JPH07278174A - ホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物 - Google Patents
ホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物Info
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- JPH07278174A JPH07278174A JP7022501A JP2250195A JPH07278174A JP H07278174 A JPH07278174 A JP H07278174A JP 7022501 A JP7022501 A JP 7022501A JP 2250195 A JP2250195 A JP 2250195A JP H07278174 A JPH07278174 A JP H07278174A
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- mycoplasma
- compound
- lipid
- mycoplasma fermentans
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Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【構成】下記構造式Ｉで示される新規なホスホリルコリ
ン含有グリセロ糖脂質化合物。 【効果】上記のマイコプラズマ・フェルメンタンスの脂
質画分から分離精製によって得られた新規なホスホリル
コリン含有グリセロ糖脂質化合物は、マイコプラズマ・
フェルメンタンスの感染についての診断薬又は医薬、或
いは、それらの薬品の中間体として有用な化合物であ
る。
ン含有グリセロ糖脂質化合物。 【効果】上記のマイコプラズマ・フェルメンタンスの脂
質画分から分離精製によって得られた新規なホスホリル
コリン含有グリセロ糖脂質化合物は、マイコプラズマ・
フェルメンタンスの感染についての診断薬又は医薬、或
いは、それらの薬品の中間体として有用な化合物であ
る。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、マイコプラズマ・フェ
ルメンタンス（Mycoplasma fermentans)ＧＧＰＬ株の脂
質画分から見出された新規な『ホスホリルコリン含有α
−グルコース（糖）脂質化合物』に関するものである。
ルメンタンス（Mycoplasma fermentans)ＧＧＰＬ株の脂
質画分から見出された新規な『ホスホリルコリン含有α
−グルコース（糖）脂質化合物』に関するものである。
【０００２】
【従来技術の説明】ヒトレトロウイルスであるＨＴＬＶ
−Ｉ、およびＨＩＶ（human immunodeficiency virus）
はいずれもリンパ球のなかでもとくにヘルパーＴ細胞に
感染しやすく、ＨＴＬＶ−Ｉではこれをモノクローナル
に腫瘍化し、ＨＩＶではこれを破壊することにより発症
する。また、マイコプラズマ・フェルメンタンスは、Ｈ
ＩＶによるＡＩＤＳの発症やリウマチの病態に深く係わ
っているという報告があるが、そのメカニズムについて
は全くわかっていない。
−Ｉ、およびＨＩＶ（human immunodeficiency virus）
はいずれもリンパ球のなかでもとくにヘルパーＴ細胞に
感染しやすく、ＨＴＬＶ−Ｉではこれをモノクローナル
に腫瘍化し、ＨＩＶではこれを破壊することにより発症
する。また、マイコプラズマ・フェルメンタンスは、Ｈ
ＩＶによるＡＩＤＳの発症やリウマチの病態に深く係わ
っているという報告があるが、そのメカニズムについて
は全くわかっていない。
【０００３】
【本発明が解決しようとする問題点】本発明の発明者ら
は、このメカニズムを解明するために、マイコプラズマ
・フェルメンタンスの脂質における主要な抗原性を持つ
種特異的抗原であるところの糖リン脂質を分離、精製し
て構造解析を試み、生理活性を有する可能性のある新規
な構造の物質を見出すべく、鋭意研究した。
は、このメカニズムを解明するために、マイコプラズマ
・フェルメンタンスの脂質における主要な抗原性を持つ
種特異的抗原であるところの糖リン脂質を分離、精製し
て構造解析を試み、生理活性を有する可能性のある新規
な構造の物質を見出すべく、鋭意研究した。
【０００４】
【問題点を解決する手段】発明者らは、前述の目的で研
究を行った結果、新規な糖リン脂質を分離、精製するこ
とに成功し、さらに、その物質を構造解析すること〔例
えば、赤外吸収分析（ＦＴＩＲ）、質量分析、13Ｃおよ
び 1Ｈ−ＮＭＲなどにより構造解析すること〕により、
その絶対構造を確定した。
究を行った結果、新規な糖リン脂質を分離、精製するこ
とに成功し、さらに、その物質を構造解析すること〔例
えば、赤外吸収分析（ＦＴＩＲ）、質量分析、13Ｃおよ
び 1Ｈ−ＮＭＲなどにより構造解析すること〕により、
その絶対構造を確定した。
【０００５】即ち、本発明のホスホリルコリン含有グリ
セロ糖脂質化合物は、1'−〔2, 3−ビス（ヘキサデカノ
イルオキシ）プロピル〕−α−Ｄ−グルコピラノス−6'
−イル−2"−（トリメチルアンモニウム）エチルフォス
フェートに関する。
セロ糖脂質化合物は、1'−〔2, 3−ビス（ヘキサデカノ
イルオキシ）プロピル〕−α−Ｄ−グルコピラノス−6'
−イル−2"−（トリメチルアンモニウム）エチルフォス
フェートに関する。
【０００６】本発明のホスホリルコリン含有グリセロ糖
脂質化合物は、次に示す構造式Ｉを有している。
脂質化合物は、次に示す構造式Ｉを有している。
【０００７】
【化１】
【０００８】マイコプラズマ・フェルメンタンス（Myco
plasma fermentans)は、最近、ヒトレトロウイルス感染
患者及び細胞から高率に分離されウイルス感染による病
態の重要な増悪因子（co-factor ）となっている可能性
が示唆されてきている。今回、構造決定した物質は、こ
のマイコプラズマ・フェルメンタンスを分離、クローニ
ングしてその脂質成分を解析したところその生物の成分
であることがわかった。この物質はマイコプラズマ・フ
ェルメンタンスに特徴的に見出された新規化合物であ
る。
plasma fermentans)は、最近、ヒトレトロウイルス感染
患者及び細胞から高率に分離されウイルス感染による病
態の重要な増悪因子（co-factor ）となっている可能性
が示唆されてきている。今回、構造決定した物質は、こ
のマイコプラズマ・フェルメンタンスを分離、クローニ
ングしてその脂質成分を解析したところその生物の成分
であることがわかった。この物質はマイコプラズマ・フ
ェルメンタンスに特徴的に見出された新規化合物であ
る。
【０００９】この物質はＡＩＤＳの病態、ＲＡの病態解
明の可能性をもつ有望な新規化合物である。また、この
化合物とその中間体は、ヒトレトロウイルス疾患などに
対する医薬またはそのような医薬の中間体としても有望
な化合物である。
明の可能性をもつ有望な新規化合物である。また、この
化合物とその中間体は、ヒトレトロウイルス疾患などに
対する医薬またはそのような医薬の中間体としても有望
な化合物である。
【００１０】以下、本発明の構造式Ｉで示されるホスホ
リルコリン含有グリセロ糖脂質を精製、分離・取得し、
その構造解析を行った実施例を示す。 実施例１ ｉ）培養；マイコプラズマ・フェルメンタンスＧＧＰＬ
株をＰＰＬＯ培地で増殖培養し、これをＰＢＳ（ｐｈｏ
ｓｐｈａｔｅ−ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ）で２
回洗浄したものを−８０℃に保存した。
リルコリン含有グリセロ糖脂質を精製、分離・取得し、
その構造解析を行った実施例を示す。 実施例１ ｉ）培養；マイコプラズマ・フェルメンタンスＧＧＰＬ
株をＰＰＬＯ培地で増殖培養し、これをＰＢＳ（ｐｈｏ
ｓｐｈａｔｅ−ｂｕｆｆｅｒｅｄ ｓａｌｉｎｅ）で２
回洗浄したものを−８０℃に保存した。
【００１１】ii）脂質の抽出；脂質は、６０ｍｌ（湿潤
状態の容量）の細胞に対しそれぞれ４００ｍｌのクロロ
ホルムとメタノールとの混合溶媒（クロロホルム：メタ
ノール＝２：１、１：１および１：２である３種の混合
溶媒）を用いて抽出し９９３ｍｇの総脂質を得た。
状態の容量）の細胞に対しそれぞれ４００ｍｌのクロロ
ホルムとメタノールとの混合溶媒（クロロホルム：メタ
ノール＝２：１、１：１および１：２である３種の混合
溶媒）を用いて抽出し９９３ｍｇの総脂質を得た。
【００１２】iii ）分画Ａ（非結合部分の取得）；総脂
質はカラム（ＤＥＡＥ Sephadex A-25 カラム）により
非結合部分と結合部分とに分け、非結合部分７７５ｍｇ
が得られた。
質はカラム（ＤＥＡＥ Sephadex A-25 カラム）により
非結合部分と結合部分とに分け、非結合部分７７５ｍｇ
が得られた。
【００１３】iv）分画Ｂ（ホスホリルコリン含有グリセ
ロ糖脂質の単離）；クロロホルムとメタノールと水との
混合溶媒の３回濃度勾配を変え（例えば、１回目の容量
比、クロロホルム：メタノール：水＝８３：１６：０．
５〜２０：８０：８）イアトロビーズにかけて分画Ａ
（非結合部分）をさらに分画し、最後に１−プロパノー
ルとアンモニアと水との溶液（容量比、１−プロパノー
ル：アンモニア：水＝８０：５：１５〜７５：５：２
０）による濃度勾配を用いて各成分を単離した。収量
は、ホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質（以下、ＧＧ
ＰＬ−１と言う）が３ｍｇであった。
ロ糖脂質の単離）；クロロホルムとメタノールと水との
混合溶媒の３回濃度勾配を変え（例えば、１回目の容量
比、クロロホルム：メタノール：水＝８３：１６：０．
５〜２０：８０：８）イアトロビーズにかけて分画Ａ
（非結合部分）をさらに分画し、最後に１−プロパノー
ルとアンモニアと水との溶液（容量比、１−プロパノー
ル：アンモニア：水＝８０：５：１５〜７５：５：２
０）による濃度勾配を用いて各成分を単離した。収量
は、ホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質（以下、ＧＧ
ＰＬ−１と言う）が３ｍｇであった。
【００１４】v ）質量分析；質量分析装置〔フィネガン
・ＭＡＴ社製、機種名：ＴＳＱ７０triple-stage guadr
upole mass spectrometer 〕を用いて、前記のＧＧＰＬ
−１について、ＬＳＩＭＳ（Liquid secondary ion mas
s spectorometry ）及びＭＳ／ＭＳ分析を行った。
・ＭＡＴ社製、機種名：ＴＳＱ７０triple-stage guadr
upole mass spectrometer 〕を用いて、前記のＧＧＰＬ
−１について、ＬＳＩＭＳ（Liquid secondary ion mas
s spectorometry ）及びＭＳ／ＭＳ分析を行った。
【００１５】vi）ＮＭＲ分析；前記のＧＧＰＬ−１につ
いて、（CH3)2 ＳＯ−d6/D2O（９８：２）０．５ｍｌに
溶解し、ＮＭＲ測定装置（日本電子( 株) 製；ＦＸ−４
００）を用いて、６０℃で 1Ｈおよび13Ｃ−ＮＭＲを行
った。
いて、（CH3)2 ＳＯ−d6/D2O（９８：２）０．５ｍｌに
溶解し、ＮＭＲ測定装置（日本電子( 株) 製；ＦＸ−４
００）を用いて、６０℃で 1Ｈおよび13Ｃ−ＮＭＲを行
った。
【００１６】〔詳細な分析試験の結果〕 （ａ）マイコプラズマ・フェルメンタンスのホスホリル
コリン含有グリセロ糖脂質；マイコプラズマ・フェルメ
ンタンスＧＧＰＬ株から抽出した脂質の中性脂質画分に
oricinol-Ｈ2 ＳＯ4 （糖の検出）、及び Dittmer（リ
ンの検出）試薬に反応する数種の脂質（リン糖脂質）を
検出し、このうち１種（以下、ＧＧＰＬ−１と言う）に
ついてシリカビーズカラムへの吸着を行ってその溶出分
離を行った。
コリン含有グリセロ糖脂質；マイコプラズマ・フェルメ
ンタンスＧＧＰＬ株から抽出した脂質の中性脂質画分に
oricinol-Ｈ2 ＳＯ4 （糖の検出）、及び Dittmer（リ
ンの検出）試薬に反応する数種の脂質（リン糖脂質）を
検出し、このうち１種（以下、ＧＧＰＬ−１と言う）に
ついてシリカビーズカラムへの吸着を行ってその溶出分
離を行った。
【００１７】前記のＧＧＰＬ−１は、クロロホルム／メ
タノール／水による濃度勾配法において、 lysophospha
tidylcholine（以下、lysoＰＣとも言う）と分離不可能
であったが、１−プロパノール／アンモニア／水による
濃度勾配法（この場合、カラムから溶出した各フラクシ
ョンを酢酸で速やかに中和してアルカリによるエステル
の分解を抑えた）によって分離することができた。
タノール／水による濃度勾配法において、 lysophospha
tidylcholine（以下、lysoＰＣとも言う）と分離不可能
であったが、１−プロパノール／アンモニア／水による
濃度勾配法（この場合、カラムから溶出した各フラクシ
ョンを酢酸で速やかに中和してアルカリによるエステル
の分解を抑えた）によって分離することができた。
【００１８】前記ＧＧＰＬ−１は、oricinol- Ｈ2 ＳＯ
4 、 Dittmer試薬及び Dragendorff試薬（コリンの検
出）に陽性を示し、しかも、緩和なアルカリ処理で分解
するものであった。
4 、 Dittmer試薬及び Dragendorff試薬（コリンの検
出）に陽性を示し、しかも、緩和なアルカリ処理で分解
するものであった。
【００１９】（ｂ）ＦＴＩＲ分析；ＧＧＰＬ−１をＩＲ
分析した結果、９６０ｃｍ-1にコリンに由来する強い吸
収が認められ、又、エステル結合に由来する１７４０ｃ
ｍ-1及び１１７０ｃｍ-1の吸収が認められた。
分析した結果、９６０ｃｍ-1にコリンに由来する強い吸
収が認められ、又、エステル結合に由来する１７４０ｃ
ｍ-1及び１１７０ｃｍ-1の吸収が認められた。
【００２０】（ｃ）ＬＳＩＭＳ（Liquid secondary ion
mass spectorometry ）及びＭＳ／ＭＳ分析；ＧＧＰＬ
−１の陽イオン−ＬＳＩＭＳの結果を図１に示す。その
図１によれば、分子イオンに相当するシグナルｍ／ｚ８
９６および９２４が確認された。そこで、ＧＧＰＬ−１
における主な分子イオンｍ／ｚ８９６について、ＭＳ／
ＭＳ分析を行った。そのＧＧＰＬ−１の分析において、
主要シグナルの帰属を概略示す結果を、図２に示す。そ
の図２の結果によれば、Ｍ−Ｃ16:0 (palmitic acid)、
Gro-Hex-P-choline(glycerol hexos phosphorylcholin
e)、 Hex-P-choline（hexos phosphoryl-choline)、 P-
choline（phosphorylcholine)、choline に相当する各
シグナルが明確に認められた。
mass spectorometry ）及びＭＳ／ＭＳ分析；ＧＧＰＬ
−１の陽イオン−ＬＳＩＭＳの結果を図１に示す。その
図１によれば、分子イオンに相当するシグナルｍ／ｚ８
９６および９２４が確認された。そこで、ＧＧＰＬ−１
における主な分子イオンｍ／ｚ８９６について、ＭＳ／
ＭＳ分析を行った。そのＧＧＰＬ−１の分析において、
主要シグナルの帰属を概略示す結果を、図２に示す。そ
の図２の結果によれば、Ｍ−Ｃ16:0 (palmitic acid)、
Gro-Hex-P-choline(glycerol hexos phosphorylcholin
e)、 Hex-P-choline（hexos phosphoryl-choline)、 P-
choline（phosphorylcholine)、choline に相当する各
シグナルが明確に認められた。
【００２１】このことから、ＧＧＰＬ−１における（
[Ｍ＋Ｈ] + ８９６）は、グリセロール−ヘキソース−
ホスホコリンに脂肪酸Ｃ16:0が２分子結合したグリセロ
糖リン脂質であることが示唆された。
[Ｍ＋Ｈ] + ８９６）は、グリセロール−ヘキソース−
ホスホコリンに脂肪酸Ｃ16:0が２分子結合したグリセロ
糖リン脂質であることが示唆された。
【００２２】（ｄ）ＮＭＲ分析（ 1Ｈ−ＮＭＲ）；ＧＧ
ＰＬ−１のＮＭＲ（ 1Ｈ−ＮＭＲ）分析の結果を、図３
に示す。図３の結果によれば、ＧＧＰＬ−１の構造とし
ては、ＤＨＱ−ＣＯＳＹ spectram により、セラミドを
含まず、ジアシルグリセロール構造（以下、Ｇｒｏとも
言う）を含むことが確認された。また、核には、α−グ
ルコースでその６位にホスホリルコリン基が結合し、１
位がグリセロール基と結合していることがわかった。1
Ｈ−ＮＭＲ分析の各ピークの帰属をさらに詳細に明らか
にした結果を、図８および表１に示す。
ＰＬ−１のＮＭＲ（ 1Ｈ−ＮＭＲ）分析の結果を、図３
に示す。図３の結果によれば、ＧＧＰＬ−１の構造とし
ては、ＤＨＱ−ＣＯＳＹ spectram により、セラミドを
含まず、ジアシルグリセロール構造（以下、Ｇｒｏとも
言う）を含むことが確認された。また、核には、α−グ
ルコースでその６位にホスホリルコリン基が結合し、１
位がグリセロール基と結合していることがわかった。1
Ｈ−ＮＭＲ分析の各ピークの帰属をさらに詳細に明らか
にした結果を、図８および表１に示す。
【００２３】（ｅ）ＮＭＲ分析（13Ｃ−ＮＭＲ）；すべ
てのピークが前述の各構造であることが説明された。ま
た、ホスホリルコリン基がα−グルコースの６位に結合
していることも再確認された。
てのピークが前述の各構造であることが説明された。ま
た、ホスホリルコリン基がα−グルコースの６位に結合
していることも再確認された。
【００２４】さらに、ＧＧＰＬ−１は、グリセロール構
造のＣ−３（３位の炭素）において酸素を介してグリセ
ロール基がグルコース構造と結合していることを示して
いる約６ｐｐｍの低磁場シフトが見られた。また、ＧＧ
ＰＬ−１において、コリン構造のリン酸エステル側、Ｎ
側およびメチル基炭素は、それぞれの標準品のＰＣとほ
ぼ等しい化学シフトと結合定数を示した。
造のＣ−３（３位の炭素）において酸素を介してグリセ
ロール基がグルコース構造と結合していることを示して
いる約６ｐｐｍの低磁場シフトが見られた。また、ＧＧ
ＰＬ−１において、コリン構造のリン酸エステル側、Ｎ
側およびメチル基炭素は、それぞれの標準品のＰＣとほ
ぼ等しい化学シフトと結合定数を示した。
【００２５】従って、前述のようにして得られたＧＧＰ
Ｌ−１は、グリセロール構造：１モル、脂肪酸構造：２
モル、α−グルコース構造（糖構造）：１モル、ホスホ
リルコリン：１モルを有しており、しかもα−グルコー
スの６’位の炭素にホスホリルコリンが結合している新
規なタイプの糖リン脂質化合物であることが明らかにな
った。
Ｌ−１は、グリセロール構造：１モル、脂肪酸構造：２
モル、α−グルコース構造（糖構造）：１モル、ホスホ
リルコリン：１モルを有しており、しかもα−グルコー
スの６’位の炭素にホスホリルコリンが結合している新
規なタイプの糖リン脂質化合物であることが明らかにな
った。
【００２６】本発明の化合物は、マイコプラズマ・フェ
ルメンタンスＧＧＰＬ株の培養によって得られその構造
が正確に確認されたものであり、その化学的な構造が前
述の構造式Ｉで示される化学構造を有している新規なホ
スホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物である。 即
ち、前記の化合物（ＧＧＰＬ−１）は、1'−〔2, 3−ビ
ス（ヘキサデカノイルオキシ）プロピル〕−α−Ｄ−グ
ルコピラノス−6'−イル−2"−（トリメチルアンモニウ
ム）エチルフォスフェートである。
ルメンタンスＧＧＰＬ株の培養によって得られその構造
が正確に確認されたものであり、その化学的な構造が前
述の構造式Ｉで示される化学構造を有している新規なホ
スホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物である。 即
ち、前記の化合物（ＧＧＰＬ−１）は、1'−〔2, 3−ビ
ス（ヘキサデカノイルオキシ）プロピル〕−α−Ｄ−グ
ルコピラノス−6'−イル−2"−（トリメチルアンモニウ
ム）エチルフォスフェートである。
【００２７】グリセロ糖脂質化合物類は、植物バクテリ
アで数多く見つかっているが、ホスホリルコリンを含有
したこのタイプのものは今まで報告がない。また、α−
グルコースにホスホリルコリン基が結合した構造も今ま
で報告がない。哺乳動物では脳と精巣からグリセロ糖脂
質が分離され構造が決定されているが、これは、α−グ
ルコース核、ホスホリルコリン構造を有していない。以
上のことにより、このＧＧＰＬ−１は極めてユニークで
グリセロ糖脂質である。
アで数多く見つかっているが、ホスホリルコリンを含有
したこのタイプのものは今まで報告がない。また、α−
グルコースにホスホリルコリン基が結合した構造も今ま
で報告がない。哺乳動物では脳と精巣からグリセロ糖脂
質が分離され構造が決定されているが、これは、α−グ
ルコース核、ホスホリルコリン構造を有していない。以
上のことにより、このＧＧＰＬ−１は極めてユニークで
グリセロ糖脂質である。
【００２８】参考例１ i ）培養；マイコプラズマ（マイコプラズマ・フェルメ
ンタンスＧＧＰＬ株を含む）の培養はＰＰＬＯ液体基礎
培地（ Difco社製）に１０％（容量／容量）牛血清、ペ
ニシリン、0.0002％（重量／容量）フェノールレッドお
よび１％グルコースを加えた液体培地１００ｍｌにて３
７℃で培養する。培地のｐＨの変化により、マイコプラ
ズマの増殖を確認した後、16,000xgで１時間遠心分離す
る。この洗浄操作をもう一度繰り返す。このようにして
得られた菌体を脂質抽出用の試料とする。
ンタンスＧＧＰＬ株を含む）の培養はＰＰＬＯ液体基礎
培地（ Difco社製）に１０％（容量／容量）牛血清、ペ
ニシリン、0.0002％（重量／容量）フェノールレッドお
よび１％グルコースを加えた液体培地１００ｍｌにて３
７℃で培養する。培地のｐＨの変化により、マイコプラ
ズマの増殖を確認した後、16,000xgで１時間遠心分離す
る。この洗浄操作をもう一度繰り返す。このようにして
得られた菌体を脂質抽出用の試料とする。
【００２９】ii）脂質の抽出；菌体試料をメタノール１
０ｍｌに浮遊させて４時間なじませる。クロロホルム２
０ｍｌを加え、メタノールとの割合が２：１（クロロホ
ルム：メタノール）と成るようにする。超音波で菌体を
破砕し、さらに４時間放置する。３０００ｒｐｍで遠心
し、その上清を回収しエバポレーションし、目的の脂質
を得る。
０ｍｌに浮遊させて４時間なじませる。クロロホルム２
０ｍｌを加え、メタノールとの割合が２：１（クロロホ
ルム：メタノール）と成るようにする。超音波で菌体を
破砕し、さらに４時間放置する。３０００ｒｐｍで遠心
し、その上清を回収しエバポレーションし、目的の脂質
を得る。
【００３０】iii ）分画（ＴＬＣ）；展開溶媒は、クロ
ロホルム：メタノール：０．２％塩化カルシウム水溶液
（５５：４５：１）の混合溶媒を用いた。 iv）検出；分画後のリン脂質の検出はデットマー（Ditt
mer's ）の試薬により、糖脂質の検出はオルシノール
（orcinol ）の試薬を用い、それぞれ染色により行っ
た。
ロホルム：メタノール：０．２％塩化カルシウム水溶液
（５５：４５：１）の混合溶媒を用いた。 iv）検出；分画後のリン脂質の検出はデットマー（Ditt
mer's ）の試薬により、糖脂質の検出はオルシノール
（orcinol ）の試薬を用い、それぞれ染色により行っ
た。
【００３１】図４は、各種のマイコプラズマ株の脂質画
分をＴＬＣで展開したものをリン脂質染色する方法で染
色した。図４の各番号は次に示すマイコプラズマ株であ
る。 番号１：ＭＴ−４（ＧＧＰＬ＋）細胞 番号２：マイコプラズマ・フェルメンタンス GGPL (M.f
ermentans GGPL) 株 番号３：マイコプラズマ・アルギニニ G230 (M.a
rginini G230) 株 番号４：マイコプラズマ・フェルメンタンス PG18 (M.f
ermentans PG18) 株 番号５：マイコプラズマ・ヒオルヒニス DBS1050 (M.h
yorhinis DBS1050) 株 番号６：マイコプラズマ・オラレ CH19299 (M.ora
le CH19299) 株 番号７：マイコプラズマ・ペネトランスGTU-54-6A1(M.p
enetrans GTU-54-6A1)株 番号８：マイコプラズマ・サリバリウム PG20 (M.s
alivarium PG20) 株
分をＴＬＣで展開したものをリン脂質染色する方法で染
色した。図４の各番号は次に示すマイコプラズマ株であ
る。 番号１：ＭＴ−４（ＧＧＰＬ＋）細胞 番号２：マイコプラズマ・フェルメンタンス GGPL (M.f
ermentans GGPL) 株 番号３：マイコプラズマ・アルギニニ G230 (M.a
rginini G230) 株 番号４：マイコプラズマ・フェルメンタンス PG18 (M.f
ermentans PG18) 株 番号５：マイコプラズマ・ヒオルヒニス DBS1050 (M.h
yorhinis DBS1050) 株 番号６：マイコプラズマ・オラレ CH19299 (M.ora
le CH19299) 株 番号７：マイコプラズマ・ペネトランスGTU-54-6A1(M.p
enetrans GTU-54-6A1)株 番号８：マイコプラズマ・サリバリウム PG20 (M.s
alivarium PG20) 株
【００３２】この図から、ＧＧＰＬ−１に相当するバン
ドが示されているが、これはマイコプラズマ・フェルメ
ンタンスが感染したＴ細胞（レーン１）とマイコプラズ
マ・フェルメンタンスＧＧＰＬ株（レーン２）及びマイ
コプラズマ・フェルメンタンスＰＧ１８株（レーン４）
にのみ認められ、その他のマイコプラズマ種では認めら
れなかった。
ドが示されているが、これはマイコプラズマ・フェルメ
ンタンスが感染したＴ細胞（レーン１）とマイコプラズ
マ・フェルメンタンスＧＧＰＬ株（レーン２）及びマイ
コプラズマ・フェルメンタンスＰＧ１８株（レーン４）
にのみ認められ、その他のマイコプラズマ種では認めら
れなかった。
【００３３】図５は、図４と同じ試料についてＴＬＣで
展開後、糖脂質を発色させる試薬を用いて染色したもの
である。ＧＧＰＬ−１に相当するバンドが図４と同様に
染色された。図５における番号１〜８は、図４における
各試料の番号と同じ内容である。
展開後、糖脂質を発色させる試薬を用いて染色したもの
である。ＧＧＰＬ−１に相当するバンドが図４と同様に
染色された。図５における番号１〜８は、図４における
各試料の番号と同じ内容である。
【００３４】図６は、図４と同じ試料についてＴＬＣで
展開後、マイコプラズマ・フェルメンタンスをウサギに
免疫し作製したポリクロナール抗体で図４と同じ試料を
免疫染色したものである。図６よりＧＧＰＬ−１のバン
ドがマイコプラズマ・フェルメンタンスの成分とのみ特
異的に強く反応していることがわかる。図６における番
号１〜８は、図４における各試料の番号と同じ内容であ
る。
展開後、マイコプラズマ・フェルメンタンスをウサギに
免疫し作製したポリクロナール抗体で図４と同じ試料を
免疫染色したものである。図６よりＧＧＰＬ−１のバン
ドがマイコプラズマ・フェルメンタンスの成分とのみ特
異的に強く反応していることがわかる。図６における番
号１〜８は、図４における各試料の番号と同じ内容であ
る。
【００３５】図７は、マイコプラズマ・フェルメンタン
スの脂質をＴＬＣで展開後、他の各種マイコプラズマを
ウサギに免疫し作製した抗血清との反応性を調べたもの
である。他のマイコプラズマ種に対して作製した抗血清
はマイコプラズマ・フェルメンタンスの脂質成分とは反
応せず、マイコプラズマ・フェルメンタンスに対し作製
した血清のみ（番号１，２）が反応していた。
スの脂質をＴＬＣで展開後、他の各種マイコプラズマを
ウサギに免疫し作製した抗血清との反応性を調べたもの
である。他のマイコプラズマ種に対して作製した抗血清
はマイコプラズマ・フェルメンタンスの脂質成分とは反
応せず、マイコプラズマ・フェルメンタンスに対し作製
した血清のみ（番号１，２）が反応していた。
【００３６】図７の各番号は次に示す内容である。 番号１：抗 M.fermentans １ 血清 番号２：抗 M.fermentans ２ 血清 （番号１と異なる
ウサギに免疫したものである） 番号３：抗 M.pneumoniae 血清 番号４：抗 M.arginini 血清 番号５：抗 M.hyorhinis血清 番号６：抗 M.orale血清 番号７：抗 M.hominis血清
ウサギに免疫したものである） 番号３：抗 M.pneumoniae 血清 番号４：抗 M.arginini 血清 番号５：抗 M.hyorhinis血清 番号６：抗 M.orale血清 番号７：抗 M.hominis血清
【００３７】各種マイコプラズマの同定は、血清反応が
今のところ最も重視されている。今回、構造決定した物
質は、マイコプラズマ・フェルメンタンス種に特異的に
存在し、しかも脂質画分において最も重要な抗原決定基
であることが示された。
今のところ最も重視されている。今回、構造決定した物
質は、マイコプラズマ・フェルメンタンス種に特異的に
存在し、しかも脂質画分において最も重要な抗原決定基
であることが示された。
【００３８】
【表１】
【００３９】
【本発明の作用効果】本発明の化合物は、マイコプラズ
マ・フェルメンタンスから精製分離された新規なホスホ
リルコリン含有グリセロ糖脂質化合物である。また、マ
イコプラズマ・フェルメンタンスは、ヒトレトロウイル
ス、あるいはリウマチなどで病原性が強く疑われている
微生物である。従って、このユニークなグリセロ糖脂質
やその中間体が診断薬及び医薬に有用である可能性は大
きい。
マ・フェルメンタンスから精製分離された新規なホスホ
リルコリン含有グリセロ糖脂質化合物である。また、マ
イコプラズマ・フェルメンタンスは、ヒトレトロウイル
ス、あるいはリウマチなどで病原性が強く疑われている
微生物である。従って、このユニークなグリセロ糖脂質
やその中間体が診断薬及び医薬に有用である可能性は大
きい。
【図１】ＧＧＰＬ−１の陽イオン−ＬＳＩＭＳの結果を
示すチャート図である。
示すチャート図である。
【図２】ＧＧＰＬ−１のＭＳ／ＭＳ分析の結果を示すチ
ャート図である。
ャート図である。
【図３】ＧＧＰＬ−１のＮＭＲ（ 1Ｈ−ＮＭＲ）分析の
結果を示すチャート図である。
結果を示すチャート図である。
【図４】リン脂質染色
【図５】糖脂質の染色
【図６】脂質の免疫染色
【図７】各種抗血清との反応性
【図８】ＧＧＰＬ−１のＮＭＲ（ 1Ｈ−ＮＭＲ）分析の
結果を示すチャート図である。
結果を示すチャート図である。
Claims (1)
- 【請求項１】1'−〔2, 3−ビス（ヘキサデカノイルオキ
シ）プロピル〕−α−Ｄ−グルコピラノス−6'−イル−
2"−（トリメチルアンモニウム）エチルフォスフェー
ト。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP7022501A JPH07278174A (ja) | 1994-02-18 | 1995-02-10 | ホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6-21429 | 1994-02-18 | ||
| JP2142994 | 1994-02-18 | ||
| JP7022501A JPH07278174A (ja) | 1994-02-18 | 1995-02-10 | ホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07278174A true JPH07278174A (ja) | 1995-10-24 |
Family
ID=26358487
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP7022501A Pending JPH07278174A (ja) | 1994-02-18 | 1995-02-10 | ホスホリルコリン含有グリセロ糖脂質化合物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07278174A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5212973B2 (ja) * | 2005-08-22 | 2013-06-19 | 国立大学法人名古屋大学 | 糖脂質誘導体合成中間体及びその製造方法、並びに糖脂質誘導体及びその製造方法 |
| JP2016056268A (ja) * | 2014-09-09 | 2016-04-21 | 日油株式会社 | ホスホリルコリン基含有糖誘導体及びその製造方法 |
| JP2016056267A (ja) * | 2014-09-09 | 2016-04-21 | 日油株式会社 | ホスホリルコリン基含有糖誘導体及びその製造方法 |
-
1995
- 1995-02-10 JP JP7022501A patent/JPH07278174A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP5212973B2 (ja) * | 2005-08-22 | 2013-06-19 | 国立大学法人名古屋大学 | 糖脂質誘導体合成中間体及びその製造方法、並びに糖脂質誘導体及びその製造方法 |
| JP2016056268A (ja) * | 2014-09-09 | 2016-04-21 | 日油株式会社 | ホスホリルコリン基含有糖誘導体及びその製造方法 |
| JP2016056267A (ja) * | 2014-09-09 | 2016-04-21 | 日油株式会社 | ホスホリルコリン基含有糖誘導体及びその製造方法 |
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