JPH0761269B2 - 菌類の同質多倍数体の形成方法 - Google Patents
菌類の同質多倍数体の形成方法Info
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- JPH0761269B2 JPH0761269B2 JP1050091A JP5009189A JPH0761269B2 JP H0761269 B2 JPH0761269 B2 JP H0761269B2 JP 1050091 A JP1050091 A JP 1050091A JP 5009189 A JP5009189 A JP 5009189A JP H0761269 B2 JPH0761269 B2 JP H0761269B2
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Description
【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、菌類の同質多倍数体を形成させる方法に関す
るものである。更に詳しくは、コルヒチン又は／及び倍
数体形成能のあるコルヒチン誘導体を、菌類の分生子又
は菌糸体に作用させて、菌類の同質多倍数体を得る方法
である。
るものである。更に詳しくは、コルヒチン又は／及び倍
数体形成能のあるコルヒチン誘導体を、菌類の分生子又
は菌糸体に作用させて、菌類の同質多倍数体を得る方法
である。
［従来の技術］ 種が新たな環境に適応するために、新たな形質を獲得す
る変異の供給源として、突然変異と組換えがある。これ
らを人為的に行い、全く新しい形質を持った産業上有益
な菌を創造する方法が行われている。
る変異の供給源として、突然変異と組換えがある。これ
らを人為的に行い、全く新しい形質を持った産業上有益
な菌を創造する方法が行われている。
産業上有益な有用菌の育種法の一つとして、薬品、紫外
線、放射線等を用いて、DNAの複製の誤りを人為的に行
わせる突然変異法がある。しかし、この突然変異法の処
理によって、分生子形成や生育等不良となる場合が多
く、産業上、取扱がきわめて不便となる。また、復帰突
然変異の可能性があり、新しく付加した形質が消失して
しまうことが知られている。さらに、突然変異は、DNA
の複製の誤りに起因するため、菌の保有する遺伝的多型
性の飛躍的な増加は望めず、産業上有益な菌の出現率は
低い。
線、放射線等を用いて、DNAの複製の誤りを人為的に行
わせる突然変異法がある。しかし、この突然変異法の処
理によって、分生子形成や生育等不良となる場合が多
く、産業上、取扱がきわめて不便となる。また、復帰突
然変異の可能性があり、新しく付加した形質が消失して
しまうことが知られている。さらに、突然変異は、DNA
の複製の誤りに起因するため、菌の保有する遺伝的多型
性の飛躍的な増加は望めず、産業上有益な菌の出現率は
低い。
一方、DNAの交差によって新たな形質を発現させて遺伝
的組換体を得る方法は、２個以上の細胞が融合して多核
細胞とする細胞融合によって行われている。
的組換体を得る方法は、２個以上の細胞が融合して多核
細胞とする細胞融合によって行われている。
細胞融合法は、センダイウイルス（HVJ）等を用いたウ
イルスによる方法、リゾレシチン、グリセロールオレイ
ン酸エステル等の細胞融合促進物質を用いた化学的方
法、電気パルスを用いて、細胞に孔を開けて融合させる
細胞電気融合法等がある。
イルスによる方法、リゾレシチン、グリセロールオレイ
ン酸エステル等の細胞融合促進物質を用いた化学的方
法、電気パルスを用いて、細胞に孔を開けて融合させる
細胞電気融合法等がある。
細胞融合法の中でも確立されたものでは、同質（Toyam
a,H.,Yamaguchi,K.,Shinmyo,A.,Okada,H.:J.Appl.Envir
on.Microbiol.,47,363（1984））、異質（Toyama,H.,Yo
koyama,H.,Shinmyo,A.,Okada,H.:J.Biotechnol.,1,25
（1984））の核を含む融合株を得て、これにより多核細
胞である倍数体を獲得する方法がある。
a,H.,Yamaguchi,K.,Shinmyo,A.,Okada,H.:J.Appl.Envir
on.Microbiol.,47,363（1984））、異質（Toyama,H.,Yo
koyama,H.,Shinmyo,A.,Okada,H.:J.Biotechnol.,1,25
（1984））の核を含む融合株を得て、これにより多核細
胞である倍数体を獲得する方法がある。
この倍数体の形成、即ち遺伝子の重複によってつくり出
された重複遺伝子は冗長なコピーを持つため、染色体間
の遺伝的組換えが、通常の二倍体細胞よりも容易に起こ
る。このため、新しい機能をもった遺伝子になり易いこ
とが知られている。
された重複遺伝子は冗長なコピーを持つため、染色体間
の遺伝的組換えが、通常の二倍体細胞よりも容易に起こ
る。このため、新しい機能をもった遺伝子になり易いこ
とが知られている。
同質多倍数体は、異質多倍数体と違い、増幅された染色
体が親細胞由来であり、このため遺伝的に安定であり、
微生物の機能管理が容易となり、産業上有益な遺伝的組
換体が得られる確率が高まる。
体が親細胞由来であり、このため遺伝的に安定であり、
微生物の機能管理が容易となり、産業上有益な遺伝的組
換体が得られる確率が高まる。
［発明が解決しようとする課題］ しかし、上記の細胞融合法は、人手と長時間を要し、倍
数体しかも低次倍数体が約１％の頻度で得られる程度で
あった。
数体しかも低次倍数体が約１％の頻度で得られる程度で
あった。
また、融合株を単離するのに両親株に遺伝的マーカーを
付加する必要があり、得られた組換体の増殖機能・酵素
生産能等の生物機能を低下させてしまう傾向があった。
付加する必要があり、得られた組換体の増殖機能・酵素
生産能等の生物機能を低下させてしまう傾向があった。
そこで、本発明は、同質多倍数体が減数分裂する際に、
多様な遺伝的組換えをおこし、その中から、産業的に有
益で、かつ遺伝的に安定した株を得るために、高頻度で
短期間に、遺伝的マーカーを付加することなしに菌類の
同質多倍数体を形成する方法を得ることを目的とする。
多様な遺伝的組換えをおこし、その中から、産業的に有
益で、かつ遺伝的に安定した株を得るために、高頻度で
短期間に、遺伝的マーカーを付加することなしに菌類の
同質多倍数体を形成する方法を得ることを目的とする。
［課題を解決するための手段］ 本発明による菌類の同質多倍数体の形成方法では、菌類
の分生子又は菌糸体の被験細胞を、該細胞分裂期に、pH
4.0以上のpH領域で、コルヒチン又は／及び倍数体形成
能のあるコルヒチン誘導体に曝すものである。
の分生子又は菌糸体の被験細胞を、該細胞分裂期に、pH
4.0以上のpH領域で、コルヒチン又は／及び倍数体形成
能のあるコルヒチン誘導体に曝すものである。
本発明に使用されるコルヒチンは、イヌサフランのアル
カロイドであり、細胞分裂において、紡錘糸形成を阻害
する作用があり、板数体植物をつくる薬剤として植物栽
培家に知られていたが、本発明により、初めて菌類の倍
数体形成能を有することが解った。
カロイドであり、細胞分裂において、紡錘糸形成を阻害
する作用があり、板数体植物をつくる薬剤として植物栽
培家に知られていたが、本発明により、初めて菌類の倍
数体形成能を有することが解った。
また、コルヒチン誘導体のうち、コルセミドのように菌
類の倍数体形成能を有する誘導体も本発明において初め
て明らかにされた。
類の倍数体形成能を有する誘導体も本発明において初め
て明らかにされた。
［作用］ 同質多倍数体は、異質多倍数体と違い、増幅された染色
体が親細胞由来であり、このため遺伝的に安定であり、
微生物の機能管理が容易となる。
体が親細胞由来であり、このため遺伝的に安定であり、
微生物の機能管理が容易となる。
そこで本発明では、菌類の同質多倍数体を得るために、
植物の育種に使用されている細胞分裂期に紡錘糸形成を
阻害するコルヒチン又は／及びコルヒチン誘導体を菌類
に曝らすものである。
植物の育種に使用されている細胞分裂期に紡錘糸形成を
阻害するコルヒチン又は／及びコルヒチン誘導体を菌類
に曝らすものである。
同質多倍数体は、一般に分生子形成や生育が良好となる
傾向がある。このため、今迄分生子形成等不良のため取
扱いにくかった菌株の取扱が容易となる。
傾向がある。このため、今迄分生子形成等不良のため取
扱いにくかった菌株の取扱が容易となる。
菌類を培養するための培養液が酸性である場合や菌類が
酸を生産する場合、コルヒチンがコルヒセインという染
色体増殖作用のない物質に変化し、同質多倍数体が得ら
れない。このため、培養液を調整する際に緩衝液等を用
いpHを微酸性〜アルカリ性として、処理するのが好まし
い。好ましいpHは4.0以上であり、上限は被験菌類によ
り異る。
酸を生産する場合、コルヒチンがコルヒセインという染
色体増殖作用のない物質に変化し、同質多倍数体が得ら
れない。このため、培養液を調整する際に緩衝液等を用
いpHを微酸性〜アルカリ性として、処理するのが好まし
い。好ましいpHは4.0以上であり、上限は被験菌類によ
り異る。
また、分生子又は菌糸体が細胞分裂し、増殖しないとコ
ルヒチン又は／及びコルヒチン誘導体の作用は生じな
い。このため、具体的には最初の細胞分裂が始まると同
時にコルヒチン又は／及びコルヒチン誘導体の作用も始
まるように、予め培養基中にコルヒチンを加える。ま
た、細胞分裂期にコルヒチン又は／及びコルヒチン誘導
体の作用があればよいので、培養基は液体培地でも固体
培地でも構わない。
ルヒチン又は／及びコルヒチン誘導体の作用は生じな
い。このため、具体的には最初の細胞分裂が始まると同
時にコルヒチン又は／及びコルヒチン誘導体の作用も始
まるように、予め培養基中にコルヒチンを加える。ま
た、細胞分裂期にコルヒチン又は／及びコルヒチン誘導
体の作用があればよいので、培養基は液体培地でも固体
培地でも構わない。
液体培地を振盪培養する場合、分生子又は菌糸体を加え
て培養すると、形成された同質多倍数体はペレット状と
なって培地中に多数出現するので、その１個１個をシャ
ーレ中の寒天培地上に置けば容易に同質多倍数体を分離
できる。
て培養すると、形成された同質多倍数体はペレット状と
なって培地中に多数出現するので、その１個１個をシャ
ーレ中の寒天培地上に置けば容易に同質多倍数体を分離
できる。
液体培地を静置培養する場合、同質多倍数体は被膜状に
増殖するため、その被膜を取り寒天培地上に置けば容易
に同質多倍数体を分離できる。
増殖するため、その被膜を取り寒天培地上に置けば容易
に同質多倍数体を分離できる。
固体培地を用いる場合は、菌体を培地の中心に置き、培
養すると同質倍数体が形成される。
養すると同質倍数体が形成される。
固体培地上に得られた同質多倍数体から発現する遺伝的
組換体の集落の形状は、通常の二倍体の集落の形状とは
違っており、その多くの場合は扇状セクターを形成する
ため、容易に同質倍数体及び遺伝的組換体を選別するこ
とができる。
組換体の集落の形状は、通常の二倍体の集落の形状とは
違っており、その多くの場合は扇状セクターを形成する
ため、容易に同質倍数体及び遺伝的組換体を選別するこ
とができる。
この扇状セクターを詳細に説明すると、通常交差が生じ
て遺伝的組換体が発現しなければ１つの円形のコロニー
を形成するのであるが、分裂時に交差によって遺伝的組
換えをした場合、１つのコロニーに２つ以上の違った形
質を持った細胞が存在することとなる。このため、円形
のコロニーを形成せず、複数の扇状のコロニーを集めた
扇状セクターを形成することとなる。
て遺伝的組換体が発現しなければ１つの円形のコロニー
を形成するのであるが、分裂時に交差によって遺伝的組
換えをした場合、１つのコロニーに２つ以上の違った形
質を持った細胞が存在することとなる。このため、円形
のコロニーを形成せず、複数の扇状のコロニーを集めた
扇状セクターを形成することとなる。
使用するコルヒチンの濃度及び処理時間は被験菌類の種
類により異るが、濃度が高い程また処理時間が長い程、
同質多倍数体の形成率が高い。一般的には、好ましい濃
度は0.01〜0.5％であり、これ以下では倍数体の形成率
が極端に低く、これ以上であれば、被験菌類の発育阻害
が生じる。濃度及び処理時間の調整により低次倍数体及
び高次倍数体の形成が可能となる。
類により異るが、濃度が高い程また処理時間が長い程、
同質多倍数体の形成率が高い。一般的には、好ましい濃
度は0.01〜0.5％であり、これ以下では倍数体の形成率
が極端に低く、これ以上であれば、被験菌類の発育阻害
が生じる。濃度及び処理時間の調整により低次倍数体及
び高次倍数体の形成が可能となる。
被験菌類は、後記実施例中に開示されているトリコデル
マ属（Trichoderma），アスペルギルス族（Aspergill
u）の子嚢菌亜門、リゾプス属（Rhizopus）の接合菌亜
門の他にも、ムコール属（Mucor）、ペニシリウム属（P
enicillium）、レンチヌス属（Lentinus edodes）、リ
ユウロタス属（pleurotus ostreatus）、フラムリナ属
（Flammulina relutipes）のような一般に真菌類と呼ば
れる類に広く用いることができる。
マ属（Trichoderma），アスペルギルス族（Aspergill
u）の子嚢菌亜門、リゾプス属（Rhizopus）の接合菌亜
門の他にも、ムコール属（Mucor）、ペニシリウム属（P
enicillium）、レンチヌス属（Lentinus edodes）、リ
ユウロタス属（pleurotus ostreatus）、フラムリナ属
（Flammulina relutipes）のような一般に真菌類と呼ば
れる類に広く用いることができる。
［実施例］ 本発明の方法では、炭素源と窒素源とを含み被験菌類の
培養に使用しうる培地を、pHが微酸性〜アルカリ性に
し、これにコルヒチン又は／及びコルヒチン誘導体を適
当量加えて減菌し、これに被験菌類の分生子又は菌糸体
を加えればよい。好ましいpHは4.0以上であり、上限は
被験菌類により異る。
培養に使用しうる培地を、pHが微酸性〜アルカリ性に
し、これにコルヒチン又は／及びコルヒチン誘導体を適
当量加えて減菌し、これに被験菌類の分生子又は菌糸体
を加えればよい。好ましいpHは4.0以上であり、上限は
被験菌類により異る。
その後、適当時間培養すると、細胞分裂が始まり、同時
にコルヒチン又は／及びコルヒチン誘導体の作用が始ま
り、同質多倍数体が形成されることとなる。
にコルヒチン又は／及びコルヒチン誘導体の作用が始ま
り、同質多倍数体が形成されることとなる。
本発明では、液体培地・固体培地共に同質多倍数体の形
成が可能である。培地のpHが酸性側であると、同質多倍
数体が形成されず、組換えが起こっていない場合が多
い。
成が可能である。培地のpHが酸性側であると、同質多倍
数体が形成されず、組換えが起こっていない場合が多
い。
培地調整に緩衝液を用いることで、酸を生産する菌類の
同質倍数体の形成にも適用可能となる。
同質倍数体の形成にも適用可能となる。
以下に具体的な実施例を詳細に示す。
（実施例１） グルコース２％、ペプトン0.5％、コルヒチン0.05％を
含むナティック（Natick）培地(NH4)2SO41.4g,KH2PO42.
0g,CaCl20.3g,Urea0.3g,MgSO4・7H2O0.3g,FeSO4・7H2O
0.3g,MnSO4・H2O0.0016g,ZnSO4・H2O0.0014g,CoCl20.00
20g:1pH8.0）20mlを50mlフラスコに入れて、120℃、1
5分間減菌して液体培地を調整した。
含むナティック（Natick）培地(NH4)2SO41.4g,KH2PO42.
0g,CaCl20.3g,Urea0.3g,MgSO4・7H2O0.3g,FeSO4・7H2O
0.3g,MnSO4・H2O0.0016g,ZnSO4・H2O0.0014g,CoCl20.00
20g:1pH8.0）20mlを50mlフラスコに入れて、120℃、1
5分間減菌して液体培地を調整した。
液体培地を冷却後、セルラーゼ生成株であるトリコデル
マ・リーゼイ（Trichoderma reesei）QM9414株を植菌
し、30℃で、往復振盪培養（120ストローク／分）し
た。
マ・リーゼイ（Trichoderma reesei）QM9414株を植菌
し、30℃で、往復振盪培養（120ストローク／分）し
た。
往復振盪培養は２〜３日間培養した。生育した菌体は、
培地中に多数のペレット状の集合体を形成した。
培地中に多数のペレット状の集合体を形成した。
このペレット状菌体を、PDA寒天培地（日水製薬（株）
製）を含むシャーレにスポットした、30℃で２〜３日間
培養すると、扇状セクターにより生育した同質多倍数体
を得た。
製）を含むシャーレにスポットした、30℃で２〜３日間
培養すると、扇状セクターにより生育した同質多倍数体
を得た。
シャーレに生育した分生子を核染色すると、核サイズの
増大が確認された。
増大が確認された。
（実施例２） グルコース２％、ペプトン0.5％、コルヒチン0.05％を
含むナティック培地（pH8.0）20mlを50mlフラスコに入
れて、120℃、15分間減菌して液体培地を調整した。
含むナティック培地（pH8.0）20mlを50mlフラスコに入
れて、120℃、15分間減菌して液体培地を調整した。
液体培地を冷却後、セルラーゼ生成株であるトリコデル
マ・リーゼイ（Trichoderma reesei）QM9414株を植菌
し、30℃で、静置培養した。
マ・リーゼイ（Trichoderma reesei）QM9414株を植菌
し、30℃で、静置培養した。
静置培養は４〜５日間培養した。生育した菌体は液体上
面に被膜を形成した。この被膜状菌体を遠心分離で集め
た。
面に被膜を形成した。この被膜状菌体を遠心分離で集め
た。
集めた皮膜状菌体を5mm四方に切りとり、PDA寒天培地を
含むスラントにスポットした。
含むスラントにスポットした。
30℃で２〜３日間培養して、扇状セクターにより生育し
た同質多倍数体を得た。
た同質多倍数体を得た。
スラントに生育した分生子を核染色すると、核サイズの
増大が確認された。
増大が確認された。
（実施例３） グルコース２％、ペプトン0.5％、コルヒチン0.05％そ
して寒天1.8％を含むナティック培地を120℃、15分間減
菌して、シャーレに撤いて固化させ固体培地を調整し
た。
して寒天1.8％を含むナティック培地を120℃、15分間減
菌して、シャーレに撤いて固化させ固体培地を調整し
た。
この固体培地にセルラーゼ生成株であるトリコデルマ・
リーゼイ（Trichoderma reesei）QM9414株を植菌して培
養した。
リーゼイ（Trichoderma reesei）QM9414株を植菌して培
養した。
30℃で培養すると２〜３日間で厚く広がったコロニー
（菌糸と分生子）を得た。この分生子を核染色すると核
サイズの増大が確認された。
（菌糸と分生子）を得た。この分生子を核染色すると核
サイズの増大が確認された。
（実施例４） グルコース２％、ペプトン0.5％、コルセミド0.2％そし
て寒天1.8％を含むナティック培地（pH8.0）を120℃、1
5分間減菌して、シャーレに撤いて固化させ固体培地を
調整した。
て寒天1.8％を含むナティック培地（pH8.0）を120℃、1
5分間減菌して、シャーレに撤いて固化させ固体培地を
調整した。
この固体培地にアスペルギルス・オリゼ（Aspergillus
oryzae）IFO5239株の分生子を接種した。
oryzae）IFO5239株の分生子を接種した。
30℃で培養すると２〜３日で厚く広がったコロニー（菌
糸と分生子）を得た。この分生子を核染色すると核サイ
ズの増大が確認された。
糸と分生子）を得た。この分生子を核染色すると核サイ
ズの増大が確認された。
（実施例５） グルコース２％、ペプトン0.5％、コルヒチン0.5％を含
むナティック培地（pH10.0）20mlを50mlフラスコに入れ
て、120℃、15分間減菌して液体培地を調整した。
むナティック培地（pH10.0）20mlを50mlフラスコに入れ
て、120℃、15分間減菌して液体培地を調整した。
この液体培地を冷却後、プロテアーゼ生産菌であるアス
ペルギルス・ニガー（Aspergillus niger）株を植菌し
た。30℃で４〜５日間静置培養した。培養後、生育した
菌糸体を濾紙で濾過し集めた。菌糸体を5mm四方に切り
とり、PDA寒天培地を含むシャーレにスポットした。
ペルギルス・ニガー（Aspergillus niger）株を植菌し
た。30℃で４〜５日間静置培養した。培養後、生育した
菌糸体を濾紙で濾過し集めた。菌糸体を5mm四方に切り
とり、PDA寒天培地を含むシャーレにスポットした。
30℃、２〜３日間培養すると菌糸と分生子を得た。この
分生子をDNA合成阻害剤であるベノミル1ppmを含むPDA寒
天培地にレプリカ（転写）して、30℃、２〜３日間培養
すると同質多倍数体及び遺伝子転換体のコロニーである
扇状セクターを得た。
分生子をDNA合成阻害剤であるベノミル1ppmを含むPDA寒
天培地にレプリカ（転写）して、30℃、２〜３日間培養
すると同質多倍数体及び遺伝子転換体のコロニーである
扇状セクターを得た。
（実施例６） グルコース２％、ペプトン0.5％、コルヒチン0.2％を含
むナティック培地（pH9.0）20mlを50mlフラスコに入れ
て、120℃、15分間減菌して液体培地を調整した。
むナティック培地（pH9.0）20mlを50mlフラスコに入れ
て、120℃、15分間減菌して液体培地を調整した。
この液体培地を冷却後、アミラーゼ生産菌であるリゾプ
ス・スピィーシーズ（Rhizopusspecies）株を植菌し
た。30℃で３日間静置培養した。培養後、生成したペレ
ットを濾紙で濾過し集めた。
ス・スピィーシーズ（Rhizopusspecies）株を植菌し
た。30℃で３日間静置培養した。培養後、生成したペレ
ットを濾紙で濾過し集めた。
このペレット状菌体をそのままか5mm四方に切りとり、P
DA寒天培地を含むシャーレにスポットした。
DA寒天培地を含むシャーレにスポットした。
30℃、３日間培養すると菌糸と分生子を得た。この分生
子を核染色すると核サイズの増大が確認された。
子を核染色すると核サイズの増大が確認された。
以上のようにして得られた同質倍数体は、原株よりも分
生子着生能、生育にすぐれており、半数体化処理しなく
とも遺伝的に安定であり、倍数体のまま、酵素やその他
の物質生産等の産業に利用し得る。
生子着生能、生育にすぐれており、半数体化処理しなく
とも遺伝的に安定であり、倍数体のまま、酵素やその他
の物質生産等の産業に利用し得る。
コルヒチン又は／及びコルヒチン誘導体の処理による倍
数体形成に要する期間は、細胞融合法による倍数体形成
に要する期間より短く、開発費用の低減の効果もある。
数体形成に要する期間は、細胞融合法による倍数体形成
に要する期間より短く、開発費用の低減の効果もある。
コルヒチン又は／及びコルヒチン誘導体の処理時間を調
節することにより、低次倍数体から高次倍数体まで形成
可能である。このことは、それら倍数体を半数体化して
得ようとする有用な遺伝的組換え体の獲得頻度を高める
こととなる。
節することにより、低次倍数体から高次倍数体まで形成
可能である。このことは、それら倍数体を半数体化して
得ようとする有用な遺伝的組換え体の獲得頻度を高める
こととなる。
遺伝的に全く均質な同質染色体を保持する同質倍数体を
用いて半数体化を行ない、遺伝的組換え試験を行なうこ
とにより、産業上、有用な酵素等の遺伝子の染色体上の
位置や分布等の染色体レベルの情報が得られ、将来の産
業上の発展の可能性が期待できる。
用いて半数体化を行ない、遺伝的組換え試験を行なうこ
とにより、産業上、有用な酵素等の遺伝子の染色体上の
位置や分布等の染色体レベルの情報が得られ、将来の産
業上の発展の可能性が期待できる。
［発明の効果］ 本発明は以上説明したように、菌類の分生子又は菌糸体
の被験細胞を、該細胞分裂期に、pH4.0以上のpH領域
で、コルヒチン又は／及び倍数体形成能のあるコルヒチ
ン誘導体に曝らすために、高頻度で短期間に容易に菌類
の同質多倍数体を形成することができ、容易に遺伝的組
換体が得られ、遺伝的多型性の飛躍的な増加が望める。
の被験細胞を、該細胞分裂期に、pH4.0以上のpH領域
で、コルヒチン又は／及び倍数体形成能のあるコルヒチ
ン誘導体に曝らすために、高頻度で短期間に容易に菌類
の同質多倍数体を形成することができ、容易に遺伝的組
換体が得られ、遺伝的多型性の飛躍的な増加が望める。
また、融合株を単離するのに両親株に遺伝的マーカーを
付加する必要がなく、この遺伝的マーカーによる生物機
能の低下がない。
付加する必要がなく、この遺伝的マーカーによる生物機
能の低下がない。
その上、処理濃度及び処理時間を調節することで、低次
倍数体から高次倍数体の形成が可能となり、産業上有益
な遺伝的組換体が得られる確率が高まる。
倍数体から高次倍数体の形成が可能となり、産業上有益
な遺伝的組換体が得られる確率が高まる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 (Ｃ１２Ｎ 1/15 Ｃ１２Ｒ 1:66） (Ｃ１２Ｎ 1/15 Ｃ１２Ｒ 1:845）
Claims (2)
- 【請求項１】菌類の分生子又は菌糸体の被験細胞を、該
細胞分裂期に、pH4.0以上のpH領域で、コルヒチン又は
／及び倍数体形成能のあるコルヒチン誘導体に曝すこと
を特徴とする菌類の同質多倍数体の形成方法。 - 【請求項２】前記倍数体形成能のあるコルヒチン誘導体
が、コルセミドであることを特徴とする請求項１に記載
の菌類の同質多倍数体の形成方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1050091A JPH0761269B2 (ja) | 1989-03-03 | 1989-03-03 | 菌類の同質多倍数体の形成方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1050091A JPH0761269B2 (ja) | 1989-03-03 | 1989-03-03 | 菌類の同質多倍数体の形成方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02231080A JPH02231080A (ja) | 1990-09-13 |
| JPH0761269B2 true JPH0761269B2 (ja) | 1995-07-05 |
Family
ID=12849377
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP1050091A Expired - Fee Related JPH0761269B2 (ja) | 1989-03-03 | 1989-03-03 | 菌類の同質多倍数体の形成方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0761269B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0479301B1 (en) * | 1990-10-04 | 1996-07-31 | Nihon Shokuhin Kako Co., Ltd. | A host vector system |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6152287A (ja) * | 1984-08-17 | 1986-03-14 | Meiji Milk Prod Co Ltd | 細胞融合方法 |
-
1989
- 1989-03-03 JP JP1050091A patent/JPH0761269B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH02231080A (ja) | 1990-09-13 |
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