JPH0684952B2 - 分析方法およびセンサ電極 - Google Patents
分析方法およびセンサ電極Info
- Publication number
- JPH0684952B2 JPH0684952B2 JP60226016A JP22601685A JPH0684952B2 JP H0684952 B2 JPH0684952 B2 JP H0684952B2 JP 60226016 A JP60226016 A JP 60226016A JP 22601685 A JP22601685 A JP 22601685A JP H0684952 B2 JPH0684952 B2 JP H0684952B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- paracetamol
- enzyme
- electrode
- sensor electrode
- aromatic primary
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/001—Enzyme electrodes
- C12Q1/005—Enzyme electrodes involving specific analytes or enzymes
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/94—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving narcotics or drugs or pharmaceuticals, neurotransmitters or associated receptors
- G01N33/9486—Analgesics, e.g. opiates, aspirine
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/817—Enzyme or microbe electrode
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Emergency Medicine (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 本発明は化学センサ、特に全血中のＮ−アセチル芳香族
第一アミン、例えばパラセタモールの存在を検出し、そ
の量を測定するかまたはその水準を監視することができ
る化学センサに関するものである。
第一アミン、例えばパラセタモールの存在を検出し、そ
の量を測定するかまたはその水準を監視することができ
る化学センサに関するものである。
パラセタモール（Ｎ−アセチルｐ−アミノフェノール）
は迅速に作用し一般に副作用を有しない鎮痛薬として広
範囲に使用されている。この医薬は有効な作用および他
の医薬との好ましい相互作用を有するが、これを入手す
ることができることにより、この医薬を自殺に使用する
ことが多くなってきた。
は迅速に作用し一般に副作用を有しない鎮痛薬として広
範囲に使用されている。この医薬は有効な作用および他
の医薬との好ましい相互作用を有するが、これを入手す
ることができることにより、この医薬を自殺に使用する
ことが多くなってきた。
致死薬量は広汎な肝壊死の結果として死に至らしめる。
パラセタモールは、苦痛受体に敏感であると考えられる
プロスタグランジンおよびリポ多糖類の或る種のものの
合成を阻止することにより作用するものと考えられる。
プロスタグランジンおよびリポ多糖類の或る種のものの
合成を阻止することにより作用するものと考えられる。
人体からこの物質の排泄は肝臓における抱合後起るもの
と考えられる。現在の理論は、パラセタモールは低濃度
で硫酸塩またはグルクロニドと抱合するが、高濃度では
システインを形成する酸化代謝路がつくられ、メルカプ
ツール酸が抱合し次いで活性中間体と減少したグルタチ
オンとの反応が行われる。パラセタモールの極めて高い
濃度で、肝の減少したグルタチオン貯留が枯渇するよう
になり結果として起る高水準の活性化した中間体が肝細
胞壊死を起すと考えられる。更に細胞の損傷を起す中間
体の活性の化学基はサルフヒドリル基であると考えられ
る。
と考えられる。現在の理論は、パラセタモールは低濃度
で硫酸塩またはグルクロニドと抱合するが、高濃度では
システインを形成する酸化代謝路がつくられ、メルカプ
ツール酸が抱合し次いで活性中間体と減少したグルタチ
オンとの反応が行われる。パラセタモールの極めて高い
濃度で、肝の減少したグルタチオン貯留が枯渇するよう
になり結果として起る高水準の活性化した中間体が肝細
胞壊死を起すと考えられる。更に細胞の損傷を起す中間
体の活性の化学基はサルフヒドリル基であると考えられ
る。
肝壊死の臨床上の初期は、パラセタモール中毒の明らか
な症状だけであり、摂取後数時間10〜12時間までは起ら
ない。更に、この中毒は、壊死が起る前、従って最初の
臨床上の徴候がおこる前に処置しなければならない。通
常治療は、胃洗または活性炭の如き吸着剤の摂取（摂取
後短時間に医学的手当が利用できる場合）、次いで活性
化した中間体の作用を競争して阻止するサルフヒドリル
基を有する物質の投与を含む。
な症状だけであり、摂取後数時間10〜12時間までは起ら
ない。更に、この中毒は、壊死が起る前、従って最初の
臨床上の徴候がおこる前に処置しなければならない。通
常治療は、胃洗または活性炭の如き吸着剤の摂取（摂取
後短時間に医学的手当が利用できる場合）、次いで活性
化した中間体の作用を競争して阻止するサルフヒドリル
基を有する物質の投与を含む。
然し、サルフヒドリルを有する解毒薬の投与は、摂取後
10時間以上後または血清のパラセタモール濃度に正しく
合わない場合には危険であることを確かめた。
10時間以上後または血清のパラセタモール濃度に正しく
合わない場合には危険であることを確かめた。
従ってパラセタモールの量の迅速であり且つ正確な測定
が行なえ、これにより診断および有効な治療を早期に確
立し得る方法を提供することが望ましい。
が行なえ、これにより診断および有効な治療を早期に確
立し得る方法を提供することが望ましい。
かかる方法を提供せんとする従来の試みは、時間、熟練
および高価な装置を必要とするクロマトグラフ法に基づ
くものであった。或いはまた、ｐ−アミノフェノール
（PAP）の検出に基づく更に特定の比色法が用いられて
きた。ｐ−アミノフェノール（MP186℃）はパラセタモ
ールの酵素減成により生成され、この場合も高価な装置
および熟練者が必要である。比色法の特別な制限は赤血
球の干渉により全血よりはむしろ血清または血漿を使用
することにある。
および高価な装置を必要とするクロマトグラフ法に基づ
くものであった。或いはまた、ｐ−アミノフェノール
（PAP）の検出に基づく更に特定の比色法が用いられて
きた。ｐ−アミノフェノール（MP186℃）はパラセタモ
ールの酵素減成により生成され、この場合も高価な装置
および熟練者が必要である。比色法の特別な制限は赤血
球の干渉により全血よりはむしろ血清または血漿を使用
することにある。
従って大きく且つ費用のかかる装置を用いることなく比
較的未熟な人により行われるパラセタモールの分析方法
を提供することが望ましい。かかる方法は全血を用い試
験管内でまたは生体内で使用されるのが好ましい。
較的未熟な人により行われるパラセタモールの分析方法
を提供することが望ましい。かかる方法は全血を用い試
験管内でまたは生体内で使用されるのが好ましい。
欧州特許出願第82305597号には、導電性物質からなり、
少くともその外面に酵素と、酵素が接触反応に有効であ
る場合電子を電極に輸送するメディエイタ化合物の組合
せを有するセンサ電極が開示され、請求されている。
少くともその外面に酵素と、酵素が接触反応に有効であ
る場合電子を電極に輸送するメディエイタ化合物の組合
せを有するセンサ電極が開示され、請求されている。
かかる電極の目的は上記酵素により触媒作用が及ぼされ
る反応を行う能力のある１種又はそれ以上の選ばれた成
分の存在の検知、その量の測定及び／又は監視である。
る反応を行う能力のある１種又はそれ以上の選ばれた成
分の存在の検知、その量の測定及び／又は監視である。
本発明は、特定の一般的反応機構がパラセタモール及び
関連化合物の分析の基礎として特に有用であることを知
見したことに基づく。
関連化合物の分析の基礎として特に有用であることを知
見したことに基づく。
本発明の第１の観点において、適当な電位に保った電極
を次のサンプル及び酵素を含む系と接触させる型の検定
方法を提供する： a)パラセタモール又はその誘導体が含まれると思われる
サンプル、及び、 b)Ｎ−アシル化された芳香族第一アミン又はその誘導体
の加水分解に触媒作用を及ぼす能力のある酵素、 であり、但し電極中を流れる電流は形成される加水分解
生成物の量、従ってサンプル中のＮ−アシル化された芳
香族第一アミン又はその誘導体の濃度の尺度である。
を次のサンプル及び酵素を含む系と接触させる型の検定
方法を提供する： a)パラセタモール又はその誘導体が含まれると思われる
サンプル、及び、 b)Ｎ−アシル化された芳香族第一アミン又はその誘導体
の加水分解に触媒作用を及ぼす能力のある酵素、 であり、但し電極中を流れる電流は形成される加水分解
生成物の量、従ってサンプル中のＮ−アシル化された芳
香族第一アミン又はその誘導体の濃度の尺度である。
この系はメディエイタを使用せず、この点で本出願人の
先願とは異なることを留意すべきである。
先願とは異なることを留意すべきである。
発明の名称が“分析装置及びそのためのセンサ電極”で
ある本出願人の係属する出願にセンサ電極の性質及び製
造が開示されている。かかる電極は、本発明の実施に好
ましく、電極はその表面に酵素が被着されるが、メディ
エイタ化合物が用いられないのが好ましい。
ある本出願人の係属する出願にセンサ電極の性質及び製
造が開示されている。かかる電極は、本発明の実施に好
ましく、電極はその表面に酵素が被着されるが、メディ
エイタ化合物が用いられないのが好ましい。
従って、本発明の第２の観点は、表面にパラセタモール
又はパラセタモールの誘導体を生成物に加水分解するの
に触媒作用を及ぼす能力のある酵素を有するセンサ電極
で、但し電極の中を流れる電流が行なわれる反応及びそ
れによる上記表面でのパラセタモール又はその誘導体の
濃度の尺度である。
又はパラセタモールの誘導体を生成物に加水分解するの
に触媒作用を及ぼす能力のある酵素を有するセンサ電極
で、但し電極の中を流れる電流が行なわれる反応及びそ
れによる上記表面でのパラセタモール又はその誘導体の
濃度の尺度である。
便利なことには、酵素はEC3.5.1.13として規定されてい
る型のものでありアリールアシルアミダーゼ〔IUB（国
際生化学連合）〕（他にアリールアシルアミドアミノヒ
ドロラーゼとして知られている）として命名されてい
る。
る型のものでありアリールアシルアミダーゼ〔IUB（国
際生化学連合）〕（他にアリールアシルアミドアミノヒ
ドロラーゼとして知られている）として命名されてい
る。
酵素は細菌から得るのが好ましい。
電極表面における分析のために、パラセタモールをｐ−
アミノフェノールに直接転化させる多数の細菌の酵素が
研究されている。
アミノフェノールに直接転化させる多数の細菌の酵素が
研究されている。
これらのアリールアシルアミダーゼを使用する分析系で
起るプロセスに対して次の反応式が仮定されている： 細菌のアリールアシルアミダーゼの作用下に、パラセタ
モールは加水分解してｐ−アミノフェノールおよび酢酸
を生成する。溶液中のｐ−アミノフェノールと電極表面
との間の電位差が、電極における低エネルギー帯が電子
によって見い出されるような大きさである場合には、電
子は電極の伝導帯によって受け取られる。従って、電極
に電位差が加えられた際に、電気酸化（electro-oxidat
ion）が基準電極に関して起る。
起るプロセスに対して次の反応式が仮定されている： 細菌のアリールアシルアミダーゼの作用下に、パラセタ
モールは加水分解してｐ−アミノフェノールおよび酢酸
を生成する。溶液中のｐ−アミノフェノールと電極表面
との間の電位差が、電極における低エネルギー帯が電子
によって見い出されるような大きさである場合には、電
子は電極の伝導帯によって受け取られる。従って、電極
に電位差が加えられた際に、電気酸化（electro-oxidat
ion）が基準電極に関して起る。
本発明の特定例では、酸素をフザリウム（Fusarium）種
から生成させる。
から生成させる。
本発明の他の特定例では、酸素をプソイドモナス（Pseu
domonas）種から生成させる。
domonas）種から生成させる。
次に本発明を図面を参照して例について説明する。
種々の材料の作用電極を使用した： 電極ディスクとテフロン被覆内に収容されている黄銅連
結棒とから金、白金、ガラス状炭素およびニッケル（中
実のもの）電極を作った。実験室において黒鉛ペースト
電極をアラルダイト（araldite）（レディオ・スペアズ
（Radio Spares）社から入手）内に収容されている青銅
連結部材から作った。アラルダイト被覆（ガラスカラー
内に保持されている）はコネクターを露出させるために
一端に孔を設けたコップを具えていた。黒鉛ペースト材
料をこのコップ内に充填した。
結棒とから金、白金、ガラス状炭素およびニッケル（中
実のもの）電極を作った。実験室において黒鉛ペースト
電極をアラルダイト（araldite）（レディオ・スペアズ
（Radio Spares）社から入手）内に収容されている青銅
連結部材から作った。アラルダイト被覆（ガラスカラー
内に保持されている）はコネクターを露出させるために
一端に孔を設けたコップを具えていた。黒鉛ペースト材
料をこのコップ内に充填した。
ヌジョール（Nujol）と混合した黒鉛粉末またはアラル
ダイトと混合した黒鉛粉末を使用して黒鉛ペーストを作
り、これをコップ内で硬化させた。いずれの場合にも対
向電極を作用電極材料の近くに保持して電子が容易に流
れるようにした。
ダイトと混合した黒鉛粉末を使用して黒鉛ペーストを作
り、これをコップ内で硬化させた。いずれの場合にも対
向電極を作用電極材料の近くに保持して電子が容易に流
れるようにした。
次の例は本発明を含む技術を使用した結果を示す。
参考例１ Ｐ−アミノフェノールのサイクリックボルタンメトリー リン酸二水素カリウム〔5.31g;ブリティッシュドラッグ
ハウジズ（BDH社製のアナラー（Analar）〕及びリン酸
水素二カリウム〔13.92g;BDH社製のアナラー）より緩衝
液を調整し、この際これらをミリーＱ水（Milli-Q wate
r）に溶解して、pHを７に調節し最終体積を１リットル
とした。
ハウジズ（BDH社製のアナラー（Analar）〕及びリン酸
水素二カリウム〔13.92g;BDH社製のアナラー）より緩衝
液を調整し、この際これらをミリーＱ水（Milli-Q wate
r）に溶解して、pHを７に調節し最終体積を１リットル
とした。
ｐ−アミノフェノール溶液を、約80mlのミリーＱ水に5
4.56mgのｐ−アミノフェノール（BDH）を溶解すること
により調整し、0.1MNaOHでpH11に調節した。次いで溶液
を0.1MHClでpH9まで酸性化し、ミリーＱ水で最終体積を
100mlとした。ｐ−アミノフェノール溶液を光から保護
し調整後直ちに使用した。
4.56mgのｐ−アミノフェノール（BDH）を溶解すること
により調整し、0.1MNaOHでpH11に調節した。次いで溶液
を0.1MHClでpH9まで酸性化し、ミリーＱ水で最終体積を
100mlとした。ｐ−アミノフェノール溶液を光から保護
し調整後直ちに使用した。
作用電極は異なる材料、例えば金、ガラス状カーボン及
び特に熱分解グラファイトの範囲から作られた。電極は
電極表面から酸化生成物及び不純物を除去するために水
に0.3μのアルミナ（BDH）のスラリーを使用して実験の
間定期的に浄化した。次いでアルミナを電極表面から超
音波により除去した。
び特に熱分解グラファイトの範囲から作られた。電極は
電極表面から酸化生成物及び不純物を除去するために水
に0.3μのアルミナ（BDH）のスラリーを使用して実験の
間定期的に浄化した。次いでアルミナを電極表面から超
音波により除去した。
サイクリックボルタモグラムを、飽和カロメル電極（SC
E）に対して電位をゼロ〜＋400mV及び−200mVの間を掃
引することにより溶液の範囲から得た。印加電位は50mV
/sの操作速度を使用するポテンシォスタット（ジェイト
ロン社・エー・エス・サイエンティフック・アビングト
ン）により制御した。
E）に対して電位をゼロ〜＋400mV及び−200mVの間を掃
引することにより溶液の範囲から得た。印加電位は50mV
/sの操作速度を使用するポテンシォスタット（ジェイト
ロン社・エー・エス・サイエンティフック・アビングト
ン）により制御した。
生じた酸化電流をグルドシリース60000チャートレコー
ダーで記録した。Ｘ軸は印加電位を、Ｙ軸は生じた電流
を示した。ｐ−アミノフェノールのサイクリックボルタ
モグラム（最終濃度1mMで）を第２図に示す。
ダーで記録した。Ｘ軸は印加電位を、Ｙ軸は生じた電流
を示した。ｐ−アミノフェノールのサイクリックボルタ
モグラム（最終濃度1mMで）を第２図に示す。
実施例１ アリールアシルアミダーゼを組み入れたセンサ パラセタモール（Ｎ−アセチルｐ−アミノフェノール；
シグマケミカル社製）をリン酸カリウム緩衝液に溶解し
て25mMの最終濃度を与えた。プソイドモナス種から抽出
したアリールアシルアミダーゼを、アプライドマイクロ
バイオロジーエンドリサーチ、ポートンダウン、サリス
バリーに対するP.H.L.S.センターにより10mlガラスビン
に凍結乾燥して供給した。酵素を−20℃で保存し、フザ
リウム種から抽出されたアリールアシルアミダーゼがシ
グマケミカル社により供給されたのでガラスびん当り1m
lのミリーＱ水で再生した。
シグマケミカル社製）をリン酸カリウム緩衝液に溶解し
て25mMの最終濃度を与えた。プソイドモナス種から抽出
したアリールアシルアミダーゼを、アプライドマイクロ
バイオロジーエンドリサーチ、ポートンダウン、サリス
バリーに対するP.H.L.S.センターにより10mlガラスビン
に凍結乾燥して供給した。酵素を−20℃で保存し、フザ
リウム種から抽出されたアリールアシルアミダーゼがシ
グマケミカル社により供給されたのでガラスびん当り1m
lのミリーＱ水で再生した。
酵素溶液を、アトキンソン・エー・ハモンド、ピー・エ
ム・ブライス・シー・ピーおよびスカウェン・エム・デ
ィーの方法（英国特許第2089978B号）を用いて定期的に
分析した。この系では、0.0880アンモニア0.4mlと混合
した無水硫酸銅の0.2％（W/V）水溶液25mlを含む0.1％
（W/V）オルトクレゾール水溶液1mlとアンモニア性硫酸
銅0.1mlを、使い捨てキュベット内の水1.4ml中に添加し
た。この溶液を十分に混合し、更に標準ｐ−アミノフェ
ノール溶液0.5mlを添加した。次いでこの溶液を再度混
合し、５分間静置した後615nmにおいて溶液の吸収を測
定した。酵素の１ユニットを、pH7および温度37℃にお
ける１分当りのパラ・アミノフェノールへのパラセタモ
ール１μmolの転化として規定した。
ム・ブライス・シー・ピーおよびスカウェン・エム・デ
ィーの方法（英国特許第2089978B号）を用いて定期的に
分析した。この系では、0.0880アンモニア0.4mlと混合
した無水硫酸銅の0.2％（W/V）水溶液25mlを含む0.1％
（W/V）オルトクレゾール水溶液1mlとアンモニア性硫酸
銅0.1mlを、使い捨てキュベット内の水1.4ml中に添加し
た。この溶液を十分に混合し、更に標準ｐ−アミノフェ
ノール溶液0.5mlを添加した。次いでこの溶液を再度混
合し、５分間静置した後615nmにおいて溶液の吸収を測
定した。酵素の１ユニットを、pH7および温度37℃にお
ける１分当りのパラ・アミノフェノールへのパラセタモ
ール１μmolの転化として規定した。
使用した電極は上述の参考例で述べたものと同じもので
ある。
ある。
サイクリックボルタモグラムでは、セルにパラセタモー
ル溶液24μｌ（上述の如き25mM）と緩衝溶液576μｌと
を入れた。
ル溶液24μｌ（上述の如き25mM）と緩衝溶液576μｌと
を入れた。
サイクリックボルタモグラムを0.9Uアリールアシルアミ
ダーゼ（上記酵素溶液120μｌ）の存在下および不存在
下の双方で記録した。反応の開始を確実ならしめるため
に、走査開始前に各サンプルを37℃で２分間温置した。
ダーゼ（上記酵素溶液120μｌ）の存在下および不存在
下の双方で記録した。反応の開始を確実ならしめるため
に、走査開始前に各サンプルを37℃で２分間温置した。
サイクリックボルタモグラムを第３図に示す。第３図で
は、走査開始前のアリールアシルアミダーゼ溶液の添加
の際、ボルタモグラムの輪郭に実質的変化が観察された
ことを示している。これは、酵素によるパラ−アミノフ
ェノールへのパラセタモールの触媒転化に起因する。
は、走査開始前のアリールアシルアミダーゼ溶液の添加
の際、ボルタモグラムの輪郭に実質的変化が観察された
ことを示している。これは、酵素によるパラ−アミノフ
ェノールへのパラセタモールの触媒転化に起因する。
実施例２ 緩衝溶液での定常状態測定 定常状態測定では、かきまぜた溶液に固定電位を印加し
た際に生ずる電流を、時間ベースとしてＸ軸を用いチャ
ートレコーダのＹ軸で評価した。系が平衡になるまでの
２分間が経過した後に、電位が37℃でSCEに対し＋250mV
で安定した。溶液のかきまぜは、酸化に有効である電極
に隣接する物質層の再補充を確実に行なわしめ、これに
より、電極で生じた電流は試薬の消耗により減衰するこ
とがなくなる。
た際に生ずる電流を、時間ベースとしてＸ軸を用いチャ
ートレコーダのＹ軸で評価した。系が平衡になるまでの
２分間が経過した後に、電位が37℃でSCEに対し＋250mV
で安定した。溶液のかきまぜは、酸化に有効である電極
に隣接する物質層の再補充を確実に行なわしめ、これに
より、電極で生じた電流は試薬の消耗により減衰するこ
とがなくなる。
かきまぜを行なった溶液はアリールアクリルアミダーゼ
溶液200μｌ（1.5ユニット）と緩衝溶液800μｌ（pH7）
とを含む。定常状態の電気化学的測定をパラセタモール
溶液の増加する量の下で行ない、パラセタモールに関す
る一次検量線を作成した。これを第４図に示す。
溶液200μｌ（1.5ユニット）と緩衝溶液800μｌ（pH7）
とを含む。定常状態の電気化学的測定をパラセタモール
溶液の増加する量の下で行ない、パラセタモールに関す
る一次検量線を作成した。これを第４図に示す。
同様の一次検量線をpH7.5の緩衝溶液（リン酸二水素カ
リウム2.18g（BDH社製アナラーと、ミリーＱ水に溶解し
たリン酸水素二カリウム19.17g（BDH社製アナラー）と
から作り、pH7.5に調整し、最終容積を１とした）に
て作成した。これを第５図に示す。
リウム2.18g（BDH社製アナラーと、ミリーＱ水に溶解し
たリン酸水素二カリウム19.17g（BDH社製アナラー）と
から作り、pH7.5に調整し、最終容積を１とした）に
て作成した。これを第５図に示す。
温置混合物のpHを更に8.0まで高めると（ミリーＱ水に
溶解したトリズマ塩基（Trizmabase）12.11g（シグマケ
ミカル社製）より調整した緩衝液を1MのHClでpH8に調整
し、最終容積を１とした）、パラセタモールに対し極
めて不十分な応答が見られ、また0.5mM以上のパラセタ
モール濃度において直線から逸脱した第６図に示す検量
線が生じた。
溶解したトリズマ塩基（Trizmabase）12.11g（シグマケ
ミカル社製）より調整した緩衝液を1MのHClでpH8に調整
し、最終容積を１とした）、パラセタモールに対し極
めて不十分な応答が見られ、また0.5mM以上のパラセタ
モール濃度において直線から逸脱した第６図に示す検量
線が生じた。
pH7.0と7.5の間の緩衝液を用いて得たパラセタモールに
関する検量線が未知サンプルの直読値に関連させて使用
し、パラセタモール濃度を決定することができた。
関する検量線が未知サンプルの直読値に関連させて使用
し、パラセタモール濃度を決定することができた。
実施例３ 100％対照血清での定常状態の測定 対照血清（モニトロール（Monitrol）IIE:スイス国メル
ツ・アンド・デードAG）をバイアル当り3.5mlのミリー
Ｑ水に懸濁させ（製造者の報告書に記載されている容積
の70％）、次いで製造者の報告書に従い混合して143％
（最終濃度）の対照血清を得た。この対照血清にパラセ
タモール（シグマケミカル社製）を添加して最終濃度4.
29mMを得た。143％の対照血清で上記溶液を希釈する
と、血清中０〜4.29mMのパラセタモール濃度範囲が得ら
れた。
ツ・アンド・デードAG）をバイアル当り3.5mlのミリー
Ｑ水に懸濁させ（製造者の報告書に記載されている容積
の70％）、次いで製造者の報告書に従い混合して143％
（最終濃度）の対照血清を得た。この対照血清にパラセ
タモール（シグマケミカル社製）を添加して最終濃度4.
29mMを得た。143％の対照血清で上記溶液を希釈する
と、血清中０〜4.29mMのパラセタモール濃度範囲が得ら
れた。
かきまぜを行なったセルには、143％対照血清中パラセ
タモール溶液700μｌと、1Mのリン酸カリウム緩衝溶液
（pH7.0）100μｌと、アリールアシルアミダーゼ溶液
（1.5ユニット）200μｌとが入っていた（かきまぜを行
なったセル内の血清の最終濃度は100％相当であっ
た）。定常状態電流を上記実施例２で述べた如く２度測
定した。100％対照血清におけるパラセタモールに関す
る検量線を第７図に示す。
タモール溶液700μｌと、1Mのリン酸カリウム緩衝溶液
（pH7.0）100μｌと、アリールアシルアミダーゼ溶液
（1.5ユニット）200μｌとが入っていた（かきまぜを行
なったセル内の血清の最終濃度は100％相当であっ
た）。定常状態電流を上記実施例２で述べた如く２度測
定した。100％対照血清におけるパラセタモールに関す
る検量線を第７図に示す。
比較研究において、143％の対照血清におけるパラセタ
モール溶液を、標準パラセタモール分析方法〔ケンブリ
ッジ ライフ サイエンス（CLS）〕を用いて分析し
た。第３図に示すCLS方法により決定したパラセタモー
ル濃度と、測定した定常状態電流との間に良好なる相関
関係を見い出した。
モール溶液を、標準パラセタモール分析方法〔ケンブリ
ッジ ライフ サイエンス（CLS）〕を用いて分析し
た。第３図に示すCLS方法により決定したパラセタモー
ル濃度と、測定した定常状態電流との間に良好なる相関
関係を見い出した。
フサリウム酵素以上のプソイドモナス酵素の特別なる利
点は、後者が周囲温度および中性pH（全血清のpHは約7.
2である）で良好に作動することである。かかる最適条
件により、特別なる実験室条件を必要とせず如何なる環
境（例えば手術室）においても使用することのできるバ
イオセンサの製造が容易となった。
点は、後者が周囲温度および中性pH（全血清のpHは約7.
2である）で良好に作動することである。かかる最適条
件により、特別なる実験室条件を必要とせず如何なる環
境（例えば手術室）においても使用することのできるバ
イオセンサの製造が容易となった。
実施例４ 膜への酵素固定化 固定したすべての酵素を、酢酸セルロースをアセトンに
溶解した溶液と種々の濃度で混合した。次いでこの溶液
を電極表面に配置し、アセトンを蒸発させ（乾燥空気流
を作用させるかまたは作用させることなしに行なう）、
取り込まれた酵素を有する酢酸セルロース膜を残留させ
た。次いで、この酵素電極を用いてパラセタモールの固
定濃度を検出した（第９図参照）。
溶解した溶液と種々の濃度で混合した。次いでこの溶液
を電極表面に配置し、アセトンを蒸発させ（乾燥空気流
を作用させるかまたは作用させることなしに行なう）、
取り込まれた酵素を有する酢酸セルロース膜を残留させ
た。次いで、この酵素電極を用いてパラセタモールの固
定濃度を検出した（第９図参照）。
酵素は、この方法において固定化した場合に、その活性
度を明らかに保持した。酵素の閉じ込は、これが固定化
膜と共有結合を形成しないのでその構造に重大な拘束を
与えず、この事が多くのその自然活性を保持させた。
度を明らかに保持した。酵素の閉じ込は、これが固定化
膜と共有結合を形成しないのでその構造に重大な拘束を
与えず、この事が多くのその自然活性を保持させた。
固定化酵素に遭遇する遅い応答時間は、酵素活性（閉じ
込めにより課せられる運動における小さい拘束によっ
て）および膜を通る生成物輸送における制限によるもの
と思われる。
込めにより課せられる運動における小さい拘束によっ
て）および膜を通る生成物輸送における制限によるもの
と思われる。
酵素を固定化することのできる特殊な利点は次のよう
に： a)パラセタモールを感知する一成分装置を製造できるこ
と、 b)酵素を再使用できること、および c)酵素特性を固定化法によりセンサの応答時間を短縮す
るように変えることができることである。
に： a)パラセタモールを感知する一成分装置を製造できるこ
と、 b)酵素を再使用できること、および c)酵素特性を固定化法によりセンサの応答時間を短縮す
るように変えることができることである。
本発明の範囲内で種々変更を加えることができる。例え
ば、本発明はパラセタモールに特有の電極の如きセンサ
電極に主に関係するが、また本発明は電極と、一次また
は永久挿入手段、例えば針状プローブとの組合わせ体に
関する。また、本発明は、信号または制御装置と連結し
たまたは連結することができるかかる電極に関する。本
発明の電極は、病院の分析パラセタモールまたはパラセ
タモール誘導体感知器機に使用する改良マクロ−センサ
の製造を可能にする。
ば、本発明はパラセタモールに特有の電極の如きセンサ
電極に主に関係するが、また本発明は電極と、一次また
は永久挿入手段、例えば針状プローブとの組合わせ体に
関する。また、本発明は、信号または制御装置と連結し
たまたは連結することができるかかる電極に関する。本
発明の電極は、病院の分析パラセタモールまたはパラセ
タモール誘導体感知器機に使用する改良マクロ−センサ
の製造を可能にする。
本発明の電極はマクロスケールで外科医師用として簡単
で、安価なエレクトロニックデジタル読取り器機に組込
むことができる。また分析用キットに組込まれる。
で、安価なエレクトロニックデジタル読取り器機に組込
むことができる。また分析用キットに組込まれる。
マクロ−センサは、僅かに変形して指から血液サンプル
を自動的に採取し、試料をセンサと接触させ、信号を増
幅し、デジタル読取りできる装置に用いることができ
る。かかる用途においてセンサ電極はアリールアシルア
ミダーゼ、安定化剤、緩衝剤および乾燥状態の黒鉛から
構成することができる。
を自動的に採取し、試料をセンサと接触させ、信号を増
幅し、デジタル読取りできる装置に用いることができ
る。かかる用途においてセンサ電極はアリールアシルア
ミダーゼ、安定化剤、緩衝剤および乾燥状態の黒鉛から
構成することができる。
本発明は、本特許出願人の英国特許出願第8515884号明
細書「電流測定センサ電極およびその製造方法」に記載
しているスクリーン印刷電極と組合わせて用いることが
できる。
細書「電流測定センサ電極およびその製造方法」に記載
しているスクリーン印刷電極と組合わせて用いることが
できる。
第１図はすべてのボルタノメータによる測定に仕様した
標準三電極装置の略線図、 第２図は1mMの最終濃度におけるｐ−アミノフェノール
のサイクリック・ポルタモグラム、 第３図は1mMの濃度におけるパラセタモールのサイクリ
ック・ポルタモグラムに及ぼすアリールアシルアミダー
ゼ転化の影響を示す説明図、 第４図はpH7.0におけるパラセタモールの検量線図、 第５図はpH7.5によおけパラセタモールの検量線図、 第６図はpH8.0によおけパラセタモールの検量線図、 第７図は100％の対照血清中のpH7.0におけるパラセタモ
ールの検量線図、 第８図は本発明の分析方法と表示パラセタモール分析方
法（ケンブリッジ・ライフ・サイエンス）との分析値の
比較結果を示すグラフ、 第９図は固定化酵素電極を使用して固定されたパラセタ
モール量を検出した結果を示すグラフである。
標準三電極装置の略線図、 第２図は1mMの最終濃度におけるｐ−アミノフェノール
のサイクリック・ポルタモグラム、 第３図は1mMの濃度におけるパラセタモールのサイクリ
ック・ポルタモグラムに及ぼすアリールアシルアミダー
ゼ転化の影響を示す説明図、 第４図はpH7.0におけるパラセタモールの検量線図、 第５図はpH7.5によおけパラセタモールの検量線図、 第６図はpH8.0によおけパラセタモールの検量線図、 第７図は100％の対照血清中のpH7.0におけるパラセタモ
ールの検量線図、 第８図は本発明の分析方法と表示パラセタモール分析方
法（ケンブリッジ・ライフ・サイエンス）との分析値の
比較結果を示すグラフ、 第９図は固定化酵素電極を使用して固定されたパラセタ
モール量を検出した結果を示すグラフである。
フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｇ０１Ｎ 27/48 ３１１ 7363−2Ｊ
Claims (9)
- 【請求項１】液体試料を分析してＮ−アシル化芳香族第
一アミンの存在または含有量を測定するに当り、 （ａ） 上記試料を、作用電極および芳香族第一アミン
を与えるためＮ−アシル化芳香族第一アミンの加水分解
に触媒作用をすることができるアリールアシルアミダー
ゼであるEC3.5.1.13型の酵素と接触させ、 （ｂ） 上記作用電極を、芳香族第一アミンを酸化し電
極に電荷を、メディエイタを使用せずに転送するに十分
高い電位で釣り合わせ、 （ｃ） 試料中のＮ−アシル化芳香族第一アミンの存在
または含有量の指示として電流を検出または測定する ことを特徴とする液体試料の分析方法。 - 【請求項２】酵素を細菌から得る特許請求の範囲第１項
記載の分析方法。 - 【請求項３】酵素を適当な基体上にスクリーン印刷する
特許請求の範囲第１または２項記載の分析方法。 - 【請求項４】電極を適当な基体上にスクリーン印刷する
特許請求の範囲第１〜３項のいずれか一つの項に記載の
分析方法。 - 【請求項５】サンプルが全血である特許請求の範囲第１
項記載の分析方法。 - 【請求項６】液体試料を分析してパラセタモールまたは
パラセタモールの誘導体の存在を測定するためのセンサ
電極において、該電極が、その表面に芳香族第１アミン
を与えるためパラセタモールまたはパラセタモールの誘
導体の加水分解に触媒作用することができるアリールア
シルアミダーゼであるEC3.5.1.13型の酵素を有し、芳香
族第一アミンを酸化し電極に電荷をメディエイタを使用
せずに転送するに十分高い電位に釣り合わせることがで
きることを特徴とするセンサ電極。 - 【請求項７】酵素を細菌から得た特許請求の範囲第６項
記載のセンサ電極。 - 【請求項８】酵素を適当な基体上にスクリーン印刷した
特許請求の範囲第６または７項記載のセンサ電極。 - 【請求項９】電極を適当な基体上にスクリーン印刷した
特許請求の範囲第６〜８項のいずれか一つの項に記載の
センサ電極。
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| GB8425777 | 1984-10-12 | ||
| GB848425777A GB8425777D0 (en) | 1984-10-12 | 1984-10-12 | Chemical sensor |
| GB8521627 | 1985-08-30 | ||
| GB08521627A GB2168157A (en) | 1984-10-12 | 1985-08-30 | Electrochemical sensor |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS61274250A JPS61274250A (ja) | 1986-12-04 |
| JPH0684952B2 true JPH0684952B2 (ja) | 1994-10-26 |
Family
ID=26288333
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60226016A Expired - Fee Related JPH0684952B2 (ja) | 1984-10-12 | 1985-10-12 | 分析方法およびセンサ電極 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4948727A (ja) |
| EP (1) | EP0184895B1 (ja) |
| JP (1) | JPH0684952B2 (ja) |
| AU (1) | AU581690B2 (ja) |
| CA (1) | CA1249025A (ja) |
| DE (1) | DE3563064D1 (ja) |
| NZ (1) | NZ213816A (ja) |
Families Citing this family (83)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB8618559D0 (en) * | 1986-07-30 | 1986-09-10 | Genetics Int Inc | Rhodococcus bacterium |
| GB8722278D0 (en) * | 1987-09-22 | 1987-10-28 | Genetics Int Inc | Determination of amylase |
| USRE36268E (en) * | 1988-03-15 | 1999-08-17 | Boehringer Mannheim Corporation | Method and apparatus for amperometric diagnostic analysis |
| GB8822738D0 (en) * | 1988-09-28 | 1988-11-02 | Medisense Inc | Theophylline assay |
| DE4003194A1 (de) * | 1990-02-03 | 1991-08-08 | Boehringer Mannheim Gmbh | Verfahren und sensorelektrodensystem zur elektrochemischen bestimmung eines analyts oder einer oxidoreduktase sowie verwendung hierfuer geeigneter verbindungen |
| JPH06104230B2 (ja) * | 1992-06-01 | 1994-12-21 | 正和 黒田 | 生体触媒固定化電極及び同電極を用いた水処理方法 |
| US6015683A (en) * | 1992-07-15 | 2000-01-18 | Clinical Diagnostic Systems, Inc. | Dry analytical element for acetaminophen assay |
| GB9215972D0 (en) * | 1992-07-28 | 1992-09-09 | Univ Manchester | Improved analytical method |
| GB9309797D0 (en) * | 1993-05-12 | 1993-06-23 | Medisense Inc | Electrochemical sensors |
| GB9416002D0 (en) * | 1994-08-08 | 1994-09-28 | Univ Cranfield | Fluid transport device |
| US6036924A (en) | 1997-12-04 | 2000-03-14 | Hewlett-Packard Company | Cassette of lancet cartridges for sampling blood |
| US6391005B1 (en) | 1998-03-30 | 2002-05-21 | Agilent Technologies, Inc. | Apparatus and method for penetration with shaft having a sensor for sensing penetration depth |
| US6582583B1 (en) | 1998-11-30 | 2003-06-24 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Amperometric biomimetic enzyme sensors based on modified cyclodextrin as electrocatalysts |
| US6541216B1 (en) | 1999-12-22 | 2003-04-01 | Roche Diagnostics Corporation | Amperometric biosensor test strip |
| US8641644B2 (en) | 2000-11-21 | 2014-02-04 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Blood testing apparatus having a rotatable cartridge with multiple lancing elements and testing means |
| US6576102B1 (en) | 2001-03-23 | 2003-06-10 | Virotek, L.L.C. | Electrochemical sensor and method thereof |
| US6572745B2 (en) | 2001-03-23 | 2003-06-03 | Virotek, L.L.C. | Electrochemical sensor and method thereof |
| US9226699B2 (en) | 2002-04-19 | 2016-01-05 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Body fluid sampling module with a continuous compression tissue interface surface |
| DE60238119D1 (de) | 2001-06-12 | 2010-12-09 | Pelikan Technologies Inc | Elektrisches betätigungselement für eine lanzette |
| CA2448681C (en) | 2001-06-12 | 2014-09-09 | Pelikan Technologies, Inc. | Integrated blood sampling analysis system with multi-use sampling module |
| US9795747B2 (en) | 2010-06-02 | 2017-10-24 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Methods and apparatus for lancet actuation |
| US7025774B2 (en) | 2001-06-12 | 2006-04-11 | Pelikan Technologies, Inc. | Tissue penetration device |
| US8337419B2 (en) | 2002-04-19 | 2012-12-25 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Tissue penetration device |
| ATE497731T1 (de) | 2001-06-12 | 2011-02-15 | Pelikan Technologies Inc | Gerät zur erhöhung der erfolgsrate im hinblick auf die durch einen fingerstich erhaltene blutausbeute |
| US7316700B2 (en) | 2001-06-12 | 2008-01-08 | Pelikan Technologies, Inc. | Self optimizing lancing device with adaptation means to temporal variations in cutaneous properties |
| US7981056B2 (en) | 2002-04-19 | 2011-07-19 | Pelikan Technologies, Inc. | Methods and apparatus for lancet actuation |
| JP4272051B2 (ja) | 2001-06-12 | 2009-06-03 | ペリカン テクノロジーズ インコーポレイテッド | 血液試料採取装置及び方法 |
| EP1404235A4 (en) | 2001-06-12 | 2008-08-20 | Pelikan Technologies Inc | METHOD AND DEVICE FOR A LANZETTING DEVICE INTEGRATED ON A BLOOD CARTRIDGE CARTRIDGE |
| US7344894B2 (en) | 2001-10-16 | 2008-03-18 | Agilent Technologies, Inc. | Thermal regulation of fluidic samples within a diagnostic cartridge |
| US8372016B2 (en) | 2002-04-19 | 2013-02-12 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing |
| US8702624B2 (en) | 2006-09-29 | 2014-04-22 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Analyte measurement device with a single shot actuator |
| US7226461B2 (en) | 2002-04-19 | 2007-06-05 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for a multi-use body fluid sampling device with sterility barrier release |
| US7674232B2 (en) | 2002-04-19 | 2010-03-09 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US8360992B2 (en) | 2002-04-19 | 2013-01-29 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7976476B2 (en) | 2002-04-19 | 2011-07-12 | Pelikan Technologies, Inc. | Device and method for variable speed lancet |
| US7524293B2 (en) | 2002-04-19 | 2009-04-28 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7175642B2 (en) | 2002-04-19 | 2007-02-13 | Pelikan Technologies, Inc. | Methods and apparatus for lancet actuation |
| US7331931B2 (en) | 2002-04-19 | 2008-02-19 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US8267870B2 (en) | 2002-04-19 | 2012-09-18 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Method and apparatus for body fluid sampling with hybrid actuation |
| US7717863B2 (en) | 2002-04-19 | 2010-05-18 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7909778B2 (en) | 2002-04-19 | 2011-03-22 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7491178B2 (en) | 2002-04-19 | 2009-02-17 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7563232B2 (en) | 2002-04-19 | 2009-07-21 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7485128B2 (en) | 2002-04-19 | 2009-02-03 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7232451B2 (en) | 2002-04-19 | 2007-06-19 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7582099B2 (en) | 2002-04-19 | 2009-09-01 | Pelikan Technologies, Inc | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7648468B2 (en) | 2002-04-19 | 2010-01-19 | Pelikon Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US8221334B2 (en) | 2002-04-19 | 2012-07-17 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Method and apparatus for penetrating tissue |
| EP1501402A4 (en) | 2002-04-19 | 2008-07-02 | Pelikan Technologies Inc | DEVICE AND METHOD FOR USING A VARIABLE SPEED LANCET |
| US7374544B2 (en) | 2002-04-19 | 2008-05-20 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7141058B2 (en) | 2002-04-19 | 2006-11-28 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for a body fluid sampling device using illumination |
| US9314194B2 (en) | 2002-04-19 | 2016-04-19 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Tissue penetration device |
| US7297122B2 (en) | 2002-04-19 | 2007-11-20 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7901362B2 (en) | 2002-04-19 | 2011-03-08 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7892183B2 (en) | 2002-04-19 | 2011-02-22 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing |
| US8784335B2 (en) | 2002-04-19 | 2014-07-22 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Body fluid sampling device with a capacitive sensor |
| US7244265B2 (en) | 2002-04-19 | 2007-07-17 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US8579831B2 (en) | 2002-04-19 | 2013-11-12 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7291117B2 (en) | 2002-04-19 | 2007-11-06 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7371247B2 (en) | 2002-04-19 | 2008-05-13 | Pelikan Technologies, Inc | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7410468B2 (en) | 2002-04-19 | 2008-08-12 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7547287B2 (en) | 2002-04-19 | 2009-06-16 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US7229458B2 (en) | 2002-04-19 | 2007-06-12 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US9795334B2 (en) | 2002-04-19 | 2017-10-24 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Method and apparatus for penetrating tissue |
| US8574895B2 (en) | 2002-12-30 | 2013-11-05 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Method and apparatus using optical techniques to measure analyte levels |
| DE602004028463D1 (de) | 2003-05-30 | 2010-09-16 | Pelikan Technologies Inc | Verfahren und vorrichtung zur injektion von flüssigkeit |
| US7850621B2 (en) | 2003-06-06 | 2010-12-14 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for body fluid sampling and analyte sensing |
| WO2006001797A1 (en) | 2004-06-14 | 2006-01-05 | Pelikan Technologies, Inc. | Low pain penetrating |
| US7604592B2 (en) | 2003-06-13 | 2009-10-20 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for a point of care device |
| EP1671096A4 (en) | 2003-09-29 | 2009-09-16 | Pelikan Technologies Inc | METHOD AND APPARATUS FOR PROVIDING IMPROVED SAMPLE CAPTURING DEVICE |
| WO2005037095A1 (en) | 2003-10-14 | 2005-04-28 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for a variable user interface |
| US20050121826A1 (en) * | 2003-12-03 | 2005-06-09 | Kiamars Hajizadeh | Multi-sensor device for motorized meter and methods thereof |
| EP1706026B1 (en) | 2003-12-31 | 2017-03-01 | Sanofi-Aventis Deutschland GmbH | Method and apparatus for improving fluidic flow and sample capture |
| US7822454B1 (en) | 2005-01-03 | 2010-10-26 | Pelikan Technologies, Inc. | Fluid sampling device with improved analyte detecting member configuration |
| US8828203B2 (en) | 2004-05-20 | 2014-09-09 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Printable hydrogels for biosensors |
| US9775553B2 (en) | 2004-06-03 | 2017-10-03 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Method and apparatus for a fluid sampling device |
| WO2005120365A1 (en) | 2004-06-03 | 2005-12-22 | Pelikan Technologies, Inc. | Method and apparatus for a fluid sampling device |
| US8652831B2 (en) | 2004-12-30 | 2014-02-18 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Method and apparatus for analyte measurement test time |
| CN100373157C (zh) * | 2005-04-21 | 2008-03-05 | 复旦大学 | 一种基于抗体抗原法检测肝纤维化的微型传感器 |
| EP2265324B1 (en) | 2008-04-11 | 2015-01-28 | Sanofi-Aventis Deutschland GmbH | Integrated analyte measurement system |
| US9375169B2 (en) | 2009-01-30 | 2016-06-28 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Cam drive for managing disposable penetrating member actions with a single motor and motor and control system |
| US8965476B2 (en) | 2010-04-16 | 2015-02-24 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | Tissue penetration device |
| US20190178832A1 (en) * | 2017-12-07 | 2019-06-13 | Pinnacle Bio, LLC | Portable microbial load detection |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3506544A (en) * | 1964-10-09 | 1970-04-14 | Magna Corp | Method of determining microbial populations,enzyme activities,and substrate concentrations by electrochemical analysis |
| US4401122A (en) * | 1979-08-02 | 1983-08-30 | Children's Hospital Medical Center | Cutaneous methods of measuring body substances |
| US4404066A (en) * | 1980-08-25 | 1983-09-13 | The Yellow Springs Instrument Company | Method for quantitatively determining a particular substrate catalyzed by a multisubstrate enzyme |
| EP0053470B1 (en) * | 1980-12-02 | 1988-01-07 | The Public Health Laboratory Service Board | Method for the estimation of n-acylated primary aromatic amines |
| EP0078636B2 (en) * | 1981-10-23 | 1997-04-02 | MediSense, Inc. | Sensor for components of a liquid mixture |
| US4528270A (en) * | 1982-11-02 | 1985-07-09 | Kabushiki Kaisya Advance Kaihatsu Kenkyujo | Electrochemical method for detection and classification of microbial cell |
| IL69644A (en) * | 1983-09-02 | 1986-11-30 | Univ Ramot | Enzyme electrodes and their preparation |
-
1985
- 1985-10-11 CA CA000492807A patent/CA1249025A/en not_active Expired
- 1985-10-11 AU AU48533/85A patent/AU581690B2/en not_active Ceased
- 1985-10-11 US US06/786,974 patent/US4948727A/en not_active Expired - Lifetime
- 1985-10-12 JP JP60226016A patent/JPH0684952B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1985-10-14 NZ NZ213816A patent/NZ213816A/xx unknown
- 1985-10-14 DE DE8585307357T patent/DE3563064D1/de not_active Expired
- 1985-10-14 EP EP85307357A patent/EP0184895B1/en not_active Expired
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU4853385A (en) | 1986-04-17 |
| NZ213816A (en) | 1988-07-28 |
| JPS61274250A (ja) | 1986-12-04 |
| EP0184895A1 (en) | 1986-06-18 |
| EP0184895B1 (en) | 1988-06-01 |
| CA1249025A (en) | 1989-01-17 |
| US4948727A (en) | 1990-08-14 |
| AU581690B2 (en) | 1989-03-02 |
| DE3563064D1 (en) | 1988-07-07 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH0684952B2 (ja) | 分析方法およびセンサ電極 | |
| Han et al. | A methylene blue-mediated enzyme electrode for the determination of trace mercury (II), mercury (I), methylmercury, and mercury–glutathione complex | |
| Zhang et al. | Development and analytical application of an uric acid biosensor using an uricase-immobilized eggshell membrane | |
| EP0078636B2 (en) | Sensor for components of a liquid mixture | |
| Hilditch et al. | Disposable electrochemical biosensors | |
| Tang et al. | p-Aminophenyl phosphate: An improved substrate for electrochemical enzyme immnoassay | |
| Kulys et al. | Printed amperometric sensor based on TCNQ and cholinesterase | |
| JP3387926B2 (ja) | 電位差式バイオセンサー及びその使用方法 | |
| Compagnone et al. | Glucose oxidase/hexokinase electrode for the determination of ATP | |
| JPS6026978B2 (ja) | ポーラログラフ分析法 | |
| Mascini et al. | Clinical uses of enzyme electrode probes | |
| Huang et al. | Amperometric determination of total cholesterol in serum, with use of immobilized cholesterol ester hydrolase and cholesterol oxidase | |
| Schubert et al. | Organic phase enzyme electrodes for the determination of hydrogen peroxide and phenol | |
| Palleschi et al. | Urea determination in human sera with an ammonium ion selective electrode made with solid inner electric contact and immobilised urease | |
| Osborne et al. | The micro water/1, 2-dichloroethane interface as a transducer for creatinine assay | |
| Kauffmann et al. | Enzyme electrode biosensors: theory and applications | |
| Kihara et al. | Determination of creatinine with a sensor based on immobilized glutamate dehydrogenase and creatinine deiminase | |
| Nagy et al. | Development and study of an amperometric biosensor for the in vitro measurement of low concentration of putrescine in blood | |
| Anik et al. | Usage of bismuth film electrode as biosensor transducer for alkaline phosphatase assay | |
| Messina et al. | Continuous-flow/stopped-flow system using an immunobiosensor for quantification of human serum IgG antibodies to Helicobacter pylori | |
| RU2049991C1 (ru) | Способ определения метаболитов в биологических жидкостях, активный элемент для его осуществления | |
| Kulys et al. | Urease sensors based on differential antimony electrodes | |
| Nagy et al. | Bioelectroanalytical sensors and analytical problems in their application | |
| JP3468312B2 (ja) | アルカリホスファターゼの検出方法 | |
| Elving | Coupling organic and biological reactions with electrochemical measurements for analytical purposes |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |