JPH0720871B2 - 動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 - Google Patents
動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤Info
- Publication number
- JPH0720871B2 JPH0720871B2 JP61148127A JP14812786A JPH0720871B2 JP H0720871 B2 JPH0720871 B2 JP H0720871B2 JP 61148127 A JP61148127 A JP 61148127A JP 14812786 A JP14812786 A JP 14812786A JP H0720871 B2 JPH0720871 B2 JP H0720871B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- malignant tumor
- tumor cell
- cell growth
- growth inhibitor
- medium
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Description
【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、人を含む動物の悪性腫瘍細胞抑制剤に関する
ものである。
ものである。
従来の技術 動物の悪性腫瘍細胞の培養後培地より前記悪性腫瘍細胞
を除いて抽出したものからなる動物の悪性腫瘍細胞増殖
抑制剤は特開昭59−33223号として提案されている。
を除いて抽出したものからなる動物の悪性腫瘍細胞増殖
抑制剤は特開昭59−33223号として提案されている。
発明が解決すべき問題点 本発明は前記従来の技術によって得られた悪性腫瘍細胞
増殖抑制剤よりも純粋で抑制効果の高い動物の悪性腫瘍
細胞増殖抑制剤を提供することを目的とするものであ
る。
増殖抑制剤よりも純粋で抑制効果の高い動物の悪性腫瘍
細胞増殖抑制剤を提供することを目的とするものであ
る。
問題点を解決するための手段 本発明の人を含む動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤は、ヒ
ト腎細胞癌由来樹立株細胞Ｈ・Ｒ・Ｃ、マウス由来の株
化細胞LLC等の動物の悪性腫瘍細胞を10％牛胎児血清添
加のＥ−MEM（イーグルミニマムエッセンシャルメディ
アム）等の培地で培養し、その後無血清培地等の抽出用
培地に移して35〜37℃で４〜７日培養し、それから前記
悪性腫瘍細胞を除くことにより、抽出培養液を得、この
粗製品に原液の1/25量のメタノールを加えて溶解し、そ
の上澄みをメタノールで膨潤したビーズ状のハイドロキ
シプロピル化デキストランゲル（米国ファルマシアファ
インケミカル社勢LH−20）を直径10cm,長さ120cm充填し
たカラムで１時間800ミリリットルの流量を通しメタノ
ールで溶出し、5.625〜7.25時間の間に流出する区分を
分画したものよりなることを特徴とする。
ト腎細胞癌由来樹立株細胞Ｈ・Ｒ・Ｃ、マウス由来の株
化細胞LLC等の動物の悪性腫瘍細胞を10％牛胎児血清添
加のＥ−MEM（イーグルミニマムエッセンシャルメディ
アム）等の培地で培養し、その後無血清培地等の抽出用
培地に移して35〜37℃で４〜７日培養し、それから前記
悪性腫瘍細胞を除くことにより、抽出培養液を得、この
粗製品に原液の1/25量のメタノールを加えて溶解し、そ
の上澄みをメタノールで膨潤したビーズ状のハイドロキ
シプロピル化デキストランゲル（米国ファルマシアファ
インケミカル社勢LH−20）を直径10cm,長さ120cm充填し
たカラムで１時間800ミリリットルの流量を通しメタノ
ールで溶出し、5.625〜7.25時間の間に流出する区分を
分画したものよりなることを特徴とする。
前記分取に際しての検出器としては254nmの波長に対す
る吸光度を計測する紫外線検出器を用いる。この分画
は、数種のアミノ酸を主成分とし、糖質を含まず、NMR
（核磁気共鳴吸収），ガスクロマトグラフィーで乳酸様
シグナルを示す物質の含量は微小である。
る吸光度を計測する紫外線検出器を用いる。この分画
は、数種のアミノ酸を主成分とし、糖質を含まず、NMR
（核磁気共鳴吸収），ガスクロマトグラフィーで乳酸様
シグナルを示す物質の含量は微小である。
そして、分子量は1000以下であり、水との親和性が極め
て高く、無機塩と結合し易く、水，メタノールに可溶で
あって、一般に有機溶剤に溶けにくい性状を有してい
る。
て高く、無機塩と結合し易く、水，メタノールに可溶で
あって、一般に有機溶剤に溶けにくい性状を有してい
る。
また、沸騰水浴中に１時間置いた場合、PH2〜10の範囲
で常温中に一昼夜放置した場合およびプロナーゼ処理及
びグリコシターゼ処理等に対してその活性は失われない
ものである。
で常温中に一昼夜放置した場合およびプロナーゼ処理及
びグリコシターゼ処理等に対してその活性は失われない
ものである。
実施例 １）使用細胞 動物の悪性腫瘍細胞としてヒト腎細胞癌由来樹立株細胞
HRCを使用した。
HRCを使用した。
２）培養 成長用培地には10％牛胎児血清を添加したＥ−MEMに4g/
のグルコースを添加したものを用い、抽出用培地とし
ては、血清無添加のＥ−MEMにグルコースを２〜5g/添
加したものを使用した。
のグルコースを添加したものを用い、抽出用培地とし
ては、血清無添加のＥ−MEMにグルコースを２〜5g/添
加したものを使用した。
まず成長用培地を用い、培養器に飽和状態になるまで悪
性腫瘍細胞を増殖し、その後無血清のＥ−MEM培地で洗
って血清を除く。次に、これを抽出用培地に移して35℃
〜37℃で培養し、抽出培養液を得る。
性腫瘍細胞を増殖し、その後無血清のＥ−MEM培地で洗
って血清を除く。次に、これを抽出用培地に移して35℃
〜37℃で培養し、抽出培養液を得る。
３）精製法 まず、悪性腫瘍細胞を除去分離するため採取された抽出
培養液を直60mm、内容積250ml、ポリカーボネート製の
蓋付容器に入れ遠心分離機にセットして毎分１万回転で
10分間遠心分離し、その上澄みを採取し、さらにこれを
減圧蒸発乾固して粗製品を得る その後、これに抽出培養液の1/25量のメタノールを加
え、溶解して直径60mm、深さ100mm、内容積250mlでポリ
カーボネート製の蓋付分離容器に入れ遠心分離機にセッ
トし遠心分離（１万回転,10分間）し、その上澄み液３
分をメタノールで棒潤した米国ファルマシアファイン
ケミカル社勢LH−20よりなる固定相充填のカラム（直径
10cm,長さ120cm）に通し、メタノールで800ml/hの液量
速度で溶出する。
培養液を直60mm、内容積250ml、ポリカーボネート製の
蓋付容器に入れ遠心分離機にセットして毎分１万回転で
10分間遠心分離し、その上澄みを採取し、さらにこれを
減圧蒸発乾固して粗製品を得る その後、これに抽出培養液の1/25量のメタノールを加
え、溶解して直径60mm、深さ100mm、内容積250mlでポリ
カーボネート製の蓋付分離容器に入れ遠心分離機にセッ
トし遠心分離（１万回転,10分間）し、その上澄み液３
分をメタノールで棒潤した米国ファルマシアファイン
ケミカル社勢LH−20よりなる固定相充填のカラム（直径
10cm,長さ120cm）に通し、メタノールで800ml/hの液量
速度で溶出する。
検出には254nmの波長に対する吸光度を計測する紫外線
検出器を使用し、図に示すように、5.625〜7.25時間に
流出する区分より分画を得た。なお、チャートスピード
は4cm/hourである。
検出器を使用し、図に示すように、5.625〜7.25時間に
流出する区分より分画を得た。なお、チャートスピード
は4cm/hourである。
次に、このようにして採取した分画を10mmHg、40℃で減
圧蒸発乾固し、さらにこれを100倍濃度の濃縮水溶液と
する。
圧蒸発乾固し、さらにこれを100倍濃度の濃縮水溶液と
する。
４）検定 （イ）24穴培養皿に２×105個／穴のヒト腎細胞癌由来
樹立株細胞HRCを植え込み、実験群を10％牛胎児血清をE
/MEMに混合したものを培地として各穴に1.5ml加え、37
℃,5％CO2,100％湿度で培養する。１日おきに培地交換
し、７日目に細胞数を計り増殖を調べた。
樹立株細胞HRCを植え込み、実験群を10％牛胎児血清をE
/MEMに混合したものを培地として各穴に1.5ml加え、37
℃,5％CO2,100％湿度で培養する。１日おきに培地交換
し、７日目に細胞数を計り増殖を調べた。
対照標準として新鮮培地で培養したヒト腎細胞癌由来樹
立株細胞HRCの数を100％とし、分画を原液に換算して10
倍濃度としたものをＡとし、５倍濃度としたものをＢと
して新鮮培地に投与してその影響を検べた結果を第１表
に示す。
立株細胞HRCの数を100％とし、分画を原液に換算して10
倍濃度としたものをＡとし、５倍濃度としたものをＢと
して新鮮培地に投与してその影響を検べた結果を第１表
に示す。
（ロ）マウスにC57BLを用い、このマウスにマウスルイ
ス肺癌細胞106個を側背部皮下に移植し、分画の50倍濃
縮水溶液を１日２回0.25ml注射によって投与し、投与８
日目の腫瘍の縦×横の大きさ及び投与12日目の解剖によ
る腫瘍の重量を計測した。対照標準に対する計測値を第
２表及び第４表に示す。
ス肺癌細胞106個を側背部皮下に移植し、分画の50倍濃
縮水溶液を１日２回0.25ml注射によって投与し、投与８
日目の腫瘍の縦×横の大きさ及び投与12日目の解剖によ
る腫瘍の重量を計測した。対照標準に対する計測値を第
２表及び第４表に示す。
図は、本発明の動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤の分画抽
出を示す線図である。
出を示す線図である。
Claims (1)
- 【請求項１】人を含む動物の悪性腫瘍細胞を培養増殖し
た後、抽出用培地に移して35〜37℃で培養し、前記悪性
腫瘍細胞を除いたものを、メタノールで膨潤したビーズ
状のハイドロキシプロピル化デキストランゲルよりなる
固定相を直径10cm,長さ120cm充填したカラムで１時間80
0ミリリットルの流量で溶出し、5.625〜7.25時間の間に
流出する区分を分取したものよりなることを特徴とする
人を含む動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61148127A JPH0720871B2 (ja) | 1986-06-26 | 1986-06-26 | 動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP61148127A JPH0720871B2 (ja) | 1986-06-26 | 1986-06-26 | 動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS635023A JPS635023A (ja) | 1988-01-11 |
| JPH0720871B2 true JPH0720871B2 (ja) | 1995-03-08 |
Family
ID=15445862
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61148127A Expired - Fee Related JPH0720871B2 (ja) | 1986-06-26 | 1986-06-26 | 動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0720871B2 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7741426B2 (en) | 2003-06-23 | 2010-06-22 | Nippon Shokubai Co., Ltd | Method for production of fluorinated phenylenediamine |
-
1986
- 1986-06-26 JP JP61148127A patent/JPH0720871B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS635023A (ja) | 1988-01-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Knütter et al. | H+-peptide cotransport in the human bile duct epithelium cell line SK-ChA-1 | |
| EP0212489A2 (en) | Anabolic activity modulator and uses thereof | |
| JPS58116498A (ja) | Ｉｌ‐２をコードする新規伝令ｒｎａの製造法 | |
| US11135160B2 (en) | Use of chlorogenic acid in preparing pharmaceuticals for treatment of LAG-3-mediated disease | |
| Wilkinson et al. | The persistence of adriamycin in man and rat | |
| US5824648A (en) | Rnase-cv (coriolus versicolor) | |
| CN103127191B (zh) | 一种罗布麻提取物的制备方法及用途 | |
| CN107536833B (zh) | 一种4-羟基-2-吡啶酮类生物碱在制备抗肿瘤产品中的应用 | |
| CN107213145A (zh) | 细锥香茶菜乙素在制备抑制食管鳞癌细胞增殖的产品中的应用 | |
| JPH0720871B2 (ja) | 動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 | |
| JPH0729931B2 (ja) | 動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 | |
| JPH0729933B2 (ja) | 動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 | |
| JPH0729932B2 (ja) | 動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 | |
| JPH0729934B2 (ja) | 動物の悪性腫瘍細胞増殖抑制剤 | |
| Laurence et al. | Epidermal chalone and cell proliferation in a transplantable squamous cell carcinoma in hamsters: II. In vitro Results | |
| US6087335A (en) | RNase-CV (Coriolus versicolor) | |
| Hwang et al. | Hepatic uptake and biliary excretion of N-acetyl procaine amide ethobromide in the rat | |
| CN110776409A (zh) | 一种印度黄檀的提取方法及提取物在抗肿瘤药物中的应用 | |
| Gaffney et al. | Production of growth-inhibitory activity in serum-free medium by human monocytic leukemia cells | |
| US5711948A (en) | Plant-derived, biologically active polysaccharides and method of preparing same | |
| CN109022442A (zh) | 一种可有效抑制骨肉瘤生长的生物重组型miR124-3p | |
| CN115778965B (zh) | 女贞苷g13在制备抗心肌纤维化药物中的新应用 | |
| CN104053447B (zh) | 天南星提取物及其用于创伤‑愈合作用的用途 | |
| CN109939103B (zh) | 芫荽内酯-1的用途及其制备方法 | |
| Gabrieli et al. | Kinetics of Plasma Hemoglobin Catabolism in the Rat. II. Cr51-Tagged Hemoglobin. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |