JPH06504035A - ヒト免疫不全ウィルス感染を阻止するペプチドとその使用法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

ヒト免疫不全ウィルス感染を 阻止工粂さブ光ヒζ丈攻俊里払 この発明は、ヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ）の感染と細胞間における）Ｉ　Ｉ 　Ｖ誘発融合細胞の形成を抑止するペプチドに関する。これらのペプチドは、Ｈ Ｉ　Ｖ感染の治療と予防に有用である。 解包背景 ＨＩＶ−１は、ヒトの後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）およびＡＩＤＳに関連 した症状（ＡＲＣ）の主要な病因として認められている密接に関連しあうウィル スのグループに与えられた名称である。 ＨＩＶ−１は、ｉ（ＴＬＶ−ｍ、ＬＡＶ−ＡＲＶとしても知られ、世界中で健康 上の大問題となっている。 ＨＩＶは少なくとも７個の遺伝子を含む比較的複雑なレトロウィルスである。こ のウィルスの１ｌ（ｌ　、Ｌ９ｉ、ｅｎとと呼ばれる構造遺伝−ｆ−は、それぞ れウィルスの核タンパク質、逆転写酵素、ウィルス外被の糖タンパク質の連子暗 号を有する。ＨＩ　Ｖのその他の遺伝子は、ウィルスの複製に関与する副遺伝子 である。ＪＬＬＬとｅｎｖ遺伝子は、重合タンパク質を暗号化する。すなわち、 これらの各遺伝子から合成されるタンパク質は、翻訳後いくつかのより小さいタ ンパク質に分裂させられる。ＨＩＶゲノムのｍと特にｅｎＶの部分に暗号化され るタンパク質は免疫学的に重要であることが既往の研究により明らかにされてい る。これはｍとｅｎｖ遺伝子の生成物に対する抗体が、ＨＩ　Ｖに感染した患者 の血清中に見出されるからである。 見１ヱ遺伝子は、見掛けの分子量（Ｍｗ）約１６０，０００ダルトンの糖タンパ ク質（ｇｐ１６０）を、翻訳後Ｍｗ　１２０，０００ダルトンのｇＰ１２０とＭ ｗ４１，０００ダルトンのｇｐ４１の２つの糖タンパク質に分裂させて暗号化す る。糖タンパク質ｇｐ１２０はウィルス外被の外部タンパク質であり、ｇｐ４１ は膜内外タンパク質である。タンパク質ｇｐ１２０は細胞表面に露出するように 非共有結合的にｇｐ４１と結合している。ｇｐ１２０．ｇｐ４１はともに免疫原 性があり、これらのタンパク質に対する抗体は、ＨＩ　Ｖに感染しているが無症 候性の患者およびＡＲＣやＡＩＤＳの患者から得られる血清中に容易に見出され る。 ＨＩ　Ｖの外被タンパク質ｇｐ１２０は、Ｔ細胞表面タンパク質ＣＤ４と結合す る。このＣＤ４はＩＩ　Ｉ　Ｖ受容タンパク質としても知られている。タンパク 質ｇｐ１２０は、ＨＩＶ感染においてきわめて重要である。なぜなら、ｇｐ１２ ０は細胞内にＨＩ　Ｖを侵入させるために強い親和力でＣＤ４と結合するからで ある。ＩＩ　Ｉ　Ｖに感染した細胞はｇｐ１２０の細胞表面形状を呈し、またそ の表面からｇｐ１２０タンパク質の可溶性組織が流出する。この細胞外の可溶性 のｇｐ１２０は。 未感染細胞上でＣＤ４と強い親和力で結合し、未知のメカニズムによって細胞の 死をひきおこすと考えられている。感染した細胞が溶解せず、その結果、ｇｐ１ ２０を呈する細胞の生存時間が延長され、ウィルスとｇｐ１２０の貯蔵庫として 機能することは、ＨＩＶ感染に特徴的なことである。 膜内外と細胞質ゾルの連鎖を欠く可溶性の組み換え型ＣＤ４が、１］ＩＶ感染お よび可溶性ｇｐ１２０を媒介とする細胞破壊を阻止し得ることの発見によって強 調されるように、ＨＩＶ感染は、ＣＤ４に結合するｇｐｔｚｏに大きく依存して いる。可溶性のＣＤ４もまた。ＨＩＶに感染した細胞と可溶性のｇｐ　１２０に 結合する。（スミスら：゛″ＣＤ４″ＣＤ４抗原泌組織によるＨＩＶ−１感染の 阻止”のサイエンス、２３８．１７０４−１７０６．１９８７年）しかし、治療 薬としての可溶性ＣＤ４の使用は高価であり、かつ供給と安定性に問題がある。 さらに、ＣＤ４による治療の結果、ＣＤ４に特有な抗体が形成され、その結果自 己免疫症患をともなう可能性がある。（ウエーバー二パウイルスの出口（７）遮 断″、ネイチャー、３４５．５７３−５７４．１９９０年）ＨＩＶ感染は。 細胞から細胞への伝達によっても生じると考えられている。この感染形態は、細 胞外でのＨＩ　ＶとＣＤ４の結合には依存せず、可溶性ＣＤ４のような薬剤では 防止できない、細胞から細胞への伝達を生じさせるために、感染細胞は非感染細 胞ととも１こ融合細胞と呼ばれる媒介を形成して、ウィルスの直接伝達を可能に する。融合細胞は光学顕微鏡で見ることができ、ＨＩＶ感染の指標である。 ＨＩ　Ｖ　−１はＡＩＤＳの病因物質として初めて認められたので、このウィル ス自体やこのウィルスが疾患を生じさせるメカニズムに関する研究、およびウィ ルスへの被曝や感染を発見する診断検査の開発は大きく進歩した。ＨＩＶワクチ ンと治療法は、ウィルスの多相性と適当な動物モデルの不足のため進歩が遅かっ た。（例えば、マーチン：１１速効性スローウィルス″、ネイチャー、３４５． ５７２−５７３．１９９０年参照）ＡＩＤＳ治療に適する薬剤の製剤のために種 々のアプローチがなされてきているが、それらの薬の全てではないにせよ多くは 強烈な劇作用を生じるために、治療薬としての有用性が大幅に制限されている。 薬剤の標的の一つは、ウィルスの増殖にとってきわめて重要なＨＩＶタンパク質 分解酵素である。ＨＩＶタンパク質分解酵素は、アスパラギンタンパク質分解酵 素であるため、Ｈ−２６１（ｔＢｏｃ−）１ｉｓ−Ｐｒｏ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｌ ｅｕφ［Ｃ）１０Ｂ−ＣＨ，］］Ｖａｌ−１１ｅ−Ｈｉｓやアセチルペプスタチ ンのような薬剤によって抑制することができる。（リチャード：“ＨＩＶ−２の アスパラギンプロテイナーゼの抑制”、　ＦＥＢＳ　Ｌｅｔｔ、、２５３．２１ ４−２１６、１９８９年）不幸にしてアスパラギンタンパク質分解酵素の抑制剤 は非選択性であるため、生体内で中毒性を有する。また、ＨＩＶタンパク質分解 酵素を抑制するいくつかのペプチド類似化合物が発見されている６　（ミータら ：″ペプチド類似化合物による感染Ｔ細胞内ＨＩ　Ｖ−１タンパク質分解酵素の 抑制”、ネイチャー、　３４３．９０−９２．１９９０年）最近、ＨＩＶタンパ ク質分解酵素の二重対称抑制剤が発表された。 （エリクソンら：“ＨＩＶ−１タンパク質分解酵素用に複合したＣ２対称抑制剤 の設計、効力、および２．８オングストローム結晶構造”。 サイエンス、２４９．５２７−５３３．１９９０年）コノ対称抑制剤はＨＩＶタ ンパク質分解酵素に対して選択的に作用し、ＨＩ　Ｖタンパク質分解酵素に対し ては、関連する細胞酵素に対する効力の約１０，０００倍の効力を有する。 ＨＩＶの逆転写酵素もまた実際のＨＩ　Ｖの感染のために必要であるため、この 酵素の活性を抑制する薬剤がめられている。いくつかのヌクレオシド派生物がＨ Ｉ　Ｖの逆転写酵素を抑制することが明らかにされている。これらの薬剤の筆頭 はアジドチミジン（ＡＺＴ、シトプシン■）である。しかしＡＺＴは多くの患者 がその投薬に耐えられないほどの強烈な副作用を引き起こす。ＨＩ　Ｖの逆転写 酵素を抑制するその他のヌクレオシド類似物は、ＡＺＴよりもさらに強烈な副作 用を引き起こすことが明らかにされている。 いくつかの薬剤は、　Ｉ−（Ｉ　ＶのＴ細胞との結合を抑制することが明らかに されている０例えば、血管作動性腸内ペプチド（ＶＩＰ）から得られるペンタペ プチドとオクタペプチドは、　ＨＩ　Ｖ感染を抑制することが明らかにされてい る。（ムーアら：″羊の生体内におけるＶＩＰとＩＩ　Ｉ　Ｖ　（Ａ　Ｉ　ＤＳ ）に関連したペプチドによるリンパ球輸送の抑制″、免疫薬理学、１６．１８１ −１８９．１９８８年）残念ながらこれらのペプチドは、Ｔ４細胞の増殖を抑制 することにより、ＩＴＩＶ！＋８染の免疫抑制を擬態する副作用があるため、治 療には用いられない。 最近、ジペプチドプロリルフェニルアラニンの派生物であるＮ−カルボメトキシ カルボニル−プロリル−フェニルアラニルベンジルエステル（ｃ、ｐＦ）が、試 駆管内でＨＩＶ−１の感染を抑制することが示された。ＣＰＦはｇｐ１２０と相 互作用し、ｇＰ１２０のＣＤ４との結合を阻止する。（フィンバーブら：”ＣＰ Ｆのｇｐｔｚｏとの結合によるＩＴＩＶ−１感染の防止とＣＤ４の機能の保護″ 、サイエンス。 ２４Ｑ、　２８７−２９１．１９９０年）はしかウィルスと／＼ルベスウイルス 感染の治療に、小ペゾチドが用１１られる。Ｚ−Ｄ−Ｐｒｏ−Ｄ−Ｐｈｅを含む 一連のカルボベンゾキシ（Ｚ）ベプチ１〜は、はしかとヘルペスウィルスを抑制 することが示されている。 （ミラーら：″はしかウィルスに対するカルボベンゾキシジ（および１１月ペプ チドの抗ウイルス効力″、応用微生物学、１６．１４８９−１４９６゜１９６８ 年；およびニコライデスら二″潜在的抗ウィルス物質。はしかとヘルペスのウィ ルスに対するカルボベンゾキシジ（およびトリ）ペプチドの効力”、医化学会誌 、　１１．７４−７９．１９６８年）これらの化合物は標的の細胞と相互作用し 、ウィルスタンパク質とは相互作用しない。 ＡＩＤＳの治療と予防において、できるだけ副作用の少ない特異的で選択的な抗 ＨＩＶ治療薬が得られれば有用である。 見吸五皿軒 ある比較的短いペプチドが、宿主細胞のＨＩ　Ｖ感染ならびに感染細胞と非感染 細胞の間の融合細胞の形成を有効に抑制し得ることを今回明らかにした。発明し たペプチドは、アミノ酸連鎖Ｐｒｏ−Ｇｌｙ　（Ｐ　Ｇ　）をもつカルボキシル 末端ジペプチド部を共通して在する。トリペプチドＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ　（ Ｇ　Ｐ　Ｇ　）がここで提起する種である。このトリペプチドはそれ自体で使用 するか、もしくはテトラ、ペンタ、ヘキサペプチドを形成するようにアミノ末端 基を延長してもよい、このペプチドはＨＩＶに感染したヒトを含む哺乳類の治療 とＨＩ　Ｖ感染の予防に適している。 図面の簡単な説明 図１はＨ９の細胞内での再現ＨＴＬＶ−Ｉ［ＩＢに対するＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌ ｙとＡＺＴの用量反応実験を示す一組のグラフである０図１については実施例５ で論じる。 図２はＧｌｙ−Ｐｒｏ−ＧｌｙとＡＺＴの共力効果を示す棒グラフである。 図２については、実施例５で論じる。 図３は、　Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙによって処置したマウスの成長を示すグラフ である０図３については、実施例８で論じる。 見叫夏眩綴を腹匪 ジペプチドＰｒｏ−Ｇｌｙとトリペプチドアミノ酸連鎖Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ をもつペプチドが、ＨＩ　Ｖ感染と融合細胞形成の両方を妨げることが今回明ら かになった。こうしたペプチドは、ＨＩＶに感染した患者の治療に役立ち、ＨＩ Ｖ感染の危険がある患者のための予防薬として使用でき、ＨＩＶへの被曝の危険 が深刻な医療機関においても有用である。 表１に列挙したペプチドは本発明に至った研究の過程でテストされたものである 。これらのペプチドはエリクソン＆メリフィールド著ｒタンパク質」第３版（１ ９７６年、ニューヨーク、アカデミツクプレス）第２巻、第３章″固相ペプチド の合成”の方法にしたがって合成したが、技術的に知られているどんな方法によ って合成してもかまわない。 紅 Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ ＾ｒｇ−Ｇｌｙ−ｒ’ｒｏ−Ｇｌｙ Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇ］、ｙ−ＡｒｇＰｒｏ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｌａ Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ Ｐｒｏ−Ｇｌｙ 本使用した略語 これらのペプチドについて、ＨＩＶ感染細胞から非感染細胞への感染の伝播の抑 制能力をテストした。感染の伝播は、ウィルス複製の指標となるＨＩＶタンパク 質ｐ２４の生成と、融合細胞の形成と、間接免疫蛍光法により判定されるＨＩＶ 感染細胞の数とを監視することにより判定した。 いくつかのペプチドがＨＩ　Ｖ感染を確かに抑制したのに対し、驚くべきことに 他の実質的に同一のペプチドはそれができなかった。 表３と表６に示す結果から、カルボキシル末端アミノ酸としてプロリル−グリシ ンをもつペプチドであるＴｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ、　Ｇｌｙ− Ｐｒｏ−Ｇｌｙ、　Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ、およびＰｒｏ−Ｇｌｙは 、ｐ２４レベルと融合細胞形成の両者により判定されるとおり、ＨＩＶ感染を阻 止することがわかる。カルボキシル末端アルギニン残基をもつペプチドであるＧ ｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ、　Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ、 およびＰｒｏ−Ｇｌｙ−Ａｒｇは１分析試験により判定されるとおり、ＨＩＶ感 染を阻止しなかった。アミノ末端アルギニン残基とカルボキシル末端グリシン残 基をもつペプチドは感染を阻止したことから、アルギニン残基の存在自体は、抑 制因子ではなかった。さらに予期しなかった発見として、ペプチドｃｉｙ−ｐｒ ｏ−Ｇｌｙは重量に基づくとＨＩ　Ｖ感染阻止に最も効果的であった。カルボキ シル末端プロリル−グリシンジペプチドをもたないペプチド（Ｇｌｙ−Ｐｒｏ− Ａｌａ、　Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、　Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、　Ｇ ｌｙ−Ｐｒｏ）は、ＨＩ■感染を抑制しない。したがって、カルボキシル末端ジ ブペプチドプロリル−グリシンは今回の発明にとって不可欠である。 したがって、今回の発明は、Ｉ（Ｉ　Ｖ感染を阻止できるペプチドで、カルボキ シル末端にジペプチドＰｒｏ−Ｇｌｙ有するものを対象とする。 提起するペプチドは、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ連鎖のみを有するが、アミノ酸残 基をベゾイドのアミノ末端基に付加しても重大な悪影響はない。実用上の目的の ためには、ペプチドの長さはおよび６個のアミノ酸より短くあるへきである。ペ プチドは、長いほど高価になり、効力が弱くなり、免疫応答を生じることもある ので、実用的ではなくなる。驚くべきことにカルボキシル末端カルボキシル基を もつペプチドがＨＩ　Ｖ感染抑制効果をもたないことが発見されたことから、ペ プチドはカルボキシル末端にカルボキシル基よりもアミド基をもつ方が望ましい 。カルボキシル末端基はまた抗ＨＩＶ効力に妨げない成分を含むこともできる。 特記無き場合は、これらのペプチドはカルボキシル末端にアミド基をもつものと する。 したがって１本発明は下記の分子式のペプチドを対象とする。 これらの化合物は次式で一般的に表される。 ここでＸは、アミド結合した１個がら４個の付加アミノ酸残基あるいはアミノ酸 残基の類似物と水素原字を含む。これらの付加アミノ酸残基は、グリシン、アル ギニル−グリシン、チロシル−アルギニル−グリシン、あるいはそれらの類似物 を含むが、これらに限られるわけではない。 発明したペプチドは、ＨＩＶ６染を避けるための予防と、すてにＨＩＶに感染し た患者の治療の両方に適している。このペプチドは予防薬として誰に対しても用 いることができるが、最も適切な対象者はＩ（ＩＶ感染の危険がある人々である 。そうした対象者には、同性愛者。 売春婦、静脈注射薬物使用昔、血友病患者、）Ｉ　Ｉ　Ｖに感染した母親から産 まれた子供、医療に従事し患者や生物学的標本と接触を持つ人達が含まれるが、 彼らに限定されるわけではない。 これらのペプチドは、ＡＺＴと共力して、様々なＨＩＶ分離分離感染を驚異的に 低減することが、今回明らかになった。したがって、ＡＺＴに耐えるる患者に対 しては、これらのペプチドをＡＺＴと組み合わせて投与することが１本発明の具 体化として望ましい。これらのペプチドは、他の抗ＨＩＶ薬剤と共力しても効果 を発揮すると考えられ、ペプチドとそうした薬剤との組み合わせは、本発明に含 まれる。 これらのペプチドは単体で、あるいは他のペプチドや他の抗ＨＩ　Ｖ薬剤と組み 合わせて投与することができ、さらに生理的に受容できる担体と組み合わせるこ ともできる。特定の組成のペプチドの有効な投与量および投４方法は、個々の患 者と病気の段階と専門家には明らかな他の要因によって変わってくるのであろう 。特定の適用に有用な投与の経路は、専門家には明らかである。投与の経路には ５局所的、経皮、腸管外、胃腸、経気管支、経肺胞その他がある。適切な投薬量 の範囲は、血液レベルで測定して約１〜１０μＭの組織濃度を得るのに十分なペ プチドを供給する範囲である。個々の患者に与えられる絶対量は、生物学的利用 能、浄化率、投与経路などの薬理学的特性による。 ペプチドの毒性が低いため、比較的高い組織濃度が維持されても無害である。 投与の経路には、局所的、経皮、腸管ガ、胃腸、経気管支、経肺胞その他がある 。局所的投与は、ペプチドを含むクリーム、ゲル、リンス等を局所的に用いるこ とにより行われる。経皮投与はペプチドに皮膚を透過させて血流に入れることが できるクリーム、リンス、ゲル等を用いて行われる。腸管外投写経路には、中心 静脈への直接注入、静脈注射、筋肉注射、腹腔内注射、皮Ｆ注射などの電気的も しくは直接、１人その他が含まオしる。胃腸投写経路には、経１」摂取、直腸そ の他が含まれる。経気管支、経肺胞投グ経路には、口あるいは鼻腔を通しての吸 入その他が含まれる。 ＋−発明は、生理的に受容可能な移植組織、軟膏、クリーム、リンス、ゲルその 他の局所的使用に適するペプチド含有化合物の組成を与えるものである。ペプチ ドが少なくとも最少量溶解可能で、製薬が可能であれば、どんな液体、ゲル、も しくは固体の基剤でも、本発明の局所的使用に適する。局所的使用のための組成 は、特に性交中のＨＩ　Ｖ感染防止に有用である。そうした使用に適する組成に は、腟あるいは肛門用の生薬、クリーム、圧注剤その他が含まれる。 経皮投与に適する組成には、直接肌に一つけるかあるいは経皮剤（通常バッチ） のような保護担体の中に取り込ませて製薬可能な懸濁液。 オイル、クリーム、軟膏その他が含まれる。適切なりリーム、軟膏等の例は９例 えば、医師用の便覧を兄ＪＬばわかる。適切な経皮剤の例は。 例えば、１９８９年・１１１４日にチェノらに発行された合衆国特許Ｎα４゜８ １８．３４０に記述されている。 腸管外投与に適する組成には、製薬可能な無菌等脹溶液その他が含まれる。そう した溶液には、ペプチドの中心静脈への注入、静脈注射、筋肉注射、腹腔的注射 、皮下注射のための生理食塩水、リン酸緩衝生理食塩水、その他が含まれる。 本発明には、胃腸投与に適した組成が含まれ、これには、経口投与および直腸投 与全薬用に製薬可能な粉剤２錠剤、液体その他が含まれる。ＨＩＶの最も一般的 な感染経路であることと使用が容易であることから、胃腸投与、特に経口投与は 本発明の実用方法として望ましい。 他のウィルス−宿主系において、経口投与後血清中に小ペプチドの特定の抗ウイ ルス効力が認められることは既に示されている（ミラーら：応用微生物学、　１ ６　：　１４８９．１９６８年）、小ペプチドは、患者の消化器系による分解を 見掛上免れるため、経口投与に理想的である。 本発明には、さらに経気管支、経肺胞投与に適した組成が含まれ、これには、さ まざまな種類の吸入用エアロゾルその他が含まれる０例えば、カリニ肺炎を防ぐ ために、ペンタミジンがエアロゾルによって鼻腔からＡＩＤＳ患者に投与される 。 本発明では、さらにペプチドの経気管支、経肺胞投与に適した装置について熟考 している。そうした装置には、噴霧器、気化器、その他が含まれる。 上記の組成および投与方法は、本発明のペプチドを含む組成の投与方法その他に ついて述べたものである。さまざまな組成と装置の製造方法は、専門技術者の能 力の範囲内であり、ここでは詳しく述べない。 注射９局所的投与、噴霧器、気化器の装置の適切な製造方法は、技術的な既知で あり、詳述しない。 本発明のペプチドは、ＨＩ　Ｖ感染の予防が重要な状況での使用にも適する。例 えば、医療職員は、ＨＩＶ陽性で分泌液や体液がＨＩ　Ｖウィルスを含むかもし れない患者と常に接している。さらに、これらのペプチドは、性交中におけるＨ ＩＶ感染防止のために用いられる抗ウィルス化合物として処方することもできる 。こうした化合物は、技術的に知られており、また参考文献（１９９０年５月３ 日のモダークらに対するＰＣＴ公報Ｎｏ、　１０９０１０４３９０のもとで発表 された国際出願）にも述べられている。 本発明は、さらにＨＩ　Ｖの伝染を防ぐ手袋、シーツ、作業着のような医療用品 の被覆物を与える。また、もうひとつの方法として、これらのペプチドをポリマ ーでできた医療用具の中に含浸させることも可能である。特に、推奨されるのは 、医療用手袋の被覆物である。さらに、ＨＩＶの性的な伝染を考慮すると、コン ドーム用の被覆物はとリオ〕け適切である。 医療用具への使用に適した被覆物は、これらのペプチドを含む粉末、あるいはこ れらのペプチドを懸濁させたポリマー被覆物として与えられる。被覆物もしくは 用具に適切なポリマー材料は、生理的に受容可能であり、治療に有効な量のペプ チドを全体的に拡散させることができるものであるが、これらに限定されるもの ではない。適切なポリマーには、ポリウレタン、ポリメタクリレート、ポリアミ ド、ポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレン、ポリテトラ フルオロエチレン、ポリビニルクロライド、セルロースアセテート、シリコンエ ラストマー、コラーゲン、絹その他が含まれる。これらの被覆物は、参考文献（ フォックスらに１９８６年９月１６日に発行された合衆国特許Ｎｏ、４．６１２ ．３３７）に述べられている。 本発明は、さらに、これらのペプチドと機能的な等価で、ペプチドの抗ウイルス 特性に重大な影響を及ぼさない変異体を含む０例えば、いろいろな類似物や擬態 ペプチドが技術的に知られており、ペプチドの１個以上のアミノ酸と置換して用 いることができる。類似物は、本発明のペプチドと機能的な等価であるが、非自 然的に発生したか変更されたアミノ酸残基を含むペプチドと定義される。さらに 、１個ないし２個以上のこれらのペプチドの重合体も、本発明の範囲内にある。 ペプチド類似物を用いることにより、より効力の大きいペプチドが得られる。こ のペプチドは、酵素による分解に対する感受性がより小さく、中枢神経系への浸 透がより容易で、より選択的である。適切なプロリンの類似物は、天然ペプチド の２０倍の効力が認められている２−アミノシクロペンタンカルボキシルａ＜β Ａ　ｃ　’　ｃ　）である（ミエルケら二″プロリンの擬態ペプチドとしての２ −アミノシクロペンタンカルボキシル酸を含むモルヒセプチン類似物”、ペプチ ドタンパク質研究国際誌、　３５　：　３５−４５．１９９０年；ボートギース ら″メツセージアドレス概念を用いた擬態ペプチドＳオピオイドレセプター拮抗 体の設計”、医化学会誌、　３３　：　１７１４−１７２０．１９９０年；グツ ドマンら二パ擬態ペプチド二合成９分光学、コンピューターシミュレーション” 、バイオポリマー、　２６　：　５２５−５２６．１９８７年　参照）。 既に提案されているペプチドを基剤とするワクチンのひとつの一般的な弱点は、 ＨＩ　Ｖゲノムの異質性によって生じるもので、ひとつの分離種に免疫性があっ たとしても、必ずしも他の分離種に免疫性があるとは限らないというものである 。本発明のペプチドは広い範囲のＨＩＶ分離種に対して防護効果を発揮し、この 弱点を克服している。今回発明したペプチドは、ＩＩ　Ｉ　Ｖのｕ一般種”　（ これは、感染した供血者から得られる）だけではなく、ＨＩＶに感染した動物モ デルの治療の研究に理想的なペプチドを与えて、サルの免疫不全ウィルスをも中 和することが今回明らかにされた。これらのペプチドの多様なＨＩＶ分離種に対 する効力は、おそらくアミノ酸連鎖Ｇｌｙ　−Ｐｒｏ　−Ｇｌｙが広範囲のＩ− （Ｉ　Ｖ分離種の中でよく保存されることに起因するものである（ラローサら： ”ＨＩＶ−１中和決定主因子の保存連鎖と構造要素″。 サイエンス、　２４９　：　９３２−９３５．１９９０年）。 発明の範囲を制限する。意図はまったくないが、以下に特定の実施例を示すこと によって、本発明をさらにわかりやすく説明する。以下の表の中で、アミノ酸残 基は次のように略記されていることに注意されたイ６：Ｇ１ｙ＋　Ｇ；Ｐｒｏ、 　Ｐ；Ａｒｇ＋　Ｒ；Ｔｙｒ＋　Ｙ；Ａｌａ、　Ａ大違■上 ペプチド合成 応用生物系ペプチド合成剤４３０Ａ型が１本発明のペプチドの合成に使用された 。それぞれの合成では、Ｐ−メチルベンジルヒドリルアミン同相支持樹脂（ベプ チ１−インターナショナル、ルイスビル、ＫＹ）を使用した。ペプチド合成剤４ ３ＯＡ型の利用者用便９ｇ、（応用生物系。 １９８６年）に従って、ベブチＩ’を合成した。 合成に用いたアミノ酸はすへてα−ＮＩＩ２群を防護するし一ブチルカルボニル 群（ｔ−Ｂｏｃ）を含み、スイスのツバ生物化学ＡＧから得たものである０反応 性側鎖群をもつアミノ酸は、望ましくない側鎖反応を防止するための付加防護群 を含む、すべてのペプチドの合成に用いた個々の防護アミノ酸を次の表２に示す 。 紅 ペプチドの八　に　いたアミノ Ｂｏｃ−Ａｒｇ　（Ｔｏｓ）−０１１ Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ Ｂｏｃ−Ｐｒｏ−０）Ｉ Ｂｏａ−Ｔｙｒ−（２−Ｂｒ−Ｚ）−０）ＩＢｏｃ−Ａｌａ−ＯＨ Ｔｏｓ＝トシルあるいはＰ−トルエンサルホン酸２−Ｂｒ−Ｚ　＝カルボベンゾ キシブロマイド特定の合成終了後、防護群は合成されたペプチドから除去され、 ペプチドは三フッ素メタルサルフオン酸（ＴＦＭＳＡ）を用いた処理によって固 体支持樹脂から分離される。この処理は、ベルゴツトら二″固相ペプチド合成で の分離試薬としてのトリフルオロメタンサルフォン酸の利用”、応用生物系利用 者報告、ペプチド合成、発行＆１６゜１９８６年９月２日に述べられている方法 に従った。用いた実験記録の詳細を以下に示す。 １、ペプチド樹脂１グラム当たり、排除剤として３ｍｌのチオアニソール１，２ −エタンジチオール（２：１）を加え、室温で１０分間連続撹拌して混合した。 ２、三フッ素酢酸（ＴＦＡ）ｌｏｍｌを加えて、室温で１０分間連続的に撹拌し た。 ３、ＴＦＭＳＡｌｍｌを強力に撹拌しながら滴下して加え、室温で２５分間反応 させた。 ４、分離後ペプチドを無水エーテルで沈殿させ、洗浄した。 ５、沈殿し洗浄されたペプチドを、少量のＴＦＡに溶解させた。 ６、溶解したペプチドは上記ステップ４と同様に再度沈殿、洗浄され、沈殿物を Ｎ２の蒸気で乾燥させた。 特定の検査への使用に先立ち、必要なら逆相の高性能液体クロマトグラフィー（ ＨＰＬＣ）によってペプチドの純度をさらに上げることも可能である。こうした 純化に特に適したカラムは、ペプチドを溶出させる水（Ｔ　Ｆ　Ａ）−アセトニ トリル（Ｔ　Ｆ　Ａ）勾配を用いた逆相ヴイダソク■Ｃ−１８カラムである。 叉胤匠Ａ １束１ 表１に示したペプチドとそのアミノ酸連鎖は、以下のウィルス／細胞系に対して 試験された。 （１）ＨＴＬＶ−１１１Ｂ／Ｈ９デンマーク（デンマーク、ベントフェーバー− ベスターガードによって得られた。）（２）ＨＴＬＶ−１１１Ｂ／Ｉ（９ニュー ヨークにニューヨーク、マンハセント、ノースショア病院、ウィリアム・ホール 博士によって得られた。） （３）ＥＬＴ−Ｌ／ＨＴＪＴ　（サンフランシスコ、ＣＡ、レヴイ博士によって 得られた） ５０％組織組織感染供与１（ｒｃｘｐ、。）１００のウィルスと、濃度２５０な いし２５μｇ　／　ｍ　ｌのペプチドを同時に細胞に加えて、頻繁に撹拌しなが ら４℃で２時間培養した。その後、温度を３７℃に上げて、混合物に第二の培養 を２時間受けさせた。第一の培養に続いて、細胞を３２５Ｘｇて遠心分離し、Ｒ ＰＭＩ法にニューヨーク、ギブコ研究所）で１回洗浄した。成長培養液（１０％ ウシ胎児血清（Ｆｅ２）、抗生物質、ポリブレン（２μｇ　／　ｍ　ｌ　）を補 ったＲＰＭＩ）の最終体積が１．５ｍｌになるように、細胞を濃度５ＸＩＯ’／ ｍｌで２４の多皿滴定井プレートに加えて、さらにペプチドを２５０ないし２５ μｇ　／　ｍ　ｌに希釈して加えた。対照のために、ウィルスに感染した細胞だ けのものと、アジドチミジン（ＡＺＴ、ヅドブジン■）　Ｃ１１度２０，２，０ ．２μＭ）存在下でのウィルスを用いた。さらに対照のために、２個のＨＩ　Ｖ 感染細胞培養液（表３−５ではｐｏｓ、ｃｏｎｔｒｏｌｓ　Ｌおよび２と呼ぶ） と２個の非感染細胞培養ｐ　（ｎｃｇ、　ｃｏｎｔｒｏｌｓ　１および２と呼ぶ ）を用いた。 ペプチドやＡＺＴを加えない成長培養液は、感染後６日および１０［１で交換し た。感染細胞については融合細胞の形成を連続的に監視し、成長培養液の上澄み については、感染後９−１２日に、ＨＩ　Ｖ複製の指標であるｐ２４抗原の分析 を行った。 ｐ２４抗原の検出には、簡単に述べると下記のような実験記録を用いた。抗体捕 捉にウサギの抗ｐ２４多りローン性抗血清を用いてＨＩ■のｐ２４抗原を判定し 、ビオチンで処理したウサギの抗ｐ２４多りローン性抗体を、アビジン−ホース ラディツシュペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）酵素結合免疫吸着検定法（ＥＬＩＳＡ ）での検出抗体として用いた。この検定法の感度は、上澄み１ｍｌ当たり約５０ ｐｇのｐ２４抗原を検出可能である。 結果は４５４ｎｍでの吸光度で示され、吸光度が高いほどタンパク貢濃度が高く 、したがって、ＨＩＶに感染していることを示す、ｐ２４濃度を最も正確な範囲 （２，０吸収単位未満）で検出するために、Ｌ澄みは階段希釈される。 細胞系統ＥＬＩＬ−ＨＵＴがＨＩ　Ｖに感染しても融合細胞を形成しないことは 注意を要する。このため、この細胞系統については、融合細胞の形成は監視しな かった。実験の最後に細胞を集めて、Ｊｅａｎｓｓｏｎらが細胞研究実験、１６ １　：　１８１−１８８．１９８５年で述べている標準的な手順に従ってアセト ンでスライド上に固定した。それから、　１／１００希釈ヒ１−Ｉ（ＩＶ陽性血 清と１／２００希釈ＦＩＴＣ共役抗ヒトガンマＧ（フランス、Ｂｉｏ　Ｍｅｒｉ ｅｕｘ）を用い間接免疫蛍光検査法により、感染細胞数を決定した。得られた結 果を表３−６に示す。 表３−５の結果から、ＨＩ　Ｖに感染して、ペプチドＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ− ＾ｒｇ、　Ａｒｇ−Ｇｉｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ａｒｇ、　Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ａｒ ｇを用いるかあるいは薬剤を用いずに処理した細胞は、感染していたことがわか る。しかし、ペプチドＴｙｒ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ、　Ｇｌｙ−Ｐ ｒｏ−Ｇｌｙ、　Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ、あるいはＡ　Ｚ　Ｔで処理 したＩ（Ｉ　Ｖ感染細胞は、Ｐ２４合成と融合細胞形成の両者による判定の結果 、感染数の低減がみられた。実験に、濃度２５μｇ／ｍｌ（約１００μＭに相当 する）のペプチドＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙが、ｐ２４生成と融合細胞形成の両者 を防止する効果は、最も高い濃度（２０μＭ）で試験したＡＺＴよりもごくわず かに小さいだけであった。　オリゴペプチドＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ａｌａ、　Ｇｌｙ −Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、　Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇ］、ｙ−ＧｌｙおよびジペプチドＧｌ ｙ−Ｐｒｏ、　Ｐｒｏ−Ｇｌｙの効力は、上述のようにＨＴＬＶ−ｍＢ／Ｈ９ニ ューヨークによるウィルスと細胞の組み合わせを用いて評価した。結果を表６に 示す。ｐ２４合成と融合細胞形成の両者による判定の結果、ジペプチドＰｒｏ− ＧｌｙがＨＩ　Ｖ複製を抑制する効果があることは明白である。その他のペプチ ドＧｌｙ−Ｐｒｏ−＾１ａ、　Ｇ］、ｙ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、　Ｇｌｙ−Ｐｒｏ− Ｇｌｙ−Ｇｌｙ、　Ｇｌｙ−Ｐｒｏは、表６に示すように、ＨＩＶ複製を抑制す る効果がなかった。 表３−６で、感染細胞の上澄みのｐ２４含有量は、感染細胞の上澄みを階段１０ 倍希釈（１／１０．１／１００．１／１０００．１／１００００）　して、前述 したＥＬＩＳＡで分析することにより定めた。結果はそれぞれの希釈溶液を吸光 度（４５４ｎｍ）で示した。 大施舅喪− 単純ヘルペスウィルス（Ｈ８Ｖ）複製とペプチドＴｒｙ−Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒ ｏ−Ｇｌｙ、ｉｌこ１９二Ｇ、１ｙ、−Ａｙｇニｐｉｙ二ＪこｒＯ−ＴＬＧｌ→ ｔＱンｆｌイ１ら１１ペプチドの特異性の毒性を決めるために、Ｔｙｒ−Ａｒｇ −Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｇｌｙ−Ｆ’ｒｏ−Ｇｌｙ、　Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐ ｒｏ−Ｇｌｙについて、（１）プラーク低減検査、および（２）Ｉ型単純ヘルペ スウィルス（Ｈ５Ｖ−１）マツキンタイヤ一種の生産抑制検査を行った。 Ｈ５Ｖ−１のプラーク低減は、５ｃｍペトリ皿中で培養されたミドリザル腎１ｍ 　（ＧＭＫ）ＡＨＩ細胞の単層について実施した。ＨＳ　Ｖ　−１の株を１ｍｌ 当たり１００−２００プラ一ク形成単位（ｐｆｕ）に希釈し、濃度２５０および ２５μｇ　／　ｍ　ｌのそれぞれのペプチドの存在■；、あるいはペプチド無し く対照用）で、２０℃で１時間、細胞に吸収させた。そのあと接種物をそれぞれ のペプチドを含む培養液（２％ウシ新生児血清、抗生物質、１％メチルセルロー スで補足したイーグルの最少必須培養液（ＭＥＭ））に取り換えた。３７℃で４ 日間培養した後、プラーク数を数えた。 生産抑制検査は以下のように行った。濃度２５０および２５μｇ／ｍｌのそれぞ れのペプチドの存在下で、ＧＭＫ細胞当たり０　、５　ｐｆｕの多重度で、Ｉ（ ＳＶ−１を接種した。ウィルス吸収は、室温で６０分間行われた。そのあと細胞 をハングの平衡塩類溶液（ＢＳＳ）で５回すすぎ洗いし、３７℃の５％ＣＯ２大 気中で、ペプチドあるいは参照文献に含めた″非環式物質に関するシンポジウム 論文集″（米国医学会誌、１９８２年７月２０日）に述へられている方法に従っ た非環式物質を含むか、あるいは何も添加しない維持液とともに培養した。感染 ２４時間後、細胞を凍結融解し、培養液を削り取って、実施例２に概要を示した 感染検査によりウィルス生産を試験した。結果を表７に示す。 表７でプラーク低減値は２つの培養の平均であり、２４時間後のｌ−Ｉ　５Ｖ− １の生産は、２つの測定値の平均であり、値は百方ｐｆｕ／ｍｌで示した。 プラーク低減とウィルス生産に関しては、表７に示すとおり、ペプチドＴｙｒ− Ａｒｇ−Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ、　Ａｒｇ−Ｇｌｙ −Ｐｒｏ−Ｇｌｙは、ＧＭＫ細胞内でのＨ５Ｖ−１の複製能力を低減させなかっ たことが明らかである。したがって、これらのペプチドは、ＨＩＶ−１への特効 性を有する。しかし、ＨＳ　Ｖ　−１の生産は、２μＭの非環式物質により著し く低減されており、非環式物質は抗ヘルペス特効薬である。さらに、位相差顕微 鏡による形態学的検査の結果と、培養液中のペプチドの存否によってＨ８Ｖ−１ の生産が変わらないことから、これらのペプチドはＧＭＫ細胞に対して毒性を示 さなかったことがわかる。 前述した実験から、本発明のペプチドは、ＨＩＶ感染の危険がある細胞のＨＩ　 Ｖ感染を防止する特異的な効果を有することが明らかであ異的な毒性によるもの ではない。 大施刺千− Ａ−ＺＴ−ζ不−ズチトゆ桂ム登ル世久勉末既知の抗Ｉ（Ｉ　Ｖ薬物とベプナド の組み合わせの効果を知るために、Ｉ（９細胞内のＴ（ＴＬＶ−ＩＩＩＢ、）Ｉ ＵＴ細胞内の５Ｆ−２、およびヒト末梢血リンパ球細胞培養（ＨＰＢＬＣ）内の いくつかの一般種のＨＩ■−を、Ｇ］、ｙ−Ｐｒｏ−Ｇ］、ｙあるいはＰｒｏ− Ｇｌｙ　東独で、もしくはＡＺＴと組み合わせて処理した。 Ｈ９細胞内のＨＴＬＶ−１１１１３１１１ｔＪに対する、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇ１ ３’とＡＺＴの、中独もしくは組み合わせによる抑制効果を１表１０．１１に示 す。 表ｊ、０．１１の結果は、実施例２に述べたようにして得られた。感染８［１後 に上澄みのｐ２４を調べた。上澄みを段階希釈（１１５，１１５０，１１５００ ）　して、実施例２で述べたＥＬＩＳＡで分析した。結果はそれぞれの希釈溶液 の吸光度（４５４ｎｍ）で示した。 ）Ｉ９細胞内の】（Ｔ（、ｖ−ｍｎｌｔｌｌＱに対する、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌ ｙとＡＺＴの抑制効果を、用量反応実験でさらに調へた。それによって、感染後 ８［３および１２［３の細胞培養からの感染細胞の上澄みの１１５希釈液中の、 ４５４ｎｍでの吸光度で決定されるｐ２４抗原濃度に基づいて、近（以的な１１ ）、。（ウィルスの生産を５０％に低減する薬物の抑制用量）を計算した。８日 日に、濃度４μＭのＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙと、０．４μＭのＡ　Ｚ　Ｔで、ｐ ２４抗原は５０％に低減さｈた（図１ａ、ｌｂ）、感染１２　ｒＪ　後での対応 する値は、Ｇｌｙ−１’ｒｏ−ＧｌｙとＡＺＴでそれぞれ６４μＮ１と３．２μ Ｍであった（図１ｃ、ｌｄ）。 ｆｉｌｏ、１１に示すように、ＡｚＴの濃度を固定して（０，８および１　、６ 　ｐ　Ｍ）　Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙの濃度を変化させ（２−２５６μＭ）、Ｇ ｌｙ−Ｐｒｏ−ＧｌｙとＡＺＴを２０：１と２：１の比で組み合わせることによ り、明らかにＨＩＶ複製を抑制する相加的かつ共力的な効果が見られた。そのた め、３．２μＭ以下のＡＺＴを含む培養液に３２−６４μＭのＧｌｙ−Ｐｒｏ− Ｇｌｙを混合した培養液中のｐ２４水準（感染後１２日で検査）は、それぞれの 薬剤を単独で含む対照用の培養液中の２２４よりも著しく低かった（図２）。 大遡銭旦 ペプチド≦４擾二Ｌ」 Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙによる５種類の一膜種のＨＩＶ−１の中和実験の結果を 表１−２に示す。１０”供血ＰＢＭＣ（末梢血単核細胞）をもつ５種類の異なる ＨＩＶ−１感染ス工−デン個体から、１０’ＰＢＭＣとの共培養によって、５種 類のＨＩＶ−１分離種（−膜種）を回収し、２゜５μｇ／ｍｌの植物性血球凝集 素（ＰＨＡ：ミシガン州、デトロイト、ＤＩＦＣＯ）を用いて、３日間刺激した 。１０％ウシ胎児血清（Ｆｅ２）、インターロイキン−２（１０％細胞増殖因子 、細胞生成物、バッファロー、ニューヨーク）、２μｇ／ｍｌのポリブレン、抗 生物質、５μｇ／ｍｌのヒドロコルチゾンアセテートを補足したＲＰＭＩ　１６ ４０培養液内で細胞培養を維持した。培養液の半分は、３日ないし４日に一度交 換し、新たにＰＨＡで刺激した細胞を７日周期で加えた。 どの分離種にもＰＢＭＣに融合細胞は見られなかった。培養液の上澄みについて 、取扱説明Ｍ（アボット）に従って、ＨＩＶ−１のｐ２４抗原を検査し、陽性の 場合は、ウィルス分離種を一９０℃で凍結貯蔵した。患者分離種の滴定終末点は １００から４００ＴＣＩＤ□の範囲にあった。これらの分離種の貯蔵ウィルスを 、１００ＴＣＩＤ、。に希釈し、Ｇ１．ｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙの４　ｍ　Ｍで始ま る階段４倍希釈液およびＡＺＴの２０μＭで始まる階段１０倍希釈液と混合した 。そのあと、このウィルス−薬剤混合物を、実施例２に述べた方法に従って、１ ０’刺激供血Ｐ　Ｂ　Ｍ　Ｃに加えた。そしてウィルスを４℃と３７℃でそれぞ れ吸収させたあと、ＰＢＭＣを１回洗浄し、表１２に示すように希釈した薬剤（ Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−ＧｌｙとＡＺＴ）を含む２ｍｌのＰＢＭＣに培養液とともに、 ２４滴定井の多血プレートに配置した。感染１３日後に感染細胞の上澄みを集め 、実施例２て述べたＥｌ、ＩＳＡにより、４倍希釈液中でＩ（ＩＶ−１のｐ２４ 抗原の存在を検査した。 表１２に示した結果は、ペプチドがＨＩ　Ｖの一膜種の治療に有効であることを 示している。さらに、これらのペプチドは無関係なＨＩＶの系統の治療にも役立 ち、したがって、ＨＩＶに対する治療薬として広い適用性を有する。 失亀桝ユ ヘズＬド匿灸）丈夾九及玉余フィーに不＝ｑ面療実施例６に示したように、（ｉ ｌｙ−ｐｒｏ−ＧｌｙとＰｒｏ−Ｇｌｙは、Ｈ９細胞（７）ＨＴＬＶ−１１１Ｂ 、ＨＵＴ細胞の５Ｆ−２、およびＨＰＢＬＣ中のＨＩＶ−１のいくつかの一膜種 に対して抗ウイルス効果を示すが、さらにそｈに加えて、　Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇ ｌｙとＰｒｏ−Ｇｌｙは、２つの別々の実験で示されるように、サル免疫不全ウ ィルス（ＳＩＶ）の複製も抑制する。 結果を表１３．１４に示す。 これらの実験では、実施例２に概要を示した手順に従い、希釈しないＳＩＶの懸 濁液（ストックホルム大学、力ロリンス力研究所、工ヴア・マリア・フェンヨ博 士提供）で、Ｉ　Ｘ　１０’ＨｐＢ　ＬＣを感染させた。感染の２週間後に、感 染した細胞の上澄みを集め、取扱説明書に従ってアボットＨＩＶ−１抗原検査に よりｐ２４抗原を検査した。 」二澄みのｐ２４量は、階段希釈した上澄みの試料（１１５，１１５０，１１５ ００）についてＥＬＩＳＡにより測定し、それぞれの希釈溶液の吸光度（４５４ ｎｍ）で示した。 表１３と１４に示した結果から、これらの実験では、ＳＩＶは１ｍＭのＧｌｙ− Ｐｒｏ−Ｇｌｙと４ｍＭのＰｒｏ−Ｇｌｙによって抑制され、すなわち、同一の ペプチドではＨ９細胞のＨＴＬＶ−１１１Ｂよりも抑制の程度が小さいことがわ かる。これらの結果は、ＨＩ　ＶとＡＩＤＳの動物実験にこれらのペプチドが役 立つことを示している。 叉亀医旦 ペグ天１法 Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙの生体内での毒性の試験では、マウスのグループに。 生後６日日からのこの物質を腹腔に注射した。与えたＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙの 量と体重の増加を表１５に示す。また、図３は結果をグラフで示したものである 。ニオしらのデータは、対照物と比較してＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙがマウスの成 長に大きな影響を及ぼさないことを示している。それゆえペプチドは多量に与え ても毒性はない。 叉塵舅旦 Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙは正常なＴ細胞とＢ細胞機「二影響を及ぼさないことが 明らかになった。ヒトとマウスの組織について、それぞれ試験管内と生体内で物 質を調べた。生体内実験については実施例１１で述べた。 健康で正常な供血者から採った末梢血単核細胞懸濁液を、非分割またはＴ細胞を 強化しくＣＤ２”　＝正常なＴ細胞；ＣＤ４”　＝推定ヘルパー／インデューサ ーＴ細胞サブセット；ＣＤ８’　＝推定細胞毒性／サプレッサーＴ細胞サブセッ ト）　、　Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙを加えることにより、正常なヒトの循環リン パ単球細胞の生育力もしくは機能にＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙが影響する可能性を 調べた。 ″細胞免疫学的手法抜粋″（ミツシェル＆シギ編集、フリーマン社、サンフラン シスコ、ｐｐ、２０５−２０７．１９１１１０年）に記述されている方法に従い 、はじめにヒツジの赤血球細胞を用いたロゼソティングにより強化し、次に、ジ ャノソシーとアルムロソトが１１リンパ球の実用的アプローチ′°（クラウス編 、ＩＲＬ出版、オツクスフオードーワシントンＤｃ、　ｐＰ、６９−７０．１９ ８７年）で記載している方法に従い、フィコール−パークの比重差遠心（スエー デン、ウプサラ、ファーマシア）によって、ヒトの血液からＴ細胞を取り出した 。強化したＴＪ４［１胞は、赤血球細胞を溶解するため、ＮＨ４Ｃｌ１−リス緩 衝溶液に４℃で５分間、簡単に再懸濁される。こうして得られたＴ細胞強化片を 、それぞれＣＤ８とＣＤ　４に対する単一クローン性抗体で被覆した均散磁気ビ ーズ（ダイナビーズ、Ｄ　Ｙ　Ｎ　Ａ　Ｌ社、オスロ、ノルウェー）を用いて、 参考文献に示したヴアートダルら（組織抗原、２８　：　３０２−３１２．１９ ８６年）とライベスタンドら（移植論文集、１９．２６５−２６７、１９８７年 ）が述べた方法に従い、免疫磁気細胞選別により、ＣＤ４強化Ｔ細胞とＣＤ８強 化Ｔ細胞にさらに分離した６ダイナビーズは、対応するＴ細胞サブセットの選択 除去のための取扱説明書に従って使用した。 種々の濃度のＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙを与えた正常な単核細胞（ＭＮＣ）の生育 力を、フィントレーらによる参考文献（血液、１５；７５：９５１−９５７．１ ９９０年）で述べられている方法に従って、プロピジウムヨウ化物で処理したあ と、流動血球計算法で４日間毎日監視した。この実験の結果、２ｍＭもの用量で ４日間もＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙを与えても、培養された単核細胞とリンパ球の 生育力に対して評価できるほどの影響は生じなかりたことが明らかになった。そ のため、　Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙを（２ｍＭ、４０間）学えた末梢血単核細胞 の生育力は、９０．６７％であり、与えなかったものでは、９９．６６％（４実 験の平均値）であった。 非分割またはＴ細胞強化（ＤＹＮＡＬ社、オス口、ノルウェーの取扱説明書に従 って、ダイナビーズＭ−４５０ＣＤ４またはダイナビーズＭ　−４５０ＣＤを用 いて強化したＣＤ４”　またはＣＩ）８”　）を並列的に曝露したあと、正常な Ｔ細胞の増殖反応を試験管内で検査した。 ヴアートダルら（１９８６年）とライベスタッドら（１９８７年）。 補助細胞組ＩＩｔ２個を含む３組織のＭＮＣ懸濁液にＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙと 慣用Ｔ細胞分裂促進因子を与え、第一に、参考文献（欧州免疫学会誌、２１：３ １９−３２５．１９９１年）で山田らが述入でいる方法に従って、植物性血球凝 集素あるいは可溶単一クローン性抗ＣＤ３抗体により、単核細胞依存刺激を与え 、第２に、非依存的に、すなわち参考文献（免疫学、６８　：　４５−５０．１ ９８９年）でＶａｎＬｉｅｒらが述べている方法に従って、固定化固相抗ＣＤ３ 単一クローン性抗体によって刺激を与えた。結果は以下のように計算される刺激 指数で示した。二分劣促進因子のみあるいは分裂促進因子プラスＧｌｙ−Ｐｒｏ −Ｇｌｙに曝露した細胞培養中に含まれる放射性チミジンを、培養基のみに曝露 した同一の細胞培養中に含まれる放射性チミジンで除した比。 これらの実験の結果は表１６にまとめられており、（ｉｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙを ２０μＭもの高い用量で用いても、Ｔ細胞の増殖を阻害する性質はほとんど表れ ず、上記の２つの組織で存在が必要とされる補助細胞（例えば、単核細胞および 樹枝状細胞）の機能に影響しないことを示している。 大癒桝１上 マウスの　へのペプチドの 体液特異抗体反応の発達に及ぼすＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙの影響を、マウスで調 べた。この目的のために、成熟した（生後４週、＠雄同数）スイス・アルピノ異 種交配マウスに、５日連続で毎日腹腔内にＧｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙを注射して与 えた。対照用のグループには、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙを与えなかったのに対し 、第２、第３のグループにはそれぞれ０　、５　ｍ　ｇと５　ｍ　ｇのＧｌｙ− Ｐｒｏ−Ｇｌｙを与えた。 前処理したマウスはその後、無関係な抗原、部分抗原トリニトロフェノール（Ｔ ＮＰ）に対する抗体反応を調べた。後者は、抗体反応を生じるためにマウスのＴ 細胞による認識が必要とされない″担体”分子（リポ多糖類（ＬＰＳ）およびフ ィコール（Ｆｉ））あるいは必要とぎれる″担体″分子（卵白アルブミン（ＯＶ Ａ））と結合されている。 Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙの最終投与後、ただちに、すなわち第５日に、マウスを ５匹ずつのグループに分け、参考文献（免疫学会誌、１３１．６３３−６３７゜ １９８３年）でモンドらが述べている方法に従って、Ｔ細胞依存抗原すなわちト リニトロフェニル卵白アルブミン（ＯＶＡ−ＴＮＰ）、あるいはトリニトロフェ ニルリポ多糖類（ＬＰＳ−ＴＮＰ）やトリニトロフェニルフィコール（Ｆｉ−Ｔ ＮＰ）のようなＴ細胞非依存抗原のどちらかを、３週間の間隔をあけて２回腹腔 内に注射して免疫を与えた。 すべての部分抗原−担体結合は、参考文献（米国化学会誌、７５：４５８３゜１ ９５３年）でアイゼンが述べている方法に従って用意した。マウスに投与した用 量は以下のとおりである。 ０ＶＡ−ＴＮＰ　； 注射１回当たり１００μｇ（タンパク質量）○ＶＡ−ＴＮＰ（７）平均置換率＝ １　：　２０ＬＰＳ−ＴＮＰ　； 注射１回当たり２５μｇ　（ＬＰＳ重量）ＬＰＳ−ＴＮＰの平均置換率＝１：５ フィコール−ＴＮＰ　； 注射１回当たり１００μｇ（フィコール重量）フィコール：　ＴＮＰの平均置換 率＝１　：　３０２回目の注射から２週間後に集めた血清試料について、ＥＬＩ ＳＡ法によって、ＴＮＰグループにμする血清抗体反応を監視した。この目的で 、ガンマＧ抗体の各サブクラス、すなわちガンマＧ１、ガンマＧ２ａ、ガンマＧ ２ｂ、ガンマＧ３、およびマクログロブリン抗体についてＥＬＩＳＡ分析を行っ た。 ＥＬＩＳＡ検査は以下のように行った。ポリビニルマイクロタイタブレート内の 各滴定弁を、参考文献（免疫学的手法ジャーナル、８５゜８７−９４．１９８５ 年）でニグレンらが述べている方法に従い、ＴＮＰと結合したイヌアルブミンで 被覆した。それから階段２倍希釈した個々のマウスの血清を、対の試料に加えて 培養した。そのあと、マウスのガンマＧ１．ガンマＧ２ａ、ｉンマＧ２ｂ、ガン マＧ３、あるいはマクログロブリンに対する酵素標識ヤギ抗体（すべてアラバマ 州バーミングハム、南部生物工学協会から得られた）および酵素基質を段階的に 加えて、ＴＮＰ反応性抗体を検出した。血清ではなく緩衝液単体を加えた対照用 試料のＥＬＩＳＡ吸光度の３倍のＥＬＩＳＡ吸光度を与える血清の最高希釈倍数 の逆数として定義される終末滴定点で結果を表した。 こうした分析の結果は表１７にまとめており、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙを高い用 量（５ｍｇ／日／匹、５日間）で用いても、Ｇｌｙ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙで前処理し なかったマウス（表１７の非免疫マウス）と比較して、Ｔ細胞依存抗原（例えば 、０ＶＡ−ＴＮＰと非依存抗原（ＬＰＳ−ＴＮＰあるいはＦｉ−ＴＮＰ）に対す るマウスの体液免疫反応性に評価できるほどの影響を与えないことを示している 。統計的に分析すると、非免疫マウスから得られた結果を前処理したマウスから 得られた結果と比較したときの、ｐ（ウィルコクソンのレンジサムテスト）は０ ．０５であった。 ＰＧ ＧＰＧ ＪｉＬ／￥萄 ＦＩＧ、　３ ＧＰＱで処置したマウスの体重増加 処置開始後の日数 マウス（１グループ当たり６匹）１：生後６日目かう７日間腹腔注射した補正書 の写しく翻訳文）提出書（特許法第１８４条の８）国際出願番号　ＰＣＴ／５Ｅ ９１１００５１１・１２、発明の名称　ヒト免疫不全ウィルス感染を阻止するペ プチドとその使用法 ３、特許出願人 住　所　スウェーデン、ニス−４３０８０フオヴオス、イゲルコッツシュチーゲ ン１４ニー 氏　名（名称）　ヴアルネ、アンプルシュ　（ほか４名）国　籍　スウェーデン ４、代理人 住　所　〒２３１　横浜市中区不老町１−２−１中央第６関内ビル１００１ なぎさ特許事務所 ５、補正書の提出年月日 １９９２年１２月１５日（特許請求の範［１−４，１ｌ−３１）１９９２年１２ 月１８日（特許請求の範囲５−１０）６、添付書類の目録 補正書の写しく翻訳文）　１通 補正さｊした特許請求の範囲

【請求項１１ の分子式または類似の分子式のペプチドを被検者に治療有効量を投与することに より成るヒトを含む哺乳類被検者におけるヒト免疫不全ウィルス感染の治療と予 防方法において、前記分子式中のＸを水素と、アミド結合した１個乃至略４個の 付加アミノ酸残基またはアミノ酸残基の＊ｉ物より成る群から選択することを特 徴としたヒト免疫不全ウィルス感染の治療および予防方法。 （請求項２）　前記のＸをグリシン、アルギニル・グリシンおよびチロシル・ア ルギニル・グリシンまたは類似のものより成る群から選択することを特徴とする 請求項第１項に記載の方法。 【請求項３】　前記の投与方法を非経口注入、直接肺注入、胃腸２局所および経 皮投与より成る群から選択することを特徴とする請求項第１項に記載の方法。

【請求項４】　前記の投与方法が非経口注入であり、中枢静脈線への注射、直接 静脈注射、筋肉注射、皮下注射および腹腔内注射より成る群から選択することを 特徴とする請求項第３項に記載の方法。

【請求項５１　前記の投与方法が直接肺注入であり、直接気管内注入および気道 系を経由した吸入より成る群から選択することを特徴とする請求項第３項に記載 の方法。 【：５求項６】　前記の投与方法が胃ｇ投与であることを特徴とする請求項第３ 項に記載の方法。

【請求項７】　前記の投与方法が局所投与であることを特徴とする請求項第３項 に記載の方法。

【請求項８】　前記の投与方法が経皮投与であることを特徴とする請求項第３項 に記載の方法。

【請求項９】 の分子式または類似の分子式のペプチドより成るヒトを含む哺乳類被検者におけ るヒト免疫不全ウィルス感染の治療と予防方法において。 前記分子式中のＸを水素と、アミド結合した１個乃至略４個の付加アミノ酸残基 またはアミノ酸残基の類似物より成る群から選択し、Ｘがグリシンであることが 排除されることを特徴としたヒト免疫不全ウィルス感染の治療と予防方法。

【請求項１０】　前記のＸをアルギニル・グリシンおよびチロシル・アルギニル ・グリシンまたは類似のものより成る群から選択することを特徴とする請求項第 ９項に記載の装置。

【請求項１１】 の分子式または類似の分子式のペプチドより成る組成の使用において、前記分子 式中のＸが、ヒトを含む哺乳類被検者におけるヒト免疫不全ウィルス感染の治療 と予防用組成を調製するためのグリシンであることを特徴とした組成の使用方法 。

【請求項１２】 の分子式または類似の分子式のペプチドの治療上有効な量よりなる噴震装置にお いて、前記分子式中のＸが、薬学的に摂取可能な担体に懸濁させた水素と、アミ ド結合した１個乃至４個の付加アミノ酸残基またはアミノ酸残基の類似物と前記 懸濁物を拡散する手段より成る群がら選択することを特徴とした噴霧装置。

【請求項１３】　前記のＸをグリシン、アルギニル・グリシンおよびチロシル・ アルギニル・グリシンより成る群から選択することを特徴とする請求項第１２項 に記載の組成。

【請求項１４） の分子式または類似の分子式のペプチドの治療上有効な量より成る。 ヒトを含む哺乳類被検者におけるヒト免疫不全ウィルス感染の治療と予防用の局 所投与用組成において、前記分子式中のＸを、薬学的に摂取可能な担体に懸濁さ せた。水素と、アミド結合した１個乃至４個の付加アミノ酸残基またはアミノ酸 残基の類似物より成る群から選択することを特徴とした局所投与用組成。 【請求項１５】　前記の担体を軟膏、乳剤、リンス、ゲルおよび経皮装置より成 る群から選択することを特徴とする請求項第１４項に記載の組成。

【請求項１６】　前記、のＸをグリシン、アルギニル・グリシンおよびチロシル ・アルギニル・グリシンまたは類似のものより成る群から選択することを特徴と する請求項第１４項に記載の組成。

【請求項１７】 の分子式または類はの分子式のペプチドの治療上有効な量より成る胃腸投与用組 成において、前記分子式中のＸを、水素と、アミド結合した１個乃至４個の付加 アミノｍ残基またはアミノ酸残基の類似物と薬学的に摂取可能な担体とより成る 群から選択することを特徴とした胃腸投与用組成。

【請求項１８】　前記のＸをグリシン、アルギニル・グリシンおよびチロシル・ アルギニル・グリシンまたは類似のものより成る群から選択することを特徴とす る請求項第１７項に記載の組成。

【請求項１９］　前記の薬学的に摂取可能な担体を錠剤、粉末剤、液剤および膣 剤より成る群から選択することを特徴とする請求項第１７項に記載の組成。 ［請求項２０］ の分子式または類似の分子式のペプチドの治療上有効な量より成、る、ヒトを含 む哺乳類被検者におけるヒト免疫不全ウィルス感染の治療と予防用の非経口投与 用組成において、前記分子式中のＸを、水素と。 アミド結合した１個乃至４個の付加アミノ酸残基またはアミノ酸残基の類似物と 、薬学的に摂取可能な担体とより成る群から選択することを特徴とした非経口投 与用組成。 【請求項２１１　前記のＸをグリシン、アルギニル・グリシンおよびチロシル・ アルギ４ル・グリシンまたは類似のものとより成る群から選択することを特徴と する請求項第２０項に記載の組成。 【請求項２２】　前記の薬学的に摂取可能な担体を等優性生理食塩水と等優性リ ン酸緩衝生理食塩水より成る群から選択することを特徴とする請求項第２０項に 記載の組成。

【請求項２３】 の分子式または類似の分子式のペプチドの治療上有効な凰より成る経皮投与用組 成において、前記分子式中のＸを、水素と、アミド結合した１ｇ乃至４個の付加 アミノ酸残基またはアミノ酸残基の類似物と、薬学的に摂取可能な担体とより成 る群から選択することを特徴とした経皮投与用組成。

【請求項２４】　前記の薬学的に摂取可能な担体をローション剤、Ｓ濁剤、オイ ル、軟膏、クリーム、リンス、ゲルと経皮装置とより成る群から選択することを 特徴とする請求項第２３項に記載の組成。

【請求項２５１ の分子式または類似の分子式のペプチドの治療上有効な量より成る被覆医療装置 用組成において、前記分子式中のＸを、水素と、アミド結合した１個乃至４個の 付加アミノ酸残基またはアミノ酸残基の類似物と、薬学的に摂取可能な担体とよ り成る群から選択することを特徴とした被覆医療装置用組成。 ［１求項２６］　前記の薬学的に摂取可能な担体がペプチドの治療上有効な量が 通過拡散出来る重合体被覆であることを特徴とする請求項第２５項に記載の組成 。 【請求項２７】　前記の重合体がポリウレタン、ポリメタクリレート。 ポリアミド、ポリエステル、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレン、４ ふっ化エチレン樹脂、塩化ビニル樹脂、酢酸繊維素、シリコンエラストマー、コ ラーゲンおよびシルクより成る群から選択することを特徴とする請求項第２６項 に記載の重合体被覆。

【請求項２８】 の分子式または類似の分子式のペプチド。

【ｒ！求項２９】 の分子式または類１以の分子式のペプチド。

【請求項３０１ の分子式または、＊４ｇ、の分子式のペプチド。 【請求項３１】 の式または類似の分子式のペプチドで、前記分子式中のＸを、グリシン、アルギ ニル・グリシンおよびチロシル・アルギニル・グリシンまたは類似のものより成 る群がら選択することを特徴としたペプチド。 国際調査報告 １．１ｗ＋ｔｅＮｍｍＡｐｍｉｃｅ＋Ｍ＃＆　ＰＣＴ／ＳＥ　９１１００５４４ １＊１１．Ｉ＾−Ｉ（至）−鱒も訂／ＳＥ　９１１００５赫国際調査報告 フロントページの続き （８１）指定回　ＥＰ（ＡＴ、ＢＥ、ＣＨ，ＤＥ。 ＤＫ、　ＥＳ、　ＦＲ，ＧＢ、　ＧＲ，ＩＴ、　ＬＵ、　ＮＬ、　ＳＥ）、０Ａ （ＢＦ、ＢＪ、ＣＦ、ＣＧ、ＣＩ、ＣＭ、ＧＡ、　ＧＮ、　ＭＬ、　ＭＲ，ＳＮ 、　ＴＤ、　ＴＧ）、　ＡＵ、　ＢＢ、　ＢＧ、　ＢＲ，ＣＡ、　ＦＩ、　ＨＵ 、　ＪＰ、　ＫＰ、　ＫＲ。 ＬＫ、　ＭＣ，ＭＧ、　ＭＷ、　Ｎｏ、　ＰＬ、　ＲＯ，ＳＤ、　ＳＵ、ＵＳ （７１）出願人　ホラール、ペーテル スウェーデン、ニス−４１２６６エーテボリ、オランゲリガータン　２１　ビー （７２）発明者　ヴアルネ、アシデルシュスウェーデン、ニス−４３０８０フオ ヴオス、イゲルコッツシュチーゲン　１４ニー（７２）発明者　スヴエンネルフ ォルム、ヴオースウェーデン、ニス−４１２６８エーテボリ、ヤコブシュダール シュガータン　４８（７２）発明者　リューモ、ラーシュ スウェーデン、ニス−４３０８０フォヴオス、フェーレクラヴエーゲン　１７ （７２）発明者　ヤンション、スチク スウェーデン、ニス−４１１２７エーテボ１バフェーレニンシュガータン　３３ （７２）発明者　ホラール、ペーテル スウェーデン、ニス−４１２６６エーテボリ、オランゲリガータン　２１　ビー

Claims (30)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ▲数式、化学式、表等があります▼ の分子式または類似の分子式のペプチドを被検者に治療有効量投与することによ り成るヒトを含む補乳類被検者におけるヒト免疫不全ウイルス感染の治療と予防 方法において、前記分子式中のＸを水素と、アミド結合した１個乃至略４個の付 加アミノ酸残基またはアミノ酸残基の類似物より成る群から選択することを特徴 としたヒト免疫不全ウイルス感染の治療および予防の方法。
2. 【請求項２】 前記Ｘをグリシン、アルギニル・グリシンおよびチロシル・アルギニル・グリシ ンまたは類似のものより成る群から選択することを特徴とした請求項第１項に記 載の方法。
3. 【請求項３】 前記の投与方法を非経口注入、直接肺注入、胃腸、局所および経皮投与より成る 群から選択することを特徴とした請求項第１項に記載の方法。
4. 【請求項４】 前記の投与方法が非経口注入であり、中枢静脈線への注射、直接静脈注射、筋肉 注射、皮下注射および腹腔内注射より成る群から選択することを特徴とした請求 項第３項に記載の方法。
5. 【請求項５】 前記の投与方法が直接肺注入であり、直接気管内注入および気道系を経由した吸 入より成る群から選択することを特徴とした請求項第３項に記載の方法。
6. 【請求項６】 前記の投与方法が胃腸への投与であることを特徴とした請求項第３項に記載の方 法。
7. 【請求項７】 前記の投与方法が局所投与であることを特徴とした請求項第３項に記載の方法。
8. 【請求項８】 前記の投与方法が経皮投与であることを特徴とした請求項第３項に記載の方法。
9. 【請求項９】 ▲数式、化学式、表等があります▼ の分子式または類似の分子式のペプチドの治療上有効な量より成る噴霧装置にお いて、前記分子式中のＸを、薬学的に摂取可能な担体に懸濁させた水素と、アミ ド結合した１個乃至４個の付加アミノ酸残基またはアミノ酸残基の類似物と前記 懸濁物を投薬する手段とより成る群から選択することを特徴とした噴霧装置。
10. 【請求項１０】 前記のＸをグリシン、アルギニル・グリシンおよびチロシル・アルギニル・グリ シンまたは類似のものより成る群から選択することを特徴とした請求項第９項に 記載の装置。
11. 【請求項１１】 ▲数式、化学式、表等があります▼ の分子式または類似の分子式のペプチドの治療上有効な量より成る局所投与用組 成において、前記分子式中のＸを、薬学的に摂取可能な担体に懸濁させた水素と 、アミド結合した１個乃至４個の付加アミノ酸残基またはアミノ酸残基の類似物 とより成る群から選択することを特徴とした局所投与用組成。
12. 【請求項１２】 前記の担体を外用薬、乳剤、リンス、ゲルおよび経皮装置より成る群から選択す ることを特徴とした請求項第１１項に記載の組成。
13. 【請求項１３】 前記のＸをグリシン、アルギニル・グリシンおよびチロシル・アルギニル・グリ シンまたは類似のものより成る群から選択することを特徴とした請求項第１１項 に記載の組成。
14. 【請求項１４】 ▲数式、化学式、表等があります▼ の分子式または類似の分子式のペプチドの治療上有効な量より成る胃腸投与用組 成において、前記分子式中のＸを、水素と、アミド結合した１個乃至４個の付加 アミ酸残基またはアミノ酸残基の類似物と薬学的に摂取可能な担体とより成る群 から選択することを特徴とした胃腸投与用組成。
15. 【請求項１５】 前記のＸをグリシン、アルギニル・グリシンおよびチロシル・アルギニル・グリ シンまたは類似のものより成る群から選択することを特徴とした請求項第１４項 に記載の組成。
16. 【請求項１６】 前記の薬学的に摂取可能な担体を錠剤、粉末剤、液剤および座剤より成る群から 選択することを特徴とした請求項第１４項に記載の組成。
17. 【請求項１７】 ▲数式、化学式、表等があります▼ の分子式または類似の分子式のペプチドの治療上有効な量より成る非経口投与用 組成において、前記分子式中のＸを、水素と、アミド結合した１個乃至４個の付 加アミノ酸残基またはアミノ酸残基の類似物と薬学的に摂取可能な担体とより成 る群から選択することを特徴とした非経口投与用組成。
18. 【請求項１８】 前記のＸをグリシン、アルギニル・グリシンおよびチロシル・アルギニル・グリ シンまたは類似のものより成る群から選択することを特徴とした請求項第１７項 に記載の組成。
19. 【請求項１９】 前記の薬学的に摂取可能な担体を等張性生理食塩水と等張性リン酸緩衝生理食塩 水より成る群から選択することを特徴とした請求項第１７項に記載の組成。
20. 【請求項２０】 ▲数式、化学式、表等があります▼ の分子式または類似の分子式のペプチドの治療上有効な量より成る経皮投与用組 成において、前記分子式中のＸを、水素と、アミド結合した１個乃至４個の付加 アミノ酸残基またはアミノ酸残基の類似物と薬学的に摂取可能な担体とより成る 群から選択することを特徴とした経皮投与用組成。
21. 【請求項２１】 前記の薬学的に摂取可能な担体をローション剤、懸濁剤、オイル、軟膏、クリー ム、リンス、ゲルと経皮装置より成る群から選択することを特徴とした請求項第 ２０項に記載の組成。
22. 【請求項２２】 ▲数式、化学式、表等があります▼ の分子式または類似の分子式のペプチドの治療上有効な量より成る被覆医療装置 用組成において、前記分子式中のＸを、水素と、アミド結合した１個乃至４個の 付加アミノ酸残基またはアミノ酸残基の類似物と薬学的に摂取可能な担体とより 成る群から選択することを特徴とした被覆医療装置用組成。
23. 【請求項２３】 前記の薬学的に摂取可能な担体がペプチドの治療上有効な量が通過拡散出来る重 合被覆剤であることを特徴とした請求項第２２項に記載の組成。
24. 【請求項２４】 前記の重合体がポリウレタン、ポリメタクリレート、ポリアミド、ポリエステル 、ポリエチレン、ポリプロピレン、ポリスチレン、４ふつ化エチレン樹脂、塩化 ビニル樹脂、酢酸繊維素、シリコンエラストマー、コラーゲンおよびシルクより 成る群から選択することを特徴とした請求項第２３項に記載の重合体被覆。
25. 【請求項２５】 ▲数式、化学式、表等があります▼ の分子式または類似の分子式のペプチド。
26. 【請求項２６】 ▲数式、化学式、表等があります▼ の分子式または類似の分子式のペプチド。
27. 【請求項２７】 ▲数式、化学式、表等があります▼ の分子式または類似の分子式のペプチド。
28. 【請求項２８】 ▲数式、化学式、表等があります▼ の分子式または類似の分子式のペプチド。
29. 【請求項２９】 ▲数式、化学式、表等があります▼ の式または類似の分子式のペプチドで、前記分子式中のＸを、水素と、アミド結 合した１個乃至４個の付加アミノ酸残基またはアミノ酸残基の類似物より成る群 から選択することを特徴としたペプチド。
30. 【請求項３０】 前記のＸをグリシン、アルギニル・グリシンおよびチロシル・アルギニル・グリ シンまたは類似のものより成る群から選択することを特徴とした請求項第２９項 に記載のペプチド。