JPH06500393A - 豚肉中のボアテイント産生インドール化合物を測定する方法並びに本方法で使用すべきサンプル容器 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 豚肉中のボアティント産生インドール　合　を・　る゛・びに　゛　ベ　ンブル 六 １棗上ム■且透１ 本発明は、豚の屠体またはその一部からラードまたは脂肪の予定量のサンプルを 取り出し、次いで極性溶媒でサンプルを抽出し、抽出物中の１種以上のインドー ル化合物量を測定する、豚肉／ラード中のボアティント（ｂｏａｒ　ｔａｉｎｔ ）産生インドール化合物、特にスカトール及びインドールの測定方法並びに本方 法を実施する際に使用すべきサンプル容器に関する。

良米五且韮 去勢していない雌豚から切り出した肉は、加熱時に悪臭、所謂ボアティントを出 す。他方、去勢した雌豚の場合には、このような不快臭は殆どしない。従って、 後に家庭で調理する際に肉から不愉快なボアティントが出ないように、雌豚は通 常、若い内に去勢される。ところが、雌豚を去勢すると、飼料の食いが悪くなり 、その疾病率が上昇し、屠体の赤肉率が同様に下がるので、動物には好ましくな い作用もある。

豚肉に特定のインドール化合物が存在すると、加熱時に非常に不快なボアティン トを出す。特に化合物スカトール及びインドールは、非常に重要な役割を果たし ている。豚肉中のスカトール及びインドールの各量とボアティントの発生との間 には強い相関関係がある。今日まで、経済的に許容可能な方法で屠殺場で使用し 得る方法によりこれらの化合物を測定することは不可能であった。

デンマーク特許第１５４，６６７号（ＳＩａＢｔｅｒｉｅｒｎｅｓ　Ｆｏｒｓｋ ｎｉｎｇｓｉｎｓｔｉｔｕｔ）は、極性有機溶媒で肉サンプルを抽出し、場合に よりこの後精製し、抽出物を分光光度法または蛍光光度法により分析して、ボア ティントの発生に統計的に相関関係のある１つ以上のパラメーターを決定する、 ボアティントの度合いの測定方法を開示している。−態様に於いて、豚肉中のボ アティントの度合いは、ラードの計量サンプルをホモジナイズし、次いで前記サ ンプルをｔｒｉｓ−アセトンで抽出することにより測定している６着色剤を抽出 物に添加し、４００〜８００ｎｍの波長範囲で吸光度を分光測定する。本性は、 １日１２００〜１４００サンプルを分析する大規模な屠殺場での使用に好適であ る０例えば１日５００サンプル未満を分析するような小規模の屠殺場では、分析 装置が高価なため個々の分析は非常に高コストにつく。この方法では、スカトー ル及びインドールは特定的に測定されず、サンプルのスカトール等価物の全量も 同様に特定的に測定されない。

デンマーク特許第１５４，６６７号に開示の方法は、デンマークの屠殺場で広く 使用されており、標準分光光度法による豚の排除限界は、スカトール等価物の最 大量０．２５ｐｐｍに設置した。

本発明者は、デンマーク特許第１５４，６６７号に記載の１５ページの表Ｉ及び １７ページの表■の試験結果の回帰分析を実施した。これから知見された相関間 係係数を以下に記載する。

蛍光光度法で内袖出物を測定すると、臭いの感覚的評価に対し相関関係係数０． ７２であり、ラード抽出物に関しては、臭いの怒覚的評価に対し相関関係係数０ ．２４であった。蛍光光度法と分光光度法により分析したラードサンプルを各々 比較すると、２つの分析法の間の相関関係係数は０，１３であったが、分光光度 法の測定と臭いの主観的な推定との間の相関関係係数は０．７０であった。上記 デンマーク特許の１７ペ一ジ１８〜３０行に記載の８匹の若い雌豚を使用した場 合と使用しない場合の両方に於ける蛍光光度法と分光光度法の測定に於いて、該 特許の表Ｈの結果をベースとして計算した。

しかしながら、８匹の雌豚を使用してもしなくても計算結果は殆ど変わらない。

相関関係係数１．００は、相関関係１０ｏｚに対応する。

従って、デンマーク特許第１５４，６６７号に記載の方法は、ラードサンプルに 於いて蛍光光度法によってボアティントの度合いを測定するには不適当であると 結論できる。

本発明の目的は、加熱時に不快臭を出す化合物をより特定的に測定することによ り、豚肉中のボアティントの度合いを測定する方法を提供することである。これ により、調理時に消費者に我慢できないボアティントを出すこれらの屠体をより 確実に示すことができ、豚肉を不必要に排除しなくて済む。

本発明のもう１つの目的は、複雑で高価な分析装置に投資する費用を負担できな い小規模の屠殺場での使用に特に好適な、ボアティントの度合いを測定する簡易 且つ比較的安価な方法を提供することである。

さらに本発明の目的は、サンプル容器から直接調製済みサンプルを取り出し、分 析装置（例えば、■ＰＬＣ装置）へ直ちに注入できる、脂肪サンプルを選択する ための実用的なサンプル容器を提供することである。

艮月し１１示 上記目的は、ラードまたは脂肪の予定量のサンプルを豚の屠体またはその一部か ら取り出し、サンプルを極性溶媒で抽出し、抽出物中の１種以上のインドール化 合物量を測定する方法であって、抽出前及び／または抽出時に脂肪が液体になる までサンプルを加熱することを特徴とする、豚肉／ラード中のインドール化合物 、特にボアティント産生スカトール及びインドールを測定する該方法により達成 される。

本発明の−！ｌｌ！様では、特定量のラードを屠体から取り出し、脂肪が融解す るまでラードを加熱した後、ラードサンプル全体を極性溶媒で抽出する。

本発明のもう一つの態様では、ラードサンプルを取り出し、抽出前にラード中の 脂肪を含まない固体を分離して、その液体の脂肪層のみを抽出する。

屠体またはその一部から直接脂肪を融解し、ラード中の脂肪を含まない固体を除 くことにより、予定量の脂肪サンプルを取り出すこともできる。

本発明の態様に於いては、上部が開口である容器と注射針によって貫通可能な閉 鎖容器とを含むサンプル容器であつて、開口容器は開口の第１のチャンバと閉鎖 した第２のチャンバに別れており、２つのチャンバは軽い物理的負荷により破壊 し得る隔壁により互いに離てられており、閉鎖手段は第３のチャンバを含み、前 記チャンバは注射針により貫通可能な領域を上部に有し、底は容器内に下げ得る 膜により限定されており、及び閉鎖手段には、閉鎖手段を適用時に隔壁を破る装 置が備えられていることを特徴とする該サンプル容器を使用するのが都合が良い 。

ボアティントを産生ずるインドール化合物は、クロマトグラフィーまたは蛍光光 度法により測定するのが都合が良い。

本発明の一態様に於いては、抽出物中のインドール化合物量は、蛍光検出器また はＵ■検出器を備えたクロマトグラフィー、好ましくはＨＰＬＣ（高性能液体ク ロマトグラフィー）を使用して測定する。

クロマトグラフィーで分離しなくても抽出物で直接蛍光光度法を実施することも 可能である。この場合、抽出物は、脂肪相のみで実施しなくてはならない。即ち 、ラード中の脂肪を含まない固体は、抽出前に除去しなくてはならない。

通常、３４０±２５ｎｍの範囲の１つ以上の予定発光波長で測定し、通常、２８ ５±２５ｎｍの範囲の励起波長を使用する。Ｕ■検出器を備えたＨＰＬＣを使用 する場合、波長は２２５±２５ｎｍまたは２８０±２５ｎｍを使用する。

クロマトグラフィーを使用する場合、種々のインドール化合物量が測定できるが 、直接蛍光光度法では、インドール化合物の含量の全量しが測定できない。両方 の場合に於いて、後で消費者が調理する際に豚が不快臭を発する範囲の詳細且つ 再現可能な測定結果が得られた。

本発明の許容性の範囲は、以下に記載の詳細な説明により明らかになろう。しか しながら、本発明の趣旨及び範囲内で種々の変形及び改良ができることは、この 詳細な説明から当業者には明らかであるので、本発明の好ましい態様を示す詳細 な説明及び特定の実施例は、単なる説明に過ぎない。

区１ヱとｉ阜ｊ」１皿 本発明は、以下の図面を参照として説明される。

図１は、容器及び閉鎖手段を含む本発明のサンプル容器の部分断面図を示す。

図２は、容器を閉鎖手段により閉じた後、注射針が閉鎖手段の膜を貫通している 同一サンプル容器を示す。

完曹ドと県茸シＳｌ朋 本発明の一態様に於いて、ラード片を屠体またはその一部から取り出す。ラード 層が好適に厚く、通常ラード中のスカトール及びインドール含量がラードサンプ ルを採取する動物のどの部分とも無関係に同一である、後頭部領域から皮下採取 するのが都合がよい。このようにして測定した結果は、サンプルが採取された屠 体の場所に依存しない。

容量または重量をベースとして特定量を計量し、容器に入れる。サンプルが入っ た容器を脂肪が融解するまで、例えば電子レンジで加熱する。この時点でサンプ ルは二相からなり、一方は液体の脂肪相で、他方は結合組織などの塊形のラード 中の脂肪３含まない固体を含む。

続いて、抽出用溶剤を使用するサンプル量に対して予定量、例えば、抽出用溶剤 １容量部に対しサンプル１重量部（各々１１及びｇ″ＣＣ測定添加する。抽出用 溶剤はボアティントを産生するインドール化合物を十分に溶解できなければなら ず、脂肪相は抽出用溶剤に不溶でなければならない。

良好に抽出するためには、抽出用溶剤は簡単に振蕩するだけで脂肪相を分散でき なくてはならず、好適な溶解性でもってエマルションを形成しなければならない 。このようなエマルションが形成すると、抽出用溶剤と脂肪相との間の接触が保 持され、１＠にインドール化合物が確実に抽出できる。

これらの条件を満足させる任意の抽出用溶剤が本発明の方法による使用に好適で ある。

好適な抽出用溶剤の例としては、極性抽出用溶剤、例えば、有機の極性抽出用溶 剤、好ましくはメタノール及びエタノール並びにこれらの水との混合物が挙げら れる。さらに選択した抽出用溶剤に応じて、ｐＨ値を調節するために種々の緩衝 剤を添加すること、並びに他のアジュバント（例えば、酵素）を添加することも 都合がよい。

サンプルは予め決めた最小時閉（例えば、１０分）で抽出し、脂肪相と脂肪を含 まない固体を例えば濾過、遠心分離または冷却により除去する。続いて、サンプ ル中のスカトール及びインドール化合物、場合により他のボアティント産生イン ドール化合物の含量を、抽出物を例えば、蛍光検出器またはＵ■検出器を備えた ＨＰＬＣを使用することによりクロマトグラフィーで特定的に測定する。

他の態様に於いては、液体脂肪の限定量をデカンテーションし、加熱直後にもう １つの容器に計量する。この場合、先に計量した量は無視する。

次いで、上記Ｒ様に記載の如く、抽出する。上記のクロマトグラフィーにより特 定的に測定する以外に、抽出物を直接蛍光光度法によりボアティント産生化合物 の全量を測定し得る。

本発明のさらなる態様に於いては、脂肪を加熱した物体（ＰＡえば、はんだごて または金属管）により屠体から直接融解して取り出す。この場合、脂肪の限定量 を充填する高さに印をつけた容器に直接融解して入れる。

次いで、上記記載の抽出を実施し、クロマトグラフィーによる特定的な測定並び に直接蛍光光度法によりボアティント産生インドール化合物の全量の測定し得る 。

屠体から脂肪を直接融解して取り出す場合に、図１及び図２に示されている特別 のサンプル容器な使用すると都合が良い、サンプル容器は、開口容器２及び注射 針１６により貫通可能な閉鎖容器４を含む、開口容器２は、隔壁６により開口の 第１のチャンバ８と閉鎖の第２のチャンバ１０の２つのチャンバに分けられてい る。各チャンバ８及び１０は、例えば２ｘｌの公知容積である。本発明の方法を 実施するためにサンプル容器を使用する際、屠体またはその一部から脂肪を直接 融解して取り出すことによって予定量の脂肪サンプルを取り、融解した脂肪サン プルを第１のチャンバ８に集め、チャンバを完全に充填し、閉鎖手段４をはめる とサンプル２ｘｅが計量できる。サンプルを取り出す前に、第２のチャンバ１０ には分析用に選択した抽出用溶剤（例えば、メタノール２１１）を充填しておく 。

第３のチャンバ１２を取り囲む閉鎖手段４は、底がテーパーの膜１４により限定 されており、上部は注射針が外から第３のチャンバ１２内に導入されるように構 築しである。チャンバ１２はその上部が通常の蓋付きバイアルで使用する通常貫 通し得る型の膜１８によりしつかり閉鎖されている。閉鎖手段４にはさらに、閉 鎖手段を開口容器２に適用する際に隔壁６を破壊するための破壊手段２０が備え られている。

サンプル容器を以下のようにして使用する。第１のチャンバ８を脂肪サンプルで 充填した後、閉鎖手段を容器に適用し、これにより脂肪サンプルの正確な量が限 定され、隔壁６が破壊される。脂肪サンプルと抽出用溶剤をサンプル容器を振蕩 することにより混合する。溶解した成分を含む抽出用溶剤を膜１４を介してｒ通 し、注射針１５によりこれを取り出して、使用する分析装置に直接注入する。

サンプル容器は、閉鎖手段を適用する際、隔壁を破壊するのに十分な過剰の圧力 が発生するように構築されていてもよい。抽出用溶剤以外に、圧縮ガスく例えば 、大気）を第２のチャンバに配合してもよく、これにより隔壁が破壊した後、容 器には特定の過剰の圧力が残る。このように圧力が過剰であると、第３のチャン バに膜を介してＰ液を移動させ易くなる。

本発明の方法は、通常抽出する前に脂肪が液体になるまでサンプルを加熱するこ とにより実施する。しかしながら、加熱前に必要量の抽出用溶剤を添加し、サン プル及び抽出用溶剤の混合物を加熱して実施してもよい。

以下の実施例は、本発明をさらに説明する。

夫ｌ］ユ 本実施例は、ラードサンプル全体の抽出と、　ＨＰＬＣによるインドール及びス カトールの測定を記載する。

ラードサンプル（５ｇ）を屠体の後頭部領域から皮下採取した。サンプルを容器 に入れて、脂肪を融解させるために電子レンジ中で８０℃で１０分加熱した０次 いでメタノール５ｘｌをサンプルに添加し、振蕩し、サンプルを１０分間抽出し た。

続いて、サンプルを一過して脂肪及び結合組織を除去し、以下の条件でＨＰＬＣ で分析した。

）ＩＰＬＣ装置：　Ｍｅｒｃｋ　）ＩＰＬＣ（蛍光検出器及びオートサンプラー 付）。

溶離液：水：メタノール（２０：８０）（容量：容量）流速：　１１１１分 蛍光検出器：励起波長−２８５ｎｍ　、発光波長−３４０ｎｍカラム：　Ｌｉｃ ｈｒｏｃａｒｔ　２５０−４．Ｌｉｃｈｒｏｓｐｈｅｒ　１００　ＲＰ１８゜５ ミクロン、逆相 注入量：２０μり 保持時間：スカトール４分、インドール３．５分検出限界、５ρｐｂ（０，００ ５ｐｐｍ＞　（溶液中）精度：抽出物４８ｐｐｂより高い濃度で５ｚ未満全部で ５回の試験を実施して、ラードからの抽出物のスカトール及びインドール濃度（ ｐｐｂで測定）を測定し、以下の表１に記載した。

Ｋ１且１ 本実施例は、ラード中の脂肪を含まない固体（結合組織など）を除去したラード からのサンプルの抽出及び、スカトール及びインドールを測定するためのＨＰＬ Ｃ分析を示す。

ラード片を屠体の後頭部の皮下から採取した。ラードを容器に入れ、脂肪が融解 するまで電子レンジ中８０℃で１０分加熱し、続いて５ｘｌの液体脂肪の上清を 取り、もう１つの容器に計量してこれにメタノール５１を添加した。振蕩後、１ ０分抽出し、脂肪粒子を除去するためにサンプルを一過し、実施例１に記載と同 一条件下で抽出物をＨＰＬＣにより分析した。

全部で５回の測定を実施し、その結果を以下の表１に記載した。

１隨１ 本実施例は、屠体から直接脂肪を融解して取り出し、ＨＰＬＣによりスカトール 及びインドールを測定する方法と記載する。

約１５０℃の温度の金属管の形をした熱い物体を屠体の後頭部領域に置き、脂肪 を屠体から直接融解して、５ｚ１を計量するまで金属管３介して計量容器内に導 く。メタノール５１を融解した脂肪サンプルに添加し、振蕩する。１０分間抽出 後、サンプルを一過し、抽出物を実施例１に記載と同一条件下でＨＰＬＣにより 分析する。

Ｋ崖Ｌ」 本実施例は、ｌｉ　Ｐ　Ｌ　Ｃ分析の代わりに、蛍光光度計（ＳＨＡＭ＾ＤＺＵ 　ＭＯＤＥＬ　ＲＦ−５０００，島原１宗都、日本製）を使用して直接蛍光光度 測定をＰ液で実施した以外には実施例２に記載の如〈実施した。

本実施例は、脂肪を直接融解し、続いて区１及び図２に示した同一容器を使用し て、ＨＰＬＣによるスカトール及びインドールの測定方法を示す。

使用したサンプル容器は、容器及び図１に示されている閉鎖手段を含む、容器は 全容量が４＊１のガラス製容器である。容器に抽出用溶媒としてメタノール２ｍ ｌを充填する。メタノールの上には、ガラス製の隔壁が配備されている。

サンプリングは、実施例３に記載の如く電気的に加熱した温度１５０℃の金属管 を屠体に導入することにより実施する。金属管から融解した脂肪サンプルが容器 の第１のチャンバ（即ち、隔壁上のチャンバ）に直接入る。あるいは、サンプル の採取及び脂肪の融解を、実施例２の記載通りに実施し、容器の第１のチャンバ は、脂肪の融解サンプルの上清を取って充填してもよい。

続いて、ＨＰＬＣ用の分析サンプルを収集するためにストッパー領域を介して注 射針が導入できるように、通常構築されているストッパーをはめる。ストッパー にはさらに第３のチャンバ含限定するテーパーの膜が備えられている。さらに、 ストッパーには下向きに延びている棒が備えられている。

ストッパーをはめると、脂肪サンプルの限定量（２ｚ１）が封入され、下向きに 延びている棒がガラス製の隔壁を押して破壊する。脂肪サンプルとメタノールと を閉鎖容器を振蕩することにより混合する。サンプル容器を最終的にＨＰＬＣに かける前に５分析に必要なサンプル量を第３のチャンバに一過する。ＨＰ　Ｌ　 Ｃ分析用サンプルを通常方法で注射針に取り出す。実際には、サンプル容器はＨ ＰＬＣ分析装置のオートサンプラーに直接設置される。

脂肪サンプルを採取したら、サンプル容器にバーコード形の番号をつけると都合 がよい。分析するためにＨＰＬＣ装置にサンプルと注入する直前に、バーコード は自動的に読み取られる。これにより、屠体を物理的に整頓する際に、屠体の番 号と使用すべき分析結果とが電気的に一致することができる。このようにして分 析結果は、飼育者との勘定を清算する際、他の屠殺データと一致し得且つ必要な 分類ができる。

ＩＬＬ！！ 抽出する前に脂肪を融解することにより得られた結果が好ましいことを示すため に、比較試験を以下の如〈実施した。

抽出直前に脂肪を融解するためにラードサンプル号加熱しなかった以外には実施 例１に記載の方法及びデンマーク特許第１５４，６６７号に記載のスカトール等 価物を検出する分光光度法３使用して、実施例１及び２に記載の本発明の方法を 使用して５回測定した。上記４つの試験に於いて、サンプルは同一動物から採取 した。結果を表１に示す。

表中の比較試験から明らかなように、加熱せずに抽出した場合にはスカトールま たはインドールのいずれをも検出できなかった。抽出前に脂肪を融解するために ラードサンプルを加熱した場合、スカトール及びインドールの両方が検出可能で あることが証明された。

驚くべきことに、ラードを予め加熱する（脂肪を融解する）場合のみ、ラードか らスカトール及びインドールを抽出することが可能である。

他の点では、デンマーク特許第１５４，６６７号に記載のスカトール等価物を検 出するための分光光度法により得られた結果と非常によく対応している０本発明 の方法により得られた測定結果は、１０ｏｚ真の値を表すわけではないが、この 値はボアタイントの度合いと関連しており、これにより固定の試験条件では、値 は豚肉を排除する限界として確定され得る。さらにこの値は、ボアタイントの度 合いと関連することが公知の他の測定結果と相関関係がある。このようにして、 実施例１及び実施例２により得られたスカトール濃度は、デンマーク特許第１５ ４，６６７号に記載の方法により得られた分光光度法による測定結果と比較する 場合、相関関係係数は殆ど１０００、つまり各々０．９９５及び０．９８８であ つ従って、測定結果は使用した試験パラメーター（例えば、抽出用溶媒の選択） にかなり依存し、表から知見されるように、実施例２による！！ｌｌｉ様はより 高い値となるが、結合組織の形で脂肪を含まない、固体を含まない脂肪で分析を 実施するので、スカトール及びインドールの含量には寄与しない。

本方法の再現性を示すために、ラード各５ｇの４サンプル及びラード各５ｇの３ サンプルを、実施例１に記載の方法の各ラードの２サンプルから採取した。サン プルは各々１０回分析した。

結果分量下の表２及び３に示す。

表から明らかなように、本方法は非常に正確であり、約５０ｐｐｂ（７）測定値 で標準偏差４．９５＄が得られ（表２）、約７０ｐｐｂの測定値で標準偏差４　 、１７１が得られたく表３）。

本発明の方法は、特定的で、正確且つ再現性がある０本方法により、消費者によ り調理される際に不快なボアタイントを出す豚をより確実に識別することができ る。本方法は、比較的安価であり、高価な分析装置は必要ないので、例えば、１ 日当たり約５００件以下の分析を実施するような小さな屠殺場での使用に非常に 有用である。上記記載の如く、本方法は、測定の関連範囲内で５ｚ未満の精度で 実施し得るので、非常に正確である。既に記載の如く、デンマークの屠殺場に於 ける豚の排除限界は、デンマーク特許第１５４．６６７号の方法により測定され たスカトール等価物０．２５ｐｐｍに設定されていたが、実施例１に記載の方法 によるとこれはスカトール約６５ｐｐｂの測定値に相当する。実際に選択した除 外限界は、日常的な実験をベースとして当業者により容易に測定され得るだろう 。

抽出前に脂肪を加熱して溶解することにより、驚くべきことに、スカトール、イ ンドール及び他の潜在的にボアタイント産生インドール化合物の両方を検出する ことができた。他の潜在的にボアタイント産生インドール化合物の中でも、酢酸 インドール〈■＾＾）及びトリプトファンは両方とも分解してスカトールになる のて非常に重要な役割を果たし得る。加熱が非常に有効であるという理由は、従 来より関連化合物が脂肪酸と結合形でラード中に知見されるということ、及び加 熱時にこれから放出されるということに基づいている。

ｔ・めの　゛ 本発明の現在最良の実施例は、実施例５に記載のサンプル容器を使用する、実施 例３に記載の方法である。

本発明を説明したが、種々の変形が考えられることは明らかである。このような 種々の変形は、本発明の趣旨及び範囲内であると見なされ、当業者にはこのよう な変形は総て以下の請求項の範囲内に含まれることは公知である。

補正書の写しく翻訳文）提出書（特許法楽１８４条の８）平成５年２月２２日。

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. １．豚の屠体またはその一部からラードまたは脂肪の予定量のサンプルを採取し 、このサンプルを極性溶媒で抽出し、抽出物中の１種以上のインドール化合物量 を測定することによる、豚肉／ラード中のボアタイント産生インドール化合物、 特にスカトール及びインドールを測定する方法であって、抽出前及び／または抽 出時に、脂肪が液体になるまでサンプルを加熱することを特徴とする該方法。
2. ２．予定量のラードを採取し、ラードサンプル全体を抽出することを特徴とする 請求項１に記載の方法。
3. ３．ラードサンプルを採取し、抽出前にラード中の脂肪を含まない固体を分離し 、次いでその液体脂肪相のみを抽出することを特徴とする請求項１に記載の方法 。
4. ４．予定量の脂肪サンプルを、屠体またはその一部から脂肪を直接融解すること により採取することを特徴とする請求項１に記載の方法。
5. ５．抽出後、抽出物中のインドール化合物量をクロマトグラフィーまたは蛍光光 度法により測定することを特徴とする請求項１〜４のいずれか１項に記載の方法 。
6. ６．抽出後、抽出物中のインドール化合物量を、好ましくは蛍光検出器またはＵ Ｖ検出器を備えたＨＰＬＣを使用するクロマトグラフィーにより測定することを 特徴とする請求項１〜５のいずれか１項に記載の方法。
7. ７．抽出後、抽出物中のインドール化合物の全量を直接蛍光光度測定法により測 定することを特徴とする請求項３または４に記載の方法。
8. ８．１つ以上の予定の発光波長３１５〜３６５ｎｍで測定し、励起波長２６０〜 ３１０ｎｍを使用することを特徴とする請求項７に記載の方法。
9. ９．ＵＶ検出器を備えたＨＰＬＣを、波長２００〜２５０ｎｍまたは２６５〜３ ０５ｎｍで使用することを特徴とする請求項６に記載の方法。
10. １０．上部が開口である容器（２）と注射針（１６）で貫通可能な閉鎖手段（４ ）とを含む、請求項４に記載の方法を実施する際に使用すべきサンプル容器であ って、開口容器（２）は開口の第１のチャンバ（８）と閉鎖の第２のチャンバ（ １０）とに分けられ、２つのチャンバは軽い物理的負荷により破壊可能な隔壁（ ６）により互いに分離されており、閉鎖手段（４）は第３のチャンバ（１２）を 含み、前記チヤンバはその上部に注射針（１６）で貫通可能な領域を有し、容器 内に押し下げられ得る膜（１４）により底が限定されていることを特徴とする該 サンプル容器。