JPH06510988A

JPH06510988A - 合成ペプチドを用いてのｈｔｌｖ−１とｈｔｌｖ−２との区別

Info

Publication number: JPH06510988A
Application number: JP5502409A
Authority: JP
Inventors: シー，ジエシー・ダブリユ; バルクザク，ジヨン・デイー; リー，ヘレン・エイチ; オドンネル，デブラ・エル
Original assignee: アボツト・ラボラトリーズ
Priority date: 1991-07-10
Filing date: 1992-07-08
Publication date: 1994-12-08
Anticipated expiration: 2018-06-30
Also published as: DE69229284D1; DK0677117T3; WO1993001316A1; DE69229284T2; JP3421336B2; ES2134810T3; EP0677117B1; AU2319492A; EP0677117A4; GR3030853T3; ATE180495T1; EP0677117A1; CA2113099A1; CA2113099C

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】合成ペプチドを用いてのＨＴＬＶ−ＩとＨＴＬＶ−ＩＩとの区別発明の背景本発明は、一般的には試験試料中にヒトＴリンパ球向性ウィルス（Ｈｕｆｆｌａｎ　Ｔ−Ｃｅｌｌ　Ｌｙｍｐｈｏｔｒｏｐｉｃ　Ｖｉｒｕｓ）　Ｉ型及び■型（ ■几Ｖ−１及びＨＴＬＶ−１１）に対する抗体を検出するのに有用な方法に係わり、より具体的にはＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＬＶ−Ｉｆそれぞれに特異的な合成ペプチド、及びＨＴＬＶ−Ｉに対する抗体と）ＩＴＬＶ−■に対する抗体とを区別して検出するのに有用であり、それによってＨＴＬＶ−１感染とＨＴＬＶ−ＩＩ感染とを区別して診断することを可能にする方法に係わる。

ＨＴＬＶ−Ｉがヒトを発病させることは公知であるが、ＩＩＴＬＶ−Ｈの方は疾病との関連性が明白になっていない。疫学的データによれば、）ＩＴＬＶ−Ｉに関して血清陽性であると確認された米国人給血者の約５０％が実はＨＴＩＪ−ＩＩに感染している（　Ｌｅｅ等の未公表の観察）。従って、給血者に適宜告知及び助言できるように上記２種のウィルス同士を区別し得ることが差し迫って要求される。

ＨＴＬＶ−１感染に関する現行のスクリーニングイムノアッセイでは、ＨＴＬＶ −１に対する抗体が検出されると同時に、程度はより低いがＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体も検出される。ウェスタンプロフト法（ＶＢ）及びラジオイムノ沈降アッセイ（ＲＩＰＡ）といった血清学的方法はＥＩＡより特異的であるが、この方法で上記２種のウィルス同士を区別することはできない。

今日まで、ＩＩＴＬＶ−ＩとＨＴＬＶ−ＩＩとの区別はプロウィルスの制限マツピングやＤＮＡ配列決定といった分子遺伝学的技術の適用、及びＩＩＴＬＶ−１またはＩＩＴＬＶ−１１に特異的なプライマーを用いるポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）によってしか行なえていない。これらの操作では検査するべき患者から得たリンパ球を用いなければならず、リンパ球は明らかに血清または血漿試験試料より採取及び貯蔵しにくい。即ち、上記のような技術は、時間及び経費が掛かり、特別の設備が必要であり、かつ容易に自動化できないという点でその有用性が限られている。

Ｙｏｓｈｉｄａの米国特許第４．５２５．３００号及び同第４．８０４．７４６号に、ヒト白血病ウィルス関連ペプチドに対する抗体を調製する方法が開示されている。開示されるこの抗体はヒト白血病ウィルスに結合することができる。

る合成ペプチドに対して産生された、ＨＴＬＶ−１と反応するモノクローナル抗体の調製が報告されている。この報告によれば産生されたクローンの幾つかは、ＨＴＬＶ−Ｉウィルス単離物には結合したがＨＴＬＶ−１１には結合しなかった。

１９８６年３月２７日付で公開されたＳＬａｍｏｎのＰＣＴ出願第ＰＣＴ／１ｌｓ８５１０１８０３号に、固体支持体に固定したＨＴＬＶゲノム由来の合成またはクローン化ポリペプチドまたはタンパク質と共に試料をインキュベートすることによって該試料中にＨＴＬｖ−■及びＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体を検出する方法が開示されてイル。上記ＰＣＴ出願の開示ｊ：　ＩＪ　ＨＴＬＶ−１（！：　）ＩＴＬＶ−ＩＩとを区別して診断する方法が含まれ、この方法はタンパク質の免疫沈降と、それに続＜　ＳＤＳ　ＰＡＧＥ電気泳動などの方法による分子量決定とを必要とする。しかし、ＳＤＳ　ＰＡＧＥ電気泳動は容易に自動化したり、通常の実験用途に適した形態に変換したりできない。

Ｗｕの米国特許第４．６８９．３９８号には、ＨＴＬＶに特異的な抗体を試験試料中に検出するのに用いられ得る別の一群のＨＴＬｖゲノム配列由来の合成ペプチドが開示されている。

１９８８年５月１８日付で公開された１ｌａｓａｎｏｒｉのヨーロッパ特及び！遺伝子タンパク質を含み、このタンパク質に対する抗体を試料中に検出するのに用いられ得るデバイスが開示されている。しかし、このデバイスはＲＴＬＶ−Ｉに対する抗体とＨＴＬＶ−■に対する抗体とを区別し得ない。

のマツピングと、特異的モノクローナル抗体の産生に有用なペプチドの合成とが報告されている。前記ペプチドは）ＩＴＬＶに対する抗体を検出するイムノアッセイに用いられ得る。この報告では更にｇｐ４６タンパク質の、ＨＴＬＶ−１とＨＴＬＶ−■とによって共有されておらず、従って前記２種のウィルスに対する抗体を区別して検出するのに用いられ得る領域の存在が、確認はされていないが示唆されている。

■９８９年９月２１日付で公開されたＶａｈｌｎｅ等のＰＣＴ出願公開第ｗｏ８９１０８６６４号（ＰＣＴ出願第ＰＣＴ／５Ｅ８９１００１２６号）に、ＨＴＬＶ−Ｉゲノムの！領域に由来する別の合成ペプチド類が開示されており、これらのペプチドはＩＩＴＬＶ−Ｉウィルスに対する抗体の検出に用いられ得る。ＩＩＴＬＶ−Ｉに対する抗体とＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体との区別については何も述べられていない。

１９９０年７月２６日付で公開されたＵｎｉｔｅｄ　Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ　Ｉｎｃ。

のＰＣＴ出願公開第Ｗ０９０１０８１６２号には、ＨＴＬＶ−Ｉ反応性抗体の検出及びＡＴＬ（成人Ｔ細胞白血病／リンパ腫）の診断に用いられる合成ペプチド類が開示されている。これらのペプチドはＨＴＬＶ−Ｉのエンベロープタンパク質のトランスメンプラン断片（ｐ２１ｅ）及び外部断片（ｇｐ４６）に由来する。このＰＣＴ出願公開には、上記ペプチドを用いるイムノアッセイも開示されている。ここに開示された１種以上のペプチドは、ＨＴＬＶ−Ｉに関する５ｙｎｔｈＥＩ＾（登録商標）（Ｏｌｙｍｐｕｓ　Ｃａｒｐ、。

Ｌａｋｅ　５ｕｃｃｅｓｓ、　ＮＹ）において用いられる。

１９９０年３月５日付で公開されたＢｌｏｍｂｅｒｇのＰＣＴ出願公開第Ｗ０９０／１０２３１号に、ＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＬＶ−１１ｉ、：対する抗体の、これらのウィルスの出及び！領域に由来する合成ペプチドへの結合を検出することにより前記抗体同士を区別して検出する方法が開示されている。ここに開示された方法は、個々の試料について４回以上のイムノアッセイの実施を必要とし、従って多数の試料を通常のようにスクリーニングするには不都合であろう。

１９９０年１２月２７日付で公開されたｖａｈｌｎｅ等のＰＣＴ出願公開第１０９０／１５８２０号に、ＨＴＬｖ−■特異的す抗体ト免疫学的ニ反応するペプチド及び該ペプチドに由来する抗体が開示されている。上記ペプチドのうちの幾つかはＨＴＬＶ−Ｉ感染とＨＴＬＶ−Ｕ感染とを区別し得る。

最近Ｒ，Ｂ、　Ｌａ１等が、ＨＴＬＶ−ＩとＨＴＬＶ−ＩＩとの区別ニ用イられ得る合成ペプチドを用いてＨＴＬＶ−１をＩＩＴＬＶ−ＩＩから血清学的に区別することについて述べている。Ｒ，Ｂ、　Ｌａｌ　ｅｔａｌ、、　Ｊ、　Ｉｎｆｅｃｔｉｏｕｓ　Ｄｉｓｅａｓｅｓ　１６３．　ｐｐ、　４１−４６　（Ｊａｎｕａｒｙ。

］−９９１）を参照されたい。Ｌａ１等は特に、ＨＴＬＶ−１の“Ｅｎｖ−５” （アミノ酸２４２〜２５７）がＨＴＬＶ−１の免疫優性ドメインに該当したこと、及びＥＮＶ−５に基づ（ＥＬＩＳ＾によって■ＴＬＶ−ＩとＨＴＬＶ−ＩＩとの区別が可能となったことを報告している。最近公表された上記論文、及び区別について述べている最も新しい２件の特許出願を除けば、上述の先行技術はいずれも１ｉＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＬＶ−ＩＩに対する特異的抗体の検出を目的としている。しかし、ＨＴＬＶ−１及びＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体の有効な検出と該抗体同士の区別とを簡単に実現する詳細な方法は、いまだに開示されていない。

ＨＴＬＶ−Ｉ及びＩＩＴＬＶ−ｎに対する抗体を検出し、かつ該抗体同士を区別するためには、両ウィルスにおいてユニークな抗原決定基を同定しなければならない。タンパク質」二の抗原決定基は、Ｈｏｐｐ　ａｎｄの方法を用いて親水性領域を同定すること、及びＫａｒｐｌｕｓａｎｄ　５ｃｈｕｌｔｚ、　Ｎａｔｕｒｖｉｓｓｅｎｓｃｈａｆｔｅｎ　７２．　ｐｐ、　２１２−２１３（１９８５）の方法を用いてフレキシブル領域を同定することにより予測されている。抗原決定基はタンパク質配列の親水性領域及びフレキシブル領域に局在していると考えられる。

抗原決定基は、タンパク質の分解またはｉｎ　ｖｉｔｒｏ合成によって製造したペプチドの免疫学的試験によって経験的に同定されてもいる。

従って、ＩＩＴＬＶ−１またはＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体の存在を検出すると共に各ウィルスに対する抗体同士を有効に区別する方法が提供されれば有利であろう。そのような方法は医師にとって、疾病をより詳細に診断すること、従って患者により適切な助言及び治療を施すことを可能にする有用な平文てとなろう。

この方法は好ましくは、日常的な実験での使用を容易にし、かつ感度及び特異性に優れた結果をもたらす、単純だが再現可能な形態を有する。

発明の概要本発明は、試験試料において１（ＴＬＶ−Ｉに対する抗体を）ＩＴＬＶ−ｎに対する抗体から区別する方法を提供する。先に述べた諸技術の組み合わせを用いて、ＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＩＪ−■のｇｐ４６　ｅｎｖ及びｐ１９　ｇａｇタンパク質の抗原領域を同定した。

ペプチドにアミノ酸を付加したり、ペプチドからアミノ酸を除去したりすると当該ペプチドの抗体への結合能に重大な影響が及ぶので、抗原領域を体系的に調べることによって、ユニークでかつ先に述べたペプチドよりも優れている抗原性配列を同定した。本発明は、（ａ　）ＨＴＬＶ−Ｉに対する抗体が試験試料中に存在することを確認し、この確認は（＋）試験試料をＨＴＩＪ−１に特異的な少なくとも１種のペプチドと接触させて混合物を形成し、（Ｕ）この混合物を抗原− 抗体複合体の生成に十分な条件下に十分な時間インキュベートし、（±）生成した複合体を、抗ヒトＩｇＧ抗体に結合させたシグナル発生化合物を含む指示薬と接触させて第二の混合物を形成し、（ｔｖ）第二の混合物を抗原−抗体−抗体複合体の生成に十分な条件下に十分な時間インキュベートし、（Ｖ）測定可能なシグナルの検出によりＦＩＴＬＶ−Ｉに対する抗体の存在を確認することによって行ない、（ｂ　）ＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体が試験試料中に存在することを確認し、この確認は（ｉ）試験試料をＨＴＬＶ−１１に特異的な少なくとも１種のペプチドと接触させて混合物を形成し、（ｉｆ）この混合物を抗原−抗体複合体の生成に十分な条件下に十分な時間インキュベートし、（ｔｉｉ）生成した複合体を、抗ヒトＩｇＧ抗体に結合させたシグナル発生化合物を含む指示薬と接触させて第二の混合物を形成し、（汁）第二の混合物を抗原−抗体−抗体複合体の生成に十分な条件下に十分な時間インキュベートし、（ｖ）測定可能なシグナルの検出によりＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体の存在を確認することによって行ない、（ｃ）ＲＴＬＶ−１及びＨＴＬＶ−ＩＩに関して試験試料の反応パターンを決定してＨＴＬＶ−１とＨＴＬＶ−ＩＩとを区別することを含む方法を提供する。

ＨＴＬＶ−Ｉ合成ペプチドのアミノ酸配列は、５ｅｉｋｉ　ｅｔ　ａｌ、。

Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳ＾８０．　ｐｐ、　３６１８−３６２２　（１９８３）によって公表された予測アミノ酸配列から得た。

ＨＴＩＪ−Ｉに特異的なペプチドには、ＨＴＬＶ−Ｉ　ｅｎｖ−１（配列番号１）、ＨＴＬＶ−１ｅｎｖ−２（配列番号２）、ＨＴＬＶ−Ｉ　ｅｎｖ−３（配列番号３）、ＨＴＬＶ−Ｉ　ｅｎｖ−４（配列番号４）、ＨＴＬＶ−１ｅｎｖ−５（配列番号５）ＨＴＬＶ−Ｉ　ｇａｇ−２（配列番号８）、ＨＴＬＶ−Ｉ　ｇａｇ−３（配列番号９）、ＨＴＬＶ−Ｉ　ｇａｇ−４（配列番号１０）、ＩＩＴＬＶ−Ｉ　ｇａｇ−５（配列番号１１）、ＨＴＬＶ−１ｇａｇ−６（配列番号１２）及びＨＴＬＶ−１ｇａｇ−７（配列番号１３）も含まれる。

ＨＴＬＶ−ＩＩ合成ペプチドのアミノ酸配列は２種のＨＴＬＶ−ＴＩｎプロトタイプ予測アミノ酸配列から得た。Ｍｏ　ＩＩＴＬＶ−１１プロトタイプのアミノ酸配列は、Ｓｈｉｍｏｔｏｈｎｏ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｐｒｏｃ。

Ｎａｔｌ−Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳ＾８２．　ｐｐ、　３１０１−３１０５　（１９８５）によって公表されている。ＮＲ＾ＩＩＴＬＶ−１１プロトタイプの配列は未公表データである。ＩＩＴＬＶ−１１に特異的なペプチドには、れもＭｏ配列である。

本発明は、抗ＨＴＩＪ−Ｉ抗体と抗ＦＩＴＬＶ−ＩＩ抗体とを区別する本発明のペプチドを収容したキットも提供する。

発明の詳細な説明本発明は、ＨＴＬＶ−ＩまたはＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体を当該抗体の合成ペプチドへの結合を検出することによって検出する方法を提供する。

最近公開されたＰＣＴ出願公開第Ｗ０９０／１５８２０号（前掲）の場合を除き、ＨＴＬＶ−Ｉ　ｇｐ４６に関して先に述べたペプチドは共通の領域内に位置する。本出願人は、前記領域においてユニークで優れたペプチド配列を同定すると共にＨＴＬＶ−１斗の第二の抗原性領域において、ＨＴＬＶ−Ｉに特異的であり、かつＨＴＬＶ−ＩＩと交叉反応しない新規なペプチド配列を同定した。ＨＴＬＶ−１合成ペプチドのアミノ酸配列は、５ｅｉｋｉ　ｅｔａｌ、、　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳ＾８０．　ｐｐ、　３６１８−３６２２（１９８３）によって公表された予測アミノ酸配列から得た。本出願人は、ＨＴＬＶ−１１ｇｐ４６　ｅｎｖのこれまで未同定の領域においてＩ（ＴＬＶ−ＩＩに特異的であるユニークなペプチド配列を同定し、しかも従来同定済みの抗原性領域でもユニークで優れたペプチド配列を同定した。ＨＴＬＶ−ＩＩ合成ペプチドのアミノ酸配列は２種のＨＴＬＶ−ｎプロトタイプの予測アミノ酸配列から得た。Ｍｏ　ＨＴＬＶ−１１プロトタイプのアミノ酸配列は、Ｓｈｉｍｏｔｏｈｎｏ　ｅｔ　ａｌ、、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、＾ｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳ＾　８２゜ｐｐ、　３１０１−３１０５　（１９８５）ｌ：　ヨーｙ　テ公表されテイル。

ＮＲＡ　ＨＴＬＶ−■プロトタイプの配列は未公表データである。水出願人ハマタ、ＨＴＬＶ−１ｐ１９　ｇａｇ及びＨＴＬＶ−１１ｐ１９　ｇａｇノ抗原性領域においてＨＴＬＶ−１及びＨＴＬＶ−ＩＩにそれぞれ特異的であるユニークなペプチド配列も同定した。

本発明の方法は通常、試験試料を、少なくとも１種のＨＴＩＪ−ＩまたはＩＩＴＬＶ−ＩＩペプチドを結合させた固相と接触させて混合物を形成することを含む。形成した混合物は、抗原−抗体複合体の生成に十分な条件下に十分な時間インキュベートする。生成した複合体を、シグナル発生化合物に結合させた抗ヒト抗体を含む指示薬と接触させて第二の混合物を形成する。第二の混合物を、抗原− 抗体−抗体複合体の生成に十分な条件下に十分な時間インキュベートする。発生された、測定可能な／グナルを検出することによって、固定された抗体の存在を確認する。試験試料をＨＴＬＶ−■に対する抗体とＨＴＬＶ−１１に対する抗体とに関して別個に調べることによって、ＨＴＬＶ−Ｉ感染とＩＩＴＬＶ−ＩＩ感染とを区別する有効な方法を実現することができる。

“固相“は重要でなく、当業者によって選択され得る。

即ち、ラテックス粒子、微小粒子、ビーズ、膜、プラスチックチューブ、マイクロタイターウェルの壁、及びタンニン酸処理したヒツジ赤血球のいずれもが好適例である。ペプチドを固相に固定する適当な方法には、イオン性相互作用、疎水性相互作用、共有結合性相互作用等が含まれる。有用な固相の適用に関して用いられ得る方法論の範囲は、当業者には認識されよう。

“試験試料”はヒトまたは動物の血清、血漿、腹水、尿、脳を髄液といった生物学的液体もしくは他の任意の身体成分、または問題の抗体を含有するかもしれない任意の組織培養上清の試料であり得る。

適当な”指示薬”は、試験試料に由来する抗体に特異的な結合メンバーに接合（結合）させた、外的手段によって検出され得る測定可能なシグナルを発生し得るシグナル発生化合物（ラベル）であり得る。指示薬は、試験試料由来の抗体に特異的な結合対の抗体側メンバーであると同時に、ビオチン−抗ビオチン、アビジン−ビオチン、炭水化物−レクチン、相補的ヌクレオチド配列、エフェクター− レセプター分子、酵素補因子−酵素、酵素阻害物質−酵素等のようなハブテン− 抗ハプテン結合対を含めた任意の結合対の一方のメンバーでもあり得る。

考えられる様々な“ノブナル発生化合物”（ラベル）は、色原体、酵素などの触媒、フルオレセイン及びローダミンなどの発光化合物、化学発光化合物、放射性元素、及び直接視覚化可能なラベルなどである。酵素の例にはアルカリホスファターゼ、セイヨウワサビペルオキシダーゼ、β−ガラクトシダーゼ等が含まれる。特定ラベルの選択は重要でないが、ラベルは単独で、または１種以上の付加的物質との組み合わせにおいてシグナルを発生し得る物質である。

本発明の一興体例では、ＨＴＬＶ−ＩまたはＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体に特異的である本発明の合成ペプチドのうちの少なくとも１種をポリスチレンビーズに固定する。次に、ビーズをヒトの血清、血漿または他の体液の稀釈試験試料と共に所与の条件下に適当な時間インキュベートし、この間に抗体はビーズに固定されたペプチドに特異的に結合する。

その後ビーズを洗浄して、存在し得る一切の未結合タンノ（り質を除去する。続いて第二のインキュベーションを行ない、その際ビーズを、適当なシグナル発生化合物で標識した抗ヒト抗体から成る指示薬と共にインキュベートする。

適当な検出システムによってビーズに固定された標識抗ヒト抗体複合体の量を、検出可能なシグナルの測定により決定し得る。それによって、ＨＴＬＶ−ｔまたはＨＴＬＶ−■に対する特異的抗体が試験試料中に存在することが確認される。

試験試料の、ＨＴＬＶ−Ｉに対する抗体に関する反応パターンとＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体に関する反応パターンとを比較すれば、ＨＴＬＶ−ｉへの感染とＨＴＬＶ−ＩＩへの感染とを区別することができる。

本発明の第二の具体例では、ＨＴＬＶ−ＩまたはＨＴＬＶ−ＩＩに特異的である本発明の合成ペプチドのうちの少なくとも１種をポリスチレンビーズに固定する。次に、ビーズを試験試料または稀釈試験試料、及び抗ヒｌ−ＴｇＧに結合させたシグナル発生化合物と共に所与の条件下に適当な時間インキュベートし、この間に抗体はビーズに固定されたペプチドに特異的に結合し、同時に指示薬にも結合する。ビーズに固定された標識抗ヒト抗体複合体の量は、発生された測定可能シグナルの検出によって決定し得る。こうして、Ｉ’１ＴＬＶ−■またはＨＴＬＶ−Ｉ［に対する抗体が試験試料中に存在することがただ１回のインキュベーションによって確認できる。

試験試料の、ＨＴＬＶ−１に対する抗体に関する反応、（ターンとＨＴＬＶ−Ｈに対する抗体に関する反応パターンとを比較すれば、ＨＴＬＶ−Ｉへの感染とＨＴＩＪ−ＩＩへの感染とを区別することができる。

本発明の第三の具体例では、ＨＴＬＶ−Ｉに対する抗体がまたはＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体に特異的である本発明のペプチドのうちの少なくとも１種をニトロセルロース膜に固定する。ニトロセルロース膜への固定の前に上記ペプチドを同じペプチド、他のペプチド、またはＢＳ＾、キーホールリンペット（ｋｅｙｈｏｌｅ　ｌｉｍｐｅｔ）ヘモンアニン、オボアルブミン等といった様々な担体タンパク質に接合または架橋結合させることが可能である。試験試料を稀釈し、ペプチドを固定した上記膜上で抗原−抗体複合体の生成に十分な条件下に十分な時間インキュベートする。その後、膜表面を洗浄して未結合のタンパク質を除去し、第二のインキュベーションでは膜を、ソゲナル発生化合物で標識した抗ヒト抗体から成る指示薬と共にインキュベートする。発生された測定可能シグナルを適当な検出システムで検出することにより、膜に固定された標識抗ヒト抗体の量を決定し、即ちＨＴＬＶ−■またはＨＴＬＶ−１１に対する抗体の存在を確認する。

検出システムによって認識されるシグナルのレベルの定量化によって、試験試料中に存在する特異的抗体の量の定量化が可能となる。試験試料の、ＨＴＩＪ−１に対する抗体に関する反応パターンとＨＴＬｖ−ｎに対する抗体に関する反応パターンとを比較すれば、ＨＴＬＶ−１への感染とＨＴＩＪ−ＩＩへの感染とを区別することができる。

上記以外の様々な固相を用いる池の例も考えられ、それらは本発明の範囲内である。例えば、いずれも本明細書に参考として含まれる、本願と同じ出願人による同時係属米国特許出願第１５０．２７８号（ヨーロッパ特許出願公開第０３２６１００号に対応）及び米国特許出願第３７５．０２９号（ヨーロッパ特許出願公開第０４０６４７３号）に開示された、負に荷電されたポリマーを伴った固定可能な反応複合体を固定するイオン捕捉法を本発明により用いて、迅速な溶液相の免疫化学反応を実現し得る。固定可能な免疫複合体を反応混合物のその池の成分から、負に荷電したポリアニオン／免疫複合体と予め処理して正に荷電した多孔質マトリックスとのイオン性相互作用によって分離し、かつ本明細書に参考として含まれる、本願と同じ出願人による同時係属米国特許出願第９２１．９７９号（ヨーロッパ特許出願公開第０２７３１１５号に対応）に開示された化学発光シグナル測定法に述べられているものを含めた、先に述べたような様々なシグナル発生糸を用いることによって検出する。

本発明の方法は、固相が微小粒子から成る自動及び半自動システムを含めた、微小粒子技術を用いるシステムでの使用にも適合し得る。そのようなシステムには、本明細書に参考として含まれるヨーロッパ特許出願公開第０４２５６３３号及び同第０４２４６３４号にそれぞれ対応する係属中の米国特許出願第４２５．６５１号及び同第４２５．６４３号に開示されたシステムなどが有る。

イムノアッセイのための走査トンネル顕微鏡検査法の使用も、本発明の方法が容易に適合し得る技術の−っである。

走査プローブ顕微鏡検査法、特に原子力（ａｔｏｍｉｃ　ｆｏｒｃｅ）顕微鏡検査法では捕捉相、例えば選択した１種以上の本発明ペプチドを同相に何着させ、固相の表面に存在し得る抗原−抗体複合体の検出に走査プローブ顕微鏡を用いる。走査トンネル顕微鏡検査法を用いることによって、多くのイムノアッセイ系で抗原−抗体複合体の検出に通常用いなければならないラベルが不要となる。このような系は、本明細書に参考として含まれる、本願と同じ出願人による係属中の米国特許出願第６６２．１４７号に開示されている。

本発明は固相の使用が好ましいことを開示しているが、本発明のペプチドは非固相アッセイ系で用い得ると考えられる。非固相アッセイ系は当業者に公知であり、かつ本発明の範囲内に有ると看做される。

本出願人は、ＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＬＶ−ＩＩそれぞれの適当な合成ペプチドを選択し、かつそれらのペプチドで固相を被覆することによってＨＴＬＶ−Ｉに対する特異的抗体をＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体から分離して検出し、それによって前記２種のウィルスへの感染を区別して診断することを容易にする試験を設計することができた。ＨＴＬＶ−Ｉに対する抗体の特異的検出に適したペプチドは本明細書において特定してあり、の特異的検出に適したペプチドも本明細書において特定しアッセイに用いる試薬は、１個以上のバイアルや瓶などの容器を有するキットの形態で提供され得ると考えられ、その際各容器もしくはバイアルは稀釈剤、指示薬、シグナル発生化合物、少なくとも１種の本発明ペプチドを含むアッセイ試薬等といった個別の試薬を収容する。

本発明を、本発明の思想及び範囲を非限定的に説明するｓｉｃ　Ｐｒｅｓｓ、　Ｎｅｗ　Ｙｏｒｋ　（１９７９）所収のＢａｒａｎｙ及びＭｅｒｒｉｆｉｅｌｄの論文（ｐｐ、　１−２８４）に述べられている当業者に公知の操作を用いてアミノ酸を固相に段階的に添加することによりペプチドを合成した。操作は大路次のとおりであった。合成はＣ末端からＮ末端へと進行させた。Ｎ−保護アミノ酸を用い、その際Ｎはｔ−プチルオキシ力ルボニル（ｔ−Ｂｏｃ）であった。Ｃ末端ｔ−Ｂｏｃアミノ酸を固相に結合させた。ｔ−Ｂｏｃ保護基をトリフルオロ酢酸で除去して遊離アミン基を残し、次のアミノ酸に結合させた。連続的にｔ−Ｂｏｃアミノ酸を添加し、ＤＣＣ（Ｎ−Ｎ’−シンクロへキンル力ルポジイミド）などの試薬を用いて結合させてから保護基を除去した。ペプチド完成後に最後のｔ−Ｂｏｃ保護基を除去し、無水フッ化水素を用いることによってペプチドをポリマーから切断した。

上述のように製造したペプチドで、［ＩＴＬＶ−１に対する抗体の捕捉のための固体支持体として機能するポリスチレンビーズを、当業者に公知の操作を用いて被覆した。操作の概略を述べれば、ポリスチレンビーズを蒸留水で洗浄し、リン酸緩衝塩水（ＰＢＳ）溶液中に０．Ｏ１〜５０μｇ／ｍｌの量で存在させた１種以上のペプチドと共に４０℃で２時間インキュベートした。ビーズを１回、０．１％のＴｒｉｔｏｎ　Ｘ−１００（登録商標）を含有するＰＢＳで１時間洗浄し、ＰＢＳ中の２％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）で１時間ブロックし、ＰＢＳ中の５％スクロースで１５分間保護被覆し、その後乾燥した。

この実施例でＨＴＬＶ−Ｉに対する抗体の検出のための固相番号ｌ）と、アミノ酸２３７〜２６０に対応するペプチドＩ（ＴＬＶ−Ｉｅｎｖ−４（配列番号５）とで同時被覆した（ｃｏ−ｃｏａｔｅｄ）。

精製ヒトＩｇＧでヤギを公知方法に従い免疫することによって、抗ヒトＩｇＧ抗血清を製造した。得られた抗血清をアフィニティ精製し、セイヨウワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰＯ）で標識した。

方法試料を試料稀釈緩衝液で、稀釈率１・２から１　：　１０００に稀釈した。２００μｌの稀釈試料を反応トレイ内で被覆ビーズと共に４０℃で６０分間インキュベートした。完全に洗浄したビーズを、適当な稀釈液で稀釈したヤギ抗ヒトＨＲＰＯと共に４０℃で３０分間インキュベートした。ビーズを再び完全に洗浄した。ビーズに固定されたＨＲＰＯの量を、０−フェニレンジアミン：　２）１（ｊ　（ＯＰＤ）試薬と共に室温で３０分間インキュベートすることによって定量した。前記インキュベーションの終了時、１．　ＯｍｌのＩＮ硫酸を添加して発色反応を停止させた。

得られた溶液の４９２／６００ｎｍでの吸光度を測定することによって発色度を決定した。

結果ＨＴ　Ｌ　Ｖに対する抗体に関して陽性であることをり、　Ｗ、　Ａｎ−ｄｅｒｓｏｎ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｂｌｏｏｄ　７４．　ｐｐ、　２５８５−２５９１　（１９８９）の方法によって予め確認し、かつ）ＩＴＬＶ−Ｉ陽性であることをＰＣＨによって確認した一群の試験試料に本発明の方法を適用したところ、ＨＴＬＶ−１に対する抗体に関して陽性である５７試料中５５（９６，５％）を検出することができた。

実施例２実施例１に述べたように製造したペプチドで、■ＴＬＶ−ＩＩに対する抗体の捕捉のための固相として用いるポリスチレンビーズを次のように被覆した。ポリスチレンビーズを１５％ｖ／ｖイソプロパツールで洗浄し、リン酸緩衝塩水（ＰＢＳ）溶液中に０．０１〜５０μｇ／ｍｌの量で存在させた１種以上のペプチドと共に４０℃で２時間インキュベートした。ビーズを１回、０８１５％のＴｒｉｔｏｎ　Ｘ−１００（登録商標）を含有するＰＢＳで１時間洗浄し、かつＰＢＳ中の２％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）で１時間ブロックしてから室温で２０分間ＰＰＢＳ中５％スクロースで保護被覆し、その後乾燥した。

この実施例ではＨＴＬＶ−ｎに対する抗体を検出するべく、た。

精製ヒトＩｇＧでヤギを免疫することによって抗ヒトＩｇＧ抗血清を製造した。

得られた抗血清を、当業者に公知の標準的方法によりアフィニティ精製し、かつセイヨウワサビベルオキシダーゼ（）ＩＲＰＯ）で標識した。

方法試料を試料稀釈緩衝液で、稀釈率１：２から１　：、１０００に稀釈した。２００μｍの稀釈試料を反応トレイ内で被覆ビーズと共に４０℃で６０分間インキュベートした。完全に洗浄したビーズを、適当な稀釈液で稀釈したヤギ抗ヒトＨＲＰＯと共に４０℃で３０分間インキュベートした。ビーズを再び完全に洗浄した。ビーズに固定されたＨＲＰＯの量を、０−フェニレンジアミン：　２）１ｃｌ（ＯＰＤ）試薬と共に室温で３０分間インキュベートすることによって定量した。前記インキュベーションの終了時、１．０ｍｌのＩＮ硫酸を添加して発色反応を停止させた。

基質の４９２／６００ｎｍでの吸光度を測定することによって発色度を決定した。

結果１（ＴＬＶに対する抗体に関して陽性であることを＾ｎｄｅｒｓｏｎの方法（前出）によって確認し、かつ１（ＴＬＶ−ｎに関して陽性であることをＰｉによって確認した一群の試験試料に上述の方法を適用したところ、この試験で７４試料中７２（９７，３％）を検出することかて者だ。

ＲＴＬＶ−ＩまたはＦＩＴＬＶ−ＩＩに対する抗体の検出試薬を実施例２と同様に製造し、但しビーズの被覆はペプチドＨＴＬＶ−Ｉ　ｇａｇ−１（配列番号７）、ＨＴＬＶ−Ｉｔ　ｇａｇ−３（配列番号２７）、ＨＴＬＶ−ＩＩ　ｅｎｖ− ８（配列番号７）及びＨＴＬＶ−Ｉ　ｅｎｖ−１（配列番号ｌ）それぞれで行なった。得られたビーズを本発明のアッセイ方法において、実施例１及び２の操作に従って用いた。下記の表Ｉに掲げたデータは、実施例１．２及び３で得られたデータの集成である。

実施例１．２及び３のへブチドを本発明の方法で用いることによって、ＩＩＴＬＶ−Ｉに対する抗体に関して陽性であると確認した５７の試験試料を５７とも（１００％）検出できたことも示した。くわえて、本発明の方法はＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体に関して陽性であると確認した７４試料中７３（９８，６％）の検出も可能にした。

実施力１１．２及び３の方法を用いて、ポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）で予め分類した一群の試料を調べた。本発明を、ＨＴｌ、’／−Ｉ及びＨＴＬＶ−■に対する抗体を検出し、かつこれらの抗体同士を区別するように設計された他の３方法［ＰＣＲ。

５ｙｎｔｈＥｌ＾”（Ｏｌｙｍｐｕｓ　Ｃｏｒｐ、、　Ｌａｋｅ　５ｕｃｃｅｓｓ、　ＮＹから入手可能）、及びＳｖｅｎｎｅｒｈｏｌｍによる方法（Ｖａｈｌｎｅのヨーロッパ特許出願公開第ＷＯ３９１０８６６４号として前出）］と比較した。試験したＳｖｅｎｎｅｒｈｏ１ｍペプチドはＩＩＴＬＶ−Ｉ　Ｈ，０、Ｔ及びＶ並びにＨＴｌｊ’−＋１Ｈ１０及びＴであった。試験したＢＬｏＩＩＩｂｅｒｇペプチドは、本発明開示のペプチドとほぼ同じ領域に存在する４種の好ましい開示ペプチド（ＩＧＢ、　２ＧＢ、　ＩＥＡ及び２ＥＡ）であった。比較方法はそれぞれ開示された好ましい方法に従ってか、または市販の５ｙｎｔｈＥＴＡの場合製造者の推奨するプロトコルに従って実施した。比較結果を表工及び■ に示す。

確認状態　ＰＣＲ結果　方法確９　＋１ＴＬＶ−ＩＴ　７３／７４（９８，６％）　９／３１（２９，０％）　５／１２（４１，７％）未確認　１１Ｔ１、Ｖ−１６／８（７５％）　１．／８（１２，５％）１／３（３３，３％）未確認＋＋Ｔｌｖ−ｎ　３／９（３３，３％）　１／９（１１，１％）　Ｏ／２（０９６）血清陰性　０／＋４４（０％）　５／４４（１１，４％）本、１試料でＰＣ，Ｒ結果と矛盾。

ｔ、　前出。

表■ 確認状態　ＰＣＢ結果　方法（９６％）（９８％）（８６％）（７２％）＋ｉｔ認ＨＴＩ、Ｖ−１１４７１５０３５１５０木　３４１５０　４０１５０本（９４％）（６８％）（６８％）（８０％）杜　本発明の方法では二つのＨＴＬＶ−Ｉ試料がこのペプチドと交叉反応した。

Ｂｌｏｍｂｅｒｇ法ては２４のＨＴＬＶ−Ｉ試料が交叉反応した。

ｉ；　前出。

この実施例に述べた方法を用いて、系統のきわめて明瞭な一群の試料を用いる、ＨＴＬＶ−１に対する抗体のＩＩＴＬＶ−１１に対する抗体からの血清学的区別を実際に行なった。他の配列を有するペプチドを用いる既存の方法と比較した場合、本明細書に述べたペプチドは優れた感度及び特異性を示す。

ここに説明した本発明の方法は、参照のポリメラーゼ連鎖反応（ＰＣＲ）法に比較して有効性が高く、かつ用いやすさの点てきわめて優れている。

試薬を実施例１．２及び３と同様に製造し、但しビーズの被１１；！ＨＴＬＶ− １ｅｎｖ−６（配列番号６）（１９０〜２１３）、ＨＴＬＶ−Ｉ号９）（１０９〜１２９）及びＨＴＬＶ−１１ｅｎｖ−７（配列番号２３）（１８６〜１９５）それぞれで行なった。実施例Ｌ　２及び３と同様の方法で実施した上記試薬を用いる実験から得られたデータを表に纏め（表■）、先の実施例１．２及び３での実験に関して得られたデータと比較した。

タンパク質　アミノ酸　ＨＴＬＶ−Ｉ反応性　ＨＴＬＶ−１１反応性ＨＴＬＶ− １ｇｐ４６　１７４〜２０４　１．３／１３ＨＴＩＪ−ｒ　ｐ１９　１０３〜１１６　０／１４ＨＴＬＶ−Ｉ　ｐ１９　１００〜１２９　１４／１４ＨＴＬＶ− ｒ　ｐ１９　１０９〜１２９　５／１．４表■に示したデータは、少数のアミノ酸がペプチドに付加されたりペプチドから除去されたりすることによって当該ペプチドの抗体結合能に重大な影響が及びかねないことを明示している。

ペプチドの反応性試薬を実施例２と同様に製造し、但しビーズの被覆は配列番号１〜２８のペプチドそれぞれで行なった。次の表■に示したデータは発生したデータの蓄積である。各配列番号のペプチドの対応する呼称を当該配列番号の次に、括弧に入れて示す。

配列番号１〜１３のペプチドを本発明の方法で用いることによって、ＨＴＬＶ− １に対する抗体に関して陽性であると確認した１４の試験試料を１４とも（１００％）検出することが可能となり、その際Ｆ！ＴＬＶ−ＩＩに関する交叉反応性は観察されないことが判明した。くわえて、本発明の方法は配列番号１４〜２８の中から選択したただ１種のペプチドの使用によって、ＩＩＴＬＶ−ＩＩに対する抗体に関して陽性であると確認した１４試料中９（６４，３％）の検出を可能にした。配列番号１４〜２８のへブチドのうちの１種、即ち配列番号２５のペプチドでのみ交叉反応が観察された。

表■ ペプチド　アミノ酸　ＨＴＬＶ−Ｉ反応性　ＨＴＬＶ−Ｉｆ反応性札　これら３種の配列はＮＲＡ　ＩＩＴ＋、■−■プロトタイプに由来。

本明細書に提示した本発明の特定例の他の変更及び変形は当業者には明白であろう。従って本発明は、添付した請求の範囲によってのみ限定されるものである。

配列表（１）一般情報：（ｉ）出願人：　５ｈｉｎ、　Ｊｅｓｓｉｅ　Ｗ。

Ｂｕｒｃｚａｋ、　Ｊｏｈｎ　Ｄ。

Ｌｅｅ、　Ｈｅ１ｅｎ　！Ｔ。

０’Ｄｏｎｎｅｌｌ、　Ｄｅｂｒａ　Ｌ。

（Ｕ）発明の名称二合成ペプチドを用いてのＨＴＬＶ−ＩとＨＴＬＶ−ｎとの区別（ｆｆｌ）配列の数：２８（ｔｖ）郵便物の宛先：（Ａ）宛名゛＾ｂｂｏｔｔ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（Ｂ）番地：　Ｏｎｅ　Ａｂｂｏｔｔ　Ｐａｒｋ　Ｒｏａｄ（Ｃ）都市：Ａｂｂｏｔｔ　Ｐａｒｋ（Ｄ）州：　ｌ１ｌｉｎｏｉｓ（Ｅ）国・ｔｌｓＡ（Ｆ）郵便番号：　６００６４−３５００（ｖ）コンピュータ読み出し形態：（Ａ）媒体の種類　フロッピディスク（Ｂ）コンピュータ＋　ＩＢＮ　ＰＣ互換機（Ｃ）オペレーティングシステム：　ＰＣ−ＤＯ３／ＭＳ−［１０Ｓ（Ｄ）ソフトウェア：　ＰａｔｅｎｔＩｎ　Ｒｅ１ｅａｓｅ　ｌｔｌ、ｏ、　Ｖｅｒｓｉｏｎｌｔｌ、　２５（ｖｉ）現出願データ：（Ａ）出願番号：（Ｂ）出願口：（Ｃ）分類：（咄）弁理士／代理人情報：（Ａ）氏名：　Ｐｏｒｅｍｂｓｋｉ、　Ｐｒ１ｓｃｉｌｌａ　Ｅ。

（Ｂ）登録番号：　３３．２０７（Ｃ）参照／事件番号：　５０１３．ＵＳ、■（Ｌｘ）電気通信情報：（Ａ）電話：　７０８−９３７−４８８４（Ｂ）ファクス：　７０８−９３７− ９５５６（２）配列番号１に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ：３１アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（Ｕ）配列の種類：ペプチド１）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置・１７４〜２０４（幻）配列Ｐｈｅ　Ｌｅｕ　Ａｓｎ　Ｔｈｒ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｇｌｎ　Ｌｅｕ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ａｌａ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ@ＬｅｕＰｒｏ　）ｌｉｓ　Ｓｅｒ　Ａｓｎ　Ｌｅｕ　Ａｓｐ　Ｈｉｓ　Ｉｌｅ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｉｌｅ　Ｐｒ。

（２）配列番号２に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ：３４アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロン−；直鎖状（ｉｆ）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置。

（Ｂ）マツプ位置・１８０〜２１３（ｘｉ）配列Ｓｅｒ　Ｇｉｎ　Ｌｅｕ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ＾ｌａ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｌｅｕ　Ｐｒｏ　Ｈｉｓ　Ｓｅｒ　Ａｓｎ　Ｌｅｕ　`ｓｐＨｉｓ　Ｉｌｅ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｉｃｅ　Ｐｒｏ　Ｔｒｐ　Ｌｙｓ　Ｓｅｒ　Ｌｙｓ　Ｌｅｕ　Ｌｅｕ　Ｔｈｒ　Ｌｅｕ@Ｖａ１（２）配列番号３に関する情報・（＋）配列の特徴・（Ａ）長さ：３１アミノ酸（Ｂ）型、アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｉｆ）配列の種類：ペプチド（罎）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：２２７〜２５７（幻）配列Ｃｙｓ　Ｉｌｅ　Ａｓｐ　Ａｒｇ　Ａｌａ　Ｓｅｒ　Ｌｅｕ　Ｓｅｒ　Ｔｈｒ　Ｔｒｐ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｔｙｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ@ＡｓｎＶａｔ　Ｓｅｒ　ｖａｌ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｌｅｕ　Ｔｙｒ　Ｐｒ。

（２）配列番号４に関する情報：（ｉ）配列の特徴。

（Ａ）長さ：３１アミノ酸（Ｂ）型・アミノ酸（Ｄ）トポロジー・直鎖状（ｔｉ）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置（Ｂ）マツプ位置＝２３０〜２６０（尤）配列Ａｒｇ　Ａｌａ　Ｓｅｒ　Ｌｅｕ　Ｓｅｒ　Ｔｈｒ　Ｔｒｐ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｔｙｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ＾ｓｎ　Ｖａｌ　Ｓｅｒ　uａ１Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｌｅｕ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｌｅｕ　Ａｌａ（２）配列番号５に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ＝２４アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｉｆ）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置・（Ｂ）マツプ位置；２３７〜２６０（ｘｉ）配列Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｔｙｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ＾ｓｎ　Ｖａｌ　Ｓｅｒ　Ｖａｌ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｔｈｒ　oｒ。

Ｌｅｕ　Ｌｅｕ　Ｔｙｒ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｌｅｕ＾１ａ（２）配列番号６に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ＝２４アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｉｊ）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：１９０〜２１３（ｘｉ）配列Ｌｅｕ　Ｐｒｏ　Ｈｉｓ　Ｓｅｒ　Ａｓｎ　Ｌｅｕ　Ａｓｐ　Ｈｉｓ　Ｉｌｅ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｉｌｅ　Ｐｒｏ　Ｔｒｐ@ＬｙｓＳｅｒ　Ｌｙｓ　Ｌｅｕ　Ｌｅｕ　Ｔｈｒ　Ｌｅｕ　Ｖａ１（２）配列番号７に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ：３０アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（■）配列の種類：ペプチド（Ｖｉ）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：１００〜１２９（ｘｉ）配列Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　ｌ１ｉｓ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ＾ｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｇｉｎ@ｌ１ｅＰｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｙｒ　Ｖａｌ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ａｌａ　Ｐｒｏ　Ｇｉｎ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ（２）配列番号８に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ・２６アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー、直鎖状（■）配列の種類：ペプチド（ｖｊ）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：１０４〜１２９（ｘｉ）配列Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ＾ｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｇｌｎ　Ｉｌｅ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　sｙｒＶａｌ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ａｌａ　Ｐｒｏ　Ｇｉｎ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ（２）配列番号９に関する情報：（ｉ）配列の特徴・（Ａ）長さ＝２１アミノ酸（Ｂ）型、アミノ酸（Ｄ）トポロジー・直鎖状（ｉｉ）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置、１０９〜１２９（ｘｉ）配列Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｇｌｎ　Ｉｌｅ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｙｒ　Ｖａｔ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ@ＡｌａＰｒｏ　Ｇｌｎ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ（２）配列番号１０に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ：１４アミノ酸（Ｂ）型・アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｎ）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：１０３〜１１６（ｘｉ）配列Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｇｉｎ　ｌ１ｅ（２）配列番号１１に関する情報；（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ・２０アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー、直鎖状（ｉｆ）配列の種類：ペプチド（暢）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：１００〜１１９（ｘｉ）配列Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒ。

（２）配列番号１２に関する情報：（量）配列の特徴：（Ａ）長さ＝２８アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｉｆ）配列の種類：ペプチド（糧）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置＝１００〜１２７（ｘｉ）配列Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｇｉｎ@ｌ１ｅＰｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｙｒ　Ｖａｌ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ａｌａ　Ｐｒｏ　Ｇ１ｎ１．２０　１２５（２）配列番号１３に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ＝２７アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｎ）配列の種類：ペプチド（４）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：１００〜１２６（ｘｉ）配列Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｇｉｎ@ｌ１ｅＰｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｙｒ　Ｖａｌ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ａｌａ　Ｐｒ。

（２）配列番号１４に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ：３２アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｆｉ）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：１６７〜１９８（ｘｉ）配列Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｔｒｐ　Ｐｈｅ　Ｉｌｅ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｇｉｎ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ@Ｐｒ。

Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　５ｅｒ（２）配列番号１５に関する情報：（ｉ）配列の特徴・（Ａ）長さ：３２アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｉｉ）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置、１６７〜１９８（尤）配列Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｔｒｐ　Ｐｈｅ　Ｉｌｅ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ａｒｇ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ@Ｐｒ。

Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｖａｔ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ＋８５　１９０　１９５（２）配列番号１６に関する情報。

（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ・２８アミノ酸（Ｂ）型、アミノ酸（Ｄ）トポロノー：直鎖状（ｉｆ）配列の種類：ペプチド（暢）ゲノム中の位ｉｔ：（Ｂ）マツプ位置：１７１〜１９８（ｘｉ）配列１１ｅ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｇｉｎ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｖａｔ@Ｈｉｓ＾ｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｈｉｓ　Ｖａｔ　Ｌｅｕ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　５ｅｒ（２）配列番号１７に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ、２８アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー、直鎮状（Ｕ）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置。

（Ｂ）マツプ位置、１７１〜１９８（対）配列１１ｅ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ａｒｇ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ@Ｈｉｓ＾ｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｈｉｓ　Ｖａｔ　Ｌｅｕ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　５ｅｒ（２）配列番号１８に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ＝２８アミノ酸ＣＢ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｉｆ）配列の種類：ペプチド（罎）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置＝１７３〜２ＧＯ（尤）配列Ｓｅｒ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｇｌｎ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ@５ｅｒＡｓｐ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｔｈｒ　５ｅｒ（２）配列番号１９に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ：３２アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｔｉ）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：１７３〜２０４（対）配列Ｓｅｒ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｇｉｎ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｖａｔ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ@５ｅｒＡｓｐ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｔｒｐ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｌｙｓ（２）配列番号２０に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ：３４アミノ酸（Ｂ）型；アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（■）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：１７６〜２０９（創）配列Ｔｈｒ　Ｇｉｎ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ@ＧｌｕＨｉｓ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｔｒｐ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｌｙｓ　Ｉｌｅ　Ｌｅｕ　Ｌｙｓ　Ｐｈｅ@ｌ１ｅ（２）配列番号２１に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ＝３４アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｉｆ）配列の種類；ペプチド（４）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位１ｉ１＋１７６〜２０９（ｘｉ）配列Ｔｈｒ　Ａｒｇ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｌｅｕ　Ｖａｌ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ@ＧｌｕＨｉｓ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｔｒｐ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｌｙｓ　Ｍｅｔ　Ｌｅｕ　Ｌｙｓ　Ｐｈｅ@ｌ１ｅ（２）配列番号２２に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ・３０アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｉｆ）配列の種類；ペプチド（４）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置＝２２８〜２５７（ＸＩ）配列Ｓｅｒ　［、ｅｕ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ｔｒｐ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ　Ｔｙｒ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ｉｌｅ　Ｓｅｒ　Ｉｌｅ　Ｐｒ潤@Ｇ１ｎ２２８　．２３０　２３５　２４０Ｇｉｎ　Ｔｈｒ　Ｓｅｒ　Ｓｅｒ　Ａｒｇ　Ｔｈｒ　Ｉｌｅ　Ｌｅｕ　Ｐｈｅ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｌｅｕ　Ａｌａ（２）配列番号２３に関する情報：（ｆ）配列の特徴；（Ａ）長さ＝１０アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（Ｕ）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置；（Ｂ）マツプ位置：１８６〜１９５（ｘｉ）配列Ｖａｌ　Ｈｉｓ　Ａｓｐ　Ｓｅｒ　Ａｓｐ　Ｌｅｕ　Ｇｌｕ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ｌｅｕ（２）配列番号２４に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ：２６アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｉｔ）配列の種類：ペプチド（ｖｉ）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：８３〜１０８（Ｘ［）配列Ｔｒｐ　Ｉｌｅ　Ｌｙｓ　Ｌｙｓ　Ｐｒｏ　Ａｓｎ　Ａｒｇ　Ｇｉｎ　Ｇｌｙ　Ｌｅｕ　Ｇｌｙ　Ｔｙｒ　Ｔｙｒ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ@ＴｙｒＡｓｎ　Ａｓｐ　Ｐｒｏ　Ｃｙｓ　Ｓｅｒ　Ｌｅｕ　Ｇｉｎ　Ｃｙｓ　Ｐｒ。

（２）配列番号２５に関する情報：（ｉ）配列の特徴；（Ａ）長さ：２１アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｎ）配列の種類：ペプチド（４）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：　１１５〜１３５（ｘｉ）配列Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｇｌｕ　Ａｌａ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｙｒ　Ｖａｔ　Ｇｌｕ　Ｐｒｏ　Ｔｈｒ@ＴｈｒＴｈｒ　Ｇｉｎ　Ｃｙｓ　Ｐｈｅ（２）配列番号２６に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ：１９アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｉｉ）配列の種類：ペプチド（４）ゲノム中の位置：（Ｂ）マツプ位置：１１１〜１２９（ｘｉ）配列Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｇｌｕ　Ａｌａ　ｔｉｔｓ　Ｖａｌ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｔｙ秩@Ｖａｌｌｌｌ　１１５　１２０　１２５Ｇｌｕ　Ｐｒ。

（２）配列番号２７に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ：１９アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（ｎ）配列の種類：ペプチド（暢）ゲノム中の位置；（Ｂ）マツプ位置：１０９〜１２７（ｘｉ）配列Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｇｌｕ　Ａｌａ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ@Ｐｒ。

７ｙｒ　Ｖａｔ（２）配列番号２８に関する情報：（ｉ）配列の特徴：（Ａ）長さ：１９アミノ酸（Ｂ）型二アミノ酸（Ｄ）トポロジー：直鎖状（■）配列の種類：ペプチド（糧）ゲノム中の位置・（Ｂ）マツプ位置：１０７〜１２５（ｘｉ）配列Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｔｈｒ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｐｒｏ　Ｓｅｒ　Ｐｒｏ　Ｇｌｕ　Ａｌａ　Ｈｉｓ　Ｖａｌ@Ｐｒ。

Ｐｒｏ　Ｐｒ。

フロントページの続き（７２）発明者　リー、ヘレン・エルアメリカ合衆国、イリノイ・６００４５、レイク・フオレスト、モーニングサイド・８２５（７２）発明者　オドンネル、デブラ・エルアメリカ合衆国、イリノイ・６０００２、アンテイオツク、ウェスト・レイク・ビスツ・

Claims

【特許請求の範囲】

１．試験試料においてＨＴＬＶ−Ｉに対する抗体をＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体から区別する方法であって、ａ）ＨＴＬＶ−Ｉに対する抗体が試験試料中に存在することを確認し、この確認はｉ）試験試料をＨＴＬＶ−Ｉに特異的な少なくとも１種のペプチドと接触させて混合物を形成し、ｉｉ）この混合物を抗原−抗体複合体の生成に十分な条件下に十分な時間インキュベートし、ｉｉｉ）生成した複合体を、抗ヒトＩｇＧ抗体に結合させたシグナル発生化合物を含む指示薬と接触させて第二の混合物を形成し、ｉｖ）第二の混合物を抗原一抗体一抗体複合体の生成に十分な条件下に十分な時間インキュベートし、ｖ）測定可能なシグナルの検出によりＨＴＬＶ−Ｉに対する抗体の存在を確認することを含み、ｂ）ＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体が試験試料中に存在することを確認し、この確認はｉ）試験試料をＨＴＬＶ−ＩＩに特異的な少なくとも１種のペプチドと接触させて混合物を形成し、ｉｉ）この混合物を抗原−抗体複合体の生成に十分な条件下に十分な時間インキュベートし、ｉｉｉ）生成した複合体を、抗ヒトＩｇＧ抗体に結合させたシグナル発生化合物を含む指示薬と接触させて第二の混合物を形成し、ｉｖ）第二の混合物を抗体−抗原−抗体複合体の生成に十分な条件下に十分な時間インキュベートし、ｖ）測定可能なシグナルの検出によりＨＴＬＶ−ＩＩに対する抗体の存在を確認することを含み、ｃ）ＨＴＬＶ−Ｉ及びＨＴＶ−ＩＩに対する抗体に関して試験試料の反応パターンを決定してＨＴＬＶ−Ｉ感染とＨＴＬＶ−ＩＩ感染とを区別することを含む方法。
２．ＨＹＬＶ−Ｉに特異的なペプチドが配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２及び配列番号１３の中から選択された少なくとも１種のペプチドを含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
３．ＨＴＬＶ−ＩＩに特異的なペプチドが配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７及び配列番号２８の中から選択された少なくとも１種のペプチドを含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
４．ＨＴＬＶ−Ｉに特異的なペプチドが配列番号１、配列番号５及び配列番号７の中から選択された少なくとも１種のペプチドを含み、ＨＴＬＶ−ＩＩに特異的なペプチドは配列番号１６、配列番号１７、配列番号２４及び配列番号２７の中から選択された少なくとも１種のペプチドを含むことを特徴とする請求項１に記載の方法。
５．配列番号１、配列番号５または配列番号７を有する、ＨＴＬＶ−Ｉに特異的なペプチド。
６．配列番号１６、配列番号１７、配列番号２４または配列番号２７を有する、ＨＴＬＶ−ＩＩに特異的なペプチド。
７．ＨＴＬＶ−ＩをＨＴＬＶ−ＩＩから区別するアッセイキットであって、固相に結合させた、ＨＴＬＶ−Ｉに特異的な少なくとも１種のペプチドを収容した容器、及び固相に結合させた、ＨＴＬＶ−ＩＩに特異的な少なくとも１種のペプチドを収容した容器を含むキット。
８．ＨＴＬＶ−Ｉに特異的なペプチドが配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、配列番号７、配列番号８、配列番号９、配列番号１０、配列番号１１、配列番号１２及び配列番号１３の中から選択された少なくとも１種のペプチドを含むことを特徴とする請求項７に記載のキット。
９．ＨＴＬＶ−ＩＩに特異的なペプチドが配列番号１４、配列番号１５、配列番号１６、配列番号１７、配列番号１８、配列番号１９、配列番号２０、配列番号２１、配列番号２２、配列番号２３、配列番号２４、配列番号２５、配列番号２６、配列番号２７及び配列番号２８の中から選択された少なくとも１種のペプチドを含むことを特徴とする請求項７に記載のキット。
１０．ＨＴＬＶ−Ｉに特異的なペプチドが配列番号１、配列番号５及び配列番号７の中から選択された少なくとも１種のペプチドを含み、ＨＴＬＶ−ＩＩに特異的なペプチドは配列番号１６、配列番号１７、配列番号２４及び配列番号２７の中から選択された少なくとも１種のペプチドを含むことを特徴とする請求項７に記載のキット。