JPH0787958A - 微細藻類を単離・培養する方法 - Google Patents
微細藻類を単離・培養する方法Info
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- JPH0787958A JPH0787958A JP23607993A JP23607993A JPH0787958A JP H0787958 A JPH0787958 A JP H0787958A JP 23607993 A JP23607993 A JP 23607993A JP 23607993 A JP23607993 A JP 23607993A JP H0787958 A JPH0787958 A JP H0787958A
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- Japan
- Prior art keywords
- liquid medium
- microalgae
- low
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- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 高ＣＯ2 濃度、低ｐＨ、低光強度照射条件下
で増殖し、多糖類、オリゴ糖などの機能性食品を生成す
る微細藻類の単離・培養する方法に関する。 【構成】 細菌類と微細藻類の複合体と考えられている
天狗の麦飯を含む土壌を無機栄養塩液体培地に懸濁し、
１０〜５０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．の低強度の
光を照射しながら静置培養した後、培養物を同じ液体培
地で数段階に希釈して採取し、採取した希釈培養物を同
じ液体培地を含む寒天プレートに接種し、生じたコロニ
ーを採取して前記細菌類と微細藻類とに分離し、分離し
た微細藻類を同じ無機栄養塩液体培地に懸濁させ、高Ｃ
Ｏ2 濃度、低ｐＨ条件で１０〜５０μ− Einsteins／ｍ
2 ／ｓｅｃ．の低強度の光を照射しながら増殖培養して
天狗の麦飯を含む土壌から微細藻類を単離培養する方
法。
で増殖し、多糖類、オリゴ糖などの機能性食品を生成す
る微細藻類の単離・培養する方法に関する。 【構成】 細菌類と微細藻類の複合体と考えられている
天狗の麦飯を含む土壌を無機栄養塩液体培地に懸濁し、
１０〜５０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．の低強度の
光を照射しながら静置培養した後、培養物を同じ液体培
地で数段階に希釈して採取し、採取した希釈培養物を同
じ液体培地を含む寒天プレートに接種し、生じたコロニ
ーを採取して前記細菌類と微細藻類とに分離し、分離し
た微細藻類を同じ無機栄養塩液体培地に懸濁させ、高Ｃ
Ｏ2 濃度、低ｐＨ条件で１０〜５０μ− Einsteins／ｍ
2 ／ｓｅｃ．の低強度の光を照射しながら増殖培養して
天狗の麦飯を含む土壌から微細藻類を単離培養する方
法。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は高ＣＯ2 濃度、低ｐＨ、
低光強度照射条件下で増殖し、多糖類、オリゴ糖などの
機能性食品を生成する微細藻類の単離・培養方法に関す
る。
低光強度照射条件下で増殖し、多糖類、オリゴ糖などの
機能性食品を生成する微細藻類の単離・培養方法に関す
る。
【０００２】
【従来の技術】淡水、海水を単離源とした藻類の単離培
養方法としては、有機培地プレート法、無機培地プレー
ト法、自走法、抗生物質法、洗浄法などがあるが、天狗
の麦飯を含む土壌を単離源とした藻類の単離培養方法は
これまでに全く報告はない。
養方法としては、有機培地プレート法、無機培地プレー
ト法、自走法、抗生物質法、洗浄法などがあるが、天狗
の麦飯を含む土壌を単離源とした藻類の単離培養方法は
これまでに全く報告はない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】本発明は上記技術水準
に鑑み、天狗の麦飯を含む土壌から多糖類、オリゴ糖な
どの機能性食品を生成する微細藻類の単離・培養する方
法を提供しようとするものである。
に鑑み、天狗の麦飯を含む土壌から多糖類、オリゴ糖な
どの機能性食品を生成する微細藻類の単離・培養する方
法を提供しようとするものである。
【０００４】
【課題を解決するための手段】本発明者らは天狗の麦飯
中の微細藻類はそれ自身の生育に殆んど光を必要としな
いと考えられることから、低強度の光を照射することに
より天狗の麦飯中を含む土壌中のＣＯ2 及び培地中の無
機栄養源を利用して培養すれば微細藻類のみが増殖され
るのではないかとの知見を得、この知見に基づいて多く
の実験を重ねた結果、本発明を完成するに至った。
中の微細藻類はそれ自身の生育に殆んど光を必要としな
いと考えられることから、低強度の光を照射することに
より天狗の麦飯中を含む土壌中のＣＯ2 及び培地中の無
機栄養源を利用して培養すれば微細藻類のみが増殖され
るのではないかとの知見を得、この知見に基づいて多く
の実験を重ねた結果、本発明を完成するに至った。
【０００５】すなわち、本発明は細菌類と微細藻類の複
合体と考えられている天狗の麦飯を含む土壌を無機栄養
塩液体培地に懸濁し、１０〜５０μ− Einsteins／ｍ2
／ｓｅｃ．の低強度の光を照射しながら静置培養した
後、培養物を同じ液体培地で数段階に希釈して採取し、
採取した希釈培養物を同じ液体培地を含む寒天プレート
に接種し、生じたコロニーを採取して前記細菌類と微細
藻類とに分離し、分離した微細藻類を同じ無機栄養塩液
体培地に懸濁させ、高ＣＯ2 濃度、低ｐＨ条件で１０〜
５０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．の低強度の光を照
射しながら増殖培養することを特徴とする天狗の麦飯を
含む土壌から微細藻類を単離培養する方法である。
合体と考えられている天狗の麦飯を含む土壌を無機栄養
塩液体培地に懸濁し、１０〜５０μ− Einsteins／ｍ2
／ｓｅｃ．の低強度の光を照射しながら静置培養した
後、培養物を同じ液体培地で数段階に希釈して採取し、
採取した希釈培養物を同じ液体培地を含む寒天プレート
に接種し、生じたコロニーを採取して前記細菌類と微細
藻類とに分離し、分離した微細藻類を同じ無機栄養塩液
体培地に懸濁させ、高ＣＯ2 濃度、低ｐＨ条件で１０〜
５０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．の低強度の光を照
射しながら増殖培養することを特徴とする天狗の麦飯を
含む土壌から微細藻類を単離培養する方法である。
【０００６】
【作用】天狗の麦飯を含む土壌を無機栄養塩液体中に懸
濁して、１０〜５０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．の
低強度の光を照射して静置培養するに当っては、土壌中
に比較的多量のＣＯ2 が含まれているので、積極的にＣ
Ｏ2 を供給する必要はない。静置培養後、培養物を同じ
液体培地で数段階に希釈して採取し、採取した希釈培養
物を同じ液体培地を含む寒天プレートに接種し、生じた
コロニーを採取することによって天狗の麦飯を構成して
いる細菌類と微細藻類とは分離される。
濁して、１０〜５０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．の
低強度の光を照射して静置培養するに当っては、土壌中
に比較的多量のＣＯ2 が含まれているので、積極的にＣ
Ｏ2 を供給する必要はない。静置培養後、培養物を同じ
液体培地で数段階に希釈して採取し、採取した希釈培養
物を同じ液体培地を含む寒天プレートに接種し、生じた
コロニーを採取することによって天狗の麦飯を構成して
いる細菌類と微細藻類とは分離される。
【０００７】分離した微細藻類を同じ無機栄養塩液体培
地に懸濁させ、高ＣＯ2 濃度、低ｐＨ条件で、上記と同
じ１０〜５０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．の低強度
の光を照射して増殖培養するに当っては、後述の実施例
で解析したように、約１０％ＣＯ2 を含む高濃度ＣＯ2
含有空気を供給しながら、また、ｐＨ４付近のｐＨ値を
維持しながら培養することが好ましい。
地に懸濁させ、高ＣＯ2 濃度、低ｐＨ条件で、上記と同
じ１０〜５０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．の低強度
の光を照射して増殖培養するに当っては、後述の実施例
で解析したように、約１０％ＣＯ2 を含む高濃度ＣＯ2
含有空気を供給しながら、また、ｐＨ４付近のｐＨ値を
維持しながら培養することが好ましい。
【０００８】
【実施例】以下実施例により本発明を説明する。天狗の
麦飯を含む土壌を１ｇ取り、これをＢＧ１１培地（Ｎａ
ＮＯ3 ：１．５ｇ、Ｋ2 ＨＰＯ4 ：３０ｍｇ、ＭｇＳＯ
4 ・７Ｈ2 Ｏ：７５ｍｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏ：３６
ｍｇ、クエン酸：６ｍｇ、Ｎａ2 ・ＥＤＴＡ：１ｍｇ、
Ｎａ2 ＣＯ3 ：２０ｍｇ、Ｈ3 ＢＯ3 ：２．８６ｍｇ、
ＭｎＣｌ2 ・４Ｈ2 Ｏ：１．８１ｍｇ、ＺｎＳＯ4 ・７
Ｈ2 Ｏ：２２２μｇ、Ｎａ2 ＭｏＯ4 ・２Ｈ2 Ｏ：０．
３９ｍｇ、ＣｕＳＯ4 ・５Ｈ2 Ｏ：７９μｇ、Ｃｏ（Ｎ
Ｏ2 ）2 ・６Ｈ2 Ｏ：４９．４μｇ、ビタミンＢ12：１
μｇ、蒸留水：１リットル）５ミリリットルに懸濁し、
１０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．の光を照射しなが
ら約２週間静置培養（前培養）する。
麦飯を含む土壌を１ｇ取り、これをＢＧ１１培地（Ｎａ
ＮＯ3 ：１．５ｇ、Ｋ2 ＨＰＯ4 ：３０ｍｇ、ＭｇＳＯ
4 ・７Ｈ2 Ｏ：７５ｍｇ、ＣａＣｌ2 ・２Ｈ2 Ｏ：３６
ｍｇ、クエン酸：６ｍｇ、Ｎａ2 ・ＥＤＴＡ：１ｍｇ、
Ｎａ2 ＣＯ3 ：２０ｍｇ、Ｈ3 ＢＯ3 ：２．８６ｍｇ、
ＭｎＣｌ2 ・４Ｈ2 Ｏ：１．８１ｍｇ、ＺｎＳＯ4 ・７
Ｈ2 Ｏ：２２２μｇ、Ｎａ2 ＭｏＯ4 ・２Ｈ2 Ｏ：０．
３９ｍｇ、ＣｕＳＯ4 ・５Ｈ2 Ｏ：７９μｇ、Ｃｏ（Ｎ
Ｏ2 ）2 ・６Ｈ2 Ｏ：４９．４μｇ、ビタミンＢ12：１
μｇ、蒸留水：１リットル）５ミリリットルに懸濁し、
１０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．の光を照射しなが
ら約２週間静置培養（前培養）する。
【０００９】前培養後再懸濁し、０．１ミリリットル分
取し、ＢＧ１１培地で１０倍に希釈し、さらに０．１ミ
リリットル分取しＢＧ１１寒天プレート（上記培地組成
に１．５％寒天を添加したもの）に塗沫し約２週間静置
培養する。プレート上に生じたコロニー（約１×１０5
個）の中から１つ採取しＢＧ１１培地１０ミリリットル
に懸濁して培養し、天狗の麦飯からの微細藻類培養液を
得る。
取し、ＢＧ１１培地で１０倍に希釈し、さらに０．１ミ
リリットル分取しＢＧ１１寒天プレート（上記培地組成
に１．５％寒天を添加したもの）に塗沫し約２週間静置
培養する。プレート上に生じたコロニー（約１×１０5
個）の中から１つ採取しＢＧ１１培地１０ミリリットル
に懸濁して培養し、天狗の麦飯からの微細藻類培養液を
得る。
【００１０】このようにして得た微細藻類は２種の文献
上未知の緑藻類に属するもので、その一種は直径：５〜
２５μｍの円形状のもの（これをＤＧ株という）であ
り、他の一種は直径：２〜４μｍ、長さ：４〜１０μｍ
の棒状のもの（これをＬＧ株という）であり、その特性
は下記表１に示すような組成のものであった。
上未知の緑藻類に属するもので、その一種は直径：５〜
２５μｍの円形状のもの（これをＤＧ株という）であ
り、他の一種は直径：２〜４μｍ、長さ：４〜１０μｍ
の棒状のもの（これをＬＧ株という）であり、その特性
は下記表１に示すような組成のものであった。
【００１１】
【表１】 ＊ 炭水化物はフェノール硫酸法、タンパク質は Lowry
法、脂質はメタノール−クロロホルム（２：１）抽出法
で測定した。
法、脂質はメタノール−クロロホルム（２：１）抽出法
で測定した。
【００１２】上記の細菌を分離した微細藻類の培養上の
特性を以下、さらに詳しく説明する。図１は分離微細藻
類（ＤＧ株、ＬＤ株）の比増殖速度に与えるｐＨの影響
を示す図表である。ｐＨ２，４，６，８，１０に調節し
たＢＧ１１培地１０ミリリットルに藻体１×１０7 （セ
ル／ミリリットル）を１ミリリットル植菌し、光強度：
１０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．、温度：２５℃で
試験管で振とう培養した。その結果、両株ともｐＨ：４
のとき比増殖速度が最大値（ＤＧ株：０．００６２
ｈ-1、ＬＧ株：０．００９ｈ-1）を示した。
特性を以下、さらに詳しく説明する。図１は分離微細藻
類（ＤＧ株、ＬＤ株）の比増殖速度に与えるｐＨの影響
を示す図表である。ｐＨ２，４，６，８，１０に調節し
たＢＧ１１培地１０ミリリットルに藻体１×１０7 （セ
ル／ミリリットル）を１ミリリットル植菌し、光強度：
１０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．、温度：２５℃で
試験管で振とう培養した。その結果、両株ともｐＨ：４
のとき比増殖速度が最大値（ＤＧ株：０．００６２
ｈ-1、ＬＧ株：０．００９ｈ-1）を示した。
【００１３】図２は分離微細藻類（ＤＧ株、ＬＧ株）の
増殖に与える供給空気中のＣＯ2 濃度の影響を示す図表
である。０．０３％、１０％、２０％の割合でＣＯ2 を
含む空気を、藻体１×１０7 （セル／ミリリットル）を
１００ミリリットル植菌したＢＧ１１培地５００ミリリ
ットル（ｐＨ：７．６）に供給し培養した。その結果、
１０％の割合のＣＯ2 を含む空気を供給した場合、最も
藻体濃度が高くなったことを確認した。（ＤＧ株：５６
０ｍｇ乾燥重量／リットル、ＬＧ株：３４０ｍｇ乾燥重
量／リットル）
増殖に与える供給空気中のＣＯ2 濃度の影響を示す図表
である。０．０３％、１０％、２０％の割合でＣＯ2 を
含む空気を、藻体１×１０7 （セル／ミリリットル）を
１００ミリリットル植菌したＢＧ１１培地５００ミリリ
ットル（ｐＨ：７．６）に供給し培養した。その結果、
１０％の割合のＣＯ2 を含む空気を供給した場合、最も
藻体濃度が高くなったことを確認した。（ＤＧ株：５６
０ｍｇ乾燥重量／リットル、ＬＧ株：３４０ｍｇ乾燥重
量／リットル）
【００１４】図３は分離微細藻類（ＤＧ株、ＬＧ株）の
比増殖速度に与える光強度の影響を示す図表である。Ｂ
Ｇ１１培地４００ミリリットル（ｐＨ：７．６）に藻体
１×１０7 （セル／ミリリットル）を４０ミリリットル
植菌し、温度：２５℃で偏平フラスコで培養した。光強
度は白色蛍光灯で１０，２０，４０，８０，１６０，２
００μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．に調節した。その
結果、４０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．で比増殖速
度が最大になることを確認した。（ＤＧ株：０．０２５
ｈ-1、ＬＧ株：０．０１４ｈ-1）なお、上記実施例では
無機栄養塩液体培地としてＢＧ１１培地を使用したが、
この培地に限るものではなく、他の無機栄養塩液体培地
も使用しうる。
比増殖速度に与える光強度の影響を示す図表である。Ｂ
Ｇ１１培地４００ミリリットル（ｐＨ：７．６）に藻体
１×１０7 （セル／ミリリットル）を４０ミリリットル
植菌し、温度：２５℃で偏平フラスコで培養した。光強
度は白色蛍光灯で１０，２０，４０，８０，１６０，２
００μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．に調節した。その
結果、４０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．で比増殖速
度が最大になることを確認した。（ＤＧ株：０．０２５
ｈ-1、ＬＧ株：０．０１４ｈ-1）なお、上記実施例では
無機栄養塩液体培地としてＢＧ１１培地を使用したが、
この培地に限るものではなく、他の無機栄養塩液体培地
も使用しうる。
【００１５】
【発明の効果】本発明によれば細菌類と微細藻類の複合
体と考えられている天狗の麦飯より、高ＣＯ2 濃度、低
ｐＨ、低光強度照射条件下で増殖し、多糖類、オリゴ糖
などの機能性食品を生成する微細藻類の単離・培養方法
が確立され、その増殖培養条件より空気中のＣＯ2 を除
去することが可能と推定され、増殖微細藻体からはオリ
ゴ糖などの機能性食品を生成できるので、本発明の工業
的効果には顕著なものがある。
体と考えられている天狗の麦飯より、高ＣＯ2 濃度、低
ｐＨ、低光強度照射条件下で増殖し、多糖類、オリゴ糖
などの機能性食品を生成する微細藻類の単離・培養方法
が確立され、その増殖培養条件より空気中のＣＯ2 を除
去することが可能と推定され、増殖微細藻体からはオリ
ゴ糖などの機能性食品を生成できるので、本発明の工業
的効果には顕著なものがある。
【図１】本発明の細菌と分離された天狗の麦飯の微細藻
類の培養時におけるｐＨの影響を示す図表。
類の培養時におけるｐＨの影響を示す図表。
【図２】同上の微細藻類の培養時における供給空気のＣ
Ｏ2 濃度の影響を示す図表。
Ｏ2 濃度の影響を示す図表。
【図３】同上の微細藻類の培養時における照射光の光強
度の影響を示す図表。
度の影響を示す図表。
Claims (1)
- 【請求項１】 細菌類と微細藻類の複合体と考えられて
いる天狗の麦飯を含む土壌を無機栄養塩液体培地に懸濁
し、１０〜５０μ− Einsteins／ｍ2 ／ｓｅｃ．の低強
度の光を照射しながら静置培養した後、培養物を同じ液
体培地で数段階に希釈して採取し、採取した希釈培養物
を同じ液体培地を含む寒天プレートに接種し、生じたコ
ロニーを採取して前記細菌類と微細藻類とに分離し、分
離した微細藻類を同じ無機栄養塩液体培地に懸濁させ、
高ＣＯ2 濃度、低ｐＨ条件で１０〜５０μ− Einsteins
／ｍ2 ／ｓｅｃ．の低強度の光を照射しながら増殖培養
することを特徴とする天狗の麦飯を含む土壌から微細藻
類を単離培養する方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23607993A JPH0787958A (ja) | 1993-09-22 | 1993-09-22 | 微細藻類を単離・培養する方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP23607993A JPH0787958A (ja) | 1993-09-22 | 1993-09-22 | 微細藻類を単離・培養する方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0787958A true JPH0787958A (ja) | 1995-04-04 |
Family
ID=16995416
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP23607993A Withdrawn JPH0787958A (ja) | 1993-09-22 | 1993-09-22 | 微細藻類を単離・培養する方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0787958A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997032969A1 (fr) * | 1996-03-07 | 1997-09-12 | Yasuhide Takashima | Procede de fermentation composite de micro-organismes aerobie et anaerobie |
| WO2012160360A2 (en) | 2011-05-20 | 2012-11-29 | Naturally Scientific Technologies Limited | Photosynthetic process |
-
1993
- 1993-09-22 JP JP23607993A patent/JPH0787958A/ja not_active Withdrawn
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1997032969A1 (fr) * | 1996-03-07 | 1997-09-12 | Yasuhide Takashima | Procede de fermentation composite de micro-organismes aerobie et anaerobie |
| WO2012160360A2 (en) | 2011-05-20 | 2012-11-29 | Naturally Scientific Technologies Limited | Photosynthetic process |
| WO2012160360A3 (en) * | 2011-05-20 | 2013-02-28 | Naturally Scientific Technologies Limited | Photosynthetic process |
| US9562244B2 (en) | 2011-05-20 | 2017-02-07 | Naturally Scientific Technologies Limited | Method of producing plant suspension cells in a growth medium enriched with carbonic acid |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 20001128 |