JPH0699314B2 - Macrophage activator - Google Patents
Macrophage activatorInfo
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- JPH0699314B2 JPH0699314B2 JP61269828A JP26982886A JPH0699314B2 JP H0699314 B2 JPH0699314 B2 JP H0699314B2 JP 61269828 A JP61269828 A JP 61269828A JP 26982886 A JP26982886 A JP 26982886A JP H0699314 B2 JPH0699314 B2 JP H0699314B2
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- peptidoglycan
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- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明は、マクロファージ活性化剤に関するものであ
る。TECHNICAL FIELD The present invention relates to a macrophage activator.
従来の技術 ガン、重度火傷などの重篤な基礎疾患を持つ患者や老令
患者は、弱毒菌による院内感染(いわゆる日和見感染)
を起こし易く、その防御策の確立が望まれている。日和
見感染に対しては、従来、主として抗生物質による治療
が行われているが、周知のように、抗生物質の使用には
菌が耐性を穫得するという問題がある。したがって、抗
生物質のみに頼ることなく、生体の感染防御能を高める
ことが望ましく、そのために有効な手段が探索されてい
る。Conventional technology Patients with serious underlying diseases such as cancer and severe burns and elderly patients are hospitalized with attenuated bacteria (so-called opportunistic infection).
Is likely to occur, and the establishment of a protective measure is desired. Conventionally, treatment of opportunistic infections is mainly carried out with antibiotics, but as is well known, the use of antibiotics has a problem that the bacteria acquire resistance. Therefore, it is desirable to improve the infection defense ability of the living body without relying only on antibiotics, and effective means for that purpose are being searched for.
マウスを用いた実験で生体防御能向上作用が確認された
物質の一つとして、乳酸桿菌菌体がある。その作用は、
多数の異物(老化赤血球、細菌、ウィルス、真菌、原虫
など)を処理する能力を有する細胞−マクロファージ‐
を活性化し、それにより感染防御能を向上させるなど、
好ましい結果を生むものと考えられている。しかしなが
ら、乳酸桿菌のいかなる成分がマクロファージの活性化
に関与するのかは知られていない。したがって、乳酸桿
菌をマクロファージ活性化に利用しようとする菌体その
ものを用いるしかなく、注射薬のように、薬効に無関係
の物質をなるべく含まず且つ水溶性であることが望まれ
る剤形での利用ができないことはもちろん、内服しても
充分な効果は期待できなかった。Lactobacillus cells are one of the substances that have been confirmed to have an effect of improving biological defense ability in experiments using mice. The action is
Cells capable of processing a large number of foreign substances (senescent red blood cells, bacteria, viruses, fungi, protozoa, etc.)-Macrophages-
To improve the defense against infection, etc.
It is believed to produce favorable results. However, it is not known what component of Lactobacillus is involved in macrophage activation. Therefore, there is no choice but to use the bacterium itself that intends to utilize lactobacillus for macrophage activation, and to use it in a dosage form that is desired to be water-soluble, such as an injectable drug, that does not contain substances unrelated to drug efficacy as much as possible. Of course, I could not do it, but I could not expect a sufficient effect even if I took it internally.
発明が解決しようとする問題点 本発明の目的は、マクロファージの活性化に乳酸桿菌を
利用する場合における上述のような問題点を解決するた
め、乳酸桿菌が示すマクロファージ活性化作用の根源物
質もしくはそれになるべく近い物質を見出し、それを用
いたマクロファージ活性化剤を提供することにある。Problems to be Solved by the Invention The object of the present invention is to solve the above-mentioned problems in the case of utilizing lactobacillus for the activation of macrophages. It is to find a substance as close as possible and to provide a macrophage activator using it.
問題点を解決するための手段 乳酸桿菌の処理物に関する広範な研究の結果、乳酸桿菌
たとえばラクトバチルス・カゼイが示す上記マクロファ
ージ活性化作用は、該活性化作用を示す乳酸桿菌をN-ア
セチルラミデースで処理して得られる多糖‐ペプチドグ
リカン複合体に見出されることが判明した。Means for Solving the Problems As a result of extensive research on a treated product of lactobacillus, the above-mentioned macrophage activating action exhibited by lactobacillus, for example, Lactobacillus casei, is due to the fact that the lactobacillus exhibiting the activating action is treated with N-acetyl lamidodes. It was found to be found in the polysaccharide-peptidoglycan complex obtained by treating with.
本発明は上記新規な知見に基づくもので、L-アラニン、
D-グルタミンおよびL-リジンを必須の構成アミノ酸とす
るペプチド鎖ならびにグルコースおよびラムノースを必
須の構成糖とする糖鎖を有する、乳酸桿菌細胞壁由来の
多糖‐ペプチドグリカン複合体を有効成分とするマクロ
ファージ活性化剤を提供するものである。The present invention is based on the above new findings, L-alanine,
Macrophage activation using a polysaccharide-peptidoglycan complex derived from lactobacillus cell wall, which has a peptide chain containing D-glutamine and L-lysine as essential constituent amino acids and a sugar chain containing glucose and rhamnose as essential constituent sugars The agent is provided.
乳酸桿菌の細胞壁の表層部には主としてペプチドグリカ
ンからなる層があり、更にその外側には、タイコ酸や多
糖などが存在する。ペプチドグリカンは、4個または5
個のアミノ酸からなるペプチド鎖で置換されたN-アセチ
ルムラミン酸とN-アセチルグルコサミンと結合した二糖
単位を基本単位とし、これが、他のアミノ酸やペプチド
によって架橋されながら巨大分子化したものであり、細
胞壁中では、上記タイコ酸や多糖とリン酸を介して結合
している。乳酸桿菌をN-アセチルラミデースで処理する
と、N-アセチルムラミン酸とN-アセチルグルコサミンと
の間のβ‐1,4結合が切断されて、ペプチドグリカンと
多糖との結合を残したまま、上記基本単位および該基本
単位同士がペプチド鎖部分で結合したものが遊離する。
その代表的なものを次に示す。At the surface of the cell wall of lactobacillus, there is a layer mainly consisting of peptidoglycan, and on the outside thereof, teichoic acid and polysaccharides are present. 4 or 5 peptidoglycan
The basic unit is a disaccharide unit linked to N-acetylmuramic acid and N-acetylglucosamine, which is substituted with a peptide chain consisting of individual amino acids.This is a macromolecule that is crosslinked by other amino acids and peptides. In the cell wall, they are bound to the above-mentioned teichoic acid and polysaccharide via phosphate. When Lactobacillus is treated with N-acetyl ramidose, the β-1,4 bond between N-acetylmuramic acid and N-acetylglucosamine is cleaved, leaving the bond between the peptidoglycan and the polysaccharide as described above. The basic unit and those in which the basic units are linked to each other at the peptide chain portion are released.
The representative ones are shown below.
但し、式中の略号はそれぞれ下記の単位を意味する。 However, the abbreviations in the formulas mean the following units, respectively.
L-Ala:L-アラニン D-Glu:Dグルタミン L-Lys:L-リジン D-Asp:D-アスパラギン なお、上記Rにおける“多糖”はグルコースおよびラム
ノースを必須の構成糖とし、ほかにガラクトースを構成
糖として含む場合がある。 L-Ala: L-alanine D-Glu: D glutamine L-Lys: L-lysine D-Asp: D-asparagine The “polysaccharide” in R above is glucose and rhamnose as essential constituent sugars, and galactose It may be included as a constituent sugar.
これら複雑な化合物の混合物が、本発明のマクロファー
ジ活性化剤を構成する多糖‐ペプチドグリカン複合体で
ある。The mixture of these complex compounds is the polysaccharide-peptidoglycan complex that constitutes the macrophage activator of the present invention.
多糖‐ペプチドグリカン複合体における糖組成およびア
ミノ酸配列は、原料乳酸桿菌の種類によって若干異なる
が、下記の乳酸桿菌から得られるものはすべて上記の糖
組成およびアミノ酸配列のものであり、且つ本発明のマ
クロファージ活性化剤を構成する多糖‐ペプチドグリカ
ン複合体として好ましい。L.カゼイ(L.casei)、L.ブ
ヒネリ(L.buchneri)、L.ユーグルティ(L.jugurt
i)、L.サケ(L.sake)、L.ラクチス(L.lactis)、L.
コリネフォルミス(L.coryneformis)、L.アシドフィル
ス(L.acidophilus)、L.パストリアヌス(L.pastorian
us)、L.カルバタス(L.curvatus)、L.サリバリウス
(L.salivarius)、L.キシロサス(L.xylosus)、L.デ
ルブレッキイ(L.del-brueckii)、L.ライヒマンニ(L.
leichmannii)、L.ブルガリクス(L.bulgalicus)、L.
ヘルベティカス(L.helveticus)、L.ブレビス(L.brev
is)。(但し、L.はラクトバチルスLactobacillusの
略。以下の文において同じ)。The sugar composition and amino acid sequence in the polysaccharide-peptidoglycan complex differ slightly depending on the type of the starting lactobacillus, but all of the following lactobacilli are of the above sugar composition and amino acid sequence, and the macrophage of the present invention Preferred as a polysaccharide-peptidoglycan complex that constitutes the activator. L. casei, L. buchneri, L. jugurt
i), L.sake, L.lactis, L.
L. coryneformis, L. acidophilus, L. pastorian
us), L. curvatus, L. salivarius, L. xylosus, L. del-brueckii, L. reichmanni.
leichmannii), L. bulgalicus, L.
L. helveticus, L. brevis
is). (However, L. is an abbreviation for Lactobacillus. The same applies in the following sentences).
本発明のマクロファージ活性化剤の有効成分である多糖
‐ペプチドグリカン複合体を乳酸桿菌から製造する方法
の詳細は、次のとおりである。The details of the method for producing a polysaccharide-peptidoglycan complex, which is an active ingredient of the macrophage activator of the present invention, from lactobacilli are as follows.
原料とする乳酸桿菌は、乳酸桿菌の培養に使用可能な適
当な培地を用いて常法により培養したものでよく、特殊
な培養法によるものである必要はない。培養後、常法に
より洗浄し、望ましくは加熱して死菌体としたものを水
に懸濁させて、N-アセチルムラミデースで処理する。pH
約5〜6、温度約37〜50℃で12〜24時間程度処理する
と、細胞壁が溶解する。反応混液を遠心分離し、上清を
再度酵素処理したのち、核酸分解酵素で核酸を分解し、
更にトリプシンを加えてタンパク質を分解する。次いで
蒸留水にて透析し、透析内液を凍結乾燥すれば、目的と
する多糖‐ペプチドグリカン複合体が得られる。The lactic acid bacillus used as a raw material may be one that has been cultured by an ordinary method using an appropriate medium that can be used for culturing the lactic acid bacterium, and does not need to be a special culture method. After culturing, the cells are washed by a conventional method, preferably heated to make dead cells, suspended in water, and treated with N-acetylmuramidice. pH
When the cells are treated at about 5 to 6 and a temperature of about 37 to 50 ° C for about 12 to 24 hours, the cell wall is dissolved. After centrifuging the reaction mixture and treating the supernatant with an enzyme again, the nucleic acid is decomposed with a nucleolytic enzyme,
Further trypsin is added to decompose the protein. Then, the product is dialyzed against distilled water and the dialyzed solution is freeze-dried to obtain the desired polysaccharide-peptidoglycan complex.
上述のようにして得られる多糖‐ペプチドグリカン複合
体は、そのまま、あるいは必要に応じて更に精製して、
本発明のマクロファージ活性化剤の構成成分とすること
ができる。多糖‐ペプチドグリカン複合体は水溶性であ
り、また安定性のよい物質である。すなわち、凍結乾燥
粉末は室温保存で一年以上も活性が低下せず、また生理
的食塩水溶液にしたものは、‐20℃で凍結保存した場
合、6カ月以上活性が減弱しないし、凍結融解を3回く
り返しても活性が減弱しない。生理的食塩水溶液は、さ
らに100℃で10分間加熱しても活性減弱を起こさない。
したがって、多糖‐ペプチドグリカン複合体からマクロ
ファージ活性化剤を製造する場合は任意の方法により注
射剤、錠剤、粉剤等の形に製剤し、静脈注射、経口投与
などの形で利用することができる。The polysaccharide-peptidoglycan complex obtained as described above may be purified as it is or may be further purified, if necessary.
It can be a constituent of the macrophage activator of the present invention. The polysaccharide-peptidoglycan complex is a water-soluble and highly stable substance. That is, the activity of freeze-dried powder does not decrease for more than a year when stored at room temperature, and the activity of physiological saline solution does not decrease for more than 6 months when stored frozen at -20 ° C, and freeze-thaw does not occur. Activity is not diminished even after repeating three times. Physiological saline solution does not lose its activity even when heated at 100 ° C for 10 minutes.
Therefore, when a macrophage activator is produced from a polysaccharide-peptidoglycan complex, it can be formulated into an injection, tablet, powder or the like by any method and used in the form of intravenous injection or oral administration.
本発明によるマクロファージ活性化剤の標準的な投与量
は、体重1kg当り、多糖‐ペプチドグリカン複合体とし
て約0.8〜80mgである。The standard dose of the macrophage activator according to the present invention is about 0.8-80 mg as polysaccharide-peptidoglycan complex per kg body weight.
多糖‐ペプチドグリカン複合体の毒性は、下記のLD50値
(7週令、体重約25gのBALB/c雄マウスについての値)
から明らかなように、全く認められない。The toxicity of the polysaccharide-peptidoglycan complex is shown by the following LD 50 value (value for 7-week-old BALB / c male mice weighing about 25 g).
As you can see, it is not recognized at all.
経口投与の場合 2000mg/kg以上 静脈内投与の場合 800mg/kg以上 腹腔内投与の場合 800mg/kg以上 発明の効果 本発明のマクロファージ活性化剤は、毒性がなく、また
抗生物質のように菌の耐性穫得という問題もないこと、
グラム陽性菌にもグラム陰性菌にも有効であるため広範
囲の感染症の予防と治療に有効なこと、マクロファージ
を活性化するため感染症以外の疾患にも効果が期待され
ること、水溶性であるため注射剤その他任意の剤形への
製剤が容易なことなど、多くの特長を有するものであ
る。Oral administration 2000 mg / kg or more Intravenous administration 800 mg / kg or more Intraperitoneal administration 800 mg / kg or more Advantageous effects of the invention The macrophage activator of the present invention is nontoxic, There is no problem of obtaining resistance,
Effective against a wide range of infectious diseases because it is effective against both Gram-positive and Gram-negative bacteria, and is expected to be effective against diseases other than infectious diseases because it activates macrophages. Therefore, it has many features such as easy preparation of injections and other arbitrary dosage forms.
実施例 以下、実施例を示して本発明を説明する。なお実施例2
以降の各例においては、次の方法により、多糖‐ペプチ
ドグリカン複合体の細菌感染防御効果を確認した。EXAMPLES Hereinafter, the present invention will be described with reference to examples. Example 2
In each of the following examples, the bacterial infection protective effect of the polysaccharide-peptidoglycan complex was confirmed by the following method.
試験法:試験動物として7週令のBALB/cマウスを、1群
5匹として用いた。このマウスに106個のリステリア菌
(Listeria monocytogenes EDG株)またはネズミチフス
菌(Salmonella tybhimurium LT-2株)を腹腔内に接種
して24時間目の腹腔内接種菌生菌数を測定するか、同量
の菌を腹腔内接種したマウスの生死を菌接種後14日目ま
で観察する。その場合、実験群には多糖‐ペプチドグリ
カン複合体の生理食塩水溶液を、感染菌接種3〜10日前
に、腹腔内に接種した。対照群にはこの前処置をしな
い。感染防御効果は、感染マウスの生残率または感染菌
の増殖抑制率(次式によるをもって判定した。Test method: Seven-week-old BALB / c mice were used as test animals, one group consisting of 5 mice. These mice were inoculated intraperitoneally with 10 6 Listeria monocytogenes EDG strains or Salmonella tybhimurium LT-2 strains, and the number of viable bacteria inoculated intraperitoneally at 24 hours was measured, or Mice inoculated intraperitoneally with an amount of fungus are observed until 14 days after inoculation. In this case, the experimental group was intraperitoneally inoculated with a physiological saline solution of a polysaccharide-peptidoglycan complex 3 to 10 days before inoculation of the infectious bacteria. The control group does not receive this pretreatment. The protective effect against infection was determined by the survival rate of infected mice or the growth inhibition rate of infected bacteria (according to the following formula.
増殖抑制率(%)=100×(1-X/Y) 但し、X:実験群の腹腔内生菌数の平均値 Y:無処置対照群の腹腔内生菌数の平均値 製造実施例 1 L.カゼイYIT9018(微工研菌寄第665号)をロゴサの培地
に接種し、37℃で2時間培養した後、遠心分離操作によ
り集菌し、蒸留水で4回洗浄した。洗浄済み菌体は、10
0℃に20分間加熱したのち凍結乾燥した。Growth inhibition rate (%) = 100 × (1-X / Y) where X: average value of viable cell count in the experimental group Y: average value of viable cell count in the untreated control group Production Example 1 L. casei YIT9018 (Microtechnology Research Institute, No. 665) was inoculated into Rogosa's medium and cultured at 37 ° C. for 2 hours, then the cells were collected by centrifugation and washed 4 times with distilled water. 10 washed cells
After heating at 0 ° C. for 20 minutes, it was freeze-dried.
上記により得られた菌末1gを、200mlの5mMトリス‐マレ
ート緩衝液(pH5.8,2mMのMgCl2を含む)に懸濁させ、10
mgのN-アセチルムラミデースSG(生化学工業製品)を加
え、37℃で16時間反応させた。その後、反応混合液を50
00×gで20分間遠心分離して細胞質部分を含む沈殿を除
き、上清をさらに18時間反応させた。次いで反応液に10
mgのDNaseと10mgのRNase(いずれもシグマ社製品)を加
えて37℃で12時間反応させることにより混在する核酸を
分解し、さらに10mgのトリプシン(シグマ社製品)を加
えて37℃で16時間反応させることにより混在するタンパ
ク質を分解した。得られた反応混合液は、4℃で多量の
蒸留水に対して透析し、その後、透析内液を凍結乾燥し
て、約400mgの多糖‐ペプチドグリカン複合体を得た。
その赤外線吸収スペクトル図は第1図のとおりである。1 g of the bacterial powder obtained above was suspended in 200 ml of 5 mM Tris-malate buffer (pH 5.8, containing 2 mM MgCl 2 ) to give 10
N-acetylmuramidice SG (Seikagaku Kogyo product) (mg) was added, and the mixture was reacted at 37 ° C for 16 hours. Then, add 50 to the reaction mixture.
The precipitate containing the cytoplasmic portion was removed by centrifugation at 00 × g for 20 minutes, and the supernatant was further reacted for 18 hours. Then 10 in the reaction mixture
DNase of 10 mg and RNase of 10 mg (both are products of Sigma) are added, and the mixed nucleic acid is decomposed by reacting at 37 ° C for 12 hours, and then 10 mg of trypsin (product of Sigma) is added and the mixture is incubated at 37 ° C for 16 hours. By reacting, the mixed proteins were decomposed. The obtained reaction mixture was dialyzed against a large amount of distilled water at 4 ° C., and then the dialyzed solution was freeze-dried to obtain about 400 mg of a polysaccharide-peptidoglycan complex.
The infrared absorption spectrum is shown in FIG.
製造実施例 2 乳酸桿菌としてL.ユーグルティYIT0085株を用いたほか
は製造実施例1と同様にして、多糖‐ペプチドグリカン
複合体を製造した。Production Example 2 A polysaccharide-peptidoglycan complex was produced in the same manner as in Production Example 1 except that L. eugleti YIT0085 strain was used as the lactobacillus.
製造実施例 3 製造実施例1で製造した多糖‐ペプチドグリカン複合体
を、Sephacryl S-300(ファルマシア社製品)を用いる
ゲル濾過により分画した。50mM(NH4)2CO3溶液による
溶出液について調べた結果、多糖‐ペプチドグリカン複
合体は分子量が約10万以上のもの(以下PS-PG・Aとい
う)と分子量が約4万以下のもの(以下、PS-PG・Bと
いう)とに分画された。Production Example 3 The polysaccharide-peptidoglycan complex produced in Production Example 1 was fractionated by gel filtration using Sephacryl S-300 (Pharmacia). As a result of investigating the eluate with a 50 mM (NH 4 ) 2 CO 3 solution, the polysaccharide-peptidoglycan complex has a molecular weight of about 100,000 or more (hereinafter PS-PG ・ A) and a molecular weight of about 40,000 or less ( (Hereinafter referred to as PS-PG / B)).
また、製造実施例2による多糖‐ペプチドグリカン複合
体を、Sephacryl S-200(ファルマシア社製品)を用い
るゲル濾過により上記と同様にして分画し、分子量が約
5万の画分(以下、PS-PG・Cという)と分子量が約2.5
万の画分(以下、PS-PG・Dという)とを得た。Further, the polysaccharide-peptidoglycan complex according to Production Example 2 was fractionated in the same manner as above by gel filtration using Sephacryl S-200 (Pharmacia) to obtain a fraction having a molecular weight of about 50,000 (hereinafter PS- PG ・ C) and the molecular weight is about 2.5
Ten thousand fractions (hereinafter referred to as PS-PG / D) were obtained.
以上の各画分は、第1表に示したような糖組成のもので
あった。Each of the above fractions had a sugar composition as shown in Table 1.
実施例 1 製造実施例1による多糖‐ペプチドグリカン複合体を濃
度5mg/mlになるように無菌生理食塩水に溶解し、得られ
た溶液0.1mlを、7週令のマウス(BALB/cマウス,体重
約25g,1群4匹)の腹腔内に注入した。投与後、1〜10
日の間に順次各群マウスを脱血、屠殺し、直ちに腹腔内
にハンクス緩衝液(pH7.0)5mlを注入してもむことによ
り腹腔内を洗浄した。次に注射器で腹腔内洗浄液を取出
し、その中に含まれる白血球数を血球計算盤にて測定し
た。一方、腹腔内洗浄液に含まれる腹腔浸出細胞をスラ
イドガラスに塗沫して乾燥し、メタノールで固定したの
ちギムザ液で染色してから顕微鏡下で観察し、全細胞中
のマクロファージ含有率を求めた。 Example 1 The polysaccharide-peptidoglycan complex according to Production Example 1 was dissolved in sterile physiological saline to a concentration of 5 mg / ml, and 0.1 ml of the resulting solution was added to a 7-week-old mouse (BALB / c mouse, body weight). About 25 g, 4 animals per group) was intraperitoneally injected. 1-10 after administration
The mice in each group were sequentially bled and sacrificed during the day, and the abdominal cavity was immediately washed by injecting 5 ml of Hanks buffer (pH 7.0) into the abdominal cavity. Next, the intraperitoneal lavage fluid was taken out with a syringe, and the number of white blood cells contained therein was measured with a hemocytometer. On the other hand, peritoneal exudate cells contained in the peritoneal lavage fluid were smeared on a slide glass, dried, fixed with methanol, stained with Giemsa solution and then observed under a microscope to determine the macrophage content in all cells. .
上記方法により測定された白血球数にマクロファージ含
有率を乗じて求められたマクロファージ数(平均値)
は、第1表のとおりであった。無処置の対照群について
同様にして測定されたマクロファージ数は6.35×105で
あり、多糖‐ペプチドグリカン複合体すなわち本発明の
マクロファージ活性化剤の投与によってマクロファージ
数が顕著に増加することを確認した。The number of macrophages (average value) obtained by multiplying the number of white blood cells measured by the above method by the macrophage content rate
Was as shown in Table 1. The number of macrophages similarly measured in the untreated control group was 6.35 × 10 5 , and it was confirmed that administration of the polysaccharide-peptidoglycan complex, that is, the macrophage activator of the present invention markedly increased the number of macrophages.
実施例 2 製造実施例1による多糖‐ペプチドグリカン複合体につ
いて、リステリア菌の感染防御効果を調べた。なお実験
群マウスに対する多糖‐ペプチドグリカン複合体の投与
量は、20mg/kgとした。 Example 2 With respect to the polysaccharide-peptidoglycan complex according to Production Example 1, the protective effect against Listeria monocytogenes infection was examined. The dose of the polysaccharide-peptidoglycan complex to the experimental group mice was 20 mg / kg.
その結果、無処置対照群のマウスはリステリア菌感染に
より4日目までにすべて死亡したのに対し、実験群マウ
スは全例14日目まで生存した。また、菌接種後24時間の
腹腔内菌増殖も、第3表に示したように顕著に抑制され
た。As a result, all the mice in the untreated control group died by the Listeria monocytogenes infection by the 4th day, whereas all the mice in the experimental group survived by the 14th day. In addition, the intraperitoneal bacterial growth 24 hours after the bacterial inoculation was also significantly suppressed as shown in Table 3.
実施例 3 製造実施例1による多糖‐ペプチドグリカン複合体につ
いて、ネズミチフス菌の感染防御効果を調べた。感染5
日前に多糖‐ペプチドグリカン複合体を20mg/kg投与し
たところ、菌の増殖抑制率は96.3%であった。 Example 3 With regard to the polysaccharide-peptidoglycan complex according to Production Example 1, the protective effect against Salmonella typhimurium infection was examined. Infection 5
When 20 mg / kg of the polysaccharide-peptidoglycan complex was administered the day before, the growth inhibition rate of the bacteria was 96.3%.
実施例 4 製造実施例1による多糖‐ペプチドグリカン複合体につ
いて、リステリア菌の感染防御効果を調べた。この場
合、多糖‐ペプチドグリカン複合体は0.8〜80mg/kgとな
るように感染5日前に投与した。その結果を第4表に示
す。Example 4 With regard to the polysaccharide-peptidoglycan complex according to Production Example 1, the protective effect against Listeria monocytogenes infection was examined. In this case, the polysaccharide-peptidoglycan complex was administered at 0.8 to 80 mg / kg 5 days before infection. The results are shown in Table 4.
実施例 5 製造実施例1および同2による多糖‐ペプチドグリカン
複合体、ならびに製造実施例1と同様にしてL.カゼイYI
T0123株、L.カゼイYIT0105株、L.サリバリウスYIT0104
株、L.ヘルベティカスYIT0083株等から製造した多糖‐
ペプチドグリカン複合体について、リステリア菌に対す
る感染防御効果を調べた。但し多糖‐ペプチドグリカン
複合体は20mg/kgを菌感染の5日前に投与した。その結
果を表5表に示す。 Example 5 Polysaccharide-peptidoglycan complex according to Production Examples 1 and 2, and L. casei YI in the same manner as in Production Example 1.
T0123 strain, L. casei YIT0105 strain, L. salivarius YIT0104
, L. helveticus YIT0083 strain, etc.
The peptidoglycan complex was examined for its protective effect against Listeria monocytogenes. However, the polysaccharide-peptidoglycan complex was administered at 20 mg / kg 5 days before bacterial infection. The results are shown in Table 5.
実施例 6 製造実施例3による多糖‐ペプチドグリカン複合体分画
物すなわちPS-PG・A〜Dについて、リステリア菌に対
する感染防御効果を調べた。但し多糖‐ペプチドグリカ
ン複合体は20mg/kgを菌感染の5日前に投与した。 Example 6 With respect to the polysaccharide-peptidoglycan complex fractions according to Production Example 3, that is, PS-PG · A to D, the protective effect against infection with Listeria monocytogenes was examined. However, the polysaccharide-peptidoglycan complex was administered at 20 mg / kg 5 days before bacterial infection.
その結果を表6表に示す。The results are shown in Table 6.
第1図は製造実施例1による多糖‐ペプチドグリカン複
合体の赤外線スペクトル図である。FIG. 1 is an infrared spectrum diagram of a polysaccharide-peptidoglycan complex according to Production Example 1.
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 Infection and Immu nity,vol,24,No.2,PP 308〜312(1979) Infection and Immu nity,vol,41,No.2,PP 462〜469(1983) ─────────────────────────────────────────────────── ─── Continuation of front page (56) References Infection and Immunity, vol. 24, No. 2, PP 308-312 (1979) Infection and Immunity, vol, 41, No. 2, PP 462-469 (1983)
Claims (1)
を必須の構成アミノ酸とするペプチド鎖ならびにグルコ
ースおよびラムノースを必須の構成糖とする糖鎖を有す
る、乳酸桿菌細胞壁由来の多糖‐ペプチドグリカン複合
体を有効成分とするマクロファージ活性化剤。1. Lactobacillus cell wall-derived polysaccharide-peptidoglycan complex having a peptide chain containing L-alanine, D-glutamine and L-lysine as essential constituent amino acids and a sugar chain containing glucose and rhamnose as essential constituent sugars. A macrophage activator containing the body as an active ingredient.
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-
1986
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