JPH0641200A - 合成脂質ａ糖複合体抗原 - Google Patents

合成脂質ａ糖複合体抗原

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JPH0641200A
JPH0641200A JP5129939A JP12993993A JPH0641200A JP H0641200 A JPH0641200 A JP H0641200A JP 5129939 A JP5129939 A JP 5129939A JP 12993993 A JP12993993 A JP 12993993A JP H0641200 A JPH0641200 A JP H0641200A
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benzyl
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JP5129939A
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Massimo Porro
マツシモ・ポロ
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Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【構成】 式： ［Ｐ１は水素またはホスフェートであり、Ｒ２はアルキ
ル（Ｃ１−Ｃ４）であり、Ｐ２は水素、プロピル、アリ
ルまたはホスフェートであり、ｎは１−３０の整数であ
り、Ｑは担体蛋白質またはペプチドである］の合成糖複
合体抗原並び該糖複合体の製造方法。 【効果】 バクテリア性内毒素により引き起こされる敗
血症性ショックの予防のためのワクチンに有用である。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】
【発明の分野】本発明は、バクテリア性内毒素（ｂａｃ
ｔｅｒｉａｌ ｅｎｄｏｔｏｘｉｎ）により引き起こさ
れる敗血症性ショック（ｓｅｐｔｉｃ ｓｈｏｃｋ）の
予防のためのワクチンに使用するための合成糖複合体抗
原および該糖複合体の新規な製造方法に関する。
【０００２】
【背景】
Ａ．敗血症性ショック 敗血症性ショックは、手術、長期入院、事故および他の
腫瘍現象の合併症としてグラム−陰性バクテリアによる
感染症の後に起きる生命を脅かす症状である。この疾病
に寄与する物質は、グラム−陰性バクテリアの表面上に
のみ存在する糖脂質抗原であるバクテリア性内毒素であ
る。この糖脂質は、脂質Ａ（ＬｉｐＡ）と称されている
脂肪酸に富んでいる部分と共有結合している炭水化物鎖
の寸法により、リポ−多糖類（ＬＰＳ）またはリポ−オ
リゴ多糖類（ＬＯＳ）としても知られている。脂質Ａだ
けが内毒素（ＬＰＳ）により示される主な毒性効果に寄
与している。バクテリアの外膜上に固定されているこの
内毒素の血液流への放出が、大食細胞および単核細胞の
ような免疫系の特定細胞との結合を生じる。これらの特
定細胞は内毒素により活性化され、そして数種の免疫メ
ディエイターが放出される（インターロイキン−１およ
びインターロイキン−６、α−腫瘍壊死因子、δ−イン
ターフェロン）。さらに、内毒素は補体カスケードも活
性化させ、それが血小板からの血管活性効果器の放出を
促進させる蛋白分解酵素（例えば、ブラディキニンおよ
びヒスタミン）の放出を伴う細胞溶解をもたらす。これ
らのシトキン類は最終的には血圧の急低下およびその後
の心不全をもたらす。最終的な結果は症例の４０−６０
％の患者の４８−７２時間以内の死亡である。今まで
は、例えばメチルプレドニソロンの如き副腎コルチコス
テロイド類の巨丸剤注入が使用されているが利用できる
特定の治療または療法はなく、そして最近では単クロー
ン性抗体の使用がある種の勇気づけられる結果を与えて
きている。
【０００３】敗血症性ショックはＬＰＳの放出を引き起
こすバクテリア感染により引き起こされる。これらのバ
クテリアには、緑膿菌、大腸菌、チフス菌、淋菌、百日
咳菌、肺炎棹菌などが包含される。
【０００４】Ｂ．脂質Ａおよび合成同族体 上記の目標細胞の引金となる前に内毒素を遮蔽するため
の宿主の免疫系有効性がないことに関する主な理由の一
つは、内毒素が特に脂質Ａと称されている毒性活性に含
まれている構造中では非常に劣悪な抗原であることによ
る。脂質Ａはβ−（１−→６）ジグルコサミンの骨格か
らなっており、それはそれぞれエステルおよびアミド結
合を介してヒドロキシルおよびアミノ基と共有結合され
た数個のアシル残基（脂肪酸類）を有している。４個の
３−ヒドロキシテトラデカノエートの分子がグルコサミ
ン二糖類と結合されており、そして他のヒドロキシル基
は通常の脂肪酸で置換されてアシルオキシアシル基を形
成している。
【０００５】脂質Ａの免疫学的活性を増加させる脂質Ａ
の種々の合成同族体が研究で製造されている。
【０００６】脂質Ａの他の合成同族体が記載されてきて
いるが、本発明は抗原性構造に影響を与えずに担体蛋白
質と共有結合するために独特に適合されている化学的特
性を有する合成脂質Ａ同族体を含んでいる。
【０００７】Ｃ．複合体ワクチン 弱い抗原である多糖類類の免疫原性を増加させる研究に
おいては、多糖類が担体蛋白質と結合していわゆる「複
合体」（ｃｏｎｊｕｇａｔｅ）ワクチンを製造するよう
な免疫原性複合体を製造することが知られている。例え
ば、人間の新生児におけるインフルエンザ菌ｂ莢膜多糖
類に対する免疫寄与は莢膜抗原をジフテリアトキソイド
の担体蛋白質と結合させることにより得られる。リンパ
球ヘルパー効果は担体蛋白質により誘発されそして免疫
の進行に寄与すると信じられている。同様な方式は肺炎
球菌ワクチンの製造に対しても向けられている。種々の
バクテリア性莢膜重合体がこれらのワクチン中の抗原成
分として使用されている。 Ｄ．ハプテン類に対する抗血清を製造するための担体蛋
白質類の使用 担体蛋白質類は結合された莢膜重合体の免疫原性を強化
させるだけでなく、ハプテン類を免疫原性にさせること
ができる。ハプテン類とは抗体すなわちリンパ球受容体
に対して特異的に結合することができるがそれら自身で
は免疫応答を誘発しない（すなわち免疫原性ではない）
分子であると定義されている。免疫応答を引き起こすた
めには、ハプテン類と称されている小／低分子量すなわ
ち劣悪な免疫原性分子は一般的に最初に普通は不均質蛋
白質である比較的大きい分子すなわち担体と結合されて
いなければならない。ハプテン−担体複合体の動物中へ
の注入が次に抗体のＢリンパ球による製造をもたらし、
それらの一部は遊離している未結合ハプテン分子と特異
的に結合できる。
【０００８】研究されている最初のハプテン類の中には
例えばアニリンおよびＯ−アミノ安息香酸の如きアゾ染
料化合物類がある。ランドスタイナー（Ｌａｎｄｓｔｅ
ｉｎｅｒ）およびランプル（Ｌａｍｐｌ）（１９１８、
Ｚ．Ｉｍｍｕｎ．Ｆｏｒｓｃｈ、２６：２９３）はこれ
らの化合物類をジアゾ化により血清蛋白質類と結合させ
た。これらの人工的に製造されたアゾ−蛋白質類を注入
する時には、兎は付着している化学的部分に対して特異
的な抗体の沈澱を進行させた。
【０００９】ハプテン化合物類の他の例はジニトロフェ
ノールであり、それは牛の血清アルブミンまたは牛のガ
ンマグロブリン（ＢＧＧ）およびリゼルギン酸ジエチル
アミドに対してジニトロフェニル（ＤＮＰ）基として結
合すると免疫原性となる。ホルムアルデヒドでさえハプ
テンとして作用することが示されており、生成物からま
たは研究室中でホルムアルデヒド蒸気に呈される人間
は、生体内でのそれらの内因性高分子のホルミル化後に
該化合物に対して「敏感」になる。
【００１０】ハプテン作用は小さい有機分子に限定され
ず、そしてインシュリンの寸法までのポリペプチドホル
モン類はたとえあったとしてもしばしば劣悪な免疫原性
である。従って、これらのホルモン類に対する高い抗体
価を得るためにはそれらを担体分子と結合させる（また
はこれらのポリペプチド類の多くを一緒に架橋結合させ
ることにより比較的大きい分子を作成する）ことが必要
である。
【００１１】担体分子の含有は、担体が単なる移送役割
以上のことを演じるという点で特に興味がある。オヴァ
リー（Ｏｖａｒｙ）およびベナセラッフ（Ｂｅｎａｃｅ
ｒａｆｆ）、１９６３、Ｐｒｏｃ．Ｓｏｃ．Ｅｘｐ．Ｂ
ｉｏｌ．Ｍｅｄ.、１１４：７２３は兎にＤＮＰ−ＢＣ
Ｇを注入することによりこのことを示している。多くの
免疫原性物質の動物中への注入が露呈の免疫学的「記
憶」を生じるであろう。第二の注入がその後になされた
時に、はるかに大きい激しい免疫応答がある。実際に、
オヴァリーおよびベナセラッフがＤＮＰ−ＢＣＧを再び
注入した時には、ＤＮＰおよびＢＣＧの両者に対して向
けられた顕著に高められた水準の抗体をもたらす強力な
二次応答があった。しかし、第二の注入をＤＮＰ−卵ア
ルブミンに変えた時には、それよりはるかに弱い抗−Ｄ
ＮＰ抗体応答が見られた。応答における差は担体効果と
称されているものによるものであり、そしてヘルパーＴ
リンパ球を含むようである。
【００１２】これまでの証明は、全ての蛋白質類が一定
のハプテンに対して同等に有効な担体蛋白質類ではない
ことを示している。ロビンス（Ｒｏｂｂｉｎｓ）他（Ｉ
ｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ.、４０：２４５−２５６）
は、同一の多糖類ハプテンが異なる蛋白質担体に結合さ
れておりそしてハプテンに対する抗体応答が定量化され
ている実験用の蛋白質−多糖類複合体ワクチンに関する
データを表示している。担体に関する主な役割を示して
いる抗−ハプテン抗体の発生量においてかなりの差が見
られた。
【００１３】Ｅ．複合体を含有しているワクチン 他の研究は、いわゆる「担体効果」による抗体生成を促
進させるための努力における担体蛋白質に対する莢膜重
合体の結合を研究している。例えば、シュニールソン
（Ｓｃｈｎｅｅｒｓｏｎ）他、ジャーナル・オブ・エク
スペリメンタル・メディスン（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ
Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、１５
２：３６１−３７６（１９８０）はインフルエンザｂ菌
により引き起こされる侵入性疾病に対する免疫性を与え
ると開示されているインフルエンザｂ菌重合体−蛋白質
複合体を記載している。該参考文献は、新生児における
莢膜重合体の年令−関連性の免疫学的作用を論じてお
り、そして元の莢膜重合体と血清アルブミン類、リムル
ス・ポリフェムス・ヘモシアニンおよびジフテリア毒素
を含む種々の蛋白質類との結合によりこの年令−依存性
を克服しようとしている。結合方法は、例えばアジピン
酸ジヒドラジドの如き結合剤の使用を含んでいる。
【００１４】ゲイヤー（Ｇｅｙｅｒ）他、Ｍｅｄ．Ｍｉ
ｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１６５：１７１−
２８８（１９７９）は還元性アミノ化によってある種の
肺炎棹菌莢膜多糖類フラグメントのニトロフェニル−エ
チルアミン結合剤に対する複合体を製造しており、そし
て次に誘導化された糖をアゾ結合を用いて蛋白質類と結
合させた。
【００１５】マックインタイヤー（ＭｃＩｎｔｉｒｅ）
により１９７４年５月９日に出願された米国特許番号
４,０５７,６８５は、ハロアシルハライドとの反応によ
り蛋白質抗原に対して共有結合された毒性が減じられた
大腸菌リポ多糖類に関するものである。
【００１６】ジェニングス（Ｊｅｎｎｉｎｇｓ）他によ
る１９８２年１０月２６日に発行された米国特許番号
４,３５６,１７０は、還元性アミノ化による多糖類−蛋
白質複合体の製造に関するものである。
【００１７】アンダーソン（Ａｎｄｅｒｓｏｎ）（１９
８３、インフェクション・アンド・イミュニティ（Ｉｎ
ｆｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｉｔｙ）、３９：
２３３−２３８）は、インフルエンザｂ型菌莢膜多糖類
からのオリゴ多糖類類と無毒であるがジフテリア毒素の
抗原学的に同一変種であるＣＲＭ197との間の複合体に
関するものである。
【００１８】ニッペ（Ｓｎｉｐｐｅ）他（１９８３、イ
ンフェクション・アンド・イミュニティ（Ｉｎｆｅｃｔ
ｉｏｎ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｉｔｙ）、４２：８４２−
８４４）は、莢膜多糖類Ｓ３の部分的な酸加水分解物か
ら単離された六糖が還元性アミノ化によりステアリルア
ミンと結合されておりそして次にリポソーム中に加えら
れている、肺炎連鎖球菌３型に対する半合成ワクチンに
関するものである。生成した複合体／リポソームワクチ
ンはハツカネズミ中で肺炎連鎖球菌３型に対する保護を
誘発することが観察された。
【００１９】ツサイ（Ｔｓａｙ）他による１９８７年５
月５日に発行された米国特許番号４,６６３,１６０は、
グラム−陰性バクテリアからの無毒化された多糖類が同
種類のグラム−陰性バクテリアからの無毒化された蛋白
質と４−１２炭素部分により共有結合されているバクテ
リアに関するものである。
【００２０】ゴルドン（Ｇｏｒｄｏｎ）による１９８６
年１０月２８日に発行された米国特許番号４,６１９,８
２８は、例えばインフルエンザｂ菌、肺炎連鎖球菌、髄
膜炎菌、および大腸菌の如き病原性バクテリアからの多
糖類分子と例えばジフテリアおよび破傷風毒素の如きＴ
細胞依存性抗原との間の複合体に関するものである。ア
ンダーソン（Ａｎｄｅｒｓｏｎ）およびクレメンツ（Ｃ
ｌｅｍｅｎｔｓ）による１９８９年２月２８日に発行さ
れた米国特許番号４,８０８,７００並びにアンダーソン
による１９８８年８月２日に発行された米国特許番号
４,７６１,２８３は、還元性アミノ化によるバクテリア
毒素類、トキソイド類、または結合性副単位に対する莢
膜重合体フラグメントの共有結合に関するものである。
【００２１】ポロ（Ｐｏｒｒｏ）他による１９８７年１
２月８日に発行された米国特許番号４，７１１,７７９
は、三価の免疫原性活性を有しておりそしてグラム陽性
バクテリアおよびグラム陰性バクテリアの莢膜多糖類類
並びにＣＲＭ197、破傷風トキソイド、または百日咳毒
素からなっている糖蛋白質複合体ワクチンに関するもの
である。
【００２２】Ｆ．複合体ワクチンの製造方法 莢膜多糖類ハプテン類が担体蛋白質類と結合されている
複合体ワクチンの製造は下記の工程を経由する： （ｉ）莢膜多糖類を製造しなければならない （ｉｉ）多糖類のフラグメントを使用する場合には、そ
れを元の多糖類から分離しなければならない。
【００２３】（ｉｉｉ）糖は活性化するかまたは複合化
されるようにしなければならなず、すなわち蛋白質と共
有結合可能な部分を生成しなければならない。
【００２４】（ｉｖ）糖は蛋白質と複合化される。
【００２５】これらの４段階を行うための種々の方法が
当技術で知られている。使用される方法に関しては、ク
ルーズ（Ｃｒｕｓｅ）ＪＭ、ルイス（Ｌｅｗｉｓ）ＲＥ
Ｊｒ．（編集）：複合体ワクチン類（Ｃｏｎｊｕｇａｔ
ｅ Ｖａｃｃｉｎｅｓ）、Ｃｏｎｔｒｉｂ．Ｍｉｃｒｏ
ｂｉｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ.，バーゼル（Ｂａｓｅ
ｌ）、カルガー（Ｋａｒｇｅｒ）、１９８９、１０巻、
４８−１１４頁を参照のこと。
【００２６】一般的には、結合は直接的であることもで
き、または長さおよび融通性を要望に応じて適合させる
ことのできる鎖により２個の抗原成分類に分離するため
に作用するリンカー（スペーサー）鎖を使用して行うこ
ともできる。結合用に使用される化学反応は一般的には
比較的少数の天然産出官能基：カルボキシル、ヘイアセ
タール、アミノ／イミノ、メルカプト／ジスルフィド、
ヒドロキシルおよびフェノキシル部分：の使用または修
正に依存している。例えば、糖複合体は水溶性ヒドロキ
シスクシンイミド誘導体を用いてまたは用いない水溶性
カルボジイミドを使用するアミド結合の生成により行う
ことができて、担体蛋白質上で第一級アミノ基と容易に
縮合する活性化されたカルボキシレート中間生成物を製
造する。他の一般的に使用されている「還元性アミノ
化」と称されている方法は、シッフ塩基として知られて
いる中間生成イミン付加物を選択的に還元するためにシ
アノホウ水素化ナトリウムを使用している。米国特許番
号４,３５６,１７０および４,８０８,７００を参照のこ
と。最近では、商業用のＰＲＰ−誘導されたオリゴ糖ワ
クチン（ＨｂＯＣ）を製造することが使用されている。
【００２７】リンカー技術を使用する種々の結合技術が
知れられている。一方法は、臭化シアンとの結合用のリ
ンカーとしてアジピン酸ジヒドラジドを使用している。
米国特許番号４,６１９,８２８を参照のこと。米国特許
番号４,７１１,７７９中では、オリゴ糖ハプテン類を最
初に酸加水分解により分解させ、次に第一級アミノ基を
末端還元性基の中に（例えばシアノホウ水素化ナトリウ
ムを用いて）加えることにより活性化させ、次に（例え
ばアジピン酸誘導体類の存在下で）エステル類に転化さ
せる。活性化されたオリゴ糖を次に例えばジメチルスル
ホキシドの如き有機溶媒の存在下でトキソイドと結合さ
せる。
【００２８】
【発明の要旨】本発明は、脂質Ａの同族体である新規な
合成二糖類ハプテンおよびそのような二糖類から該二糖
類の担体蛋白質類に対する共有結合により製造される免
疫原性複合体に関する。
【００２９】さらに、本発明は合成二糖類ハプテンを合
成しそして免疫原性複合体の製造で使用される結合工程
において必須である二糖類中の第一級アミノ基を製造す
る新規な方法にも関する。
【００３０】さらに、本発明は合成脂質Ａ二糖類の製造
において有用な新規な中間生成物にも関する。
【００３１】最後に、本発明は合成脂質Ａ複合体ワクチ
ン類および敗血症性ショックの処置におけるそれらの使
用に関する。
【００３２】従って、本発明は一般式：
【００３３】
【化７】
【００３４】［式中、Ｐ1は水素またはホスフェートで
あり、Ｒ2はアルキル（Ｃ1−Ｃ4）であり、Ｐ2は水素、
プロピル、アリルまたはホスフェートであり、ｎは１−
３０の整数であり、そしてＱは担体蛋白質またはペプチ
ドである］の新規な合成脂質ＡＤ−グルコサミン二糖類
複合体に関する。以上の式において、ｎは１モルの担体
蛋白質当たりの二糖類単位のモル数を表す。
【００３５】
【詳細な記載】
１．Ｄ−グルコサミン二糖類の製造 本発明の免疫原性複合体の製造において有用な新規な合
成二糖類ハプテンは、式：
【００３６】
【化８】
【００３７】［式中、Ｒ1は水素またはアシルであり、
Ｒ2は（Ｃ1−Ｃ4）アルキルであり、Ｒ3は水素またはＣ
Ｈ（ＣＨ2）4ＣＯＯＸであり、ここでＸは式：
【００３８】
【化９】
【００３９】の官能基であり、Ｐ1は水素またはホスフ
ェートであり、そしてＰ2は水素、プロピル、アリルま
たはホスフェートである］のものである。
【００４０】化合物類１３、３２および３５により代表
される本発明のこれらの新規な脂質ＡＤ−グルコサミン
二糖類並びにそれらの新規な複合体は、反応式Ｉおよび
反応式ＩＩに記載する如くして製造することができる。
【００４１】
【化１０】
【００４２】
【化１１】
【００４３】
【化１２】
【００４４】
【化１３】
【００４５】
【化１４】
【００４６】
【化１５】
【００４７】反応式Ｉおよび反応式ＩＩにおいて、Ｒは
ベンジルオキシカルボニル（ＣＢＺ）または２,２,２ト
リクロロエチルオキシカルボニルであり、Ｒ′はＣ(Ｏ)
(ＣＨ2)4Ｃ(Ｏ)Ｏ−Ｘであり、ここでＸは
【００４８】
【化１６】
【００４９】であり、Ｒ″はプロピルであり、ａｌはア
リル基であり、Ｂｎはベンジルであり、Ｐ＊はジフェニ
ルホスフェートであり、ＴＣＡはトリクロロアセトイミ
デート基であり、Ｐ＊＊はジベンジルホスフェートであ
り、Ｐはホスフェートであり、Ｐ1は水素またはホスフ
ェートであり、Ｐ2はプロピル、アリル、ホスフェート
または水素である。
【００５０】以上の反応で使用されている試薬は下記の
如くである： ａ. 無水酢酸／ピリジン ｂ. 四塩化錫 ｃ. 塩化ベンジルオキシカルボニル ｄ. アリルアルコール／ＨＣＬ ｅ. ジメトキシプロパン／ｐ−ＴＳＡ ｆ. 無水酢酸／ピリジン ｇ. ９０％酢酸、１００℃ ｈ. Ｐ−ＴＳＡ、クロロホルム ｉ. Ｐｄ／Ｃ、エタノール、シクロヘキセン ｊ. アンベルライトＩＲＡ４０１ ｍ. 硝酸アンモニウム第二セリウム／ナトリウムアジ
ド ｎ. 亜硝酸ナトリウム ｏ. 炭酸カリウム／トリクロロアセトニトリル ｐ. アリルアルコール／トリメチルシリルトリフレー
ト ｑ. 臭化ベンジル／水素化ナトリウム ｒ. ７Ｎ ＨＣｌ、室温、１時間 ｓ. 臭化ベンジル／水酸化バリウム／酸化バリウム ｔ. ジフェニルホスホロクロリデート／ジメチルアミ
ノピリジン ｕ. ヘキサフルオロ燐酸１,５−シクロオクタジエンビ
ス(メチルジフェニルホスフィン)−イリジウム／ヨウ素
分子ふるい／トリメチルシリルトリフレート ｗ. Ｐｄ／Ｃ、Ｐｔ2Ｏ、Ｈ2、８バール ｘ. ブチルリチウム／ジベンジルホスホロクロリデー
ト ｋ.およびｌ. 明細書を参照のこと。
【００５１】しかしながら、当技術の専門家に既知の如
く他の試薬も適している。
【００５２】反応式Ｉに従うと、供与体である２−メチ
ル−（３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−１,２−ジデオ
キシ−α−Ｄ−グルコピラノ）−［２,１−ｄ］−オキ
サゾリン（５）および新規な受容体であるアリル３−Ｏ
−アセチル−２−(ベンジルオキシカルボニル)アミノ−
α−Ｄ−グルコピラノシド（１０）のグルコシド化によ
りプロピル６−Ｏ−［２−アセトアミド−２−デオキシ
−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２−アミノ−２−デオ
キシ−α−Ｄ−グルコピラノシド（１３）の合成が行わ
れる。
【００５３】供与体である２−メチル−（３,４,６−ト
リ−Ｏ−アセチル−１,２−ジデオキシ−α−Ｄ−グル
コピラノ）−［２,１−ｄ］−オキサゾリン（５）はス
リヴァツサヴァ（Ｓｒｉｖａｔｓａｖａ）Ｖ．Ｋ．（１
９８２）により記されている如く二段階で製造される。
第一段階で、Ｄ−クルゴサミン塩酸塩を無水酢酸および
ピリジンで処理して五酢酸塩４を生成する。五酢酸塩を
例えば塩化メチレンの如き適当な溶媒中で四塩化錫で処
理することによりオキサゾリン５に転化させる。
【００５４】新規な受容体であるアリル３−Ｏ−アセチ
ル−２−(ベンジルオキシカルボニル)アミノ−α−Ｄ−
グルコピラノシド（１０）は市販のＤ−グルコサミン塩
酸塩から五段階で製造することができる。Ｄ−グルコサ
ミン塩酸塩を塩化ベンジルオキシカルボニルまたは２,
２,２トリクロロエチルクロロホルメートで処理して
（ベルガマン（Ｂｅｒｇａｍａｎｎ）Ｍ．およびゼルヴ
ァス（Ｚｅｒｖａｓ）Ｌ．、１９３２）誘導体（６）を
与える。この反応は例えば炭酸水素ナトリウムを含有し
ている水の如き適当な溶媒中で実施することができる。
次にアミノ−Ｄ−グルコピラノース誘導体（６）を次に
アリルアルコール−ＨＣｌとの反応によりアリル２−置
換された−アミノ−α−Ｄ−グルコピラノシド（７）に
転化させる。この中間生成物は文献中に報告されている
（スガワラ（Ｓｕｇａｗａｒａ）、タミオ（Ｔａｍｉ
ｏ）他、１９８９）。化合物７をＰ−ＴＳＡの存在下で
２,２′−ジメトキシプロパンと反応させるる時に、ア
リル−２−置換された−アミノ−４,６−Ｏ−イソプロ
ピリデン−α−Ｄ−グルコピラノシド（８）が得られる
（二段階）。８の位置３におけるヒドロキシ基を無水酢
酸およびピリジンでエステル化して（ウェバー（Ｗｅｂ
ｅｒ）およびコラナ（Ｋｈｏｒａｎａ）、１９７２）、
アリル２−置換された−アミノ−３−Ｏ−アセチル−
４,６−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−グルコピラノ
シド（９）を生成する。３−Ｏ−アセチル基は、酸無水
物用の適当な試薬で置換することにより、Ｃ1−Ｃ4アル
キルエステルで置換することができる。この化合物をイ
ソプロピリデン基の酸性加水分解（ルーバート（Ｌｅｗ
ｂａｒｔ）およびシュナイダー（Ｓｃｈｎｅｉｄｅ
ｒ）、１９６９）により受容体１０に転化させる。
【００５５】５および１０のグリコシド反応は例えば還
流クロロホルムの如き適当な溶媒中でｐ−トルエンスル
ホン酸の存在下で実施される。この反応は希望する１−
→６β−配置された二糖類１１（アリル−２−デオキシ
−６−Ｏ−［２−デオキシ−２−アセトアミド−３,４,
６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノシル］
−２−（ベンジルオキシカルボニル）アミノ−３−Ｏ−
アセチル−α−Ｄ−グルコピラノシド）を与える。
【００５６】この新規な二糖類の構造は実験研究におい
て1Ｈ−ＮＭＲおよび13Ｃ−ＮＭＲにより確認された。1
Ｈ−ＮＭＲにおいて、非還元性部分のＨ−１とＨ−２の
間の結合定数はβ−結合の特性である８.９である。１
１をパラジウム／炭素上で水素化する時には（ベルガマ
ン（Ｂｅｒｇａｍａｎｎ）Ｍ．およびゼルヴァス（Ｚｅ
ｒｖａｓ）Ｌ.、１９３２）、窒素保護基を除去し、そ
してアリル基をプロピルに還元し、二糖類１２が製造さ
れる。１２を脱アセチル化して、新規な合成二糖類であ
るプロピル６−Ｏ−［２−アセトアミド−２−デオキシ
−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２−アミノ−２−デオ
キシ−α−Ｄ−グルコピラノシド（１３）を得る。
【００５７】以上の記載は特定の試薬、溶媒および反応
条件を用いる反応式Ｉに従う本発明の新規な二糖類の製
造を記しているが、溶媒、試薬および反応条件に関する
他の改変も本発明の範囲内であるとみなされる。例え
ば、５および１０のグリコシド化反応用に適している溶
媒には、四塩化炭素（ＣＣｌ4）、ジクロロメタン（Ｃ
Ｈ2Ｃｌ2）、ベンゼンなどが包含される。以上の記載か
らの他の改変も当技術の専門家には明らかであろう。
【００５８】反応式ＩＩ Ｄ−グルコサミン二糖の合成 モノ−およびジホスフェート類（３２および３５） 反応式IIに従い、新規な供与体である２−デオキシ−２
−アセトアミド−３,６−ジ−Ｏ−ベンジル−グルコピ
ラノシルトリクロロアセトイミデート−４−Ｏ−ジフェ
ニルホスフェート（３０）および新規な受容体であるア
リル２−アジド−３−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルコピラノ
シド（２２）のグリコシド化によりプロピル２−デオキ
シ−６−[２−デオキシ−２−アセトアミド−β−Ｄ−
グルコピラノシル]−２−アミノ−Ｄ−グルコピラノシ
ド４′−(ホスフェート)（３２）および２−デオキシ−
６−[２−デオキシ−２−アセトアミド−β−Ｄ−グル
コピラノシル]−２−アミノ−α−Ｄ−グルコピアノー
ス１,４′−ビス(ホスフェート)（３５）の合成が行わ
れる。新規な受容体であるアリル２−アジド−３−Ｏ−
ベンジル−Ｄ−グルコピラノシド（２２）は市販のトリ
アセチルグリカール（１５）から出発して八段階で合成
される。トリアセチルグリカールを文献（グルンドラー
（Ｇｒｕｎｄｌｅｒ）およびシュミット（Ｓｃｈｍｉｄ
ｔ）、１９８４）に記されている如きアジド−ニトロ化
にかける。このアジド−ニトロ化で化合物類の混合物、
すなわちα−Ｄ−グルコ−アジド（１９％）、β−Ｄ−
グルコ−アジド（３０％）およびα−Ｄ−マンノ−アジ
ド（３０％）、が生じる。混合物の1Ｈ−ＮＭＲスペク
トルのＨ−Ｃ(１)信号の積分から比を測定する。これら
の混合物をこの段階で分離するための試みはなされてい
ない。アジド−ナイトレート１６をジオキサン中で硝酸
ナトリウムで処理して（グルンドラー（Ｇｒｕｎｄｌｅ
ｒ）およびシュミット（Ｓｃｈｍｉｄｔ）、１９８４）
１７を与え、それを２段階でアリルグリコシド１８に転
化させる。１９を与えるための１８の脱アセチル化は１
８をアンベルライトＩＲＡ４０１樹脂で処理することに
より行われる。化合物１９をジメトキシプロパンおよび
ｐ−トルエンスルホン酸で処理する（エヴァンス（Ｅｖ
ａｎｓ）他、１９６７）。この反応生成物から、２０を
フラッシュクロマトグラフィーにより単離する。２０は
α−およびβ−アノマー類の混合物である。２０の構造
は1Ｈ−ＮＭＲおよび13Ｃ−ＮＭＲスペクトルにより確
認された。２０を二段階で、最初に位置３におけるヒド
ロキシ基のベンジル化（臭化ベンジル／水素化ナトリウ
ム、ゼルネッキー（Ｃｚｅｒｎｅｃｋｉ）他、１９７
６）そして次に４，６−Ｏ−イソプロピリデン基の加水
分解（ルーバート（Ｌｅｗｂａｒｔ）およびシュナイダ
ー（Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ）、１９６９）で、２２に転化
させる。１当量のベンジルを位置３におけるヒドロキシ
基の保護用に使用することができる。意図する当量は、
置換基が保護基の官能性を妨害しないような置換された
ベンジル部分を含んでいる。
【００５９】新規な供与体である２−デオキシ−２−ア
セトアミド−３,６−ジ−Ｏ−ベンジル−グルコピラノ
シルトリクロロアセトイミデート−４−Ｏ−ジフェニル
ホスフェート（３０）は市販のＮ−アセチルグルコサミ
ン（２３）から七段階で製造される。最初に２３をアセ
チル化しそして次にイソプロピリデン化して（エヴァン
ス（Ｅｖａｎｓ）他、１９６７）２５を生成する。２５
の構造は１Ｈ−ＮＭＲおよび13Ｃ−ＮＭＲスペクトルに
より確認された。２−デオキシ−２−アセトアミド−
４,６−Ｏ−イソプロピリデン−α−Ｄ−グルコピラノ
シド（２５）を酸化バリウムおよび水酸化バリウムの存
在下でベンジル化にかけて２−デオキシ−２−アセトア
ミド−４,６−Ｏ−イソプロピリデン−３−Ｏ−ベンジ
ル−α−Ｄ−グルコピラノシドを生成し、それを７Ｎ
ＨＣｌで処理して２−デオキシ−２−アセトアミド−３
−ベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシド（２６）を与え
る。２６を２５に関して記されているのと同じベンジル
化にかけて、２−デオキシ−２−アセトアミド−３,６
−Ｏ−ジベンジル−α−Ｄ−グルコピラノシド（２７）
を与える。化合物２７も２４から２当量のベンジル化試
薬を用いて製造することができる。化合物２０のヒドロ
キシ基の保護に関して以上で記されている如く、化合物
２７のヒドロキシ基の保護用に他の当量のベンジルを使
用することもできる。ジメチルアミノピリジンの存在下
における乾燥クロロホルム中でのジフェニルホスホロク
ロリデートを用いる２７のホスホリル化（イモト（Ｉｍ
ｏｔｏ）他、１９８７）でアリル２−デオキシ−２−ア
セトアミド−３,６−ジ−Ｏ−ベンジル−α−グルコピ
ラノシド−４−Ｏ−ジフェニルホスフェート（２８）を
与える。この反応およびその後の化合物３０のグリコシ
ド化反応においては、エタノールを含まないクロロホル
ムを使用することが重要である（２−メチル２−ブテン
を含有しているＨＰＬＣ等級クロロホルムがこれらの場
合に使用された）。２８を１,５−シクロオクタジエン
ビス(メチルジフェニルホスフィン)−イリジウムヘキサ
フルオロホスフェートおよびヨウ素を用いる保護基除去
により２９に転化させる（イモト（Ｉｍｏｔｏ）他、１
９８７）。
【００６０】供与体３０は２９を炭酸カリウムおよびト
リクロロアセトニトリルで処理することにより得られる
（シュミット（Ｓｃｈｍｉｄｔ）Ｒ．Ｒ．およびグルン
ドラー（Ｇｒｕｎｄｌｅｒ)Ｇ.、１９８２）。二糖類３
１は乾燥クロロホルム中での触媒としてトリメチルシリ
ルトリフレートを用いる受容体３０および供与体２２の
グリコシド化により得られる（シュミット（Ｓｃｈｍｉ
ｄｔ）Ｒ．Ｒ．、アンゲヴァンドテ・ヘミイ・インター
ナショナル・エディッション（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．
Ｉｎｔ．Ｅｄ．）、１９８６）。二糖類３１をＰｄ／Ｃ
およびＰｔ2Ｏ触媒（イモト（Ｉｍｏｔｏ）Ｍ．他、１
９８７）を用いる８バール圧力下での水素化にかけて３
２を与える。
【００６１】新規な二糖類３５は、天然脂質Ａの合成に
関してイモト（Ｉｍｏｔｏ）他、（１９８７）により報
告されているのと同様な方法で新規な二糖類３１から３
段階で製造することができる。
【００６２】３．蛋白質に対する二糖類の結合 本発明に従い使用できる蛋白質類には、若い哺乳動物へ
の投与に関して安全であり且つ免疫学的に有効な担体蛋
白質として作用できる蛋白質が包含される。特定態様で
は、細胞表面蛋白質類、膜蛋白質類、毒素類およびトキ
ソイド類を使用できる。安全性に関する基準には、初期
毒性の無いことおよびアレルギー反応の最少危険性が包
含される。ジフテリアおよび破傷風トキソイド類はこれ
らの基準を満たしており、すなわち適切に製造された場
合にはそれらは無毒でありそしてアレルギー反応の発生
は許容可能な程度の低さである。アレルギー反応の危険
性は成人にとっては相当なものであるかもしれないが、
新生児に関しては最少である。本発明の別の特定態様に
従うと、適切な担体蛋白質類には下記のものが包含され
るがそれらに限定されるものではない：サルモネラ・フ
ラゲリン、ヘモフィルス・ピリン、ヘモフィルス１５ｋ
Ｄａ、２８−３０ｋＤａ、および４０ｋＤａ膜蛋白質
類、大腸菌熱移動性エンテロトキシンＬＴＢ、コレラ毒
素、並びにロタウィルスＶＯ７および呼吸系合胞体ウィ
ルスＦおよびＧ蛋白質類を含むウィルス性蛋白質類。
【００６３】「担体効果」では、担体として比較的強力
な抗原に結合されていることにより弱い抗原はそれが単
独で存在している場合より大きい免疫原性となる。動物
があらかじめ担体だけで免疫化されている場合には、動
物は「準備されて」いて、そして担体抗原に対してだけ
でなく結合されたハプテン基に対しても強化された免疫
応答を生じるかもしれない。新生児は日常的に破傷風お
よびジフテリアトキソイド類で免疫化されている。従っ
て、彼らはその後のこれらのトキソイド類のいずれかと
並びにジフテリア交差−反応性蛋白質ＣＲＭ197と結合
されている糖抗原の存在に関して準備されているであろ
う。
【００６４】莢膜重合体が結合されている担体蛋白質類
は天然毒素または解毒された毒素（トキソイド）であっ
てよい。また、比較的最近の変異技術により、毒素と抗
原的には同様であるが無毒な遺伝子的に変更された蛋白
質類を製造することもできる。これらは「交差反応性物
質」またはＣＲＭ類と称されている。ＣＲＭ197は天然
ジフテリア毒素から１個だけのアミノ酸変化を有してお
りそして免疫学的にそれと区別がつかないため、それは
価値がある。
【００６５】天然毒素に対する莢膜重合体の結合は毒性
を減じることもあるが、かなりの毒性が残っているかも
しれない。従って、蛋白質毒素のそれ以上の解毒にはホ
ルマリンが使用され、それは蛋白質の遊離アミノ基と反
応する。残存毒性は依然としてある程度あるかもしれな
い。さらに、瞬間的な解毒は特定のロットのワクチンで
可能であり、そしてこの方式でこの方式にはこの論点は
残っている。
【００６６】一方、天然毒素をホルマリンを用いて解毒
して莢膜重合体に対する結合の前に一般的トキソイドを
生成することもできる。しかしながら、これまでのホル
マリン処理は莢膜重合体フラグメントの還元性基との反
応用に利用できる遊離アミノ基の数を減少させる。ＣＲ
Ｍ類は従ってそれらが固有毒性を有していないがそれら
のアミノ基はホルマリンにより占拠されていないという
相当な利点を有している。別の利点は、ＣＲＭ類を用い
る作業において生物学的有害性がないことである。
【００６７】天然毒素と免疫学的に同一であるＣＲＭ
197の場合には、ホルマリンを用いる処理（解毒する必
要はないが）が免疫学的応答を大きく強化する。これは
身体機能による変性および／または架橋結合による集塊
化に対する分子の安定化によるものと思われる（粒子の
免疫原性は寸法に従い増加する）。
【００６８】上記の全ての理由のために、破傷風および
ジフテリアトキソイド類は担体蛋白質用の最重要候補で
あるが、他の適しているものもある。これらの他のもの
はジフテリアおよび破傷風を用いて見いだされた安全性
の経歴は有していないが、それらを使用するに足る他の
優勢な理由がある。例えば、それらは担体としてさらに
有効であったり、または製造経済性に意義がある。担体
用の他の候補には、シュードモナス、スタフィロコッカ
ス、ストレプトコッカス、ペルツシスおよび大腸菌の毒
素が包含される。
【００６９】本発明の特定態様では、脂質Ａ同族体二糖
類を下記の如くして精製されているＣＲＭ197蛋白質と
結合させることができる。
【００７０】菌株コリンバクテリウム・ジフテリアによ
り製造されるＣＲＭ197を培養媒体からバクテリア性培
養物をミリポール膜中に通し、蛋白質を濾液から沈澱さ
せ、そしてイオン交換クロマトグラフィーによりＣＲＭ
197を精製することにより分離できる。一方、実質的に
純粋なＣＲＭ197は当技術で既知の方法により得られ
る。
【００７１】二糖類の遊離第一級アミノ基の蛋白質に対
する結合を促進させるために、二糖類を有機溶媒および
任意に他の試薬（例えば縮合剤）の存在下で担体蛋白質
と共有複合体させることができる。本発明の免疫原性−
蛋白質複合体を得るために、当技術で既知の種々の方法
を用いて二糖を担体蛋白質と共有結合させられる使用可
能な結合方法には下記のものが包含される： １）−酸性ｐＨにおけるカルボジイミド活性化により、
アミノ−活性化された二糖類を担体蛋白質のカルボキシ
ル基と反応させる。
【００７２】２）−シアノホウ水素化ナトリウムの如き
還元剤を使用する還元性アミノ化により、アミノ−活性
化された二糖類をアルデヒド基を含有している二官能性
スペーサーと反応させ、該基をさらに担体蛋白質のアミ
ノ基と反応させる。
【００７３】３）−２個の臭化物基を含有している二官
能性スペーサーにより、アミノ−活性化された二糖類を
担体蛋白質のアミノ基と反応させる。
【００７４】４）−空気による酸化によりまたは既知の
酸化剤の使用により、アミノ−活性化された二糖をスル
フィドリル基を含有している二官能性スペーサーのＮ−
ヒドロキシスクシンイミジルエステルと反応させ、該基
をさらに担体蛋白質のスルフィドリル基と反応させる。
【００７５】５）−アミノ−活性化された二糖類をＮ−
マレイミド基を含有する二官能性 スペーサーのＮ−ヒ
ドロキシスクシンイミジルエステルと反応させ、該基を
さらに担体蛋白質のスルフィドリル基と反応させる。
【００７６】本発明の特定の好適態様では、第一級アミ
ノ基を有する二糖類を、それぞれの官能基が二糖類の末
端アミノ基または担体蛋白質の構造中に存在しているア
ミノ基のいずれかと反応可能な二官能性分子の使用によ
り、担体蛋白質上に存在している遊離アミノ基と共有結
合させて、二官能性分子がオリゴ糖類および担体蛋白質
を一緒に結合させることができる。本発明の好適態様で
は、二官能性基はジエステルであり、そしてより特に、
蛋白質のさらに有効なグリコシル化に関連することが示
されているアジピン酸のジエステルである。本発明の好
適な特定態様では、二糖が琥珀酸のスクシンイミジルジ
エステルとまたはより好適にはアジピン酸と下記の如く
して反応する。
【００７７】反応式ＩＩに示されている如く、アジピン
酸のビス−スクシンイミジルエステルとの反応により第
一級アミノ基をモノスクシンイミジルエステル１４に変
換させることにより合成二糖類１３、３２または３５を
誘導体とする。この目的用には、二糖類１３をジメチル
スルホキシド（ＤＭＳＯ）中に溶解させ、そしてアジピ
ン酸のビス−スクシンイミジルエステル（１：１モル／
モル）と３７℃において約２時間にわたり反応させる。
我々の実験では９０％以上のアミノ基がモノスクシンイ
ミジルエステルに誘導体化される。生成した化合物１４
をＤＭＳＯ中で最後に０.１Ｍ ＮａＨＣＯ3溶液中の例
えばＣＲＭ197の如き担体蛋白質と約２５：１の（二糖
類：蛋白質）のモル比で約８.０のｐＨおよび０−５０
℃の、好適には約３７℃の、温度において反応させる。
次に複合体を防腐剤として０.０１％のチメロサルを含
有しているホスフェート緩衝溶液（ＰＢＳ、ｐＨ＝７.
２）に対して約２４時間にわたり透析する。
【００７８】本発明者は下記の実施例中に記されている
如くして上記工程に従い複合体を製造した。複合体の同
定は、ａ）蛋白質ＣＲＭ197中（２５／４０）の残存ア
ミノ基の分析、ｂ）高性能クロマトグラフィー（ＨＰＬ
Ｃ）による複合体の酸性加水分解後のグルコサミン残基
の同定（アミノ酸分析）、およびｃ）天然ＣＲＭ197に
関する分子量増加に対するＳＤＳ−ＰＡＧＥ（ドデシル
硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電子泳動）によ
り、行われた。
【００７９】４．ワクチン処方および投与 ワクチンの処方に適する担体媒体には、燐酸ナトリウム
で緩衝された食塩水（ｐＨ７.４）またはｐＨ６の燐酸
ナトリウムで緩衝された食塩水および他の一般的媒体中
に懸濁された０.１２５Ｍ燐酸アルミニウムゲルが包含
される。
【００８０】一般的には、約５−約１００μｇの、好適
には約１０−５０μｇの、二糖類を含有しているワクチ
ンが若い温血哺乳動物における脂質Ａ同族体に対する有
効水準の抗体を誘発させるのに適する。もちろん、正確
な投与量は日常的投与量／応答実験により決められるで
あろう。子供用のワクチンの調合用の糖蛋白質複合体の
濃度は約２５−２００μｇの二糖類の範囲内である。比
較的多い投与量は体重を基にして投与することができ
る。連続的に与えられる数回の少量投与量の方が単一注
入として与えられる同量の複合体より優れていると予期
される。
【００８１】本発明のワクチンはいずれの年令の温血哺
乳動物に投与することができ、そして特に病原体類であ
る大腸菌、髄膜炎菌、緑膿菌、チフス菌、淋菌、百日咳
菌、肺炎棹菌などにより放出される脂質Ａ内毒素の放出
により引き起こされる若い哺乳動物において敗血症性シ
ョックに対して活性免疫化を誘発するのに特に応用され
る。
【００８２】本発明に従うと、ワクチンを皮下に、静脈
内に、筋肉内に、腹腔内に、経口的に、または鼻内に分
配することができる。ワクチンは糖複合体を可溶性また
は微粒形で含むこともでき、或いは微球またはリポソー
ムを含む微小嚢中に加えることもできる。
【００８３】５．オリゴ糖複合体ワクチンの有用性 本発明の好適態様では、病原性バクテリアにより製造さ
れるＬＰＳに対して向けられた糖複合体ワクチンを使用
して、個体をこれらの試薬により引き起こされる敗血症
性ショックの進行から保護する。そのようなワクチンか
ら利益を受けるであろう特に敏感な個体には、未成熟の
免疫系を有する幼い子供、無脾性の個体、並びに中間的
免疫系または慢性疾病、特に後天的免疫不全症候群（エ
イズ）、造血悪性、糖尿病、慢性心臓疾病、慢性肺疾
病、および鎌状赤血球貧血、を有する個体が包含され
る。本発明の糖複合体は、担体蛋白質に対するそれらの
結合によって、それらが担持している二糖類の免疫原性
を強化する。
【００８４】従って、本発明の糖複合体はワクチン処理
において使用されて、大腸菌、髄膜炎菌、チフス菌、肺
炎棹菌および緑膿菌などを含むＬＰＳを生成するバクテ
リアにより引き起こされる敗血症性ショックに対する保
護を与えることができる。
【００８５】担体蛋白質としてＣＲＭ197を用いて上記
の如くして製造された脂質Ａ糖複合体を兎中でＣＲＭ
197および脂質Ａ／ＬＰＳに対するＩｇＧ免疫応答を測
定するために試験した。結果を表Ｉに示す。
【００８６】
【表１】 表 Ｉ ドット−ブロットにより分析された、糖−複合体ＣＲＭ197− 合成同族体脂質Ａ（ＰＯ）により誘発されたＣＲＭ197および 脂質Ａ／ＬＰＳに対する兎のＩｇＧ免疫応答 ＣＲＭ197 担体−蛋白質 脂質Ａ ＬＰＳ 兎 ＃１ ０週間 ０ ０ ０ ３週間 １,６００ １００ ５０ ６週間 ６,４００ ２００ ２００ ８週間 １２,８００ ２００ ２００ 兎 ＃２ ０週間 ０ ０ ０ ３週間 ８００ ０ ０ ６週間 ６,４００ ５０ ５０ ８週間 １２,８００ １００ １００ 兎 ＃３ ０週間 ０ ５０ １００ ３週間 ４００ ２００ ２００ ６週間 ３,２００ ２００ ２００ ８週間 ６,４００ ４００ ４００ 兎 ＃４ ０週間 ０ ５０ ５０ ３週間 ８００ １００ １００ ６週間 ６,４００ ２００ ２００ ８週間 １２,８００ ２００ ２００ 抗原：ＣＲＭ197−合成同族体脂質Ａ（ＰＯ）。炭水化
物／蛋白質比：０.１（重量／重量）または１５（モル
／モル）。
【００８７】投与量：ＣＲＭ197１００μｇ、水酸化ア
ルミニウム１ｍｇ／投与。
【００８８】明細書および特許請求の範囲をさらに検討
すると、本発明の他の目的および利点が当技術の専門家
には明白となるであろう。
【００８９】本発明を下記の非限定的な個々の実施例と
共にさらに詳細に記す。
【００９０】
【実施例】実施例１ Ｄ−五酢酸グルコサミン（４） Ｄ−グルコサミン塩酸塩（３０ｇ）の乾燥ピリジン（１
８０ｍｌ）中溶液に、無水酢酸を室温において加え、そ
して溶液を一夜撹拌した。２０ｍｌのメタノールを加
え、そして溶媒を５０℃において除去した。残渣をＥｔ
ＯＡｃ（４００ｍｌ）中に溶解させた。この溶液をＭ
ＨＣｌ、水および食塩水で洗浄した。ＭｇＳＯ4上で乾
燥した後に、溶媒除去して粗製の４（４４ｇ）を得て、
それをＥｔＯＨから結晶化させた。融点＝１３６−３７
℃。Ｒｆ０.２７（ＥｔＯＡｃ）。1Ｈ−ＮＭＲ：６.０
８（ｄ，Ｊ＝３.３，Ｈ−１）、５.８６（ｄ，Ｊ＝８.
９５，ＮＨ）、５.４５（ｍ，２Ｈ，Ｈ−３およびＨ−
４）、４.２８（ｄｄｄ，Ｈ−５）、４.１７（ｄｄ，Ｊ
−１３.５，３.８７，Ｈa−６）、３.９５（ｍ，２Ｈ，
Ｈb−６，Ｈ−２）および２.１５−１.８５（４ｓ，５
Ａｃ）。
【００９１】実施例２ ２−メチル−（３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−１,２
−ジデオキシ−α−Ｄ−グルコピラノ）−［２,１−
ｄ］−２−オキサゾリン（ＤＯＮＯＲ,５） 五酢酸塩４（１３ｇ）の乾燥塩化メチレン（２５０ｍ
ｌ）中溶液に、四塩化第二錫（２.６ｇ、１.１５ｍｌ）
を室温において加えた。生じた溶液を窒素雰囲気下で４
８時間撹拌した。反応物を１０％ＮａＨＣＯ3の添加に
より中和し、生じた沈澱をセライトパッドを通して濾過
した。濾液を水、食塩水で洗浄し、そして乾燥した（Ｍ
ｇＳＯ4）。溶媒を除去した後に、生成物をフラッシュ
クロマトグラフィー（ＦＣ）（２：１：１：：ヘキサ
ン：エーテル：アセトン）にかけて、５（３.２ｇ）お
よび未反応の４（７ｇ）を得た。1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣ
ｌ3，３００ＭＨｚ）：５.９８（ｄ，Ｊ＝７.３，Ｈ−
１）、２.１−２.０９（３ｓ，ｏＡｃ）。Ｒｆ.＝０.１
９（ベンゼン：エーテル：メタノール（７：７：０.
５））。
【００９２】実施例３ ２−デオキシ−２−（ベンジルオキシカルボニル）アミ
ノ−Ｄ−グルコース（６）： 塩化ベンジルオキシカルボ
ニル（４０ｇ、(３９.３ｍｌ)、２３６ミリモル）を２
−アミノ−２−デオキシ−Ｄ−グルコース塩酸塩（３４
ｇ、１５８ミリモル）および炭酸水素ナトリウム（３４
ｇ、４０５ミリモル）の水（５００ｍｌ）中の冷却（０
−４℃）溶液にゆっくり加えた。混合物をこの温度にお
いて２時間そして次に室温において一夜撹拌した。６の
無色沈澱を濾過により集め、水、エーテルで洗浄し、そ
して真空下で乾燥した（２５ｇ、５０％）。融点２１６
−２１７℃（分解）。Ｒｆ＝０.３１（ＭｅＯＨ：Ｅｔ
ＯＡｃ：１：９）。
【００９３】実施例４ アリル２−デオキシ−２−（ベンジルオキシカルボニ
ル）アミノ−α−Ｄ−グルコピラノシド（７）： 化合物
６（３５ｇ）を撹拌しながら２（重量／容量）％の乾燥
ＨＣｌを含有しているアリルアルコール中で０.５時間
にわたり１００℃に加熱した。残渣をトルエン（５０ｍ
ｌ）と共に３回蒸発させることにより乾燥した。この化
合物をさらに精製することなく次の段階で使用した。融
点＝１２４−２６℃。
【００９４】Ｒｆ０.４７ ７.０５（ｄ，Ｊ＝７.８，
ＮＨ）、６.０−５.８（ｍ，ＣＨ＝）、５.４−５.２５
（ｍ，ＣＨ2＝）、５.０５−５.１５（ｂｓ，ＡＢ）、
４.９８および４.４８（ｂｓ，２ＯＨ）、４.７８
（ｄ，Ｊ−３.１，Ｈ(１)）、４.２−３.８５（ｍ，Ｃ
Ｈ2−アリル）、３.７５−３.０５（ｍ，７Ｈ）。
【００９５】実施例５ アリル２−デオキシ−４,６−Ｏ−イソプロピリデン−
２−（ベンジルオキシカルボニル）アミノ−α−Ｄ−グ
ルコピラノシド（８）： 上記の乾燥生成物（５ｇ）を
２,２′ジメトキシプロパン（５０ｍｌ）中に溶解させ
た。この撹拌されている溶液に、乾燥ｐ−トルエンスル
ホン酸（１００ｍｇ）を室温において加えた。トリエチ
ルアミン（２ｍｌ）を反応混合物に加え、そして溶媒を
減圧下で蒸発させた。残渣をＦＣ（ＳｉＯ2＝１５０
ｇ、５：１；ＣＨ2Ｃｌ2：１％ＴＥＡを含有しているア
セトン）にかけて、３.２ｇ（５７％）の８を生じた。
融点＝１０７−１０９℃。Ｒｆ＝０.５４（１：１：：
Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ）。
【００９６】1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，３００ＭＨ
ｚ）：１.４２および１.５０（２ｓ，６Ｈ，ＣＨ3）、
２.７５（ｂ，１Ｈ,ＯＨ）、３.５−４.２（ｍ，８
Ｈ）、４.８２（ｄ，Ｊ＝３.４，Ｈ−１）、５.１−５.
３（ｍ，５Ｈ，ＮＨ，ＣＨ2−ベンジル，ＣＨ2＝）、
５.７５−５.９０（ｍ，１Ｈ，ＣＨ＝）および７３５
（ｂｓ，５Ｈ，芳香族）。
【００９７】13Ｃ−ＮＭＲ：１５７（ｓ,Ｏ＝Ｃ−Ｏ−
ベンジル）、１３６.７５（ｓ，芳香族）、１３３.９８
（ｄ，ＣＨ＝）、１２９.０−１２８.８６（ｄ，芳香
族）、１１８.６（ｔ，ＣＨ2＝）、１００.５（ｓ，イ
ソプロ）、９７.９４（ｄ，Ｃ（１)）、７５.１および
７０.９６（ｄ）、６９.１（ｔ，ＣＨ2−Ｏ−ベンジ
ル）、６７.８３（ｔ，Ｏ−ＣＨ2−アリル）、６４.１
６（ｄ）、６２.８４（ｔ）、５９.３２（ｄ，Ｃ
(２)）、２９.６８および１９.７（ｑ，ＣＨ3）。
【００９８】実施例６ アリル２−デオキシ−２−（ベンジルオキシカルボニ
ル）アミノ−３−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノ
シド（１０）：８ （９.００ｇ，２３ミリモル）の乾燥
ピリジン（６０ｍｌ）中溶液に、無水酢酸（１５ｍｌ）
を室温において加えた。反応溶液を一夜撹拌した。溶媒
を３５℃において真空下で除去して、アリル２−デオキ
シ−２−(ベンジルオキシカルボニル)アミノ−３−Ｏ−
アセチル−４,６−Ｏ−イソプロピリデンα−Ｄ−グル
コピラノシド（９）を生成した。アセチル化された生成
物９（５ｇ）を９０％無水酢酸中で１０分間にわたり９
５℃に加熱した。溶媒を真空中で蒸発させた。生成物
（３.９１ｇ、８５％）はゴム状物質であった。
【００９９】Ｒｆ＝０.２（Ｈｅｘ：ＥｔＯＡｃ；１：
１）。
【０１００】1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3）：１.９（ｓ，
ＣＨ3）、２.５６（ｄ，ＯＨ）、３.６５−４.２（ｍ，
９Ｈ）、４.８６（ｄ，Ｊ＝３.６Ｈｚ，Ｈ−１）、４.
９５−５.３（ｍ，６Ｈ）、５.７５−５.９５（ｍ，１
Ｈ，ＣＨ＝）および７.３５（ｂｓ，芳香族）。
【０１０１】13Ｃ−ＮＭＲ：１７２.６７（ｓ，Ｏ＝Ｃ
−Ｏ−アセチル）、１５６.８３（ｓ，Ｏ＝Ｃ−Ｏ−ベ
ンジル）、１３６.８６（ｓ，芳香族）、１３３.９３
（ｄ，ＣＨ＝）、１２９.０−１２８.６４（ｄ，芳香
族）、１１８.６９（ｔ，ＣＨ2＝）、９７.２５（ｄ，
Ｃ(１)）、７４.６および７２.３９（ｄ）、６９.０４
（ｔ，ＣＨ2−Ｏ−ベンジル）、６８.８３（ｄ）、６
７.８３（ｔ，Ｏ−ＣＨ2−アリル）、６１.８９
（ｔ）、５４.３３（ｄ，Ｃ(２)）および２１.４０
（ｑ，ＣＨ3）。 実施例７ アリル６−Ｏ−［２−デオキシ−２−アセトアミド−
３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ
シル］−２−デオキシ−２−（ベンジルオキシカルボニ
ル）アミノ−３−Ｏ−アセチル−α−Ｄ−グルコピラノ
シド（１１）： 供与体５（０.３２ｇ、０.１０ミリモ
ル）、受容体１０（０.８ｇ、０.２０ミリモル）および
ｐ−ＴｓＯＨ（４０ｍｇ）の乾燥クロロホルム（２０ｍ
ｌ）中溶液をＮ2雰囲気下で２４時間にわたり還流し
た。冷却後に、溶液を１０％水性ＮａＯＣＨ3、水およ
び食塩水で洗浄した。溶媒を除去し、そして残渣をＦＣ
（２：１：：ＥｔＯＡｃ：Ｈｅｘ.）にかけて１１（０.
５ｇ）を得た。
【０１０２】Ｒｆ.＝０.３５（ＥｔＯＡｃ）。
【０１０３】1Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ3，３００Ｈｚ）：
１.９０、２.０、２.０５（ｓ，ＣＨ3）、３.４９
（ｄ，ＯＨ）、３.５５−４.２９（ｍ，９Ｈ）、４.８
（ｄ，Ｊ＝３.５４，Ｈ−１）、４.８９（ｄ，Ｊ＝８.
４２，Ｈ−１′）、４.９５−５.３５（ｍ，５Ｈ）、
５.７４−５.８９（ｍ，ＣＨ＝）、６.１（ｄ，ＮＨ）
および７.２５−７.３５（ｍ，芳香族）。
【０１０４】13Ｃ−ＮＭＲ：１７２.３５、１７１.９
４、１７１.４６、１７０.１（ｓ，Ｏ＝Ｃ−Ｏ−アセチ
ル）、１５６.５８（ｓ，Ｏ＝Ｃ−Ｏ−ベンジル）、１
３６.９１（ｓ，芳香族）、１３３.８３（ｄ，ＣＨ
＝）、１２９.１３、１２８.７８、１２８.５７（ｄ，
芳香族）、１１８.７２（ｄ，ＣＨ2＝）、１０３.０２
（ｄ，Ｃ（１′)）、１０１.６８（ｄ，Ｃ(１)）、７
４.４２、７２.４２、７２.７３、７２.５１、７１.４
３、６９.２８、６８.９６（ｄ）、６８.７９（ｔ，Ｃ
Ｈ2−Ｏ−ベンジルおよびＣＨ2−Ｏ−アリル）、６８.
６５（ｄ）、６７.４４、６２.６５（ｔ，ＣＨ2）、５
５.３８、５４.３１（ｄ，Ｃ(２)およびＣ(２′)）、２
３.７７および２１.３（ｑ，ＣＨ3）。
【０１０５】実施例８ プロピル６−Ｏ−［２−デオキシ−２−アセトアミド−
３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−β−Ｄ−グルコピラノ
シル］−２−デオキシ−２−アミノ−３−Ｏ−アセチル
−α−Ｄ−グルコピラノシド（１２）：１１ （０.３
ｇ）のエタノール（１６ｍｌ）およびシクロヘキセン
（６ｍｌ）中溶液に、水酸化パラジウムを加え、そして
生じた反応混合物を２時間にわたり還流した。触媒の濾
過後に、溶媒を蒸発させ、そして残渣をＦＣ（ＥｔＯＡ
ｃ）にかけて１２（１３０ｍｇ、６０％）を生じた。Ｒ
ｆ.＝０.５４（ＥｔＯＨ：ＭｅＣＮ：Ｈ2Ｏ：：８：
８：４）。融点、非晶質粉末。1Ｈ−ＮＭＲ：０.９４
（ｔ，ＣＨ3）、１.６（ｑ，ＣＨ2）、１.９、２.０お
よび２.１（ｓ，ＣＨ3Ｃ(Ｏ)）、３.２５−４.３
（ｍ）、４.７２−４.８５（ｍ）、４.８（ｄ,Ｊ＝８.
３，ｈ−１′）、４.９２（ｄ，Ｊ＝３.１２，Ｈ−
１）、５.０８（ｔ，Ｊ＝(.６，１Ｈ）、５.２４（ｔ，
Ｊ＝９.８５，１Ｈ）および５.９（ＮＨ）。
【０１０６】実施例９ プロピル６−Ｏ−［２−アセトアミド−２−デオキシ−
β−Ｄ−グルコピラノシル］−２−アミノ−２−デオキ
シ−α−Ｄ−グルコピラノシド（１３）： 二糖類１２
（５０ｍｇ）をメタノール（１０ｍｌ）中でアンベルラ
イトＩＲ−４００(ＯＨ-)（０.５ｇ）樹脂を用いて室温
で４時間撹拌することにより脱アセチル化した。樹脂を
濾過し、そして濾液を濃縮してプロピル６−Ｏ−［２−
アセトアミド−２−デオキシ−β−Ｄ−グルコピラノシ
ル］−２−アミノ−２−デオキシ−α−Ｄ−グルコピラ
ノシド（１３）（３０ｍｇ、８５％）を与えた。
【０１０７】Ｒｆ．融点、非晶質粉末。
【０１０８】1Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−Ｄ6）：０.８５
（ｔ，ＣＨ3）、１.５５（ｑ，ＣＨ2ＣＨ3）、１.８０
（ｓ，ＣＨ3Ｃ(Ｏ)−）。
【０１０９】実施例１０ Ｏ−ニトロ−３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−２−アジ
ド−ピラノース（１６）： 窒素雰囲気下で、微細粉末状
の乾燥された硝酸アンモニウム第二セリウム（６０ｇ）
およびナトリウムアジド（４ｇ）を三酢酸グルカール
（１５、１０ｇ）の乾燥アセトニトリル（２００ｍｌ）
中溶液に−２０℃において加えた。生じた懸濁液をこの
温度において７時間にわたり激しく撹拌した。次に混合
物をエーテル（３００ｍｌ）で希釈し、水、Ｎａ2ＣＯ3
溶液、水および食塩水で洗浄した。ＭｇＳＯ4上で乾燥
した後に、溶媒を除去して１６（１２ｇ）をゴム状物質
として与えた。１６を高真空ポンプしたで乾燥し、そし
てさらに精製せずに次の反応で使用した。Ｒｆ.＝０.７
（ヘキサン：酢酸エチル：：１：１）。1Ｈ−ＮＭＲ：
２.０−２.１５（ｓ，ＣＨ3ＣＯ）、４.０−４.３
（ｍ）、４.９０−５.５５（ｍ）、６.３３（ｄ，Ｊ＝
４.２）、６.２１（ｄ，Ｊ＝１.９）および５.６３
（ｄ，Ｊ＝８.９）。
【０１１０】実施例１１ ３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−２−アジド−ピラノー
ス（１７）： Ｏ−ニトロ−３,４,６−トリ−Ｏ−アセチ
ル−２−アジド−ピラノース（１６、１２ｇ、上記実験
から）のジオキサン（７０ｍｌ）中溶液に、亜硝酸ナト
リウム（１４ｇ）の水（１５ｍｌ）中溶液を加え、そし
て生じた混合物を１０時間にわたり８０℃に加熱した。
室温に冷却した後に、氷冷水を加えた。水相をエーテル
を用いて抽出し、そしてエーテル抽出物を一般的訪欧で
処理して、粗製生成物１７を与えた。粗製物１７をＦＣ
（フラッシュクロマトグラフィー）（ヘキサン：酢酸エ
チル：：１：１）にかけて３,４,６−トリ−Ｏ−アセチ
ル−２−アジド−ピラノース（１７、７.５ｇ、二段階
で６２％）を生成した。
【０１１１】実施例１２ アリル２−アジド−３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−ピ
ラノース（１８）：１７ （４.６ｇ）の乾燥ジクロロメ
タン中の撹拌されている溶液に、炭酸カリウム（３.８
ｇ、炎乾燥された）およびトリクロロアセトニトリル
（５.６ｍｌ）を乾燥窒素雰囲気下で加えた。室温で５
時間撹拌した。不溶性炭酸カリウムを濾別し、濾液を濃
縮し、そして高真空下で乾燥してトリクロロアセトアミ
デート（６.６ｇ）を与えた。このトリクロロアセトア
ミデートをアリルアルコール（４ｍｌ）を含有している
乾燥クロロホルム（５０ｍｌ）中に加えた。生じた溶液
に、トリメチルシリルトリフレート（０.１ｍｌ）を加
え、そして乾燥Ｎ2雰囲気下での撹拌を２時間続けた。
トリエチルアミン（３ｍｌ）を加え、生じた溶液を濃縮
し、そしてＦＣ（フラッシュクロマトグラフィー）（ジ
クロロメタン：アセトン：：９.５：０.５）にかけてア
リル２−アジド−３,４,６−トリ−Ｏ−アセチル−ピラ
ノース（１８、４.６ｇ、９０％）を与えた。
【０１１２】実施例１３ アリル２−アジド−ピラノース（１９）：１８ （４.６
ｇ）のメチルアルコール（３００ｍｌ）中溶液に、アン
ベルライトＩＲＡ−４０１（ＯＨ−、１００ｍｌ）を加
え、そして一夜撹拌した。樹脂の濾過後に、濾液を濃縮
して、アリル２−アジド−ピラノース（１９、２ｇ、６
５％）を生成した。
【０１１３】実施例１４ アリル２−アジド−４,６−Ｏ−イソプロピレデン−Ｄ
−グルコピラノシド（２０）： アリル２−アジド−ピラ
ノース（２ｇ）をジメトキシプロパン（５０ｍｌ）と共
に超音波を用いて均質化した。この溶液に触媒量のｐ−
ＴＳＡを加え、そして一夜撹拌した。反応混合物を酢酸
エチル中に加え、一般的な処理および濃縮後に、残渣を
ＦＣ（ヘキサン：酢酸エチル：：３：１、０.５％ＴＥ
Ａを含有している）にかけて、０.９ｇのアリル２−ア
ジド−４,６−Ｏ−イソプロピレデン−Ｄ−グルコピラ
ノシド（２０）を生成した。
【０１１４】Ｒｆ.＝０.３１（ヘキサン：酢酸エチ
ル：：３：１、０.５％ＴＥＡを含有している）。
【０１１５】１Ｈ−ＮＭＲ：１.４０および１.５０
（ｓ，ＣＨ3）、３.１０−４.２０（ｍ）、４.４（ｄ，
Ｊ＝８.０３，β−アノマーのＨ−１）、４.９０（ｄ，
Ｊ＝３.７４,α−アノマーのＨ−１）、５.２０、５.３
６（ｍ,ＣＨ２＝）および５.９（ｍ，ＣＨ＝）。
【０１１６】１３Ｃ−ＮＭＲ：１９.２および２９.０７
（ｑ，ＣＨ３）、９７.７０（ｄ，Ｃ(１)）、１００.０
６（ｄ，ＢのＣ(１)）、１０１.５５（ｓ，Ｃ−ＣＨ
３）、１１８.０２（ｔ，ＣＨ２＝）および１３３.３１
（ｄ，ＣＨ＝）。
【０１１７】実施例１５ アリル２−アジド−３−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルコピラ
ノシド（２２）： アリル２−アジド−４,６−Ｏ−イソ
プロピレデン−Ｄ−グルコピラノシド（２０、１３０ｍ
ｇ、０.５ミリモル）のＤＭＦ（５ｍｌ）中溶液をＮａ
Ｈ（２４ｍｇ、１ミリモル）および臭化ベンジル（１７
１ｍｇ、０.１２ｍｌ、１ミリモル）で処理した。撹拌
を３時間続け、この段階で薄層クロマトグラフィー（ｔ
ｌｃ）（ヘキサン：酢酸エチル：：１：１）は２１の完
全生成を示した。２１を含有しているこの反応混合物を
７Ｎ ＨＣｌで酸性化し、そして１時間撹拌した。エー
テルを用いる抽出、一般的処理およびＦＣ（ヘキサン：
酢酸エチル：：２：１）で、アリル２−アジド−３−Ｏ
−ベンジル−Ｄ−グルコピラノシド（６０ｍｇ、４０
％）を与えた。Ｒｆ.＝０.１７（ヘキサン：酢酸エチ
ル：：１：１）。
【０１１８】１Ｈ−ＮＭＲ：２.２２および２.８０
（ｂ,２ＯＨ）、３.２０−４.４０（ｍ）、４.７５およ
び４.９５（ＡＢ，Ｊ＝１１.２,ベンジル）、４.９２
（ｄ，Ｊ＝３.７５，α−のＨ−１）、５.２−５.４
（ｍ，ＣＨ２＝）および５.９２（ｍ，ＣＨ＝）。１３
Ｃ−ＮＭＲ：６２.６および６２.７５（ｔ，Ｃ(６)）、
６３.６３、６６.５１（ｄ）、６９.１８、７１.２４
（ｔ，アリルのＣＨ2）、７０.７８、７１.４１、７１.
９６（ｄ）、７５.７４（ｔ，ベンジル）、８０.６７、
８３.１５（ｄ）、９７.５３（ｄ，α−のＣ(１)）、１
０１.８１（ｄ,βのＣ(１)）、１１８.６３、１１８.５
３（ｄ，ＣＨ２＝）、１２８.７４、１２９.３１（ｄ，
芳香族）、１３３.７８（ｄ，ＣＨ＝）および１３８.６
（ｓ，芳香族）。
【０１１９】実施例１６ アリル２−デオキシ−２−アセトアミド−α−Ｄ−グル
コピラノシド（２４）： Ｎ−アセチルグルコサミン（２
３、１ｇ）の２％ＨＣｌを含有しているアリルアルコー
ル（１０ｍｌ）中懸濁液を１０分間にわたり１００℃に
加熱した。アリルアルコールを水流ポンプ下で蒸発さ
せ、そして残渣をＦＣ（ＥｔＯＡｃ：ＥｔＯＨ：：４：
１）にかけて、アリル２−デオキシ−２−アセトアミド
−α−Ｄ−グルコピラノシド（２４、０.９ｇ、７６
％）を与えた。Ｒｆ.＝０.３２（ＥｔＯＡｃ：ＥｔＯ
Ｈ：：４：１）。融点＝１８０−８２℃。1Ｈ−ＮＭＲ
（ＤＭＳＯ−Ｄ6）：１.８５（ｓ，ＣＨ3）、３.１０−
３.７０（ｍ，６Ｈ）、３.９および４.１（２ｄｄ，ア
リルのＣＨ2）、４.６８（ｄ，Ｊ＝３.０,Ｈ−１）、
５.１５および５.３０（２ｂｄ，ＣＨ2＝）、５.９
（ｍ，ＣＨ＝）および７.７４（ｄ，Ｊ＝７.７５，Ｎ
Ｈ）。
【０１２０】実施例１７ アリル２−デオキシ−２−アセトアミド−４,６−Ｏ−
イソプロピレデン−α−Ｄ−グルコピラノシド（２
５）： アリル２−デオキシ−２−アセトアミド−α−Ｄ
−グルコピラノシド（２４、１ｇ）をジメトキシプロパ
ン（１０ｍｌ）と共に超音波を用いて均質化した。この
溶液に触媒量のｐ−ＴＳＡを加え、そして一夜撹拌し
た。ＴＥＡ（３ｍｌ）を加え、そして溶媒を蒸発させ、
残渣をＦＣ（酢酸エチル）にかけて、アリル２−デオキ
シ−２−アセトアミド−４,６−Ｏ−イソプロピレデン
−α−Ｄ−グルコピラノシド（２５、１ｇ、８６.５
％）を与えた。Ｒｆ.＝０.５（エタノール：酢酸エチ
ル：：１：９）。１Ｈ−ＮＭＲ：１.４０および１.５０
（２ｓ，ＣＨ3）、１.９８（ｓ，ＣＨ3ＣＯ）、３.４４
（ｂｓ，ＯＨ）、３.５８−４.２０（ｍ）、４.８２
（ｄ，Ｊ＝３.８，Ｈ−１）、５.２２（ｄｄ，ＣＨ
2＝）、５.８５（ｍ，ＣＨ＝）および６.０７（ｄ，Ｊ
＝８.７，ＮＨ）。13Ｃ−ＮＭＲ：１９.７１および２
９.６９（ｑ，ＣＨ3）、２３.８８（ｑ，ＣＨ3ＣＯ）、
５４.６８（ｄ，Ｃ(２)）、６２.８２（ｔ，Ｃ(６)）、
６４.１５、７１.１４、７５.２９（ｄ）、６９.０２
（ｔ，アリルのＣＨ2）、９７.６５（ｄ，Ｃ(１)）、１
００.５（ｓ，Ｃ−ＣＨ3）、１１８.６９（ｔ，ＣＨ２
＝）、１３３.９９（ｄ，ＣＨ＝）および１７２.０８
（ｓ，ＣＨ 3ＣＯ）。
【０１２１】実施例１８ アリル−２−デオキシ−２−アセトアミド−３−Ｏ−ベ
ンジル−α−Ｄ−グルコピラノシド（２６）： 酸化バリ
ウム（６１３ｍｇ）、水酸化バリウム（１５８ｇ）およ
びアリル２−デオキシ−２−アセトアミド−４,６−Ｏ
−イソプロピレデン−α−Ｄ−グルコピラノシド（２
５、４７０ｍｇ）の乾燥ＤＭＦ（１０ｍｌ）中溶液に、
臭化ベンジルをゆっくり加えた。撹拌を３時間続け、そ
の時にｔｌｃは出発物質なしを示し、反応混合物を７Ｎ
ＨＣｌで酸性化しそして一夜撹拌した。一般的処理お
よびＦＣ（９：１、ＥｔＯＡｃ：ＥｔＯＨ）で、アリル
−２−デオキシ−２−アセトアミド−３−Ｏ−ベンジル
−α−Ｄ−グルコピラノシド（１４、２１０ｍｇ）を与
えた。Ｒｆ.＝０.４８（９：１、ＥｔＯＡｃ：ＥｔＯ
Ｈ）。１Ｈ−ＮＭＲ：１.９（ｓ，ＣＨ3ＣＯ）、２.３
５および２.９（２ｓ，ＯＨ）、３.５−４.３（ｍ）、
４.７（ベンジルのＡＢ）、４.８（ｄ，Ｊ＝３.７，Ｈ
−１）、５.２３（ｍ）および７.３（ｍ）。13Ｃ−ＮＭ
Ｒ：２４.０６（ｑ，ＣＨ3ＣＯ）、５２.６３（ｄ，Ｃ
(２)）、６２.８４（ｔ，Ｃ(６)）、６８.８３（ｔ，ア
リルのＣＨ２＝）、７１.３４および７２.１８（ｄ）、
７４.６１（ｔ，ベンジル）、８０.７３（ｄ）、９７.
５５（ｄ，Ｃ(１)）、１１８.４５（ｔ，ＣＨ2＝）、１
２８.６６および１２９.２５（ｄ）、１３４.１（ｄ，
ＣＨ＝）、１３８.９５（ｓ，芳香族）および１７０.６
（ｓ，ＣＨ 3ＣＯ）。
【０１２２】実施例１９ アリル２−デオキシ−２−アセトアミド−３,６−ジ−
Ｏ−ベンジル−α−グルコピラノシド（２７）： 上記の
１４に関して記されているのと同様な方法で、２７を２
６から製造した。７Ｎ ＨＣｌを用いる酸性化後に、反
応混合物を酢酸エチルで抽出し、そして酢酸エチルの一
般的処理で粗製生成物を与え、それはジ−およびトリ−
ベンジル誘導体類の混合物であった。この混合物から２
７がＦＣ（４：１、ＣＨ2Ｃｌ2：アセトン）により６０
％で単離された。
【０１２３】１Ｈ−ＮＭＲ：１.９（ｓ，ＣＨ3ＣＯ）、
２.７５（ｓ，ＯＨ）、３.５−４.３（ｍ）、４.５−
４.７８（ベンジルの２ＡＢ）、４.８２（ｄ，Ｊ＝３.
７２，Ｈ−１）、５.２（ｍ）、５.４（ｄ，Ｊ＝９.２
８、ＮＨ）、５.８５（ｍ）および７.３（ｍ、芳香
族）。13Ｃ−ＮＭＲ：２４.０６（ｑ，ＣＨ3ＣＯ）、５
２.４２（ｄ，Ｃ(２)）、６８.８２（ｔ，Ｃ(６)）、７
０.７８（２ｔ，ベンジル）、９７.５１（ｄ，Ｃ
(１)）、１１８.３４（ｔ，ＣＨ２＝）、１２８.２８、
１２８.４、１２８.６６、１２９.１、１２９.１８およ
び１３０.５９（ｄ）、１３４.２２（ｄ，ＣＨ＝）、１
３８.３９および１３８.４８（ｓ，芳香族）並びに１７
０.４４（ｓ，ＣＨ 3ＣＯ）。
【０１２４】実施例２０ アリル２−デオキシ−２−アセトアミド−３,６−ジ−
Ｏ−ベンジル−α−グルコピラノシド−４−Ｏ−ジフェ
ニルホスフェート（２８）：２７ （２.７５ｇ）、ジメ
チルアミノピリジン（３ｇ）およびピリジンの乾燥クロ
ホルム（５０ｍｌ）中溶液に、ジフェニルホスホロクロ
リデート（５ｍｌ）をゆっくり加えた。撹拌を室温にお
いて２時間続けた。反応混合物をクロロホルムで希釈
し、そして一般的処理およびＦＣ（９：１、塩化メチレ
ン：アセトン）で２８を９５％の収率で与えた。Ｒｆ.
０.３７（ジクロロメタン：アセトン：：９：１混合
物）。1Ｈ−ＮＭＲ：１.８（ｓ，ＣＨ3）、３.６６（ｄ
ｄ）、４.０５−３.７６（ｍ）、４.０５−４.３４（２
ＡＢ）、４.８５−４.７２（ｍ）、４.８８（ｄ，Ｊ＝
３.９）、５.６−５.０（ｍ）、６.８５（ｍ，ＣＨ＝）
および７.６０−７.０（ｍ，芳香族）。13Ｃ−ＮＭＲ：
２３.２６（ｑ，ＣＨ3ＣＯ）、５１.７８（ｄ，Ｃ
(２)）、６８.５１、７０.２５、７３.３７、７３.５
４、７６.９３、７８.１１、９６.５４（ｄ，Ｃ
(１)）、１１７.８３（ｔ，ＣＨ2＝）、１２０.１４−
１２８.６９（芳香族）、１３３.４６（ｄ，ＣＨ＝）、
１３８.０５および１３８.１５（ｓ，芳香族）並びに１
６９.６６（ｓ，ＣＨ3ＣＯ）。
【０１２５】実施例２１ ２−デオキシ−２−アセトアミド−３,６−ジ−Ｏ−ベ
ンジル−α−グルコピラノシド−４−Ｏ−ジフェニルホ
スフェート（２９）： 化合物２８（１.６ｇ）および１,
５−シクロオクタジエンビス（メチルジフェニルホスフ
ィン）−イリジウムヘキサフルオロホスフェート（０.
２ｇ）の乾燥している酸素を含まないテトラヒドロフラ
ン（５０ｍｌ）中溶液を水素圧力下で、溶液の橙色が薄
黄色に変わるまで撹拌した。次に水素を乾燥窒素気体で
置換し、そして撹拌を５０℃において３時間続けた。反
応溶液の冷却後に、ヨウ素（０.５ｇ）および水（１０
ｍｌ）を加え、そして室温において一夜撹拌した。反応
混合物を酢酸エチル（１５０ｍｌ）で希釈し、酢酸エチ
ル溶液を亜硫酸ナトリウム水溶液（５％）、水および食
塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ4上で乾燥し、そして濃縮し
た。残渣をＦＣ（ジクロロメタン：アセトン：：９：
１）、化合物２９（０.７５ｇ、５０％）を生成した。
Ｒｆ.０.１２（ジクロロメタン：アセトン：：９：１混
合物）。13Ｃ−ＮＭＲ：２３.１７（ｑ）、５２.６７、
６８.８、６９.５１、６９.６１、７３.３８、７３.５
３、７６.８、７７.２５、７７.３８、７７.４９、９
１.０（ｄ，Ｃ(１)）、１３０−１２０.１（ｄ，芳香
族）、１３７.８７、１３８.０３、１５０.４７、１５
０.５１および１７０.４９（全てｓ）。 実施例２２ ２−デオキシ−２−アセトアミド−３,６−ジ−Ｏ−ベ
ンジル−グルコピラノシル−トリクロロアセトイミデー
ト−４−Ｏ−ジフェニルホスフェート（３０）： 化合物
２９（０.５３ｇ）、炭酸カリウム（３ｇ、炎乾燥され
た）およびトリクロロアセトニトリル（３ｍｌ）の乾燥
クロロホルム（アルコールを含まない）中混合物を室温
において一夜撹拌した。炭酸カリウムを濾別した。濾液
を濃縮し、残渣（Ｒｆ.０.６５、ジクロロメタン：アセ
トン：：４：１）を高真空下で乾燥し、そしてそのまま
で次の段階で使用した。
【０１２６】実施例２３ アリル６−Ｏ−［２−デオキシ−２−アセトアミド−
３,６−ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシ
ル］−２−デオキシ−２−アジド−３−Ｏ−ベンジル−
Ｄ−グルコピラノシド−４′−Ｏ−ジフェニルホスフェ
ート（３１）： 上記のトリクロロアセトイミデート３０
およびアリル−２−アジド−３−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グ
ルコピラノシド（０.５３ｇ）の乾燥クロロホルム中溶
液に、分子ふるい（１０ｇ、粉末状、炎乾燥された）を
加えた。溶液をＮ2雰囲気下で１時間撹拌した。この乾
燥反応混合物に、トリメチルシリルトリフレート（０.
２ｍｌ）をゆっくり加え、そして撹拌を室温において６
時間続けた。反応混合物をトリエチルアミン（３ｍｌ）
を含有している酢酸エチル（１００ｍｌ）で希釈した。
分子ふるいを濾別し、そして濾液を濃縮した。残渣のＦ
Ｃ（ジクロロメタン：アセトン：：４：１）で生成物３
１（０.１５ｇ）、Ｒｆ.０.４９（ジクロロメタン：ア
セトン：：４：１）、を与えた。ＩＲ.（ヌジュー
ル）：２１１０ｃｍ-1（Ｎ3）。1Ｈ−ＮＭＲ：１.７５
（Ｓ，ＣＨ3）、４.９５−３.２０（ｍ）、５.４０−
５.０４（ｍ）、５.８５（ｍ）および７.５０−７.００
（ｍ,芳香族）。13Ｃ−ＮＭＲ：２３.３５（ｑ，Ｃ
Ｈ3）、８２.３２−５０.７１（ｄ，環炭素類）、９６.
８９（ｄ,α−アノマー性Ｃ(１)）、１００.４５、１０
０.５８および１００.９７（ｄ,β−アノマー性Ｃ
(１′)およびＣ(１′)）、１１７.９５（ｔ，ＣＨ
2＝）、１２９.７７−１２０.２４（ｄ，芳香族）、１
３３.２６（ｄ，ＣＨ＝）、１３７.９６、１３８.２
９、１５０.４１および１７１.８９（全てｓ）。
【０１２７】実施例２４ プロピル６−Ｏ−［２−デオキシ−２−アセトアミド−
β−Ｄ−グルコピラノシル］−２−デオキシ−２−アミ
ノ−Ｄ−グルコピラノシド−４′−Ｏ−ホスフェート
（３２）： 化合物３１（６５ｍｇ）のメタノール（１５
ｍｌ）中溶液を１０％Ｐｄ／Ｃ（４０ｍｇ）上で８バー
ルの圧力下で２時間にわたり水素化した。反応混合物に
対する酸化白金（２０ｍｇ）の添加後に、水素化を８バ
ールにおいてさらに２時間続けた。触媒を濾別し、そし
て濾液を濃縮して、化合物３２（３０ｍｇ）を与えた。
【０１２８】実施例２５ ６−Ｏ−［２−デオキシ−２−アセトアミド−３,６−
ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２−
デオキシ−２−アジド−３−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルコ
ピラノース−４′−Ｏ−ジフェニルホスフェート（３
３）： この化合物３３は、２−デオキシ−２−アセトア
ミド−３,６−ジ−Ｏ−ベンジル−α−グルコピラノシ
ド−４−Ｏ−ジフェニルホスフェート（２９）の製造に
関してすでに報告されているのと同様な方法で、アリル
６−Ｏ−［２−デオキシ−２−アセトアミド−３,６−
ジ−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２−
デオキシ−２−アジド−３−Ｏ−ベンジル−Ｄ−グルコ
ピラノシド−４′−Ｏ−ジフェニルホスフェート（３
１）からアリル保護基の保護基除去により、製造され
た。
【０１２９】実施例２６ ２−デオキシ−６−［２−デオキシ−２−アセトアミド
−β−Ｄ−グルコピラノシル］−２−アミノ−α−Ｄ−
グルコピラノース１,４′−ビス（ホスフェート）（３
５）： 化合物３３（８０ｍｇ）を乾燥ＴＨＦ（２０ｍ
ｌ）中に溶解させ、そして窒素雰囲気下で−７０℃に冷
却した。溶液をヘキサン（０.１ｍｌ）中１.６Ｍブチル
リチウムで、そして次にジベンジルホスホロクロリデー
ト（５０ｍｇ）で処理した。混合物を−７０℃において
５分間撹拌し、そして１０％パラジウム／炭素（１００
ｍｇ）触媒をそれに加えた。混合物を６ｋｇｃｍ-1で１
７時間にわたり水素化した。１７時間後に、酸化白金
（１００ｍｇ）を加え、そして水素化を６ｋｇｃｍ-1で
さらに２時間続けた。触媒を濾別し、濾液を水性アンモ
ニアで中和し、そして濃縮して、３５ｍｇの固体を生成
した。
【０１３０】参考文献：ベルガマン（Ｂｅｒｇａｍａｎ
ｎ）Ｍ．およびゼルヴァス（Ｚｅｒｖａｓ）Ｌ．、６
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ッシュ（Ｐａｒｒｉｓｈ）Ｆ．Ｗ．およびロング（Ｌｏ
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リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．）、３、４５
３（１９６７）。
【０１３３】グルンドラー（Ｇｒｕｎｄｌｅｒ）Ｇ．お
よびシュミット（Ｓｃｈｍｉｄｔ）Ｒ．Ｒ.、リービッ
ヒス・アナーレン・デル・ヘミイ（Ｌｉｅｂｉｇｓ Ａ
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【０１３４】イモト（Ｉｍｏｔｏ）Ｍ．他、日本化学会
報（Ｂｕｌｌ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．Ｊｐｎ．）、６０、
２２０５（１９８７）。
【０１３５】ルーバート（Ｌｅｗｂａｒｔ）Ｍ．Ｌ．お
よびシュナイダー（Ｓｃｈｎｅｉｄｅｒ）Ｊ．Ｊ．、ザ
・ジャーナル・オブ・ザ・オーガニック・ケミストリイ
（Ｊ．Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ．）、３４、３５０５（１０
６９）。
【０１３６】シュミット（Ｓｃｈｍｉｄｔ）Ｒ．Ｒ．お
よびグルンドラー（Ｇｒｕｎｄｌｅｒ）Ｇ．、アンゲヴ
ァンドテ・ヘミイ（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．）、９４、
７９０（１９８２）。
【０１３７】シュミット（Ｓｃｈｍｉｄｔ）Ｒ．Ｒ．、
アンゲヴァンドテ・ヘミイ・インターナショナル・エデ
ィッション（Ａｎｇｅｗ．Ｃｈｅｍ．Ｉｎｔ．Ｅ
ｄ．）、２５、２１２（１９８６）。
【０１３８】スリヴァトサヴァ（Ｓｒｉｖａｔｓａｖ
ａ）Ｖ．Ｋ.，ジュニア（Ｊｒ．）、カーボハイドレー
ト・リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．）、１０
３、２８７−２９２（１９８２）。
【０１３９】スガワラフ（Ｓｕｇａｗａｒｗ）、タミオ
（Ｔａｍｉｏ）他、ジュニア（Ｊｒ．）、カーボハイド
レート・リサーチ（Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．）、
１９４、１２５−１３８（１９８９）。
【０１４０】ウェバー（Ｗｅｂｅｒ）Ｈ．、コラナ（Ｋ
ｈｏｒａｎａ）Ｈ．Ｇ.、ジャーナル・オブ・モレキュ
ラー・バイオロジー（Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．）、７
２、２１９（１９７２）。
【０１４１】本発明の主なる特徴および態様は以下のと
おりである。
【０１４２】１．敗血症性ショックの処置のための式：
【０１４３】
【化１７】
【０１４４】［式中、Ｐ1は水素またはホスフェートで
あり、Ｒ2はアルキル（Ｃ1−Ｃ4）であり、Ｐ2は水素、
プロピル、アリルまたはホスフェートであり、ｎは１−
３０の整数であり、そしてＱは担体蛋白質またはペプチ
ドである］の免疫原性複合体。
【０１４５】２．担体蛋白質またはペプチドがＣＲＭ
197、ＣＲＭ197から誘導されたペプチド、ジフテリアト
キソイド、破傷風トキソイドおよびジフテリアまたは破
傷風トキソイドから誘導されたペプチドである上記１の
免疫原性複合体。
【０１４６】３．式：
【０１４７】
【化１８】
【０１４８】［式中、Ｒ1は水素またはアシルであり、
Ｒ2は（Ｃ1−Ｃ4）アルキルであり、Ｒ3は水素またはＣ
Ｈ(ＣＨ2)4ＣＯＯＸであり、ここでＸは式：
【０１４９】
【化１９】
【０１５０】の部分であり、Ｐ1は水素またはホスフェ
ートであり、そしてＰ2は水素、プロピル、アリルまた
はホスフェートである］の化合物。
【０１５１】４．（ｉ）式：
【０１５２】
【化２０】
【０１５３】［式中、Ｒ1は水素またはアシルであり、
Ｒ2はアルキル(Ｃ1−Ｃ4)であり、Ｐ1は水素またはホス
フェートであり、そしてＰ2は水素、プロピル、アリル
またはホスフェートである］の化合物を、一方が該化合
物の第一級アミンと反応することができそして他方が担
体蛋白質と反応することができる２個の官能基を含む分
子と反応させ、そして（ｉｉ）上記（ｉ）の生成物を該
担体蛋白質と複合体が生ずるように反応させることから
なる免疫原性複合体の製造方法。
【０１５４】５．段階（ｉ）の２個の官能基を含む分子
がジエステルである上記４の方法。 ６．段階（ｉ）の２個の官能基を含む分子がアジピン酸
のジエステルまたは琥珀酸のジエステルである上記４の
方法。
【０１５５】７．（ｉ）式：
【０１５６】
【化２１】
【０１５７】［式中、Ｒ1は水素またはアシルであり、
Ｒ2はアルキル(Ｃ1−Ｃ4)であり、Ｐ1は水素またはホス
フェートであり、そしてＰ2は水素、プロピル、アリル
またはホスフェートである］の化合物を、一方が活性化
された二糖類の末端基と反応することができそして他方
が該担体蛋白質と反応することができる２個の官能基を
含む分子と反応させることにより、活性化されたＤ−グ
ルコサミン二糖類を製造し、そして（ii）上記（ｉ）の
活性化されたＤ−グルコサミン二糖類生成物を該担体蛋
白質と複合体が生ずるように反応させる段階からなる方
法により製造されたＤ−グルコサミン二糖類と担体蛋白
質の間の共有複合体。
【０１５８】８．上記１の共有複合体を含有する敗血症
性ショックの予防のためのワクチン。
【０１５９】９．上記４に従い製造された共有複合体を
含有する敗血症性ショックの予防のためのワクチン。
【０１６０】１０．式：
【０１６１】
【化２２】
【０１６２】［式中、Ｂｎはベンジルであり、Ｐ3はホ
スフェートまたはジフェニルホスフェートであり、Ｐ4
はアリルまたはプロピルまたは水素またはジベンジルホ
スフェートであり、Ａｃはアシルである］の化合物。

Claims (7)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 敗血症性ショックの処置のための、式： 【化１】 ［式中、 Ｐ1は水素またはホスフェートであり、 Ｒ2はアルキル（Ｃ1−Ｃ4）であり、 Ｐ2は水素、プロピル、アリルまたはホスフェートであ
    り、 ｎは１−３０の整数であり、そしてＱは担体蛋白質また
    はペプチドである］の免疫原性複合体。
  2. 【請求項２】 式： 【化２】 ［式中、 Ｒ1は水素またはアシルであり、 Ｒ2は（Ｃ1−Ｃ4）アルキルであり、 Ｒ3は水素またはＣＨ（ＣＨ2）4ＣＯＯＸであり、ここ
    でＸは式： 【化３】 の部分であり、 Ｐ1は水素またはホスフェートであり、そしてＰ2は水
    素、プロピル、アリルまたはホスフェートである］の化
    合物。
  3. 【請求項３】 （ｉ）式： 【化４】 ［式中、 Ｒ1は水素またはアシルであり、 Ｒ2はアルキル（Ｃ1−Ｃ4）であり、 Ｐ1は水素またはホスフェートであり、そしてＰ2は水
    素、プロピル、アリルまたはホスフェートである］の化
    合物を、一方が該化合物の第一級アミンと反応すること
    ができそして他方が担体蛋白質と反応することができる
    ２個の官能基を含む分子と反応させ、そして（ｉｉ）上
    記（ｉ）の生成物を該担体蛋白質と複合体が生ずるよう
    に反応させることを特徴とする、免疫原性複合体の製造
    方法。
  4. 【請求項４】 （ｉ）式： 【化５】 ［式中、 Ｒ1は水素またはアシルであり、 Ｒ2はアルキル（Ｃ1−Ｃ4）であり、 Ｐ1は水素またはホスフェートであり、そしてＰ2は水
    素、プロピル、アリルまたはホスフェートである］の化
    合物を、一方が活性化された二糖類の末端基と反応する
    ことができそして他方が該担体蛋白質と反応することが
    できる２個の官能基を含む分子と反応させることによ
    り、活性化されたＤ−グルコサミン二糖類を製造し、そ
    して（ｉｉ）上記（ｉ）の活性化されたＤ−グルコサミ
    ン二糖類生成物を該担体蛋白質複合体が生ずるように反
    応させる段階からなる方法により製造された、Ｄ−グル
    コサミン二糖類と担体蛋白質の間の共有複合体。
  5. 【請求項５】 請求項１に記載の共有複合体を含有する
    ことを特徴とする敗血症性ショックの予防のためのワク
    チン。
  6. 【請求項６】 請求項４に従い製造された共有複合体を
    含有することを特徴とする敗血症性ショックの予防のた
    めのワクチン。
  7. 【請求項７】 式： 【化６】 ［式中、 Ｂｎはベンジルであり、 Ｐ3はホスフェートまたはジフェニルホスフェートであ
    り、 Ｐ4はアリルまたはプロピルまたは水素またはジベンジ
    ルホスフェートであり、 Ａｃはアシルである］の化合物。
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