで増加する、請求項13に記載の診断用使い捨て装置。 19．プレートが、成形可能なプラスチックから作られ、そしてプレートが一緒に溶融される、請求項13に記載の診断用使い捨て装置。 20．本装置が、インキュベーション領域を通してのその毛細管流れの制御のために、そのインキュベーション領域に隣接して配置されたキャピラリー・バルブをさらに含んで成る、請求項13に記載の診断用使い捨て装置。 21．サンプル中で分析物を測定するための方法であって：インキュベーション領域にサンプルを添加し、そのインキュベーション領域が蛍光脂質膜を支持する上部表面、ここで、特異的結合対膜がその膜の一外面に近く、及び酵素結合体試薬を支持する底部表面を含んで成り、それらの表面がそのインキュベーション領域を通しての毛細管流れを提供するために離れて置かれており；上記サンプルが上記インキュベーション領域を通して動くことを許容し、それにより上記酵素結合体が溶解され、そしてそのサンプル中に存在する分析物の量に比例して上記蛍光脂質膜に結合し；上記インキュベーション領域を洗浄して、そのインキュベーション領域がサンプル成分及び非結合の結合体を実質的に含まないように洗浄し；上記インキュベーション領域内に酵素基質を含んで成る検定溶液を導入し、それにより、上記蛍光脂質膜の蛍光を調節（modulates）する酵素生成物が作られ；上記蛍光脂質膜上の場合により透明な窓を通してその蛍光脂質膜を照射し、それによりその脂質膜が励起され、そして蛍光を発し；そして少なくとも１回その蛍光強度を測定して、上記サンプル中の分析物の存在を測定する、を含んで成る方法。 22．分析物が、ハプテンである、請求項21に記載の方法。 23．分析物が、抗原である、請求項21に記載の方法。 24．分析物及び酵素結合体が、脂質膜への結合において競合する、請求項21に記載の方法。 25．分析物が、脂質膜及び酵素結合体を橋かける、請求項21に記載の方法。 26．方法が、インキュベーション領域中のサンプルを撹拌することをさらに含んで成る、請求項21に記載の方法。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＣＡ，ＪＰ (72)発明者ソール，トムアメリカ合衆国，カリフォルニア 94038 モスビーチ，ピー．オー．ボックス 372 (72)発明者ラングフォード，ジェフリー，ビー. アメリカ合衆国，カリフォルニア 94044 パシフィカ，テラノバブールバード 1172

Claims

【特許請求の範囲】１．診断用使い捨て装置であって：分析物を測定するための検定における使用のためのハウジングであって：インキュベーション領域であってそのインキュベーション領域を通しての毛細管流れを提供するための分離された上部及び底部表面をもつようなインキュベーション領域を含んで成るハウジング；そのハウジングの１端に近い、サンプル入口；上記サンプル入口に上記インキュベーション領域を接続する輸送チャンネル；上記インキュベーション領域のそれぞれの側上のリザーバーであって側試薬リザーバー及び上記インキュベーション領域の反対側上の側廃リザーバーを含んで成るもの、並びに上記輸送チャンネルの反対側の上部廃リザーバー、その上部及び側廃リザーバーがガス放出口をもち、その側試薬リザーバーが上記キャピラリー・チャンネルにより定められる流れ方向と直行する液の流れを許容する入口をもつようなもの；及び見るための上記インキュベーション領域上の光学的に透明な窓、を含んで成る、診断用使い捨て装置。２．前記インキュベーション領域内に撹拌手段をさらに含んで成る、請求項１に記載の診断用使い捨て装置。３．底部表面が、撹拌手段をインキュベーション領域内の限定された領域に位置決めするための手段を含んで成る、請求項２に記載の診断用使い捨て装置。４．インキュベーション領域を通して毛細管流れを制御するためのそのインキュベーション領域に隣接するキャピラリー・バルブをさらに含んで成る、請求項１に記載の診断用使い捨て装置。５．診断用使い捨て装置であって：ハウジングであって蛍光脂質膜を含んで成る検定装置を含むもの；そのハウジング内のインキュベーション領域であって上部及び底部表面をもち；その上部表面が上記蛍光脂質膜を支持し；底部表面が試薬を支持することができ、それらの表面がそのインキュベーション領域を通しての毛細管流れを提供するために分離されているようなインキュベーション領域；そのハウジングの１端に近い、サンプル入口；上記サンプル入口に上記インキュベーション領域を接続する輸送チャンネル；上記インキュベーション領域のそれぞれの側上の側リザーバーであって入口をもつ側試薬リザーバー及び側廃リザーバーであるもの、並びに上記輸送チャンネルと反対側の上記インキュベーション領域から下流の上部廃リザーバー、その上部及び側廃リザーバーがガス放出口をもつ；及び見るための上記蛍光脂質の上の場合により透明な窓、を含んで成る診断用使い捨て装置。６．底部表面から延びた底部表面の両方の側壁が、毛細管力を実質的に減少させるために側リザーバーに急に下がる、請求項５に記載の診断用使い捨て装置。７．底部表面がその表面上に試薬をコートされており、その試薬が検定の間に蛍光脂質膜と相互作用する、請求項５に記載の使い捨て装置。８．底部表面が、撹拌手段であって混合手段トラフ内に置かれているものを含んで成る、請求項５に記載の診断用使い捨て装置。９．底部表面が、混合手段トラフと平行して走る乾燥試薬トラフを含んで成り、そして乾燥試薬トラフの壁が乾燥試薬によりコートされている、請求項８に記載の診断用使い捨て装置。 10．ハウジングがトラフをもち、そのトラフの入口及びガス放出口が、プライミング又は他の廃液を受容するための検定装置と接続されていない、請求項５に記載の診断用使い捨て装置。 11．上部廃リザーバーの深さが、インキュベーション領域から遠くで増す、請求項５に記載の診断用使い捨て装置。 12．インキュベーション領域を通しての毛細管流れを制御するためにそのインキュベーション領域の隣りに置かれたキャピラリー・バルブをさらに含んで成る、請求項５に記載の診断用使い捨て装置。 13．診断用使い捨て装置であって：ハウジングであって、それが互いに固定された上部プレート及び底部プレートを含んで成り、１のプレートが止めをもち、そして他のプレートがそれらのプレートをインデックス（indexing）するためのオリフィスをもち、それが蛍光脂質膜を含んで成る検定装置を含む、ようなハウジング；そのハウジング内のインキュベーション領域であって上部及び底部表面をもち；その上部表面が上記蛍光脂質膜を支持し；その第２表面が試薬を支持することができ、それらの表面がそのインキュベーション領域を通しての毛細管流れを提供するために分離されており；その第２表面が混合手段トラフ内に撹拌手段を含んで成り、そして２つの乾燥試薬トラフがその混合手段トラフに平行して走り、ここで、乾燥試薬がそれらのトラフの表面をコートしている、ようなインキュベーション領域；そのハウジングの１端に近い、サンプル入口；上記サンプル入口に上記インキュベーション領域を接続する輸送チャンネル；上記インキュベーション領域のそれぞれの側上の側リザーバーであって側試薬リザーバー及びそのインキュベーション領域の反対側上の側廃リザーバーであるもの、並びに上記輸送チャンネルと反対側の上記インキュベーション領域から下流の上部廃リザーバー、その上部及び側廃リザーバーがガス放出口をもち、その側試薬リザーバーが入口をもち、そのガス放出口がその上部及び側廃リザーバーの１つの側に沿って延びたスロットである、ようなリザーバー；及び見るための上記蛍光脂質の上の場合により透明な窓、を含んで成る診断用使い捨て装置。 14．乾燥試薬が、蛍光脂質膜と相互作用する、請求項13に記載の診断用使い捨て装置。 15．試薬が酵素結合体であり、そして側試薬保存リザーバーが、酵素基質を含む、請求項14に記載の診断用使い捨て装置。 16．ハウジングが複数の検定装置を含んで成る、請求項13に記載の診断用使い捨て装置。 17．ハウジングがトラフをもち、そのトラフのための入口及びガス放出口が診断用使い捨て装置内に収納された検定装置と接続されておらず、そのトラフがその診断用使い捨て装置を収納する機器からのプライミング又は他の廃液を受容するのに役立ち、そしてその機器との液採取関係にあるような、請求項13に記載の診断用使い捨て装置。 18．主廃リザーバーの深さが、インキュベーション領域から遠くで増加する、請求項13に記載の診断用使い捨て装置。 19．プレートが、成形可能なプラスチックから作られ、そしてプレートが一緒に溶融される、請求項13に記載の診断用使い捨て装置。 20．本装置が、インキュベーション領域を通してのその毛細管流れの制御のために、そのインキュベーション領域に隣接して配置されたキャピラリー・バルブをさらに含んで成る、請求項13に記載の診断用使い捨て装置。 21．サンプル中で分析物を測定するための方法であって：インキュベーション領域にサンプルを添加し、そのインキュベーション領域が蛍光脂質膜を支持する上部表面及び酵素結合体試薬を支持する底部表面を含んで成り、それらの表面がそのインキュベーション領域を通しての毛細管流れを提供するために離れて置かれており；上記サンプルが上記インキュベーション領域を通して動くことを許容し、それにより上記酵素結合体が溶解され、そしてそのサンプル中に存在する分析物の量に比例して上記蛍光脂質膜に結合し；上記インキュベーション領域を洗浄して、そのインキュベーション領域がサンプル成分及び非結合の結合体を実質的に含まないように洗浄し；上記インキュベーション領域内に酵素基質を含んで成る検定溶液を導入し、それにより、上記蛍光脂質膜の蛍光を調節（modulates）する酵素生成物が作られ；上記蛍光脂質膜上の場合により透明な窓を通してその蛍光脂質膜を照射し、それによりその脂質膜が励起され、そして蛍光を発し；そして少なくとも１回その蛍光強度を測定して、上記サンプル中の分析物の存在を測定する、を含んで成る方法。 22．分析物が、ハプテンである、請求項21に記載の方法。 23．分析物が、抗原である、請求項21に記載の方法。 24．分析物及び酵素結合体が、第１膜への結合において競合する、請求項21に記載の方法。 25．分析物が、第１膜及び酵素結合体を橋かける、請求項21に記載の方法。 26．方法が、インキュベーション領域中のサンプルを撹拌することをさらに含んで成る、請求項21に記載の方法。