JPH06505505A - ジパルミトイルホスファチジルコリン分散体の投与方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ジパルミトイルホスファチジルコリン分散体の投与方法この発明は、エアロゾル 化サーファクタント製剤の患者の肺への投与方法に関する。

ヒアリン膜疾患とも称される呼吸困難症候群（ＲＤＳ）は、早産幼児に見られる 死亡および不興の主要例である。米国では、毎年、２３０．０００ないし２５０ ．０００人の幼児が早産により誕生し、４０．０００ないし５０．０００人にＲ ＤＳが発病する。そして、この疾患を発病した者のうち、５．０００ないし８． ０００人が死亡する。一般には、Ｒ，Ｐｅｔｅｌａ＋ａｎおよびＰ、　Ｆａｔｒ ｅｌｌ　。

？ｄｉａｌｒｉｃｓ　７０．５７０　（１９８２）　；Ｄ、　Ｖｉｄ７ａｕｇａ ｒ　Ｓｉｎ　Ｂａ７１ｉｎｅＭｓｍｂｒａｎ！Ｄｉｓｅａｔｅ　：　Ｐａｔｈｏ ｇｅｎｅｓｉｓ　ａｎｄ　Ｐａｌｈｏｐｈ７ｓｉｏｌｏｇ７゜９３　（Ｌ、５ｔ ｅｒｎ編１９８４）を参照。加えて、ＲＤＳは、児童、青少年および成人に肺の 外傷もしくは損傷の結果として起こり得る。毎年、６０−８０％の死亡率で、１ ５０．０００事例の成人呼吸困難症候群（ＡＲＤＳ）が報告されている。Ａｍｅ ｔｉｃａｎ　ＬｕｎｇＰｒｏｇｒａｍ、　Ｒｅ５ｐｉｔａｔｏｒ７　Ｄｉｓｓａ ｓｅｓ、　Ｔｘｓｋ　Ｆｏｒｃｔ　Ｒｅｐｏｒｔ　ｏｎＰｒｏｂｌｅｍｓ、　Ｒ ｅ５ｅａｒｃｈ　Ａｐｐｒｏｘｃｈｅｓ、　ａｎｄ　Ｎｅｅｄｇ、　Ｎｘｔｉｏ ｎａｌＨｃａｒｔ　ａｎｄ　Ｌｕｎｇ　Ｉｎ５ｊｉｔｕｊｅ、　ＤＨＥＷ　Ｐｕ ｂｌｎ、（ＮＩＨ）　７３−４３２：１６５−８０　（１９７２）参照。

ＲＤＳは、通常肺胞表面上に分泌される物質である肺サーファクタントの１次欠 損によって起こる。ＡＲＤＳは、サーファクタント阻害および／または分泌の減 少による肺サーファクタントの２次欠損からなる。サーファクタントが存在しな い場合には、呼出の間に肺胞が虚脱する傾向にある。虚脱は、肺に機械的に通気 することにより回避することができる。

しかしながら、機械的な通気に伴う問題は、高い酸素濃度と陽圧のために肺に損 傷を引き起こし得ることである。

多くのグループが、ＲＤＳおよびＡＲＤＳの治療または予防に用いることができ るサーファクタント製剤の開発を目指している。ヒトおよびウシの両者の天然サ ーファクタントがヒトの気道内に投与されている。例えば、１．　Ｈｏｒｂａｒ ら、Ｎ。

Ｅｎｇ、ｌ　Ｍｅｄ、３２０．９５９　（１９８９）　：　Ｒ，５ｏｌｌら、Ｐ ｅｄｉ＊ｔｒｉｃＲｃｓ、２３．４２５Ａ　（１９８８）参照。しかしながら、 そのような天然サーファクタントに伴う問題は、微生物による潜在的な汚染およ びそれらに含まれるタンパク質に対する患者の潜在的な感受性である。そのため 、完全な合成サーファクタントが開発されている。例えば、Ｃｌｅｍｓｎｔｇの 米国特許４．８２６．８２１　；Ｃｌｅｍｅｎｌｓの米国特許４．３１２．８６ ０を参照。

サーファクタント製剤の開発が機械的な通気に代わる手段を提供しているにもか かわらず、臨床医は、今や、これらの製剤を患者の肺にいかに迅速に、かつ有効 に投与するかという問題に直面している。ＲａｍｂｅおよびＬｅｅの米国特許４ ．８３２．９１２は、薬物含有液のエアロゾルの形態での患者の肺への送達に用 いることができる噴霧装置を開示している。霧状にする前に、液体の加熱もしく は冷却が可能であることが示唆されている（第４段、４７−４８行目）　。Ｒｘ ｘｂｓおよびＬｅｅは、患者の肺へのサーファクタント製剤の投与に含まれる問 題を扱っていない。そのような製剤は、単一相溶液というよりも、むしろ水性担 体溶液中の脂質の分散体である。

前述の観点から、この発明の目的は、患者の肺にエアロゾルの形態でサーファク タント製剤を投与する手段を提供することにある。

この発明は、サー・ファクタント製剤の投与処置が必要な患者の肺に投与するた めのサーファクタント製剤の調製方法を提供する。この方法は、分散体を約２５ ℃ないし９０℃の温度に加熱することを含む。この分散体は、水性担体中に分散 するリン脂質を含む。このリン脂質は、水性担体ｌミリリットル当り約ＩＯない し９０ミリグラムの量が含まれる。この分散体は霧状化されて吸入可能なサーフ ァクタント粒子を生成し、そしてこの吸入可能なサーファクタント粒子が患者の 肺に送達される。霧状化に先立って加熱することにより、患者の肺に送達される リン脂質の量が増加する。

また、この発明は、肺疾患の治療に用いられるサーファクタント製剤であって、 霧状化して吸引可能な粒子とするのに適合しており、水性担体中に水性担体ｌミ リリットル当り約ＩＯないし約９０ミリグラムの量のリン脂質ジパルミトイルホ スファチジルコリン（ＤＰＰＣ）が分散する分散体を含有するサーファクタント 製剤を提供する；前記分散体は、霧状化および患者の肺への吸引可能なサーファ クタント粒子の送達に先立って約２５°Ｃないし約９０℃の温度に加熱される。

さらに、この発明は、肺疾患の治療方法であって、水性担体中に水性担体ｌミリ リットル当り約１０ないし約９０ミリグラムの墓のリン脂質ジパルミトイルホス ファチジルコリン（ＤＰＰＣ）が分散する分散体の投与を具備し、前記分散体が 霧状化および患者の肺への吸引可能なサーファクタント粒子の送達に先立って約 ２５℃ないし一約９０℃の温度に加熱される治療方法を提供する。

この発明の実施に用いられるサーファクタント製剤は、天然のもの（すなわち、 ヒト、ウシ）、例えばＪ、　１ｌｏｒｂｘｒら。

Ｎ、Ｅｎｇ、Ｊ、Ｍｅｄ、３２０．　９５９　（１９８９）；　Ｒ，５ｏｌｌら 、ＰｅｄｉＮｒｉＣｂｓ、　２３．４２５Ａ　（１９８８）参照、組換え体、ま たは合成起源のもの、またはそれらの組み合わせであっても、ＲＤＳまたはＡＲ ＤＳの治療に有用であればいかなるタイプのものでもよい。

例えば、Ｙ、Ｔ＋ｎａｋｉら、Ｊ、Ｌｉｐｉｄ　Ｒｅｓ、２７．　Ｎｏ、２．４ ７５　（１９８６）、Ｔ、Ｆｕｊｉｗａｒａ　ら、Ｌｇｎｃｅｌ　１．　５５　 （Ｊａｎｕｘｒｙ　１２．　１９８０）（ジパルミトイルホスファチジルコリン で強化されたウシ肺抽出物）　；　Ｓｃｈｉｌｌｉｎｇらの米国特許４．９１２ ．０３８　（肺胞サーファクタントタンパク質をコードする組換えＤＮＡ配列） を参照。特に、Ｃｌｅｍｅｎｔ＠の米国特許４．８２６．８２１に記載されるタ イプの合成サーファクタントがこの発明の実施に特に好ましい（出願人は、とり わけ、ここに引用される全ての特許文献の開示が、言及されることによってここ に組み込まれることを意図している）　。ＣＬｅｍ？ｎｆｓの米国特許４．３１ ２．８６０に記載されるタイプの合成サーファクタントもまた、この発明の実施 に有用である。他のサーファクタント製剤が、ロス−ラボラトリーズ（Ｒｏｓｓ 　Ｌａｂｏｔ＋＋１ｏｒｉｅｓ　）から５ＵＲＶＡＮＴＡ”として市販されてい る。これは、リン脂質、天然脂質、脂肪酸、およびサーファクタント関連タンパ ク質を含み、組成を標準化し、かつ天然肺サーファクタントの表面張力低下能を 模倣するためにジパルミトイルホスファチジルコリン、パルミチン酸、およびト リパルミチンが添加された天然ウシ肺抽出物である。

このサーファクタント製剤は、使用前に再構成する無菌凍結乾燥粉末、または即 使用可能な液体として提供される。

一般に、全てのサーファクタント製剤は、水性担体中に、リン脂質としてジパル ミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ；　“コルホセリルパルミテート（Ｃ ｏｌｆｏｔｃｅｔｉｌ　Ｐａｌｍｉｔｍｔｅ）”とも呼ばれる）を単独で、また はｌ−バルミトイル−２−オレオイル−ホスファチジルグリセロール、シミリス トイルホスファチジルコリン、ジステアロイルホスファチジルコリン、シミリス トイルホスファチジルエタノールアミン、ジラウロイルホスファチジルエタノー ルアミン、ジメチルジパルミトイルホスファチジルコリン、メチルジパルミトイ ルホスファチジルコリン、ジパルミトイルホスファチジルグリセロール、ホスフ ァチジルコリン、ジオレオイルホスファチジルコリン、およびジベヘノイルホス ファチジルコリンのような他のリン脂質との組み合わせで含有する。典型的には 、ＤＰＰＣは、霧状化され、肺に投与されるサーファクタント製剤中に、１０な いし９０ｍｇ／ｍＬの量含まれる。

サーファクタント製剤は、典型的には、１ｃｍ当り１５ダイン未満の表面張力を 有している。１ｃｍ当り約１ないし２ダイン以下までの表面張力低下をもたらす ことが可能な、ここに記載のサーファクタント製剤を用いて、より低い表面張力 （例えば、　１ｃｍ当り約ｌＯダイン）を得ることは好ましい傾向である。

サーファクタント製剤は、好ましくは、脂肪族アルコールもしくは肺サーファク タントタンパク質のような展着剤を、肺胞表面−上にサーファクタント製剤を展 着させるのに有効な量含む。この発明の特に好ましい態様においては、この展着 剤はセチルアルコール（ヘキサデカノールとも呼ばれる）である。サーファクタ ント製剤の水性相は、好ましくは、肺表面を過度に刺激することがないように、 塩溶液（例えば、塩化ナトリウム溶液）である。塩化ナトリウム溶液は、通常の 生理食塩水溶液（すなわち、約、９％ＮａＣ＃）であっても、あるいはより好ま しくは、わずかに低張のもの（例えば、約、４％ないし約、９％ＮａＣ，Ｑ、よ り好ましくは約、４％ないし約、８％ＮａＣ１、最も好ましくは、５４％ＮａＣ １）であってもよい。

適切なサーファクタント製剤は、上述のように、展着剤として肺サーファクタン トタンパク質を含有するものを含む。

そのような製剤の例は、米国特許４．９１２．０３８に記載されるようなサーフ ァクタント・アポタンパクと脂質混合物とを合わせることによって調製される。

ここで、前記脂質混合物は、ＤＰＰＣ，ｌ−バルミトイル−２−オレオイルホス ファチジルグリセロール（Ｐ　ＯＰ　Ｇ）およびパルミチン酸（ＰＡ）を、ＰＯ ＰＧに対してＤＰＰＣを５０　：　５０ないしｔ＋ｏ：ｔｏ、サーファクタント タンパク質に対して（ＤＰＰＣ＋ＰＯＰＧ）を５０：ｌないし５：１、かつ（Ｄ ＰＰＣ＋ＰＯＰＧ）に対してＰＡを口ないし０．２の割合で含む。ＰＯＰＧ以外 の不飽和酸性脂質をＰＯＰＧに代えることもできる。このタイプの製剤の特に好 ましい態様においては、ＤＰＰＣ対ＰＯＰＧ対ＰＡの割合は７：　３：　１であ って、脂質の量の３倍の最終リン脂質濃度を有し、約０．０１ｍｇ／ｍＬないし １０ｍｇ／ｍＬ　Ｃａ”Ｔ’組み込まれるカルシウムを含有する。例えば、Ｇｅ ｎ５ｎｌｅｅｈ　Ｉｎｃ。

およびＣｘ１ｉｌｏｒｎｉａ　Ｂｉｏｔ！ｃｈｎｏｌｏｇ７　Ｉｎｃ、のＰＣＴ 出願公開Ｗ０９１１００８７１　（１９９１年１月２４日公開）を参照。

分散体は、好ましくは、約２５℃ないし７５℃の温度に加熱され、リン脂質は、 好ましくは、水性担体ｌミリリットル当り約８ないし５０ミリグラムの置台まれ るジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）である。ここで言及される “加熱”温度は、加熱手段（すなわち、加熱ブロック）の温度である；液状サー ファクタント製剤それ自体は、霧状化の冷却効果により、加熱手段よりも幾らか 低い温度に達する。この発明の実施においては、例証されるＤＰＰＣを用いる以 下の態様、および特に好ましい下記第７パラグラフに示される態様を含む、加熱 とリン脂質濃度の種々の組み合わせを用いることができる。

（１）分散体が約２５℃ないし５５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが水性担体中 に１ｍＬ当り約３０ないし５０ｒｎｇ　（ｍｇ／ｍＬ）の量で含まれる方法。よ り好ましくは、分散体が約３５℃ないし４５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが約 ３５ないし４５ｍ　ｇ　／　ｍ　Ｌの量で含まれる。最も好ましくは、分散体が 約３７℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが約４０．５ｍｇ／ｍＬの量で含まれる。

（２）分散体が約４５℃ないし７５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが水性担体中 に約７０ないし９０ｍｇ／ｍＬの量で含まれる方法。より好ましくは、分−散体 が約５５℃ないし６５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが約乃ないし８５ｍｇ／ｍ Ｌの量で含まれる。最も好ましくは、分散体が約６０℃の温度に加熱され、ＤＰ ＰＣが約８１ｍｇ／ｍＬの量で含まれる。

（３）分散体が約２５℃ないし５５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが水性担体中 に約７０ないし９０ｍｇ／ｍＬの量で含まれる方法。より好ましくは、分散体が 約３５℃ないし４５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが約７５ないし８５ｍｇ／ｍ Ｌの量で含まれる。最も好ましくは、分散体が約３７℃の温度に加熱され、ＤＰ ＰＣが約８１ｍｇ／ｍＬの量で含まれる。

（４）分散体が約４５℃ないし７５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが水性担体中 に約３０ないし５０ｍｇ／ｍＬの量で含まれる方法。より好ましくは、分散体が 約５５℃ないし６５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが約３５ないし４５ｍｇ／ｍ Ｌの量で含まれる。最も好ましくは、分散体が約６０’Ｃの温度に加熱され、Ｄ ＰＰＣが約４０．５ｍｇ／ｍＬの量で含まれる。

（５）分散体が約２５℃ないし５５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが水性担体中 に約５ないし２４ｍｇ／ｍＬの量で含まれる方法。より好ましくは、分散体が約 ３５℃ないし４５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが約８ないし２０ｍｇ／ｍＬの 量で含まれる。最も好ましくは、分散体が約３７℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣ が約１３．５ｍｇ／ｍＬの量で含まれる。

（６）分散体が約４５℃ないし７５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが水性担体中 に約５ないし２４ｍｇ／ｍＬの量で含まれる方法。より好ましくは、分散体が約 ５５℃ないし６５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが約８ないし２０ｍｇ／ｍＬの 量で含まれる。最も好ましくは、分散体が約６０℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣ が約１３．５ｍｇ／ｍＬの量で含まれる。

（７）分散体が約４５℃ないし７５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが水性担体中 に１ｍＬ当り約５ないし２４ｍｇ　（ｍｇ／ｍＬ）の量で含まれる方法。より好 ましくは、分散体が約４５℃ないし５５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが約８な いし２０ｍ　ｇ　／　ｍ　Ｌの量で含まれる。最も好ましくは、分散体が約５０ ℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが約１３．５ｍｇ／ｍＬの量で含まれる。

（８）分散体が約４５℃ないし７５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが水性担体中 に約３０ないし５０ｍｇ／ｍＬの量で含まれる方法。より好ましくは、分散体が 約４５℃ないし５５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが約３５ないし４５ｍｇ／ｍ Ｌの量で含まれる。最も好ましくは、分散体が約５０℃の温度に加熱され、ＤＰ ＰＣが約４０．５ｍｇ／ｍＬの量で含まれる。

（９）分散体が約４５℃ないし７５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが水性担体中 に約７０ないし９０ｍｇ／ｍＬの量で含まれる方法。より好ましくは、分散体が 約４５℃ないし５５℃の温度に加熱され、ＤＰＰＣが約７５ないし８５ｍｇ／ｍ Ｌの量で含まれる。最も好ましくは、分散体が約５０℃の温度に加熱され、ＤＰ ＰＣが約８１ｍｇ／ｍＬの量で含まれる。

一般に、分散体は、少なくともリン脂質の転移温度程度まで加熱される。サーフ ァクタント製剤の霧状化がその製剤の温度の低下を引き起こし、そのため、連続 的な霧状化の間には、室温であっても、サーファクタント製剤の温度を維持する ためにその製剤を加熱する必要があることに注意されたい。

吸引可能なサーファクタント粒子は、自発吸入および機械的通気を含む適切ない かなる方法によっても患者の肺に送達することができる。自発吸入においては、 患者がサーファクタント粒子を吸入する。多くの異なるエアロゾル吸入器が知ら れている。ここで、“通気”という用語は、患者が他の方法ではそれ自身で呼吸 することができない場合に、患者の呼吸を助けるか、もしくは患者に呼吸させる ために、周期的に、少なくとも患者の１つの肺に酸素に富む空気を強制的に送り 込み、かつ肺から酸素が枯渇した空気を脱出させるプロセスを指す。通気は、い ずれか１つの肺が閉塞しているか、虚脱しているか、または手術不可能な他のも のであるかどうかによって、患者のいずれかもしくは両方の肺で行ない得る。多 くのタイプの通気装置が知られている。吸引可能な粒子が通気によって粒子に投 与されるものである場合には、吸引可能な粒子は、患者に対する最大限の送達の ために、典型的には、通気装置出力と結合しているかもしくは接続している噴霧 出力を具備する噴霧器によって生成される。噴霧器は、通気装置サイクルの吸気 相または呼気相の間に通気装置にロードすることができる。

上述のサーファクタント製剤から吸入可能な粒子（例えば、サイズが１ないしｌ Ｏミクロン体積メジアン直径（ｖｏｌｕｍｅｍｅｄｉｉｎ　ｄｉａｍｅｊｅｒ　 ）の粒子）を形成することが可能な噴霧装置であればどのようなものでも、ジェ ット噴霧器および超音波噴霧器を含んで、この発明の実施において使用可能であ る。

エアロゾル中に目的を達成するに十分な量の吸引可能な粒子が含まれる限りにお いて、噴霧装置によって製造されたエアロゾルが吸入可能ではないより大きい粒 子を含み得ることは当業者には認識されであろう。ジェット噴霧器の例が米国特 許４．８３２．０１２に記載されている。超音波噴霧器の例には、Ｄｓｖｉｌｔ ＋ｉｓ＠Ｃｏ、、Ｓｏ＋ｕｒｓｃｊ、Ｐｅｎｎ５７１ｖａｎｉｘ、　ＵＳＡによ って製造されたＦｏｒｌａ−５ｏｎｉｃＴＭおよびＰｕｌｍｏ−５ｏｎｉｃ”噴 霧器が含まれる。

以下に示す例において、この発明をより詳細に説明する。

これらの例において、他に示されていなければ、“ＣＣ”は立方センチメーター を意味し、“ｇ”はグラムを意味し、“ｍｇ”はミリグラムを意味し、“ｍＬ“ はミリリットルを意味し、”ｍｏｓｍ”はミリ浸透圧モルを意味し、“Ｎ”はノ ーマルを意味し、“Ｌ”はリットルを意味し、“ｍｉｎ”は分を意味し、“ｈｒ ”は時間を意味し、パーセンテージは重量ベースで与えられ、“Ａｍｂ”は周囲 を意味し、および温度は摂氏で与えられる。

例１ サーファクタント製剤の調製 無菌のパイロジエンを含まない水２５ｃｃを無菌のディスポーザルシリンジに取 り、ジパルミトイルホスファチジルコリン（Ｄ　Ｐ　Ｐ　Ｃ）凍結乾燥粉末２． ０２５ｇ、ヘキサデカノール２２５ｍ　ｇ　、チロキサボール（Ｉｙｌｏｘａｐ ｏｌ　）　１５０ｍｇ１およびＮａＣρ　８７６、６ｍ　ｇを入れた無菌の排気 した５０ｃｃバイアルに注入する。この混合物は公知である。Ｃ１ｅａ＋ｅｎｊ ｓの米国特許４、８２６．８２１参照。このバイアルを逆さにすることにより水 と粉末とを激しく混合し、シリンジ内にこの混合物を繰り返しとり、シリンジの プランジャーを解放する。その結果、溶液というよりも懸濁液であるサーファク タント製剤的２５ｃｃが得られる。この製剤を噴霧器のウェル内に入れ、必要に 応じて、無菌のパイロジエンを含まない水１２５ｍ　Ｌで希釈する。

得られたサーファクタント製剤は、ＮａＣ１について０．ＩＮであり、１９０ｍ 　Ｏｓ　ｍ／　１の浸透圧を有し、１３．５ｍ　ｇ／　ｃ　ｃのＤＰＰＣ，１， ５ｍｇ／ｃｃのヘキサデカノール、および１ｍｇ／ｃｃのチロキサボールを含有 する。この製剤は、下で、１×サーフアクタント製剤と呼ばれる。３×および６ ×サーフアクタント製剤は、ＤＰＰＣ，ヘキサデカノール、およびチロキサボー ルが各々重量で３倍および６倍に増加していることを除いて、本質的に同じ方法 で調製される。ＮａＣｊ！は３×および６×製剤において、約０．ＩＮ濃度に維 持される。

例２ 試験装置 試験装置は、５ＥＲＶＯ９００Ｃ通気装置（Ｓｉｅｍｅｎｓ−ＥＩｅ＋ｕ　ＡＢ 。

３ｗｅｄｅｎ）および’ＪＩｓＡＮ”噴霧ユニット（Ｖｏ山ｓｎ　Ｍｔｄｉｃｇ ｌＴｅｃｈｎｏｌｏｇ７．　Ｉｎｃ、、　Ｓａｃｔａｍｅｎｊｏ、　Ｃａｌｉｆ ｏｒｎｉｇ）から組み立てた。圧縮空気（５０ｐｓｉ）を酸素／空気混合器に供 給し、分離した噴霧器フローメーターを通過する噴霧器ガス供給を含めて、通気 装置および噴霧器の両者へのガスの供給に用いた。

噴霧制御ユニットは、通気装置の呼吸機能の吸気相の間に霧状化サーファクタン トが断続的に送達されるように、呼吸サイクルの吸気相を制御するレスビレ−タ ーの電気信号源に電気的に接続した。通気装置および噴霧出力は、各々、４リッ トル・エーレンマイヤー〇フィルター争フラスコ内でコイル状になッテいるＴＹ ＧＯＮ”管系ＣＲ−３６０３、内径２．２ｃｍ）の区画に順に接続される患者Ｙ チューブに接続した。フィルター・フラスコの出力は、第２の４リツトル・エー レンマイヤー・フィルター・フラスコ内でコイル状になっているＴＹＧＯＮ”管 系の第２の区画に接続した。コイル状の管系は人工肺として機能し、霧状化サー ファクタント製剤を採取する。フィルター・フラスコはラテックスやグラブで密 封し、各実験に先立ってメタノール／ドライアイス浴中に配置した。実験中は、 凍結に起因するコレクションチューブの閉塞を避けるために、浴温度を調節した 。

通気装置および噴霧ユニットは、合わせた全吸気性−回換気量（Ｖｔ）７５０ｍ Ｌ／呼吸を送達するように設定した。初期−回換気量は、患者Ｙチューブにゴム “肺”を取付け、適当な通気装置のゲージを観察することにより調べた。通気装 置平均気道圧（ｖｕｊｉｌａｔｏｒ　ｍｅａｎ　ｔｉｒｗｔ７　ｐｒｅｚｓｕｒ ｅ　）（ｃｒｙ水）を監視し、開始時および各サンプリング時に記録して系に対 する背圧を決定した。通気装置および噴霧ユニットの機器設定は以下の通りであ る二通気装置は、７０ｃｍ水の作動圧；２０呼吸／分の呼吸率（ｆ）、２５％の 吸入分画例３ 周囲温度および水浴温度での サーファクタント製剤の霧状化 表１に列挙されるパラメータを用いて総計１８の実験を行なった（後の表では、 実験の定義については表１を参照する）。

表　１−　実験パラメータ 変数には、サーフアクタン下製剤濃度（ＩＸ、３Ｘ、６Ｘ）、噴霧器−Ｙ送達チ ューブ長、霧状化浴温度（約２℃の氷水温度、または約２２℃の周囲温度）、お よび霧状化時間を含めた。噴霧器および採取フラスコからの試料は、霧状化開始 の２．４および６時間後に取り出した。噴霧器は開始時および実験の終了時に計 量し、霧状化されたサーファクタントの総量を重量で決定した。所定のサンプリ ング時間に通気装置回路から採取フラスコを取り出してこれを室温と平衡にし、 取り出しの直後に次の１組の冷却流フラスコを設置した。採取された物質の総容 量を測定した後、フラスコおよび７７ｇｏｎ管系の蒸留水すすぎ液１５０ｍ　Ｌ と合わせた。採取およびすすぎ分画を合わせ、混合し、等量を４つの５０ｍＬガ ラスバイアルにアリコートした。

噴霧器試料は、各サンプリング時間に噴霧器から１０ｒｎＬの画分を取り出すこ とにより得た。次いで、噴霧器画分の３ｍＬずつの３の部分をｌＯｍＬガラスバ イアルに移した。採取および噴霧器試料は、いずれも、Ｖｉｒｆｉ＠凍結乾燥機 を３−４日用いて凍結乾燥した。

Ｔｙｇｏｎ管系およびフラスコは、各サンプリング期間の後、熱蒸留水で完全に すすぎ、乾燥させた。噴霧器および通気装置の配管は、各実験の後取り替えた。

凍結乾燥試料をメタノールまたはクロロホルムに溶解し、それらの初期濃度に従 って適当に希釈し、（ａ）ＨＰＬＣ分析によりＤＰＰＣ濃度について、（ｂ）Ｕ Ｖ測定によりチロキサポール濃度について、および（ｃ）ＧＣ分析によりセチル アルコール濃度について試験した。開始時および最終重量から決定された、霧状 化に起因する相対重量損失（これは効率に関係し得る）を表２に示す。この重量 損失の数字には、サンプリングの目的で噴霧器から取り出された３０ｍ　Ｌの液 体が含まれることに注意されたい。この両分はエアロゾル化されてはいないが、 取り出された量は各実験について一定である。したがって、重量損失測定は実験 的な変数の比較に用いることができる。

表　２−　霧状化に起因する相対重量損失表３は各実験により回収された採取フ ラスコ容量を列挙する。各実験は、サーファクタント製剤の再構成強度（ｌＸ、 ３×、または６×）によってグループ分けされている０このデータには、送達チ ューブ長が採取されるサーファクタント製剤の容量または質量に対して重大な影 響を与えることを示唆する傾向はない。また、２．４、および６時間の採取時間 に測定された結果にも大きな相違はない。したがって、データの検査を簡略化す るために、氷および周囲温度での１×、３×、および６×濃度について、採取チ ューブ長および採取された総量の平均を示す。採取画分総質量測定は表４−７に 示す。

表　３−　採取容量（ｍＬ） 表　４−　採取画分−ＤＰＰＣ測定 表　５−　採取画分−チロキサボール測定表　６−　採取画分−セチルアルコー ル測定表　７−　採取画分−塩化ナトリウム測定上記表２−７の分析は、重量、 採取容積、および採取質量決定による霧状化の効率が、氷水噴霧器浴（実験Ａ− Ｉ）と比較して周囲噴霧器浴（実験Ｊ−Ｒ）を用いたほうが高いことを示してい る。

例４ ３７℃でのサーファクタント製剤の霧状化この実験は、３７℃でのサーファクタ ントの霧状化を調べるために行なった。使用した装置は、噴霧器浴と共にＢｒｉ ｎｋｍｉｎＩＣ−２浸漬ヒーター／サーキユレートを用いたことを除いて、本質 的に上記例２に記載したものと同じである。ｌ×、３Ｘ、および６×サ一フアク タント製剤濃度について、３７℃で、二重実験を行なった。実験条件は、（ａ） 全ての実験に１２２ｃｍの送達チューブ長を用い；噴霧器浴温度を３７℃に維持 し；（ｃ）最初に、噴霧器に各サーファクタント製剤を（例２における１５０ｍ 　Ｌに対して）２００ｍＬ充填し；　（ｄ）３Ｘおよび６×実験については４時 間採取期の後にさらに５０ｍＬのサーファクタント製剤を添加し；　（ｅ）採取 容器およびＴ７ｇｏｎ管系のすすぎ容積を各フラスコおよび管系当り（前記研究 における７５ｍ　Ｌと比較して）５０ｍＬ減少させ；および（ｆ）　ＤＰＰＣの 採取＋すすぎ画分の試験を、凍結乾燥の後に行なうよりも試料のメタノール希釈 液に対して直接行なったことを除いて、本質的に上記例２に記載のものと同じで ある。初期噴霧器容量の増加および４時間でのサーファクタント製剤５０ｍＬの 添加は、噴霧器中で再構成した薬剤の十分なレベルを維持するために行なった。

すすぎ容量は、すすぎおよび採取試料画分中のサーファクタント製剤成分を濃縮 するために減じた。

まとめた結果を、上記例３における氷および周囲温度での類似の実験（１２２ｃ ｍ送達チューブ）について得られた値と共に表８に示す。実験が繰り返されてい る場合には、データはプールされている。採取容積および総ＤＰＰＣ質量は、前 記の氷および周囲条件での研究で得られた値と比較して増加した。図１−３は、 回収されたＤＰＰＣの平均総質量を噴霧器浴温度の関数として示す。用いた浴温 度値は、氷（２℃）、周囲（２２℃）、および加熱（３７℃）であった。結果は 、噴霧器浴温度の増加に伴ってＤＰＰＣ総質量が増加することを示している。

表　８−　採取画分−ＤＰＰＣ測定 例−５ ６０℃でのサーファクタント製剤の霧状化この実験は、上述の例４に記載の装置 および実験パラメータを用いて、６０℃でのサーファクタント製剤の霧状化を調 べるために行なった。

まとめた結果を、上記例３および４に記載の氷、周囲および３７℃の温度での類 似の実験（１２２ｃｍ送達チューブ）について以前に得られた値と共に、表９に 示す。実験が繰り返される場合には、データはプールされている。図４−６は、 回収されたＤＰＰＣの平均総質量を噴霧器浴温度の関数として示す。これらのデ ータは、ｌ×および６ｘ再構成体の総ＤＰＰＣ送達が、氷、周囲、および３７℃ の温度での類似の実験について得られた結果と比較して有意に増加したことを示 している。

驚くべきことに、３×サーフアクタント製剤は、６０℃の霧状化温度でのＤＰＰ Ｃ送達において、３７℃での実験において見出されたものと比較して減少を示し た。この効果を生じる機構は知られていない。

表　９−　採取画分−ＤＰＰＣ測定 図面の簡単な説明 図１は、２℃ないし３７℃の範囲の温度に維持される霧状化ｌ×サーファクタン ト製剤から６時間にわたって採取されたジパルミトイルホスファチジルコリン（ ＤＰＰＣ）のミリグラム（ｍｇ）数を示す。

図２は、２℃ないし３７℃の範囲の温度に維持される霧状化３×サーフアクタン ト製剤から６時間にわたって採取されたＤＰＰＣのｍｇ数を示す。

図３は、２℃ないし３７℃の範囲の温度に維持される霧状化６ｘサーフアクタン ト製剤から６時間にわたって採取されたＤＰＰＣのｍｇ数を示す。

図４は、２℃ないし６０℃の範囲の温度に維持される霧状化ｌ×サーファクタン ト製剤から採取されたＤＰＰＣの総量ｇ数を示す。

図５は、２℃ないし６０℃の範囲の温度に維持される霧状化３×サーフアクタン ト製剤から採取されたＤＰＰＣの総量ｇ数を示す。

図６は、２℃ないし６０℃の範囲の温度に維持される霧状化６×サーフアクタン ト製剤から採取されたＤＰＰＣの総量ｇ数を示す。

１ｘサーフアクタント製斉り 温　度　（摂氏度） ３Ｘサーフアクタント製斉す ６Ｘサーフアクタント製剤 温　度　（摂氏度） 図３ １Ｘサーフアクタント製斉り 図４ ３Ｘサーフアクタント製剤 ６Ｘサーフアクタント製斉す 国際調査報告　。、Ｔ２．。。つｌ、、、ｔ、ＬＱ１ｗｗａａ＋ｈｍｌ　ｋｇ１ ４ｋｍ−Ｎ・　ρＣＴ／ＧＢ　９２１０１６６Ｂ国際調査報告

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. １．患者の肺に投与するためのサーフアクタント製剤の調製方法であって、水性 担体中に水性担体１ｍＬ当り約１０ないし約９０ｍｇの量でリン脂質ジパルミト イルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）が分散する分散体を、霧状化および患者 の肺への吸引可能なサーファクタント粒子の送達の前に、約２５℃ないし約９０ ℃の温度に加熱することを特徴とする方法。
2. ２．前記分散体が、少なくとも前記リン脂質の転移温度程度の温度に加熱される 請求の範囲第１項記載の方法。
3. ３．前記サーファクタント分散体がさらに展着剤を含み、かつ前記サーファクタ ント分散体が１ｃｍ当り１５ダイン未満の表面張力を有する請求の範囲第１項記 載の方法。
4. ４．前記展着剤がセチルアルコールである請求の範囲第３項記載の方法。
5. ５．前記分散体が約２５℃ないし約５５℃の温度に加熱され、前記ＤＰＰＣが前 記水性担体中に約５ないし２４ｍｇ／ｍＬの量含まれる請求の範囲第１項記載の 方法。
6. ６．前記分散体が約４５℃ないし約７５℃の温度に加熱され、前記ＤＰＰＣが前 記水性担体中にＩｍＬ当り約７０ないし９０ｍｇの量含まれる請求の範囲第３項 記載の方法。
7. ７．霧状化して吸引可能な粒子とするに適した、肺疾患の治療に用いられるサー ファクタント製剤であって、水性担体中に水性担体ＩｍＬ当り約１０ないし約９ ０ｍｇの量のリン脂質ジパルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）が分散 する分散体を含み、該分散体が霧状化および患者の肺への吸引可能なサーファク タント粒子の送達の前に約２５℃ないし約９０℃の温度に加熱されるサーファク タント製剤。
8. ８．前記分散体が約４５℃ないし約５５℃の温度に加熱され、かつ前記ＤＰＰＣ が約８ないし２０ｍｇ／ｍＬの量含まれる請求の範囲第８項記載のサーファクタ ント製剤。
9. ９．水性担体中に水性担体ＩｍＬ当り約１０ないし約９０ｍｇの量のリン脂質ジ パルミトイルホスファチジルコリン（ＤＰＰＣ）が分散する分散体を投与するこ とを具備する肺疾患の治療法であって、該分散体が霧状化および患者の肺への吸 引可能なサーファクタント粒子の送達の前に約２５℃ないし約９０℃の温度に加 熱される方法。
10. １０．前記分散体が約４５℃ないし約５５℃の温度に加熱され、かつ前記ＤＰＰ Ｃが約８ないし２０ｍｇ／ｍＬの量含まれる請求の範囲第１項または第９項のい ずれか１項に記載の方法。