JPH06211895A - 環状ペプチド - Google Patents
環状ペプチドInfo
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- JPH06211895A JPH06211895A JP5004172A JP417293A JPH06211895A JP H06211895 A JPH06211895 A JP H06211895A JP 5004172 A JP5004172 A JP 5004172A JP 417293 A JP417293 A JP 417293A JP H06211895 A JPH06211895 A JP H06211895A
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 式：Trp−Asn−Pro−Ｘ−Asp−Tyr−Gly−Gl
y−Ｙ−Lys（式中、ＸはAspまたはAlaを表し、ＹはVal
またはIleを表す。）で表されるアミノ酸配列を含有
し、１０〜５０個のアミノ酸残基からなる環状ペプチ
ド。 【効果】 本発明の環状ペプチドは、重症筋無力症患者
の体液中に存在する病因物質であるヒト抗アセチルコリ
ン受容体抗体と高い反応性を有しているので、重症筋無
力症の治療および診断において有用である。
y−Ｙ−Lys（式中、ＸはAspまたはAlaを表し、ＹはVal
またはIleを表す。）で表されるアミノ酸配列を含有
し、１０〜５０個のアミノ酸残基からなる環状ペプチ
ド。 【効果】 本発明の環状ペプチドは、重症筋無力症患者
の体液中に存在する病因物質であるヒト抗アセチルコリ
ン受容体抗体と高い反応性を有しているので、重症筋無
力症の治療および診断において有用である。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、重症筋無力症患者の体
液中に存在する病因物質であるヒト抗アセチルコリン受
容体抗体と結合する能力を有する環状ペプチドに関す
る。本発明の環状ペプチドは、ヒト抗アセチルコリン受
容体抗体と高い反応性を有しているので、重症筋無力症
の治療および診断において有用である。
液中に存在する病因物質であるヒト抗アセチルコリン受
容体抗体と結合する能力を有する環状ペプチドに関す
る。本発明の環状ペプチドは、ヒト抗アセチルコリン受
容体抗体と高い反応性を有しているので、重症筋無力症
の治療および診断において有用である。
【０００２】
【従来の技術】重症筋無力症患者の体液中に存在するヒ
ト抗アセチルコリン受容体抗体には、アセチルコリン受
容体との反応部位が異なる自己抗体が複数存在している
ことが知られている。一般に、ヒト抗アセチルコリン受
容体抗体はアセチルコリン受容体のαブンガロトキシン
結合部位（アセチルコリン結合部位）と反応する阻害型
抗体と、該結合部位以外の部位と反応する結合型抗体に
分類される。
ト抗アセチルコリン受容体抗体には、アセチルコリン受
容体との反応部位が異なる自己抗体が複数存在している
ことが知られている。一般に、ヒト抗アセチルコリン受
容体抗体はアセチルコリン受容体のαブンガロトキシン
結合部位（アセチルコリン結合部位）と反応する阻害型
抗体と、該結合部位以外の部位と反応する結合型抗体に
分類される。
【０００３】重症筋無力症患者の血清中に存在するヒト
抗アセチルコリン受容体抗体のうち、阻害型抗体と結合
する能力を有するペプチドとしては、トルペド・カリホ
ルニカ（Torpedo Californica）のアセチルコリン受容
体のαサブユニットの第１８３〜２００位のアミノ酸配
列を一部に含有する合成ペプチドが知られている（特開
平１−１３９５９７号公報参照）。しかしながら、重症
筋無力症の治療および診断におけるペプチドの適用範囲
を広げるうえで、さらに結合型抗体と結合する能力を有
するペプチドを得ることも、非常に有用なことである。
抗アセチルコリン受容体抗体のうち、阻害型抗体と結合
する能力を有するペプチドとしては、トルペド・カリホ
ルニカ（Torpedo Californica）のアセチルコリン受容
体のαサブユニットの第１８３〜２００位のアミノ酸配
列を一部に含有する合成ペプチドが知られている（特開
平１−１３９５９７号公報参照）。しかしながら、重症
筋無力症の治療および診断におけるペプチドの適用範囲
を広げるうえで、さらに結合型抗体と結合する能力を有
するペプチドを得ることも、非常に有用なことである。
【０００４】アセチルコリン受容体のαサブユニットで
は、第１７０〜２００位付近の部位が阻害型抗体との結
合位置に相当し、それ以外の部位が結合型抗体との結合
位置に相当することが知られている。αサブユニットの
第１７０〜２００位以外の部分ペプチドとしては、例え
ば、プロシーディングス・オブ・ザ・ナショナル・アカ
デミー・オブ・サイエンス・ユー・エス・エー（Proc.
Natl. Acad. Sci. USA）、第８４巻、第３６３３〜３６
３７頁（１９８７年）に、トルペド・カリホルニカのア
セチルコリン受容体のαサブユニットの第６７〜８２位
のアミノ酸配列に対応する直鎖状合成ペプチドが、トル
ペド・カリホルニカのアセチルコリン受容体でマウスお
よびウサギを免疫することにより得られたマウス抗体お
よびウサギ抗体と結合することが報告されている。
は、第１７０〜２００位付近の部位が阻害型抗体との結
合位置に相当し、それ以外の部位が結合型抗体との結合
位置に相当することが知られている。αサブユニットの
第１７０〜２００位以外の部分ペプチドとしては、例え
ば、プロシーディングス・オブ・ザ・ナショナル・アカ
デミー・オブ・サイエンス・ユー・エス・エー（Proc.
Natl. Acad. Sci. USA）、第８４巻、第３６３３〜３６
３７頁（１９８７年）に、トルペド・カリホルニカのア
セチルコリン受容体のαサブユニットの第６７〜８２位
のアミノ酸配列に対応する直鎖状合成ペプチドが、トル
ペド・カリホルニカのアセチルコリン受容体でマウスお
よびウサギを免疫することにより得られたマウス抗体お
よびウサギ抗体と結合することが報告されている。
【０００５】また、インターナショナル・イムノロジー
（International Immunology）、第３巻、第９８３〜９
８９頁（１９９１年）に、ヒトのアセチルコリン受容体
のαサブユニットの第６５〜８０位のアミノ酸配列に対
応する直鎖状合成ペプチドが、遺伝子組換え手法により
調製されたヒトのアセチルコリン受容体のαサブユニッ
ト第１〜２１０位のアミノ酸配列に対応するタンパク
で、マウス、ラット、ウサギを免疫することにより得ら
れたマウス抗体、ラット抗体、ウサギ抗体と結合するこ
とが報告されている。
（International Immunology）、第３巻、第９８３〜９
８９頁（１９９１年）に、ヒトのアセチルコリン受容体
のαサブユニットの第６５〜８０位のアミノ酸配列に対
応する直鎖状合成ペプチドが、遺伝子組換え手法により
調製されたヒトのアセチルコリン受容体のαサブユニッ
ト第１〜２１０位のアミノ酸配列に対応するタンパク
で、マウス、ラット、ウサギを免疫することにより得ら
れたマウス抗体、ラット抗体、ウサギ抗体と結合するこ
とが報告されている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】アミノ酸残基数が５０
個程度以下のペプチドは、一般に合成が容易であり、ア
セチルコリン受容体のαサブユニット（４３７個のアミ
ノ酸残基）のような天然高分子に比較して、生体に対す
る抗原性が非常に小さく安全であり、滅菌時および保管
時における活性低下が極めて小さいという利点がある。
しかしながら、上記の第６７〜８２位および第６５〜８
０位のアミノ酸配列に対応する直鎖状合成ペプチドはい
ずれも、マウスなどの動物をアセチルコリン受容体で免
疫することにより実験的に調製した動物由来の抗アセチ
ルコリン受容体抗体との反応性を有してはいるものの、
重症筋無力症患者の体液中のヒト抗アセチルコリン受容
体抗体との反応性は低く、重症筋無力症患者の治療およ
び診断に利用できるような臨床上有用なペプチドは得ら
れていなかった。
個程度以下のペプチドは、一般に合成が容易であり、ア
セチルコリン受容体のαサブユニット（４３７個のアミ
ノ酸残基）のような天然高分子に比較して、生体に対す
る抗原性が非常に小さく安全であり、滅菌時および保管
時における活性低下が極めて小さいという利点がある。
しかしながら、上記の第６７〜８２位および第６５〜８
０位のアミノ酸配列に対応する直鎖状合成ペプチドはい
ずれも、マウスなどの動物をアセチルコリン受容体で免
疫することにより実験的に調製した動物由来の抗アセチ
ルコリン受容体抗体との反応性を有してはいるものの、
重症筋無力症患者の体液中のヒト抗アセチルコリン受容
体抗体との反応性は低く、重症筋無力症患者の治療およ
び診断に利用できるような臨床上有用なペプチドは得ら
れていなかった。
【０００７】本発明の目的は、重症筋無力症患者の体液
中に存在する病因物質であるヒト抗アセチルコリン受容
体抗体と高い反応性を有し、重症筋無力症の治療および
診断において有用なアミノ酸残基数５０個以下のペプチ
ドを提供することにある。
中に存在する病因物質であるヒト抗アセチルコリン受容
体抗体と高い反応性を有し、重症筋無力症の治療および
診断において有用なアミノ酸残基数５０個以下のペプチ
ドを提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】本発明によれば、上記の
目的は、式（１）：Trp−Asn−Pro−Ｘ−Asp−Tyr−Gly
−Gly−Ｙ−Lys（式中、ＸはAspまたはAlaを表し、Ｙは
ValまたはIleを表す。）で表されるアミノ酸配列を含有
し、１０〜５０個のアミノ酸残基からなる環状ペプチド
を提供することによって達成さる。
目的は、式（１）：Trp−Asn−Pro−Ｘ−Asp−Tyr−Gly
−Gly−Ｙ−Lys（式中、ＸはAspまたはAlaを表し、Ｙは
ValまたはIleを表す。）で表されるアミノ酸配列を含有
し、１０〜５０個のアミノ酸残基からなる環状ペプチド
を提供することによって達成さる。
【０００９】本明細書においては各種アミノ酸残基を次
の略号で記述する。 Ala： Ｌ−アラニン残基 Arg： Ｌ−アルギニン残基 Asp： Ｌ−アスパラギン酸残基 Asn： Ｌ−アスパラギン残基 Cys： Ｌ−システイン残基 Gly： グリシン残基 Ile： Ｌ−イソロイシン残基 Leu： Ｌ−ロイシン残基 Lys： Ｌ−リジン残基 Pro： Ｌ−プロリン残基 Trp： Ｌ−トリプトファン残基 Tyr： Ｌ−チロシン残基 Val： Ｌ−バリン残基
の略号で記述する。 Ala： Ｌ−アラニン残基 Arg： Ｌ−アルギニン残基 Asp： Ｌ−アスパラギン酸残基 Asn： Ｌ−アスパラギン残基 Cys： Ｌ−システイン残基 Gly： グリシン残基 Ile： Ｌ−イソロイシン残基 Leu： Ｌ−ロイシン残基 Lys： Ｌ−リジン残基 Pro： Ｌ−プロリン残基 Trp： Ｌ−トリプトファン残基 Tyr： Ｌ−チロシン残基 Val： Ｌ−バリン残基
【００１０】また本明細書においては、常法に従ってペ
プチドのアミノ酸配列を、そのＮ末端のアミノ酸残基が
左側に位置し、Ｃ末端のアミノ酸残基が右側に位置する
ように記述する。
プチドのアミノ酸配列を、そのＮ末端のアミノ酸残基が
左側に位置し、Ｃ末端のアミノ酸残基が右側に位置する
ように記述する。
【００１１】本発明の環状ペプチドは、式（１）で表さ
れるアミノ酸配列を含有し、１０〜５０個のアミノ酸残
基からなる。実質的に式（１）で表されるアミノ酸配列
だけから成っていてもよいし、また、式（１）で表され
るアミノ酸配列のＮ末端および／またはＣ末端に任意の
アミノ酸残基またはアミノ酸配列を更に含有してもよ
い。本発明の環状ペプチドの形態は、直鎖状ペプチドの
Ｎ末端とＣ末端部分で環化したものでもよいし、また、
直鎖状ペプチドの末端以外の部分で環化したものでもよ
い。本発明の環状ペプチドにおいて、式（１）で表され
るアミノ酸配列は、環状部に含有されていても、また直
鎖状部に含有されていてもよい。
れるアミノ酸配列を含有し、１０〜５０個のアミノ酸残
基からなる。実質的に式（１）で表されるアミノ酸配列
だけから成っていてもよいし、また、式（１）で表され
るアミノ酸配列のＮ末端および／またはＣ末端に任意の
アミノ酸残基またはアミノ酸配列を更に含有してもよ
い。本発明の環状ペプチドの形態は、直鎖状ペプチドの
Ｎ末端とＣ末端部分で環化したものでもよいし、また、
直鎖状ペプチドの末端以外の部分で環化したものでもよ
い。本発明の環状ペプチドにおいて、式（１）で表され
るアミノ酸配列は、環状部に含有されていても、また直
鎖状部に含有されていてもよい。
【００１２】本発明の環状ペプチドは、式（１）で表さ
れるアミノ酸配列を少なくとも一部に含有することと、
環状構造を有することの両方の構造上の要件を満足する
ことに由来して、アミノ酸残基数が５０個以下という比
較的簡単な構成であるにもかかわらず、ヒト抗アセチル
コリン受容体抗体と結合する能力を発現する。
れるアミノ酸配列を少なくとも一部に含有することと、
環状構造を有することの両方の構造上の要件を満足する
ことに由来して、アミノ酸残基数が５０個以下という比
較的簡単な構成であるにもかかわらず、ヒト抗アセチル
コリン受容体抗体と結合する能力を発現する。
【００１３】本発明の環状ペプチドのうち、システイン
残基またはそれを含有するペプチド断片がそれぞれ式
（１）で表されるアミノ酸配列の両末端に結合し、該シ
ステイン残基間でジスルフィド結合を形成した形の環状
ペプチドには、後述するように、システイン残基間での
ジスルフィド結合の形成の容易さから、多種の環状ペプ
チドが包含される。
残基またはそれを含有するペプチド断片がそれぞれ式
（１）で表されるアミノ酸配列の両末端に結合し、該シ
ステイン残基間でジスルフィド結合を形成した形の環状
ペプチドには、後述するように、システイン残基間での
ジスルフィド結合の形成の容易さから、多種の環状ペプ
チドが包含される。
【００１４】システイン残基間でジスルフィド結合を形
成した形の本発明の環状ペプチドとしては、次式（２）
〜（５）で表されるアミノ酸配列からなる環状ペプチド
が、またＮ末端のアミノ基とＣ末端のカルボキシル基で
ペプチド結合を形成した形の本発明の環状ペプチドとし
ては、次式（６）または（７）で表されるアミノ酸配列
からなる環状ペプチドが例示されるが、これらに限定さ
れるものではない。 式（２）：Cys Lys Gly Gly Leu Arg Trp Asn Pro Asp
Asp Tyr Gly Gly Val Lys Lys Cys（配列番号：１） 式（３）：Cys Lys Gly Gly Leu Arg Trp Asn Pro Ala
Asp Tyr Gly Gly Ile Lys Lys Cys（配列番号：２） 式（４）：Cys Trp Asn Pro Asp Asp Tyr Gly Gly Val
Lys Cys（配列番号：３） 式（５）：Cys Trp Asn Pro Ala Asp Tyr Gly Gly Ile
Lys Cys（配列番号：４） 式（６）：Trp Asn Pro Asp Asp Tyr Gly Gly Val Lys
（配列番号：５） 式（７）：Trp Asn Pro Ala Asp Tyr Gly Gly Ile Lys
（配列番号：６）
成した形の本発明の環状ペプチドとしては、次式（２）
〜（５）で表されるアミノ酸配列からなる環状ペプチド
が、またＮ末端のアミノ基とＣ末端のカルボキシル基で
ペプチド結合を形成した形の本発明の環状ペプチドとし
ては、次式（６）または（７）で表されるアミノ酸配列
からなる環状ペプチドが例示されるが、これらに限定さ
れるものではない。 式（２）：Cys Lys Gly Gly Leu Arg Trp Asn Pro Asp
Asp Tyr Gly Gly Val Lys Lys Cys（配列番号：１） 式（３）：Cys Lys Gly Gly Leu Arg Trp Asn Pro Ala
Asp Tyr Gly Gly Ile Lys Lys Cys（配列番号：２） 式（４）：Cys Trp Asn Pro Asp Asp Tyr Gly Gly Val
Lys Cys（配列番号：３） 式（５）：Cys Trp Asn Pro Ala Asp Tyr Gly Gly Ile
Lys Cys（配列番号：４） 式（６）：Trp Asn Pro Asp Asp Tyr Gly Gly Val Lys
（配列番号：５） 式（７）：Trp Asn Pro Ala Asp Tyr Gly Gly Ile Lys
（配列番号：６）
【００１５】本発明の環状ペプチドは、例えば、式
（１）で表されるアミノ酸配列を含有する所望の直鎖状
ペプチドを合成した後、該ペプチドを環化することによ
り得られる。
（１）で表されるアミノ酸配列を含有する所望の直鎖状
ペプチドを合成した後、該ペプチドを環化することによ
り得られる。
【００１６】直鎖状ペプチドはペプチド合成において通
常用いられる方法、例えば固相合成法、段階的伸長法、
フラグメント縮合法のような液相合成法により行われる
が、固相合成法により行うのが操作上簡便である〔例え
ば、ジャーナル・オブ・ジ・アメリカン・ケミカル・ソ
サエティー（Journal of the American Chemical Socie
ty）、第８５巻、第２１４９〜２１５４頁（１９６３
年）；日本生化学会編「生化学実験講座１タンパク質の
化学IV 化学修飾とペプチド合成」（昭和５２年１１月
１５日、（株）東京化学同人発行）、第２０７〜４９５
頁；日本生化学会編「続生化学実験講座２ タンパク質
の化学（下）」（昭和６２年５月２０日、（株）東京化
学同人発行）、第６４１〜６９４頁参照〕。
常用いられる方法、例えば固相合成法、段階的伸長法、
フラグメント縮合法のような液相合成法により行われる
が、固相合成法により行うのが操作上簡便である〔例え
ば、ジャーナル・オブ・ジ・アメリカン・ケミカル・ソ
サエティー（Journal of the American Chemical Socie
ty）、第８５巻、第２１４９〜２１５４頁（１９６３
年）；日本生化学会編「生化学実験講座１タンパク質の
化学IV 化学修飾とペプチド合成」（昭和５２年１１月
１５日、（株）東京化学同人発行）、第２０７〜４９５
頁；日本生化学会編「続生化学実験講座２ タンパク質
の化学（下）」（昭和６２年５月２０日、（株）東京化
学同人発行）、第６４１〜６９４頁参照〕。
【００１７】直鎖状ペプチドの固相合成法による製造
は、例えば、反応溶媒に不溶性であるスチレン−ジビニ
ルベンゼン共重合体などの重合体に、目的とするペプチ
ドのＣ末端側からＮ末端方向に向かって、対応するアミ
ノ酸を該アミノ酸が有するα−カルボキシル基以外のα
−アミノ基などの官能基を保護したうえで縮合させて結
合させる操作と、該結合したアミノ酸におけるα−アミ
ノ基などのペプチド結合を形成するアミノ基が有する保
護基を除去する操作を順次繰返すことによってペプチド
鎖を伸長させ、目的とする直鎖状ペプチドに対応するペ
プチド鎖を形成し、次いで該ペプチド鎖を重合体から脱
離させ、かつ保護されている官能基から保護基を除去す
ることにより目的とする直鎖状ペプチドを得ることがで
きる。必要に応じてこの直鎖状ペプチドをさらに精製す
ることにより、純度の高いものを得ることができる。直
鎖状ペプチドの精製は逆相高速液体クロマトグラフィー
で行うのが効果的である。
は、例えば、反応溶媒に不溶性であるスチレン−ジビニ
ルベンゼン共重合体などの重合体に、目的とするペプチ
ドのＣ末端側からＮ末端方向に向かって、対応するアミ
ノ酸を該アミノ酸が有するα−カルボキシル基以外のα
−アミノ基などの官能基を保護したうえで縮合させて結
合させる操作と、該結合したアミノ酸におけるα−アミ
ノ基などのペプチド結合を形成するアミノ基が有する保
護基を除去する操作を順次繰返すことによってペプチド
鎖を伸長させ、目的とする直鎖状ペプチドに対応するペ
プチド鎖を形成し、次いで該ペプチド鎖を重合体から脱
離させ、かつ保護されている官能基から保護基を除去す
ることにより目的とする直鎖状ペプチドを得ることがで
きる。必要に応じてこの直鎖状ペプチドをさらに精製す
ることにより、純度の高いものを得ることができる。直
鎖状ペプチドの精製は逆相高速液体クロマトグラフィー
で行うのが効果的である。
【００１８】直鎖状ペプチドを環化する方法として、シ
ステイン残基のＳＨ基（メルカプト基）どうしを反応さ
せてジスルフィド結合を形成させる方法、Ｎ末端のアミ
ノ基またはリジン残基などに含まれるアミノ基と、Ｃ末
端のカルボキシル基またはグルタミン酸残基、アスパラ
ギン酸残基などに含まれるカルボキシル基を反応させて
ペプチド結合を形成させる方法などが挙げられる。シス
テイン残基のＳＨ基どうしを反応させてジスルフィド結
合を形成させる方法が、ペプチドの任意の部位で容易に
環化することが可能であるので好ましい。
ステイン残基のＳＨ基（メルカプト基）どうしを反応さ
せてジスルフィド結合を形成させる方法、Ｎ末端のアミ
ノ基またはリジン残基などに含まれるアミノ基と、Ｃ末
端のカルボキシル基またはグルタミン酸残基、アスパラ
ギン酸残基などに含まれるカルボキシル基を反応させて
ペプチド結合を形成させる方法などが挙げられる。シス
テイン残基のＳＨ基どうしを反応させてジスルフィド結
合を形成させる方法が、ペプチドの任意の部位で容易に
環化することが可能であるので好ましい。
【００１９】ジスルフィド結合の形成による環化方法と
しては、例えば、空気酸化法またはフェリシアン化カリ
ウムによる酸化法が挙げられる。ペプチド結合形成によ
る環化方法としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボ
ジイミドなどによる脱水縮合法、対称酸無水物法または
活性エステル法が挙げられる。
しては、例えば、空気酸化法またはフェリシアン化カリ
ウムによる酸化法が挙げられる。ペプチド結合形成によ
る環化方法としては、例えば、ジシクロヘキシルカルボ
ジイミドなどによる脱水縮合法、対称酸無水物法または
活性エステル法が挙げられる。
【００２０】環化反応の反応条件によっては、環状ペプ
チドの他に直鎖状ペプチドどうしが結合したオリゴマー
が形成される場合があるので、環化反応後のペプチドを
さらに逆相高速液体クロマトグラフィーなどで精製する
ことにより、オリゴマーを含まない高純度の環状ペプチ
ドが得られる。
チドの他に直鎖状ペプチドどうしが結合したオリゴマー
が形成される場合があるので、環化反応後のペプチドを
さらに逆相高速液体クロマトグラフィーなどで精製する
ことにより、オリゴマーを含まない高純度の環状ペプチ
ドが得られる。
【００２１】本発明の環状ペプチドを担体上に固定化す
ることにより、該環状ペプチドのヒト抗アセチルコリン
受容体抗体との結合能力を利用して、重症筋無力症患者
の血液、血漿などの体液中に存在するヒト抗アセチルコ
リン受容体抗体を吸着除去する目的の治療用吸着剤とし
て有効に用いることができる。本発明の環状ペプチドを
固定化する際に使用する担体としては、親水性の表面を
有し、かつペプチドとの間で共有結合を形成させるため
に利用し得るアミノ基、カルボキシル基、水酸基などの
反応性の官能基を有するものが好ましい。また、上記の
担体は血液、血漿などの体液に不溶性であり、多孔性で
あるものが好ましい。担体は粒子状、繊維状、シート
状、中空糸状などの任意の形状であることができる。
ることにより、該環状ペプチドのヒト抗アセチルコリン
受容体抗体との結合能力を利用して、重症筋無力症患者
の血液、血漿などの体液中に存在するヒト抗アセチルコ
リン受容体抗体を吸着除去する目的の治療用吸着剤とし
て有効に用いることができる。本発明の環状ペプチドを
固定化する際に使用する担体としては、親水性の表面を
有し、かつペプチドとの間で共有結合を形成させるため
に利用し得るアミノ基、カルボキシル基、水酸基などの
反応性の官能基を有するものが好ましい。また、上記の
担体は血液、血漿などの体液に不溶性であり、多孔性で
あるものが好ましい。担体は粒子状、繊維状、シート
状、中空糸状などの任意の形状であることができる。
【００２２】本発明の環状ペプチドの担体上への固定化
は、一般にペプチドまたはタンパク質を担体上に固定化
する場合に採用される方法に従って行われる。その固定
化方法としては、例えば、担体が有するカルボキシル基
をＮ−ヒドロキシコハク酸イミドと反応させることによ
って、スクシンイミドオキシカルボニル基に変換し、こ
れに本発明の環状ペプチドをアミノ基の部分で反応させ
る方法（活性エステル法）、担体が有するアミノ基また
はカルボキシル基にジシクロヘキシルカルボジイミドな
どの縮合試薬の存在下で、本発明の環状ペプチドのカル
ボキシル基またはアミノ基を縮合反応させる方法（縮合
法）、担体と本発明の環状ペプチドとをグルタルアルデ
ヒドなどの２個以上の官能基を有する化合物を用いて架
橋する方法（担体架橋法）などが挙げられる。
は、一般にペプチドまたはタンパク質を担体上に固定化
する場合に採用される方法に従って行われる。その固定
化方法としては、例えば、担体が有するカルボキシル基
をＮ−ヒドロキシコハク酸イミドと反応させることによ
って、スクシンイミドオキシカルボニル基に変換し、こ
れに本発明の環状ペプチドをアミノ基の部分で反応させ
る方法（活性エステル法）、担体が有するアミノ基また
はカルボキシル基にジシクロヘキシルカルボジイミドな
どの縮合試薬の存在下で、本発明の環状ペプチドのカル
ボキシル基またはアミノ基を縮合反応させる方法（縮合
法）、担体と本発明の環状ペプチドとをグルタルアルデ
ヒドなどの２個以上の官能基を有する化合物を用いて架
橋する方法（担体架橋法）などが挙げられる。
【００２３】さらに本発明の環状ペプチドはヒト抗アセ
チルコリン受容体抗体と高い反応性を有しているので、
ヒト抗アセチルコリン受容体抗体を検出するための診断
薬用の試薬としても有用である。本発明の環状ペプチド
を、酵素、放射性同位元素、蛍光色素などで標識するこ
とにより、酵素免疫測定法、放射免疫測定法、蛍光免疫
測定法などの測定法で使用できる。
チルコリン受容体抗体と高い反応性を有しているので、
ヒト抗アセチルコリン受容体抗体を検出するための診断
薬用の試薬としても有用である。本発明の環状ペプチド
を、酵素、放射性同位元素、蛍光色素などで標識するこ
とにより、酵素免疫測定法、放射免疫測定法、蛍光免疫
測定法などの測定法で使用できる。
【００２４】
【実施例】以下、実施例により本発明を説明するが、本
発明は実施例により限定されるものではない。
発明は実施例により限定されるものではない。
【００２５】実施例１ 前記の式（２）で表されるアミノ酸配列に対応する直鎖
状ペプチド（配列番号：７）を、ペプチド自動合成装置
〔米国アプライド・バイオシステムズ（Applied Biosys
tems）社製モデル４３０Ａ（Model 430A）〕を用いて固
相合成法により合成した。４−ヒドロキシメチルフェノ
キシメチル基を０．８５ミリモル／ｇ（樹脂）の割合で
有するスチレン−ジビニルベンゼン共重合体〔スチレン
とジビニルベンゼンの構成比（モル比）：９９対１〕か
らなる粒状樹脂〔米国アプライド・バイオシステムズ
（Applied Biosystems）社製ＨＭＰレジン〕を０．２９
ｇ用い、これに表１に示す一連の操作に従って、目的と
するペプチドのＣ末端側からＮ末端方向に向かって、対
応する順序でＬ−アルギニン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−
アスパラギン酸、Ｌ−システイン、グリシン、Ｌ−ロイ
シン、Ｌ−リジン、Ｌ−プロリン、Ｌ−チロシン、Ｌ−
バリンおよびＬ−トリプトファンを結合させた。縮合反
応において上記のアミノ酸は、それぞれ９−フルオレニ
ルメトキシカルボニル−Ｎ−４−メトキシ−２，３，６
−トリメチルベンゼンスルホニル−Ｌ−アルギニン、９
−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−アスパラギ
ン、９−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−アスパ
ラギン酸−β−ｔ−ブチルエステル、９−フルオレニル
メトキシカルボニル−Ｓ−トリチル−Ｌ−システイン、
９−フルオレニルメトキシカルボニルグリシン、９−フ
ルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−ロイシン、Ｎ↑α
−９−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｎ↑ε−ｔ−
ブチルオキシカルボニル−Ｌ−リジン、９−フルオレニ
ルメトキシカルボニル−Ｌ−プロリン、９−フルオレニ
ルメトキシカルボニル−Ｏ−ｔ−ブチル−Ｌ−チロシ
ン、９−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−バリン
および９−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−トリ
プトファンとして用い、それらの使用量は基質に対して
約２倍モル量とした。
状ペプチド（配列番号：７）を、ペプチド自動合成装置
〔米国アプライド・バイオシステムズ（Applied Biosys
tems）社製モデル４３０Ａ（Model 430A）〕を用いて固
相合成法により合成した。４−ヒドロキシメチルフェノ
キシメチル基を０．８５ミリモル／ｇ（樹脂）の割合で
有するスチレン−ジビニルベンゼン共重合体〔スチレン
とジビニルベンゼンの構成比（モル比）：９９対１〕か
らなる粒状樹脂〔米国アプライド・バイオシステムズ
（Applied Biosystems）社製ＨＭＰレジン〕を０．２９
ｇ用い、これに表１に示す一連の操作に従って、目的と
するペプチドのＣ末端側からＮ末端方向に向かって、対
応する順序でＬ−アルギニン、Ｌ−アスパラギン、Ｌ−
アスパラギン酸、Ｌ−システイン、グリシン、Ｌ−ロイ
シン、Ｌ−リジン、Ｌ−プロリン、Ｌ−チロシン、Ｌ−
バリンおよびＬ−トリプトファンを結合させた。縮合反
応において上記のアミノ酸は、それぞれ９−フルオレニ
ルメトキシカルボニル−Ｎ−４−メトキシ−２，３，６
−トリメチルベンゼンスルホニル−Ｌ−アルギニン、９
−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−アスパラギ
ン、９−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−アスパ
ラギン酸−β−ｔ−ブチルエステル、９−フルオレニル
メトキシカルボニル−Ｓ−トリチル−Ｌ−システイン、
９−フルオレニルメトキシカルボニルグリシン、９−フ
ルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−ロイシン、Ｎ↑α
−９−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｎ↑ε−ｔ−
ブチルオキシカルボニル−Ｌ−リジン、９−フルオレニ
ルメトキシカルボニル−Ｌ−プロリン、９−フルオレニ
ルメトキシカルボニル−Ｏ−ｔ−ブチル−Ｌ−チロシ
ン、９−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−バリン
および９−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−トリ
プトファンとして用い、それらの使用量は基質に対して
約２倍モル量とした。
【００２６】
【表１】
【００２７】全てのアミノ酸についての反応操作が終了
した後、得られた樹脂をグラスフィルター上でジクロロ
メタンおよびメタノールを用いて順次洗浄し、次いで真
空乾燥することによって８５０mgの乾燥樹脂を得た。バ
イアル瓶中で、乾燥樹脂８５０mgとトリフルオロ酢酸１
０ml、水０．５ml、チオアニソール０．５ml、エタンジ
チオール０．２５mlおよびフェノール０．７５ｇを混合
した。室温で２０時間放置後、混合物をグラスフィルタ
ーで濾過し、濾液にジエチルエーテルを加え、遠心する
ことにより白い沈殿物を得た。得られた沈殿物を真空乾
燥した後、２規定の酢酸水溶液で抽出し、抽出液を凍結
乾燥することにより直鎖状ペプチドを得た。得られた直
鎖状ペプチドを分析用高速液体クロマトグラフィー〔カ
ラム：粒径５μｍのオクタデシル化シリカゲル充填カラ
ム（内径：４．６mm、長さ：１００mm、東ソー（株）製
TSKgel ODS-80TMCTR）；移動相：トリフルオロ酢酸を
０．０５容量％含有するアセトニトリルと水の混合溶媒
（アセトニトリルの濃度は３０分間で５容量％から５０
容量％になるように漸次変化させた。）；流速：１ml／
分；検出法：波長２１０nmにおける吸光度〕に付したと
ころ、１６．１分に単一の鋭いピークが示された。ＦＡ
Ｂ（高速原子衝撃）法マススペクトルにより求めた直鎖
状ペプチドの分子量は１９９７であった（理論値１９９
６．２７）。
した後、得られた樹脂をグラスフィルター上でジクロロ
メタンおよびメタノールを用いて順次洗浄し、次いで真
空乾燥することによって８５０mgの乾燥樹脂を得た。バ
イアル瓶中で、乾燥樹脂８５０mgとトリフルオロ酢酸１
０ml、水０．５ml、チオアニソール０．５ml、エタンジ
チオール０．２５mlおよびフェノール０．７５ｇを混合
した。室温で２０時間放置後、混合物をグラスフィルタ
ーで濾過し、濾液にジエチルエーテルを加え、遠心する
ことにより白い沈殿物を得た。得られた沈殿物を真空乾
燥した後、２規定の酢酸水溶液で抽出し、抽出液を凍結
乾燥することにより直鎖状ペプチドを得た。得られた直
鎖状ペプチドを分析用高速液体クロマトグラフィー〔カ
ラム：粒径５μｍのオクタデシル化シリカゲル充填カラ
ム（内径：４．６mm、長さ：１００mm、東ソー（株）製
TSKgel ODS-80TMCTR）；移動相：トリフルオロ酢酸を
０．０５容量％含有するアセトニトリルと水の混合溶媒
（アセトニトリルの濃度は３０分間で５容量％から５０
容量％になるように漸次変化させた。）；流速：１ml／
分；検出法：波長２１０nmにおける吸光度〕に付したと
ころ、１６．１分に単一の鋭いピークが示された。ＦＡ
Ｂ（高速原子衝撃）法マススペクトルにより求めた直鎖
状ペプチドの分子量は１９９７であった（理論値１９９
６．２７）。
【００２８】得られた直鎖状ペプチド１００mgを０．１
mg／mlの濃度になるように精製水に溶解した後、溶液を
攪拌しながら１Ｍのアンモニア水を加え、ｐＨを７．０
になるように調整した。このペプチド溶液に、２mg／ml
のフェリシアン化カリウム水溶液を、ペプチド溶液が淡
黄色に着色するまでゆっくりと滴下し、さらにその後１
時間攪拌することにより、ジスルフィド結合を形成さ
せ、直鎖状ペプチドを環化させた。このペプチド溶液を
分取用逆相高速液体クロマトグラフィー〔カラム：粒径
１５μｍのオクタデシル化シリカゲル充填カラム（内
径：４７mm、長さ：３００mm、日本ミリポアリミテッド
製 プレパックカートリッジデルタパック）；移動相：
トリフルオロ酢酸を０．０５容量％含有するアセトニト
リルと水の混合溶媒（アセトニトリルの濃度は２０分間
で１５容量％から３０容量％になるように漸次変化させ
た。）；流速：５０ml／分；検出法：波長２３０nmにお
ける吸光度〕で精製した後、凍結乾燥することにより、
前記の式（２）で表されるアミノ酸配列からなる環状ペ
プチド（配列番号：１）の精製物を４０mg得た。得られ
た環状ペプチドを前記と同様の条件で分析用高速液体ク
ロマトグラフィーに付したところ、１５．５分に単一の
鋭いピークが示された。ＦＡＢ法マススペクトルにより
求めた環状ペプチドの分子量は１９９５であった（理論
値１９９４．２７）。４，４’−ジチオピリジンを用い
て環状ペプチドのＳＨ基量を定量したところ〔生物化学
実験法１０ ＳＨ基の定量法、学会出版センター、第８
８頁（１９７８年）参照〕、ＳＨ基は測定されなかっ
た。これらの結果より、得られた環状ペプチドがジスル
フィド結合により環化されているものであることが確認
された。
mg／mlの濃度になるように精製水に溶解した後、溶液を
攪拌しながら１Ｍのアンモニア水を加え、ｐＨを７．０
になるように調整した。このペプチド溶液に、２mg／ml
のフェリシアン化カリウム水溶液を、ペプチド溶液が淡
黄色に着色するまでゆっくりと滴下し、さらにその後１
時間攪拌することにより、ジスルフィド結合を形成さ
せ、直鎖状ペプチドを環化させた。このペプチド溶液を
分取用逆相高速液体クロマトグラフィー〔カラム：粒径
１５μｍのオクタデシル化シリカゲル充填カラム（内
径：４７mm、長さ：３００mm、日本ミリポアリミテッド
製 プレパックカートリッジデルタパック）；移動相：
トリフルオロ酢酸を０．０５容量％含有するアセトニト
リルと水の混合溶媒（アセトニトリルの濃度は２０分間
で１５容量％から３０容量％になるように漸次変化させ
た。）；流速：５０ml／分；検出法：波長２３０nmにお
ける吸光度〕で精製した後、凍結乾燥することにより、
前記の式（２）で表されるアミノ酸配列からなる環状ペ
プチド（配列番号：１）の精製物を４０mg得た。得られ
た環状ペプチドを前記と同様の条件で分析用高速液体ク
ロマトグラフィーに付したところ、１５．５分に単一の
鋭いピークが示された。ＦＡＢ法マススペクトルにより
求めた環状ペプチドの分子量は１９９５であった（理論
値１９９４．２７）。４，４’−ジチオピリジンを用い
て環状ペプチドのＳＨ基量を定量したところ〔生物化学
実験法１０ ＳＨ基の定量法、学会出版センター、第８
８頁（１９７８年）参照〕、ＳＨ基は測定されなかっ
た。これらの結果より、得られた環状ペプチドがジスル
フィド結合により環化されているものであることが確認
された。
【００２９】実施例２ 実施例１と同様な方法でペプチドの固相合成を行うこと
により、前記の式（３）で表されるアミノ酸配列に対応
する直鎖状ペプチド（配列番号：８）を得た。ただし縮
合反応においてＬ−アラニンおよびＬ−イソロイシンは
それぞれ９−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−ア
ラニンおよび９−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ
−イソロイシンとして用いた。得られた直鎖状ペプチド
を分析用逆相高速液体クロマトグラフィーに付したとこ
ろ、１５．２分に単一の鋭いピークが示された。ＦＡＢ
法マススペクトルにより求めた直鎖状ペプチドの分子量
は１９６６であった（理論値１９６６．２９）。
により、前記の式（３）で表されるアミノ酸配列に対応
する直鎖状ペプチド（配列番号：８）を得た。ただし縮
合反応においてＬ−アラニンおよびＬ−イソロイシンは
それぞれ９−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ−ア
ラニンおよび９−フルオレニルメトキシカルボニル−Ｌ
−イソロイシンとして用いた。得られた直鎖状ペプチド
を分析用逆相高速液体クロマトグラフィーに付したとこ
ろ、１５．２分に単一の鋭いピークが示された。ＦＡＢ
法マススペクトルにより求めた直鎖状ペプチドの分子量
は１９６６であった（理論値１９６６．２９）。
【００３０】さらに、得られた直鎖状ペプチドを実施例
１に記載の方法に従い、ジスルフィド結合を形成させる
ことにより環化させた後、分取用逆相高速液体クロマト
グラフィーに付して精製することにより、前記の式
（３）で表されるアミノ酸配列からなる環状ペプチド
（配列番号：２）を得た。得られた環状ペプチドを分析
用逆相高速液体クロマトグラフィーに付したところ、１
４．７分に単一の鋭いピークが示された。ＦＡＢ法マス
スペクトルにより求めた環状ペプチドの分子量は１９６
４あった（理論値１９６４．２９）。４，４’−ジチオ
ピリジンを用いて環状ペプチドのＳＨ基量を定量したと
ころ、ＳＨ基は測定されなかった。これらの結果より、
得られた環状ペプチドがジスルフィド結合により環化さ
れているものであることが確認された。
１に記載の方法に従い、ジスルフィド結合を形成させる
ことにより環化させた後、分取用逆相高速液体クロマト
グラフィーに付して精製することにより、前記の式
（３）で表されるアミノ酸配列からなる環状ペプチド
（配列番号：２）を得た。得られた環状ペプチドを分析
用逆相高速液体クロマトグラフィーに付したところ、１
４．７分に単一の鋭いピークが示された。ＦＡＢ法マス
スペクトルにより求めた環状ペプチドの分子量は１９６
４あった（理論値１９６４．２９）。４，４’−ジチオ
ピリジンを用いて環状ペプチドのＳＨ基量を定量したと
ころ、ＳＨ基は測定されなかった。これらの結果より、
得られた環状ペプチドがジスルフィド結合により環化さ
れているものであることが確認された。
【００３１】試験例 実施例１、２で得られた環状ペプチドおよび直鎖状ペプ
チドと、重症筋無力症患者血清中のヒト抗アセチルコリ
ン受容体抗体との反応性を調べるため、該ペプチドを用
いて、ジャーナル・オブ・ザ・ニューロロジカル・サイ
エンシーズ（Journal of the Neurological Sciences）
第８５巻、第１２１〜１２９頁（１９８８年）に記載さ
れている方法に従い、健常人１０例および重症筋無力症
患者６３例の血清についてヒト抗アセチルコリン受容体
抗体価の測定を行なった。すなわち、ボルトン−ハンタ
ー試薬（アマシャム社製）１８．５MBqの入っている容
器に窒素ガスを通じて溶媒を除去した後、ジメチルホル
ムアミド５μｌおよび実施例１、２で得られたペプチド
１０μｇを含む０．１Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ８．５）１
０μｌを加え、氷冷下で１５分間反応させた。０．１Ｍ
グリシン／０．１Ｍホウ酸緩衝液を１００μｌ加え、さ
らに１５分間反応後、反応液にジエチルエーテルを加
え、遠心洗浄後得られた沈殿物を放射標識ペプチドとし
た。放射標識ペプチド約４００Bqを含む０．１Ｍトリス
−塩酸緩衝液／０．１％Tween（ｐＨ７．４）５０μｌ
を各種血清５０μｌに加え、４℃で一夜放置後、抗ヒト
ＩｇＧウサギポリクロナル抗体（ダコ・ジャパン（株）
販売）を５０μｌ添加し、さらに４℃で一夜放置後、
０．１Ｍのトリス−塩酸緩衝液／０．１％Tween（ｐＨ
７．４）で３回遠心洗浄操作を繰り返した後、得られた
沈殿物の放射活性をγシンチレーションカウンターを用
いて測定した。健常人血清の測定値の平均値＋２ＳＤ値
をカットオフ値として、重症筋無力症患者血清における
陽性率を求めた結果を表２に示す。本発明の環状ペプチ
ドを使用して測定した場合は、重症筋無力症患者血清に
ついて高い陽性率が得られたが、環化していない直鎖状
ペプチドを使用して測定した場合は、重症筋無力症患者
血清の測定値は健常人血清の測定値とほぼ同等であっ
た。
チドと、重症筋無力症患者血清中のヒト抗アセチルコリ
ン受容体抗体との反応性を調べるため、該ペプチドを用
いて、ジャーナル・オブ・ザ・ニューロロジカル・サイ
エンシーズ（Journal of the Neurological Sciences）
第８５巻、第１２１〜１２９頁（１９８８年）に記載さ
れている方法に従い、健常人１０例および重症筋無力症
患者６３例の血清についてヒト抗アセチルコリン受容体
抗体価の測定を行なった。すなわち、ボルトン−ハンタ
ー試薬（アマシャム社製）１８．５MBqの入っている容
器に窒素ガスを通じて溶媒を除去した後、ジメチルホル
ムアミド５μｌおよび実施例１、２で得られたペプチド
１０μｇを含む０．１Ｍホウ酸緩衝液（ｐＨ８．５）１
０μｌを加え、氷冷下で１５分間反応させた。０．１Ｍ
グリシン／０．１Ｍホウ酸緩衝液を１００μｌ加え、さ
らに１５分間反応後、反応液にジエチルエーテルを加
え、遠心洗浄後得られた沈殿物を放射標識ペプチドとし
た。放射標識ペプチド約４００Bqを含む０．１Ｍトリス
−塩酸緩衝液／０．１％Tween（ｐＨ７．４）５０μｌ
を各種血清５０μｌに加え、４℃で一夜放置後、抗ヒト
ＩｇＧウサギポリクロナル抗体（ダコ・ジャパン（株）
販売）を５０μｌ添加し、さらに４℃で一夜放置後、
０．１Ｍのトリス−塩酸緩衝液／０．１％Tween（ｐＨ
７．４）で３回遠心洗浄操作を繰り返した後、得られた
沈殿物の放射活性をγシンチレーションカウンターを用
いて測定した。健常人血清の測定値の平均値＋２ＳＤ値
をカットオフ値として、重症筋無力症患者血清における
陽性率を求めた結果を表２に示す。本発明の環状ペプチ
ドを使用して測定した場合は、重症筋無力症患者血清に
ついて高い陽性率が得られたが、環化していない直鎖状
ペプチドを使用して測定した場合は、重症筋無力症患者
血清の測定値は健常人血清の測定値とほぼ同等であっ
た。
【００３２】この結果より本発明の環状ペプチドが、重
症筋無力症患者血清中のヒト抗アセチルコリン受容体抗
体と高い反応性を有することが明らかである。
症筋無力症患者血清中のヒト抗アセチルコリン受容体抗
体と高い反応性を有することが明らかである。
【００３３】
【表２】
【００３４】
【発明の効果】本発明により提供される環状ペプチド
は、重症筋無力症患者の体液中に存在する病因物質であ
るヒト抗アセチルコリン受容体抗体と高い反応性を有し
ているので、重症筋無力症の治療および診断において有
用である。
は、重症筋無力症患者の体液中に存在する病因物質であ
るヒト抗アセチルコリン受容体抗体と高い反応性を有し
ているので、重症筋無力症の治療および診断において有
用である。
【００３５】
配列番号：１ 配列の長さ：１８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：環状 配列の種類：ペプチド 配列 Cys Lys Gly Gly Leu Arg Trp Asn Pro Asp Asp Tyr Gly Gly Val Lys 1 5 10 15 Lys Cys
【００３６】配列番号：２ 配列の長さ：１８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：環状 配列の種類：ペプチド 配列 Cys Lys Gly Gly Leu Arg Trp Asn Pro Ala Asp Tyr Gly Gly Ile Lys 1 5 10 15 Lys Cys
【００３７】配列番号：３ 配列の長さ：１２ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：環状 配列の種類：ペプチド
【００３８】配列番号：４ 配列の長さ：１２ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：環状 配列の種類：ペプチド
【００３９】配列番号：５ 配列の長さ：１０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：環状 配列の種類：ペプチド
【００４０】配列番号：６ 配列の長さ：１０ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：環状 配列の種類：ペプチド
【００４１】配列番号：７ 配列の長さ：１８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Cys Lys Gly Gly Leu Arg Trp Asn Pro Asp Asp Tyr Gly Gly Val Lys 1 5 10 15 Lys Cys
【００４２】配列番号：８ 配列の長さ：１８ 配列の型：アミノ酸 トポロジー：直鎖状 配列の種類：ペプチド 配列 Ｃｙｓ Ｌｙｓ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｌｅｕ Ａｒｇ Ｔｒｐ Ａｓｎ Ｐｒｏ
Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ｌｙｓ １ ５
１０ １５ Ｌｙｓ Ｃｙｓ
Ａｌａ Ａｓｐ Ｔｙｒ Ｇｌｙ Ｇｌｙ Ｉｌｅ Ｌｙｓ １ ５
１０ １５ Ｌｙｓ Ｃｙｓ
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｇ０１Ｎ 33/564 Ｚ 9015−2Ｊ Ｃ０７Ｋ 99:00
Claims (1)
- 【請求項１】 式：Trp−Asn−Pro−Ｘ−Asp−Tyr−Gly
−Gly−Ｙ−Lys （式中、ＸはAspまたはAlaを表し、ＹはValまたはIleを
表す。）で表されるアミノ酸配列を含有し、１０〜５０
個のアミノ酸残基からなる環状ペプチド。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP00417293A JP3391831B2 (ja) | 1993-01-13 | 1993-01-13 | 環状ペプチド |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP00417293A JP3391831B2 (ja) | 1993-01-13 | 1993-01-13 | 環状ペプチド |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06211895A true JPH06211895A (ja) | 1994-08-02 |
| JP3391831B2 JP3391831B2 (ja) | 2003-03-31 |
Family
ID=11577314
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP00417293A Expired - Fee Related JP3391831B2 (ja) | 1993-01-13 | 1993-01-13 | 環状ペプチド |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3391831B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008039472A (ja) * | 2006-08-02 | 2008-02-21 | Kanazawa Univ | 胸腺腫合併重症筋無力症の診断方法 |
| JP2019531716A (ja) * | 2016-09-08 | 2019-11-07 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア | 重症筋無力症を診断および治療するためのペプチドおよびその使用 |
-
1993
- 1993-01-13 JP JP00417293A patent/JP3391831B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008039472A (ja) * | 2006-08-02 | 2008-02-21 | Kanazawa Univ | 胸腺腫合併重症筋無力症の診断方法 |
| JP2019531716A (ja) * | 2016-09-08 | 2019-11-07 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア | 重症筋無力症を診断および治療するためのペプチドおよびその使用 |
| US11422132B2 (en) | 2016-09-08 | 2022-08-23 | The Regents Of The University Of California | Peptides and uses thereof for diagnosing and treating myasthenia gravis |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3391831B2 (ja) | 2003-03-31 |
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