JPH08133943A - 美肌剤 - Google Patents
美肌剤Info
- Publication number
- JPH08133943A JPH08133943A JP6293679A JP29367994A JPH08133943A JP H08133943 A JPH08133943 A JP H08133943A JP 6293679 A JP6293679 A JP 6293679A JP 29367994 A JP29367994 A JP 29367994A JP H08133943 A JPH08133943 A JP H08133943A
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- growth factor
- milk
- fraction
- skin
- ruminant
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- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 ヒト及びウシなどの単胃及び反芻動物の乳汁
から各増殖因子を含む画分を得、それぞれの細胞及び皮
膚に対する美肌効果を発揮する美肌剤に関する。 【構成】 インスリン様増殖因子、形質転換増殖因子及
び線維芽細胞増殖因子を含む反芻動物初乳又は単胃動物
乳のホエ−画分を有効成分とし、若しくは線維芽細胞増
殖因子、ヘパラン硫酸プロテオグリカンを含む反芻又は
単胃動物乳のクリ−ム画分、乳脂肪球皮膜及びバタ−ミ
ルク画分を有効成分とする美肌剤。
から各増殖因子を含む画分を得、それぞれの細胞及び皮
膚に対する美肌効果を発揮する美肌剤に関する。 【構成】 インスリン様増殖因子、形質転換増殖因子及
び線維芽細胞増殖因子を含む反芻動物初乳又は単胃動物
乳のホエ−画分を有効成分とし、若しくは線維芽細胞増
殖因子、ヘパラン硫酸プロテオグリカンを含む反芻又は
単胃動物乳のクリ−ム画分、乳脂肪球皮膜及びバタ−ミ
ルク画分を有効成分とする美肌剤。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】この発明は、ヒト及びウシなどの
単胃及び反芻動物の乳汁から各増殖因子を含む画分を
得、それぞれの細胞及び皮膚に対する美肌効果を発揮す
る美肌剤に関する。
単胃及び反芻動物の乳汁から各増殖因子を含む画分を
得、それぞれの細胞及び皮膚に対する美肌効果を発揮す
る美肌剤に関する。
【０００２】
【従来の技術】哺乳動物の乳汁には種々の増殖因子が含
まれており、それぞれ種の新生児の健全な発育に必須で
ある。たとえば、もつともよく研究されているヒトやウ
シでは、ヒトとウシ乳に共通して認められる増殖因子
は、IGF（インスリン様増殖因子、Francis, G.L. et a
l. Biochem. J., 251. 95-103(1988)、Rinderknecht,
E.,Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 73, 2365〜2369(197
6)),TGF（形質転換増殖因子、Noda, K. et al., Gann,
75, 109-112（1984）, David, Y. J. et al., J.Protei
n Chemistry, 10, 565-575(1991)), 及び aFGFとbFGF
(酸性と塩基性線維芽増殖因子、発明者ら未発表）であ
り、EGF（上皮細胞増殖因子）はヒト乳にのみ認めら
れ、ウシ乳には存在しない（Shing. Y. W. et al., End
ocrinology,115, 273-282(1984))と報告されている。
まれており、それぞれ種の新生児の健全な発育に必須で
ある。たとえば、もつともよく研究されているヒトやウ
シでは、ヒトとウシ乳に共通して認められる増殖因子
は、IGF（インスリン様増殖因子、Francis, G.L. et a
l. Biochem. J., 251. 95-103(1988)、Rinderknecht,
E.,Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 73, 2365〜2369(197
6)),TGF（形質転換増殖因子、Noda, K. et al., Gann,
75, 109-112（1984）, David, Y. J. et al., J.Protei
n Chemistry, 10, 565-575(1991)), 及び aFGFとbFGF
(酸性と塩基性線維芽増殖因子、発明者ら未発表）であ
り、EGF（上皮細胞増殖因子）はヒト乳にのみ認めら
れ、ウシ乳には存在しない（Shing. Y. W. et al., End
ocrinology,115, 273-282(1984))と報告されている。
【０００３】これら各増殖因子の細胞特異性は極めて低
く、広範囲の細胞に作用する。その作用範囲は増殖ばか
りではなく、たとえばTGF-βはマクロフア−ジを不活性
化することによる免疫抑制（Tsunawa K, S. et al., Na
ture, 334, 260-262,(1988))や結合組織、細胞外基質の
主要成分であるコラ-ゲンフアイブロネクチンやプロテ
オグリカンの合成を促進させる(Kovacs, E. J. et al.,
Immunol, Today 12,17(1991), Kelley, J., Am. Rev.
Respir. Dis. 141, 765(1990))ことが確認されている。
これら各増殖因子は個々に作用しているのではなく、相
互に作用するネツトワ−クを形成している。
く、広範囲の細胞に作用する。その作用範囲は増殖ばか
りではなく、たとえばTGF-βはマクロフア−ジを不活性
化することによる免疫抑制（Tsunawa K, S. et al., Na
ture, 334, 260-262,(1988))や結合組織、細胞外基質の
主要成分であるコラ-ゲンフアイブロネクチンやプロテ
オグリカンの合成を促進させる(Kovacs, E. J. et al.,
Immunol, Today 12,17(1991), Kelley, J., Am. Rev.
Respir. Dis. 141, 765(1990))ことが確認されている。
これら各増殖因子は個々に作用しているのではなく、相
互に作用するネツトワ−クを形成している。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】したがつて、美肌効果
を期待するには、個々の増殖因子を単独で使用するより
も、より自然に近い形で混合物として使用する方が、そ
の効果をより期待できるものと当然予想される。
を期待するには、個々の増殖因子を単独で使用するより
も、より自然に近い形で混合物として使用する方が、そ
の効果をより期待できるものと当然予想される。
【０００５】またヒトとウシの各増殖因子を比較する
と、これらの一次構造上の相同性は非常に高く、ほとん
ど同一であり、異種間の細胞にも同様に作用する。これ
らの見地から発明者らはヒト及びウシ乳汁から各増殖因
子を含む画分を得、それぞれの細胞及び皮膚に対する影
響を調べ、美肌効果が非常に高いことを見出し、この発
明を完成した。
と、これらの一次構造上の相同性は非常に高く、ほとん
ど同一であり、異種間の細胞にも同様に作用する。これ
らの見地から発明者らはヒト及びウシ乳汁から各増殖因
子を含む画分を得、それぞれの細胞及び皮膚に対する影
響を調べ、美肌効果が非常に高いことを見出し、この発
明を完成した。
【０００６】
【課題を解決するための手段】すなわち、この発明にお
いて、請求項１に記載の美肌剤は、インスリン様増殖因
子、形質転換増殖因子及び線維芽細胞増殖因子を含む反
芻動物初乳のホエ−画分を有効成分とする。また請求項
２に記載の美肌剤は、インスリン様増殖因子、形質転換
増殖因子及び線維芽細胞因子を含む単胃動物乳のホエ−
画分を有効成分とする。更に請求項３に記載の美肌剤
は、線維芽細胞増殖因子、ヘパラン硫酸プロテオグリカ
ンを含む反芻又は単胃動物乳のクリ−ム画分、乳脂肪球
皮膜及びバタ−ミルク画分を有効成分とする。
いて、請求項１に記載の美肌剤は、インスリン様増殖因
子、形質転換増殖因子及び線維芽細胞増殖因子を含む反
芻動物初乳のホエ−画分を有効成分とする。また請求項
２に記載の美肌剤は、インスリン様増殖因子、形質転換
増殖因子及び線維芽細胞因子を含む単胃動物乳のホエ−
画分を有効成分とする。更に請求項３に記載の美肌剤
は、線維芽細胞増殖因子、ヘパラン硫酸プロテオグリカ
ンを含む反芻又は単胃動物乳のクリ−ム画分、乳脂肪球
皮膜及びバタ−ミルク画分を有効成分とする。
【０００７】
【作用】インスリン様増殖因子、形質転換増殖因子及び
線維芽細胞増殖因子を含む反芻動物初乳又は単胃動物乳
のホエ−画分を有効成分とし、若しくは線維芽細胞増殖
因子、ヘパラン硫酸プロテオグリカンを含む反芻又は単
胃動物乳のクリ−ム画分、乳脂肪球皮膜及びバタ−ミル
ク画分を有効成分として美肌剤を製造する。
線維芽細胞増殖因子を含む反芻動物初乳又は単胃動物乳
のホエ−画分を有効成分とし、若しくは線維芽細胞増殖
因子、ヘパラン硫酸プロテオグリカンを含む反芻又は単
胃動物乳のクリ−ム画分、乳脂肪球皮膜及びバタ−ミル
ク画分を有効成分として美肌剤を製造する。
【０００８】
【実施例】次に実施例でこの発明を詳細に説明する。 例１．ヒト乳からの調製法：分娩後２週間までの乳を遠
心分離により、クリ−ムと脱脂乳に分けた。クリ−ムか
らチヤ−ニング法により脱脂塊を除去し、バタ−ミルク
画分を得、pH4.6又はエタノ−ル沈殿法により脱カゼイ
ンした。分画分子量3,000の限外濾過モジユ−ル、又は
透析膜で脱塩した後、凍結乾燥した。これをHuman butt
er milk derived FGF(HBM-FGF)とし、実験に供した。脱
脂乳は最終カルシウム濃度とエタノ−ルを0.05〜0.1Mと
10〜20%になるようにCaCl2とエタノ−ルを加え，pHを6.
0に調整した後、40℃に加温した。生じた沈殿物を遠心
分離で除去し、上清液をレチノイン酸固定化アミノセル
ロフアイン樹脂(RA-セルロフアイン、生化学工業社製)
に接触させ、β-ラクトグロブリンを除去した。RA-セル
ロフアイン樹脂非吸着物を分画分子量3,000の限外濾過
モジユ−ル（旭化成社製）を用いて脱塩した後、凍結乾
燥した。これをHuman skim milk derivedgrowth factor
s(BCSM-GFs)とし、実験に供した。
心分離により、クリ−ムと脱脂乳に分けた。クリ−ムか
らチヤ−ニング法により脱脂塊を除去し、バタ−ミルク
画分を得、pH4.6又はエタノ−ル沈殿法により脱カゼイ
ンした。分画分子量3,000の限外濾過モジユ−ル、又は
透析膜で脱塩した後、凍結乾燥した。これをHuman butt
er milk derived FGF(HBM-FGF)とし、実験に供した。脱
脂乳は最終カルシウム濃度とエタノ−ルを0.05〜0.1Mと
10〜20%になるようにCaCl2とエタノ−ルを加え，pHを6.
0に調整した後、40℃に加温した。生じた沈殿物を遠心
分離で除去し、上清液をレチノイン酸固定化アミノセル
ロフアイン樹脂(RA-セルロフアイン、生化学工業社製)
に接触させ、β-ラクトグロブリンを除去した。RA-セル
ロフアイン樹脂非吸着物を分画分子量3,000の限外濾過
モジユ−ル（旭化成社製）を用いて脱塩した後、凍結乾
燥した。これをHuman skim milk derivedgrowth factor
s(BCSM-GFs)とし、実験に供した。
【０００９】例２．ウシ乳からの調整法：分娩後24時間
以内の乳を実施例１に記載の方法で調整し、クリ−ム画
分由来をbovine colostrum butter milk derived FGF
（BCBM-FGF)とし、脱脂乳由来のものをbovine colostru
m skim milk derived growthfactors(BCSM-GFs)とし、
実験に供した。
以内の乳を実施例１に記載の方法で調整し、クリ−ム画
分由来をbovine colostrum butter milk derived FGF
（BCBM-FGF)とし、脱脂乳由来のものをbovine colostru
m skim milk derived growthfactors(BCSM-GFs)とし、
実験に供した。
【００１０】例３．各調整物の増殖因子活性：HBM-FGF
とBCBM-FGFは、ウシ臍帯内皮細胞に対する活性を、HSM-
GFsとBCSM-GFsはマウスBALB/C 3T3細胞を用い、それら
の細胞数をカウントすることで活性を測定した。
とBCBM-FGFは、ウシ臍帯内皮細胞に対する活性を、HSM-
GFsとBCSM-GFsはマウスBALB/C 3T3細胞を用い、それら
の細胞数をカウントすることで活性を測定した。
【００１１】ａ）HBM-FGFとBCBM-FGF:細胞増殖活性はウ
シ臍帯から酵素法（三井洋司ら編、機能細胞の分離と培
養(1987), 227-229)で内皮細胞を得、10%FCS加RPMI 164
0培地(ギブコ社製)で37℃、５%CO2の条件下で３代予備
培養した。96穴マイクロプレ−ト（フアルコン社製）に
50個/穴の細胞数になるように植え付け、無血清培地(RP
MI 1640)に置換した後、HBM-FGFとBCBM-FGF を0-3%濃度
になるように加え、48時間〜72時間培養し、各穴の細胞
数をカウントした。結果を図１に示した。
シ臍帯から酵素法（三井洋司ら編、機能細胞の分離と培
養(1987), 227-229)で内皮細胞を得、10%FCS加RPMI 164
0培地(ギブコ社製)で37℃、５%CO2の条件下で３代予備
培養した。96穴マイクロプレ−ト（フアルコン社製）に
50個/穴の細胞数になるように植え付け、無血清培地(RP
MI 1640)に置換した後、HBM-FGFとBCBM-FGF を0-3%濃度
になるように加え、48時間〜72時間培養し、各穴の細胞
数をカウントした。結果を図１に示した。
【００１２】ｂ）HSM-GFsとBCSM-GFs:細胞増殖活性はME
M培地(ギブコ社製)にて、上記条件下で予備培養した3T3
細胞を96穴マイクロプレ−トに(a)に記した条件で植え
付け、HSM-FGsとBLSM-GFsを0-3%濃度になるように加
え、同一条件下で培養し、各穴の細胞数をカウントし
た。図２に結果を示した。
M培地(ギブコ社製)にて、上記条件下で予備培養した3T3
細胞を96穴マイクロプレ−トに(a)に記した条件で植え
付け、HSM-FGsとBLSM-GFsを0-3%濃度になるように加
え、同一条件下で培養し、各穴の細胞数をカウントし
た。図２に結果を示した。
【００１３】細胞外基質合成能はコラ−ゲン、ヒアルロ
ン酸（HA)及びヘパラン硫酸プロテオグリカン(HSPG)の
含量を測定した。つまり3T3細胞直径80mmのデツシユ(フ
アルコン社製)に植え付け、無血清RPMI 1640培地にHSM-
GFsとBLSM-GFsをそれぞれ0-3%濃度になるように加え、
(a)に記載の条件下で細胞数がコンフルエントになるま
で培養した細胞をEDTAを用いて剥離し、デツシユに付着
している細胞外基質を得た。コラ−ゲンは電気泳動法
で、HAとHSPGはニトロセルロ−ス膜二次元電気泳動法で
測定した。結果を表１に示す。
ン酸（HA)及びヘパラン硫酸プロテオグリカン(HSPG)の
含量を測定した。つまり3T3細胞直径80mmのデツシユ(フ
アルコン社製)に植え付け、無血清RPMI 1640培地にHSM-
GFsとBLSM-GFsをそれぞれ0-3%濃度になるように加え、
(a)に記載の条件下で細胞数がコンフルエントになるま
で培養した細胞をEDTAを用いて剥離し、デツシユに付着
している細胞外基質を得た。コラ−ゲンは電気泳動法
で、HAとHSPGはニトロセルロ−ス膜二次元電気泳動法で
測定した。結果を表１に示す。
【００１４】
【表１】
【００１５】例４．肌荒れ改善効果：23℃、50%湿度で
飼育している生後４日目のマウスと16週令のマウスの背
部５mm2にキシレンを塗布し、肌を荒れさせた。16時間
後にBCSM-GFs １%加市販美溶液500mlを染み込ませたガ
−ゼを塗布し、48時間同一条件下で飼育した。対照とし
て、同一固体の背部５mm2にキシレンを塗布し、同一条
件下で市販美容液を同量塗布し、同一条件下で48時間飼
育した。判定は皮膚の状態を肉眼的に観察して行なつ
た。結果を表２に示す。
飼育している生後４日目のマウスと16週令のマウスの背
部５mm2にキシレンを塗布し、肌を荒れさせた。16時間
後にBCSM-GFs １%加市販美溶液500mlを染み込ませたガ
−ゼを塗布し、48時間同一条件下で飼育した。対照とし
て、同一固体の背部５mm2にキシレンを塗布し、同一条
件下で市販美容液を同量塗布し、同一条件下で48時間飼
育した。判定は皮膚の状態を肉眼的に観察して行なつ
た。結果を表２に示す。
【００１６】
【表２】
【００１７】例５．アレルギ−改善効果と抗アレルギ−
作用：金属接触性皮膚アレルギ−疾患のボランテイアの
左腕に金属を接触させ、炎症を誘発させた。その後例４
に用いたものと同じBCSM-GFs添加及び無添加美容液を塗
布し、その改善効果を肉眼的に観察した。また炎症を誘
発する直前に同じ美容液を塗布し、金属を接触させた場
合の炎症反応を肉眼的に観察した。結果を表３に示す。
作用：金属接触性皮膚アレルギ−疾患のボランテイアの
左腕に金属を接触させ、炎症を誘発させた。その後例４
に用いたものと同じBCSM-GFs添加及び無添加美容液を塗
布し、その改善効果を肉眼的に観察した。また炎症を誘
発する直前に同じ美容液を塗布し、金属を接触させた場
合の炎症反応を肉眼的に観察した。結果を表３に示す。
【００１８】
【表３】
【００１９】
【発明の効果】この発明による美肌剤によつて、肌荒れ
の改善効果と共に抗アレルギ−作用が得られた。
の改善効果と共に抗アレルギ−作用が得られた。
【図１】ウシ初乳にHBM-FGF又はBCBM-FGFを添加した各
調整物の細胞増殖活性を時間と細胞数の関係で示す図で
ある。
調整物の細胞増殖活性を時間と細胞数の関係で示す図で
ある。
【図２】ウシ初乳にHSM-GFs又はBLSM-GFsを添加した各
調整物の細胞増殖活性を、時間と細胞数との関係で示す
図である。
調整物の細胞増殖活性を、時間と細胞数との関係で示す
図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ａ６１Ｋ 38/27
Claims (3)
- 【請求項１】 インスリン様増殖因子、形質転換増殖因
子及び線維芽細胞増殖因子を含む反芻動物初乳のホエ−
画分を有効成分とすることを特徴とする美肌剤。 - 【請求項２】 インスリン様増殖因子、形質転換増殖因
子及び線維芽細胞増殖因子を含む単胃動物乳のホエ−画
分を有効成分とすることを特徴とする美肌剤。 - 【請求項３】 線維芽細胞増殖因子、ヘパラン硫酸プロ
テオグリカンを含む反芻又は単胃動物乳のクリ−ム画
分、乳脂肪球皮膜及びバタ−ミルク画分を有効成分とす
ることを特徴とする美肌剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6293679A JPH08133943A (ja) | 1994-11-04 | 1994-11-04 | 美肌剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6293679A JPH08133943A (ja) | 1994-11-04 | 1994-11-04 | 美肌剤 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08133943A true JPH08133943A (ja) | 1996-05-28 |
Family
ID=17797832
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP6293679A Pending JPH08133943A (ja) | 1994-11-04 | 1994-11-04 | 美肌剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH08133943A (ja) |
Cited By (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997004009A1 (en) * | 1995-07-15 | 1997-02-06 | The Rowett Research Institute | Colostrum derived growth factor |
| WO2002005828A1 (en) * | 2000-07-13 | 2002-01-24 | Gropep Limited | Compositions and methods for the treatment of skin damage |
| FR2828402A1 (fr) * | 2001-08-10 | 2003-02-14 | Oreal | Composition cosmetique ou dermatologique comprenant une association de l'igf1 et/ou d'un compose mimetique de l'igf1 et au moins un isoflavonoide |
| WO2004098632A1 (ja) * | 2003-05-07 | 2004-11-18 | Snow Brand Milk Products Co., Ltd. | 皮膚コラーゲン産生促進剤 |
| WO2005049054A1 (en) * | 2003-11-21 | 2005-06-02 | Beta Peptide Pty Ltd | Compositions and methods for the treatment of skin damage |
| WO2010134384A1 (ja) * | 2009-05-20 | 2010-11-25 | よつ葉乳業株式会社 | 皮膚機能改善組成物 |
| JP2014521698A (ja) * | 2011-08-05 | 2014-08-28 | ステムテック インターナショナル， インコーポレイテッド | 天然原料の組み合わせを含有するスキンケア組成物 |
| CN113304063A (zh) * | 2021-04-23 | 2021-08-27 | 四川省恩乐生物工程有限公司 | 一种用于肌肤美容抗衰老的组合物及其制备方法 |
-
1994
- 1994-11-04 JP JP6293679A patent/JPH08133943A/ja active Pending
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