JPH06500797A - プリン基修飾２´―デオキシリボヌクレオシド、三重形成オリゴヌクレオシドにおける使用、およびそれを調製するためのプロセス - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ｌ１り１見　プリン基修飾２′−デオキシリボヌクレオシド、三重形成オリゴヌ クレオシドにおける使用、及びそれを調製するためのプロセス。

１ユ豊丘互 本発明は二本鎖ＤＮＡを有する三重らせんを形成することができるオリゴヌクレ オシドの成分として有益な新規プリン基修飾２′−デオキシリボヌクレオシドの 合成に関するものである。

３−一一一東 三重らせん構造についてはすでに多くの資料があるが、三重形成というのは医薬 品介在のプログラムの基礎としては比較的新しい概念である。最近の研究で、部 位を選択するや薬の開発に関しては、かなりの進歩が得られた。その研究でＤＮ Ａ遺伝子内部のＡまたはＧ連結部分をリピートするように意図された合成りＮＡ オリゴヌクレイチドが酸性ｐｉ（領域で安定した三重構造（ｔｒｉｐｌｅｘ）を 形成できることが実証されている。これら三重らせんの形成はＴ基のＤＮＡ二重 らせんあるいは二重構造への、および陽子付加シトシン（Ｃ＋）のＧＣ二重構造 への水素結合に基づいている。シトシンの陽子付加の必要性は概念的には重要で あるが、Ｃ＋ＧＣ三重構造のｐ＋（はほぼ３であるので、生理学的な意義はもっ ていない。さらに、この三重構造は生理的ｐＨ範囲で安定していない。この問題 を解決しようとする従来の試みにはシトシンを５−メチルシトシンおよび５−ブ ロモウリジンと置換することが含まれている。

こうした置換により見かけのｐＨが増大して、６から７のｐＨ範囲での三重構造 が可能になるが、この範囲でもまだ生理的ｐＨ範囲ではない。したがって、ＴＰ Ｏの生物学的有用性を考えると、生理的ｐＨ範囲（例えば、ｐＨ７，４−ｐＨ７ ，８）で配列固有の三重構造形成を可能にするようなヌクレオシド修飾あるいは 他のヌクレオシド同属種について調べるのが重要である。

過去数年間に、オリゴヌクレオシドに基づく療法についての展望が提案されてお り、最初の実験はＤＮＡの配列に沿った三重構造形成のための部位選択性を調べ るために意図されたものであった。ｃ−ｍｙｃ同属種のコントロール領域がモデ ルとして用いられた。これら初期の実験で、生理的ｐｌ（範囲で、独立した２７ 基長のオリゴヌクレオシドが高い選択性で安定した三重らせんを形成する能力を 有していることが示された。この合成オリゴヌクレオシドは主要溝でＤＮＡｃ− ｍｙｃオンコシン標的のプリンを豊富に含んでいる鎖に結合するように意図され たものでＡＴに結合するＴ、ＡＴに結合するＡ、そしてＧＣに結合するＧによっ て安定化された。その後、ＧＧＣおよびＴＡＴトリプレットがＤＮＡ内のＡまた はＧを豊富に含んでいる部位で安定化した三重らせん形成をもたらすことが示さ れた。三重らせん形成オリゴヌクレオシドのデザインをさらに改良した結果、三 重らせん化合物を形成して、ＤＮＡのプリンを豊富に含んだ鎖に対して平行では なく、アンチパラレルに結合することにより、はとんどのＤＮＡ標的部位で安定 性がかなり強化されることが示された。したがって、生理的ｐＨ範囲で、１０− ″から１０−’の範囲の解離定数で、プリンを豊富に含む遺伝子プロモーター・ セグメントに結合する三重らせん形成リガンドをデザインすることが可能である 。

ＴＰＯデザインの目標は、プリン含量や他のシンメトリ−に関する配慮なしに、 どの二重ＤＮＡ配列に結合できる分子を開発することである。ホッグスティーン （ｈｏｏｇｓｔｅｅｎ）または逆ホッグスティーン・タイプのＨ−結合は基礎と なる二重構造の主要溝内でプリン基との間で起きる。その結果、ポリプリン／ポ リピリミジン二重構造標的は主要らせん溝の一方の側の上に位置する一定の秩序 を持った結合フォーマ−を示す。

ＣＧまたはＴＡ逆位の部位で、対応するプリン標的基は主要溝の反対側の半分の 上に配置されており、（ａ）　ＴＰＯバックボーンの延長か、（ｂ）その二重構 造の膨張か、あるいは（Ｃ）その両方、によってのみＨ結合のために、接合する ことができる。

間接的なデータは、二重ＤＮＡが三重構造形成の際Ａ形態をとることを示唆して いる。このＡ形態では、主要溝は深くて狭く、その寸法は結合される第三の鎖の サイズによく適合している。したがって、ポリプリン／ポリピリミジン領域内の ＣＧまたはＴＡ逆位の部位で、主要溝のｒ他の側ＪでＨ−結合を受け入れるため に、せいぜい３−５Ａの横方向のゆがみ（ｔｒａｎｓｖｅｒｓｅ　ｄｉｓｔｏｒ ｔｉｏｎ）が必要である。その程度の横方向のゆがみはデオキシポリボース・バ ックボーンまたは二重構造に許される立体配座の自由度によって部分的に対応す ることができる。予備的なモデル化作業の結果では、そうした部位で標準的なＴ ＡＴあるいはＧＧＣホッグスティーンあるいは逆ホッグスティーン三重構造を形 成するためには、その三重構造結合部位のゆがみも必要かもしれないということ が示されている。

アンチパラレル三重らせんのＣＧまたはＴＡ逆位部位で、局所トリブレット形成 がその二重構造にかなりのゆがみを生み出すことを示す証拠がある。本発明は結 合部位のゆがみを必要とせず、ＴＡまたはＣＧ逆位の部位で強力な三重らせんを 形成する修飾ヌクレオシド類似物のグループを提供する。

その生物学的安定性、組織分布、セル状アップティクおよび製造コストの故に、 これら新しい化合物の進歩と最終的な商品化のためには、新しいヌクレオシド代 用物の探究と合成が極めて重要である。これら新規化合物は多くの疾患の治療に おいて非常に有用な筈である。

例えば、レトロウィルスＨＩＶ−１がＡＩＤＳの病原因子として確認されて以来 、この徐々に人を衰弱させ、やがて死に至らしめる病気の治療と予防のための薬 を開発するために必死の努力が行われている。種々のプリンおよびピリミジン・ ヌクレオシド薬がヱ之・旦土旦で抗ＨＩＶ作用を持っていることが示されている が、ＡＩＤＳの治療に広範に月いられ、進行したＡＩＤＳの症例の治療に使用す ることがＦＤＡで認められている唯一の薬はＡＺＴである。ＡＺＴは多くの事例 で臨床的に有益であるが、特に、骨髄腫抑制に使用されるとかなりの毒性を示し 、血液に対する重大な副作用を引き起こす。さらに、ＡＩＤＳ関連特許から抗Ａ ＺＴ　ＨＩＶ鎖は切り離されている。現在用いられている薬品は毒性を持ってい るので、ＨＩＶ感染を化学的に治療するための新しい薬品を見いだす必要がある 。旧■感染を含む広範なウィルス性疾患の安全、かつ効果的な治療に用いること ができる、一般的には「アンチセンスＪと呼ばれる、画期的に新しい治療方法が 現在登場しつつある。この新しい方法は特に特定のウィルス遺伝性配列に結びつ いて、それを不活性化し、それによって、その疾病のプロセスを停止させるよう にデザインされたポリマー性薬品の使用を伴っている。しかしながら、アンチセ ンス治療を用いて得られた予備的な知見についてはいろいろな議論がある。しか し、本発明は三重らせん形成という新しい治療法を前提としている。本発明にお いては、薬品はメツセンジャーＲＮＡ以外のプロウィルス性ＤＮＡに直接結びつ いて、それによって、共線形（ｃｏｌｉｎｅａｒ）三重らせんを形成することに より、ＨＩＶを選択的に抑制する能力を持つようにデザインされ、合成される。

この方法は他のさまざまな疾病の治療においても用いることができ、また、遺伝 子表現の調整にも用いることができる。

且王立１笠 本発明の目的はグアノシンの新しい類似物を提供することである。

本発明のもうひとつの目的は２′−デオキシフォルミシンＡ、チオグアノシンお よび他のグアノシン類似物をＴＰＯに導入することである。

本発明のさらに別の目的は、ＡＩＤＳの治療法である。

本発明のさらにもうひとつの目的は、これらの修飾ＹＦＯを疾病の治療に用いる ことである。

本発明のさらにもうひとつ別の目的は遺伝子表現を調節するための修飾ＴＰＯの 提供である。

したがって、上に述べた目標を達成する場合、本発明のひとつの側面に従って一 連のグアノシン類似物、化合物番号４゜１０ａ、Ｊｏｂ、１９および２９（図５ −９）が提供される。さらに、これら類似物合成の中間製品である特殊な化合物 もある。

好ましい実施例において、広範な疾病の治療および蛋白質、ホルモンおよび遺伝 子表現の調整において使用するために、２′−デオキシフォルミシンＡおよび他 のグアノシン類似物がＴＰＯに組み込まれる。

本発明の現段階での好ましい実施例が開示されている、以下の仕様書を読み、そ の一部を構成する関連図面を参照することにより、他の目的、特徴、および利点 が明らかになり、本発明についての一層の理解が得られるであろう。

皿皿五五ユ 図１はＣＧおよびＴＡ逆位部位でのトリプレットＨ−結合を説明するためのモデ ルである。

図２はＣＧ逆位の部位でのＧ同族体としてのフォルミシンの結合を示すモデルで ある。

図３はアンチパラレル三重らせんにおけるＣＧおよびＴＡ逆位部位におけるＣｕ −フェナントロリン過敏性を示している。

図４は２′−デオキシフォルミシン（ｄＦ）置換の効果を示すバンド・シフト分 析である。

図５は７−Ｎ−ベンゾイルアミノ−３−［３−０−（β−シアノエチル）−Ｎ、 Ｎ−ジイソプロビルアミノフオスフオルアミジト−５−０−ジメトキシトリチル −１−２−デオキシ−β一旦−エリスローペントフラノシル］ピラゾロ［４，３ −ｄ］−ピリミジンの合成図である。

図６は２−イソブチルアミノ−［３−０−（β−シアノエチル）−Ｎ、Ｎ−ジイ ソプロビルアミノフオスフオルアミジト−５−０−−ジメトキシトリチル−２− デオキシ−α一旦−エリスローペントフラノシル］プリン−６（ＬＨ）−オンお よび２−イソブチリルアミノ−９−［３一旦−（β−シアノエチル）−Ｎ、Ｎ− ジイソプロビルアミノフオスフオルアミジト−５−立−ジメトキシトリチル−２ −デオキシ−α一旦−エリスローペントフラノシル］プリン−６（ＩＨ）−チオ ンの合成図である。

図７は２−イソブチルアミノ−６−イソプチルチオー９−［３−仝−（β−シア ノエチル）−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルアミノフオスフオルアミジト−５−且−ジ メトキシトリチル−２−デオキシ−β−二一エリスローペントフラノシルコブリ ンの合成図である。

図８は２−イソブチリルアミノ−９−［３−０−（β−シアノエチル）−Ｎ、Ｎ −ジイソプロピルアミノフオスフオルアミジト−５一旦−ジメトキシトリチル− ２−デオキシ−β一旦−エリスローペントフラノシル］プリン−６（ＬＨ）−チ オンの合成図である。

図９は２−イソブチリルアミノ−Ｎ、−イソブチリル−７−［３−Ｏ−（ｅ−シ アノエチル）−Ｎ、Ｎ−ジイソプロビルアミノフオスフォルアミジト−５一旦一 ジメトキシトリチルー２−デオキシ−β一旦−エリスローペントフラノシル〕ピ ロロ［３，２−ｄ］ピリミジン−４（３Ｈ）−オンの合成図である。

図１０は７−Ｎ−ペンシルアミノ−３−［２−Ω−メチル−３−０−（β−シア ノエチル）−Ｎ、Ｎ−ジイソプロビルアミノフォスフオルアミジト−５−０−ジ メトキシトリチル−β−Ｄ−リボフラノシル］ピラゾロ−［４，３−ｄ］ピリミ ジンの合成図である。

これらの図面の寸法は必ずしも正確に表現されておらず、一部の特徴は寸法が誇 張されており、また、簡潔・明瞭に示すために系統図の形で示されている。

の　な 本発明の範囲および精神を逸脱することなしに、ここに開示されている発明に対 して種々の代用あるいは修正が可能であることは当業者には容易に分かるであろ う。

ここで用いられているＩｒＴＦｏ　、１あるいは「三重構造形のオリゴヌクレオ シドＪは、主要溝内で二重ＤＮＡ構造と結合して三重構造を形成することができ る、本発明によるオリゴヌクレオシドを意味している。

ここで用いられている「主要溝Ｊという用語は、二重ＤＮＡの糖−フォスフェー ト・バックボーンが塩基よりさらに軸から延びているので形成されるＤＮＡらせ んの外部表面に沿った溝のひとつを指している。この主要溝は調節分子が特定の ＤＮＡ配列に結合するためには重要な役割を果たしている。

ここで用いられている「オリゴヌクレオシドＪという用語は２以上、好ましくは １０以上のデオキシボヌクレオシドあるいはりボヌクレオシドで構成される分子 と定義される。正確なサイズは特異性および結合親和性を含む多くの要素に依存 している。

ここで用いられている「塩基Ｊという用語は、デオキシボ核酸とリボ核酸の両方 を含んでいる。さらに、以下の略語が用いられている。Ａはアデニンおよびその デオキシリボース誘導体を指しており、Ｔはチアミンとそのデオキシリボース誘 導体を指しており、Ｇはグアニンと、そのデオキシリボース誘導体を指しており 、Ｃはシトシンとそのデオキリボース誘導体を指しており、配列中のＦまたはＮ はグアノシン類似物を指している。類似物のいくつかの例としては化合物４゜１ ０ａ、　１０ｂ、　１４．１９．２９および３５（図５−１０）がある。これら の化合物は、オリゴヌクレオシドでグアノシンと置換するために用いることがで き、Ｃと結合してＦＣＣホッグスティーンおよび逆ホッグスティーン・トリブレ ットを形成するので、グアノシン類似物と呼ばれている。

本発明のひとつの実施例は、以下の構造で示される図５の化合物である。

二こで、Ｒ，はＨまたは−ＣＯＣ，Ｈ，であり、Ｒ３はＨまたは−ＣＯＣ，Ｈい そしてＲ，はβ連鎖で取りつけられており、以下のものからなるグループから選 択され ここで、ＸはＨまたはＤＭＴ、そしてＹはＨまたは本発明によるこれらの化合物 は図５に示されている系統的イラストレーションに描かれているプロセスにより 合成される。好ましい実施例において、化合物４が合成される。

本発明のもうひとつの実施例は以下の構造で示される図６の化合物である。

ユニでＲ３はＯまたはＳ、Ｒ，はＨまたは本発明によるこれらの化合物は図６の 系統的イラストレーションに描かれているプロセスで合成される。

本発明のもうひとつの実施例は以下の構造物で示される図７の化合物である。

ココテ、Ｒ，ハＴＢＤＭＳ、　ＤＭＴ４７’＝ハＨ１’Ｊ、Ｒ，ハＴＢＤＭｓ、 　Ｈである。

本発明によるこれらの化合物は図７に示されている系統的イラストレーションに 描かれているプロセスで合成される。

本発明のさらに別の実施例は以下の構造で示される図８のＲ３はＨまたはＤＭＴ である。

本発明によるこれらの化合物は図８の系統的イラストレーションで描かれている プロセスで合成される。

本発明によるもうひとつ別の実施例は以下の構造で示される図９の化合物である 。

Ｒ，はＨまたは（ＣＨ，）、Ｃ）ｌ−ＣＯ−、Ｒ，はＨまたはＤＭＴ、Ｒ，はＨ ま本発明によるこれらの化合物は図９の系統的イラストレーションで描かれてい るプロセスで合成される。

本発明の別の実施例は化合物２３−２６　（図９）である。

本発明のさらなる実施例は以下の構造で示される図１Ｏの化合物である。

ここで、Ｒ１はβ連鎖で結合され、そして以下のものからなるグループから選択 される。

本発明によるこれらの化合物は図１０に示されている系統的イラストレーション で描かれているプロセスで合成される。

好ましい実施例で、化合物３５が合成される。

好ましい実施例において、該オリゴヌクレオシドの少なくともひとつの塩基が化 合物４．　ＩＯａ、　Ｊｏｂ、　１４．１９．２９および３５（図５−１０）の 少なくともひとつと置換された、二重鎖ＤＮＡと三重らせんを形成することがで きるオリゴヌクレオシドで構成されるＴＰＯが存在している。

本発明のさらに別の実施例は１（ＩＶ−１の抑制、および表皮成長ファクター・ レセプター、マウス・インシュリン・レセプターなどで構成されるグループから 選択される遺伝子の表現を変更するための、本発明による化合物を含むＴＰＯの 使用である。

本発明の別の実施例はグアノシン類似物を含んでいる丁ＦＯである。これらのＴ ＰＯの具体的な実施例はＳＥＱ、Ｉ、Ｄ、Ｎ０９１゜ＳＥＱ、Ｉ、Ｄ、Ｎｏ、２ ．　ＳＥＱ、１．Ｄ、ＮＯ，３およびＳＥＱ、　１．Ｄ、Ｎｏ、４で構成される グループから選択される。

本発明のさらに別の実施例はＳＥＱ、　１．Ｄ、ＮＯ，４で構成される、ＡＩＤ Ｓを治療するためのＴＰＯである。

本発明によるもうひとつの実施例は、二重ＤＮＡ内で標的配列を有するコリニヤ ー（ｃｏｌｉｎｅａｒ）三重構造を形成するための、三重構造形成オリゴヌクレ オシドである。ＴＰＯは少なくとも２０程度のヌクレオシドのヌクレオシド配列 で構成されている。この配列はＧ、Ｔおよびグアノシン類似物を含んでいる。こ のＴＰＯで、二重ＤＮＡ標的内の補足的な部位が方向決定（ｏｒｉｅｎｔｉｎｇ ）　（プリンをより豊富に含む）領内でＧを含んでいる場合、Ｇが使われる。二 重ＤＮＡ標的が方向決定領内でＣを含んでいる場合、Ｇの代わりにグアノシン類 似物が用いられる。二重ＤＮＡ標的内の補足的な部位がＡＴ塩基基底の場合、Ｔ が用いられる。一般的に、ＴＰＯは、二重ＤＮＡ標的の方向決定銀に対して平行 か、あるいはアンチパラレルＴＰＯ鎖を有する上述のような基底を持ったトリプ レットを形成するようにデザインすることができる。しかしながら、ＧＣ対ＡＴ 基ペア比が１よりかなり大きい標的の場合、アンチパラレルＴＰＯアイソマーが 好まれることが多く、ＧＣ対ＡＴペア比が１よりかなり低い標的の場合、平行ア イソマーが好まれることが多い。ＧＣ対ＡＴ基ベア比が１前後の標的の場合、両 方のＴＰＯアイソマーが同じ程度に好まれる。

本発明のひとつの好ましい実施例において、少なくとも２０程度のヌクレオシド でできているヌクレオシド配列で構成されている標的配列が二重ＤＮＡ内に存在 しており、該ヌクレオシド配列がＧ、Ｔおよびグアノシン類似物を含んでおり、 その二重ＤＮＡ内の補足的部位がＧＣ基ベアの場合はＧが用いられ、二重ＤＮＡ 内の補足的部位がＡＴ基ペアの場合はＴが用いられ、その二重ＤＮＡ標的部位内 部にＣＧ逆位が存在している場合はグアノシン類似物が用いられ、該配列がアン チパラレルで二重ＤＮＡ標的部位内のプリン鎖に結合しており、該結合がＴＡＴ 　。

ＧＧＣおよびＦＣＣホッグスティーンまたは逆ホッグスティーン・トリブレット を形成している。

以下の例は説明のために提供されるものであり、いかなる意味でも本発明を限定 するために意図されたものではない。

これらの例で、すべてのパーセンテージは、固体に関する場合は重量ベース、そ して液体の場合は体積ベースであり、すべての温度は特に注がない限り、セ氏温 度を示している。

例１ ２′−−オキシフォル々シン゛よび　の、ＤＭＴフォスフオルアミシト　のム フオルミシンを対応する２′−デオキシリボヌクレオシド（ｄＦ）に転化し、そ の後、対応する遮断ＤＭＴ−フォスフオルアミシトに活性化する合成方法である 。

市販されているフォルミシンＡ（±）を用いて、公知の種々の方法で２７−デオ キシフォルミシンＡを調製することが可能である。２′−デオキシフォルミシン Ａ合成のひとつの方法はＴ、　Ｃ，Ｊａｉｎ、　ｅｔ、　ａｌ、、　Ｊ、　Ｏｒ ｇ、　Ｃｈｅｗ、　３８　：　３１７９　（１９７３）に述べられている。この 方法は上のアセトキシイソブチリル・プロミドとの反応、それに続くアンモノリ シス、そして還元性脱ハロゲン化を含んでいる。この方法は２′−デオキシフォ ルミシンＡおよび３′−デオキシ・アイソマーの混合物で後者の比率の方が２： １以上に上回っている混合物をつくりだす。

別の方法はＲｏｓｏｗｓｋｙ、　ｅｔ、　ａｌ、、　Ｊ　、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅ ｍ、　２８　：　１０９６（１９８５）に述べられている。これは脱酸素化法で あり、対応する３’、５’−保護上の２′−ヒドロキシル基のフェノキシチオカ ルボニル化を用いる。上の３’、　５’−保護は、陽子受容子の存在の下で、環 状ジシロキシ誘導体を提供する１、３−シグロロー１．１，３．３−テトライソ プロピルジシロキサンを用いて達成された。フェノキシチオカルボニル・クロラ イドによるジシロキシ誘導体の２７−ヒドロキシルのアシル化と、それに続く、 α、α′−アゾビスイソブチロニトリルの存在下でのトリーｎ−ブチルチン・ハ イドライドによるフェノキシチオカルボニル基の還元性切断により、利用可能な 中間物７−アミノ−３−［３，５，一旦−（１，１，３，３−テトライソプロピ ル−１，３−ジシロキサンジイル−２−デオキシ−β−二一リボフラノシル）コ ビラゾロ−［４，３−ｃｌ］ピリミジン（２）が得られた。

例２ ７−Ｎ　Ｎ’−ジベンゾイルアミノ−３−３５−０−１ニー」ユ」辷ｊ」二と仁 ムズ旦ヱユ二上、」二２圭Ｊ」ソＬ乙２エルー２−−オキシ−−Ｄ−エリスロー ペントフラノシルビラゾロ　４３−ｄ　ピリミジン　３　の４２５ｍ１無水ピリ ジンに１．５ｇの化合物（２）　（２，９２ｍモル）を溶かした冷却（ｏ−５℃ ）溶液にｌ。３６ｍ１ベンゾイルクロライド（１１，７ｍモル）を加えて、攪拌 した。その反応混合物を室温で２．５時間攪拌すると、水とジグロロメタンに分 離された。

その有機層を分離して、無水Ｎａ、ＳＯ，上で乾燥し、次に、減圧条件下で蒸発 させて、乾燥させた。残滓をトルエン（４ｘ５０ｍｌ　）で共沸蒸留してピリジ ンの最後の痕跡を除去し、溶離剤としてＣＨ，Ｃ１，→Ｎｅｏ）（（０ｍ１％） の勾配を用いて、シリカゲルカラム上でのクロマトグラフィーを用いて精製した 。均一部分を集めて、減圧条件下で蒸発させ、標記の化合物の１．４５ｇ　（７ ０，７％）を得た；　ｍｐ７４−７５℃、　ＩＲ（ＫＢｒ）　：　ｕｍａｘ１７ ２０　（Ｃ＝Ｏ）　、　３２４０　（ＮＨ）　ｃｍ−’　；ＵＶ　（ＭｅＯＨ） 　：λｍａｘ２３０ｎｍ（ｇ２４，０００）　、３１８ｎｍ　（ｇ　１４，５０ ０）　；　’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　：６０．９８　（ｂｒｓ、　２８Ｈ ，２［（ＣＨ，）、ＣＨ］、Ｓｉ）　、　２．４０−２．９０　（ｍ。

２Ｈ，Ｃ，’旦およびＣ１′旦）、　３．７−４．０　（ｍ、３　Ｈ，Ｃ，’旦 およびＣ，’ＣＨ，）、４．９０　（ｑ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’旦）、５．５０　（ｄ ｄ、Ｌ　Ｈ。

（、／旦）　、７．３０−８．１５　（ｍ、１０旦、２ＣＯＣ，Ｈ，）　、９． ０７　（Ｓ。

ＬＨ，Ｃ，旦）および１２．Ｏ（ｂｒ　ｓ、Ｌ　Ｈ，ＮＨ）。皿、計算値＝Ｃｌ １＃Ｈ４ｔＮ＃Ｏ＃Ｓｌｔとして、　Ｃ，６１，５９、Ｈ，６，７５、Ｎ、　９ ．９７．実測値：　Ｃ，６１，６８、Ｈ，６，８１、Ｎ、　９．８６゜例３ ７−Ｎ−ベンゾイルアミノ−３−２−一オキシ−−Ｄ−エリスローペントフラノ シル　ピラゾロ　４３−ｄピリミジン　６　のム 無水テトラハイドロフラン（３０ｍｌ　）内に（３）（１，３５ｇ。

１．９６ａ＋モル）を加えた溶液に、０℃で、テトラ一旦−ブチルアンモニウム フルオライド（ＴＨＦ内での８ｍｌ、１Ｍ溶液）が加えられた。この混合物を室 温で２時間攪拌してから、この溶液を減圧条件下で蒸発させ、残滓を溶離剤とし てＣＨ，ＣＩ。

→ＭｅＯＨ（０ｍ４％）の勾配を用いて、シリカゲル上でのクロマトグラフィー によって精製した。均一部分を集めて、減圧条件下で蒸発させ、分析上純粋な（ ６）を０．４６ｇ　（６８％）得た；ｍｐ２５０−２５１℃、　ＩＲ（ＫＢｒ） 　：　υｍａｘ１６９０　（Ｃ＝Ｏ）　、　３１００−３５００　（ＯＨ，Ｎ） ｌ）　ａｍ−’　；　ＵＶ　（ＭｅＯＨ）　：λｍａｘ２４８ｎｍ　（ｇ　１４ ，５００）　。

３２０ｎｍ　（ｔ　１３，７００）　；　’ｔ（ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　： δ２．００−２．２０　（ｍ　。

ＩＨ，Ｃ，、旦）　、２．６０−２．８０　（ｍ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’旦）　、３． ４０−３．７０（ｍ、２Ｈ，Ｃ，’ＣＣＮ）　？　３．９０　（ｍ、Ｉ　Ｈ，Ｃ ，’旦）、４．４０　（ｄ。

ＬＨ，Ｃ，’旦）　、　５．１５　（ｂｒｓ、２Ｈ，３’および５′０旦）、　 ５．５０（ｄｄ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’旦）　、７．５０−８．１５　（ｍ、５　Ｈ， ＣＯＣ，、ｊｉ、）　。

８．７５　（ｓ、　ＩＨ，ＣＪｊ）　、　１１．８０　（ｂｒｓ、ＩＨ，Ｎ、旦 ）および１３．００　（ｂｒ　ｓ、Ｌ　Ｈ，Ｎ、旦）、ｉ４１．計算値：　Ｃ， 、Ｈ，、Ｎ、０．。

１／４Ｈ，Ｏとして、　Ｃ，５６，７４、Ｈ，４，９０、Ｎ、　１９，４６．実 測値：　Ｃ，５６，９３；　Ｈ，４，９６；　Ｎ、１９．３５゜例４ ７−Ｎ−ベンゾイル　ミノ−３−５−〇−ジメト　シトリチル−２−一オ　シー 　−Ｄ−エリスローペン　フーノシル　ピラゾロ　４３−ｄ　ビ１ミジン　５の ム 無水ピリジン（１０＠ｌ　）に（６）　（０，４ｇ、　１．１２ｍモル）を溶か した溶液に、４，４′−ジメトキシトリチルクロライド（０，４６ｇ　、　１． ３５ｍモル）を加えて、室温で攪拌した。３時間攪拌すると、反応混合物はＣＨ ，ＣＩ、と水（それぞれ５０ｍ１　）に分離した。有機層を分離して、無水Ｎａ 、ＳＯ２上で乾燥し、減圧条件下で蒸発させた。残滓をトルエン（４ｘ５０ｍｌ ）で共沸蒸留し、ピリジンの最後の痕跡を取り除いてから、溶離剤としてＣＨ， ＣＩ、→ＭｅＯＨ（０ｍ２％）の勾配を用いて、シリカゲルカラムでのクロマト グラフィーで精製した；均一部分を集めて、減圧条件下で蒸発させ、純粋な、標 題の化合物を０．２６ｇ（３５，３％）を得た；　ｍｐ１０７−１０８℃。ＩＲ （ＫＢｒ）　：　ｕｍａｘ１６９０（Ｃ＝○）　３２００−３４００　（ＯＨ， ＮＨ）　ａｍ””　；　ＵＶ　（ＭｅＯＨ）　：λｍａｘ２３８ｎｍ　（ｔ　３ １，７００）　、　３２０ｎｍ　（ｔ　１８，０００）　；　’ＨＮＭＲ（ＤＭ ＳＯ−ｄ　、　）＝５２．０５−２．３０および２．７５−２．９５　（２ｍ、 ２　Ｈ，Ｃ，’旦およびＣ２′旦）３．７０　（ｓ、３Ｈ，ＯＣＨ，）　、３． ７１　（ｓ、３Ｈ，ＯＣＨ，）。

３．９８　（ｍ、　２　Ｈ，Ｃ，’ＣＨ，）　、　４．４０　（ｍ、　Ｉ　Ｈ， Ｃ，’Ｈ）　、　５．２０（ｍ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’Ｈ）　、５．５５　（ｄｄ、Ｌ 　Ｈ，Ｃ，’旦’）　、６．７０−８．３０（ｍ、　１８Ｈ，Ｃ０ＣＪｊ、およ びＤＭＴ）　、　８．６５　（ｓ　、Ｉ　Ｈ，Ｃ，Ｈ）　。

１１．８５　（ｂｒｓ、Ｉ　Ｈ，Ｎ、旦）および１３．１０　（ｂｒ　ｓ、Ｌ　 Ｈ，Ｎ、Ｈ）　。

例５ ７−Ｎ−ベンゾイルアミノ−３−３−〇−−シ　ノエチル−Ｎ　Ｎ−ジイソプロ ピルアミノフォスフオル　ミノ　−５−〇−ジ　ト　シトリチル−２−−オキシ −−Ｄ−エリスローペントフラノシル　ピラゾロ　４３−ｄ　ピリミジン４二皇 里 無水ジグロロメタン（３ｍｌ　）に（５）　（０，１６ｇ、　０．２ｍモル）お よびＮ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０，１４ｍ１．０．８３ｍモル）を 加えた溶液に、アルゴン中で攪拌しながら２−シアノエチル−Ｎ、Ｎ−ジイソプ ロピルクロロフォスフオルアミシト（５６μｍ、　０．２５ｍモル）を加えた。

３０分後に、さらに４５μｍのフオスフオリル化剤を加えた。さらに１５分間攪 拌した後。

この反応混合物をＥｔＯＡｃ溶液（５０＠ｌ）中で１０％ＮＥｔ、で希釈し、飽 和ＮａＨＣＯ，水溶液（１０ｍｌ）で洗浄した。水層を分離して、１０％ＮＥｔ 、−ＥｔＯＡｃで再抽出を行った。有機層は無水Ｎａ、　Ｓｏ、上で乾燥し、減 圧状態で乾燥するまで蒸発させた。残滓を１０％ＮＥｔ、−ＥｔＯＡｃに溶かし て作成した溶液を、同じ溶媒システムで溶出するＣＨ，Ｃ１，：　ＥｔＯＡｃ　 ：　ＮＥｔ、　（４５：　４５　：　１０）にバックされたシリカゲルカラム中 を通過させた。適切な、均一部分を集めて、減圧状態で蒸発させた。残滓を少量 のＣＨ，Ｃ１，（３ｍ１）に溶解し、生成物を乾燥ヘキサンに加えて析出させ、 ０．１８　ｇ（８６，２％）を得た。’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１，）　：δ１．２０ 　［ｍ、　１２Ｈ。

Ｎ（ＣＭｅ　）、］　、　］２．４０−２．７０（ｍ、２　Ｈ，０％旦およびＣ Ｈ旦）。

２．８０−４．０　（ｍ、６　Ｈ，ＯＣＨ，ＣＨ，ＣＮ、Ｃ，’ＣＣＨ）＋　３ −７５　（Ｓ＋６Ｈ，２０Ｃ旦１）、４．３５　（ｍ、ｌ　Ｈ，Ｃ，’旦）　、 ４．７５　（ｍ、Ｌ　Ｈ。

Ｃ，’Ｈ）　＋　５．７５　（ｑ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’Ｈ）　、　６．５０−８．２ ０　（ｍ、　１８Ｈ。

ｃｏｃ４．およびＤＭＴ）　、　８．６４および８．６５　（２Ｓ、Ｌ　Ｈ，ア イソマーのＣ，Ｈ）　、　１２．２０　（ｂｒ　ｓ、Ｌ　Ｈ，Ｎ、り　；　”Ｐ ＮＭＲ（ＣＤＣ１，）　：δ１４８．３６゜立上、計算値：Ｃ４，Ｈ，，Ｎ、Ｏ ，Ｐ、ｌ／２Ｈ，０として二〇、　６５．１＋　、　Ｈ，６，２８、Ｎ、　１１ ．３＋　、　Ｐ、　３．５７．実測値：Ｃ１６５，１６、Ｈ，６，３２、Ｎ、１ ０．８７　、Ｐ、３．７０゜例６ ２−　ミノ−９−２−−オキシ−α−Ｄ−エリスローペントフラノシル　プリン −６１Ｈ−オン　８　の　しいム２−アミノ−９−（２−デオキシ−α一旦一エ リスローペントフラノシル）プリン−６（１旦）−チオン（１）　（Ｒ、ＨｏＩ ｗａｍｏｔｏ。

Ｅ、　Ｍ、　Ａｃｔｎおよびり、　Ｇｏｏｄｍａｎ、　ＪｌＭｅｄ、Ｃｈｅｍ、 、　６，６８４（１９６３）コ（２，Ｏｇ　、　７．０６＋＋＋モル）を水（６ ０ｍｌ）に懸濁させたものに、ＮＨ４ＯＨ（３０％、　２０ｎ＋１）　、そして 次にＨ，Ｏ，（３０％、　２．８ｍ１）を加えた。室温で４５分間攪拌した後、 その反応混合物を最初の体積の半分まで濃縮し、２５℃で１時間放置した。この 水溶液から析出した生成物をろ過で集めて、ろ液をダウエックス−５０（Ｈ＋） 樹脂で中和した。樹脂をろ過で取り出して、水（５ｘ２５ｍｌ）で完全に洗い、 合したろ液を減圧状態で蒸発させて、無色の固体を得た。この固体が上に述べた 水溶液から析出させたものと合し、標記の化合物１．６２ｇ　（８６％）を得た ；ｍｐ＞２９ｓ℃［Ｌｉｔｏｍｐ）３００℃、　Ｍ、　Ｊ、　Ｒｏｂｉｎｓおよ びＲｏＫ。

Ｒｏｂｉｎｓ、　Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、、　３４．２１６０　（１９６９ ）　］　、　ＩＲ（ＫＢｒ）　：ｕｍａｘ１７４０　（Ｃ＝　Ｏ）　、　３１５ ０．３３１０．３４４０　（ＯＨ，ＮＨ，ＮＨ，）ｃｍ−’　；　［ＪＶ　：λ ｍａｘ　（ｐＨ１）　２５４．５ｎｍ　（ｔ；、　ｔｏ、８００）　；λｍａｘ （ｐＨ７）２５４ｎｍ　（δ１３，０００）　；＾ｗａｘ　（ｐＨ１ｌ）　２６ ３ｎｍ　（ｇ　１０，０００）　；’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　：　δ２， ２０　（ｍ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’旦）２．７０　（ｍ。

ＩＨ，Ｃ，’旦）　、３．４５　（ｔ　、２　Ｈ，Ｃ，’Ｃ旦、）　、４．０５ 　（ｍ、Ｉ　Ｈ。

Ｃ４′旦）　、４．３０　（ｍ、Ｉ　Ｈ，Ｃ，’旦）　、４．８０　（ｔ　、Ｌ 　Ｈ，Ｃ，’Ｏ旦）。

５．５０　（ｄ、Ｉ　Ｈ，Ｃ，’Ｏ旦）　、６．１０　（ｄｄ、ｌ　Ｈ，Ｊ　＝ ３．０Ｈｚ。

Ｃ，’Ｈ）　、　６．５０　（ｓ、２Ｈ，Ｎｊ；ｊ、）　、　８．０　（Ｓ、Ｌ 　Ｈ，Ｃ，Ｈ）　。

１０．６４　（ｓ、Ｌ　Ｈ，Ｎ、旦）　、　ｊｋＪＬ−計算値；Ｃ，、Ｈ，、Ｎ 、０．。

１／３ＨｓＯとして：　Ｃ，４３，９５；　Ｈ，５，０４；　Ｎ、　２５．６３ ．実測値：Ｃ，４３，９７、Ｈ，４，９７、Ｎ、２５．５８゜例７ ２−イソブチリルアミノ−９−５−〇−ジメ　シトリチル−２−一オ　シーα− Ｄ−エリスローペントフラノシル−プリン−６１Ｈ−オン　９ａ　のム ビリジン（３０ｍｌ　）に８　（１，８ｇ、　６．７３ｍ１モル）を懸濁させた ものに０℃で、トリメチルシリルクロライド（７，６１ｍ１．６０ｍモル）を加 えた。この反応混合物を室温で２時間攪拌した後、反応に使われたフラスコをア イスバス中で冷却して、イソブチルクロライド（０，８５ｍ１．８．０７ｍモル ）を加えた。この反応をさらに４時間、室温で継続させた後、水（ｌｏｍｌ）を 加え、さらにＣＨ，ＣＩ、　（２００ｍｌ）を加えた。有機層を分離して、４０ ℃の温度で、減圧状態で蒸発させた。得られる残滓をトルエン（５ｘ２５ｍｌ） で共沸蒸留し、ピリジンの最後の痕跡を除いてから、溶離剤としてＭｅＯＨ：Ｃ Ｈ，Ｃ１，（１：　３．Ｖ／Ｖ）を用いて、シリカゲルカラム上でのクロマトグ ラフィーにより精製した。均一の部分を集めて、蒸発させ、純粋なＮ３−イソブ チル−２′−デオキシ−α−グアノシン１．７５ｇ　（７７％）を得た。

上のＮ、−イソブチリル−２′−デオキシ−α−グアノシン（１，５ｇ　、　４ ．４５ｍモル）及びジメトキシトリチルクロライド（１，８１ｇ　、　５．３４ ｍモル）をピリジン（２０ｍｌ）に溶かしたものを室温で２．５時間攪拌した。

この反応混合物をＣＨ，Ｃ１，（２００ｍｌ）で希釈し、有機層を飽和炭酸水素 ナトリウム水溶液（２ｘ５０ｍｌ　）で洗浄した。（Ｎａ、　ＳＯ，上で）乾燥 された有機層を減圧状態で蒸発させ、残滓を、溶離剤としてＣＨ，Ｃ１，→Ｍｅ Ｏ）Ｉ（０−４％）の勾配を用いてシリカゲルカラム上で精製した。均一部分を 集めて、減圧状態で蒸発させ、２．Ｏｌｇ　（７０，５％）の純粋な標記の化合 物を得た；　ｍｐ１５２−１５４℃（ｄｅｃ）　、　ＩＲ（Ｋｂｒ）υｍａｘ１ ７１０　（Ｃ＝　Ｏ）、　３１００−３４００　（ＯＨ，ＮＨ）　ｃｍ−’　； 　ＵＶ　（ＭｅＯＨ）：λｍａｘ２３８ｎｍ　（δ２６，５６５）　、　２６２ ｎｍ　（ε１４，６００）　：　’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　：　８１，１ ２　［ｄ　、６　Ｈ，Ｃ（Ｃ１−１，）、］　、２．３０−２．４５（ｍ、Ｌ　 Ｈ，Ｃ，’旦）　、　２．８０　（ｍ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’旦）　、　３．０−３． ２５（ｍ、２Ｈ，Ｃ，、ＣＨ，）　、３．７５　（ｓ、６Ｈ，２０Ｃ旦、）　、 ４．３１（ｂｒ　ｓ、２　Ｈ，Ｃ，’旦およびＣ４′旦）、　５．５４　（ｄ、 Ｌ　Ｈ，Ｃ，’０旦）。

６．２７　（ｄｄ、Ｉ　Ｈ，Ｊ　＝４．０Ｈｚ、　Ｃ，’Ｈ）　、　６．８９− ７．４１　（ｍ。

＋３８．　ＤＭＴ）　、　８．２８　（ｓ、ＩＨ，Ｃ，Ｈ）　、　１１．６７　 （ｂｒｓ、ＬＨ。

Ｎ、Ｈ）　、　１２．１０　（ｂｒ　ｓ、Ｉ　Ｈ，Ｎ′ＨＡ）、、■、計算値： 　Ｃ，、Ｈ，、Ｎ、　Ｏ。

として：　Ｃ，６５，７１；　Ｈ，５，８３；　Ｎ、　＋０．９５．実測値：Ｃ ７６５，３２；　Ｈ，５，９４；　Ｎ、　１０，６１゜例８ ２−　ツブチルアミノ−１−シアノエチル　−Ｎ。

Ｎ−ジイソプロビルアミノフオスフオルアミジト−５−０−ジメ　キシトリチル −２−一オキシーａ−Ｄ−エリスローペントフラノシル　−プリン−６１Ｈ−オ ン１０ａ　のＡ無水ジグロロメタン（４ｍｌ）に９　ａ　（０，７５ｇ、　１． １７ｍモル）およびＮ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０，８２ｍ１．４． ６９ｍモル）を溶かしたものに、アルゴン雰囲気内で、２−シアノエチル−Ｎ、 Ｎ−ジイソプロピルアミノクロロフォスフイン（０，３９ｍ１．１．７６ｍモル ）を加えた。室温で３０分間攪拌した後、反応混合物をＥｔＯＡｃ溶液（７５ｍ ｌ）内でｌＯ％ＮＥｔ、で希釈した。有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（ ２０ｍｌ　）で洗浄して、無水硫酸ナトリウム上で乾燥させた。この溶液を減圧 状態で蒸発させ、残滓を溶離剤としてＥｔＯＡｃ　：　ＣＨＨＣｌ２　：　ＮＥ ｔ。

（４５：　４５　：　１０）を用いて、シリカゲルカラム上で精製した結果、０ ．７１ｇ　（７２，１％）の分析上純粋な生成物を得た。　”　ＰＮＭＲ（ＣＤ ＣＩ、）　：６１４９．２０および１５０．２８　、　’ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１， ）　：δ１，０−１．４０　［ｍ、２１Ｈ，Ｎ（ＣＨＣＨ，）、及びＣ０ＣＨ（ ＣＨ，）、コ　、３．８０（５１６Ｈ，２０ＣＨり　、６．３０　（ｍ、Ｉ　Ｈ ，Ｃ，’旦）　、８．１２，８．１６（２ｓ、アイソマーのＣ０旦）。皿、計算 値：　Ｃ，４Ｈ，、Ｎ、０．Ｐ。

Ｈ，Ｏとして：　Ｃ，６１，６０、Ｈ，６，５８，Ｎ、　１１．４３　、　Ｐ、 　３．６１゜実測値：　Ｃ，６１，２６，Ｈ，６，６９，Ｎ、　１１．４７．　 Ｐ、　３．７６゜例９ ２−イソブチル　ミノ−９−５−〇−ジメト　シトリチル−２−一オキシーα− Ｄ−工！スローペントフラノシル　−プリン−６１Ｈ−チオン　９ｂのム ピリジン（４０ｍｌ　）に７　（４，０ｇ、　１４．１２ｍモル）を懸濁させた ものに、０℃でトリメチルシリルクロライド（１７，１ｍｌ。

１４０ｍモル）を加えた。その反応混合物を室温で２時間攪拌した後、反応フラ スコをアイスバスで冷却して、イソブチルクロライド（１，７８ｍ１．１６．９ ５ｍモル）を加えた。この反応を室温でさらに３時間継続させた後、水（４０ｍ ｌ　）を加え、その後、ジクロロメタン（２００ｍｌ　）を加えた。有機層を分 離して、Ｎａ、　Ｓｏ、で乾燥し、４０℃の温度下、減圧状態で蒸発させた。得 られた残滓をメタノール（５０＋ａｌ　）に再び溶がして、減圧状態で蒸発乾個 した。この残滓をＣＨ，ＣＩ、に溶かして、ろ過し、ろ液をさらに精製せずに次 のステップに直接用いた。

その溶液を蒸発させて残滓を得、その残滓を無水ピリジン（２ｘ２０ｍｌ）で共 沸蒸留して乾燥させ、得られる残滓をピリジン（４０ｍｌ　）に再び溶かし、そ れにジメトキシトリチルクロライド（４，８８ｇ　、　１４ｍモル）を加えた。

この反応混合物を室温で３．５時間攪拌した後、その混合物を水（５０ｍｌ　） で希釈した。この水性混合物をＣ）（、Ｃ１，（３ｘ　１００ｍ１）で抽出し、 合した有機層を無水Ｎａ　＊　Ｓ　Ｏ＊上で乾燥した。溶媒を減圧状態で蒸発さ せて残滓を得、その残滓を溶離剤としてＣＨ，Ｃ１，−ＭｅＯＨ（０→５％）の 勾配を用いてシリカゲルカラム上で精製した。

均一部分を集めて、減圧状態で蒸発させ、６．０２ｇ　（６５％。

２ステツプで）の純粋な標記化合物を得た；　ｍｐ１３９−１４１℃（ｄｅｃ） 　、　ＩＲ（ＫＢｒ）　：　ｕｍａｘ１６９０　（ＣｍＯ）　、　３１００−３ ４００（ＯＨ，ＮＨ）　ｃｍ−’　；　ＵＶ（ＭｅＯＨ）　：λｍａｘ２３４ｎ ｍ　（δ２２，３００）　。

３３２ｎｍ　（ε２０，３００）　；’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　：δ１． １３［ｄ、６Ｈ。

Ｃ（ＣＨ，）、コ　、２．３０−２．４５　（ｍ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’旦→　、２． ８０　（ｍ。

２Ｈ，Ｃ，’旦およびＣｏ−ＣＨ＜）、３．０−３．３０　（ｍ、２　Ｈ，Ｃ， ’Ｃ旦、）。

３．７４　（ｓ、６　Ｈ，２０ＣＨ，）　、　４．３３　（ｂｒ　ｓ、２Ｈ，Ｃ ，’旦および０４′旦）　、５．５３　（ｄ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’Ｏ旦）、６．２９ 　（ｄｄ、Ｉ　Ｈ，Ｊ　＝３．８Ｈｚ、Ｃ，’旦）、６．８９−７．３７　（ｍ 、１３Ｈ，ＤＭＴ）、８．４２　（ｓ　。

ＩＨ，Ｃ，旦）　、１２．１４　（Ｓ、Ｌ　Ｈ，Ｎ、旦）、１２．６４　（ｂｒ 　ｓ、Ｌ　Ｈ。

ＮＨ）。立上、計算値：Ｃ，、Ｈ，、Ｎ、０．Ｓ、１／３ＣＨ，Ｏ）Ｉとして： Ｃ，６３，６８；　Ｈ，５，７９；　Ｎ、　１０．５１　；　Ｓ、　４．８１． 実測値：Ｃ２６３，３４、Ｈ，５，５９、Ｎ、　１０．３６　、　Ｓ　、　４． ６４゜例１０ ２−　ツブチリルアミノ−９−３−〇−−シ　ノエ　ル　−Ｎ。

Ｎ−ジイソプロピルアミノフォスフオル　々シトー５−〇−シトキシトリチル− ２−−オキシ−α−り一エリスローペン　フーノシル　−プｌンー６１Ｈ−チオ ンｌＯｂのム無水ジクロロメタン（８＋ｍｌ）に１旦（０，６５ｇ、１ｍモル） およびＮ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０，７ｍｌ、　４ｍモル）を溶か したものにアルゴン雰囲気中で、２−シアノエチル−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルア ミノクロロフォスフイン（０，２９ｍ１．１．３ｍモル）を溶かした。室温で２ ０分間攪拌した後、さらに０．２９ｍ１のフオスフオリル化剤が加えられ、さら に３０分間攪拌した後、無水メタノール（２０μｌ）を加えて、反応を打ち切っ た。５分間攪拌した後、その反応混合物はＥｔＯＡｃ内のｌＯ％ＮＥｔ、と飽和 ＮａＨＣＯ，水溶液（５０ｍｌ　）に分離した。有機層を分離して、無水Ｎａ、 Ｓｏ、で乾燥し、減圧状態で乾個した。得られた残滓を溶離剤としてＥｔＯＡｃ 　：　ＣＨ，Ｃ１，：　ＮＥｔ、　（４５：　４５　：　１０）溶液を用いて、 シリカゲルカラム上で精製し、標記化合物０．６８ｇ　（７９，５％）を無色の アモルファス状固体として得た；”ＰＮＭＲ（ＣＤＣＩ、）　：δ１４９．１５ および１５０，６　、　’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩお）：６０．９−１．４　［ｍ、 　１２Ｈ，Ｎ（ＣＨＣＨ，）、およびＣ０ＣＨ（ＣＨ，）ヨコ。

３．８０　（ｓ、６Ｈ，２０Ｃ旦、）　、６．２５　（ｍ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’旦） 　、８．２３および８．２６（２ｓ、アイソマーのＣ，！ｉ）　、　斑豆、計算 値：Ｃ，，Ｈ，，Ｎ、Ｏ，ＰＳとして：　Ｃ，６１，７４、Ｈ，６，３６、Ｎ、 　１１．４５　；Ｐ、３．６２．実測値：　Ｃ，６１，５０；　Ｈ，６，５９； 　Ｎ、　１１．１２　；　Ｐ。

３．７１゜ 例ＩＩ ３’　５’−Ｄ　１−０−　ｔ−ブチル　ジメチルシリル−２７−−オキシー６ −チオグ　ノシン旦Ｌ１１或無水Ｎ、Ｎ−ジメチルフォルムアミド（２５ｍｌ） に２′−デオキシ−６−チオグアノシン（１１）　［Ｒ８Ｈ，Ｉｗａｍｏｔｏ、 　Ｅ、　Ｍ、　Ａｃｔｏｎおよびり、　Ｇｏｏｄｍａｎ、　ＪｏＭｅｄ、　Ｃｈ ｅｍ、、　６，６８４　（１９６３）　］　（１１，８ｇ６．３ｍモル）を懸濁 させたものに、ニーブチルジメチルシリルクロライド（３，３５ｇ　、　２２ｍ モル）を加え、ついで、乾燥したイミダゾール（２，９８ｇ、　４１．９ｍモル ）を加えた。この反応混合物に湿気が加わらないようにし、室温で２４時間攪拌 した。

４０℃で、減圧状態で溶媒を蒸発させ、白い固体が得られた。

この固体を溶離剤としてＣＨ，Ｃｌヨ→ＭｅＯＨ（０→５％）の勾配を用いてシ リカゲルカラム上でのグロマトグラフイーによって精製した。適切な均一部分を 集めて、減圧状態で蒸発させ、純粋な標記の化合物を２．４ｇ　（７３，６％） 得た；　ｍｐ＞３０ｏ℃（ｄｅｃ）　、　ＩＲ（ＫＢｒ）　：　ｕｍａｘ１２５ ７　（Ｃｍ　Ｓ）　、　３１００−３４００（ＮＨ，ＮＨ，）　ｃｍ″″’　； 　ＩＪＶ　（ＭｅＯＨ）　：λｍａｘ２２６ｎｍ　（δ５，５００）　。

２７０ｎｍ　（δ３，５００）　、　３４４ｎｍ　（ｇ　１１，８００）　；　 ’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　：δ０．０７　Ｃｄ、　６　Ｈ，ｔ−Ｂｕ−Ｓ ｉ（ＣＨ，）、１　、０．８８　（ｄ、　１８Ｈ。

ｔ−Ｂｕ−ＳｉＭｅ、）　、　２．２０−２．７３　（ｍ、２　Ｈ，Ｃ，’旦お よびＣ，′ｊｉ）　。

３．６０−３．８５　（ｍ、３　Ｈ，Ｃ，’旦およびｃ、’ｃル’Ｉ　、　４． ４８　（ｄ。

ＬＨ，Ｃ，’旦）　、６．１０　（ｔ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’Ｈ）　、６．８３　（ｓ 、２Ｈ。

ＮＥｔ　）　！　８−０　（Ｓ　＊　Ｌ　Ｈ＋　Ｃｍ旦）および１１．９７　（ Ｓ　、Ｌ　Ｈ，Ｎ、旦）。

、分」元、計算値：　Ｃ，、Ｈ４，Ｎ、　Ｏ，ＳＳｉ、として：　Ｃ，５１，６ １°；Ｎ。

１３．６８　；　Ｓ　、　６．２６　；　Ｓｉ、　１０．９７゜実測値：　Ｃ， ５１，３６；　Ｈ。

８．０５　；　Ｎ、　１３．６５　；　Ｓ　、　６．２７　；　Ｓｉ、　１０． ９９゜例１２ 無水ピリジン（ｌｏｏｍｌ）に１２　（２，２ｇ、　４．２ｍモル）を溶かして 氷で冷やした溶液にイソブチルクロライド（１，３７ｍ１．１２．８ｍモル）を 加えた。この反応混合物を室温で３時間攪拌してから、砕いた氷（１００ｇ）お よび酢酸エチル（４００ｍｌ　）を含んだ飽和炭酸水素ナトリウム水溶液（３０ ０ｍｌ）に入れた。この水性混合物を１５分間攪拌した。有機層を分離して、水 （２ｘ５０＋＋＋１）で洗浄してから、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。

減圧状態で溶媒を蒸発して、残滓を得、この残滓をトルエン（３ｘ２０ｍｌ）で 共沸蒸留して、ピリジンの最後の痕踏を取り除いた。残った青黄色のオイルを、 溶離剤としてＣ肌Ｃ１，中２％ＭｅＯＨを用いて、シリカゲル上でのクロマトグ ラフィー（こよって精製し、２．Ｉｇ　（７５％）の純粋な標記の化合物を得た ；ｍｐ８５℃。ＩＲ（ＫＢｒ）　：ｕｍａｘ１６９０　（ＣｍＯ）　、　３１０ ０−３４００（ＮＨ）　ａｍ−’　；ＵＶ　（ＭｅＯＨ）　：　λｍａｘ２２６ ｎ鳳　（Ｃ９，７００）　、３３２ｎｍ（６１１，５００）　；　’ＨＮＭＲ（ ＤＭＳＯ−ｄ、）　：δ０．０８　［ｄ、、　６　Ｈ。

ニーＢｕ−５ｔ　（ｃｏｓ　）ｍ　］　ｒ　ｏ−８ｓ　＜　ａ　、　、　ｌｓ　 Ｈｌ上−Ｂｕ−５ｉＭｅ、）　、　１．１４［ｄ、、　！２Ｈ，２ＣＯ−Ｃｌ（ （ＣＨ，）、］　、　２．２８−２．８９　（ｍ、３　Ｈ。

Ｃ，’Ｈ，Ｃ，’ＨおよびＣ旦Ｍｅ、）　、　３．６１−３．８９　（ｍ、３　 Ｈ，Ｃ，’旦およびＣ０′旦、）　、　４．５２　（ｓ、ＬＨ，Ｃ，’ｊｊ）　 、　８．３８　（ｓ、ＬＨ。

Ｃ，！ｉ）および比９３　（ｂｒｓ、Ｌ　Ｈ，ＮＨ）。

例１３ ２−イソブチルアミノ−６−イソプチリルチオー９−２−−オキシ−−Ｄ−エリ スローペン　フラノシル　プリン１６のＡ無水テトラヒドロフラン（２５ｍｌ） に１３　（２，Ｉｇ、　３．６ｍモル）を溶かしたものに０℃でテトラ−ｎ−ブ チルアンモニウムフルオライド（１７，５ｍｌ、　１７．５ｍモル、Ｔ）（Ｆ中 ＩＭ溶液）を加えた。

室温で３時間攪拌した後、減圧状態で溶媒を蒸発させ、残った褐色の固体を溶離 剤としてＣＨＨＣｌ２−ＭｅＯＨ（０−１０％）の勾配を用いて、シリカゲルカ ラム上でのクロマトグラフィ−（こよって精製した。均一部分を集めて、減圧状 態で蒸発させ、１．１５ｇ　（８４，２％）の標記化合物を得た；ｍｐ：）３０ ０’Ｃ６ＩＲ（ＫＢｒ）：　ｕｍａｘ１７００　（Ｃ＝　Ｏ）、　３１００−３ ６００　（ＮＨ，ＯＨ）　ａｍ−’　；　ＵＶ（ＭｅＯＨ）　：λｍａｘ２３２ ｎｍ　（Ｃ８，６００）　、　２４６ｎｉ　（ｔ−１１，５００）　。

２９４ｎｉ　（δ７，４００）　；　’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　：δ１． １２　［ｄ、、　１２Ｈ。

２　Ｃ０ＣＨ（ＣＨ，）、］　、　２゜２８−２．８９　（ｍ、３　Ｈ，Ｃ，’ 旦、０１′旦およびＣｆｉＭｅ、）　、　３．５３−３．８６　（ｍ、３　Ｈ， Ｃ，’ＨおよびＣ１’ＣＨ，）　。

４、５３　（ｓ　ｒ　Ｉ　Ｈｔ　Ｃｍ　’旦）　、４．９４　（ｔ　、Ｉ　Ｈ， Ｃ，’ＯＨ）　、５．３６（ｄ、、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’Ｏ旦）　、６．３５　（ｔ、 Ｉ　Ｈ，Ｃ，’Ｈ）　、８．６１　（Ｓ。

ＬＨ，Ｃ，旦）および１０．６３　（ｓ　、Ｌ　Ｈ，ＮＨ）。

例１４ 化合物１６　（１，Ｏｇ、　２．３６ｍモル）を無水ピリジン（５ｘ２０ｍｌ） で繰り返し共沸蒸留して乾燥し、乾燥ピリジン（１０ｍｌ）内に再び溶解し、そ れに４，４７−シメトキシトリチルクロライド（１，１５ｇ　、　３．４ｍモル ）を加えた。室温で２．５時間攪拌した後、この反応混合物をジクロロメタン（ ２００ｎｉ）で希釈した。有機層を水（１００ｎｉ）　、飽和ＮａＨＣＯ，溶液 （１００ｎｉ）　、そして水（１００ｉ１）で連続的に洗浄し、それから無水Ｎ ａ＊　Ｓ　Ｏ４で乾燥した。減圧状態で溶媒を蒸発させ、残滓を溶離剤としてＣ ＨＨＣｌ２中の２％ＭｅＯＨを用いて、シリカゲルカラム上でのクロマトグラフ ィーにより精製した。均一部分を集めて乾燥状態になるまで蒸発させ、白い固体 を得た。この固体を最少量のＣＨヨＣＩ。

（−５ｍｌ）に溶かし、ペンタン（２００１１）に加えて再析出させ、Ｏ，１５ ｇ　（８５％）の標記化合物を得た；　ｍｐ１０８℃（ｄｅｃ）。

ＩＲ（ＫＢｒ）　：　ｕｍａｘ１７００　（Ｃ＝Ｏ）　、　３２００−３６００ 　（ＮＨ，ＯＨ）ａｍ−’　；ＵＶ　（ＭｅＯＨ）　：　λｍａｘ２３６ｎｍ　 （ｔ　１５，７００）　、　２９６ｎｍ（Ｃ６，４００）　；”Ｉ（ＮＭＲ（Ｄ ＭＳＯ−ｄ、）　：δ１，０９　［ｑ、　１２Ｈ。

２ＧＯＣｌ（（ＣＨ，）］、、２．３０−２．９０　（ｍ、４　Ｈ，Ｃ，’旦　 Ｑ、ＮＨ。

２ＣＨＭｅ、）　３．７０　（ｓ、　６　Ｈ，２０ＣＨ，）　、　３．９８　（ ｄ、、Ｌ　Ｈ。

Ｃ１′旦）、４．５５　（ｍ、ＩＨ，Ｃ，’ｊｊ）、５．３３　（ｄ、、ＬＨ， Ｃ，’０旦）６．４　（ｔ　、Ｉ　Ｈ，Ｃ，’旦）、６．７０−７．２８　（ｍ 、１３Ｈ，ＤＭＴ）。

８．４９　（ｓ　、Ｌ　Ｈ，Ｃ１Ｈ）およびｌ（１，５６（ｓ　、Ｌ　Ｈ，ＮＨ ）。

例１５ ２−イソブチリルアミノ−６−イソプチリルチオー９−３−〇−−シアノエチル 　−ＮＮ−ジイソプロピルアミノフオスフオルアミジトミノ−０−ジメトキシト リチル−２−−オキシー−Ｄ−工１スローペントフラノシル　プリン１４のム無 水ジクロロメタン（５ｍｌ）に１５　（０，３０ｇ、　０．４２ｍモル）および Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（０，２９ｍ１．１．６８ｍモル）を溶か したものに、アルゴン雰囲気中で、攪拌しな力τら、２−シアノエチル−Ｎ、Ｎ −ジイソプロピルグロロフオスフオルアミノト（０，１９ｍ１．０．８４＋＋＋ モル）を加えた。この反応混合物を室温で１時間攪拌して、その後、酢酸エチル （４５ｍｌ）とＮＨ５（５ｍ１．）を加えた。この混合物は冷だｂｔ（０−５℃ ）飽和ＮａＨＣＯ，水溶液（５０ｍｌ）と分離された。有機層を無水Ｎａ、ＳＯ ，上で乾燥して、減圧状態で蒸発させた。残ったオイルを溶離剤としてＥｔＯＡ ｃ　：ＣＨ，Ｃ１，：ＮＥｔ、　（４５：４５　：　１０．　ｖ／ｖ）を用いて シリカゲルカラム上でのクラマドグラフィ一によって精製した。均一部分をまと めて、減圧状態で蒸発させ、０．１８ｇ　（４７％）の標記化合物をアモルファ ス状の白し）固体として得た。’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　：δ１，３４　 ［ｍ、　２４Ｈ，、２ＣＯＣＨ（ＣＨ，）、およびＮＣＨ（ＣＨ，）、］　、　 ２．５−４．０　（ｍ、　８　Ｈ，Ｃ，’旦。

Ｃ＊′旦、ＯＣＣＨＣ旦ヨＣＮ、２ＣＯＣ旦）　、３．７１　（ｓ、６Ｈ，２０ Ｃ旦、）。

３．８８−４．１２　（ｍ、３　Ｈ，Ｃ，’旦およびＣ，’Ｃｔ（、）　、　４ ．８３　（ｍ。

ＬＨ，Ｃ，’旦）６゜４３　（ｔ、　Ｉ　Ｈ，Ｃ，’旦）、　６．６９−７．２ ９　（ｍ、１３Ｈ。

ＤＭＴ）　、　８．５２　（ｓ　、Ｉ　Ｈ，Ｃ，旦）および１０．５　（ｂｒ　 ｓ、Ｌ　Ｈ，ＮＨ）；　”ＰＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　：δ１３４および１４ ４゜例１６ ２−イソブチルアミノ−９−２−−オキシ−−Ｄ−エリスローペントフラノシル 　プリン−６１Ｈ−チオン１８のム無水ピリジン（２５ｍｌ）に２７−ジオキシ −６−チオグアノシン（１７）　［Ｎ、　Ｂ、　Ｈａｎｎａ、　Ｋ、　Ｒａｍａ ｓａｍｙ、　Ｒ，Ｋ、　Ｒｏｂｉｎｓ及びＧ、　Ｒ。

Ｒｅｖａｎｋａｒ、　Ｊ、　Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ、　Ｃｈｅｍ、、　２５．１ ８９９　（１９８８）　］（２，Ｏｇ、　７．ｂａモル）を懸濁させたものに０ ℃で、トリメチルシリルクロライド（１０，８ｍｌ、　７１ｍモル）を加えた。

この反応混合物を室温で２時間攪拌した後、反応フラスコをアイスバスで冷却し て、イソブチルクロライド（０，９１ｍ１．８．６ｍモル）を加えた。この反応 を０℃で３０分間、さらに室温で３時間継続させた。この反応混合物に水（４０ ｍｌ　）を加え、その後、ジクロロメタン（２００ｎｉ）を加えた。５分間震動 後、有機層を分離して、４０℃、減圧状態で蒸発させた。得られた残滓をトルエ ン（５ｘ２５ｍｌ）で共沸蒸留し、ピリジンの最後の痕跡を取り除き、溶離剤と してＣＨ，Ｃ１，中５％ＭｅＯＨを用いてシリカゲルカラム上でのクロマトグラ フィーで精製した。均一部分をまとめて蒸発させ、１．６　ｇ　（６３％）の標 記化合物を得た；峠）２４０℃　（ｄｅｃ）、ＩＲ（ＫＢｒ）　：　ｕｍａｘ１ ２９０　（Ｃ＝Ｓ）＊１６９０　（Ｃ＝Ｏ）　、　３１５０−３２５０　（ＮＨ ，ＯＨ）　ｃｍ″″’　；ＵＶ　（ＭｅＯＨ）　：λｍａｘ２３２ｎｍ　（δ８ ，１００）　、３３０ｎｍ　（ｇ　１０，７００）　；　’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ −ｄ、）：δ１，１４　［ｄ、、　６　Ｈ，ＣＨ（ＣＨ，）、］　、　２．２４ −２．８６　（ｍ。

３Ｈ，Ｃ，’旦、Ｃ，′旦、Ｃ旦＜）、３．５３　（ｍ、２　Ｈ，Ｃ，’ＣＨ， ）。

３．８５　（ｍ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’旦）、４．３８　（ｓ　、Ｉ　Ｈ，Ｃ，’旦） 、４．９８（ｔ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’ＯＨ）　、　５．３３　（ｔ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’ Ｏ旦）　、　６．２１（ｔ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’Ｈ）、８．４２　（ｓ、Ｉ　Ｈ，Ｃ ，旦）、１２．０　（ｂｒ　ｓ。

ＩＨ，Ｎ、旦）および１３．３０　（ｂｒ　ｓ、Ｌ　Ｈ，ＮｊｉＣＯ）　、　此 、計算値：　Ｃ１）Ｉ、、Ｎ、０４Ｓ、　Ｈ，Ｏとして：　Ｃ，４５，２７、Ｈ ，５，６９、Ｎ。

１８．８５　、　Ｓ　、　８．６５゜実測値：　Ｃ，４５，４６、Ｈ，５，４１ 、Ｎ。

１８．５４　、Ｓ　、　８．９７゜ 例１７ ２−　ツブチル　々ノー９−５−〇−ジメ　キシトリチル−２−−オ　シー　− Ｄ−エリスローペントフーノシル　−プリン＝６１Ｈ−チオン２０のＡ 無水ピリジンに１８　（１，５ｇ、　４．２ｍモル）を溶かしたものを減圧状態 で数回蒸発させ（４ｘ２５ｍｌ）で乾いた残滓を得、この残滓をピリジン（２０ ｍｌ　）に再び溶かした。このピリジン溶液に４，４′−ジメトキシトリチルグ ロライド（１，５３ｇ　。

４．３ｍモル）を加え、室温で４時間攪拌した。この反応混合物はＣＨ，Ｃ１， （２００ｍｌ）と水（２００ｍｌ　）が分離した。有機層を分離し、無水Ｎａ、 　Ｓｏ、上で乾燥し、減圧状態で蒸発させた。残滓をトルエン（４ｘ５０ｍｌ） で共沸蒸留して、ピリジンの最後の痕跡を取り除き、溶離剤としてＣＨ，Ｃ１， −ＭｅＯＨ（０−４％）の勾配を用いてシリカゲルカラム上でのクロマトグラフ ィーで精製した。均一部分を集めて、減圧状態で蒸発させ、固体を得た。この白 い固体を最少量のＣＨ，Ｃ１，（３ｍｌ）　１に溶かし、ペンタン（〜ｌｏｏｍ ｌ）に加えて再析出させ、１．１２ｇ　（６７％）の標記化合物を得た；　ｍｐ １４６℃（ｄｅｃ）　、　ＩＲ（ＫＢｒ）　：　υｍａｘ１２５０　（Ｃ＝Ｓ） 　、　１６９０　（Ｃ＝○）　、　３１００−３６００　（ＮＨ，ＯＨ）　；Ｕ Ｖ　（ＭｅＯＨ）　：λｍａｘ２３６ｎｍ　（ε１７，７００）　、　２８６ｎ ＋ｉ　（Ｃ５，２００）　。

３３２ｎ＋＊　（＃：　１４，３００）　；　’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　 ：δ１．１４　［ｄ、　６Ｈ。

ＣＨ（Ｃ！ｉ、）、］　、　２．１５−２．８６　（ｍ、４　Ｈ，Ｃ，’旦、Ｃ １′旦およびＣＨ）。

３．７２　（ｓ　、６　Ｈ，２０ＣＩ（、）、３．９６　（ｍ、ｌ　Ｈ，Ｃ４’ 旦）、４．４３（ｔ、Ｉ　Ｈ，Ｃ，’旦）、５．３７　（ｄ、、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’ Ｏ旦）、６．２７（ｔ、ＩＨ，Ｃ％旦）　、　６．７６−７．３０　（ｍ、　１ ３Ｈ，ＤＭＴ）　、　８．９０（ｓ、ＬＨ，Ｃ，旦）　、　１１．９３　（ｓ、 Ｌ　Ｈ，ＮＨ）および１３．４３（ｓ　、Ｉ　Ｈ、Ｎ！１ＣＯ−）　−立豆−計 算値：Ｃ，，Ｈ，，Ｎ、０．５．　１／２ＣＨ，ＯＨとして：　Ｃ，６３，４７ ；　Ｈ，ｓ、ｓｓ；　Ｎ、　１０．４２．　Ｓ、　４，７７゜実測値：　Ｃ，６ ３，２０，Ｈ，５，６９，Ｎ、　１０．３３．　Ｓ、　４．７８゜例１８ ２−イソブチリルアミノ−９−３−〇−−シ　ノエチル　−ＮＮ−ジイソプロピ ルアミノフォスフオル　ミント−５−〇−ジメト　シ　リチルー２−デオキシ− −り一エリスローベントフラノシル　−プリン−６１Ｈ−チオン１９のムおよび Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン（，０，３７ｍ１．２，１ｍモル）を溶か したものにアルゴン雰囲気中で２−シアノエチル−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルグロ ロフォスフォルアミノト（０，２５ｍ１．１．０６ｍモル）を攪拌しながら加え た。この反応混合物を室温で５０分間攪拌した。そしてこの反応混合物に酢酸エ チル（４５ｍｌ　）およびトリエチルアミン（５ｍｌ）を加え、得られた溶液は 氷冷の飽和Ｎａｔ（ＣＯオ溶液（５０ｍｌ　）と分離された。

有機層を分離し、無水Ｎａ、Ｓｏ０上で乾燥し、減圧状態で蒸発させて、オイル を得た。残留オイルをＣＨ□Ｃ１，（３ｍｌ）に溶解し、溶離剤としてＥｔＯＡ ｃ：ＣＨ，Ｃ１，：ＮＥｔ、　（４５：４５：　１０．　ｖ／ｖ）を用いて、シ リカゲルカラム上でのクロマトグラフィーで精製した。適切な均一部分を集めて 、蒸発させ、アモスファス状の白い固体として、０．４３ｇの化合物側を得た。

　”　’　ＰＮＭＲ（ＣＤＣＩ、）　：δ１４８，０１および＋４９，０８　； “ＨＮＭＲ（ＣＤＣ１，）　：δ０．８４−１．３５［ｍ、　１８Ｈ，ＣＨ（Ｃ Ｈ，ハおよび２　ＮＣＨ（ＣＨ，）、コ、　２．５−４．０（ｍ、８　Ｈ，Ｃ， ’Ｈ，Ｃ，’Ｈ，２ＣＨ−およびｏｃ！Ｕ、ｃＨ，ｃＮ）、　３．７２（ｄ、６ 　Ｈ，２０Ｃ旦、）　、　４．１−４．８５　（ｍ、３　Ｈ，Ｃ，’旦およびｃ 、’ｃ旦、）　、６．１８　（ｔ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’旦）　、６．７３−７．４６ 　（ｍ、１３Ｈ。

ＤＭＴ）　、　７．９０　（ｄ　、Ｉ　Ｈ，Ｃ，旦）、　１１．９３　（ｄ、Ｉ 　Ｈ，ＮＨ）および８．５５　（ｓ、Ｉ　Ｈ，ＮＨ）、皿、計算値：　Ｃ４，Ｈ ，、Ｎ、Ｏ，ＳＰ。

１、．５Ｈ，０として：　Ｃ，５９，８５；　Ｈ，６，５０；　Ｎ、　１１０１ ０；　Ｓ、　３．３６；Ｐ、３，５０゜実測値：　Ｃ，６０，０１；　Ｈ，６， ７９；　Ｎ、　１１．２３　；　Ｓ。

３．２６．　Ｐ、　４．０１゜ 例１９ ２−イソブチルアミノ−７−−〇−リボフラノシルーピロロ３２〜ｄ　ピリミジ ン−４３８５Ｈ−オン（２２の旦 無水ピリジン（２０ｍｌ）に２−アミノ−７−β一旦−リボフラノシル−ピロロ −［３，２−ｄコビリミジン−４（３Ｈ，５Ｈ）−オン（２１）　［Ｎ、　Ｓ、 　Ｇｉｒｇｉｓ、　Ｍ、　ＡｏＭｉｃｈａｅｌ、　Ｄ、　Ｆ、　Ｓｍｅｅ、　Ｈ ｏＡ−Ａｌａｇｈａｍａｎｄａｎ、　Ｒ，Ｋ、　ＲｏｂｉｎｓおよびＨ，Ｂ、　 Ｃｏｔｔａｍ、　ＪｏＭｅｄ。

Ｃｈｅｍ、、　３３．２７５０　（１９９０）コ（２，０ｇ、　７，１ｍモル） を懸濁させたものにトリメチルシリルクロライド（９，Ｏｗｌ、　７１ｍモル） を０℃で加えた。この反応混合物を室温で２時間撹拌した後、反応フラスコをア イスバスで冷やして、イソブチルグロライド（０，９０ｍ１．８．５ｍモル）を 加えた。この反応を室温でさらに４時間継続させた後、冷水（２０ｍｌ　）を加 え、次にＣＨよＣ１，を加えた。有機相を分離し、４０℃で減圧状態で蒸発させ た。得られた残滓をトルエン（４ｘ２５ｍｌ）で共沸蒸留し、ピリジンの最後の 痕跡を取り除いてから、乾燥ＣＨ，ＣＩ、と粉砕した。分離した無色の固体をろ 過で集めて、乾燥させた。この生成物を少量含むろ液を、溶離剤としてのＣＨ， ＣＩ、中で５％ＭｅＯＨを用いてシリカゲル上でのクロマトグラフィーにかけた 。均一成分を集めて減圧中で乾燥状態になるまで蒸発させ、上の生成物と結合さ せて、標記の化合物１．９０ｇ　（７６％）を得た；ｍｐ２２２−２２４℃；　 ｍｐ１４６℃（ｄｅｃ）　、　ＩＲ（ＫＢｒ）　：　ｕｍａｘ１６８０　（Ｃ＝ Ｏ）。

３０５０−３５００　（ＯＨ，ＮＨ）　ａｍ−’　；　ＵＶ　（ＭｅＯＨ）　： λｍａｘ２４６ｎｍ（ε１５，４００）　、　２７４ｎｍ　（ε１０，７００） 　；’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　：δ１．１０　［ｄ、６　Ｈ，Ｃ（ＣＨ， ）ヨ］　、２．７５　（ｍ、Ｌ　Ｈ，ＣＯＣ旦）。

３．３０−３．８０　（ｍ、３　Ｈ，Ｃ，’旦、ｃ、’ｃ旦、）　、３．９０　 （ｔ、Ｉ　Ｈ。

０８′旦）　、４．０９　（ｔ　、Ｌ　Ｈ，Ｃ，’旦）、４．８１　（ｄ、ＬＨ ，Ｊ＝６．０Ｈｚ、Ｃ，’旦）、７．４２　（ｄ、Ｌ　Ｈ，Ｊ　＝２．８Ｈｚ、 Ｃ，’旦）。

１１．３５　（ｂｒ　ｓ、Ｌ　Ｈ，Ｎ、旦）および１１．９８　（ｂｒ　ｓ、２ 　Ｈ，Ｎ、旦およびＮＨ−１Ｂｕ）　ｓ　旦、計算値：Ｃ，、Ｈ，０Ｎ４０．、 　１／２ＭｅＯＨとして：　Ｃ，５０，５４、Ｈ，６，０２、Ｎ、　１５．２１ ．実測値：　Ｃ，５０，８１。

Ｈ，５，７０；　Ｎ、１４．８３゜ 例２０ ２−　ツブチル　ミノ−７−３５−０−１１３３−−トー　ソブロビル−１−１ ３−ジ　ソプロビル　−　−Ｄ−リボフラノシル　−ピロロ　３２−ｄ　ピリミ ジン−４３Ｈ５Ｈ−オン２３のム 無水ピリジン（３０ｍｌ　）に２２　（２，６８ｇ、　７．６１ｎ＋モル）を溶 かしたものに１，３−ジクロロ−１，１，３，３，−テトライソプロピルジシロ キサン（２，９１ｍ１．９．１３ｍモル）を加えた。この反応混合物を室温で２ ．５時間撹拌すると、ジクロロメタン（１００ｍｌ）と水（ｌｏｏｍｌ）に分離 した。有機層を分離し、無水Ｎａ、　ＳＯ，上で乾燥し、減圧状態で蒸発させた 。残滓を溶離剤としてのジクロロメタン中で２％ＭｅＯＨを用いて、シリカゲル カラム上でのクロマトグラフィーによって精製した。適切な均一部分を集めて、 減圧状態で溶媒を蒸発させ、標記化合物３．０７ｇ　（６７，８％）を得た；　 ｍｐ１４８−１５０℃、ＩＲ（ＫＢｒ）　＋　１６８０（Ｃ＝Ｏ）、　３０００ −３５００　（ＯＨ，ＮＨ）　ｃｍ″″’　；　ＵＶ　（ＭｅＯＨ）　：λｍａ ｘ２４４ｎｍ　（ｇ３０，４００）　、　２７６ｎｍ　（ｇ　１２，６００）　 ；’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　：δ０．９０−１．２０　［ｍ、　３４Ｈ， Ｃ０ＣＨ（ＣＨ，）、およびＯ−Ｓｉ　（ＣＨＭｅ、　）。

−０−５ｉ（ＣＨＭｅ、）、１．２．７５　（ｍ、Ｉ　Ｈ，ＣＯＣＨＭｅ、）　 、　３．７５−４．３０（ｍ、５　Ｈ，Ｃ，’Ｈ，Ｃ，’ＣＨ，，Ｃ４’旦およ びｃ、’ｃ旦、）　、　４．９２　（ｄ。

Ｉ　Ｈ，Ｊ　＝２．６Ｈｚ、Ｃ，’旦）、７．２８　（ｓ　、Ｉ　Ｈ，Ｃ，’Ｈ ）、１１．４０（Ｓ　、Ｌ　Ｈ，Ｎ、ｊｊ）および１２．００　（ｂｒ　ｓ、　 ２　Ｈ，Ｎ、旦およびＮＨ−１Ｂｕ）　、　■、計算値：　Ｃ，、Ｈ４，Ｎ、Ｏ ，Ｓｉ、、　１　／　３ＭｅＯＨとして：Ｃ，５４，２２、Ｈ，７，８８、Ｎ、 　９．２５　、実測値：　Ｃ，７，９３；　Ｈ。

７．９３　、Ｎ、８．８３゜ 例２１ ２−イソブチル　ミノ−７−３５−０−１１３３−−トラ　ソプロビル−１３− ジシロキサンニジ　ル　−２−フェノ　ジチオ−カルボニル−−Ｄ−リボフラノ シル　ピロロ　３２−ｄ　ピリミジン−４３Ｈ−オン２６のＡ無水アセトニトリ ル（１０ｍｌ）に２３　（０，８０ｇ、　１．３４ｍモル）および４−ジメチル アミノピリジン（０，３３ｇ、　２．７ｍモル）を懸濁させたものにアルゴン雰 囲気中でフェノキシチオカルボニルクロライド（０，２０＋ａｌ、　１．４７ｍ モル）を加えた。室温で６時間撹拌した後、反応混合物をＣＨ，Ｃ１，（７５ｎ ＋１）で希釈した。有機層を分離し、水（２ｘ２５ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ、　Ｓ Ｏ４で乾燥した。

減圧状態で溶媒を蒸発させた。こうして得られた残滓を、溶離剤としてのＣＨ， Ｃ１，中１．５％ＭｅＯＨを用いてシリカゲルカラム上でのクロマトグラフィー によって精製した。適切な均一部分を集めて、蒸発させ、標記化合物０．７１ｇ 　（７２，５％）を得た；ｍｐ９８−９９℃、ＵＶ　（ＭｅＯＨ）　：λｍａｘ ２６２ｎｍ　（ｇ２６，０００）　、　３３２ｎｍ（ｇ１２，５００）　；’Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　：δ０．８０−１．３０　［ｍ。

３４Ｈ，Ｃ０ＣＨ（岨、）１およびＯ−Ｓｉ　（Ｃ±、）、−０−ＳＬ（Ｃ±） ３］。

２．８０　（ｍ、Ｌ　Ｈ，ＣＯＣＨＭｅ、）　、３．８０−４．２０　（ｍ、４ 　Ｈ，Ｃ，’旦。

Ｃ，／旦およびｃ、’ｃ旦、）　、　４．９２　（ｂｒ　ｓ、Ｉ　Ｈ，Ｃ，’旦 ）　、　５．２１　（ｄ。

Ｌ　Ｈ，Ｊ　＝３．８Ｈｚ、Ｃ，’旦）、７．１０−７．６０　（ｍ、５　Ｈ， ＱＣ，ｊｉ、）。

８．０３　（ｓ、Ｌ　Ｈ，Ｃ，旦）　、　１１．７９　（ｂｒ　ｓ、Ｌ　Ｈ，Ｎ Ｊｊ）および１２．２４　（ｂｒ　ｓ、２　Ｈ，Ｎ、！およびＮＨ−１Ｂｕ）。

例２２ ２−　ツブチリルアミノ−７−３５−０−１１３３−一トーイソプロピル−１３ −ジシロキサンジイル　−２−デオ　シー　−Ｄ−工１スローペントフラノシル 　ピロロ　３２−ｄ　ピリミジン−４３Ｈ５Ｈ−オン２５のＡ無水トルエン（２ ５ｍｌ）に２６　（０，６５ｇ、　０．８４５ｍモル）お、よびα、α−アゾビ スイソブチロニトリル（５０ｍｇ）を溶がしたものに、アルゴン雰囲気中で、ト リーニーブチルチンハイドライド（１，３６ｍ１．５．１ｎモル）を加えた。こ の混合物を撹拌しながら６５℃で２．５時間加熱し、その後、溶媒を減圧状態で 乾燥状態になるまで蒸発させた。このようにして得られた残滓を溶離剤としての ＣＨ，ＣＩ、中２％ＭｅＯＨを用いて、シリカゲルカラム上でのクロマトグラフ ィーによって精製された。適切な均一成分を集めて蒸発させ、純粋な標記化合物 Ｑ、３０ｇ　（６１，２％）を得た；　ｍｐ９３−９５℃。ＩＲ（ＫＢｒ）　： 　ｕｍａｘ１６８０　（Ｃ＝Ｏ）　。

３１００−３５００　（ＮＨ）　ｃｍ−’　；　ＵＶ　（ＭｅＯＨ）　：λｍａ ｘ２４８ｎｍ　（ｅ　２４．２００）　。

２８２ｎｍ　（ｔ　１０，６００）　；　’ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ、）　：δ ０．８０−１．２０　［ｍ。

３４Ｈ，Ｃ０ＣＨ（ＣＨ５）、および０−５ｉ（Ｃ，比一旦、）、−０−Ｓｉ（ Ｃ±、）、］。

２．７５−３．１０　（ｍ、、３　Ｈ，ＣＯＣＨＭｅ、、Ｃ，’旦および０３′ 旦）　、３．７５−４．３０　（ｍ、４　Ｈ，Ｃ，’Ｈ，Ｃ，’旦およびＣ，’ Ｃ旦、）　、　４．９２　（ｄｄ。

ＬＨ，Ｃ，’旦）、７．２４　（ｓ、Ｉ　Ｈ，Ｃ，Ｈ）、１１．４１’（ｓ、Ｌ 　Ｈ。

Ｎ、旦）および１１．９３　（ｓ、Ｌ　Ｈ，ＮＨ−１Ｂｕ）。且、計算値二Ｃ， ，Ｈ，，Ｎ、Ｏ，Ｓｉ、０ＭｅＯＨとして：　Ｃ，５５，０６；　Ｈ，８，２４ 、Ｎ。

９．１６．実測値Ｃ，５５，３６、Ｈ，８，０６、Ｎ、　８．４６゜乾燥アセト ニトリル中に皿を溶かしたものをＮａＨの存在下イソブチルクロライドで選択的 にアルキル化すると、Ｎ−５イソブチリル誘導体（２Ａ）が得られる。イソブチ リル誘導体（旦）をＴＨＦ中テトラ−ｎ−ブチリルアンモニウムフルオライドの １モル溶液で処理すると、３’、　５’−ヒドロキシル基の離脱が起こり、２− イソブチリルアミノ−Ｎ、−イソブチリル−７−β一旦一エリスローペントフラ ノシル−ピロロ［３，’２−ｄ］ピリミジンー４（３Ｈ）−オン（訂）が得られ る。４，４′−ジメトキシトリチルエーテルによる５′−ヒドロキシル基の選択 的保護を行うと、従来の手順通り、５　’−ＯＤＭＴ誘導体（皿）が得られる。

皿の３′−ヒドロキシル基は無水ジクロロメタン中でジイソプロピルエチルアミ ンの存在下で、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルグロロフオスフオルアミノトと反応して フォスフオルアミシト（社）に転換される。

例２３ ＴＡ　ＧＣ’　、の応　トリプレットノ通常のアンチパラレル三重構造形態で、 ＴＰＯは主要らせん溝内のＧＣＣあるいはＴＡＴ　トリプレット基によって二重 ＤＮＡに結合する。このクラスの三重らせん構造において、第三の鎖はよりプリ ンを含んだ二重鎖に対してアンチパラレルに結合すに含んでいる鎖がピリミジン によって中断されている部位が存在する場合が時々ある。こうした不整合は変形 結合部位の形態を構成し、局所塩基ベア・ダイアトを中心とした逆転によってポ リプリン・レフェレンス・アイソマーに関連づけられている。予備的な分子モデ ル化作業の結果では、第三の鎖のＴ及びＧ基がＴＡ及びＣＧ逆位の部位でＴＡＴ 及びＧＧＣトリブレットを形成することができるが、その二重構造及びＴＦＯバ ッグボーンがかなり歪んでいる場合に限られることを示唆している。この例で、 ＴＡ及びＣＧ逆位の二重部位は、構造化された特殊なプローブにより認識できる であろう種類の局所的に変形された二重構造を形成する。

銅フェナントロリン、（Ｃｕ（ＯＰ）、　）の結合によりもたらされる化学的割 れ目の変形二重構造マツピングを測定するために、構造的プローブとして二重Ｄ ＮＡインターカレイターが用いられた。銅フェナントロリンはＤＮＡをその結合 部位近くで切断する能力を持っている。ＥＧＦＲプロモーター領域内部の二つの 部位で形成される三重構造のマツピング分析が行われた。

対応するアンチパラレルＴＰＯの結合に関する図３に示されているように、この 二重構造はＴＡまたはＣＧ逆位の部位だけで、非複合化ＤＮＡに対する高いＣｕ （ＯＰ）、感作性を示す。Ｃｕ　（ＯＰ）　、は一般的に、二つのクラスの結合 リガンド間の単純な競合から予想されるように、三重らせん内部の結合から排除 される。

ＥＧＦＲ部位を表１に示す。

以下余白 表Ｉ　ＥＧＦＲ部位 表１は３　’　Ａ−ＥＧ３６ａｐ及び３　’　Ａ−ＥＧ４ａｐ複合体の詳細マツ プを示す。コントロールされたＴＦＯｓ　３　’　Ａ−ＨＩＶ３８ｐ及び３′Ａ −ＥＧ３１　ａｐも示されている。これはスタート・コードンから−３５２近く のＥＧＦＲプロモーター領域の詳細マツプである。３′Ａ−ＥＧ４ａｐ及び３　 ’　Ａ−ＥＧ３６ａｐ三重構造の図が低解像度で示されている。括弧内の数字は 図３に示されている放射能でラベルしたバインド■端からの距離を示している。

コントロールされたＴＦＯｓ　３　’　Ａ−）ＩＩＶ３８ａｐ及び３’　Ａ−Ｅ Ｇ３１ａｐは結合しない。ポリプリン／ポリピリミジン・ストレッチがその三重 構造結合部位内のＴＡまたはＣＧ逆位によって中断されている部位に下線がつけ られている。注意すべき点は、両方の複合体において、Ｃｕ　（ＯＰ）っ過敏性 は部位選択性三重構造形態によって逆位部位で誘発されるのである。この効果は 非複合化二重構造内、及びコントロール・オリゴヌクレオチドの添加によっては 検出されなかった。このマツピング・データは検出される歪みの詳細を正確に決 定することはできないが、過敏性の証拠を提供すると同時に、結合ＴＰＯがそう した部位上にスペーサーとして受動的に広がらない可能性があることを示唆して いる。

その代わりに、逆位部位は二重結合部位のかなりの補正的歪みを必要とするトリ ブレットＨ結合を形成する。常に副次的溝の拡張を伴う主要溝の局所的な挟まり は特殊な構造的可能性を示している。

例２４ ＴＡ　ＣＧ”１３　φのトリプレッ るためのモデル ＴＡ及びＧＣ逆位部位での一定の長さを持ったトリプレット形態を説明するため のひとつの構造的仮説を、隣接ポリプリン連鎖（ｒｕｎ、）内での安定したトリ プレット形態に関する逆ホッグスティーン／反（ＲＨ／　ａ　）モデルに基づい て描かれた図１に示す。図１で、そのトリプレット系は、シンメトリ−及びＨ結 合関係を強調するために系統図的な形で示しである。

標準的なＧＧＣトリプレット形成のプロセスで、三番目の鎖のグアノシンが基礎 となる二重構造のＧに対する二つのＨ結合に関与している。同様に、Ｔは基礎の 二重構造でひとつのＨ結合を出し、ひとつのＨ結合を受け入れている。両方の例 で、ＧとＴはシンメトリ−の擬二っ近軸を有しており、いつでもホッグスティー ン及び逆ホッグスティーン・タイプ・トリブレットの両方と組み合わさることが できる。図１の上半分は逆ホッグスティーン・トリプレットを系統図的に示した ものである。三番目の鎖のＧ及びＴと結びついた太線はアンチ・コンファーメー ション（ａｎｔｉ−ｃｏｎｆｉｒｍａｔｉｏｎ）におけるフラノース面（直立及 び突出部）で示される位置を示している。

そうした逆ホッグスティーン反（ＲＨ／　ａ　）構成では、低解像度での構造決 定の必要性から、二重構造標的のプリンを豊富に含む基準鎖に対してアンチパラ レルな位置関係で三番目の鎖を示しである。基礎となる二重構造の基準とされる 鎖は図１では左側に位置されている。こうしたトリブレットを構成する三つの鎖 の間のシンメトリ−を矢印で示しである。

図１の下半分はベース・ダイアトを中心とするＣＧ　（左）またはＴＡ　（右） 逆位を持つ二重構造部位がもたらす対応状況を示している。

これはポリプリン／ポリプリミジン標的部位内の位置的ずれを示している。ベー ス・トリプレットがそうした欠陥部位で形成される場合、その三重構造の側面に 位置する領域との間の連続性が維持されねばならない。こうした接続性の必要性 を満たすためには、ＣＧまたはＴＡ逆位部位のＴＦＯ鎖が全体として、二重構造 標的のプリンを豊富に含む基準鎖に対してアンチパラレルな位置関係を保たねば ならない。これはＴＡまたはＣＧ逆位部位で、プリン含有鎖に対して、トリプレ ットが平行鎖方向に切り替わらねばならないという条件と同じことである。こう したシンメトリ−の変化を図１の下側の矢印で示しである。

非修飾基の場合、トリプレット・シンメトリ−の局所的逆転を行うために行使で きる二つの程度の自由度がある。

１、　ホッグスティーンから逆ホッグスティーンＨ結合への転換、または ２、　アンチ／シン配糖体回転 図１に下側の部分にホッグスティーンから逆ホッグスティーンへの自由度を示し である。この構成では、逆位部位でＨ／ａトリプレットをつくりだすために、配 糖体結合はアンチのままである。

ＧとＴの擬二つ折シンメトリ−の故に、ホッグスティーン及び逆ホッグスティー ン・トリプレットに関する結合強度にはほとんど差はない。したがって、ＴＡま たはＣＧのずれに起き得るＨ／ａトリプレット系の可能性の評価において主に問 題となるのは、Ｈ−結合強度や鎖の方向自体ではなく、その欠陥を受容するため に必要な第三の鎖のバックボーンのかなり大きな横方向のずれである。このずれ は図１の上部に、水平方向の矢印で示されており、そのずれの大きさは３−５オ ングストロームに達する。局所ベース・スタッキング作用もこうしたずれと関係 しており、このことも三重構造の安定性における局所的な変化に関与している可 能性がある。

三重らせん構造及び熱力学的特性は図１のモデルを基準として評価することがで きる。３−５オングストロームのずれ、及びそれに伴うスタッキング変化は秩序 正しい三重構造に受け入れるのは困難な場合があり、ポリプリン／ポリピリミジ ン連鎖（ｒｕｎ）内の安定した相互関係と比較して、ベース・スタッキング及び トリブレットビー結合エネルギーの局所的な減少をもたらす場合がある。したが って、三重構造の安定性に対するそうした欠陥の不安定化効果はこのモデルと整 合している。

図１のモデルは、トリプレットが不安定であるが、それらがＣＧ及びＴＡ逆位部 位で形成され得、全体として三重構造らせん形態に安定化効果を及ぼす可能性が あることを示唆している。二重構造が三重構造内では変形してしまうという、こ のモデルから引き出されるこうした結論はＣｕ　（ＯＰ）　、過敏性アッセイの 結果と一致している。この変形が応力三重構造の形成を促す可能性がある。

例２５ ＣＧＴＡ゛　翫　・のトリプレットノ。

ための２′−一オキシフォル々シン　モールＴＡ及びＣＧ逆位部位でトリブレッ ト形態が安定化されれば、オリゴヌクレオチドはプリンを豊富に含む部位だけで なく、どの二重構造部位でも意図的に形成することができる。図２もモデルによ れば、ＣＧ部位での結合問題に対するひとつの解決方法はフラノースに対する配 糖体結合接合部位に対するグアノシンの二つの水素結合供与体の位置を変えるこ とである。

この解決方法を図２に示す。図に示されている通り、この解決方法がもたらす結 果は、ＣＧ逆位部位でのトリブレットＨ／ａ結合に対応するために必要な横方向 のずれの減少である。

図２は対応するＧ相応物として２′−デオキシフォルミシンを用いる、上に提案 した変更の概略を示している。フォルミシン（１１図５）は自然に発生するヌク レオシド抗生物質で、その構造はアデノシンと類似している。しかしながら、そ れが持っている不正常なＣ−Ｃ配糖体結合の故に、そのアグリコン部分がより芳 香族性を強め（最大変移＋　３１０１Ｍ）で、そのプロトン付加の状態はＡに対 して変更される。中性ｐＨ領域で、フォルミシン環はＮ、とＮ、　（図５）でプ ロトン付加される。したがって、この環は受け入れ可能な供与体に対して二つの Ｈ−結合を供与することができ、したがって、トリプレット形成に関してはＧに 類似している。

このように、２′−デオキシフォルミシンをＧと置換することにより、三番目の 鎖バックボーンはＣＧ逆位部位でその膨張性がより小さくなる。もうひとつ注意 すべき点はＣＧ逆位部位（図２の下側）でＧＧＣトリブレットを基準として、フ ラノース配置の類似性がより改善されている点である。

例２６ ｄＦのプロ　スーロン、　への　入 プロゲステロン応答プロモーター内のプロゲステロン応答要素のための結合領域 に対応する二重ＤＮＡ標的を図２に示す。

二つの蛋白結合部位に下線が付されている。この部位に特有のＴＰＯは好ましい アンチパラレル方向で示されている。

ＴＦＯ３’　Ａ−ＰＲＥ２ａｐにａｐ−ＤＭｒ−７ｔ　スフ　、ｔ　ルアミノト （４）に導入された。非修飾ＴＰＯとして、プロゲステロン応答要素ＰＲＥ２ａ ｐは表２に示したプリンを豊富に含む標的部位に選択的に結合する。

表２　ＴＰＯを含有するｄＦ　：　３　’　Ａ−ＰＲＥ２Ｆａｐ　（ＳＥＱ、　 ＩＤ、Ｎｏ、１）３６８Ｐ部位、３１／３６＝８７％プリン、６０％ＧＣ。

藍置換の３部位 対応肛誘導体（３’　Ａ　−ＰＲＥ２Ｆａｐ　）は標準的な固体相法で合成され た。ＴＦＯはミリケン８フ００シンセサイザー上でＣＰＧ法およびβ−シアノエ チルフォスフオルアミシト化学反応を用い、固体和合成で調製される。これらの ＴＰＯは、３′−〇端で、ＰＧサポート：　Ｇｌｅｎｎ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ社提 供のｌｒ３’−アミノ修飾剤」へのリンクの一部として導入される、−次アミン 、例えば、３　’　−ＯＣＨ，ＣＨＯＨＣＨ，Ｎ＋Ｈ，として修飾される。すべ ての事例で、ＴＰＯはＣＩ、ＨＰＬＣにより、次いで非トリチル化、有機抽出、 そして０２５分子ふるい上でのグロマトグラフイーによって精製される。その結 果得られる物質の純度は高解像度電気泳動法およびＩ（ＰＬＣによって分析され る。

例２７ ＴＰＯのｄＦ　ＴＦＯの比 ３　’　−Ａ−ＰＲＥ２ａｐおよびその２′−デオキシフォルミシン同族体の結 合を、バンド・シフト法により、３７℃の温度下で観察した。標準的な結合緩衝 剤：　１０ｍＭ　Ｔｒｉｓ／）ＩｃＩ、　１０ｍＭ　ＭｇＣ１°◆。

ｐＨ７，８が用いられた。この実験で、表２の放射能でラベルした二重標的フラ グメントを、ラベルしないＴＰＯの濃度を増しながら滴定する。次に、自然由来 １０％アクリルアミド・ゲル上で、二重構造と三重構造との間の、電気泳動可動 性における特徴的な差を手がかりに結合が検出される。

このアッセイで、ＴＰＯを含有する２′−デオキシフォルミシンは、その非修飾 対応物と比較して、親和性が約１０倍も増大した（図４）。ＴＰＯ等量で、ｉｏ −“Ｍから１０−”　Ｍへの明らかな滴定中点値減少がある。ｄＦ置換によって もたらされる結合親和性のこのかなりの増大は、アンチパラレル三重構造形成の ために、標的部位内のＣＧ　（およびＴＡ）部位を受け入れる方法を提供してく れる。

例２８ インシュリン・リセブタ−１ＴＦｏへのｄＦのマウス・インシュリン・リセブタ ー遺転子内のプリンを豊富に含む領域が確認された（表３　）　、　ＴＦＯ補足 ３　’　Ａ−ＩＲ２ａｐがアンチパラレル方向で結合しているのが示されている ６３′Ａ−ＩＲ２ａｐはアンチパラレル方向でＧＧＣおよびＴＡＴ　トリブレッ トを形成するために結合する方向で示されている。番号は５ｉｂｌｅｙ、　ａｔ 、ａｌ、　［Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、Ａｅｄ、Ｓｃｉ、　ＵＳＡ８６　：　９７ ３２（１９８９）　］に述べられている主要キャッピング部位を示している。

表３　ヒトおよびマウスにおけるＴＣ反復を伴うＩＲ１部位２上流領域（ＩＲ２ Ｆａｐ　；　ＳＥＱ、　ＩＤ、Ｎｏ、２）５’−ＣＣＴＣＣＣＣＧＡＧＣＴ、Ｃ ＴＧＣＴＧＧＣＴＴＴＣＴＣＣＣＣＣＴＣＣＣＣＣＣＣＣ−３’τＡＲＧＥＴ３ ’−ＧＧＡＧＧＧＧＣＴＣＧＡＧＡＣＧＡＣＣＧＡＡＡＧＡＧＧＧＧＧＡＧＧＧ Ｇ−ＧＧＧＧ−５’　５ＩＴＥ３８８Ｐ部位、８４％プリン、７６％ＣＧ、此置 換の５部位例２９ ＥＧＦプロモーターへのｄＦの　入 ＥＧＦＲプロモーター内のプリンを豊富に含有した領域と、アンチパラレルＴＦ Ｏ補足３　’　Ａ−ＥＧ３６ａｐを確認した（表４）。番号はスタート・コドン を基準とする位置を示している。

表４　ＥＧＦＲ，ＥＧ３６部位標的機能：ｓｐｔ結合部位＃　４　（ＥＧＦＲ３ ６Ｆａｐ　；　ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ、３）５′−Ｔ丁ＣＴＣＣＴＣＣＴＣＣＴＣ ＴＧＣＴＣＣＴＣＣＣＧＡＴＣＣＣＴＣＣＴＣＣ−３’　ＴＡＲＧＥＴ３’−Ａ ＡＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＡＧＡＧＧＡＧＧＡＧＧＧＣＴＡＧＧＧＡＧＧＡＧＧ− ５’　５ＩＴＥ５’−ＴＴＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＴＧＴＧＧＴＧＧＴＧＧＧＧＴ ＴＧＧＧＴＧＧＴＧＧ−３’　ＥＧＦＲ３６ａｐ５’　−ＴＴＧＴＧＧＴＧＧＴ ＧＧＴＧＴ匹ＴＧＧＴＧＧＧＦＴＴＧＧＧＴＧＧＴＧＧ−３’　ＥＧＦＲ３６Ｆ ａｐ３６ＢＰ部位、９２％プリン、６７％ＧＣ，ｄＦ置換の２部位例３０ ＨＩＶ−１、Ａ（７）ｄＦ（７） 隣接Ｓｐｌ結合部位の連鎖に対応する、）ＩＩＶ−Ｉ　ＬＴＲ内の標的部位が示 されている。番号はウィルス性ｍＲＮＡスタート部位を基準とする位置を示して いる。

表５　提案Ｓｐ１転写転写アク−ベーター結合部位ＨＩＶ３８ＦＰ　、　ＳＥＱ 、　ＩＤ、ＮＯ，４）５’−ＡＧＧＧＡＧＧＣＧＴＧＧＣＣＴＧＧＧＣＧＧＧＡ ＣＴＧＧＧＧＡＧＴＧＧＣＧＡＧ−３’　ＴＡＲＧＥＴ３’−ＴＣＣＣＴＣＣＧ ＣＡＣＣＧＧＡＣＣＣＧＣＣＣＴＧＡＣＣＣＣＴＣＡＣＣＧＣＴＣ−５’　５Ｉ ＴＥ５’−ＴＧＧＧＴＧＧＧＧＴＧＧＧＧＴＧＧＧＧＧＧＧＴＧＴＧＧＧＧＴＧ ＴＧＧＧＧＴＧ−３’　ＨＩＶ３８ｐ５’　−ＴＧＧＧＴＧＧＦＧＴＧＧ江ＴＧ ＧＧ匹ＧＧＴ旦ＴＧＧＧＧＴＧＴＧＧ匹ＴＧ−３’　ＨＩＶ３８Ｆｐ３８ＢＰ部 位、７７％ＧＣ，旺置換の６部位例３１ ７−Ｎ−ベンゾイルアミ／−３−２−０−メチル−３−０−−シ化合物且の合成 は図１Ｏに示されている手順で行われる。

無水ピリジンにフォルミシンＡ（１）を懸濁させたものをトリメチルシリルクロ ライドで、０℃の温度下、２時間処理し、次に、ベンゾイルクロライドの１．１ モル相当を加えてから、トリメチルシリル保護基を水で加水分解すると、Ｎ−７ −ベンゾイルフォルミシンＡ　（３０）が得られる。■の３’、５’−ヒドロキ シル基の保護は１，３−ジクロロ−１，１，３，３−テトライソプロピルジシロ キサンとの反応により行われ、７−Ｎ−ベンゾイルアミノ−３−［３，５−０− （１，１，３，３−テトライソプロピル−１，３−ジシロキサンジイル−β一旦 −リボフラノシル］ピラゾロ［４，３−ｄコビリミジン（３１）が得られた。

１ｍＭ塩化第一錫の存在下でジアゾメタン［Ｍ、　Ｊ、Ｒｏｂｉｎｓ、　Ｓ、Ｒ 。

Ｎａ１ｋ及びＡ、　Ｓ、に、　Ｌｅｅ、　Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｗ、、　３９ 　：　１８９１　（１９７４）　］あるいは析出されたばかりの酸化銀の存在下 でよう化メチル［Ｅ、５ｏｃｈａｅｋａ及びＡ、　Ｍａｌｋｉｅｗｉｃｚ、　Ｎ ｕｃｌｅｏｓｉｄｅｓＮｕｃｒｅｏｔｉｄｅｓ。

９　：　７９３　（１９９０）　］を用いて…の２′−ヒドロキシル基の選択的 なメチル化を行うと、７−Ｎ−ベンゾイルアミノ−３−［３゜５−仝−（１，ｌ 、３．３−テトライソプロピル−１，３−ジシロキサンディル−２一旦−メチル −β一旦一リボフラノシル］ピラゾロ［４，３−ｄ］ピリミジン（旦）が得られ る。その後、テトラ−ｎ−ブチルアンモニウムフルオライド（ＴＨＦ中ＩＭ溶液 ）を用いて、Ｏ−５℃の温度で２時間処理することによって、３．’５’−０− 保護シリル基の保護を取り除くと、必要な中間生成物である２′一旦−メチル− Ｎ−７−ベンゾイルフォルミシンＡ　（３３）が得られる。皿を無水ピリジン中 で１．１モル当量の４，４′〜ジメトキシトリチルクロライドと周辺大気温度下 で４時間カップリングすることにより、７−Ｎ−ベンゾイルアミノ−３−［２− ０−メチル−５−０−ジメトキシトリチル−β−Ｄ−リボフラノジルコピラゾロ ［４，３−ｄ］ピリミジン（…）が得られる。２′−および５′−ヒドロキシル 基が保護されると、Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルエチルアミンの存在下で２−シアノ エチル−Ｎ、Ｎ−ジイソプロピルクロロフォスフオルアミシトによる処理によっ て、川の３′−ヒドロキシルがフォスフオルアミシトに対して活性化され、標記 化合物並が得られる。生成物並はシリカゲルカラム上で精製することができる。

本明細書中のすべての特許および出版物は本発明が関係する技術に通じている人 々のレベルに対応するものである。ここに取り上げられているすべての特許およ び出版物は、それぞれ個々の出版物が具体的、個別的に参照として組み入れられ た場合と同様に、本明細書中に参照として組み入れられている。

当業者は、本発明が、上に述べられた、またそれに本質的に付随する目的を実施 し、目的と利点を達成するのによく適合していることをすぐ理解できるであろう 。ここで述べられている化合物、方法、手順および手法は現在の段階で、好まし い実施例を代表するものであり、具体例として挙げられているのであって、発明 の範囲を限定するためのものではない。

本発明の精神の範囲内に含まれ、または以下の特許請求の範囲で定義される技術 に通じている人々なら、本明細書に述べられている修正、その他の使用法を容易 に思い付くであろう。

以下余白 配列リスト （１）　一般情報 （ｉ）　出願人：　Ｒｅｖａｎｋａｒ、　Ｇａｎａｐａｔｈｉ　Ｒ９Ｈｏｇａｎ 、　Ｍｉｃｈａｅｌ　Ｅ。

Ｒａｏ、　Ｔａｋｋｅｌｌａｐａｔｉ　Ｓ。

５ｃｈｒｏｆｆ、　Ｈｉｔｅｓｈ　Ｎ。

（ｉｉ）　発明の名称＝２７−ゾオキシリボヌクレイシド、三重構造形成オリゴ ヌクレイチドにおける使用、およびそれを調製するためのプロセス （ｉｉｉ）　配列数＝１５ （ｆｖ）　連絡先： （Ａ）　住所：　Ｔｈｏｍａｓ　Ｄ、　Ｐａｕｌ（Ｂ）　街路：　１３０１　Ｍ ｃＫｉｎｎｅｙ、　５ｕｉｔｅ　５１００（Ｃ）　都市：　Ｈｏｕｓｔｏｎ （Ｄ）州：　Ｔｅｘａｓ （Ｅ）国：Ｕ、Ｓ、Ａ （Ｆ）　ＺＩＰ　ニア７０１０−３０９５（ｖ）　コンピュータ読み取り可能形 式％式％ （Ｂ）　コンピューター：　ＩＢＮ　ＰＣ互換機（Ｃ）　オペレーティング・シ ステム：ＰＣ−ＤＯ５／ＭＳ−ＤＯ５ （Ｄ）　ソフトウェア：リリース特許＃１．０バージョン＃１，２５ （ｖｉ）　本願データ （Ａ）　申請番号：ＵＳ （Ｂ）　申請臼 （Ｃ）　分類 （ｖｆｆｉ）　弁理士／代理人に関する情報（Ａ）　氏名：　Ｐａｕｌ、　Ｔｈ ｏｍａｓ　Ｄ。

（Ｂ）　登録番号：　３２，７１４ （Ｃ）　参照事案番号：　Ｄ−５３４８−ＰＣＴ（ｉｘ）　通信に関する情報 （Ａ）　電話：　７１３／６５１−５１５１（Ｂ）　ファックス：　７１３／６ ５１−５２４６（Ｃ）　テレックス：　７６２８２９ （２）　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ：　１　：に関する情報（ｉ）　配列特性 （Ａ）　長さ：３６塩基対 （Ｂ）　タイプ：核酸 （Ｃ）　鎖特性：単一 （Ｄ）　トポロジー：線形 （ｉｔ）　分子タイプ：ＤＮＡ（ゲノム）（ｉｉｉ）　仮定的：　ＹＥＳ （ｘｉ）　配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、ＮＯ：　１　：ＧＴＧＴＮＴＴＧＴＧ 　ＧＧＧＧＧＴＧＧＧＧ　ＧＴＮＴＴＧＴＧＴＧ　ＴＮＴＴＧＴ　３６−（２） 　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ　：　２　：に関する情報（ｉ）　配列特性 （Ａ）　長さ：３９塩基対 （Ｂ）　タイプ：核酸 （Ｃ）　鎖特性：単一 （Ｄ）　トポロジー二線形 （ｉｉ）　分子タイプ：　ＤＮＡ　（ゲノム）（ｆｉｉ）　仮定的：　ＹＥＳ （ｘｉ）　配列説明：　ＳＥＱ、ＩＤ、Ｎｏ　：　２　：ＧＧＴＣ；ＧＧＧＮＴ Ｎ　ＧＴＧＴＮＧＴＮＮＧ　ＴＴＴＧＴＧＧＧＧＧ　ＴＧＧＧＧＧＧＧＧ（２） 　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ　：　３　：に関する情報（ｆ）　配列特性 （Ａ）　長さ＝３６塩基対 （Ｂ）　タイプ：核酸 （Ｃ）　鎖特性：単一 （Ｄ）　トポロジー二線形 （ｉｉ）　分子タイプ：ＤＮＡ（ゲノム）（ｎｉ）　仮定的：　ＹＥＳ （ｘｉ）　配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、　Ｎｏ　：　３　：ＴＴＧＴＧＧＴＧ ＧＴ　ＧＧＴＧＴＮＧＴＧＧ　ＴＧＧＧＮＴＴＧＧＧ　ＴＧＧＴＧＧ（２）　Ｓ ＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ：　４　：に関する情報（ｉ）　配列特性 （Ａ）　長さ：３８塩基対 （Ｂ）　タイプ：核酸 、（Ｃ）鎖特性：単一 （Ｄ）　トポロジー二線形 （ｉｉ）　分子タイプ：ＤＮＡ（ゲノム）（ｉｉｔ）　仮定的：　ＹＥＳ （ｘｉ）　配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、　Ｎｏ　：　４　：ＴＧＧＧＴＧＧＮ ＧＴ　ＧＧＮＮＴＧＧＧＮＧ　ＧＧＴＮＴＧＧＧＧＴ　ＧＴＧＧＮＧＴＧ　３８ （２）　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ　：　５　：に関する情報（ｉ）　配列特性 （Ａ）　長さ＝８５塩基対 ３９　（Ｂ）　タイプ：核酸 （Ｃ）　鎖特性二二重 （Ｄ）　トポロジー：線形 （ｉｉ）　分子タイプ：ＤＮＡ（ゲノム）（ｎｔ）　仮定的二Ｎ０ （ｘｉ）　配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、　ＮＯ：　５　：（２）　ＳＥＱ　Ｉ Ｄ　Ｎｏ：　６　：に関する情報（ｉ）　配列特性 ３６　（Ａ）　長さ＝３６塩基対 （Ｂ）　タイプ：核酸 （Ｃ）　鎖特性：単一 （Ｄ）　トポロジー：線形 （Ｕ）　分子タイプ：　ＤＮＡ　（ゲノム）−（ｉｉｉ）　仮定的：Ｎｏ （Ｘｌ）　配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、ＮＯ：　６　：ＴＴＧＴＧＧＴＧＧＴ 　ＧＧＴＧＴＧＧＴＧＧ　ＴＧＧＧＧＴＴＧＧＧ　ＴＧＧＴＧＧ　３６（２）　 ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　７　：に関する情報（１）　配列特性 （Ａ）　長さ＝３８塩基対 （Ｂ）　タイプ：核酸 （Ｃ）　鎖特性：単一 （Ｄ）　トポロジー二線形 （ｉｉ）　分子タイプ：ＤＮＡ（ゲノム）（ｉｉｉ）　仮定的二Ｎ０ （Ｘｌ）配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、　ＮＯ：　７　：ＴＧＧＧＴＧＧＧＧＴ 　ＧＧＧＧＴＧＧＧＧＧ　ＧＧＴＧＴＧＧＧＧＴ　ＧＴＧＧＧＧＴＧ　３８（２ ）　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ：　８　：に関する情報（１）配列特性 （Ａ）　長さ＝３５塩基対 （Ｂ）　タイプ：核酸 （Ｃ）　鎖特性：単一 （Ｄ）　トポロジー　線形 （ｉｉ）　分子タイプ：ＤＮＡ（ゲノム）（ｉｉｉ）　仮定的＝ＮＯ （ｘｉ）　配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、Ｎｏ　：　８　：ＴＴＧＴＧＧＴＧＧ Ｔ　ＧＧＴＧＧＴＧＧＧＴ　ＴＴＧＴＧＧＴＧＧＴ　ＧＧＴＧＴ　３５（２）　 ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　９　：に関する情報（ｉ）　配列特性 （Ａ）　長さ：２６塩基対 （Ｂ）　タイプ：核酸 （Ｃ）　鎖特性：単一 （Ｄ）　トポロジー二線形 （ｎ）　分子タイプｎＤＮＡ（ゲノム）（ｉｉｉ）　仮定的二Ｎ０ （ｘｉ）　配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、　Ｎｏ　：　９　：ＴＧＧＧＴＧＧＴ ＧＧ　ＴＧＧＧＧＧＧＧＴＧ　ＧＧＴＧＧＧ　２６（２）　ＩＤ番号ＮＯ：　１ ０　：に関する情報（ｉ）　配列特性 （Ａ）　長さ＝３９塩基対 （Ｂ）　タイプ：核酸 （Ｃ）　鎖特性：二重 （Ｄ）　トポロジー二線形 （ｉｉ）　分子タイプ＋ＤＮＡ（ゲノム）（ｉｉｉ）　仮定的二Ｎ０ （ｘｌ）　配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、Ｎｏ　：　１０　：ＣＣＴＣＣＣＣＧ ＡＧ　ＣＴＣＴＧＣＴＧＧＣＴＴＴＣＴＣＣＣＣＣＴＣＣＣＣＣＣＣＣ３９（２ ）　５ＥＱＩＤＮＯ：１１：に関する情報（１）配列特性 （Ａ）　長さ：３９塩基対 （Ｂ）　タイプ：核酸 −（Ｃ）鎖特性：単一 （Ｄ）トポロジー二線形 （ｉｉ）　分子タイプ：ＤＮＡ（ゲノム）（ｍ）　仮定的：ＮＯ （え）配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、ＮＯ：　１１　：ＧＧＴＧＧＧＧＧＴＧ　 ＧＴＧＴＧＧＴＧＧＧ　ＴＴＴＧＴＧＧＧＧＧ　ＴＧＧＧＧＧＧＧＧ（２）　５ ＥＱＩＤＮＯ：１２：に関する情報（ｉ）　配列特性 （Ａ）　長さ：４７塩基対 （Ｂ）　タイプ：核酸 （Ｃ）　鎖特性二二重 （Ｄ）　トポロジー：線形 （ｉｆ）　分子タイプ：ＤＮＡ（ゲノム）（ｉｔｉ）　仮定的二Ｎ０ （ｘｉ）　配列説明：　ＳＥＱ、　ＴＤ、Ｎｏ　：　１２　：ＧＡＴＣＴＧＴＡ ＣＡ　ＣＴＣＴＧＴＴＣＴＣＣＣＣＣＣＡＣＣＣＣＣＴＧＴＡＣＡＣＴＣＴＧＴ ＴＣＴＧ（２）　ＳＥＱ　ＩＤ　ＮＯ：　１３　：に関する情報（ｉ）　配列特 性 （Ａ）　長さ＝３６塩基対 （Ｂ）　タイプ：核酸 （Ｃ）　鎖特性：二重 （Ｄ）　トポロジー：線形 （ｉｆ）　分子タイプ：ＤＮＡ（ゲノム）（ｉｎ）　仮定的二Ｎ０ −　（ｘｉ）　配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、Ｎｏ　：　１３　：ＴＴＣＴＣＣ ＴＣＣＴ　ＣＣＴＣＴＧＣＴＣＣＴＣＣＣＧＡＴＣＣＣＴＣＣＴＣＣ３６（２） 　ＳＥＱ　ＩＤ　Ｎｏ　：　１４　：に関する情報（ｉ）　配列特性 （Ａ）　長さ＝３６塩基対 ３９　（Ｂ　）　タイプ：核酸 （Ｃ）　鎖特性：単一 （Ｄ）　トポロジー：線形 （ｉｉ）　分子タイプ：ＤＮＡ（ゲノム）（ｆｉｔ）　仮定的＝ＮＯ （ｘｉ）　配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、　Ｎｏ　：　１４　：ＧＴＧＴＧＴＴ ＧＴＧ　ＧＧＧＧＧＴＧＧＧＧ　ＧＴＧＴＴＧＴＧＴＧ　ＴＧＴＴＧＴ　３６（ ２）　５ＥＱＩＤＮＯ：１５：に関する情報（ｉ）　配列特性 （Ａ）　長さコ３８塩基対 ４７　（Ｂ　）　タイプ：核酸 （Ｃ）鎖特性二二重 （Ｄ）　トポロジー：線形 （ｉｉ）　分子タイプ：　ＤＮＡ　（ゲノム）（ｉｉｉ）　仮定的＝ＮＯ （ｘｉ）　配列説明：　ＳＥＱ、　ＩＤ、　Ｎｏ　：　１５　：ＡＧＧＧＡＧＧ ＣＧＴ　ＧＧＣＣＴＧＧＧＣＧ　ＧＧＡＣＴＧＧＧＧＡ　ＧＴＧＧＣＧＡＧ　３ ８デル Ｆ都（資）１ ＣＧ逆位の部位でのＧ同族体としての Ｆｉｇｕｒａ　２ バンド・シフト分析 ｒ−４ Ｆｉｇｕｒｅ　５ Ｆｉｇｕｒｅ　８ Ｆｉｇｕｒｅ　１０ フロントページの続き （５１）　Ｉｎｔ、Ｃ１，’　識別記号　庁内整理番号Ｃ０７Ｈ２３１００７８ ２２−４Ｃ Ｃ１２Ｎ　１５／１０ １５／１１　ＺＮＡ （７２）発明者　レヴアンカー、ガーナ−パーティ、ラーマクリシュナ アメリカ合衆国、　７７３８１　チクサス、ザウッドランズ、エン、ミルトレイ ス　ドライヴ、１８０ （７２）発明者　ホウガン、マイクル、エドワドアメリカ合衆国、　７７３８１ 　チクサス、ザウッドランズ、ゴウルダン　シャドウ。

Ｉ （７２）発明者　ラーウ、タケラバティ、サドハガールアメリカ合衆国、　７７ ３８０　チクサス、ザウッドランズ、＃２５０９．ニス、ミルベンドドライヴ　 ２３０１ （７２）発明者　サラフ、ハイテッシュ、ナヴインチャンドラ アメリカ合衆国、　７７３８１　チクサス、ザウッドランズ、ステイル　グレン 、１０

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．以下の構造の化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１はＨまたは−ＣＯＣ■Ｈ５；Ｒ２はＨまたは一ＣＯＣ■Ｈ５；およ びＲ２はβリンケージによって結合され、そして、以下のものからなるグループ から選択される。 ▲数式、化学式、表等があります▼および▲数式、化学式、表等があります▼こ こで、ＸはＨまたはＤＭＴであり、ＹはＨまたは▲数式、化学式、表等がありま す▼ ２．Ｒ１およびＲ２が−ＣＯＣ■Ｈ■、Ｒ２が▲数式、化学式、表等があります ▼である、請求項１の化合物。 ３．Ｒ１がＨ、Ｒ２が−ＣＯＣ６Ｈ５、そしてＲ２が▲数式、化学式、表等があ ります▼である、請求項１の化合物。 ４．Ｒ２が ▲数式、化学式、表等があります▼である、請求項３の化合物。 ５．Ｒ２が ▲数式、化学式、表等があります▼である、請求項３の化合物。 ６．その少なくとも一つの基が請求項５の化合物と置換されている、二重鎖ＤＮ Ａと三重らせんを形成できるオリゴヌクレオチドで構成される三重構造形成オリ ゴヌクレオチド。 ７．以下の構造の化合物。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ８．以下の構造の化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１はＯまたはＳ；Ｒ２はＨまたは▲数式、化学式、表等があります▼ である。 ９．Ｒ１がＯであり、そしてＲ２が ▲数式、化学式、表等があります▼である、請求項８の化合物。 １０．その少なくとも一つの基が請求項９の化合物と置換されている、二重鎖Ｄ ＮＡと三重らせんを形成できるオリゴヌクレオチドで構成される三重構造形成オ リゴヌクレオチド。 １１．Ｒ１がＳであり、そしてＲ２が ▲数式、化学式、表等があります▼である、請求項８の化合物。 １２．その少なくとも一つの基が請求項１１の化合物と置換されている、二重鎖 ＤＮＡと三重らせんを形成できるオリゴヌクレオチドで構成される三重構造形成 オリゴヌクレオチド。 １３．以下の構造の化合物。 ▲数式、化学式、表等があります▼ １４．以下の構造の化合物。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１はＴＢＤＭＳ，ＤＭＴまたはＨ；および、Ｒ２がＴＢＤＭＳ，Ｈま たは ▲数式、化学式、表等があります▼である。 １５．Ｒ１がＤＭＴおよび ▲数式、化学式、表等があります▼である、請求項１４の化合物。 １６．その少なくとも一つの基が請求項１５の化合物と置換されている、二重鎖 ＤＮＡと三重らせんを形成できるオリゴヌクレオチドで構成される三重構造形成 オリゴヌクレオチド。 １７．以下の構造の化合物。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、ＲＩはＨまたは ▲数式、化学式、表等があります▼および、Ｒ１はＨまたはＤＭＴである。 １８．Ｒ１がＤＭＴ、およびＲ２が ▲数式、化学式、表等があります▼である、請求項１７の化合物。 １９．その少なくとも一つの基が請求項１８の化合物と置換されている、二重鎖 ＤＭと三重らせんを形成できるオリゴヌクレオチドで構成される三重構造形成オ リゴヌクレオチド。 ２０．以下の構造の化合物。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１はＨまたは−ＣＯ−ＣＨ（ＣＨ３）２；Ｒ２はＨまたはＤＭＴ；そ してＲ２はＨまたは ▲数式、化学式、表等があります▼およびＲ４はＯＨまたはＨである。 ２１．Ｒ１が−ＣＯ−ＣＨ（ＣＨ３）２、Ｒ２がＤＭＴ、Ｒ２が▲数式、化学式 、表等があります▼および、Ｒ４がＨである、請求項２０の化合物。 ２２．その少なくとも一つの基が請求項１８の化合物と置き換えられている、二 重鎖ＤＮＡと三重らせんを形成できるオリゴヌクレオチドで構成される三重構造 形成オリゴヌクレオチド。 ２３．以下の構造の化合物。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１はＨまたは−ＯＣ−ＣＨ（ＣＨ３）２；およびＲ２が▲数式、化学 式、表等があります▼である。２４．以下の構造の化合物。 ▲数式、化学式、表等があります▼ ここで、Ｒ１はβリンケージで結合されており、そして以下のものでからなるグ ループから選択される。 ▲数式、化学式、表等があります▼および▲数式、化学式、表等があります▼こ こでＸはＨまたはＣＨ２；ＹはＨまたは▲数式、化学式、表等があります▼ および、ＺはＨまたはＤＭＴ である。 ２５．Ｒ１がβリンケージで結合され、そして▲数式、化学式、表等があります ▼ である、請求項２４の化合物。 ２６．その少なくとも一つの基が請求項２５の化合物と置き換えられている、二 重鎖ＤＮＡと三重らせんを形成できるオリゴヌクレオチドで構成される三重構造 形成オリゴヌクレオチド。 ２７．その少なくとも一つの基がグアノシン類似物と置き換えられた、三重構造 形成オリゴヌクレオチド。 ２８．そのグアノシン類似物が化合物４，１０ａ，１０ｂ，１４，１９，２９お よび３５よりなるグループから選択される、請求項２７の三重構造形成オリゴヌ クレオチド。 ２９．該オリゴヌクレオチドがＳＥＱ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．１，ＳＥＱ，Ｉ．Ｄ．Ｎ ｏ２，ＳＥＱ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．３およびＳＥＱ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．４の化合物で構 成されるグループから選択される、請求項２７の三重構造形成オリゴヌクレオチ ド。 ３０．ＳＥＱ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．４の化合物で構成されるＡＩＤＳを処理するため の、請求項２７の三重構造形成オリゴヌクレオチド。 ３１．少なくとも約２０のヌクレオチドで構成されるヌクレオチド配列で構成さ れ、該ヌクレオチド配列がＧ，Ｔおよびグアノシン類似物を含んでおり、二重Ｄ ＮＡ内の補足的位置がＧＣ基ベアの場合にはＧが用いられ、二重ＤＭ内の補足的 位置がＡＴ基ベアである場合はＴが用いられ、二重ＤＮＡ標的部位内にＣＧ逆位 が存在する場合はグアノシン類似物が用いられ、該配列が二重ＤＭ標的部位内の 方向決定鎖に結合し、その結合がＴＡＴ，ＧＧＣおよびＮＣＧホッグステイーン 、または逆ホッグスティーン・トリプレットを形成し、Ｎがグアノシン類似物で ある、二重ＤＮＡ内に標的配列を持っている共線形トリプレックスを形成するた めの三重構造形成オリゴヌクレオチド（ＴＦＯ）。 ３２．グアノシン類似物が化合物４，１０ａ，１０ｂ，１４，１９，２９および ３５からなるグループから選択される、請求項３１のＴＦＯ。 ３３．ＴＦＯが方向決定鎖にアンチパラレルに結合し、標的ＧＣとＡＴ基ペアと の比が実質的に１より大きい、請求項３１のＴＦＯ。 ３４．ＴＦＯが方向決定鎖に平行に結合し、標的ＧＣ対ＡＴ墓ペアの比が実費的 に１より小さい、請求項３１のＴＦＯ。 ３５．ＴＦＯがＳＥＱ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．１，ＳＥＱ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．２，ＳＥＱ ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．３およびＳＥＱ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．４で構成されるグループから 選択される、請求項３１のＴＦＯ。 ３６．該ＴＦＯがＳＥＱ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．４であるＨＩＶ−１を措置するための 、請求項３１のＴＦＯ。 ３７．少なくとも約２０のヌクレオチドで構成されるヌクレオチド配列で構成さ れ、該ヌクレオチド配列がＧ，Ｔおよびグアノシン類似物を含んでおり、二重Ｄ ＮＡ標的内の補足的位置が方向決定鎖内にＧを有している場合にはＧが用いられ 、二重ＤＮＡ標的が方向決定鎖内にＣを有している場合にはグアノシン類似物が 用いられ、二重ＤＮＡ標的内の補足的位置がＡＴ基ペアの場合にはＴが用いられ 、該配列がその方向決定鎖に対してパラレル、またはアンチパラレルで結合して いる、二重ＤＮＡ内に標的配列を持っている共線形トリプレックスを形成するた めの三重構造形成オリゴヌクレオチド（ＴＦＯ）。 ３８．標的配列が実質的に１大きなＧＣ対ＡＴペア比を有しており、ＴＦＯが方 向決定鎖にアンチパラレルで結合している、請求項３７のオリゴヌクレオチド。 ３９．標的配列が実質的に１小さなＧＣ対ＡＴペア比を有しており、ＴＦＯが方 向決定鎖にパラレルで結合している、請求項３７のオリゴヌクレオチド。 ４０．グアノシン類似物が化合物４，１０ａ，１０ｂ，１４，１９，２９および ３５でからなるグループで選択される、請求項３７のＴＦＯ。 ４１．ＴＦＯがＳＥＱ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．１，ＳＥＱ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．２，ＳＥＱ ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．３およびＳＥＱ．Ｉ．Ｄ．Ｎｏ．４の化合物で構成からなるグ ループから選択される、請求項３７のＴＦＯ。 ４２．該ＴＦＯがＳＥＱ．Ｉ．Ｄ．ＮＯ．４のＨＩＶ−１を措置するための、請 求項３７のＴＦＯ。