JPH0662896A - スペルミジン／スペルミンｎ１−アセチルトランスフェラーゼの、予後インジケータ及び／又は腫瘍応答マーカーとしての使用方法 - Google Patents
スペルミジン／スペルミンｎ１−アセチルトランスフェラーゼの、予後インジケータ及び／又は腫瘍応答マーカーとしての使用方法Info
- Publication number
- JPH0662896A JPH0662896A JP5124961A JP12496193A JPH0662896A JP H0662896 A JPH0662896 A JP H0662896A JP 5124961 A JP5124961 A JP 5124961A JP 12496193 A JP12496193 A JP 12496193A JP H0662896 A JPH0662896 A JP H0662896A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- spermine
- spermidine
- acetyltransferase
- assay
- induction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/13—Amines
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
- G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
- G01N33/5011—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing antineoplastic activity
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/81—Packaged device or kit
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
(57)【要約】 （修正有）
【目的】スペルミジン／スペルミンＮ１−アセチルトラ
ンスフェラーゼ（ＳＳＡＴ）の生体内での誘導に関連す
る決定因子の測定方法の提供。 【構成】上記方法には、ＳＳＡＴ酵素活性、ＳＳＡＴ酵
素プロテイン及びＳＳＡＴ ｍ−ＲＮＡ転写体を含む、
１又はそれ以上のＳＳＡＴ特異的な決定因子の測定が含
まれる。もしくは、このＳＳＡＴ誘導に関連する他の決
定因子を測定しても良い。このような決定因子には、Ｓ
ＳＡＴ補因子アセチル補酵素Ａ、及びＳＳＡＴ生成物Ｎ
１−アセチルスペルミジン及びＮ１−アセチルスペルミ
ンが含まれる。 【効果】これらの決定因子の測定は、ビス−エチルスペ
ルミン同族体のようなＳＳＡＴ活性を誘導するポリアミ
ン同族体を含む抗癌剤の臨床効果性を評価するための、
予後のインジシア(indicia)及び腫瘍応答マーカーとし
て有用である。
ンスフェラーゼ（ＳＳＡＴ）の生体内での誘導に関連す
る決定因子の測定方法の提供。 【構成】上記方法には、ＳＳＡＴ酵素活性、ＳＳＡＴ酵
素プロテイン及びＳＳＡＴ ｍ−ＲＮＡ転写体を含む、
１又はそれ以上のＳＳＡＴ特異的な決定因子の測定が含
まれる。もしくは、このＳＳＡＴ誘導に関連する他の決
定因子を測定しても良い。このような決定因子には、Ｓ
ＳＡＴ補因子アセチル補酵素Ａ、及びＳＳＡＴ生成物Ｎ
１−アセチルスペルミジン及びＮ１−アセチルスペルミ
ンが含まれる。 【効果】これらの決定因子の測定は、ビス−エチルスペ
ルミン同族体のようなＳＳＡＴ活性を誘導するポリアミ
ン同族体を含む抗癌剤の臨床効果性を評価するための、
予後のインジシア(indicia)及び腫瘍応答マーカーとし
て有用である。
Description
【０００１】
【発明の分野】本発明は、一般的には、癌の化学療法薬
の特定の類によって影響を受ける酵素レベルの検出に関
するものであり、更に特には、酵素 スペルミジン／ス
ペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼの、予後イ
ンジケータ及び／又は腫瘍応答マーカーとしての使用方
法に関し、この酵素の誘導を引き起こす抗癌剤の類を臨
床において使用することが容易になる。
の特定の類によって影響を受ける酵素レベルの検出に関
するものであり、更に特には、酵素 スペルミジン／ス
ペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼの、予後イ
ンジケータ及び／又は腫瘍応答マーカーとしての使用方
法に関し、この酵素の誘導を引き起こす抗癌剤の類を臨
床において使用することが容易になる。
【０００２】
【背景及び関連する技術の説明】生物学的なポリアミン
類、プトレッシン、スペルミジン及びスペルミンは、全
ての哺乳動物の細胞タイプの天然成分であり、細胞成長
にとって必須であることが知られている。細胞成長を補
助する際の、これらの正確な役割は明らかになっていな
いが、核酸類との相互作用が含まれると考えられてい
る。これらの物質および、これらの鍵となる生合成酵素
である、オルニチン及びＳ−アデノシルメチオニンカル
ボキシル基分解酵素（それぞれＯＤＣ及びＳＡＭＤＣ）
は、悪性組織で増加する。そのため、ポリアミン生合成
が、実験的な抗癌戦略の発展において目標とされてき
た。
類、プトレッシン、スペルミジン及びスペルミンは、全
ての哺乳動物の細胞タイプの天然成分であり、細胞成長
にとって必須であることが知られている。細胞成長を補
助する際の、これらの正確な役割は明らかになっていな
いが、核酸類との相互作用が含まれると考えられてい
る。これらの物質および、これらの鍵となる生合成酵素
である、オルニチン及びＳ−アデノシルメチオニンカル
ボキシル基分解酵素（それぞれＯＤＣ及びＳＡＭＤＣ）
は、悪性組織で増加する。そのため、ポリアミン生合成
が、実験的な抗癌戦略の発展において目標とされてき
た。
【０００３】ポリアミン生合成酵素の抑制剤は、腫瘍細
胞のポリアミン含有量を低下させるので、抗癌剤として
の使用が評価されている。しかし、これまで、これらの
抑制剤は、臨床的に有効な抗癌剤になっていない。これ
らを使用する際に直面する問題の一つは、ポリアミンプ
ール（供給源）が減少するとすぐに、鍵となるポリアミ
ン生合成酵素ＯＤＣ及びＳＡＭＤＣが、活性の点で代償
増加を受けることである（ポータ及びバーゲロン、1988
年、Advances in Enzyme Regulation において、第57〜
79頁、パーガモン出版）。従って、酵素抑制剤の好まし
い効果（即ち、ポリアミンプール逓減(depletion) によ
って細胞成長が抑制されること）は、これらの酵素の応
答の一方又は両方によって妨げられる。
胞のポリアミン含有量を低下させるので、抗癌剤として
の使用が評価されている。しかし、これまで、これらの
抑制剤は、臨床的に有効な抗癌剤になっていない。これ
らを使用する際に直面する問題の一つは、ポリアミンプ
ール（供給源）が減少するとすぐに、鍵となるポリアミ
ン生合成酵素ＯＤＣ及びＳＡＭＤＣが、活性の点で代償
増加を受けることである（ポータ及びバーゲロン、1988
年、Advances in Enzyme Regulation において、第57〜
79頁、パーガモン出版）。従って、酵素抑制剤の好まし
い効果（即ち、ポリアミンプール逓減(depletion) によ
って細胞成長が抑制されること）は、これらの酵素の応
答の一方又は両方によって妨げられる。
【０００４】ポリアミンプールにおいて抑制ＯＤＣ及び
ＳＡＭＤＣ活性が増加するという観察に基づいて、また
別の方法が提案されてきた（ポータ及びバーゲロン、19
88年、Advances in Enzyme Regulation において、第57
〜79頁、パーガモン出版）。これは、ダウンレギュレー
ションするＯＤＣ及びＳＡＭＤＣにおける天然ポリアミ
ン類と同様に挙動するが、細胞成長に必要な機能を果た
す能力を欠いているポリアミン同族体を同定することを
目的としている。Ｎ1 , Ｎ12−ビス（エチル）スペルミ
ン（ＢＥＳＰＭ）、スペルミンのＮ−ビス（エチル）同
族体は、このような戦略のモデル化合物として役立つ。
スペルミン及びＢＥＳＰＭの化学構造の比較が図１に示
されている。ＢＥＳＰＭは、生体外での研究によって発
見され、ＯＤＣ及びＳＡＭＤＣを素早く抑制し、天然の
ポリアミンプールを減らし、１〜１０ｕＭにまで細胞成
長を抑制する（ポータ等、1987年、Cancer Res. 、47
巻、第2821〜2825頁）。更に、ＢＥＳＰＭは、ポリアミ
ン逓減を抑制し（バイヤーズ及びペッグ、1990年、J. P
hysiol. 142 巻、第 460〜 467頁、及びクラマー等、Pr
oc. Am. Assoc. Can. Res.、32巻、第 404頁、1991
年）、その結果、腫瘍細胞の能力を最少にさせ、周囲か
らこれらを吸収することによりポリアミン要求量を満足
させる。有効な化学療法剤としてのポリアミン同族体に
対するポテンシャルは、生体外での、いくつかの黒色腫
細胞系に対する強力な腫瘍活性によって証明されており
（ポータ等、1991年、Cancer Research 、51巻、第3715
〜3720頁；シャッペル等、1992年、Anticancer Res. 、
印刷中）、又、無胸腺症マウスにおける異種移植とし
て、ＭＡＬＭＥ−３ヒト黒色腫瘍成長に対する強力な腫
瘍活性が、ビス−エチルスペルミン同族体により示され
ている（バーナッキ等、1992年５月、Can. Res. 、印刷
中）。
ＳＡＭＤＣ活性が増加するという観察に基づいて、また
別の方法が提案されてきた（ポータ及びバーゲロン、19
88年、Advances in Enzyme Regulation において、第57
〜79頁、パーガモン出版）。これは、ダウンレギュレー
ションするＯＤＣ及びＳＡＭＤＣにおける天然ポリアミ
ン類と同様に挙動するが、細胞成長に必要な機能を果た
す能力を欠いているポリアミン同族体を同定することを
目的としている。Ｎ1 , Ｎ12−ビス（エチル）スペルミ
ン（ＢＥＳＰＭ）、スペルミンのＮ−ビス（エチル）同
族体は、このような戦略のモデル化合物として役立つ。
スペルミン及びＢＥＳＰＭの化学構造の比較が図１に示
されている。ＢＥＳＰＭは、生体外での研究によって発
見され、ＯＤＣ及びＳＡＭＤＣを素早く抑制し、天然の
ポリアミンプールを減らし、１〜１０ｕＭにまで細胞成
長を抑制する（ポータ等、1987年、Cancer Res. 、47
巻、第2821〜2825頁）。更に、ＢＥＳＰＭは、ポリアミ
ン逓減を抑制し（バイヤーズ及びペッグ、1990年、J. P
hysiol. 142 巻、第 460〜 467頁、及びクラマー等、Pr
oc. Am. Assoc. Can. Res.、32巻、第 404頁、1991
年）、その結果、腫瘍細胞の能力を最少にさせ、周囲か
らこれらを吸収することによりポリアミン要求量を満足
させる。有効な化学療法剤としてのポリアミン同族体に
対するポテンシャルは、生体外での、いくつかの黒色腫
細胞系に対する強力な腫瘍活性によって証明されており
（ポータ等、1991年、Cancer Research 、51巻、第3715
〜3720頁；シャッペル等、1992年、Anticancer Res. 、
印刷中）、又、無胸腺症マウスにおける異種移植とし
て、ＭＡＬＭＥ−３ヒト黒色腫瘍成長に対する強力な腫
瘍活性が、ビス−エチルスペルミン同族体により示され
ている（バーナッキ等、1992年５月、Can. Res. 、印刷
中）。
【０００５】他の生体外での研究では、ＢＥＳＰＭが、
ある種の人間の癌細胞系において、ポリアミン新陳代謝
酵素スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトランス
フェラーゼ（ＳＳＡＴ）の深く大きな誘導をも引き起こ
すことが示されている。以下は、関連する従来技術のリ
ストであり、それぞれについての簡単な説明が一緒に記
載されている。
ある種の人間の癌細胞系において、ポリアミン新陳代謝
酵素スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトランス
フェラーゼ（ＳＳＡＴ）の深く大きな誘導をも引き起こ
すことが示されている。以下は、関連する従来技術のリ
ストであり、それぞれについての簡単な説明が一緒に記
載されている。
【０００６】リビー等（Arch. Biochem. Biophys. 、28
4 巻、第 238〜 244頁、1991年）及びカセロ等（Bioche
m. J. 、270 巻、第 615〜 620頁）は、ＢＥＳＰＭ治療
された細胞系からのヒトＳＳＡＴプロテインの単離及び
部分的な特徴を記している。カセロ等は、ＢＥＳＰＭに
曝されるためのＮＣＩ Ｈ１５７ヒト大細胞肺癌細胞系
の細胞毒応答が、生体外でのＳＳＡＴの高い誘導と関連
があったことを報告している。
4 巻、第 238〜 244頁、1991年）及びカセロ等（Bioche
m. J. 、270 巻、第 615〜 620頁）は、ＢＥＳＰＭ治療
された細胞系からのヒトＳＳＡＴプロテインの単離及び
部分的な特徴を記している。カセロ等は、ＢＥＳＰＭに
曝されるためのＮＣＩ Ｈ１５７ヒト大細胞肺癌細胞系
の細胞毒応答が、生体外でのＳＳＡＴの高い誘導と関連
があったことを報告している。
【０００７】ポータ等（1991年、Cancer Res. 、51巻、
第3715〜3720頁）は、生体外でのＢＥＳＰＭを用いたヒ
ト黒色腫細胞系（ＭＡＬＭＥ−３）の治療後の、ＳＳＡ
Ｔレベルの極端な誘導、及び、他のビス−エチルスペル
ミン同族体を用いた誘導の程度が低くなることを記して
いる。２つの黒色腫細胞系の間で、ＳＳＡＴ活性の高い
誘導が、ビス−エチルスペルミン同族体に対する生体外
での成長感度と相互に関連することが示唆された。
第3715〜3720頁）は、生体外でのＢＥＳＰＭを用いたヒ
ト黒色腫細胞系（ＭＡＬＭＥ−３）の治療後の、ＳＳＡ
Ｔレベルの極端な誘導、及び、他のビス−エチルスペル
ミン同族体を用いた誘導の程度が低くなることを記して
いる。２つの黒色腫細胞系の間で、ＳＳＡＴ活性の高い
誘導が、ビス−エチルスペルミン同族体に対する生体外
での成長感度と相互に関連することが示唆された。
【０００８】上記の参考文献のそれぞれには、ビス−エ
チルスペルミン同族体を用いた生体外での、ある種のヒ
ト腫瘍細胞系の治療後の、ＳＳＡＴのレベルにおける高
い誘導が開示されている。しかしながら、動物における
ＳＳＡＴレベルと腫瘍成長応答との間の相互関連を確か
める必要がある。特に、上記の参考文献のいずれも、腫
瘍を持った動物、即ち、生体内で治療後に起こるＳＳＡ
Ｔレベルの誘導を示すものではなく、これらの参考文献
には、生体内で誘導されたＳＳＡＴレベルを伴ったビス
−エチルスペルミン同族体に対する腫瘍成長感度の相互
関係も開示されていない。第一に、従来技術からは、ポ
リアミン同族体が生体内での安定性、吸収及び抗増殖能
の関連した問題を受けやすいのかどうか知られていな
い。
チルスペルミン同族体を用いた生体外での、ある種のヒ
ト腫瘍細胞系の治療後の、ＳＳＡＴのレベルにおける高
い誘導が開示されている。しかしながら、動物における
ＳＳＡＴレベルと腫瘍成長応答との間の相互関連を確か
める必要がある。特に、上記の参考文献のいずれも、腫
瘍を持った動物、即ち、生体内で治療後に起こるＳＳＡ
Ｔレベルの誘導を示すものではなく、これらの参考文献
には、生体内で誘導されたＳＳＡＴレベルを伴ったビス
−エチルスペルミン同族体に対する腫瘍成長感度の相互
関係も開示されていない。第一に、従来技術からは、ポ
リアミン同族体が生体内での安定性、吸収及び抗増殖能
の関連した問題を受けやすいのかどうか知られていな
い。
【０００９】第二に、同族体自身（上記参照）、及びＳ
ＳＡＴ特異性ｍ−ＲＮＡの細胞内での安定性および酵素
自身の安定性に関する問題が不確かであるために、ＳＳ
ＡＴの高い誘導が生体内で起こるのかどうか知られてい
ない。又、この同族体は、生体外系において多くの細胞
状態（即ち、ＯＤＣ／ＳＡＭＤＣの抑制、ポリアミンプ
ールの逓減、ミトコンドリアＤＮＡの逓減、及びおそら
くは他のＤＮＡ−関連効果）を引き起こすので、生体内
でのＳＳＡＴ誘導が、起こった事柄の中でも目立ったも
のであることと、この誘導が、抗腫瘍活性と因果関係が
あるか、あるいは抗腫瘍活性を表すものであること、が
示されたことは重要である。なぜならば、生体外で起こ
ることが、必ずしも生体内において起こるとは限らない
からである。例えば、ＯＤＣ及びＳＡＭＤＣの抑制は、
ビス−エチルスペルミン同族体の生体外での効果とし
て、充分に認識されている。しかしながら、最近の研究
（ポータ等、先述のもの）では、このような効果が生体
内においては起こらないことが示されている。
ＳＡＴ特異性ｍ−ＲＮＡの細胞内での安定性および酵素
自身の安定性に関する問題が不確かであるために、ＳＳ
ＡＴの高い誘導が生体内で起こるのかどうか知られてい
ない。又、この同族体は、生体外系において多くの細胞
状態（即ち、ＯＤＣ／ＳＡＭＤＣの抑制、ポリアミンプ
ールの逓減、ミトコンドリアＤＮＡの逓減、及びおそら
くは他のＤＮＡ−関連効果）を引き起こすので、生体内
でのＳＳＡＴ誘導が、起こった事柄の中でも目立ったも
のであることと、この誘導が、抗腫瘍活性と因果関係が
あるか、あるいは抗腫瘍活性を表すものであること、が
示されたことは重要である。なぜならば、生体外で起こ
ることが、必ずしも生体内において起こるとは限らない
からである。例えば、ＯＤＣ及びＳＡＭＤＣの抑制は、
ビス−エチルスペルミン同族体の生体外での効果とし
て、充分に認識されている。しかしながら、最近の研究
（ポータ等、先述のもの）では、このような効果が生体
内においては起こらないことが示されている。
【００１０】更に、生体内でのＳＳＡＴ誘導が、種々の
通常の組織に比較して、腫瘍組織において選択的に起こ
ることが示されなければならない。腫瘍マーカーとして
の、又、薬の作用を決定する因子としての、その強力な
有効性は、腫瘍細胞においての選択的な酵素レベルの誘
導に著しく依存する。従来技術には、ある種の腫瘍細胞
系における生体外での酵素の誘導が開示されているが、
関連する通常の組織における生体内での相対的な酵素レ
ベルについては開示されていない。
通常の組織に比較して、腫瘍組織において選択的に起こ
ることが示されなければならない。腫瘍マーカーとして
の、又、薬の作用を決定する因子としての、その強力な
有効性は、腫瘍細胞においての選択的な酵素レベルの誘
導に著しく依存する。従来技術には、ある種の腫瘍細胞
系における生体外での酵素の誘導が開示されているが、
関連する通常の組織における生体内での相対的な酵素レ
ベルについては開示されていない。
【００１１】従って、黒色腫のような、ある種の癌に対
する強力な抗癌活性を有するビス−エチルスペルミン同
族体を含む、ポリアミン同族体抗癌剤の臨床効果性をモ
ニターする方法を開発することが必要である。更に、処
置の治療学的な有効性を決定し、しかもビス−エチルス
ペルミン同族体のような同族体を用いた、個々の腫瘍の
治療に対する感度を予測するための方法が望まれる。こ
のような方法は、ビス−エチルスペルミン同族体のよう
なＳＳＡＴの誘導を引き起こす同族体に敏感な腫瘍を持
った個体の、同定及び化学療法的治療を非常に容易なも
のにする。
する強力な抗癌活性を有するビス−エチルスペルミン同
族体を含む、ポリアミン同族体抗癌剤の臨床効果性をモ
ニターする方法を開発することが必要である。更に、処
置の治療学的な有効性を決定し、しかもビス−エチルス
ペルミン同族体のような同族体を用いた、個々の腫瘍の
治療に対する感度を予測するための方法が望まれる。こ
のような方法は、ビス−エチルスペルミン同族体のよう
なＳＳＡＴの誘導を引き起こす同族体に敏感な腫瘍を持
った個体の、同定及び化学療法的治療を非常に容易なも
のにする。
【００１２】
【発明の要約】本発明の主な目的は、ビス−エチルスペ
ルミン同族体のようなＳＳＡＴ誘導を引き起こすポリア
ミン同族体を用いた治療における、個々の腫瘍の応答性
を予測するための方法を提供することである。
ルミン同族体のようなＳＳＡＴ誘導を引き起こすポリア
ミン同族体を用いた治療における、個々の腫瘍の応答性
を予測するための方法を提供することである。
【００１３】本発明の別の目的は、この種のポリアミン
同族体を用いて、この種の同族体に敏感な腫瘍を持った
個体の処置の治療学的な有効性をモニターするための方
法を提供することである。
同族体を用いて、この種の同族体に敏感な腫瘍を持った
個体の処置の治療学的な有効性をモニターするための方
法を提供することである。
【００１４】本発明の更に別な目的は、ＳＳＡＴの誘導
を引き起こすポリアミン同族体を用いた化学療法を行う
個体に対する、治療養生法および治療スケジュールを決
定するための方法を提供することである。
を引き起こすポリアミン同族体を用いた化学療法を行う
個体に対する、治療養生法および治療スケジュールを決
定するための方法を提供することである。
【００１５】要するに、上記の目的は、前もってポリア
ミン同族体を用いた治療に曝される個々の腫瘍細胞にお
いて、ＳＳＡＴのレベルが測定されるという方法を提供
することにより達成される。ＳＳＡＴの誘導は、ポリア
ミン同族体に対する感度、ポリアミン同族体の治療有効
性のインジカ(indica)として用いることができ、又、ポ
リアミン同族体の臨床上の効能量を決定するのに用いる
ことができる。
ミン同族体を用いた治療に曝される個々の腫瘍細胞にお
いて、ＳＳＡＴのレベルが測定されるという方法を提供
することにより達成される。ＳＳＡＴの誘導は、ポリア
ミン同族体に対する感度、ポリアミン同族体の治療有効
性のインジカ(indica)として用いることができ、又、ポ
リアミン同族体の臨床上の効能量を決定するのに用いる
ことができる。
【００１６】本発明のより完全な評価、及びそれらにつ
いての多くの付随する利点、及びその特徴の更なる理解
は、付随する図面に関連して、詳細な説明を参照するこ
とにより理解することができる。
いての多くの付随する利点、及びその特徴の更なる理解
は、付随する図面に関連して、詳細な説明を参照するこ
とにより理解することができる。
【００１７】
【詳細な説明】スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチ
ルトランスフェラーゼの誘導を、予後インジケータ又は
腫瘍応答マーカーとして使用する方法は、ポリアミン同
族体を用いた腫瘍の治療に関係があり、腫瘍生検におけ
るＳＳＡＴ活性の直接測定を含み、又、組織や血清に見
出されるＳＳＡＴの代謝生成物の検出、組織内の増幅さ
れたＳＳＡＴ特異性メッセンジャーＲＮＡ（ｍ−ＲＮ
Ａ）転写体の検出、ＳＳＡＴ活性の誘導により影響され
る酵素のレベルにおける相当する変化の測定、及び、酵
素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）のような、組織内
での酵素プロテイン自身の増加量の検出や定量化など
の、ＳＳＡＴレベルに関連した他の決定因子の測定をも
含む。
ルトランスフェラーゼの誘導を、予後インジケータ又は
腫瘍応答マーカーとして使用する方法は、ポリアミン同
族体を用いた腫瘍の治療に関係があり、腫瘍生検におけ
るＳＳＡＴ活性の直接測定を含み、又、組織や血清に見
出されるＳＳＡＴの代謝生成物の検出、組織内の増幅さ
れたＳＳＡＴ特異性メッセンジャーＲＮＡ（ｍ−ＲＮ
Ａ）転写体の検出、ＳＳＡＴ活性の誘導により影響され
る酵素のレベルにおける相当する変化の測定、及び、酵
素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）のような、組織内
での酵素プロテイン自身の増加量の検出や定量化など
の、ＳＳＡＴレベルに関連した他の決定因子の測定をも
含む。
【００１８】適切な生体内での研究を行うために使用さ
れるポリアミン同族体の代表的なパネルとして選ばれ
た、３つのビス−エチルスペルミン同族体には、Ｎ1 ,
Ｎ12−ビス（エチル）スペルミン（ＢＥＳＰＭ）、
Ｎ1 , Ｎ11−ビス（エチル）ノルスペルミン（ＢＥＮＳ
ＰＭ）及び、Ｎ1 , Ｎ14−ビス（エチル）ホモスペルミ
ン（ＢＥＨＳＰＭ）が含まれる。この３つは全て、同様
に、オルニチン及びＳ−アデノシルメチオニンカルボキ
シル基分解酵素レベルを抑制するが、生体外での異なっ
たＳＳＡＴレベルを誘導する（ポータ等、Cancer Resea
rch 、51巻、第3715〜3720頁、1991年）。ＢＥＳＰＭ
と、この２つの関連化合物、ＢＥＨＳＰＭとＢＥＮＳＰ
Ｍとの間の化学的関係が、図２に示されている。
れるポリアミン同族体の代表的なパネルとして選ばれ
た、３つのビス−エチルスペルミン同族体には、Ｎ1 ,
Ｎ12−ビス（エチル）スペルミン（ＢＥＳＰＭ）、
Ｎ1 , Ｎ11−ビス（エチル）ノルスペルミン（ＢＥＮＳ
ＰＭ）及び、Ｎ1 , Ｎ14−ビス（エチル）ホモスペルミ
ン（ＢＥＨＳＰＭ）が含まれる。この３つは全て、同様
に、オルニチン及びＳ−アデノシルメチオニンカルボキ
シル基分解酵素レベルを抑制するが、生体外での異なっ
たＳＳＡＴレベルを誘導する（ポータ等、Cancer Resea
rch 、51巻、第3715〜3720頁、1991年）。ＢＥＳＰＭ
と、この２つの関連化合物、ＢＥＨＳＰＭとＢＥＮＳＰ
Ｍとの間の化学的関係が、図２に示されている。
【００１９】
【ＳＳＡＴ誘導を伴ったＮ, Ｎ’−ビス
（エチル）スペルミン同族体の抗腫瘍活性の、生体内で
のＳＳＡＴ誘導及び生体内での相互関係】ＢＥＳＰＭ、
ＢＥＨＳＰＭ及びＢＥＮＳＰＭの、生体内での抗腫瘍活
性は、マウスにおけるＭＡＬＭＥ−３ヒト黒色腫異種移
植に対して比較された。培養されたＭＡＬＭＥ−３黒色
腫細胞は、最初に、雌のＨＳＤヌード無胸腺症マウスに
おいて数回継代された。得られた腫瘍の断片は、皮下套
管針移植を経てマウスの中に移植された。異なった治療
グループのマウスは、３つのビス−エチルスペルミン同
族体、ＢＥＳＰＭ、ＢＥＨＳＰＭ及びＢＥＮＳＰＭのう
ちの一つを用いて治療された。腫瘍成長抑制は、腫瘍の
体積を含むパラメータによってモニターされた。マウス
におけるＭＡＬＭＥ−３ヒト黒色腫異種移植に対して、
ＢＥＳＰＭは、治療を停止した後、更に３０日間、腫瘍
成長の抑制されることが明らかにされ、著しい抗腫瘍活
性を示した。これに対し、ＢＥＨＳＰＭは、ＢＥＳＰＭ
よりも効果が低く、治療を停止した後、１８日間、腫瘍
成長を抑制した。ＢＥＮＳＰＭは、３つのうち最も有効
なものであり、治療を停止した後、４０日間、腫瘍成長
を抑制した。これら３つの同族体についての抗腫瘍活性
は、生体外での同様の腫瘍細胞成長におけるＳＳＡＴ活
性を誘導するための能力と相互関係があった（表１）。
又、ＢＥＮＳＰＭを用いた再治療２週間後に、ＭＡＬＭ
Ｅ−３異種移植の約２０％が明らかに治癒したことは注
目されることであった。ここに示されている抗腫瘍活性
は、ＳＳＡＴ誘導に影響するポリアミン同族体、特にＢ
ＥＮＳＰＭの臨床試験を証明するのに充分に重要性のあ
るものである。
（エチル）スペルミン同族体の抗腫瘍活性の、生体内で
のＳＳＡＴ誘導及び生体内での相互関係】ＢＥＳＰＭ、
ＢＥＨＳＰＭ及びＢＥＮＳＰＭの、生体内での抗腫瘍活
性は、マウスにおけるＭＡＬＭＥ−３ヒト黒色腫異種移
植に対して比較された。培養されたＭＡＬＭＥ−３黒色
腫細胞は、最初に、雌のＨＳＤヌード無胸腺症マウスに
おいて数回継代された。得られた腫瘍の断片は、皮下套
管針移植を経てマウスの中に移植された。異なった治療
グループのマウスは、３つのビス−エチルスペルミン同
族体、ＢＥＳＰＭ、ＢＥＨＳＰＭ及びＢＥＮＳＰＭのう
ちの一つを用いて治療された。腫瘍成長抑制は、腫瘍の
体積を含むパラメータによってモニターされた。マウス
におけるＭＡＬＭＥ−３ヒト黒色腫異種移植に対して、
ＢＥＳＰＭは、治療を停止した後、更に３０日間、腫瘍
成長の抑制されることが明らかにされ、著しい抗腫瘍活
性を示した。これに対し、ＢＥＨＳＰＭは、ＢＥＳＰＭ
よりも効果が低く、治療を停止した後、１８日間、腫瘍
成長を抑制した。ＢＥＮＳＰＭは、３つのうち最も有効
なものであり、治療を停止した後、４０日間、腫瘍成長
を抑制した。これら３つの同族体についての抗腫瘍活性
は、生体外での同様の腫瘍細胞成長におけるＳＳＡＴ活
性を誘導するための能力と相互関係があった（表１）。
又、ＢＥＮＳＰＭを用いた再治療２週間後に、ＭＡＬＭ
Ｅ−３異種移植の約２０％が明らかに治癒したことは注
目されることであった。ここに示されている抗腫瘍活性
は、ＳＳＡＴ誘導に影響するポリアミン同族体、特にＢ
ＥＮＳＰＭの臨床試験を証明するのに充分に重要性のあ
るものである。
【００２０】ＭＡＬＭＥ−３ヒト黒色腫異種移植のＢＥ
ＮＳＰＭ治療を用いて、抗腫瘍活性と生体内でのＳＳＡ
Ｔ誘導との間の相互関係があるか否かを決定するため
に、実験が行われた。ＳＳＡＴ活性は、１ｍＭのジチオ
スレイトールを含有する、５ｍＭのＮ−２ ヒドロキシ
ピペラジン−Ｎ2 −エタン硫酸（ｐＨ７．２）による音
波処理によって得られた、治療されたマウスからの腫瘍
生検、及びコントロールマウスからの腫瘍生検の細胞抽
出物を用いて測定された。スピンコ４０ロータにおいて
３５０００ｒｐｍで１時間遠心分離して得られた細胞質
ゾル状抽出物は、ＳＳＡＴ活性の検定のための酵素源と
して使用された。この細胞質ゾル状抽出物は、１０ｕｍ
ｏｌのＨＥＰＥＳ緩衝液、ｐＨ７．８、０．１５ｎｍｏ
ｌのスペルミジン及び０．５ｎｍｏｌの〔１−14Ｃ〕ア
セチル補酵素Ａを用いて、最終的な体積が５０ｕｌで、
３７℃で５分間培養された。この反応は、低温にして、
０．５ＭのＮＨ2 ＯＨ・Ｃｌを２０ｕｌを添加し、沸騰
した水浴にて３分間加熱することによって停止された。
沈澱したプロテインを除去するために遠心分離を行った
後、反応物の５０ｕｌを、Ｐ−８１ホスホセルロースの
ディスク上にスポットし、放射能を計算した。又、プロ
テイン濃度は、酵素活性が、プロテインのミリグラムに
ついて１分間あたりに合成されたアセチルスペルミンの
ピコモルとして表されるようにして測定された。
ＮＳＰＭ治療を用いて、抗腫瘍活性と生体内でのＳＳＡ
Ｔ誘導との間の相互関係があるか否かを決定するため
に、実験が行われた。ＳＳＡＴ活性は、１ｍＭのジチオ
スレイトールを含有する、５ｍＭのＮ−２ ヒドロキシ
ピペラジン−Ｎ2 −エタン硫酸（ｐＨ７．２）による音
波処理によって得られた、治療されたマウスからの腫瘍
生検、及びコントロールマウスからの腫瘍生検の細胞抽
出物を用いて測定された。スピンコ４０ロータにおいて
３５０００ｒｐｍで１時間遠心分離して得られた細胞質
ゾル状抽出物は、ＳＳＡＴ活性の検定のための酵素源と
して使用された。この細胞質ゾル状抽出物は、１０ｕｍ
ｏｌのＨＥＰＥＳ緩衝液、ｐＨ７．８、０．１５ｎｍｏ
ｌのスペルミジン及び０．５ｎｍｏｌの〔１−14Ｃ〕ア
セチル補酵素Ａを用いて、最終的な体積が５０ｕｌで、
３７℃で５分間培養された。この反応は、低温にして、
０．５ＭのＮＨ2 ＯＨ・Ｃｌを２０ｕｌを添加し、沸騰
した水浴にて３分間加熱することによって停止された。
沈澱したプロテインを除去するために遠心分離を行った
後、反応物の５０ｕｌを、Ｐ−８１ホスホセルロースの
ディスク上にスポットし、放射能を計算した。又、プロ
テイン濃度は、酵素活性が、プロテインのミリグラムに
ついて１分間あたりに合成されたアセチルスペルミンの
ピコモルとして表されるようにして測定された。
【００２１】最終的にＢＥＮＳＰＭが注入されて１６時
間が経過した腫瘍におけるＳＳＡＴ活性は、コントロー
ル腫瘍における７５ｐｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇの活性に比
べ、約１３７００ｐｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇにまで高めら
れた（表２）。又、ＢＥＮＳＰＭを用いて治療されたマ
ウスにおける腎臓及び肝臓ＳＳＡＴ活性は、約１０ｐｍ
ｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇの基礎レベルから、それぞれ１２５
５及び３２０ｐｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇに増加されること
がわかった。ＢＥＮＳＰＭ治療された腫瘍は、この時点
ではほとんど全体的に逓減されるポリアミンプールを有
していた。治療の後２週間では、ＢＥＮＳＰＭ治療され
たマウスにおけるＭＡＬＭＥ−３ヒト黒色腫異種移植か
らの腫瘍は、腎臓及び肝臓に対してはそれぞれ２６０及
び７５ｐｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇであるのに比べて、３０
４０ｐｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇのＳＳＡＴレベルを含んで
いた。ＯＤＣ及びＳＡＭＤＣレベルが抑制されなかった
ことは注目すべきことであり、ポリアミン逓減が全体的
にＳＳＡＴ誘導によるものであることが示唆されてい
る。従って、後者は、成長抑制に対して直接、関与して
いると思われ、それゆえ、生体内での薬の作用の決定因
子であると言える。
間が経過した腫瘍におけるＳＳＡＴ活性は、コントロー
ル腫瘍における７５ｐｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇの活性に比
べ、約１３７００ｐｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇにまで高めら
れた（表２）。又、ＢＥＮＳＰＭを用いて治療されたマ
ウスにおける腎臓及び肝臓ＳＳＡＴ活性は、約１０ｐｍ
ｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇの基礎レベルから、それぞれ１２５
５及び３２０ｐｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇに増加されること
がわかった。ＢＥＮＳＰＭ治療された腫瘍は、この時点
ではほとんど全体的に逓減されるポリアミンプールを有
していた。治療の後２週間では、ＢＥＮＳＰＭ治療され
たマウスにおけるＭＡＬＭＥ−３ヒト黒色腫異種移植か
らの腫瘍は、腎臓及び肝臓に対してはそれぞれ２６０及
び７５ｐｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇであるのに比べて、３０
４０ｐｍｏｌ／ｍｉｎ／ｍｇのＳＳＡＴレベルを含んで
いた。ＯＤＣ及びＳＡＭＤＣレベルが抑制されなかった
ことは注目すべきことであり、ポリアミン逓減が全体的
にＳＳＡＴ誘導によるものであることが示唆されてい
る。従って、後者は、成長抑制に対して直接、関与して
いると思われ、それゆえ、生体内での薬の作用の決定因
子であると言える。
【００２２】他の主要な生化学的摂動が存在しない場合
には、治療された腫瘍における劇的に増加されたＳＳＡ
Ｔレベルは、治療の間の初期の成長抑制における、酵素
に対する役割を示し、治療後の効果を維持しているよう
に思われる（図３）。２週間でのポリアミンプール（表
３）は、ポリアミン抑制剤−誘導された成長抑制という
特徴を示さないので（即ち、プールは著しく逓減されな
い）、ＳＳＡＴは、他の手段によって抗増殖的な応答を
媒介することがある。これらの他の手段には、全ての結
合していないスペルミジン及びスペルミンの速やかなア
セチル化で、フリーのポリアミンの有用性が排除される
こと、Ｎ1 −アセチルスペルミジンの過剰な滞留、アセ
チル補酵素−Ａプールの逓減（図４に示されるようにＳ
ＳＡＴに対する補因子）、臨界分子又は受容体の、不適
当なアセチル化及び可能な不活性化、又は上記のいずれ
かの組合せが含まれる。
には、治療された腫瘍における劇的に増加されたＳＳＡ
Ｔレベルは、治療の間の初期の成長抑制における、酵素
に対する役割を示し、治療後の効果を維持しているよう
に思われる（図３）。２週間でのポリアミンプール（表
３）は、ポリアミン抑制剤−誘導された成長抑制という
特徴を示さないので（即ち、プールは著しく逓減されな
い）、ＳＳＡＴは、他の手段によって抗増殖的な応答を
媒介することがある。これらの他の手段には、全ての結
合していないスペルミジン及びスペルミンの速やかなア
セチル化で、フリーのポリアミンの有用性が排除される
こと、Ｎ1 −アセチルスペルミジンの過剰な滞留、アセ
チル補酵素−Ａプールの逓減（図４に示されるようにＳ
ＳＡＴに対する補因子）、臨界分子又は受容体の、不適
当なアセチル化及び可能な不活性化、又は上記のいずれ
かの組合せが含まれる。
【００２３】
【表１】
【００２４】
【表２】
【００２５】
【表３】
【００２６】
【好ましい実施例】以下の実施例は、引き続いて腫瘍の
ポリアミン同族体治療が行われる、ＳＳＡＴの生体内で
の誘導に関連した決定因子の測定に関するものであり、
この生体内誘導は、ポリアミン同族体に対する感度、ポ
リアミン同族体の治療有効性のインジカ(indica)として
用いることができ、又、ポリアミン同族体の臨床上の効
能量を決定するのに用いることができる。
ポリアミン同族体治療が行われる、ＳＳＡＴの生体内で
の誘導に関連した決定因子の測定に関するものであり、
この生体内誘導は、ポリアミン同族体に対する感度、ポ
リアミン同族体の治療有効性のインジカ(indica)として
用いることができ、又、ポリアミン同族体の臨床上の効
能量を決定するのに用いることができる。
【００２７】
【ビス−エチルスペルミン同族体治療に対する予測検定
としてのＳＳＡＴの使用】ビス−エチルスペルミン同族
体のようなポリアミン同族体への応答において、ＳＳＡ
Ｔの誘導のレベルは、ヒトの黒色腫を含む、ヒトの腫瘍
タイプの中で非常に変化するので、ＳＳＡＴ過度誘導の
定量化は、投与されるべきビス−エチルスペルミン同族
体に対する、特定のヒト腫瘍タイプの応答性を予測する
ための、事前の治療試験において使用することができ
た。患者の間でのＳＳＡＴ誘導応答の範囲を確かめるた
めの臨床試験は、ＳＳＡＴ誘導と治療に対する臨床応答
との間の相互関係を引き出すために使用することができ
た。
としてのＳＳＡＴの使用】ビス−エチルスペルミン同族
体のようなポリアミン同族体への応答において、ＳＳＡ
Ｔの誘導のレベルは、ヒトの黒色腫を含む、ヒトの腫瘍
タイプの中で非常に変化するので、ＳＳＡＴ過度誘導の
定量化は、投与されるべきビス−エチルスペルミン同族
体に対する、特定のヒト腫瘍タイプの応答性を予測する
ための、事前の治療試験において使用することができ
た。患者の間でのＳＳＡＴ誘導応答の範囲を確かめるた
めの臨床試験は、ＳＳＡＴ誘導と治療に対する臨床応答
との間の相互関係を引き出すために使用することができ
た。
【００２８】
【実施例１】腫瘍生検又は腫瘍を含む外科試料を分離
し、細胞培養の中に導入するか、もしくは外植体として
培養中で成長させる。そして、ビス−エチルスペルミン
同族体のようなポリアミン同族体を用いた治療を開始
し、媒体変化なしに、４つの細胞倍加(doublings) にな
るまで継続する。その後、治療された細胞を、ＳＳＡＴ
誘導の定量化のための細胞サスペンジョンとして調製す
る。
し、細胞培養の中に導入するか、もしくは外植体として
培養中で成長させる。そして、ビス−エチルスペルミン
同族体のようなポリアミン同族体を用いた治療を開始
し、媒体変化なしに、４つの細胞倍加(doublings) にな
るまで継続する。その後、治療された細胞を、ＳＳＡＴ
誘導の定量化のための細胞サスペンジョンとして調製す
る。
【００２９】実施例Ａ：ＳＳＡＴ誘導は、酵素活性を検
定することによって定量化することができる。処理さ
れ、培養された腫瘍細胞の細胞抽出物は、１ｍＭのジチ
オスレイトールを含有する、５ｍＭのＮ−２ ヒドロキ
シピペラジン−Ｎ2 −エタン硫酸（ｐＨ７．２）による
音波処理によって得ることができる。スピンコ４０ロー
タにおいて３５０００ｒｐｍで１時間遠心分離して得ら
れた細胞質ゾル状抽出物は、ＳＳＡＴ活性の検定のため
の酵素源として使用される。この細胞質ゾル状抽出物
は、１０ｕｍｏｌのＨＥＰＥＳ緩衝液、ｐＨ７．８、
０．１５ｎｍｏｌのスペルミジン及び０．５ｎｍｏｌの
〔１−14Ｃ〕アセチル補酵素Ａを用いて、最終的な体積
が５０ｕｌで、３７℃で５分間培養される。この反応
は、低温にして、０．５ＭのＮＨ2 ＯＨ・Ｃｌを２０ｕ
ｌを添加し、沸騰した水浴にて３分間加熱することによ
って停止される。沈澱したプロテインを除去するために
遠心分離を行った後、反応物の５０ｕｌを、Ｐ−８１ホ
スホセルロースのディスク上にスポットし、放射能を計
算する。又、プロテイン濃度は、酵素活性が、プロテイ
ンのミリグラムについて１分間あたりに合成されたアセ
チルスペルミンのピコモルとして表されるようにして測
定する。
定することによって定量化することができる。処理さ
れ、培養された腫瘍細胞の細胞抽出物は、１ｍＭのジチ
オスレイトールを含有する、５ｍＭのＮ−２ ヒドロキ
シピペラジン−Ｎ2 −エタン硫酸（ｐＨ７．２）による
音波処理によって得ることができる。スピンコ４０ロー
タにおいて３５０００ｒｐｍで１時間遠心分離して得ら
れた細胞質ゾル状抽出物は、ＳＳＡＴ活性の検定のため
の酵素源として使用される。この細胞質ゾル状抽出物
は、１０ｕｍｏｌのＨＥＰＥＳ緩衝液、ｐＨ７．８、
０．１５ｎｍｏｌのスペルミジン及び０．５ｎｍｏｌの
〔１−14Ｃ〕アセチル補酵素Ａを用いて、最終的な体積
が５０ｕｌで、３７℃で５分間培養される。この反応
は、低温にして、０．５ＭのＮＨ2 ＯＨ・Ｃｌを２０ｕ
ｌを添加し、沸騰した水浴にて３分間加熱することによ
って停止される。沈澱したプロテインを除去するために
遠心分離を行った後、反応物の５０ｕｌを、Ｐ−８１ホ
スホセルロースのディスク上にスポットし、放射能を計
算する。又、プロテイン濃度は、酵素活性が、プロテイ
ンのミリグラムについて１分間あたりに合成されたアセ
チルスペルミンのピコモルとして表されるようにして測
定する。
【００３０】実施例Ｂ：ＳＳＡＴ誘導は、ＳＳＡＴの物
理的な存在を検定するための、特定の抗体を使用するこ
とによって定量化することができる。この実施例の１つ
の様式においては、ＳＳＡＴは、ＳＳＡＴ誘導を検出
し、定量化するために作られた免疫検定法における抗原
として使用することができる。細胞抽出物または細胞質
ゾル状抽出物は、実施例Ａの方法に従って調製される。
調製された抽出物における抗原としてのＳＳＡＴの検出
には、従来より知られている、放射線免疫検定法、酵素
結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）、「サンドイッチ」
検定法、沈降素反応、凝集反応検定法、及び螢光免疫検
定法の、いずれの免疫検定システムも含まれるが、これ
らに限定されるものではない。
理的な存在を検定するための、特定の抗体を使用するこ
とによって定量化することができる。この実施例の１つ
の様式においては、ＳＳＡＴは、ＳＳＡＴ誘導を検出
し、定量化するために作られた免疫検定法における抗原
として使用することができる。細胞抽出物または細胞質
ゾル状抽出物は、実施例Ａの方法に従って調製される。
調製された抽出物における抗原としてのＳＳＡＴの検出
には、従来より知られている、放射線免疫検定法、酵素
結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ）、「サンドイッチ」
検定法、沈降素反応、凝集反応検定法、及び螢光免疫検
定法の、いずれの免疫検定システムも含まれるが、これ
らに限定されるものではない。
【００３１】この実施例の別の様式では、ポリアミン同
族体を用いた治療に引き続いて、全ての細胞は、単層と
して培養にてＳＳＡＴの物理的存在を検定することがで
き、その後に、ＳＳＡＴの誘導の存在を検出するため
に、その場での免疫細胞化学検定を実施することができ
る。これは、螢光顕微鏡を用いた細胞単層の視覚検査に
よって、あるいは、細胞単層から調製された細胞サスペ
ンジョンの、螢光流動血球計算法によって自動的に、定
量化することができる。
族体を用いた治療に引き続いて、全ての細胞は、単層と
して培養にてＳＳＡＴの物理的存在を検定することがで
き、その後に、ＳＳＡＴの誘導の存在を検出するため
に、その場での免疫細胞化学検定を実施することができ
る。これは、螢光顕微鏡を用いた細胞単層の視覚検査に
よって、あるいは、細胞単層から調製された細胞サスペ
ンジョンの、螢光流動血球計算法によって自動的に、定
量化することができる。
【００３２】実施例Ｃ：ＳＳＡＴ活性の誘導に対する基
本は、増加された酵素特異的なｍ−ＲＮＡ（メッセンジ
ャーＲＮＡ）蓄積、及び減少された酵素プロテイン分解
に関連する酵素プロテインの誘導である。従って、酵素
活性又はプロテインを検定する代わりのものは、ＳＳＡ
Ｔ特異的なｍ−ＲＮＡ転写体での増加を検定することで
ある。ｍ−ＲＮＡは、細胞抽出物から精製することがで
き、その後、分析及び検出のために充分な量を得るため
に、酵素的増幅が行われる。使用することができる酵素
的増幅技術には、ＰＣＲ（重合酵素鎖反応）、ＱＢレプ
リカーゼ、及びＮＡＳＢＡ（核酸配列に基づく増幅）の
ような、従来より知られているものが含まれる。検出技
術には、従来より知られている、アガロースゲル電気泳
動及びノザン法、螢光に基づく交雑検定法、化学ルミネ
ッセンスに基づく交雑検定法、及び捕捉交雑マイクロ滴
定検定法などのシステムが含まれるが、これらに限定さ
れるものではない。
本は、増加された酵素特異的なｍ−ＲＮＡ（メッセンジ
ャーＲＮＡ）蓄積、及び減少された酵素プロテイン分解
に関連する酵素プロテインの誘導である。従って、酵素
活性又はプロテインを検定する代わりのものは、ＳＳＡ
Ｔ特異的なｍ−ＲＮＡ転写体での増加を検定することで
ある。ｍ−ＲＮＡは、細胞抽出物から精製することがで
き、その後、分析及び検出のために充分な量を得るため
に、酵素的増幅が行われる。使用することができる酵素
的増幅技術には、ＰＣＲ（重合酵素鎖反応）、ＱＢレプ
リカーゼ、及びＮＡＳＢＡ（核酸配列に基づく増幅）の
ような、従来より知られているものが含まれる。検出技
術には、従来より知られている、アガロースゲル電気泳
動及びノザン法、螢光に基づく交雑検定法、化学ルミネ
ッセンスに基づく交雑検定法、及び捕捉交雑マイクロ滴
定検定法などのシステムが含まれるが、これらに限定さ
れるものではない。
【００３３】実施例Ｄ：上記実施例Ａ〜Ｃの手順及び方
法は、ＳＳＡＴ特異的酵素活性、プロテイン又はｍＲＮ
Ａ転写体を測定するよりは、むしろＳＳＡＴ誘導の関連
した他のインジカを測定するために利用される。これら
のインジカには、ＳＳＡＴ補因子アセチル補酵素Ａにお
ける減少、又はＮ1 −アセチルスペルミジン及びＮ1−
アセチルスペルミンのようなＳＳＡＴ生成物における増
加が含まれる。又、ＳＳＡＴ符号化した遺伝子の突然変
異体または突然変異株は、ＳＳＡＴ誘導に対するポテン
シャルを示すことがある。
法は、ＳＳＡＴ特異的酵素活性、プロテイン又はｍＲＮ
Ａ転写体を測定するよりは、むしろＳＳＡＴ誘導の関連
した他のインジカを測定するために利用される。これら
のインジカには、ＳＳＡＴ補因子アセチル補酵素Ａにお
ける減少、又はＮ1 −アセチルスペルミジン及びＮ1−
アセチルスペルミンのようなＳＳＡＴ生成物における増
加が含まれる。又、ＳＳＡＴ符号化した遺伝子の突然変
異体または突然変異株は、ＳＳＡＴ誘導に対するポテン
シャルを示すことがある。
【００３４】
【実施例２】ビス−エチルスペルミン同族体のような、
１又はそれ以上のポリアミン同族体に対して応答性があ
ると考えられる腫瘍タイプを有する患者に、このような
同族体の一回投薬量を投与する。この治療に引き続い
て、患者からの腫瘍組織を生検によって得、その後、Ｓ
ＳＡＴの誘導を検出するために、この組織に対し、実施
例１、実施例Ａ〜Ｄに示される方法及び手順の１つ又は
それ以上を行う。
１又はそれ以上のポリアミン同族体に対して応答性があ
ると考えられる腫瘍タイプを有する患者に、このような
同族体の一回投薬量を投与する。この治療に引き続い
て、患者からの腫瘍組織を生検によって得、その後、Ｓ
ＳＡＴの誘導を検出するために、この組織に対し、実施
例１、実施例Ａ〜Ｄに示される方法及び手順の１つ又は
それ以上を行う。
【００３５】
【ビス−エチルスペルミン同族体治療における腫瘍応答
マーカーとしてのＳＳＡＴの使用】ビス−エチルスペル
ミン同族体治療に引き続いて直ちに、ＳＳＡＴ活性にお
ける劇的な増加が起こる。更に重要なことに、ＳＳＡＴ
活性の高いレベルは、ＢＥＮＳＰＭ治療を用いた図３に
例示されるように、ビス−エチルスペルミン同族体治療
に続く維持された成長抑制の間も続く。従って、ＳＳＡ
Ｔ誘導応答は、ビス−エチルスペルミン同族体治療の治
療効果性を特異的にモニターするための、及び、ビス−
エチルスペルミン同族体に対して腫瘍応答性のある個々
の患者に投薬養生法及び治療スケジュールを決定するた
めの腫瘍応答マーカーとして役立つ。投薬養生法及び治
療スケジュールを決定するのに適したインジケータは、
患者にビス−エチルスペルミン同族体治療の結果として
の不利な副作用が生じる場合に特に好ましい。
マーカーとしてのＳＳＡＴの使用】ビス−エチルスペル
ミン同族体治療に引き続いて直ちに、ＳＳＡＴ活性にお
ける劇的な増加が起こる。更に重要なことに、ＳＳＡＴ
活性の高いレベルは、ＢＥＮＳＰＭ治療を用いた図３に
例示されるように、ビス−エチルスペルミン同族体治療
に続く維持された成長抑制の間も続く。従って、ＳＳＡ
Ｔ誘導応答は、ビス−エチルスペルミン同族体治療の治
療効果性を特異的にモニターするための、及び、ビス−
エチルスペルミン同族体に対して腫瘍応答性のある個々
の患者に投薬養生法及び治療スケジュールを決定するた
めの腫瘍応答マーカーとして役立つ。投薬養生法及び治
療スケジュールを決定するのに適したインジケータは、
患者にビス−エチルスペルミン同族体治療の結果として
の不利な副作用が生じる場合に特に好ましい。
【００３６】実施例Ａ：ビス−エチルスペルミン同族体
を用いた治療に続いて、腫瘍が都合良く入手し易い時に
は、腫瘍を患者から生検することもできる。ＳＳＡＴ誘
導は、酵素活性を検定することによって定量化すること
ができる。実施例１、実施例Ａの方法及び手順に従っ
て、生検された腫瘍細胞の細胞抽出物を調製することが
でき、酵素活性を測定することができる。
を用いた治療に続いて、腫瘍が都合良く入手し易い時に
は、腫瘍を患者から生検することもできる。ＳＳＡＴ誘
導は、酵素活性を検定することによって定量化すること
ができる。実施例１、実施例Ａの方法及び手順に従っ
て、生検された腫瘍細胞の細胞抽出物を調製することが
でき、酵素活性を測定することができる。
【００３７】実施例Ｂ：もしくは、ＳＳＡＴ誘導は、実
施例１、実施例Ｂの方法及び手順に従って、ＳＳＡＴの
物理的存在を検定するための特殊な抗体を使用すること
によって、生検された腫瘍細胞の細胞抽出物から定量化
することができる。この実施例の１つの様式において
は、ＳＳＡＴは、ＳＳＡＴ誘導誘導を検出し、定量化す
るために計画された免疫検定法における抗原として使用
することができる。調製された抽出物における抗原とし
てのＳＳＡＴの検出には、従来より知られている、放射
線免疫検定法、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳ
Ａ）、「サンドイッチ」検定法、沈降素反応、凝集反応
検定法、及び螢光免疫検定法の、いずれの免疫検定シス
テムも含まれるが、これらに限定されるものではない。
施例１、実施例Ｂの方法及び手順に従って、ＳＳＡＴの
物理的存在を検定するための特殊な抗体を使用すること
によって、生検された腫瘍細胞の細胞抽出物から定量化
することができる。この実施例の１つの様式において
は、ＳＳＡＴは、ＳＳＡＴ誘導誘導を検出し、定量化す
るために計画された免疫検定法における抗原として使用
することができる。調製された抽出物における抗原とし
てのＳＳＡＴの検出には、従来より知られている、放射
線免疫検定法、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳ
Ａ）、「サンドイッチ」検定法、沈降素反応、凝集反応
検定法、及び螢光免疫検定法の、いずれの免疫検定シス
テムも含まれるが、これらに限定されるものではない。
【００３８】この実施例の別の様式では、ＳＳＡＴの誘
導の存在を検出するために、腫瘍生検の組織学的調製に
おいて、直接、その場での免疫細胞化学検定を実施する
ことができる。
導の存在を検出するために、腫瘍生検の組織学的調製に
おいて、直接、その場での免疫細胞化学検定を実施する
ことができる。
【００３９】実施例Ｃ：ＳＳＡＴ活性の誘導に対する基
本は、増加された酵素特異的なｍ−ＲＮＡ（メッセンジ
ャーＲＮＡ）蓄積、及び減少された酵素プロテイン分解
に関連する酵素プロテインの誘導である。従って、酵素
活性又はプロテインを検定する代わりのものは、実施例
１、実施例Ｃの方法及び手順に従って、ＳＳＡＴ特異的
なｍ−ＲＮＡ転写体での増加を検定することである。ｍ
−ＲＮＡ転写体を検出するのに有用なシステムは、アガ
ロースゲル電気泳動及びノザン法、螢光に基づく交雑検
定法、化学ルミネッセンスに基づく交雑検定法、及び捕
捉交雑マイクロ滴定検定法からなる群より選択すること
ができる。
本は、増加された酵素特異的なｍ−ＲＮＡ（メッセンジ
ャーＲＮＡ）蓄積、及び減少された酵素プロテイン分解
に関連する酵素プロテインの誘導である。従って、酵素
活性又はプロテインを検定する代わりのものは、実施例
１、実施例Ｃの方法及び手順に従って、ＳＳＡＴ特異的
なｍ−ＲＮＡ転写体での増加を検定することである。ｍ
−ＲＮＡ転写体を検出するのに有用なシステムは、アガ
ロースゲル電気泳動及びノザン法、螢光に基づく交雑検
定法、化学ルミネッセンスに基づく交雑検定法、及び捕
捉交雑マイクロ滴定検定法からなる群より選択すること
ができる。
【００４０】他の実施例では、ＳＳＡＴ特異的なｍＲＮ
Ａレベルの物理的な存在は、腫瘍生検の組織学的調製に
おいて、直接、その場での交雑を実施することによっ
て、検出することができる。
Ａレベルの物理的な存在は、腫瘍生検の組織学的調製に
おいて、直接、その場での交雑を実施することによっ
て、検出することができる。
【００４１】実施例Ｄ：上記実施例Ａ〜Ｃの手順及び方
法は、ＳＳＡＴ特異的酵素活性、プロテイン又はｍＲＮ
Ａ転写体を測定するよりは、むしろＳＳＡＴ誘導の関連
した他のインジカを測定するために利用される。これら
のインジカには、ＳＳＡＴ補因子アセチル補酵素Ａにお
ける減少、又はＮ1 −アセチルスペルミジン及びＮ1−
アセチルスペルミンのようなＳＳＡＴ生成物における増
加が含まれる。又、ＳＳＡＴ符号化した遺伝子の突然変
異体または突然変異株は、ＳＳＡＴ誘導に対するポテン
シャルを示すことがある。
法は、ＳＳＡＴ特異的酵素活性、プロテイン又はｍＲＮ
Ａ転写体を測定するよりは、むしろＳＳＡＴ誘導の関連
した他のインジカを測定するために利用される。これら
のインジカには、ＳＳＡＴ補因子アセチル補酵素Ａにお
ける減少、又はＮ1 −アセチルスペルミジン及びＮ1−
アセチルスペルミンのようなＳＳＡＴ生成物における増
加が含まれる。又、ＳＳＡＴ符号化した遺伝子の突然変
異体または突然変異株は、ＳＳＡＴ誘導に対するポテン
シャルを示すことがある。
【００４２】実施例Ｅ：ビス−エチルスペルミン同族体
を用いた治療に続いて、患者から腫瘍生検を実施する代
わりのものとして、血液サンプルを取り出しても良い
し、あるいは尿サンプルを集めても良い。ＳＳＡＴ関連
生成物の、血清、赤血球（ｒｂｃ）、又は尿レベルは、
Ｎ1 −アセチルスペルミジン及びＮ1 −アセチルスペル
ミンからなる群より選ぶことができる。これらの生成物
の、血清、ｒｂｃ、又は尿レベルは、従来より知られて
いる定量化クロマトグラフ技術、例えばＨＰＬＣ（高圧
液体クロマトグラフィー）を用いたり、あるいは、放射
線免疫検定法、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳ
Ａ）、「サンドイッチ」検定法、沈降素反応、凝集反応
検定法、及び螢光免疫検定法からなる群より選ばれた、
従来より知られている免疫検定システムを用いて決定す
ることができる。
を用いた治療に続いて、患者から腫瘍生検を実施する代
わりのものとして、血液サンプルを取り出しても良い
し、あるいは尿サンプルを集めても良い。ＳＳＡＴ関連
生成物の、血清、赤血球（ｒｂｃ）、又は尿レベルは、
Ｎ1 −アセチルスペルミジン及びＮ1 −アセチルスペル
ミンからなる群より選ぶことができる。これらの生成物
の、血清、ｒｂｃ、又は尿レベルは、従来より知られて
いる定量化クロマトグラフ技術、例えばＨＰＬＣ（高圧
液体クロマトグラフィー）を用いたり、あるいは、放射
線免疫検定法、酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳ
Ａ）、「サンドイッチ」検定法、沈降素反応、凝集反応
検定法、及び螢光免疫検定法からなる群より選ばれた、
従来より知られている免疫検定システムを用いて決定す
ることができる。
【００４３】本発明を明らかにし、理解するための説明
および実施例により、本発明をかなり詳細に説明してき
たが、前述の記載および付随する図面から、当業者であ
れば種々の改良が明らかとなるであろう。このような改
良は、本願の技術思想の範囲内及び、付随するクレーム
の範囲内に含まれることを意味している。
および実施例により、本発明をかなり詳細に説明してき
たが、前述の記載および付随する図面から、当業者であ
れば種々の改良が明らかとなるであろう。このような改
良は、本願の技術思想の範囲内及び、付随するクレーム
の範囲内に含まれることを意味している。
【図１】スペルミンと、ビス−エチルスペルミン同族体
であるＮ1 , Ｎ12−ビス（エチル）スペルミンを含むポ
リアミン同族体との間の化学的関係を示す図である。
であるＮ1 , Ｎ12−ビス（エチル）スペルミンを含むポ
リアミン同族体との間の化学的関係を示す図である。
【図２】異なってＳＳＡＴを誘導する、３つの選ばれた
ビス−エチルスペルミン同族体の間の化学的関係を示す
図である。
ビス−エチルスペルミン同族体の間の化学的関係を示す
図である。
【図３】ビス−エチルスペルミン同族体治療を伴う、Ｓ
ＳＡＴ活性の生体内での誘導を示す棒グラフである。
ＳＡＴ活性の生体内での誘導を示す棒グラフである。
【図４】スペルミン及びそれらの誘導体を含む生化学的
経路を示す図である。
経路を示す図である。
Claims (44)
- 【請求項１】 スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチ
ルトランスフェラーゼを誘導するポリアミン同族体を含
む抗癌剤を用いて、化学療法に対する哺乳動物の腫瘍タ
イプの応答性を予測するための方法であって、前記方法
が、 （ａ）生検を行い、腫瘍細胞を得る工程、 （ｂ）前記腫瘍細胞又は腫瘍組織を培養中に導入する工
程、 （ｃ）培養中の前記腫瘍細胞に対して治療的に有効な量
の前記ポリアミン同族体を投与する工程、及び （ｄ）前記ポリアミン同族体に曝された前記腫瘍細胞中
のスペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトランスフ
ェラーゼの誘導のレベルを検出する工程を含むことを特
徴とする、化学療法に対する哺乳動物の腫瘍タイプの応
答性を予測するための方法。 - 【請求項２】 前記ポリアミン同族体が、Ｎ1 , Ｎ12−
ビス（エチル）スペルミン、Ｎ1 , Ｎ11−ビス（エチ
ル）ノルスペルミン、Ｎ1 , Ｎ14−ビス（エチル）ホモ
スペルミン及びこれらの混合物からなる群より選ばれた
ビスエチルスペルミン同族体であることを特徴とする請
求項１記載の方法。 - 【請求項３】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −ア
セチルトランスフェラーゼの誘導が、スペルミジン／ス
ペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼ活性を定量
化することにより測定されることを特徴とする請求項１
記載の方法。 - 【請求項４】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −ア
セチルトランスフェラーゼの誘導が、スペルミジン／ス
ペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼプロテイン
の物理的な存在を検定することにより測定されることを
特徴とする請求項１記載の方法。 - 【請求項５】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −ア
セチルトランスフェラーゼプロテインの物理的な存在
が、放射線免疫検定法、酵素結合免疫吸着検定法、「サ
ンドイッチ」検定法、沈降素反応、凝集反応検定法、螢
光に基づく免疫検定法、及び化学ルミネッセンスに基づ
く免疫検定法からなる群より選ばれた免疫検定法におい
て検出されるべき抗原として、スペルミジン／スペルミ
ンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼプロテインを用い
ることによって検定されることを特徴とする請求項４記
載の方法。 - 【請求項６】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −ア
セチルトランスフェラーゼプロテインの物理的な存在
が、スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトランス
フェラーゼに対して特異的な、その場での細胞化学検定
法により、無傷細胞において検定されることを特徴とす
る請求項４記載の方法。 - 【請求項７】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −ア
セチルトランスフェラーゼの誘導が、アガロースゲル電
気泳動及びノザン法、螢光に基づく交雑検定法、化学ル
ミネッセンスに基づく交雑検定法、及び捕捉交雑マイク
ロ滴定検定法からなる群より選ばれた検出技術を用い
て、スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトランス
フェラーゼｍ−ＲＮＡを検定することにより測定される
ことを特徴とする請求項１記載の方法。 - 【請求項８】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −ア
セチルトランスフェラーゼｍ−ＲＮＡが、その場での交
雑により、無傷細胞において検定されることを特徴とす
る請求項７記載の方法。 - 【請求項９】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −ア
セチルトランスフェラーゼの誘導が、アガロースゲル電
気泳動及びノザン法、螢光に基づく交雑検定法、化学ル
ミネッセンスに基づく交雑検定法、及び捕捉交雑マイク
ロ滴定検定法からなる群より選ばれた検出技術を用い
て、スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトランス
フェラーゼを符号化している遺伝子における突然変異又
は変異を検出することにより測定されることを特徴とす
る請求項１記載の方法。 - 【請求項１０】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼｍ−ＲＮＡが、まず初めに
酵素的に増幅されることを特徴とする請求項７記載の方
法。 - 【請求項１１】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、Ｎ1 −アセチル
スペルミジン、及びＮ1 −アセチルスペルミンからなる
群より選ばれたポリアミン誘導体を検定することによっ
て測定されることを特徴とする請求項１記載の方法。 - 【請求項１２】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、スペルミジン／
スペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼ補因子ア
セチル補酵素Ａを検定することによって測定されること
を特徴とする請求項１記載の方法。 - 【請求項１３】 スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセ
チルトランスフェラーゼを誘導するポリアミン同族体を
含む抗癌剤を用いて、化学療法に対する哺乳動物の腫瘍
タイプの応答性を予測するための方法であって、前記方
法が、 （ａ）哺乳動物に対して治療的に有効な量の前記ポリア
ミン同族体を投与する工程、 （ｂ）生検を行い、腫瘍細胞を得る工程、及び （ｃ）前記ポリアミン同族体に曝された前記腫瘍細胞中
のスペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトランスフ
ェラーゼの誘導のレベルを検出する工程を含むことを特
徴とする、化学療法に対する哺乳動物の腫瘍タイプの応
答性を予測するための方法。 - 【請求項１４】 前記ポリアミン同族体が、Ｎ1 , Ｎ12
−ビス（エチル）スペルミン、Ｎ1 , Ｎ11−ビス（エチ
ル）ノルスペルミン、Ｎ1 , Ｎ14−ビス（エチル）ホモ
スペルミン及びこれらの混合物からなる群より選ばれた
ビスエチルスペルミン同族体であることを特徴とする請
求項１３記載の方法。 - 【請求項１５】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、スペルミジン／
スペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼ活性を定
量化することにより測定されることを特徴とする請求項
１３記載の方法。 - 【請求項１６】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、スペルミジン／
スペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼプロテイ
ンの物理的な存在を検定することにより測定されること
を特徴とする請求項１３記載の方法。 - 【請求項１７】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼプロテインの物理的な存在
が、放射線免疫検定法、酵素結合免疫吸着検定法、「サ
ンドイッチ」検定法、沈降素反応、凝集反応検定法、螢
光に基づく免疫検定法、及び化学ルミネッセンスに基づ
く免疫検定法からなる群より選ばれた免疫検定法におい
て検出されるべき抗原として、スペルミジン／スペルミ
ンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼプロテインを用い
ることによって検定されることを特徴とする請求項１６
記載の方法。 - 【請求項１８】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼプロテインの物理的な存在
が、スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトランス
フェラーゼに対して特異的な、その場での細胞化学検定
法により、無傷細胞において検定されることを特徴とす
る請求項１６記載の方法。 - 【請求項１９】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、アガロースゲル
電気泳動及びノザン法、螢光に基づく交雑検定法、化学
ルミネッセンスに基づく交雑検定法、及び捕捉交雑マイ
クロ滴定検定法からなる群より選ばれた検出技術を用い
て、生検により得られた腫瘍細胞から直接、スペルミジ
ン／スペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼｍ−
ＲＮＡを検定することにより測定されることを特徴とす
る請求項１３記載の方法。 - 【請求項２０】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼｍ−ＲＮＡが、その場での
交雑により、無傷細胞において検定されることを特徴と
する請求項１９記載の方法。 - 【請求項２１】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、アガロースゲル
電気泳動及びノザン法、螢光に基づく交雑検定法、化学
ルミネッセンスに基づく交雑検定法、及び捕捉交雑マイ
クロ滴定検定法からなる群より選ばれた検出技術を用い
て、スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトランス
フェラーゼを符号化している遺伝子における突然変異又
は変異を検出することにより測定されることを特徴とす
る請求項１３記載の方法。 - 【請求項２２】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼｍ−ＲＮＡが、まず初めに
酵素的に増幅されることを特徴とする請求項１９記載の
方法。 - 【請求項２３】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、Ｎ1 −アセチル
スペルミジン、及びＮ1 −アセチルスペルミンからなる
群より選ばれたポリアミン誘導体を検定することによっ
て測定されることを特徴とする請求項１３記載の方法。 - 【請求項２４】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、スペルミジン／
スペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼ補因子ア
セチル補酵素Ａを検定することによって測定されること
を特徴とする請求項１３記載の方法。 - 【請求項２５】 スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセ
チルトランスフェラーゼを誘導するポリアミン同族体を
含む抗癌剤を用いて、腫瘍を持った哺乳動物への化学療
法の治療有効性をモニターし、しかも、投薬養生法及び
治療スケジュールを決定するのに有効な方法であって、
前記方法が、 （ａ）哺乳動物に対して治療的に有効な量の前記ポリア
ミン同族体を投与する工程、 （ｂ）生検を行い、前記哺乳動物から腫瘍細胞を得る工
程、及び （ｃ）前記の治療された腫瘍細胞中のスペルミジン／ス
ペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼの誘導のレ
ベルを検出する工程を含むことを特徴とする方法。 - 【請求項２６】 前記ポリアミン同族体が、Ｎ1 , Ｎ12
−ビス（エチル）スペルミン、Ｎ1 , Ｎ11−ビス（エチ
ル）ノルスペルミン、Ｎ1 , Ｎ14−ビス（エチル）ホモ
スペルミン及びこれらの混合物からなる群より選ばれた
ビスエチルスペルミン同族体を含むことを特徴とする請
求項２５記載の方法。 - 【請求項２７】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、スペルミジン／
スペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼ活性を定
量化することにより測定されることを特徴とする請求項
２５記載の方法。 - 【請求項２８】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、スペルミジン／
スペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼプロテイ
ンの物理的な存在を検定することにより測定されること
を特徴とする請求項２５記載の方法。 - 【請求項２９】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼプロテインの物理的な存在
が、放射線免疫検定法、酵素結合免疫吸着検定法、「サ
ンドイッチ」検定法、沈降素反応、凝集反応検定法、螢
光に基づく免疫検定法、及び化学ルミネッセンスに基づ
く免疫検定法からなる群より選ばれた免疫検定法におい
て検出されるべき抗原として、スペルミジン／スペルミ
ンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼプロテインを用い
ることによって検定されることを特徴とする請求項２８
記載の方法。 - 【請求項３０】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼプロテインの物理的な存在
が、スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトランス
フェラーゼに対して特異的な、その場での細胞化学検定
法により検定されることを特徴とする請求項２８記載の
方法。 - 【請求項３１】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、アガロースゲル
電気泳動及びノザン法、螢光に基づく交雑検定法、化学
ルミネッセンスに基づく交雑検定法、及び捕捉交雑マイ
クロ滴定検定法からなる群より選ばれた検出技術を用い
て、生検により得られた腫瘍細胞から直接、スペルミジ
ン／スペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼｍ−
ＲＮＡを検定することにより測定されることを特徴とす
る請求項２５記載の方法。 - 【請求項３２】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼｍ−ＲＮＡが、その場での
交雑により、無傷細胞において検定されることを特徴と
する請求項３１記載の方法。 - 【請求項３３】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、アガロースゲル
電気泳動及びノザン法、螢光に基づく交雑検定法、化学
ルミネッセンスに基づく交雑検定法、及び捕捉交雑マイ
クロ滴定検定法からなる群より選ばれた検出技術を用い
て、スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトランス
フェラーゼを符号化している遺伝子における突然変異又
は変異を検出することにより測定されることを特徴とす
る請求項２５記載の方法。 - 【請求項３４】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼｍ−ＲＮＡが、まず初めに
酵素的に増幅されることを特徴とする請求項３１記載の
方法。 - 【請求項３５】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、Ｎ1 −アセチル
スペルミジン、及びＮ1 −アセチルスペルミンからなる
群より選ばれたポリアミン誘導体を検定することによっ
て測定されることを特徴とする請求項２５記載の方法。 - 【請求項３６】 前記スペルミジン／スペルミンＮ1 −
アセチルトランスフェラーゼの誘導が、スペルミジン／
スペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼ補因子ア
セチル補酵素Ａを検定することによって測定されること
を特徴とする請求項２５記載の方法。 - 【請求項３７】 スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセ
チルトランスフェラーゼを誘導するポリアミン同族体を
含む抗癌剤を用いて、腫瘍を持った哺乳動物への化学療
法の治療有効性をモニターし、しかも、投薬養生法及び
治療スケジュールを決定するのに有効な方法であって、
前記方法が、 （ａ）哺乳動物に対して治療的に有効な量の前記ポリア
ミン同族体を投与する工程、 （ｂ）前記哺乳動物から体液を取り去る工程、及び （ｃ）スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトラン
スフェラーゼの誘導のレベルを、Ｎ1 −アセチルスペル
ミジン、Ｎ1 −アセチルスペルミン及びこれらの混合物
からなる群より選ばれたポリアミン誘導体を測定するこ
とによって検出する工程を含むことを特徴とする方法。 - 【請求項３８】 前記ポリアミン同族体が、Ｎ1 , Ｎ12
−ビス（エチル）スペルミン、Ｎ1 , Ｎ11−ビス（エチ
ル）ノルスペルミン、Ｎ1 , Ｎ14−ビス（エチル）ホモ
スペルミン及びこれらの混合物からなる群より選ばれた
ビスエチルスペルミン同族体を含むことを特徴とする請
求項３７記載の方法。 - 【請求項３９】 前記体液が、血液、尿及びこれらの混
合物からなる群より選ばれることを特徴とする請求項３
７記載の方法。 - 【請求項４０】 スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセ
チルトランスフェラーゼ活性を定量化するための診断キ
ット。 - 【請求項４１】 放射線免疫検定法、酵素結合免疫吸着
検定法、「サンドイッチ」検定法、沈降素反応、凝集反
応検定法、螢光に基づく免疫検定法、及び化学ルミネッ
センスに基づく免疫検定法からなる群より選ばれた免疫
検定法における抗原としての、スペルミジン／スペルミ
ンＮ1 −アセチルトランスフェラーゼプロテインの物理
的な存在を検出するための診断キット。 - 【請求項４２】 螢光に基づく交雑検定法、化学ルミネ
ッセンスに基づく交雑検定法、及び捕捉交雑マイクロ滴
定検定法からなる群より選ばれた検出技術を用いて、ス
ペルミジン／スペルミンＮ1 −アセチルトランスフェラ
ーゼｍ−ＲＮＡを検出するための診断キット。 - 【請求項４３】 Ｎ1 −アセチルスペルミジン、及びＮ
1 −アセチルスペルミンからなる群より選ばれたポリア
ミン誘導体を検出するための診断キット。 - 【請求項４４】 スペルミジン／スペルミンＮ1 −アセ
チルトランスフェラーゼ補因子アセチル補酵素Ａを検出
するための診断キット。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US87509192A | 1992-04-28 | 1992-04-28 | |
| US07/875091 | 1992-04-28 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0662896A true JPH0662896A (ja) | 1994-03-08 |
Family
ID=25365191
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5124961A Pending JPH0662896A (ja) | 1992-04-28 | 1993-04-27 | スペルミジン／スペルミンｎ１−アセチルトランスフェラーゼの、予後インジケータ及び／又は腫瘍応答マーカーとしての使用方法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5498522A (ja) |
| EP (1) | EP0568338A2 (ja) |
| JP (1) | JPH0662896A (ja) |
| CA (1) | CA2094341A1 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000074917A (ja) * | 1998-08-27 | 2000-03-14 | Yamasa Shoyu Co Ltd | ジアセチルポリアミンの測定法及びキット |
| JP2007176948A (ja) * | 1999-02-05 | 2007-07-12 | Mediquest Therapeutics Inc | アンチザイムモジュレーターおよびその使用 |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5674908A (en) * | 1993-12-20 | 1997-10-07 | Life Technologies, Inc. | Highly packed polycationic ammonium, sulfonium and phosphonium lipids |
| US5650096A (en) * | 1994-12-09 | 1997-07-22 | Genzyme Corporation | Cationic amphiphiles for intracellular delivery of therapeutic molecules |
| EP1221615A2 (en) * | 1995-04-25 | 2002-07-10 | Oridigm Corporation | S-adenosyl methionine regulation of metabolic pathways and its use in diagnosis and therapy |
| EP1459747A3 (en) * | 1996-09-13 | 2004-12-15 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Method of inhibiting biosynthesis of Elf5A |
| US8198334B2 (en) * | 1997-10-27 | 2012-06-12 | Pathologica Llc | Methods for modulating macrophage proliferation in ocular disease using polyamine analogs |
| AU2003231670B2 (en) * | 1997-10-27 | 2006-06-08 | Slil Biomedical Corporation | Methods for modulating macrophage proliferation using polyamine analogs |
| US7087648B1 (en) * | 1997-10-27 | 2006-08-08 | The Regents Of The University Of California | Methods for modulating macrophage proliferation using polyamine analogs |
| PT1129064E (pt) | 1998-11-12 | 2008-01-31 | Invitrogen Corp | Reagentes de transfecção |
| US6649587B1 (en) | 1999-04-30 | 2003-11-18 | Slil Biomedical Corporation | Polyamine analog conjugates and quinone conjugates as therapies for cancers and prostate diseases |
| EP1177197B1 (en) | 1999-04-30 | 2006-08-09 | Cellgate, Inc. | Polyamines and their use in therapy |
| US6482943B1 (en) | 1999-04-30 | 2002-11-19 | Slil Biomedical Corporation | Quinones as disease therapies |
| BR0010700A (pt) * | 1999-04-30 | 2002-02-13 | Slil Biomedical Corp | Conjugados análogos de poliamina e conjugados de quinona como terapias para cânceres e doenças na próstata |
| MXPA02006778A (es) * | 2000-01-12 | 2004-04-05 | Ventana Inc | Metodo para determinar la respuesta a una terapia de cancer. |
| AU2002235126A1 (en) * | 2000-11-08 | 2002-05-21 | Slil Biomedical Corporation | Novel polyamine analog-amino acid conjugates useful as anticancer agents |
| AU2002343609B2 (en) * | 2001-11-16 | 2008-12-11 | Als Therapy Development Foundation, Inc. | Treatment of neurodegenerative disorders through the modulation of the polyamine pathway |
| CA2469354A1 (en) | 2001-12-07 | 2003-06-19 | Slil Biomedical Corporation | Cycloalkyl substituted polyamines for cancer therapy and methods of synthesis therefor |
| JP2004189714A (ja) * | 2002-12-09 | 2004-07-08 | Rasanen Tiina-Liisa | すい臓炎の治療と予防ならびに肝臓再生機能の誘導のための薬剤 |
| CN102344950B (zh) * | 2011-05-31 | 2015-08-26 | 上海拜瑞曼克生物科技有限公司 | 一种用于检测ssat底物的乙酰化代谢物的方法 |
| US9585380B2 (en) | 2011-09-02 | 2017-03-07 | Temple University—Of the Commonwealth System of Higher Education | SSAT mRNA translation repression and activation |
| WO2014117272A1 (en) * | 2013-01-30 | 2014-08-07 | Biomark Technologies Inc. | Spermidine/spermine n1-acetyltransferase antibodies as anti-cancer drug compounds |
| WO2016011203A1 (en) | 2014-07-15 | 2016-01-21 | Life Technologies Corporation | Compositions with lipid aggregates and methods for efficient delivery of molecules to cells |
-
1993
- 1993-04-19 CA CA002094341A patent/CA2094341A1/en not_active Abandoned
- 1993-04-27 JP JP5124961A patent/JPH0662896A/ja active Pending
- 1993-04-28 EP EP93303312A patent/EP0568338A2/en not_active Withdrawn
- 1993-11-16 US US08/153,300 patent/US5498522A/en not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2000074917A (ja) * | 1998-08-27 | 2000-03-14 | Yamasa Shoyu Co Ltd | ジアセチルポリアミンの測定法及びキット |
| JP2007176948A (ja) * | 1999-02-05 | 2007-07-12 | Mediquest Therapeutics Inc | アンチザイムモジュレーターおよびその使用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0568338A2 (en) | 1993-11-03 |
| EP0568338A3 (ja) | 1994-03-30 |
| US5498522A (en) | 1996-03-12 |
| CA2094341A1 (en) | 1993-10-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JPH0662896A (ja) | スペルミジン／スペルミンｎ１−アセチルトランスフェラーゼの、予後インジケータ及び／又は腫瘍応答マーカーとしての使用方法 | |
| Funaki et al. | Hematogenous spreading of hepatocellular carcinoma cells: possible participation in recurrence in the liver | |
| US7628975B2 (en) | Compositions and methods for detecting and quantifying COX-2 activity and 2-arachidonylgycerol metabolites | |
| US20190269759A1 (en) | Methods for detecting cardiac damage | |
| US20150355180A1 (en) | Differential Expression of Novel Protein Markers for the Diagnosis and Treatment of Eosinophilic Esophagitis | |
| Parker et al. | Leukocyte and lymphocyte cyclic AMP responses in atopic eczema | |
| US20030129134A1 (en) | Method of monitoring neuroprotective treatment | |
| WO2008043725A1 (en) | Biomarker in inflammatory disorders | |
| US20030170747A1 (en) | Peripheral marker of blood brain barrier permeability | |
| WO2000062076A1 (en) | Galectin expression is induced in cirrhotic liver and hepatocellular carcinoma | |
| JP5347028B2 (ja) | バイオマーカーとしてのＥＥＦ１Ａの使用およびＭｅｔＡＰ２阻害剤をスクリーニングするための方法 | |
| Livaniou et al. | Serum biotin levels in patients undergoing chronic hemodialysis | |
| Casero Jr et al. | Immunohistochemical staining of human spermidine/spermine N 1-acetyltransferase superinduced in response to treatment with antitumor polyamine analogues | |
| WO2006138243A2 (en) | Inhibition of creatine uptake to promote weight loss | |
| EP1787115A2 (en) | Methods of diagnosis of attention deficit hyperactivity disorder (adhd) | |
| JP2002524723A (ja) | パラクリンの尿細管レニン−アンジオテンシン系に基づく薬物スクリーニングおよび診断 | |
| EP1988164A1 (en) | Method of testing sensitivity of solid cancer against tyrosine kinase inhibitor and test kit therefor | |
| JPH06503647A (ja) | ヒトホスホリパーゼ活性化タンパク質および慢性関節リウマチの診断の方法 | |
| Porter et al. | Methods for the use of spermidine/spermine N1-acetyltransferase as a prognostic indicator and/or a tumor response marker | |
| JP4795353B2 (ja) | 腫瘍疾患および慢性炎症性腸疾患の診断のための液性バイオマーカーとしてのカルバモイルリン酸合成酵素１（ｃｐｓ１）の使用 | |
| Landon et al. | The measurement of enzymes by radioimmunoassay: A review | |
| US20030077678A1 (en) | Diagnostic kit for schizophrenia | |
| US20070254303A1 (en) | Methods for assessing the efficacy of treatment with a glucocorticoid | |
| AU2001284747B2 (en) | Compositions and methods for detecting and quantifying COX-2 activity and 2-arachidonylglycerol metabolites | |
| US20140208835A1 (en) | Method for determination of stroke and/or cerebral infarction using 3-hpma as measure |