JPH0829324A - 走査型光学測定装置 - Google Patents
走査型光学測定装置Info
- Publication number
- JPH0829324A JPH0829324A JP16225394A JP16225394A JPH0829324A JP H0829324 A JPH0829324 A JP H0829324A JP 16225394 A JP16225394 A JP 16225394A JP 16225394 A JP16225394 A JP 16225394A JP H0829324 A JPH0829324 A JP H0829324A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- optical
- scanning
- sample
- measuring device
- laser
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Landscapes
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By Optical Means (AREA)
- Mechanical Optical Scanning Systems (AREA)
- Microscoopes, Condenser (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 蛍光標識の検出感度が高い走査型光学測定装
置を提供すること。 【構成】 ガルバノメーターミラー４は、アクチュエー
ター５により紙面と直交する軸で往復回動されることに
より、集光レンズ２，ダイクロイックミラー３を経て入
射したレーザ光源１からのレーザビームを走査するよう
になされている。他方、このガルバノメーターミラー４
は、位置決め手段２３によって偏心オフセット角が決定
されるようになされている。そのため、主に瞳投影レン
ズ６の入射第１面からの反射光は、蛍光検出器２２へ入
射しないようになされている。
置を提供すること。 【構成】 ガルバノメーターミラー４は、アクチュエー
ター５により紙面と直交する軸で往復回動されることに
より、集光レンズ２，ダイクロイックミラー３を経て入
射したレーザ光源１からのレーザビームを走査するよう
になされている。他方、このガルバノメーターミラー４
は、位置決め手段２３によって偏心オフセット角が決定
されるようになされている。そのため、主に瞳投影レン
ズ６の入射第１面からの反射光は、蛍光検出器２２へ入
射しないようになされている。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、走査型光学測定装置に
関し、例えば、蛍光色素で生化学的に標識された生物細
胞集団の個々の細胞に対して、レーザスポットを照射し
て励起させ、該個々の細胞が発する蛍光を測定する場合
などに用いて好適な走査型光学測定装置に係るものであ
る。
関し、例えば、蛍光色素で生化学的に標識された生物細
胞集団の個々の細胞に対して、レーザスポットを照射し
て励起させ、該個々の細胞が発する蛍光を測定する場合
などに用いて好適な走査型光学測定装置に係るものであ
る。
【０００２】
【従来の技術】特開平３−２５５３６５号公報には、
“生物標本の複数の光学的特性を測定する方法及び装
置”と題して、光源からの光ビーム、即ちこの場合には
レーザビームを収束したレーザスポットによってスライ
ドグラス上の細胞集団を２次元的に走査させ、該細胞集
団の個々の細胞が発する蛍光等を検出してデータ処理す
るもの（以下、走査型サイトメーターという）が開示さ
れている。
“生物標本の複数の光学的特性を測定する方法及び装
置”と題して、光源からの光ビーム、即ちこの場合には
レーザビームを収束したレーザスポットによってスライ
ドグラス上の細胞集団を２次元的に走査させ、該細胞集
団の個々の細胞が発する蛍光等を検出してデータ処理す
るもの（以下、走査型サイトメーターという）が開示さ
れている。
【０００３】走査型サイトメーターと同じように、蛍光
色素で生化学的に標識された生物細胞集団の個々の細胞
にレーザスポットを照射・励起し、個々の細胞の発する
蛍光を測定し、得られたデータを細胞集団の免疫的特
性、遺伝的特性、細胞増殖性を表わす統計的なデータと
して解析し提示する測定装置として、フローサイトメー
ターが知られている。又、走査型サイトメーターに構成
上類似した装置として、走査型レーザ顕微鏡が知られて
いるが、この装置は、個々の細胞の細胞内構造を明らか
にするために、個々の細胞の画像を提示するだけの装置
である。
色素で生化学的に標識された生物細胞集団の個々の細胞
にレーザスポットを照射・励起し、個々の細胞の発する
蛍光を測定し、得られたデータを細胞集団の免疫的特
性、遺伝的特性、細胞増殖性を表わす統計的なデータと
して解析し提示する測定装置として、フローサイトメー
ターが知られている。又、走査型サイトメーターに構成
上類似した装置として、走査型レーザ顕微鏡が知られて
いるが、この装置は、個々の細胞の細胞内構造を明らか
にするために、個々の細胞の画像を提示するだけの装置
である。
【０００４】そこで、走査型サイトメーターとフローサ
イトメーターの基本構成を図６に示す。
イトメーターの基本構成を図６に示す。
【０００５】図６（ａ）はフローサイトメーターを示し
ている。単離浮遊状態の細胞Ａのジェット水流３１を縦
軸とし、その横断面上に集光レンズ３３を含むレーザ光
学系３２が配置され、それらと空間的に分離し且つ直交
する位置に蛍光検出光学系３４とバリアフィルター３５
が配置されている。符号３６は前方散乱光検出用光学系
である。フローサイトメーターはこのような構成をして
いるため、レーザビームは蛍光検出光学系３４へは入射
しない。厳密に言うと、レーザビームの入射角に対して
直交する方向への散乱（側方散乱）が生じるが、その散
乱強度は強くないためバリアフィルター３５で遮断され
る。このフローサイトメーターでは、レーザとして空冷
アルゴンレーザが一般に用いられており、蛍光標識とし
ては通常の蛍光顕微鏡で実績のあるＦＩＴＣ（FIuoresc
ein isothiocyanate）が最も普通に用いられている。
ている。単離浮遊状態の細胞Ａのジェット水流３１を縦
軸とし、その横断面上に集光レンズ３３を含むレーザ光
学系３２が配置され、それらと空間的に分離し且つ直交
する位置に蛍光検出光学系３４とバリアフィルター３５
が配置されている。符号３６は前方散乱光検出用光学系
である。フローサイトメーターはこのような構成をして
いるため、レーザビームは蛍光検出光学系３４へは入射
しない。厳密に言うと、レーザビームの入射角に対して
直交する方向への散乱（側方散乱）が生じるが、その散
乱強度は強くないためバリアフィルター３５で遮断され
る。このフローサイトメーターでは、レーザとして空冷
アルゴンレーザが一般に用いられており、蛍光標識とし
ては通常の蛍光顕微鏡で実績のあるＦＩＴＣ（FIuoresc
ein isothiocyanate）が最も普通に用いられている。
【０００６】他方、図６（ｂ）は走査型サイトメーター
を示している。この走査型サイトメーターは走査型レー
ザ顕微鏡と同じように、レーザ光学系４１と蛍光検出光
学系４２が顕微鏡光学系４６を共有する同軸落射光学系
で構成されており、レーザ光学系４１と蛍光検出光学系
４２はダイクロイックミラー４４で分離され、蛍光検出
光学系４２の前面にはバリアフィルター４３が配置され
ている。細胞Ａはスライドグラス４７上に静置されてお
り、レーザスポットは、１次元スキャナー４５によりＹ
軸方向へ光学的に走査され、またスライドグラス４７を
機械的に動かすことによってＸ軸方向へ走査される。符
号４８は前方散乱光検出用光学系である。
を示している。この走査型サイトメーターは走査型レー
ザ顕微鏡と同じように、レーザ光学系４１と蛍光検出光
学系４２が顕微鏡光学系４６を共有する同軸落射光学系
で構成されており、レーザ光学系４１と蛍光検出光学系
４２はダイクロイックミラー４４で分離され、蛍光検出
光学系４２の前面にはバリアフィルター４３が配置され
ている。細胞Ａはスライドグラス４７上に静置されてお
り、レーザスポットは、１次元スキャナー４５によりＹ
軸方向へ光学的に走査され、またスライドグラス４７を
機械的に動かすことによってＸ軸方向へ走査される。符
号４８は前方散乱光検出用光学系である。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記のサイ
トメーターのうち走査型サイトメーターに関するもので
あるが、この走査型光学測定装置においては、レーザと
して空冷アルゴンレーザを用い、蛍光標識としてＦＩＴ
Ｃを用いるようにした場合、レーザの励起波長（４８８
nm）と蛍光波長が近接しているためバリアフィルターの
通過波長帯域を狭くする必要があるが、該波長帯域を狭
くすると検出感度が低下してしまうことがあるため、ダ
イクロイックミラーとバリアフィルターの組合せによる
光学的な分離には必然的に限界がある。このため、特に
顕微鏡光学系において、光学的偏向器通過後のレンズ入
射第１面で反射したレーザ光が蛍光検出光学系へ迷光
し、センターフレアーを発生させるため、蛍光標識の検
出感度が低下してしまうという欠点があった。
トメーターのうち走査型サイトメーターに関するもので
あるが、この走査型光学測定装置においては、レーザと
して空冷アルゴンレーザを用い、蛍光標識としてＦＩＴ
Ｃを用いるようにした場合、レーザの励起波長（４８８
nm）と蛍光波長が近接しているためバリアフィルターの
通過波長帯域を狭くする必要があるが、該波長帯域を狭
くすると検出感度が低下してしまうことがあるため、ダ
イクロイックミラーとバリアフィルターの組合せによる
光学的な分離には必然的に限界がある。このため、特に
顕微鏡光学系において、光学的偏向器通過後のレンズ入
射第１面で反射したレーザ光が蛍光検出光学系へ迷光
し、センターフレアーを発生させるため、蛍光標識の検
出感度が低下してしまうという欠点があった。
【０００８】本発明は、上記のような問題点を解決する
ためになされたものであって、その目的とするところ
は、光源からの光学的ビームを標本に対して主走査方向
へ走査する光学的偏向手段上において、該光学的ビーム
を該主走査方向と直交する副走査方向へオフセット角度
を与えて偏心させることにより、蛍光標識の検出感度が
高くなるようにした走査型光学測定装置を提供すること
である。
ためになされたものであって、その目的とするところ
は、光源からの光学的ビームを標本に対して主走査方向
へ走査する光学的偏向手段上において、該光学的ビーム
を該主走査方向と直交する副走査方向へオフセット角度
を与えて偏心させることにより、蛍光標識の検出感度が
高くなるようにした走査型光学測定装置を提供すること
である。
【０００９】
【課題を解決するための手段】上記の目的を達成するた
めに、本発明は、光源からの光学的ビームを光学的偏向
手段により、被測定対象の標本に対する主走査方向へ１
次元走査させると共に、該主走査方向と直交する副走査
方向に前記標本を物理的／機械的に移動して２次元走査
させ、該標本からの後方散乱光を含む反射光及び／又は
蛍光を検出器で検出して測定する走査型光学測定装置に
おいて、前記光学的偏向手段が、主走査方向に１次元走
査される光学的ビームを、副走査方向へオフセット角度
を与え偏心せしめるようにして配置されていることを特
徴としている。
めに、本発明は、光源からの光学的ビームを光学的偏向
手段により、被測定対象の標本に対する主走査方向へ１
次元走査させると共に、該主走査方向と直交する副走査
方向に前記標本を物理的／機械的に移動して２次元走査
させ、該標本からの後方散乱光を含む反射光及び／又は
蛍光を検出器で検出して測定する走査型光学測定装置に
おいて、前記光学的偏向手段が、主走査方向に１次元走
査される光学的ビームを、副走査方向へオフセット角度
を与え偏心せしめるようにして配置されていることを特
徴としている。
【００１０】
【作用】主走査方向に、光学的に１次元走査されるレー
ザビームを、主走査方向と直交する副走査方向、即ち標
本を物理的・機械的に移動させる方向に、オフセット角
度を与え偏心させる。これによって顕微鏡光学系からの
反射光がレーザ光学系に戻らないようにし、且つ蛍光検
出光学系へ入射しないようにする。従って、顕微鏡光学
系からのレーザ反射光が分光学的手段だけではなく空間
的にも蛍光検出光学系と分離されるので、レーザ反射光
が蛍光検出光学系へ迷光し、センターフレアーが生じる
のを防ぐことができる。そのため、バリアフィルターの
通過波長帯域を無理に狭くする必要がなくなり、結果と
して蛍光検出感度を向上させることになる。
ザビームを、主走査方向と直交する副走査方向、即ち標
本を物理的・機械的に移動させる方向に、オフセット角
度を与え偏心させる。これによって顕微鏡光学系からの
反射光がレーザ光学系に戻らないようにし、且つ蛍光検
出光学系へ入射しないようにする。従って、顕微鏡光学
系からのレーザ反射光が分光学的手段だけではなく空間
的にも蛍光検出光学系と分離されるので、レーザ反射光
が蛍光検出光学系へ迷光し、センターフレアーが生じる
のを防ぐことができる。そのため、バリアフィルターの
通過波長帯域を無理に狭くする必要がなくなり、結果と
して蛍光検出感度を向上させることになる。
【００１１】
【実施例】本発明に係る走査型光学測定装置の実施例を
図１乃至図５を参照して説明する。
図１乃至図５を参照して説明する。
【００１２】図１において先ず実施例の構成を説明す
る。レーザ光源１から出射したレーザビームは、集光レ
ンズ２を経てダイクロイックミラー３で反射され、ガル
バノメーターミラー４に入射する。ガルバノメーターミ
ラー４は紙面と直交する軸を回転中心としてアクチュエ
ーター５により回動し、反射光を紙面において上下方向
へ走査する。
る。レーザ光源１から出射したレーザビームは、集光レ
ンズ２を経てダイクロイックミラー３で反射され、ガル
バノメーターミラー４に入射する。ガルバノメーターミ
ラー４は紙面と直交する軸を回転中心としてアクチュエ
ーター５により回動し、反射光を紙面において上下方向
へ走査する。
【００１３】瞳投影レンズ６は、１次元走査スポットを
対物レンズ１次像面７上に形成すると共にガルバノメー
ターミラー４を対物レンズの瞳と共役に結像しており、
標本の後方散乱光を含む反射光又は蛍光は、ガルバノメ
ーターミラー４の走査角度に関係なく、照射されたレー
ザビームの光路と同じ方向へ戻ることになる。
対物レンズ１次像面７上に形成すると共にガルバノメー
ターミラー４を対物レンズの瞳と共役に結像しており、
標本の後方散乱光を含む反射光又は蛍光は、ガルバノメ
ーターミラー４の走査角度に関係なく、照射されたレー
ザビームの光路と同じ方向へ戻ることになる。
【００１４】対物レンズ１次像面７上に形成された１次
元走査スポットは、光路切換ミラー８で屈折され、顕微
鏡対物レンズ９で試料面に結像し、標本（スライドグラ
ス）１０上に蛍光標識された細胞を励起する。標本１０
を載置している走査ステージ１１は、アクチュエーター
１２によって紙面と垂直な方向に直線的に往復作動を行
い、それによって標本上の２次元走査が行われる。
元走査スポットは、光路切換ミラー８で屈折され、顕微
鏡対物レンズ９で試料面に結像し、標本（スライドグラ
ス）１０上に蛍光標識された細胞を励起する。標本１０
を載置している走査ステージ１１は、アクチュエーター
１２によって紙面と垂直な方向に直線的に往復作動を行
い、それによって標本上の２次元走査が行われる。
【００１５】走査ステージ１１の下部には、コンデンサ
ーレンズ１３，ビームスプリッター１４，透過照明光源
１５，リングスリット１６，前方散乱光検出器１７が配
置されている。又、光路切換ミラー８の上部には、バリ
アフィルター１８，ＣＣＤカメラ１９が配置されてお
り、走査ステージ１１上の標本１０の様子をＣＣＤカメ
ラ１９を介して画像で観察したり、記録したりすること
ができる。
ーレンズ１３，ビームスプリッター１４，透過照明光源
１５，リングスリット１６，前方散乱光検出器１７が配
置されている。又、光路切換ミラー８の上部には、バリ
アフィルター１８，ＣＣＤカメラ１９が配置されてお
り、走査ステージ１１上の標本１０の様子をＣＣＤカメ
ラ１９を介して画像で観察したり、記録したりすること
ができる。
【００１６】標本１０の細胞からの蛍光は、レーザスポ
ットの照射光路を逆上り、ダイクロイックミラー３を透
過してバリアフィルター２０，集光レンズ２１を経て蛍
光検出器２２に到る。位置決め手段２３は、レーザビー
ムの光路を、オフセット角を持たせ偏心させるようにガ
ルバノメーターミラー４を設置するためのものである。
この位置決め手段２３はガルバノメーターミラー４のオ
フセット角の位置調整をも行えるようにしておくことが
好ましく、実用的である。
ットの照射光路を逆上り、ダイクロイックミラー３を透
過してバリアフィルター２０，集光レンズ２１を経て蛍
光検出器２２に到る。位置決め手段２３は、レーザビー
ムの光路を、オフセット角を持たせ偏心させるようにガ
ルバノメーターミラー４を設置するためのものである。
この位置決め手段２３はガルバノメーターミラー４のオ
フセット角の位置調整をも行えるようにしておくことが
好ましく、実用的である。
【００１７】上記の構成において、ガルバノメーターミ
ラー４及び走査ステージ１１を制御する走査制御系や、
蛍光検出器２２からの信号を処理する信号処理系などに
ついては、特に図示していないが何れもコンピュータに
よって制御され、細胞の座標位置と測光データを計算し
て、記録や表示が行われるようになされている。
ラー４及び走査ステージ１１を制御する走査制御系や、
蛍光検出器２２からの信号を処理する信号処理系などに
ついては、特に図示していないが何れもコンピュータに
よって制御され、細胞の座標位置と測光データを計算し
て、記録や表示が行われるようになされている。
【００１８】ここで、本発明の特徴は、ガルバノメータ
ーミラー４を、光軸を中心に走査偏向方向と直交する方
向にオフセット角を持たせて偏心させることである。こ
のように偏心させた場合における顕微鏡視野内での１次
元走査スポットの位置関係が図２に示されている。視野
に内接する４対３の長方形ａｂｃｄは、通常の走査型レ
ーザ顕微鏡で走査される範囲を示している。ガルバノメ
ーターミラー４に上述のオフセット角を持たせて偏心さ
せると、１次元走査スポットは顕微鏡視野に対して、例
えば図のように左側へオフセットされる。このとき、オ
フセット角の増大に応じて走査範囲は対物視野で制限を
受ける。図中ｂｃ程度がオフセット角と走査範囲の実用
上の上限と考えられる。
ーミラー４を、光軸を中心に走査偏向方向と直交する方
向にオフセット角を持たせて偏心させることである。こ
のように偏心させた場合における顕微鏡視野内での１次
元走査スポットの位置関係が図２に示されている。視野
に内接する４対３の長方形ａｂｃｄは、通常の走査型レ
ーザ顕微鏡で走査される範囲を示している。ガルバノメ
ーターミラー４に上述のオフセット角を持たせて偏心さ
せると、１次元走査スポットは顕微鏡視野に対して、例
えば図のように左側へオフセットされる。このとき、オ
フセット角の増大に応じて走査範囲は対物視野で制限を
受ける。図中ｂｃ程度がオフセット角と走査範囲の実用
上の上限と考えられる。
【００１９】次に、ガルバノメーターミラー４に偏心オ
フセット角を与えた場合における作用上の説明を、図
３，図４，図５を用いて行う。図３は、１次元走査の方
向を紙面上に示しており、ガルバノメーターミラー４に
よって偏向されたレーザビームが、瞳投影レンズ６と対
物レンズ９を介して標本１０に走査される様子が分かる
ように示されている。図４及び図５は、１次元走査方向
に直角な方向から見た図であり、図４は偏心オフセット
角を与える前の状態を示し、図５は偏心オフセット角を
与えた後の状態を示している。
フセット角を与えた場合における作用上の説明を、図
３，図４，図５を用いて行う。図３は、１次元走査の方
向を紙面上に示しており、ガルバノメーターミラー４に
よって偏向されたレーザビームが、瞳投影レンズ６と対
物レンズ９を介して標本１０に走査される様子が分かる
ように示されている。図４及び図５は、１次元走査方向
に直角な方向から見た図であり、図４は偏心オフセット
角を与える前の状態を示し、図５は偏心オフセット角を
与えた後の状態を示している。
【００２０】図４においては、レーザビームは常に光軸
上にあり、特に瞳投影レンズ６の入射第１面での反射光
がレーザ光源１及び蛍光検出器２２への光路へ戻る。図
３を見れば、瞳投影レンズ６の入射第１面で反射されて
戻るのは、レーザビームが光軸近傍をよぎる場合である
ことが容易に理解できる。そして、走査ステージ１１と
の併用による２次元走査画像においては、走査ステージ
１１の移動方向に水平に、且つ視野の中心付近に帯状の
フレアーを観察することになる。
上にあり、特に瞳投影レンズ６の入射第１面での反射光
がレーザ光源１及び蛍光検出器２２への光路へ戻る。図
３を見れば、瞳投影レンズ６の入射第１面で反射されて
戻るのは、レーザビームが光軸近傍をよぎる場合である
ことが容易に理解できる。そして、走査ステージ１１と
の併用による２次元走査画像においては、走査ステージ
１１の移動方向に水平に、且つ視野の中心付近に帯状の
フレアーを観察することになる。
【００２１】この帯状のフレアーは、特に空冷アルゴン
レーザを励起光源として、ＦＩＴＣで標識された細胞を
走査したときに顕著となる。従って、このようなフレア
ーを除去するためには、バリアフィルター２０を、遮断
特性のよいものを２枚重ねて構成しなければならない。
然しながら、フィルターを２枚重ねにすることは測定装
置のコストが上昇するばかりでなく、透過帯域での透過
率の低下を招き、感度を低下させる要因となる。
レーザを励起光源として、ＦＩＴＣで標識された細胞を
走査したときに顕著となる。従って、このようなフレア
ーを除去するためには、バリアフィルター２０を、遮断
特性のよいものを２枚重ねて構成しなければならない。
然しながら、フィルターを２枚重ねにすることは測定装
置のコストが上昇するばかりでなく、透過帯域での透過
率の低下を招き、感度を低下させる要因となる。
【００２２】これに対して、図５においては、偏心オフ
セット角を与えてあるため、瞳投影レンズ６の入射第１
面による反射光は、光学系の外側へ反射してしまい、レ
ーザ光源１及び蛍光検出器２２への光路へ戻ることはな
い。そのため、上述の帯状のフレアーは排され、レーザ
の励起波長と蛍光波長が近接している場合でも、バリア
フィルター２０の分光特性にさほど厳密に配慮する必要
がない。従って、蛍光検出感度が向上する。
セット角を与えてあるため、瞳投影レンズ６の入射第１
面による反射光は、光学系の外側へ反射してしまい、レ
ーザ光源１及び蛍光検出器２２への光路へ戻ることはな
い。そのため、上述の帯状のフレアーは排され、レーザ
の励起波長と蛍光波長が近接している場合でも、バリア
フィルター２０の分光特性にさほど厳密に配慮する必要
がない。従って、蛍光検出感度が向上する。
【００２３】尚、図５を見れば分かるように、レンズ曲
率半径と、必要な偏心オフセット角との間には強い相関
関係があり、最も影響の大きい瞳投影レンズ６の入射第
１面に関しては、レーザ光源側から見て凸面の曲率半径
が小さいほど偏心オフセット角が小さくて済む。
率半径と、必要な偏心オフセット角との間には強い相関
関係があり、最も影響の大きい瞳投影レンズ６の入射第
１面に関しては、レーザ光源側から見て凸面の曲率半径
が小さいほど偏心オフセット角が小さくて済む。
【００２４】又、上記の実施例においては、生物・医学
領域において観察・測定を行う場合について説明した
が、本発明の測定装置はそのような領域で用いられるだ
けではなく、工業領域でも用いることが可能である。即
ち、表面処理後の金属や合成樹脂材料等の反射率の低い
標本を観察する際、光学系の反射によるセンターフレア
ーが問題となるが、そのような場合に用いて有効であ
る。
領域において観察・測定を行う場合について説明した
が、本発明の測定装置はそのような領域で用いられるだ
けではなく、工業領域でも用いることが可能である。即
ち、表面処理後の金属や合成樹脂材料等の反射率の低い
標本を観察する際、光学系の反射によるセンターフレア
ーが問題となるが、そのような場合に用いて有効であ
る。
【００２５】
【発明の効果】上記のように本発明の走査型光学測定装
置によれば、光源からの光学的ビームに、標本に対して
主走査方向へ走査する光学的偏向手段上において、該主
走査方向と直交する副走査方向へ偏心オフセット角を与
えるようにしたから、光学系による反射光の影響を抑え
ることができ、蛍光標識の検出感度を高めることができ
る。
置によれば、光源からの光学的ビームに、標本に対して
主走査方向へ走査する光学的偏向手段上において、該主
走査方向と直交する副走査方向へ偏心オフセット角を与
えるようにしたから、光学系による反射光の影響を抑え
ることができ、蛍光標識の検出感度を高めることができ
る。
【図１】本発明の実施例の説明図である。
【図２】顕微鏡視野内での１次元走査スポットの位置関
係を示す図である。
係を示す図である。
【図３】レーザビームの１次元走査の方向を紙面上に示
した光路説明図である。
した光路説明図である。
【図４】１次元走査方向に直角な方向から視た光路説明
図であり、偏心オフセット角を与える前の状態を示して
いる。
図であり、偏心オフセット角を与える前の状態を示して
いる。
【図５】１次元走査方向に直角な方向から視た光路説明
図であり、偏心オフセット角を与えた後の状態を示して
いる。
図であり、偏心オフセット角を与えた後の状態を示して
いる。
【図６】（ａ）はフローサイトメーター、（ｂ）は走査
型サイトメーターの各蛍光検出光学系の基本構成図であ
る。
型サイトメーターの各蛍光検出光学系の基本構成図であ
る。
１ レーザ光源 ２，２１ 集光レンズ ３ ダイクロイックミラー ４ ガルバノメーターミラー ５，１２ アクチュエーター ６ 瞳投影レンズ ７ 対物レンズ１次像面 ８ 光路切換ミラー ９ 対物レンズ １０ 標本（スライドグラス） １１ 走査ステージ ２０ バリアフィルター ２２ 蛍光検出器 ２３ 位置決め手段
Claims (5)
- 【請求項１】 光源からの光学的ビームを光学的偏向手
段により、被測定対象の標本に対する主走査方向へ１次
元走査させると共に、該主走査方向と直交する副走査方
向に前記標本を物理的／機械的に移動して２次元走査さ
せ、該標本からの後方散乱光を含む反射光及び／又は蛍
光を検出器で検出して測定する走査型光学測定装置にお
いて、 前記光学的偏向手段が、主走査方向に１次元走査される
光学的ビームを、副走査方向へオフセット角度を与え偏
心せしめるようにして配置されていることを特徴とする
走査型光学測定装置。 - 【請求項２】 前記標本が細胞標本であって、生化学的
に蛍光標識されており、光学的ビームで励起された蛍光
を測定する細胞計測装置として構成されていることを特
徴とする請求項１に記載の走査型光学測定装置。 - 【請求項３】 前記光学的ビームが、レーザビームであ
ることを特徴とする請求項１又は２の何れかに記載の走
査型光学測定装置。 - 【請求項４】 前記光学的ビームの光源にアルゴンレー
ザを使用し、前記蛍光標識としてＦＩＴＣを用いたこと
を特徴とする請求項２に記載の走査型光学測定装置。 - 【請求項５】 前記光学的偏向手段による偏心量は、標
本側の第１レンズ面で反射された光学的ビームが前記検
出器へ入射しないように設定されていることを特徴とす
る請求項１乃至４の何れかに記載の走査型光学測定装
置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP16225394A JP3454575B2 (ja) | 1994-07-14 | 1994-07-14 | 走査型光学測定装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP16225394A JP3454575B2 (ja) | 1994-07-14 | 1994-07-14 | 走査型光学測定装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0829324A true JPH0829324A (ja) | 1996-02-02 |
| JP3454575B2 JP3454575B2 (ja) | 2003-10-06 |
Family
ID=15750923
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP16225394A Expired - Fee Related JP3454575B2 (ja) | 1994-07-14 | 1994-07-14 | 走査型光学測定装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3454575B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2003500692A (ja) * | 1999-05-19 | 2003-01-07 | カール ツァイス イエナ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 蛍光層の感知を主目的とする走査装置 |
| JP2016540996A (ja) * | 2013-11-04 | 2016-12-28 | トムラ・ソーティング・エヌ・ヴィ | 検査装置 |
| JP2018116060A (ja) * | 2018-02-09 | 2018-07-26 | 日本光電工業株式会社 | 画像サイトメータ |
| US10436699B2 (en) | 2014-10-20 | 2019-10-08 | Nihon Kohden Corporation | Analyzing system and analyzing apparatus |
-
1994
- 1994-07-14 JP JP16225394A patent/JP3454575B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2003500692A (ja) * | 1999-05-19 | 2003-01-07 | カール ツァイス イエナ ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング | 蛍光層の感知を主目的とする走査装置 |
| JP2016540996A (ja) * | 2013-11-04 | 2016-12-28 | トムラ・ソーティング・エヌ・ヴィ | 検査装置 |
| US10436699B2 (en) | 2014-10-20 | 2019-10-08 | Nihon Kohden Corporation | Analyzing system and analyzing apparatus |
| JP2018116060A (ja) * | 2018-02-09 | 2018-07-26 | 日本光電工業株式会社 | 画像サイトメータ |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3454575B2 (ja) | 2003-10-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US6947127B2 (en) | Arrangement for the optical capture of excited and/or back scattered light beam in a sample | |
| US6888148B2 (en) | Arrangement for the optical capture of excited and /or back scattered light beam in a sample | |
| US6229635B1 (en) | Light sensing device | |
| EP1787157B1 (en) | Apparatus for fluorescent confocal microscopy | |
| US7701632B2 (en) | Method and arrangement for changing the spectral composition and/or intensity of illumination light and/or specimen light in an adjustable manner | |
| US5248876A (en) | Tandem linear scanning confocal imaging system with focal volumes at different heights | |
| US6236454B1 (en) | Multiple beam scanner for an inspection system | |
| EP0880690B1 (en) | Fluorescence imaging system compatible with macro and micro scanning objectives | |
| EP1650551B1 (en) | Biochip Reader | |
| EP0564178B1 (en) | Scanning confocal microscope | |
| US7173694B2 (en) | Method and system for detecting defects | |
| US20170115232A1 (en) | Multi-spot scanning collection optics | |
| US7605976B1 (en) | Method and device for changing light in an adjustable manner | |
| US20030179370A1 (en) | Method and system for detecting defects | |
| JP2007506955A (ja) | エバネッセント波照明を備えた走査顕微鏡 | |
| JP3454575B2 (ja) | 走査型光学測定装置 | |
| JPH07128596A (ja) | コンフォーカル顕微鏡 | |
| JP2002023059A (ja) | 顕微鏡組立物 | |
| JP3384072B2 (ja) | コンフォーカル顕微鏡 | |
| US20030002148A1 (en) | Arrangement for optically scanning an object | |
| JPH0427909A (ja) | 透過型顕微鏡 | |
| JP2003524194A (ja) | 対象物を光学的に走査するための装置 | |
| JP2886691B2 (ja) | 共焦点型レーザ走査顕微鏡 | |
| JPH05241074A (ja) | 共焦点顕微鏡 | |
| JP2001290078A (ja) | 共焦点顕微鏡 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20030701 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080725 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090725 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100725 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100725 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110725 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120725 Year of fee payment: 9 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |