JPH07505119A - （３ｓ，４ｓ）−デルタ−６−テトラヒドロカンナビノール−７−酸及びそれらの誘導体並びにそれらの合成方法並びにそれらを含む医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （３Ｓ、　４Ｓ）−デルタ−６−チトラヒドロカンナビノールー７−酸及びそれ らの誘導体並びにそれらの合成方法並びにそれらを含む医薬組成物発明の分野 本発明は、（３Ｓ、　４Ｓ）−デルタ−６−チトラヒドロカンナビノールー７− 酸（（３Ｓ、４Ｓ）−ｄｅｌｔａ−６−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃａｎｎａｂｉｎ ｏｌ−７−ｏｉｃ　ａｃｉｄｓ）及び同族体及びそいれらの誘導体であって（３ Ｒ，４Ｒ）形感を本質的に含まないもの、並びにそれらの合成方法に関する。本 発明は、上記の化合物を活性成分として含み、抗炎症性（ａｎｔｉ−ｉｎｆｌａ ｍｍａｔｏｒｙ）　、鎮痛性（ａｎａｌｇｅｔｉｃ）　、白血球抗−癒着性（ｌ ｅｕｃｏｃｙｔｅ　ａｎｔｉ−ａｄｈｅｓｉｏｎ）　、抗血小板活性化因子（Ｐ ＡＰ）（ａｎｔｉｐｌａｔｅｌｅｔ　ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ　ｆａｃｔｏｒ）　 、及び抗−線内症（ａｎ　ｔ　ｉ　−ｇ　ｌａｕｃｏｍａ）活性を、並びにニュ ーロンの損傷又は損失が原因の特定の症状を緩和することにおいて有効な性質を 、もつ医薬組成物にも関する。

発明の背景 偽カンナビ（ｃａｎｎａｂｉｍｉｍｅｔｉｃａｌｌｙ）活性のカンナピノイド（ （、ａｌｎａｂ　１ｎｏｉｄｓ）の（３５，４Ｓ）　エナンシオマー、例えば、 天然の（３Ｒ，４Ｒ）−デルタ−１−テトラヒドロカンナビノール（（３Ｒ，４ Ｒ）−ｄｅｌｔａ−１−ｔｅｔｒａｈｙｄｒｏｃａｎｎａｂｉｎｏｌ（ＴＨＣ） ）は、一般的に、偽カンナビ性である。不所望のＣＮＳ副作用の上記の欠如は、 それらを、治療剤としての好適な候補にしている。（３Ｓ、　４Ｓ）−７−ビト ロキシ−デルタ−６−テトラヒドロカンナビノール−１，１−ジ−メチルへブチ ル同族体（添付図中の化合物物１ａ）は、鎮痛性、抗催吐性（ａｎｔ　ｉｅｍｅ ｔ　ｉｃ）、及び抗−間ＤＡ薬である［米国特許第４．８７６、２７６号及び同 時係属中のイスラエル特許出願第９２２３８号：Ｍｅｃｈｏｕｌａｍ、　Ｒ，、 ｅｔ　ａｌ、、　Ｔｅｔｅｒａｈｅｄｒｏｎ：　Ａｓｙｍｍｅｔｒｙ、　１．３ １５（１９９８４（１９８９）］。（３Ｒ，４Ｒ）−デルタ−１−テトラヒドロ カンナビノール−７−酸（化合物２）であって同様に神経作用効果（ｐｓｙｃｈ ｏｔｒｏｐｉｃ　ａｆｆｅｃｔｓ）を全く示さないものが、抗炎症性及び鎮痛性 の化合物である〔米国特許第４．８４７．２９０号１０しかしながら、コノ（３ Ｓ、４Ｓ）−テトラｔ：　Ｆロカンナビノール−７−酸は、未だ合成されておら ず、そしてそれらの治療的活性は、未だ知られていない。これらの化合物を、今 般合成し、そして予期せぬ治療的に重要な性質を有していることを発見した。

発明の要約 本発明は、（３Ｓ、４Ｓ）−デルタ−６−チトラヒドロカンナビノールー７−酸 、同族体及びそれらの誘導体であって、以下の一般式：［式中、Ｒが水素原子又 はＣ＋−Ｃｓアルキル基であり、Ｒ１が水素原子又はＣ＋−Ｃｓアシル基であり 、そしてＲ１が：（ａ）直鎖又は分枝Ｃｓ　−Ｃ＋ｔ７ｚｌｚ−１’４：（ｂ） −０−Ｒａ基（基中Ｒ４が直鎮又は分枝のＣ２−Ｃ，アルキルであってフェニル 基によりその末端炭素原子において置換されることができるものである。）：及 び（ｃ）−（ＣＨ２）　−−０−アルキル基（基中ｎが１から７までの整数であ り、そしてこのアルキル基がｌから５までの炭素原子を含んでいる。）から成る 群から選ばれている。］をもつものに関する。

最も好ましい化合物は、（３Ｓ、　４Ｓ）−（＋）−デルタ−６−チトラヒドロ カンナビノールー７−酸（以下、ＨＵ−２３５という、添付図１中の化合物３ａ ）及びその酢酸塩（以下、Ｈｔｌ−２４５という、添付図１中の化合物３Ｃ）の １．１−ジメチルへブチル（Ｄ＆Ｉ）Ｉ）同族体である。

上記の全ての化合物が（＋）−（３Ｓ、　４Ｓ）立体配座を有しており、（＋） −（３Ｒ，４Ｒ）エンアンジオマーを本質的に含まないということを強調する。

一般式（１）により定められるタイプの化合物は、”カンナビータイブ（Ｃａｎ ｎａｂｉｓ−ｔｙｐｅ）″のＣＮＳ活性を実質的に欠いている。

本発明は、一般式（ｒ）の化合物の合成方法にも関する。

第一の態様においては、一般式（＋）の化合物であって式中Ｒが水素又はＣ２− Ｃｓアルキル基であり且つＲ′及びＲ２が請求項１中で定義するものと同じであ る化合物の合成方法は。

（ａ）以下の式： Ｌ式中、Ｙが直鎖又は分枝のＣ，−Ｃ，アルキル基であり、Ｘが好適な保護基で あり、そしてＲ２が式（１）中で定義したものと同しである。］により表される 化合物を、好適な還元剤と反応させ、以下の式（Ｉｌｌ） により表される対応するアリル・アルコールを得て、（ｂ）この式（［［Ｄのア ルコールを、好適な酸化剤により酸化し、以下の式（［Ｖ）： により表される対応するアルデヒドを得て、（Ｃ）この式（］Ｖ）のアルデヒド を、好適な酸化剤により酸化し、以下の式（■）： により表される対応するアリル酸を得て、そして、Ｃｄ＞この保護基Ｘを除去し 、式（＋）に記載の酸を得る、を含んで成る。

Ｙは、例えば、（トリメチル）メチルであることができる。

（ａ）段階においては、保護基ＯＹは、場合により、−ＮＲ’　Ｒ’　［基中、 Ｒ４及びＲＳｆＪ＜Ｃ、−Ｃｓアルキル基である。］により置き換えられてもよ い。

このフェノールＸは、例えば、ジメチル−ｔｅｒヒブチルノリル、又は他のシリ ル誘導体、例えば、フェニルシリル、Ｃ、−ＣＳアルキル基又はベンジルである ことができる。これらのアルキル又はベンジル・エーテルであってこのフェノー ル基に対する保護基として役立つものは、標準的な手順によりその後に除去され ることができる。

上記の還元剤は、例えば、水素化リチウム・アルミニウムであることができる。

第二の態様においては、一般式（１）の化合物であってその置換基が先に定義し たものと同じであるものは、以下の（ａ）以下の式。

１式中、Ｒ２が先に定義したものと同しである。］により表される化合物を、選 択的エステル化に供し、以下の式（ＶＩＤ［式中、Ｒ３がＣ１−ＣＳアルキル基 又はベンジルであってそのバラ位において塩素又は臭素により置換されているも のである。１により表される対応するフェノール・エステルを得て。

（ｂ）この式（Ｖｌｌ）のエステルを、好適な酸化剤により酸化し、以下の式（ Ｖｌｌｌ） により表される対応するアルデヒドを得て、そして、（Ｃ）この式（Ｖｌｌｌ） のアルデヒドを、好適な酸化剤により酸化し、以下の式（］）・ ＯＯＨ ？ により表される対応する酸を得て、そして、場合により、そのエステル基ＣＯＲ ’を除去し、以下の式・ により表される対応する化合物を得る、のように合成される二とがてきる。

第一の態様に従って、その経路を図１中に説明する。出発物質は、７−ビトロキ ン−デルタ−６−テトラヒトロカンナビノールー〇ＭＨ（ｌａ）（ＨｔＪ−２１ １）（これは、＾ＩｅｃｈｏｕＩａｍ、　Ｒ，、ｅｔ　ａｌ、、　Ｔｅｔｒａｈ ｅｄｒｏｎ：　ＡＳｙｍｍｅｔｒできる。）であって、その７−位において、慣 用の保護基、例えば、ピバレートにより保護されたもの（化合物１ｂ）　、慣用 の保護基、例えば、ジメチル−ｔｅｒｔ−ブチルシリルにより同様に保護された フェノール基（化合物４ｂ）である。この保護された出発物質を、例えば、水素 化リチウム・アルミニウムにより還元し、その対応するアリル・アルコール（化 合物４ａ）を得る。このアルコールを、次に、例えば、ピリジン中の酸化クロム により酸化し、その対応するアルデヒド（化合物５ｂ）を得る。他の酸化剤、例 えば、ｔｅｒｔ−ブチル・クロメート、クロム酸／ピリジン複合体又は関連クロ メート誘導体又は酸化マンガン、特にノアン化物の存在中のもの、又は関連マン ガン誘導体を、使用することができる。このアルデヒドを、例えば、亜塩素酸ナ トリウムにより、さらに酸化し、対応するアリル酸（化合物３ｂ）を得る。他の 酸化剤、例えば、シアン化ナトリウム及び酢酸の存在中の２酸化マンガン並びに 関連マンガン誘導体を、使用することができる。このフェノール保護基を、次に 除去し、所望の酸（化合物３ａ、　ＨＵ−２３５）を得る。この合成ルートは、 合成された関連化合物の一連のものを作り出す。

第二の態様も、出発物質として、７−ヒドロキシ−デルター６−ｔｅｔｒａ−ヒ ドロカンナビノール−ＤＮＩＨ（化合物１ａ）を使用する。この出発物質を、選 択的エステル化に供し、モノ・アセテート（化合物４ｃ）を得て、これと共に、 酸化の間、例えば、ピリジン中のクロム酸によりアルデヒド（化合物５ｄ）を得 て、これを、さらに、酸化して、酸（化合物３ｃ、　ＨＵ−２４５）を得る。上 記のような他の酸化剤を使用することができる。このフェノール保護基の除去が 、所望の酸（化合物３ａ、　ＨＵ−２３５）を導く。

また、本発明は、医薬組成物であって、鎮痛性、抗−炎症性、抗−催吐性、抗− 線内症、抗−血小板活性化因子及び白血球抗−唐着活性の能力を存し、活性成分 として一般式（］）の化合物を含むものに関する。これらの組成物も、中枢神経 系に対する急性損傷、例えば、遅延性てんかん性発作（ｐｒｏｌｏｎｇｅｄ　ｅ ｐｉｌｅｐｔｉｃ　５ｅｉｚｕｒｅｓ）、妥協され又は減少された血液供給、グ ルコース供給の喪失及び機械的な外傷を、原因とする興奮性（ｅｘｃｉ　ｔａｔ ｏｒｙ）アミノ酸の神経毒性を、減少させそしてさらに防止することができる。

この組成物は、大てんかん（ｇｒａｎｄ　ｍａｌ）発作、全般低酸素症虚血性障 害（ｇｌｏｂａｌ　ｈｙｐｏｘｉｃｉｓｃｈｅｍｉｃ　１ｎｓｕｌｔｓ）におけ る、単独の又は血液法減少（虚血症）と−緒になった低酸素症（ｈｙｐｏｘｉａ ）における、並びに大脳動脈（ｃｅｒｅｂｒａｔ　ａｒｔｅｒｉｅｓ）の突発性 閉塞（ａｂｒｕｐｔ　ｏｃｃｌｕｓｉｏｎ）の場合における、特別な価値を存す る。本発明の組成物は、特定の慢性の変性疾患であって段階的選択的ニューロン 損失、主にノ＼ンチングトン舞踏病（Ｈｕｎｔｉｎｇｔｏｎ’ｓ　ｃｈｏｒｅａ ）　、パーキンソン症候群（Ｐａｒｋｉｎｓｏｎｉｓｍ　）及びアルツハイマー 病（Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ’ｓ　ｄｉｓｅａｓｅ）と関連するものにおいても有効 である。本発明の組成物は、多発性硬化症（ｍｕｔｉｐｌｅ　５ｃｌｅｒｏｓｉ ｓ）の治療においても有効であることも発見された。本発明の組成物は、中枢神 経系に影響を与える被毒（ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ）　、例えば、ストリキニン（ｓ ｔｒｙｃｈｎｉｎｅ）、ピクロトキシン（ｐｉｃｒｏｔｏｘｉｎ）又は有機リン 系被毒（ｏｒｇａｎｏｐｈｏｓｐｈｏｒｏｕｓ　ｐｏｉｓｏｎｉｎｇ）の治療に おいても育用である。

本新規の組成物は、上記活性成分に加えて、慣用の医薬として許容される担体、 希釈剤等を含む。経口投与のための固体組成物、例えば、錠剤、ビル、カプセル 等を、上記活性成分を、慣用の医薬として許容される成分、例えば、コーン・ス ターチ、ラクトース、ンユクロース、ソルビトール、タルク、ステアリン酸、ス テアリン酸マグネシウム、リン酸２カルシウム及び医薬として許容される希釈剤 を含むガムと、混合することにより調製することができる。錠剤及びピルを、被 覆し又は別のやり方で、遅延型作用又は持続性放出を与える投与形態を提供する ことが知られている医薬として許容される材料と共に配合することができる。そ の他の固体組成物を、直腸投与のための座剤として調製することができる。液体 の形感を、投与又は注射のために調製することができる。この用語は、皮下、経 皮的、静脈内、クモ膜下腔内（ｉｎｔｒａｔｅｃｈａｌ）等の投与を含む。この 液体組成物は、水溶液、芳香性シロップ、水性又は油性懸濁液、食用油を含む芳 香性エマルジョン、並びにエリキシル剤（ｅｌｉｘｉｒｓ）及び類似の医薬媒体 を含む。さらに、本発明の組成物を、鼻内等の投与のためのエアロゾルとして作 ることができる。

ヒトのための活性投与量は、一般的に、１日当たり１−４回の養生法（ｒｅｇｉ ｍｅｎ）において、体重１ｋｇ当たり０゜００５ｍｇから約５０ｍｇまでの範囲 内にある。しかしながら、１日おきのの投与も可能である。なぜなら、その医薬 がむしろ遅延型作用をもっているからである。投与量の好ましい範囲は、体重１ ｋｇ当たり１．Ｏｍｇから約２０ｍｇまでである。しかしなから、投与量が、治 療されるべき疾患、投与方法、患者の年齢、体重、反対兆候等に従って、担当医 により決定されるであろうことは、当業者には明らかである。

先に定義した化合物のすべては、上記の症状の治療において有効であり、そして 先に定義した症状（ｓｙｍｐｔｏｍｓ）又は失調（ｄｉｓｏｒｄｅｒｓ）の１つ 又は同時に数個の治療のための医薬組成物の活性成分として使用することができ る。有効投与量は本質的に同様である。　゛本発明は、先に記載した様々な病因 の症状の治療のための、本発明の組成物の使用にも関する。治療的有効量の本発 明の組成物の使用時の投与は、本明細書中で、経口、経腸的、静脈内、筋肉内、 皮下、経皮的、クモ膜下腔内、直腸内、及び鼻内の投与を包含している。

１、　ジメチル−ｔｅｒｔ−ブチルシリル・エーテル（４ａ）の合成エステル（ ｌｂ）（２，９ｇ、　６．１７ｍｍｏｌ）、［（ｒ　］Ｄ＋＋５２．６°（ｃ、 　１７．２ｍｇ／ｍｌ。

ＣＨＣｌ　２　）を、乾燥ツメチルホルムアミド（ＤＭＦ）（６ｍｌ）中に溶解 させる。ジメチル−ｔｅｒｔ−ブチルシリル・クロライド（１，８５ｇ、　１２ ．２７ｍｍｏｌ）及びイミダゾール（１，６７ｇ、　２４．６ｍｍｏｌ）を、添 加し、そして得られた混合物を、３８°Ｃで４８時間攪拌した。水（３０ｍｌ） を添加し、そして混合物を、エーテルで抽出した。乾燥エーテル層の蒸発後、油 （４ｂ）　（３，６ｇ）を得た；［α］Ｄ＋＋５３°（ｃ、　２４．４５ｍｇ／ 吐ＣＨＣｌ　、　）：　１．Ｒ，最大（生）１７２５ｃｍ−’。遊離のヒドロキ シル基は全く観察されなかった：　’　ＨＭＩＲδ（ＣＤＣＩ　！　）３．２８ （ＩＨ，ｂｒ　ｄ、　Ｊ＝１６Ｈｚ、　Ｃ−２ｅｑｕａｔ、　Ｈ）、　４．４６ （２Ｈ。

ｓ、　Ｃ−７８）、　５．７０（ＩＨ，ｍ、　Ｃ−６Ｈ）、　６．３８　（ＩＨ ，ｄ、　Ｊ＝１．５　Ｈｚ、　ａｒｏｍ、）。

６．４２　（ｌ）１．　ｄ、　Ｊ＝１．５　Ｈｚ、　ａｒｏｍ）　、この油（４ ｂ）を、さらに精製することなく次の段階において使用した。

乾燥エーテル（５０ｍｌ）中の化合物（４ｂ）（３，２ｇ、　５．５ｍｍｏｌ） の溶液を、窒素雰囲気下、乾燥エーテル（６０ｍｌ）中の水素化リチウム・アル ミニウム（８７０ｍｇ）に添加した。得られた混合物を、１．５時間還流下沸騰 させた。普通の処理（透明なエーテル上澄液が形成されるまでの、酢酸エチル後 の硫酸マグネシウムの飽和溶液のゆっくりした添加）の後、このエーテル層を、 乾燥させ、そして蒸発させ、油（３，２ｇ）を得た。この油を、シリカゲル・カ ラム（１００ｇ）上で、エーテル二石油エーテル（６：４）を溶出液として使用 して、クロマトグラフィーにか（す、アルコール Ｃｌ　３　）　１．Ｒ．最大（生）３３２０ｃｍ−’（ＯＨ結合）、カルボニル 結合無し。

’　Ｈ　ＮＭＲδ（ＣＤＣＩ　、　）６３．３８（１！（、　ｂｒ　ｄ．　Ｊ＝ １６Ｈｚ．　Ｃ−２　ｅｑｕａｔ．　Ｈ）。

４、０２（２Ｈ．　ｓ．　Ｃ−７８）、　５．７２（ｌＨ’．　ｂｒ　ｄ．　Ｃ −６　）１）、　６．３６．　６．４２　（２Ｈ．　ｓ、ａｒｏｍａｔｉｃ）　 。

２、　アルデヒドの合成（５ｂ） 乾燥ピリジン（２．３ｍｌ）　、その後の酸化クロム８１．４４ｇ．　１４．４ ｍｍｏｌ）を、塩化メチレンＤＭＦ（４：ｌ）の溶液に添加した。この混合物を 、１５分間攪拌した。塩化メチレンＤＡＩＦ（４　：　１）（７．　２ｍｌ）中 の第一アリル・ヒドロキシ化合物（４ａ）（１．８ｇ．　３．６ｍｍｏｌ）を、 添加し、そして反応混合物を室温で１時間攪拌した。エタノール（１．８ｍｌ） を添加し、この混合物をさらに１０分間攪拌し、そして次に、酢酸エチル（１８ ０ｍｌ）により希釈した。得られた混合物を、焼結ガラス漏斗であってシリカ（ ３ｃｍ）を詰め、頂上に無水硫酸ナトリウムの層をもつものを通して濾過し、そ して酢酸エチル（約６００ｍｌ）により溶出させた。この酢酸エチル濾液を、希 釈塩化水素酸（ＩＮ）により、次に２炭酸ナトリウム溶液及び水により洗浄した 。その乾燥有機溶媒の蒸発後、半固体の化合物（５ｂ）（１．７ｇ．　９５％） を得た。ペンタンからの結晶化によりアルデヒド（５ｂ）を得た；融点８０−８ ビＣ：［α］ー２６８°；（ｃ．　６．８２ｍｇ／ｍ１．　ＣＨＣＩ、　）１． Ｒ．　ｆｉ大１６９０ｃｍ　−’　（生）：　’　Ｈ　ＮＭＲδ（ＣＤＣＩ　、 　）　３．８２（１１（。

ｂｒ　ｄ．　Ｊ＝１５ｔ（ｚ．　Ｃ−２　ｅｑｕａｔ．　Ｈ）、　６．３８及び ６．４２（２Ｈ．　ｓ．　ａｒｏｍａｔｉｃ）。

６、８０（ＩＨ．　ｍ．　Ｃ−６　Ｈ）、　９．５０（ＩＨ，　ｓ．　Ｃ−７　 ８）。

分析（Ｃｓ１）１　ｓ。０　３　Ｓｉ）ＣＨ　０３、　（３Ｒ．４Ｒ）−デルタ −６−ＴＩ（Ｃ−Ｄ＆ＩＨ−７−酸（３ａ）の合成亜塩素酸ナトリウム（４８８ ｍｇ）を、少しずつ激しく攪拌しながら、アルデヒド（５ｂ）（４９８ｍｇ．　 １ｍｍｏｌ）、２−メチル−２−ブテン（２．　２４ｍｌ）、飽和水性リン酸２ 水素カリウム（１．３４ｍｌ）及びｔ−ブタノール（２２ｍｌ）の混合物に添加 した。この反応混合物を、室温で５時間攪拌した。水（２０ｍｌ）を添加し、そ してその混合物を。酢酸エチルで数回抽出し、乾燥させ、そして蒸発させ、粗酸 を得て、これを、シリカゲル・カラム（ｌｏｇ．　１０％エーテル　石油エーテ ルによる溶出）上で精製し、酸（３ｂ）（４６０ｍｇ、　８９％）を油として得 た：［ａ　］Ｄ＋２１８°：（ｃ、　１３．７ｍｇ／ｍ１．　ＣＨＣｌ、　）ｉ 、Ｒ，最大１６８０ｃｍ　−’　：及び２８００−３６００領域内のブロード・ バンド：　’　ＨＮ＋ｌｌＲδ（ＣＤＣＩ　、　）　３．７５（ＩＨ，ｂｒ　ｄ 、Ｊ＝１８Ｈｚ、Ｃ−２ｅｑｕａｔ、Ｈ）、６．２３（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１．５． 　ａｒｏｍ、）、６．２７（ＩＨ，ｄ、Ｊ＝１．５．　ａｒｏｍ、）、７．００ （１１（、ｍ、Ｃ−６８）。

テトラブチルアンモニウム・フルオリト（ＴＨＦ中０．６ｍｍｏｌ　溶Ｍ）を、 窒素雰囲気下のインジェクションにより、テトラヒドロフラン（’ｒ　ＨＦＸ３ ｍ１）中の酸（３ｂ）（２８０ｍｇ、　０．５４ｍｍｏｌ）の冷溶液（水浴）に 添加した。得られた溶液を、０°Ｃにおいて１５分間攪拌した。水を、添加し、 そしてこの混合物を数回エーテルにより抽出した。このエーテル層を、乾燥し、 そして蒸発され、粗生成物を得た。この生成物を、さらに溶出液としてエーテル 　石油エーテル（１１）により、シリカゲル・カラム上で精製した。このように 得られた固体（１４０ｍｇ、　５６％）を、アセトニトリルから結晶化し、酸（ ３ａ）融点＋１２−１１４（焼結）；［αｌＤ＋２７５°：（ｃ、　３．８ｍｇ ／ｍ１．　ＣＨＣｌ　、　）　１．Ｒ，最大（Ｎｕｊｏｌ）１６８０ｃｍ　−’ 　；及び３１００−３６００領域内のブロード・バンド：　’　ＨＮ＆ｌＲδ３ ．８２（ＩＨ，ｂｒ　ｄ。

Ｊ＝１８）（ｚ、　Ｃ−２ｅｑｕａｔ、　）ｌ）、　６．２２（ＩＨ，ｄ、　Ｊ ＝１．５．　ａｒｏｍ、）、　６．３８（ＩＨ，ｄ。

Ｊ＝１．５．　ａｒｏｍ、）、７．１６（ＩＨ，ｍ、　Ｃ−６Ｈ）：　ｍ／ｚ　 ４００（ｋｌ）。アセテート（３ｃ）、（ＨＵ−２４５）　、１２０−＋２２° Ｃおいて融解：　［ｃｒ　］　Ｄ＋２６５°：（ｃ、　９．０ｍｇ／ｍｌ。

ＣＨＣｌ　３　）［、Ｒ，ｆｉ大（Ｎｕｊｏｌ）１７６０ｃｍ　−’　：及び３ １００−３６００ｃｍ　−’領域内のブロード・バンド：’ＨＮ八Ｉへ（ＣＤＣ ｈ　）δ２．３０（３Ｈ，ｓ、　０ＣＯＣＨｚ　）。

３．３８（ＩＨ，ｂｒ　ｄ、　Ｊ＝Ｉ９Ｈｚ、　Ｃ−２ｅｑｕａｔ、　Ｈ）、　 ６．５６（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝１．５Ｈｚ。

ａｒｏｍ、）、　６．６８（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝１．５、ａｒｏｍ、）、　７．１ ８（ＩＨ，ｍ、　Ｃ−６Ｈ）　ｏ分析（Ｃ２＝Ｈｉｓｏ　Ｓ　）Ｃ，＋（。メチ ル・エーテル（３ｄ）　＋７２−１７４°Ｃにおいて融解；［αｌＤ＋２７０° ：（７，５ｍｇ／ｍ１．　ＣＨＣｌ　−）　［、Ｒ，最大（ＫＢｒ）１６６０． １６８０ｃｍ−１、及び３１００−３６００ｃｍ−’＠域内のブロード・バンド ：　（ＣＨＣｌ、　、　）１６９６ｃｍ−Ｉ；　’　ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ−）　 ３．７６（ＩＨ，ｂｒ　ｄ、　Ｊ＝１８Ｈｚ、　Ｃ−２ｅｑｕａｔ。

Ｈ）、３．８０（３）（、ｓ、　０ＣＨｚ　）、６．３９．　６．４２．　（２ Ｈ，ｓ、　ａｒｏｍａｔｉｃ）、　７．１６（ＩＨ，ｍ、　Ｃ−６Ｈ）：ＬＩＳ 　ｍ／ｚ　４１４　（Ｌじ）。分析（Ｃ２，Ｈ、，０４）Ｃ，Ｈ。

４、　アルデヒド（５ａ）の合成 テトラブチルアンモニウム・フルオリド（ＴＨＦ中０．４ｍｍｏｌ溶液）を、窒 素雰囲気下、インジェクションにより、ＴＨＦ　（４ｍｌ）中のアルデヒド（５ ｂ）（２００ｍｇ、　０．４ｍｍｏｌ）の冷溶液（水浴）に添加した。コノ溶液 を、０°において５分間、そして次に、室温におい′ＣＩ５分間攪拌した。

この溶液を蒸発させ、そしてその残渣を、シリカゲル・カラム（１０ｇ）上で分 離した。この生成物を、エーテル：石油エーテル（１５：８５）により、溶出し た。得られた固体（１２０ｍｇ、７８％）を、ペンタンから結晶化し、所望の化 合物（５ａ）融点１７４−１７５°Ｃを得た：　［、Ｒ，最大（ＫＢｒ）　１６ ９０ｃｍ　−’　：’　ＨＮ＆１Ｒ（ＣＤＣＩ　ｚ）δ３．８４（ＩＨ，ｄ、　 Ｊ＝１７Ｈｚ、　Ｃ−２／ｅｑｕａｔ。

Ｈ）、　６．２４．６．３６（２Ｈ，ｓ、　ａｒｏｍａｔｉｃ）、　６．８６（ ＩＨ，ｍ、　Ｃ−６８）、　９．４８（Ｉ）ｌ。

ｓ、　Ｃ−７Ｈ）。分析（Ｃ２５Ｈｉｔｏ　３　）Ｃ，Ｈ、メチル・エーテル（ ５ｃ）　＋０９−＋１０°Ｃにおいて融解：　［ｔｘ　］　Ｄ＋３０２°（Ｃ， ８，２ｍｇ／ｍ１．　Ｃ）ＩｃＩ　２　）；　［、Ｒ，最大（生）１６８０ｃｍ 　”’　：　’　ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩ　！　）６３．７６（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝１ ８Ｈｚ、　Ｃ−２ｅｑｕａｔ、Ｈ）、３．８０（３Ｈ，ｓ、ＯＣＨ２）、６．３ ８．　（ＩＩ（、ｄ、、Ｉ’１．５．　ａｒｏｍ。

）、６．４２．　（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝］、５．　ａｒｏｍ、）、　６．８２（Ｉ Ｈ，ｍ、　Ｃ−６Ｈ）、　９．５０（ＩＮ、　ｓ。

Ｃ−７Ｈ）：ＡＩＳ　ｍ／ｚ　３９８　Ｑｌ　”″）。分析（Ｃ２ｇＨ、、Ｏ、 ）Ｃ，）！　。

５、ＨＵ−２１１、モノアセテート（４Ｃ）の合成カリウム（Ｉｇ）を、２−メ チル−２−ブタノール（１６ｍｌ）に、窒素雰囲気下で添加した。この混合物を 、８０°Ｃにおいて、金属のすべてが反応するまで温めた。過剰のアルコールを 、真空蒸留により除去し、そしてその乾燥残渣を、乾燥ベンゼン（４５ｍｌ）中 に溶解させた。この溶液の２ｍｌを、乾燥ベンゼン（３０ｍｌ）中に溶解した間 −２１１（３００ｍｇ、　０．７８ｍｍｏ　ｌ　）に添加した。この溶液を、窒 素雰囲気下、２時間、攪拌し、そしてそれを、希釈ＨＣＩＣＨＣｌＮ）、次に２ 炭酸ナトリウム溶液（ＩＮ）、そして次に、水により洗浄した。この有機層を、 ＡｌｇＳＯ，上で乾燥させ、そして蒸発させた。得られた油を、シリカゲル（１ ５ｇ）上でクロマトグラフィーにかけた。エーテル二石油エーテル（１：１０） による溶出は、ジアセテートのＨＵ−２１１（９９ｍｇ）を、その後、（そのア リル・アルコール部分上の）微量のモノアセテートがエーテル　石油エーテル（ ２：１０）により溶出され、その後、このモノアセテート（４ｃ）　１５０ｍｇ を、１７６０ｃｍ−’における］Ｒピークにより同定した：　’　）ｌ　ＮＭＲ ６２，２８（３Ｈ，ｓ、　０ＣＯＣＨｚ　）、　２．９８（ＩＨ，ｄｄ、　Ｃ− ２ｅｑｕａｔ、　Ｈ）、　４．０２（２Ｈ，ｑ、　Ｃ−７Ｈ）、　５．７２．　 （ＩＨ，ｄ、　Ｃ−６Ｈ）、　６．５２．６．６６　（ａｒｏｍ、　Ｈ）。

６、　アルデヒド（５ｄ）の合成 乾燥ピリジン（０，６４５ｍ１．８ｍｍｏｌ）を、塩化メチレン：ＤＭＦ（４： Ｉ）に、添加し、その後、酸化クロム（４００ｍｇ、　４ｍｍｏｌ）を添加した 。この混合物を、室温において１５分間攪拌した。上記の溶媒混合物（２ｍｌ） 中のエステル（４ｃＸ４３０ｍｇ、　Ｉｍｍｏｌ）を、添加し、そしてその反応 混合物を、室温において托時間攪拌し、次に、酢酸エチル（５０ｍｌ）により希 釈し、そして焼結カラス漏斗であって３ｃｍ層のンリカにより被覆されその上に 無水硫酸マグネシウムの層（Ｉｃｍ）をもつものを通して濾過した。

酢酸エチル（２００ｍｌ）を、この二重層を通過させ、その溶媒を、蒸発させ、 そしてその残渣を、エーテル　石油エーテル（１：５）を使用してシリカ上のク ロマトグラフィーにかけ、油としてアルデヒド（５ｄ）２８０ｍｇ（６６％）を 得て、１７６０ｃｍ　−’　（酢酸フェノール）及び１６８０ｃｍ　−１（不飽 和アルデヒド）における［Ｒビークにより同定した。　’　ＨＮＭＲ６２，２０ （３Ｈ，Ｓ、　０ＣＯＣＨ、）、　２．８２（ＩＨ，ｄｄ、　Ｃ−２ｅｑｕａｔ 、　Ｈ）、　６．４２゜６．５８　（ａｒｏｍ、　Ｈ）、　６．７０（Ｃ−６Ｈ ）、　９．４０（アルデヒドＨ）ｏこのアルデヒドをさらに精製することなく使 用した。

７、（３Ｓ、４Ｓ）−ＴＨＣ−Ｄへ１Ｈ−７＝酸、アセテート（３ｃ）（ＨＵ− １４５）の合成亜塩素酸ナトリウム（４８８ｍｇ、　４．３ｍｍｏｌ）を、少し ずつ激しく攪拌しなから、アルデヒド（５ｄ）（４，２６ｍｇ、！ｍｍｏｌ）　 、２−メチル−２−ブテン（２゜２４ｍ１．２１ｍｍｏ１．）　、飽和リン酸２ 水素カリウム（１，３４ｍ１）及び【−ブタノール（２２ｍｌ）の混合物に添加 した。この反応混合物を、室温で５時間攪拌し、酢酸エチルで抽出し、硫酸マグ ネシウム上で乾燥させ、そして溶媒を除去した。得られた酸（９０ｍｇ、　８８ ％）、融点１２０−１２２°Ｃ（ペンタンから）は、先に記載した物質と同一で あった。

アラキドン酸の注射によりげっ歯頚における足（ｐａｗ）の水腫誘発は、炎症の ための実験的モデルとして使用されてきた［Ｃａ１ｈｏｕｎ、　Ｗ、。

ｅｔ　ａｌ、、　Ａｇｅｎｔｓ　ａｎｄ　Ａｃｔｉｏｎｓ、　２１．３０６　（ １９８７）］。多くの場合において非−ステロイド系抗−炎症薬（ＮＳＡＩＤｓ ）の前投与は、投与量関連の水腫反応の抑制であって臨床効果の指標として考え ることができるものを導く。上記のカンナピノイド酸Ｈ［Ｊ−２３５、及び関連 化合物は、表１中に見られるように上記のモデルにおいて足水腫の減少に有効で あった。

第二のモデルであって、その中で水腫が血小板活性化因子（ＰＡＦ）により誘発 されたものを、活性を評価するために使用した。表ＩＩ中に要約した結果から見 られることができるように、上記の酸ＮＵ−２３５及び関連化合物は、活性であ ることが見つかった。

上記に条件は、先に報告されたものに基づいていた［Ｃｈａｌｈｏｕｎ　ｅ！ａ ｌ、、　１ｂｉｄ］。水を、その置き換え媒質として水銀と置換し、そして満足 な結果を与えることが見つかった。生理食塩水中の５％エタノールの５０μｌ中 に溶解したＰＡＰ（１，０ａｇ）又はアラキドン酸（１，０ｍｇ）を、Ｃｈａｒ ｌｅｓ　Ｒｉｖｅｒ　Ｌａｂｓから得られたＣＤ−１雌マウス（２０−２５ｇ） の右後足の足底（ｐｌａｎｔａｒ）表面中に皮下注射した。このマウスを、この 手順の間エーテル麻酔の下にあった。この右足の容量を、処理前及ｑＰＡＰ注射 １５分後又はアラキトネート注射３０分後に、水置換により、外くるぶしく１ａ ｔｅｒａｌ　ｍａｌｌｅｏｕｓ）のレベルまで測定した。足の容量における変化 を、それぞれのマウスについて計算し、そしてそれぞれの群ニツイての有意性を 、対ｔテスト検定法（ｐａｉｒｅｄ　ｔ　ｔｅｓｔ　ａｎａｌｙｓｉｓ）により 決定した。

０．０５０　３５．７（Ｎ、Ｓ、）　５．５（Ｎ、Ｓ、）　４８．５＊　４２． ＋（Ｎ、Ｓ、＞０．１００　５０．１章　１０．２（Ｎ、Ｓ、）　６６．２＊　 ６５．８章０．２５０　４８．２＊　４０．１（Ｎ、Ｓ、）５１．４本　５２． ６零０．５５　４２．２（Ｎ、Ｓ、）　４７．２ネ　４８．２ネ　４７．４）１ ０−２３５（３ａ）　４４．４（Ｎ、Ｓ、）　３８．７ネ　３１．９才　６０． １零　−−）ＩＵ−２４５（３ｃ）　３７．３本　６６．９＊　７２．０＊　− −７ｂ　３９．０＊　５９．０傘　６８．２ネ　−　−ＨＵ−２１１（ｌａ）　 ３７．５　２１．９−（Ｎ、Ｓ、）　（Ｎ、Ｓ、） Δ−ＴＨＣ−７−酸　−−５０，２ １示された値は、媒体処理対照としたときの足水腫の抑制パーセントである。

本ＡＮＯＶＡによる９５％有意性。Ｎ、　Ｓ、−有意差なし。

２対照マウスに、ビーナツツ油（５０μｍ）を経口的に与えた。

３示された値は、媒体処理対照としたときの足水腫の抑制パーセントである。

＊　ＡＮＯＶＡによる９５％有意性。Ｎ、　Ｓ、−有意差なし。

４対照マウスに、ビーナツツ油（５０μｍ）を経口的に与えた。

２、　白血球の癒着減少 白血球は、炎症反応に対する主要な原因であると教示されており、そしてこの点 に関してのそれらの能力は、様々な基質へのそれらの癒着性により再現されてい る［Ａｕｄｅｔｔｅ、　Ｃ，Ａ、、　ｅｔ　ａｌ、、　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉ、。

４７、７５３　（１９９０）］。表【１］中のデータは、本カンナビノールを経 口投与されたマウスからの腹膜（ｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）白血球が減少した癒着 性を示すことを示している。

白血球癒着検定の詳細は、先に報告されている［Ａｕｄｅｔｔｅ　ｅｔ　ａｌ、 。

１ｂｉｄ、　］。簡単に言えば、雌ＣＤ−１マウス（２０−２５ｇ）からの腹膜 細胞を上記の薬及び媒体（５０μｍビーナツツ油）の経口投与９０後において回 収した。それぞれの処理群からの細胞（Ｎ・３）を、プールし、そして同じ数を 、６つの培養皿ｗｅｌｌ（１，９ｃｍ’面積）に分けた。１８−２０時間のイン キユベーシヨンの後、非−逢着細胞を、除去し、そして残った細胞の単層を、Ｄ ＮＡ測定により定量した。

（ｍｇ、Ｊ）　’　ＨＵ−２１１（ｌａ）　間−２４５（３Ｃ）　２３５　（３ ａ）対照　０．８８±０．０８（ｔｏｏ）　１．２６±０．０５（＋００）　１ ．２６±０．０５（１００）０．０１　−　１．３４±０．１４（１０６）０． ０５　１．０９±０．０８（１２４）ネ１．３２±０．０４（＋０５）　１．２ ９±０．０５（＋０２）０．１０　０．４４±０．０３（５０）零　〇、６６± ０．０５（５２）本　１．３８±０、＋７（１１０）０．２０　− ０．５０　０．６４±０．０６（７３）ネ　０．８５±０．０８（６７）本　１ ．４６±０．０５（１１６）１．００　０．５９±０．０６（６７）＊　０．３ ０±０．０４（２４）零　〇、７０±０．１２（５６）ネＴＨＣ−７−酸 対照　０．８１±０．０３− ２０　０．６７±０．０２（９０，６）ネ４０　０．５５±０．２２（６７，９ ）本５値は、癒着細胞数ｘ　１０−’士標準誤差。腹膜内の数が対照のパーセン ト。詳細については実験のセクションを参照のこと。

＊　ＡＮＯＶＡによる９５％有意性：その他は、満足できる程の有意差はなかっ た。

６対照マウスに、５０μｍのビーナツツ油を経口的に与えた。腹膜細胞を、カン ナピノイドの経口投与９０分後に回収した。

３、　抗侵害受容性（ａｎｔｉｎｏｃｉｃｅｐｔｉｏｎ）多くのＮ５ＡＩＤタイ プ薬と同様に、本カンナピノイトも、抗侵害受容性のためのマウス・ホット・プ レート・テスト（５５℃）において活性を示した。

痛覚脱失（ａｎａ　Ｉｇｅｓ　ｉａ）のためのホット・プレート・テストにおい て、アルミニウム表面を、その金属内の通路を通しての循環水により５５±ｌ″ Ｃにおいて維持した。直径１８ｃｍ及び高さ２６ｃｍの透明のプラスチック円筒 を、逃げるのを防ぐためのその表面上に置いた。このマウスが後足をなめる動作 をし又はその表面から飛び跳ねるかの何方かとなったときを、その終点とした。

マウスは、１回以上は全く使用せず、対照値を、午前１１時においていつも測定 し、そしてそのテスト値を午後２時において測定した。本薬を、このホット・プ レート・テストの９０分前に経口投与した。反応時間（潜伏期）におけるパーセ ンテージの変化を、そのテスト値の平均と対照値の平均とを比較することにより 計算し、そして統計的な有意差を、Ｂｒａｉｎｐｏｗｅｒ、　Ｉｎｃ、、　Ｃａ １ａｂａｓａｓ、　Ｃａからのソフトウェア−（Ｓｔａｔｖｉｅｗ、　５１２） を使用して対ｔ−テスト検定法により測定した。

表ＩＶ 投与量（ｍｇ、ｋｇ）　ＨＵ２１１（Ｉａ）　３ｅ　ＨＵ−２４５（３ｃ）　Ｈ Ｕ−２３５（３ａ）０．０２５　ｌＯ，７（５）　１０．３（５）０．０５０　 ６６．２（５）零　６１．７（５）本０．１０　６２．２（５）本　４９．５（ ２０）本領２５　３０．０（５）本　１０．４（５）　６８．１（１０）本　６ １．５（１７）木本〇、５０　７２．５（５）本本本４９．０（１０）本４９． ９（５戸　５１．７（８）本１．０　−１０．２（５）　６１．−１（１５）本 １２．５（５）　１４．７（５）７値は、潜伏期におけるパーセンテージの変化 である。詳細については、上記を参照のこと。括弧内の数字は、マウスの数であ る。

本Ｐｒｏ、０５＋ ネ本対ｔテストによるＰ＜０．００５ものも：他のものは、満足できるほどの有 意差をもっていなかった。

４、　カタレプシー（ｃａｔａｌｅｐｔｉｃ）効果本明細書中に記載した化合物 についてのＣＮＳ活性の損失を、表Ｖ中に示されるデータから見ることができる 。これを、いわゆる”リング・テスト（ｒｉｎｇ　ｊｅｓ＋）−により測定し［ Ｐｅｒいｖｅｅ、　Ｒ，Ｇ、、　ｅｔ　ａｌ、。

Ｊ、　Ｐｈａ、ｒｍａｃｏｌ、、４６．７５３　（１９７２）］　、この中で、 カンナピノイトのカタレプシー効果を定量化することができる。本化合物は、そ の親藁と比較したとき、少しの反応を生しさせ又は反応を全く生しさせなかった 。

このカタレプシー反応を、リング・テストを使用して測定した。

マウスを、直径５．５ｃｍの水平なワイヤー・リングであって１６Ｃｍの垂直ロ ットに付着したもの上に置いた。後足及び前足を、このリングの反対側に置いた 。周囲温度か３０°Ｃにおいて維持され、その環境が聴覚刺激及び明るい光から 全くもたないことが重要である。不動性の判断基準は、Ｐｅｒｔｗｅｅにより詳 述されている。反応を、５分間のテスト期間にわたりマウスが動かない時間の分 数として計算する。

測定を、午後２時と午後４時との間にいつも行い、そして動物を、１回限り使用 した。

媒体９　７．７　上４゜４ ＨＵ−２４５（３ｃ）　０．５　６．８　上２゜４ＨＵ−２４５（３Ｃ）　１． ０　１２．０　上６゜０ＨＵ−２３５（３ａ）　０．２５　１２．３　±１０３ ＨＩＪ−２３５（３ａ）　０．５　１３．８　上７゜９ＨＩＪ−２３５（３ａ） 　１．０　１０．４　±ｌ０９６ＨＵ−２３５（３ａ）　４、Ｏ８，７±５．６ Δ　’−ＴＨＣ４０４８，９±１６本 １値を、マウスが動かないで残った時間の分数の平均上標準誤差として表した。

＊ＡＮＯＶＡによる９５％有意性、その他は、満足できるほとの有意差をもって いなかった。

９ビ一ナツツ曲（５０μｌ）を、経口的に与えた。

５、　神経保１（ｎｅｕｒｏｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ）本化合物は、神経保護を示 すために一般的に使用される幾つかのテストにおいて活性である。例えは、ＨＵ −２４５であって最もよく調査されているものは、マウスにおいて死亡率（ｌｅ ｔｈａｌｉｔｙ）を誘発するＮ−メチル−〇−アスパルテート（ＮＩＩＩＤＡ） 及びビクロトキンンの遮断薬てあり、ＮＵ−２１１（化合物１ａ）については先 に見られいる（イスラエル特許出願第９２２３８号）。それは、ラットにおいて 死亡率を誘導するストリキニンに対しても保護する。化合物ｆｌｕ−２１１（Ｉ ａ）、ＨＵ−２３５（３ａ　）及びＨＵ−２４５（３ｃ）は、モンゴリアン・ア レチネズミ（ｍｏｎｇｏｌｉａｎ　ｇｅｒｂｉＩｓ）における前脳虚血（ｆｏｒ ｅｂｒａｉｎ　ｉｓｃｈｅｍｉａ８片側性の閉塞（ｕｎｉｌａ＋ｅｒａｌ　ｏｃ ｃｌｕｓｉｏｎ））に対して保護することも示されている。

Ｂａ１ｂ／ｃ雄マウスに、Ｎ！ｔｌＤＡによる処理（１２５ｍｇ／ｋｇ）の９０ 分前又はエマルション中のビクロトキンン（８ｍｇ／ｋｇ）の１２０分前に上記 の薬を皮下投与した。表ＶＩ中に示した生存率は、使用した動物の全数からの生 存数を示している。

ビグ０トキノノ　ｔ（Ｌｌ−２４５（１０ｍｇ／ｋｇ）　５／８ヒクロトキノン 　ＨＵ−２１１（１０ｍｇ／ｋｇ）　６／１０ヒクＵト＋＞ノ　ＨＵ−２３５（ １０ｍｇ／ｋｇ）　８／１２Ｎ八ＩＤＡ　Ｏ／２Ｏ ＮへＩＤＡ　ＨＵ−２４５（２，５ｍｇ／ｋｇ）　６／１２ＮＭＤＡ　ＨＵ−２ ４５（１０ｍｇ／ｋｇ）　８／１０間ＤＡ　ＨＵ−２３５（１０ｍｇ／ｋｇ）　 ７／１ＯＮＡＩＤＡ　ＨＵ−２１１（ｌｏｍｇ／ｋｇ）　ＩＩ／１６６、　抗− 線内症活性（ａｎｔｉ−Ｇｌａｕｃｏｍａ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ）ウサギにおける 眼内圧の減少を、ウサギの眼にカンナピノイドの１％エマルジョンの５０μｍの 添加により、測定した。このテストは、抗−線内症の測定である。ＨＵ−２３５ 及びＨＵ−２４５の化合物について有意な減少か確立された。

７、　卵母細胞（ｏｏｃｙｔｅｓ）における閲ＤＡ−遮断反応卵母細胞は、発現 された電圧−若しくは伝達−作用のあるイオン・チャンネルの、分子的、生物身 体的な、そして薬理学的な性質を研究するために最も広く使用されている系であ る。この巨大な細胞は、本タイプの研究のために幾つかの利点を提供する。それ を、２−電極電圧クランプ試験のために、容易に使用することができ、様々な源 からの注射されたｍＲＮＡを翻訳し、そしてその翻訳された蛋白を機能的に発現 し、そしてそれは、細胞間のマイクロインジェクションを容易に受け入れること もできる。重要なことは、単一の卵母細胞内での伝達−若しくは電圧−誘導電流 の記録が、非常に安定しており、そして２−３時間、切れることなく起こること ができ、このことか、羊−卵母細胞における全投与量−反応の関係の性能を可能 にしている。

興奮性のアミノ酸（ＦＡＡ）のニューロンのレセプタは、正常及び病的な脳の機 能の理解のために益々重要になってきた。ＥＡＡレセプタ／イオン・チャンネル 複合体の定量的な薬理学的な研究は、ニューロンにおいて研究することか困難で ある。それ故、脳のｍＲＮＡを注射されたアフリカッメガエル（Ｘｅｎｏｐｕｓ ）卵母細胞は、今般の選択された調製物である。

ラットのｍＲＮＡを注射した卵母細胞内でのＮ−メチル−〇−アスバルテー　ト （ＭＩＤＡ）に対する反応を、特徴付けし、そしてＨＵ−２４５の効果を研究し た。

雌のアフリカッメガエルを０．１５％トリ力イン・メタンスルホネー）　（ｔｒ ｉｃａｉｎｅ　ｍｅｔｈａｎｅｓｕｌｆｏｎａｔｅ）を含む水の中に沈めること により麻酔し、そして小さな切開を下腹部において行った。卵巣断片を間−９６ 中に取り出した。このカエルを、再び使用する前に、少なくとも３力月の間治癒 に供した。

この卵母細胞を、その小胞（ｆｏｌｌｉｃｌｅ）細胞層を取り出すためにコラゲ ナーゼ処理により脱小胞した。この脱小胞卵母細胞に、ラット脳ＲＮＡのすべて を注射し、そして無菌ＮＤＥ−９６溶液中で２２°Ｃにおいて２−４時間インキ ュベートした。ＮＤ−９６溶液は、（ｎｔｌにおいて）：ＮａＣ１９６、ＫＣＩ 　２　、ＣａＣ１’２１．８　、）Ｉｅｐｅｓ　５　（ｐＨ＝７．４−７．６） を含む。ＮＤＥ−９６は、さらに、２．５ｎｔｌのピルビン酸ナトリウム、１０ ０単位／ｍｌのペニシリン、１００μｇ／ｍｌのストレプトマイシンを含む。

単一の卵母細胞を、室温においてＮＤ−９６溶液でその上面を恒常的に洗い流す ところの１ｍｌ浴に置いた。この細胞を、２つのマイクロ電極で突き刺し、そし て電圧クランプ回路を使用して一６０ｍＶの膜電位に保った。

ＲＮＡを、生後１４日口のウサギの脳の脳から抽出した。それぞれの卵母細胞に 、５０ｎ１の全ＲＮＡ　（水中８ｍｇ／ｍｌ、−８０°Ｃにおいて３−１Ｏｎ１ 部分として保管したもの）をインジェクトした。

すべての化学物質は、Ｓ　ｉ　ｇｍａからのものであった。

ウサギＲＮＡをインジェクトされた卵母細胞は、全てのεＡＡ（ＮＭＤＡ、カイ ニン酸塩（ｋａｉｎａｔｅ）　、グルタメート）に対して、そして他の伝達物質 （５）ＩＴ、　ＧＡＢＡ等）に対して反応性となる。ＮＭＤＡにより活性化され た電導度を、より詳しく検査した。はとんどの卵母細胞においては、Ｎ＆ＩＤＡ 単独は、検出可能な電流のいずれをも引き出さず、そしてグリシンの添加か、反 応を引き起こすために必要であった。それ故、ＮＭＤＡ反応を観察するために、 組み合わせ：ｌＯ−’Ｍ　ＮＭＤＡ及び５　Ｘ　１０−’Ｍグリシン、をすべで の実験において使用した。

幾つかのＮＭＤＡレセプタ遮断薬をテストした。これらの化合物は、非常に低い 可溶性をもち、そして１００％ジメチル・スルホキシド（Ｄ＆ｌ５Ｏ）中に溶解 しなければならず、そして１％ＤＭＳＯを含むＮＤ　９６における使用のために 希釈しなければならなかった。それ故、１０−’　Ｍ　Ｎ＆ＩＤＡ及び５　ｘ　 １０−’Ｎ！グリシンへの反応に対する１％Ｄ＾ＩｓＯの効果を検査した。

Ｄ！ＪＳＯは、３つの異なる細胞におけるＮＭＤＡ反応に対して全く効果をもっ ていなかった。

新規の誘導体ＨＵ−２４５を、１０−＠ｋｌの濃度におけるＮ＆ｌＤＡ反応に対 してテストした。完全な遮断効果は、その化合物か１０−７Ｍまでの濃度におい てのみ可溶であることから、達成されることができなかった。

化合物ＨＵ−２４５は、間ＤＡに対する反応に対し強い阻害効果−１０−＠＆ｌ における対照の５５％をもっていた。）１０−２４５の他の利点は、従来技術の 化合物のものよりも高い、その可溶性であろう。）１０−２４５の効果は、ＮＤ 　９６溶液に対しても同じであった。

ｅ、　Ｒ’ＣＨ３；Ｒ’Ｈ 補正音の翻訳文提出書 （特許洪第１８４条の８） 平成６年り月／７日

Claims (23)

【特許請求の範囲】
1. １．以下の式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒが水素原子又はＣ１−Ｃ５アルキル基であり、Ｒ１が水素原子又はＣ １−Ｃ５アルキル基であり、そしてＲ２が：（ａ）直鎖又は分枝Ｃ５−Ｃ１２ア ルキル基：（ｂ）−Ｏ−Ｒ４基（基中Ｒ４が直鎖又は分枝のＣ２−Ｃ９アルキル 基であってその末端炭素原子においてフェニル基により置換されることができる ものである。）：及び（ｃ）−（ＣＨ２）ｎ−Ｏ−アルキル基（基中ｎが１から ７までの整数であり、そしてこのアルキル基が１から５までの炭素原子を含んで いる。）から成る群から選ばれている。）により表される化合物であって、その （３Ｓ，４Ｓ）立体配座をもち、その（３Ｒ，４Ｒ）のエナンシオマーを本質的 に含まない化合物。
2. ２．Ｒが水素であり、そしてＲ１が水素又はメチルである、請求項１に記載の化 合物。
3. ３．Ｒ２が１，１−ジメチルヘプチルである、請求項１又は請求項２に記載の化 合物。
4. ４．（＋）−（３Ｓ，４Ｓ）−デルタ−６−テトラヒドロカンナビノール−７− 酸の１，１−ジメチルヘプチル同族体である、一般式（Ｉ）の化合物。
5. ５．（３Ｓ，４Ｓ）−（＋）−デルタ−６−テトラヒドロカンナビノール・アセ テート−７−酸の１，１−ジメチルヘプチル同族体である、一般式（Ｉ）の化合 物。
6. ６．式中Ｒが水素又はＣ１−Ｃ５アルキル基であり、そしてＲ１及びＲ２が請求 項１の中で定義するものと同じである式（Ｉ）の化合物の合成方法であって、以 下の段階： （ａ）以下の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩ）（式中、Ｙが直鎖又は分枝のＣ１− Ｃ５アルキルであり、Ｘが好適な保護基であり、そしてＲ２が請求項１の中で定 義したものと同じである。）により表される化合物を、好適な還元剤と反応させ 、以下の式（ＩＩＩ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＩＩ）により表される対応するアリル・ アルコールを得て、（ｂ）この式（ＩＩＩ）のアルコールを、好適な酸化剤によ り酸化し、以下の式（ＩＶ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＩＶ）により表される対応するアルデヒド を得て、（ｃ）この式（ＩＶ）のアルデヒドを、好適な酸化剤により酸化し、以 下の式（Ｖ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｖ）により表される対応するアリル酸を得 て、そして、（ｄ）この保護基Ｘを除去し、式（Ｉ）に記載の酸を得る、を含ん で成る方法。
7. ７．式中、Ｙが直鎖又は分枝Ｃ１−Ｃ５アルキルである、請求項６に記載の方法 。
8. ８．式中、Ｙが（トリ−メチル）メチル基である、請求項７に記載の方法。
9. ９．式中、−ＣＯＯＹ基が、−ＣＯＮＲ４Ｒ５基（基中、Ｒ４及びＲ５がＣ１− Ｃ５アルキル基である。）により置き換えられている、請求項６に記載の方法。
10. １０．式中、Ｘが、ジメチル−ｔｅｒｔ−ブチルシリル、ジメチル・フェニルシ リル、Ｃ１−Ｃ５アルキル又はベンジルから選ばれた保護基である、請求項６に 記載の方法。
11. １１．Ｘがジメチル−ｔｅｒｔ−ブチルシリルである、請求項１０に記載の方法 。
12. １２．還元剤が水素化リチウム・アルミニウムである、請求項６〜１１のいずれ か１項に記載の方法。
13. １３．その置換基が請求項１の中に記載したものと同じである一般式（Ｉ）の化 合物の製造方法であって、以下の段階：（ａ）以下の式： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＶＩ）｛式中、Ｒ２が請求項１の中に記載 したものと同じである。｝により表される化合物を、選択的エステル化に供し、 以下の式（ＶＩＩ）：▲数式、化学式、表等があります▼（ＶＩＩ）｛式中、Ｒ ３がＣ１−Ｃ５アルキル基又はベンジルであってそのパラ位において塩素又は臭 素により置換されているものである。｝により表される対応するフェノール・エ ステルを得て：（ｂ）この式（ＶＩＩ）のエステルを、好適な酸化剤により酸化 し、以下の式（ＶＩＩＩ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ＶＩＩＩ）により表される対応するアルデ ヒドを得て：そして、（ｃ）この式（ＶＩＩＩ）のアルデヒドを、好適な酸化剤 により酸化し、以下の式（Ｉ）： ▲数式、化学式、表等があります▼ａｎｄにより表される対応する酸を得て、そ して、場合により、そのエステル基ＣＯＲ３を除去し、以下の式： ▲数式、化学式、表等があります▼ により表される対応する化合物を得る、を含んで成る方法。
14. １４．段階（ｂ）における酸化剤が酸化クロム、ｔｅｒｔ−ブチル・クロメート 、クロム酸／ピリジン複合体又は２酸化マンガンである、請求項６〜１３の中の いずれか１項に記載の方法。
15. １５．段階（ｃ）における酸化剤が亜塩素酸ナトリウム又は２酸化マンガンであ る、請求項６〜１４の中のいずれか１項に記載の方法。
16. １６．活性成分として、請求項１に記載の一般式（Ｉ）の化合物を含んで成る、 医薬組成物。
17. １７．活性成分が（３Ｓ，４Ｓ）−（＋）−デルタ−６−テトラヒドロカンナビ ノール−７−酸の１，１−ジメチル−へブチル同族体である、請求項１６に記載 の医薬組成物。
18. １８．活性成分が（３Ｓ，４Ｓ）−（＋）−デルタ−６−テトラヒドロカンナビ ノール・アセテート−７−酸の１，１−ジメチル−へブチル同族体である、請求 項１６に記載の医薬組成物。
19. １９．請求項１６〜１８の中のいずれか１項に記載の医薬組成物であって； （ａ）鎮痛性； （ｂ）抗−炎症性； （ｃ）抗−催吐性； （ｄ）抗−緑内症性； （ｅ）白血球抗−癒着活性；又は、 （ｆ）抗−血小板活性化因子（ＰＡＦ）活性、である医薬組成物。
20. ２０．以下の： （ａ）興奮性アミノ酸の神経毒性を原因とする中枢神経系に対する急性損傷の治 療、場合により、遅延性てんかん性発作、妥協され又は減少された血液供給、グ ルコース供給の喪失、機械的な外傷、全般低酸素症虚血性障害、心停止又は発作 、の治療；（ｂ）段階的選択的ニューロン損失と関連した慢性の変性疾患の治療 、場合により、ハンチングトン舞踏病、パーキンソン症候群、アルツハイマー病 及び多発性硬化症、の治療；（ｃ）中枢神経系に影響を与える被毒の治療、場合 により、ストリキニン、ピクロトキシン又は有機リン系被毒、の治療、のための 、請求項１６〜１８の中のいずれか１項に記載の医薬組成物。
21. ２１．投与単位形態における、請求項１６〜２０の中のいずれか１項に記載の医 薬組成物。
22. ２２．血小板活性化因子の不規則性又は不完全な白血球癒着活性を原因とする炎 症、痛み又は緑内症、嘔吐又は病的な症状の治療方法であって、請求項１９又は 請求項２１に記載の医薬組成物の治療的有効量を患者に投与することを含んで成 る方法。
23. ２３．以下の： （ａ）興奮性アミノ酸の神経毒性を原因とする中枢神経系に対する急性損傷、場 合により、遅延性てんかん性発作、妥協され又は減少された血液供給、グルコー ス供給の喪失、機械的な外傷、全般低酸素症虚血性障害、心停止又は発作； （ｂ）段階的選択的ニューロン損失と関連した慢性の変性疾患、場合により、ハ ンチングトン舞踏病、パーキンソン症候群、アルツハイマー病及び多発性硬化症 ；又は、 （ｃ）中枢神経系に影響を与える被毒、場合により、ストリキニン、ピクロトキ シン又は有機リン系被毒、 を治療する方法であって、請求項２０又は請求項２１に記載の医薬組成物の治療 的有効量を患者に投与することを含んで成る方法。