JPH06273409A - 液体試料のイオン強度又は比重測定用組成物及び該組成物を用いた試験片 - Google Patents

液体試料のイオン強度又は比重測定用組成物及び該組成物を用いた試験片

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JPH06273409A
JPH06273409A JP8254993A JP8254993A JPH06273409A JP H06273409 A JPH06273409 A JP H06273409A JP 8254993 A JP8254993 A JP 8254993A JP 8254993 A JP8254993 A JP 8254993A JP H06273409 A JPH06273409 A JP H06273409A
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Abstract

(57)【要約】 (修正有) 【目的】 液体試料のイオン強度又は比重を簡単に且つ
正確に測定できる組成物及び該組成物を用いた試験片を
提供する。 【構成】 イオン会合反応の塩阻害現象を利用して試料
中のイオン強度又は比重を測定するための測定用組成物
中にポリエチレングリコール等のオキシエチレン基を有
する物質を含ませた組成物、及びこの組成物を含浸させ
た後乾燥して所定の大きさに切断した濾紙からなる試験
紙をプラスチック片に貼付した試験片に関する。 【効果】 試料のpHや温度等に影響されず、低比重域
から高比重域まで、簡便迅速且つ正確に、液体試料のイ
オン強度又は比重を測定することができる。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は液体試料のイオン強度又
は比重の測定用組成物及び該組成物を用いた試験片に関
するものである。
【0002】液体試料の比重測定は広範囲な技術分野で
行われているが、特に尿の比重を測定することは臨床検
査の分野において臨床的意義の高い重要な項目の一つで
あり、腎臓病の診断等に利用されている。健常人の尿比
重は通常1.005〜1.030と幅広く変動し、24
時間尿で1.015前後の値となる。尿比重の測定方法
には液体比重計、尿比重計、ピクノメーター、屈折率
計、浸透圧計等を用いる物理的測定方法がある。又特開
昭59−120843号公報、特開昭59−11215
1号公報には多孔性樹脂材や複数個のビーズからなる比
重測定用検査紙・測定片を用いる測定方法が開示されて
いる。しかし、これらの方法は、器具が高価であった
り、操作が複雑でかつ測定に時間が掛かったり、測定片
の構造が複雑になる等の問題があった。
【0003】一方、臨床検査の分野では、体液例えば尿
を試料とした各種成分の測定において安価でかつ測定操
作を簡単迅速に行うために、試料中の各種成分と試験片
中の試薬成分との反応により生じる試験片の色変化を目
視/比色法により分析する測定方法が迅速な測定方法と
して使用されている。この方法は色変化を目視により確
認でき、またカラーアナライザー等の簡単な器具により
測定できるため広く利用されている。
【0004】液体試料のイオン強度と比重の関係は特公
昭62−12858号に詳しいので省略するが、特に尿
においてはイオン強度と比重は良好に相関し、比例関係
にあることが知られている。
【0005】そして、近年、試験片を用いた比色分析に
より液体試料のイオン強度又は比重を測定する方法が種
々提案されている。例えば特公昭60−46374号公
報ではマイクロカプセルの内外の浸透圧勾配を利用して
いるが、温度に影響され易く判定に難があり、また製造
が困難である。特開昭62−95462号公報では膨潤
性樹脂の吸水量の変化を利用しているが、温度の影響を
受け易くまた均一なもの製造することが困難であった。
特公昭62−12858号公報では弱電解質ポリマーの
イオン交換作用を、特開昭59−160739号公報で
は第4アンモニウム塩高分子電解質のイオン交換作用
を、特開平2−66451号公報では錯体形成剤のイオ
ン交換作用を、それぞれ利用しているが、それぞれが弱
電解質であるためポリマー等の電荷がpHで変り、尿p
Hの影響を受け易い。特に高度に緩衝されたアルカリ尿
ではpHの補正が必要となる等それぞれ実用的ではなか
った。
【0006】
【発明が解決しようとする課題】前記公報に開示された
従来の液体試料のイオン強度又は比重の比色分析的測定
方法では電解質ポリマー、錯体形成剤、pH緩衝剤、p
H指示薬、高吸収性樹脂、マイクロカプセル等を用いた
試験片を使用している。しかしながら、これらの従来の
比色分析的測定方法によると例えば液体試料のpHや温
度、測定時間等の影響を受け易く、正確な測定が困難で
あった。また、従来の比色分析的測定方法に使用する試
験片は一般に製造が難しいものが多く、実用的なもので
はなかった。
【0007】そこで、本願出願人は、陰イオン型イオン
会合性試薬と陽イオン型イオン会合性試薬(色素)のイ
オン会合反応に対する塩阻害現象を利用して、より簡便
で液体試料のpHや温度、測定時間等の影響のない試験
片を製造できることを見いだした(特開平4−3150
49号公報)。しかし、この方法では高比重域において
色差が小さくなる傾向が見られ、特に比重1.025以
上の高比重域の尿試料の測定に難があった。
【0008】
【課題を解決するための手段】本発明は前記従来技術の
問題点を解決するためのものである。本発明の目的は液
体試料のpHや温度等の特性に影響されず、低比重域か
ら高比重域まで、簡便迅速且つ正確に精度良く、液体試
料のイオン強度又は比重を測定することができる組成
物、及び該組成物を用いて容易に製造することができる
試験片を提供することである。
【0009】すなわち本発明は、陰イオン型イオン会合
性試薬及び陽イオン型イオン会合性試薬とからなる液体
試料のイオン強度又は比重測定用組成物において、オキ
シエチレン基を有する物質を含むことを特徴とする液体
試料のイオン強度又は比重測定用組成物及び該組成物が
吸収性担体に含浸されてなることを特徴とする液体試料
のイオン強度又は比重測定用試験片に関するものであ
る。
【0010】本発明の組成物中に含まれる陰イオン型イ
オン会合性試薬は、スルホン酸基、硫酸エステル基もし
くはリン酸エステル基を有するポリマー又は鎖状化合物
であり、例えばポリマーとしてはデキストラン硫酸ナト
リウム、ヘパリンナトリウム、コンドロイチン硫酸ナト
リウム、硫酸セルロースナトリウム及び核酸等が挙げら
れ、鎖状化合物としてはドデシル硫酸ナトリウム、ドデ
シルベンゼンスルホン酸ナトリウム等が挙げられる。こ
れらのポリマー又は鎖状化合物は強電解質であるため、
広いpH範囲に渡って溶液中で常に陰イオンの状態で存
在することができる。
【0011】本発明の組成物中に含まれる陽イオン型イ
オン会合性試薬は、pH4−9(通常の尿が示すpH範
囲)の範囲では変色しない塩基性色素であり、例えば、
チアジン色素、オキサジン色素、アジン色素、トリフェ
ニルメタン色素、ジフェニルメタン色素、アゾ色素等が
挙げられる。特にその中でも、好ましいチアジン色素と
してはメチレンブルーが、好ましいオキサジン色素とし
てはブリリアントクレシルブルー及びナイルブルーが、
好ましいアジン色素としてはサフラニン0が、好ましい
トリフェニルメタン色素としてはクリスタルバイオレッ
トが、好ましいジフェニルメタン色素としてはオーラミ
ンが、好ましいアゾ色素としてはヤーヌスレッドBが挙
げられる。
【0012】本発明において、陰イオン型イオン会合性
試薬の濃度は0.001〜10%が適当であり、特に
0.005〜5%が好ましい。陽イオン型イオン会合性
試薬の濃度は0.0001〜5%が適当であり、特に
0.001〜1%が好ましい。両試薬の混合比率は、両
試薬の種類や測定すべき被検液の種類に応じて適宜選択
する。(%は特に規定しない限り重量/容量%をあらわ
す)。
【0013】pH緩衝剤は、液体試料が通常の尿の場合
は不要であるが、特殊な試料のときは必要に応じてpH
緩衝域がpH5−10の範囲となるように慣用のpH緩
衝剤を所定量添加して構わない。pH緩衝剤としては例
えばリン酸塩、硝酸塩、炭酸塩、クエン酸塩、ジエチル
マロン酸塩、アミノアルキルスルホン酸塩誘導体等の慣
用のものが挙げられる。
【0014】オキシエチレン基を有する物質としては、
ポリエチレングリコール、クラウンエーテル、及びオキ
シエチレン基を有する非イオン性界面活性剤が挙げられ
る。ポリエチレングリコールとしては分子量100から
400万のものが好ましく、その中でも分子量3000
から50万のものが特に好ましい。
【0015】クラウンエーテルの種類については「クラ
ウンエーテルとクリプタンドの化学」(R.M.IZA
TT, J.J.CHRISTENSEN共編,庄野利
行他訳,(株)化学同人,1979年発行)の62ペー
ジから107ページに詳しく載っており、その中でも本
発明に好適なクラウンエーテルとしては18−クラウン
−6−エーテル、15−クラウン−5−エーテル、12
−クラウン−4−エーテルが挙げられる。
【0016】オキシエチレン基を有する非イオン性界面
活性剤の種類は問わず、現在、トリトン、ツウィーン、
ブリッジ等の商品名で市販されているもので構わない
が、特に水溶性のよいものが、本発明には好ましく使用
できる。
【0017】更にオキシエチレン基を有する物質は単独
で用いても、また複数の組み合わせで用いても構わな
い。
【0018】オキシエチレン基を有する物質の添加量は
陰イオン型イオン会合性試薬と陽イオン型イオン会合性
色素の種類や組み合わせ、吸収性担体の吸水量にあわせ
て適宜選択するが、通常は0.01%〜10%程度の濃
度範囲が好ましい。
【0019】本発明の組成物は、吸収性担体に含浸させ
て所定の試験片とすると使用上都合がよい。吸収性担体
としては例えば紙、綿、木片、不織布、粉末、親水性ポ
リマー等が挙げられ、特に濾紙を用いるのが有利であ
る。
【0020】吸収性担体は、それ自体を試験片として使
用することができるし、また、適当な支持体例えばポリ
スチレン、ポリ塩化ビニル、ポリエステル等のプラスチ
ックシート上に適する大きさ及び形状のものを貼付して
試験片として使用することもできる。更に、親水性ポリ
マー例えば澱粉やポリビニルアルコールを吸収性担体兼
接着剤として用いて、これと混合した本発明の組成物を
前記プラスチックシート等の支持体上に塗布した後乾燥
し固着させて試験片を製造してもよい。
【0021】前記支持体には、測定値の判別を容易にす
るために所望により色彩、記号、文字、図形、模様等を
付与してもよい。
【0022】
【作用】
I) 測定原理 陰イオン型イオン会合性試薬と陽イオン型イオン会合性
試薬(色素)とのイオン会合に塩類が影響を与えること
を利用して、液体試料中の陽イオン濃度を測定し、イオ
ン強度又は比重を二次的に測定する。
【0023】II)測定原理の説明 イオン会合とは配位結合によらない陰イオンと陽イオン
との結合であり(ぶんせき,1989,1,p61−7
2)、イオン会合による色素の色調の変化はメタクロマ
ジー(変色反応)と呼ばれる(ぶんせき,1990,
3,p82−86)。陽イオン型イオン会合性試薬(色
素)は陰イオン型イオン会合性試薬とイオン会合するこ
とにより電子状態が変化し、それに伴い色調が変化す
る。
【0024】メタクロマジー現象を起こす代表的な例
は、コロイド滴定における陰イオン型イオン会合性試薬
のポリビニル硫酸カリウム(PVSK)と、陽イオン型
イオン会合性試薬のトルイジンブルー(TB)との組合
せである。TBはPVSKと反応し青から赤紫色に変色
する。しかし、この現象は糖やグリセリンには影響され
ないが塩類によって著しく影響される(新実験化学講座
9,分析化学〔II〕(1977),p557−56
0,特殊試薬による分析)。
【0025】本願出願人は、この点に着目し、メタクロ
マジーでの色調の変化を利用して、液体試料の陽イオン
濃度を測定することにより、イオン強度又は比重を二次
的に測定することができることを見いだし、先に出願し
た(特開平4−315049号)。
【0026】前述のようにメタクロマジーでの色素の色
調変化は水性溶液のpHの変化によるものではなく、試
薬の電子状態の変化によるものである。そのため、先願
(特開平4−315049号)や本発明の組成物を用い
る液体試料のイオン強度又は比重測定方法はpHの影響
をほとんど受けない。そのため緩衝剤の添加やpH補正
は通常の尿(pH4−9)ではまったく不要である。
【0027】しかしながら、先願(特開平4−3150
49号)の組成物である陰イオン型イオン会合性試薬と
陽イオン型イオン会合性試薬のみでは高比重域での色調
の変化に難があり、判定が不明瞭であった。
【0028】そこで本発明においてはオキシエチレン基
を有する物質を添加することによって、高比重域での色
調変化を改良し、色調がより明瞭になり、判定が明確且
つ容易となったのである。
【0029】更に、全体の変色域が広がるとともに比重
判定を0.005刻みで区切った場合、比重1.020
以上の各比重間の色差が拡大し、機械判定、目視判定と
もより明確にできるようになり比重1.030以上の試
料でも測定可能となる。さらに、それに伴い、精度や正
確度も向上するものである。
【0030】本発明のオキシエチレン基を有する物質の
正確な作用機序は不明であるが、オキシエチレン基を有
する物質は、陽イオン型イオン会合性色素の溶解度を増
加させ、組成物中の反応に関与する色素量を増加させる
ため色素の変色域を拡大するものと考えられる。
【0031】また、実施例には載せなかったが、このオ
キシエチレン基を有する物質と陽イオン型イオン会合性
色素だけでは変色反応(メタクロマジー)は起こらない
ため、オキシエチレン基を有する物質はイオン会合に関
与していないことが分かる。
【0032】
【実施例】以下の実施例により、本願発明をさらに詳細
に説明する。なお、本実施例で使用した試薬はクラウン
エーテルは関東化学より、その他の試薬は和光純薬より
購入したものを使用した。尿試料はランダム尿又はプー
ル尿を使用し、使用に先立ち屈折計で比重を、又必要に
応じてpHメーターでpHを測定した。また比重=1.
000の試料は精製水を使用した。
【0033】実施例1:本発明の組成物の製造 精製水に各成分を溶解して、下記組成の本発明の添加物
を含む組成物A〜Eを得た。また、同時に対照としてオ
キシエチレン基を有する物質を含まない従来の組成物F
も製造した(表1)。
【0034】
【表1】
【0035】実施例2:本発明の試験片の製造 組成物Aを濾紙(凸版商事製、51A)に含浸させた後
乾燥して、5×5mmの大きさに切断し試験紙とした。
試験紙を5×40mmの大きさのプラスチック片に貼
り、図1に外観を示す本発明の試験片Aを得た。同様に
組成物B〜Fを用いて試験片B〜Fを製造した。
【0036】実施例3:本発明の試験片を用いた測定 試験片Aを比重が異なる(1.00−1.03)各種尿
試料中に1−2秒間浸漬し、カラーアナライザーTC−
1800M(東京電色社製)で反射率曲線を測定した。
同時に目視でも判定した。結果を図2に示す。図2から
明らかなように尿比重の違いにより反射率曲線に差が見
られた。目視でも色調に明らかな差が見られた。
【0037】実施例4:尿試料の比重の測定1 試験片Aと対照試験片Fを使用し、比重が異なる(1.
00−1.03)各種尿試料中に1−2秒間浸漬し、カ
ラーアナライザーTC−1800Mを用い、620nm
におけるK/S関数を下記式1から算出した。 K/S=(1−R)2/2R (1) (式中、K=吸光係数、S=散乱係数、R=反射率) 結果を図3に示す。
【0038】K/S関数は、塗装面や織物等の反射率を
求めるため、クーベルカームンク(Kubelka-Munk)が理論
的にK/SとRとの関係を導いたものである。図3に示
すように、尿比重に比例したK/Sが得られた。また、
ポリエチレングリコールが添加されている試験片Aで
は、添加されていない対照の試験片Fに比較して高比重
域まで直線性が良好であり、比重測定の検量線として使
用可能であった。
【0039】実施例5:尿試料の比重の測定2(オキシ
エチレン基を有する物質の効果) 試験片Aと対照試験片Fを用い、比重1.015〜1.
025の尿試料〜に1−2秒間浸漬し、試験片の色
調変化をカラーアナライザーで測定し、また目視でも比
較した。結果を表2に示す。
【0040】
【表2】
【0041】表2から明かな通り、ポリエチレングリコ
ールを含む試験片Aは対照試験片Fと比較して各尿試料
間の色差(ΔE)が拡大し、試験片Fでは比重1.02
0と1.025の判別がやや困難なのに対し、試験片A
では判別が容易であった。また試験片Aは目視でも各試
料の色調差は試験片Fよりも明瞭であった。さらに同様
に試験片B〜Eも目視で測定したが、同様に各試料の色
調差は試験片Fよりも明瞭であり、オキシエチレン基を
有する物質の添加により高比重域まで測定可能となっ
た。
【0042】実施例6:pHが異なる尿試料の比重の測
定 試験片Aを下記尿試料〜中に1−2秒間浸漬し、カ
ラーアナライザーTC−1800Mで測定し、620n
mでのK/S関数を算出し、図3を検量線として用いて
尿比重を求めた。 尿試料:pH5、比重1.020 尿試料:pH6、比重1.020 尿試料:pH7、比重1.020
【0043】本発明の試験片Aを用いた測定の結果、尿
試料〜はいずれも比重1.020に相当するK/S
を示し、色調も同一であり、pHの違いによる差は見ら
れなかった。また同様に試験片B〜Fでも目視測定を行
ったが、色調はそれぞれ同一であった。結果を表3に示
す。
【0044】
【表3】
【0045】実施例7:本発明の組成物を用いた液−液
系による尿試料の比重の測定 本発明の組成物A150μlと精製水3mlからなる水
溶液に比重の異なる尿試料〜各250μlを添加し
よく混合した後、目視で各々の色調を判定した。結果を
表4に示す。表4から明らかな通り尿比重の違いにより
色調が異なり、液−液系においても比重測定が可能なこ
とが分かる。
【0046】
【表4】
【0047】
【発明の効果】本発明の液体試料のイオン強度又は比重
測定用組成物は、陰イオン型イオン会合性試薬と陽イオ
ン型イオン会合性試薬及び所望によりpH緩衝剤を含ん
でなり、更にオキシエチレン基を有する物質を含んでい
るので、イオン会合により明瞭に変色し、液体試料のp
Hや温度等の特性に影響されず、簡便迅速かつ正確に液
体試料のイオン強度又は比重を測定することができる。
【0048】さらにオキシエチレン基を有する物質を含
有しているので、色調がより明確になり、判定がより正
確且つ容易になる。また塩基性色素の変色域が広がるた
め、検量線の直線性も改善される。従って機械による反
射率の測定やK/Sの測定や、目視による色調表との比
較においても従来の試験片よりも正確に且つ精度良く判
定が可能となる。
【0049】また本発明の組成物に用いる陰イオン型イ
オン会合性試薬、陽イオン型イオン会合性試薬、pH緩
衝剤及びオキシエチレン基を有する物質には各々多くの
種類があり且つそれぞれ市販品として利用できるので種
々の組み合わせが可能であり、使用目的に応じた最適な
組成物を容易に且つ安価に調製することができる。
【0050】さらに本発明の試験片も各種の形態のもの
が容易に且つ安価に製造可能であり、且つ構造が簡単で
小型軽量であるため、測定操作、持ち運び、保管等が極
めて容易である。
【0051】
【図面の簡単な説明】
【図1】 本発明の試験片の一実施例の斜視図である。
【図2】 本発明の試験片を用いて測定した各種尿試料
の、カラーアナライザーの測定波長と反射率と関係を示
す図である。
【図3】 本発明の試験片を用いて測定した各種尿試料
の620nmにおけるK/S関数と比重との関係を示す
図である。
【符号の説明】
1 試験紙 2 プラスチック片

Claims (11)

    【整理番号】 P274 【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 陰イオン型イオン会合性試薬及び陽イオ
    ン型イオン会合性試薬とからなる液体試料のイオン強度
    又は比重測定用組成物において、オキシエチレン基を有
    する物質を含むことを特徴とする液体試料のイオン強度
    又は比重測定用組成物。
  2. 【請求項2】 オキシエチレン基を有する物質がポリエ
    チレングリコールであることを特徴とする請求項1記載
    の組成物。
  3. 【請求項3】 オキシエチレン基を有する物質がクラウ
    ンエーテルであることを特徴とする請求項1記載の組成
    物。
  4. 【請求項4】 オキシエチレン基を有する物質がオキシ
    エチレン基を有する非イオン性界面活性剤であることを
    特徴とする請求項1記載の組成物。
  5. 【請求項5】 オキシエチレン基を有する物質がポリエ
    チレングリコール、クラウンエーテル、オキシエチレン
    基を有する非イオン性界面活性剤からなる群より選ばれ
    た1以上の物質であることを特徴とする請求項1記載の
    組成物。
  6. 【請求項6】 陰イオン型イオン会合性試薬がスルホン
    酸基、硫酸エステル基もしくはリン酸エステル基を有す
    るポリマー又は鎖状化合物であることを特徴とする請求
    項1記載の組成物。
  7. 【請求項7】 陽イオン型イオン会合性試薬が塩基性色
    素であることを特徴とする請求項1記載の組成物。
  8. 【請求項8】 塩基性色素がチアジン色素、オキサジン
    色素、アジン色素、トリフェニルメタン色素、ジフェニ
    ルメタン色素、アゾ色素からなる群より選ばれたことを
    特徴とする請求項7記載の組成物。
  9. 【請求項9】 所望により更にpH緩衝剤を含むことを
    特徴とする請求項1記載の組成物。
  10. 【請求項10】 所望により含まれるpH緩衝剤のpH
    緩衝域がpH5−10の範囲であることを特徴とする請
    求項9記載の組成物。
  11. 【請求項11】 請求項1ないし10記載の組成物が吸
    収性担体に含浸されてなることを特徴とする液体試料の
    イオン強度又は比重測定用試験片。
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Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
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