JPH06199656A - パイロジエンの除去方法 - Google Patents
パイロジエンの除去方法Info
- Publication number
- JPH06199656A JPH06199656A JP35875292A JP35875292A JPH06199656A JP H06199656 A JPH06199656 A JP H06199656A JP 35875292 A JP35875292 A JP 35875292A JP 35875292 A JP35875292 A JP 35875292A JP H06199656 A JPH06199656 A JP H06199656A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- solution
- pyrodiene
- filter
- filtration
- pyrogen
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Medicinal Preparation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 パイロジエンを含有し、３７℃において２万
〜６万センチストークスの粘度を有する溶液を、ｐＨ６
〜１０において溶液中で正に帯電したフィルターに通す
ことにより、前記溶液からパイロジエンを除去する。 【効果】 溶液中に混入したパイロジエンを簡便に且つ
低コストで除去することができる。このパイロジエン除
去効果は、パイロジエンを含有する溶液が高い粘性を有
する場合にも実質的に減殺されない。
〜６万センチストークスの粘度を有する溶液を、ｐＨ６
〜１０において溶液中で正に帯電したフィルターに通す
ことにより、前記溶液からパイロジエンを除去する。 【効果】 溶液中に混入したパイロジエンを簡便に且つ
低コストで除去することができる。このパイロジエン除
去効果は、パイロジエンを含有する溶液が高い粘性を有
する場合にも実質的に減殺されない。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、液体に混入するパイロ
ジエンを除去する方法に関するものであり、特に、眼科
用剤として用いられるヒアルロン酸ナトリウム、ヒドロ
キシプロピルメチルセルロース等の粘弾性物質に混入す
るパイロジエン除去に好適なパイロジエン除去方法に関
する。
ジエンを除去する方法に関するものであり、特に、眼科
用剤として用いられるヒアルロン酸ナトリウム、ヒドロ
キシプロピルメチルセルロース等の粘弾性物質に混入す
るパイロジエン除去に好適なパイロジエン除去方法に関
する。
【０００２】
【従来の技術】従来より、医療用の潤滑剤としてヒアル
ロン酸塩に代表されるムコ多糖類が一般に使用されてい
る。また近年、前眼部手術、例えば白内障手術、緑内障
手術、角膜移植、人工眼内レンズ移植等の手術時に、前
房中に粘弾性を持つヒアルロン酸塩の製剤を注入して手
術操作を実施することによって、組織表面の損傷を防
ぎ、縫合などの手技を安全かつ確実に実施でき、また手
術後の癒着を防ぐことができるため、このような手法が
一般的に利用されている。
ロン酸塩に代表されるムコ多糖類が一般に使用されてい
る。また近年、前眼部手術、例えば白内障手術、緑内障
手術、角膜移植、人工眼内レンズ移植等の手術時に、前
房中に粘弾性を持つヒアルロン酸塩の製剤を注入して手
術操作を実施することによって、組織表面の損傷を防
ぎ、縫合などの手技を安全かつ確実に実施でき、また手
術後の癒着を防ぐことができるため、このような手法が
一般的に利用されている。
【０００３】一般に、上記ヒアルロン酸塩は主にニワト
リのトサカや硝子体から抽出しているため、このように
して得られた抽出体には、ヒアルロン酸塩の外にパイロ
ジエン等が含有されている。
リのトサカや硝子体から抽出しているため、このように
して得られた抽出体には、ヒアルロン酸塩の外にパイロ
ジエン等が含有されている。
【０００４】このパイロジエンは、生体に投与すると発
熱を起こす物質の総称であり、発熱物質、発熱因子とも
呼ばれる。パイロジエンの中で最も発熱に関与する物質
は、細菌由来のものであり、一般に外毒素（エクソトキ
シン）、及び内毒素（エンドトキシン）に大別されてい
る。これらの毒素のうち、大腸菌などのグラム陰性菌に
おいて、多糖類と結合した脂質の複合体、リポ多糖体
（リポポリサツカライド：ＬＰＳ）を主とする内毒素が
最も強い発熱性を持ち、体内投与により発熱の他、ショ
ックや白血球の増加を誘引する。
熱を起こす物質の総称であり、発熱物質、発熱因子とも
呼ばれる。パイロジエンの中で最も発熱に関与する物質
は、細菌由来のものであり、一般に外毒素（エクソトキ
シン）、及び内毒素（エンドトキシン）に大別されてい
る。これらの毒素のうち、大腸菌などのグラム陰性菌に
おいて、多糖類と結合した脂質の複合体、リポ多糖体
（リポポリサツカライド：ＬＰＳ）を主とする内毒素が
最も強い発熱性を持ち、体内投与により発熱の他、ショ
ックや白血球の増加を誘引する。
【０００５】したがって、上記ヒアルロン酸塩を生体に
使用する場合は、上記ヒアルロン酸塩抽出体からパイロ
ジエンを除去する必要がある。
使用する場合は、上記ヒアルロン酸塩抽出体からパイロ
ジエンを除去する必要がある。
【０００６】パイロジエンの除去方法としては、膜によ
るろ過（特開昭５８−７３３７１号公報）など、分子量
の差を利用する方法、ヒスチジンを結合させた担体（特
開昭５７−１８３７１２号公報）などを用いて、パイロ
ジエンを吸着させる方法などがある。
るろ過（特開昭５８−７３３７１号公報）など、分子量
の差を利用する方法、ヒスチジンを結合させた担体（特
開昭５７−１８３７１２号公報）などを用いて、パイロ
ジエンを吸着させる方法などがある。
【０００７】また、特開平２−１９３９１３号公報に
は、金属イオンを配位させた担体に生理活性物質を吸着
させ、その後洗浄によりパイロジエンを除去した後、更
に前記生理活性物質を緩衝液で溶出させることにより、
パイロジエンを含まない生理活性物質を緩衝液で溶出さ
せて、パイロジエンを含まない生理活性物質を得る方法
が記載されている。
は、金属イオンを配位させた担体に生理活性物質を吸着
させ、その後洗浄によりパイロジエンを除去した後、更
に前記生理活性物質を緩衝液で溶出させることにより、
パイロジエンを含まない生理活性物質を緩衝液で溶出さ
せて、パイロジエンを含まない生理活性物質を得る方法
が記載されている。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、前述し
た方法は、いずれも繰りかえし操作を行う必要があるた
め工程が複雑となってしまい、低コストで簡便にパイロ
ジエンを除去することが可能な方法ではなかった。
た方法は、いずれも繰りかえし操作を行う必要があるた
め工程が複雑となってしまい、低コストで簡便にパイロ
ジエンを除去することが可能な方法ではなかった。
【０００９】特に、溶液が高粘性（２万〜６万センチト
ークス）の場合、この高粘性溶液中に混入されているパ
イロジエンは、前記特開昭５８−７３３７１号公報の方
法による場合、細かいフィルターでは溶液が通過でき
ず、粗いフィルターでは、パイロジエンも通過するの
で、溶液からのパイロジエンの除去は困難であった。ま
た前述した特開昭５７−１８３７１２号公報及び特開平
２−１９３９１３号公報の方法でも、最終的にフィルタ
ーを通過させることが必要であるが、細かいフィルター
では、溶液が通過できず、粗いフィルターでは、パイロ
ジエンを吸着した物質も通過するので、溶液からのパイ
ロジエンの除去は困難であった。
ークス）の場合、この高粘性溶液中に混入されているパ
イロジエンは、前記特開昭５８−７３３７１号公報の方
法による場合、細かいフィルターでは溶液が通過でき
ず、粗いフィルターでは、パイロジエンも通過するの
で、溶液からのパイロジエンの除去は困難であった。ま
た前述した特開昭５７−１８３７１２号公報及び特開平
２−１９３９１３号公報の方法でも、最終的にフィルタ
ーを通過させることが必要であるが、細かいフィルター
では、溶液が通過できず、粗いフィルターでは、パイロ
ジエンを吸着した物質も通過するので、溶液からのパイ
ロジエンの除去は困難であった。
【００１０】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、上述
した従来技術の問題点を解決し、高粘性溶液に対しても
簡便且つ低コストでパイロジエンを除去することができ
る溶液中のパイロジエン除去方法を提供することにあ
る。
した従来技術の問題点を解決し、高粘性溶液に対しても
簡便且つ低コストでパイロジエンを除去することができ
る溶液中のパイロジエン除去方法を提供することにあ
る。
【００１１】
【課題を解決するための手段】本発明者は鋭意研究の結
果、特定のｐＨ領域で正に帯電したフィルターが上記パ
イロジエンの除去に極めて効果的であることを見出し、
更には、このようなフィルターのパイロジエン除去効果
は、パイロジエンを含有する溶液が高い粘性を有する場
合にも実質的に減殺されないことを見出した。
果、特定のｐＨ領域で正に帯電したフィルターが上記パ
イロジエンの除去に極めて効果的であることを見出し、
更には、このようなフィルターのパイロジエン除去効果
は、パイロジエンを含有する溶液が高い粘性を有する場
合にも実質的に減殺されないことを見出した。
【００１２】本発明のパイロジエン除去方法は上記知見
に基くものであり、より詳しくは、パイロジエンを含有
し、３７℃において２万〜６万センチストークスの粘度
を有する溶液を、ｐＨ６〜１０において溶液中で正に帯
電したフィルターに通すことにより、前記溶液からパイ
ロジエンを除去することを特徴とするものである。
に基くものであり、より詳しくは、パイロジエンを含有
し、３７℃において２万〜６万センチストークスの粘度
を有する溶液を、ｐＨ６〜１０において溶液中で正に帯
電したフィルターに通すことにより、前記溶液からパイ
ロジエンを除去することを特徴とするものである。
【００１３】以下、本発明を詳細に説明する。 （パイロジエン含有溶液）本発明の方法を適用可能なパ
イロジエン含有溶液の種類等は特に制限されないが、本
発明の方法は、粘弾性物質を（例えば主成分として）含
む溶液に、特に好ましく適用される。このような粘弾性
物質の例としては、ヒアルロン酸ナトリウム、セルロー
ス類、コンドロイチン硫酸等が挙げられる。上記セルロ
ース類としては、メチルセルロース、ヒドロキシプロピ
ルメチルセルロース等が挙げられる。
イロジエン含有溶液の種類等は特に制限されないが、本
発明の方法は、粘弾性物質を（例えば主成分として）含
む溶液に、特に好ましく適用される。このような粘弾性
物質の例としては、ヒアルロン酸ナトリウム、セルロー
ス類、コンドロイチン硫酸等が挙げられる。上記セルロ
ース類としては、メチルセルロース、ヒドロキシプロピ
ルメチルセルロース等が挙げられる。
【００１４】これらの粘弾性物質ないし高分子物質の好
ましい濃度は、用いられる物質によって各々異なるが、
例えばヒアルロン酸ナトリウムは１〜２％程度（特に１
％程度）、メチルセルロース及びヒドロキシプロピルメ
チルセルロースは、２〜５％程度（特に２％程度）、コ
ンドロイチン硫酸は、２０〜５０％程度である。これら
の粘弾性物質の溶液のｐＨは、通常は弱酸性か弱塩基性
（より具体的にはｐＨ６〜８）であることが好ましい。
ましい濃度は、用いられる物質によって各々異なるが、
例えばヒアルロン酸ナトリウムは１〜２％程度（特に１
％程度）、メチルセルロース及びヒドロキシプロピルメ
チルセルロースは、２〜５％程度（特に２％程度）、コ
ンドロイチン硫酸は、２０〜５０％程度である。これら
の粘弾性物質の溶液のｐＨは、通常は弱酸性か弱塩基性
（より具体的にはｐＨ６〜８）であることが好ましい。
【００１５】本発明のパイロジエン除去方法は、パイロ
ジエンを含有する溶液が比較的高粘度、より具体的には
３７℃における粘度が２万センチストークス以上（更に
は２万〜６万センチストークス程度）である場合にも、
そのパイロジエン除去効果が実質的に減殺されないの
で、特に効果的に用いられる。
ジエンを含有する溶液が比較的高粘度、より具体的には
３７℃における粘度が２万センチストークス以上（更に
は２万〜６万センチストークス程度）である場合にも、
そのパイロジエン除去効果が実質的に減殺されないの
で、特に効果的に用いられる。
【００１６】本発明において、上記粘度の測定は、例え
ばコーン・プレート型回転粘度計を用い回転数０．５，
１，２，５，１０，２０，５０，１００ｒｐｍの粘度を
測定し、ずり速度−粘度の対数の関係から、見かけ上の
回転粘度として測定することが可能である。
ばコーン・プレート型回転粘度計を用い回転数０．５，
１，２，５，１０，２０，５０，１００ｒｐｍの粘度を
測定し、ずり速度−粘度の対数の関係から、見かけ上の
回転粘度として測定することが可能である。
【００１７】本発明においては、上記したパイロジエン
含有溶液に、必要に応じて、等張化剤、緩衝化剤等の添
加剤を添加することができる。
含有溶液に、必要に応じて、等張化剤、緩衝化剤等の添
加剤を添加することができる。
【００１８】等張化剤としては、例えば、塩化ナトリウ
ム、塩化カリウム等の公知の無機塩類が用いられる。
ム、塩化カリウム等の公知の無機塩類が用いられる。
【００１９】緩衝化剤としては、例えば、リン酸一カリ
ウム−リン酸二カリウム、リン酸一ナトリウム−リン酸
二ナトリウム、ホウ酸−ホウ砂等が用いられる。
ウム−リン酸二カリウム、リン酸一ナトリウム−リン酸
二ナトリウム、ホウ酸−ホウ砂等が用いられる。
【００２０】（フィルター）本発明のパイロジエン除去
方法において用いられる「ｐＨ６〜１０で正に帯電した
フィルター」としては、通常はメンブレンフィルターが
好ましく用いられる。本発明において、上記フィルター
がｐＨ６〜１０において正に帯電していることは、例え
ば該ｐＨ領域において、上記フィルターのゼータ電位を
測定することにより確認することが可能である。このゼ
ータ電位の測定に関しては文献（セラミックス，１９，
Ｎｏ.１，３８〜４２ｐ(１９８４)）を参照することが
できる。
方法において用いられる「ｐＨ６〜１０で正に帯電した
フィルター」としては、通常はメンブレンフィルターが
好ましく用いられる。本発明において、上記フィルター
がｐＨ６〜１０において正に帯電していることは、例え
ば該ｐＨ領域において、上記フィルターのゼータ電位を
測定することにより確認することが可能である。このゼ
ータ電位の測定に関しては文献（セラミックス，１９，
Ｎｏ.１，３８〜４２ｐ(１９８４)）を参照することが
できる。
【００２１】「ｐＨ６〜１０で正に帯電したフィルタ
ー」を得る方法は特に制限されないが、該フィルターと
しては、ポリアミド樹脂（例えばナイロン−６６）を一
成分とする共重合体からなる膜が好ましく用いられる。
一例として、ナイロン−６６（ポリアミド樹脂）に少量
のエポキシ樹脂を加えて交叉結合(crosslinking)させて
なる膜（メンブレン）が好ましく用いられる。上記メン
ブレンフィルターとしては市販のフィルターを使用する
ことも可能である。このような市販フィルターとして
は、例えば日本ポール（株）製の「ポジダインフィルタ
ー（商品名）」が挙げられる。
ー」を得る方法は特に制限されないが、該フィルターと
しては、ポリアミド樹脂（例えばナイロン−６６）を一
成分とする共重合体からなる膜が好ましく用いられる。
一例として、ナイロン−６６（ポリアミド樹脂）に少量
のエポキシ樹脂を加えて交叉結合(crosslinking)させて
なる膜（メンブレン）が好ましく用いられる。上記メン
ブレンフィルターとしては市販のフィルターを使用する
ことも可能である。このような市販フィルターとして
は、例えば日本ポール（株）製の「ポジダインフィルタ
ー（商品名）」が挙げられる。
【００２２】上述したように、所定のｐＨ領域（ｐＨ３
〜１０、特にｐＨ６〜１０）において溶液中で正に帯電
しているフィルターを用いた場合、その静電吸着力に基
づき、本来のフィルターの定格ろ過精度よりはるかに小
さいパイロジエン（例えば溶液中で負に帯電したパイロ
ジエン）を除去することが可能となると推定される。
〜１０、特にｐＨ６〜１０）において溶液中で正に帯電
しているフィルターを用いた場合、その静電吸着力に基
づき、本来のフィルターの定格ろ過精度よりはるかに小
さいパイロジエン（例えば溶液中で負に帯電したパイロ
ジエン）を除去することが可能となると推定される。
【００２３】本発明において、ｐＨ６〜１０で正に帯電
したフィルターの定格ろ過精度（μｍ）は、０．６５〜
３．０であることが好ましい。この定格ろ過精度が０．
６５未満では溶液の粘度が比較的高い場合に目づまりを
起こし易く、得られたろ液の粘性が低下するおそれがあ
り、一方、３．０を越えるとパイロジエン除去効率が不
充分となり易い。特に、パイロジエンを含有する溶液が
粘度２０，０００〜６０，０００センチストークスの高
粘性溶液の場合には、定格ろ過精度は０．８μｍ以上
１．２μｍ以下であることがより好ましい。
したフィルターの定格ろ過精度（μｍ）は、０．６５〜
３．０であることが好ましい。この定格ろ過精度が０．
６５未満では溶液の粘度が比較的高い場合に目づまりを
起こし易く、得られたろ液の粘性が低下するおそれがあ
り、一方、３．０を越えるとパイロジエン除去効率が不
充分となり易い。特に、パイロジエンを含有する溶液が
粘度２０，０００〜６０，０００センチストークスの高
粘性溶液の場合には、定格ろ過精度は０．８μｍ以上
１．２μｍ以下であることがより好ましい。
【００２４】上述したようなｐＨ６〜１０で正に帯電し
ているフィルターに代えて、同ｐＨ領域で負に帯電した
メンブレンフィルターを用いた場合、負に帯電している
パイロジエンとは静電吸着が起らないので、静電吸着に
よっては該パイロジエンを除去することができない。し
たがって負帯電のメンブレンフィルターを用いて上記パ
イロジエンを除去するには、０．４５μｍ以下の定格ろ
過精度のフィルターを用いることが必要となる。ところ
が、定格ろ過精度が０．４５μｍ以下のメンブレンフィ
ルターを用いた場合は、高粘性溶液をろ過しようとする
と目づまりが極めて生じ易いため、高粘性溶液のろ過は
極めて困難である。
ているフィルターに代えて、同ｐＨ領域で負に帯電した
メンブレンフィルターを用いた場合、負に帯電している
パイロジエンとは静電吸着が起らないので、静電吸着に
よっては該パイロジエンを除去することができない。し
たがって負帯電のメンブレンフィルターを用いて上記パ
イロジエンを除去するには、０．４５μｍ以下の定格ろ
過精度のフィルターを用いることが必要となる。ところ
が、定格ろ過精度が０．４５μｍ以下のメンブレンフィ
ルターを用いた場合は、高粘性溶液をろ過しようとする
と目づまりが極めて生じ易いため、高粘性溶液のろ過は
極めて困難である。
【００２５】（フィルターによるろ過）本発明において
は、上記したようなフィルターでパイロジエン含有溶液
をろ過する際、温度を高くすると上記溶液の見かけ上の
粘度が低下するため、目づまりを起こしにくくなりろ過
速度が速くなる。また、本発明者の知見によれば、正に
帯電させたフィルターの有するパイロジエンの除去効果
は、温度を高くすることにより向上する。したがって、
正に帯電させたフィルターを用いる際のろ過温度は、そ
のフィルターの特性の変化及び溶液の主成分（例えば高
分子物質）の特性が変化を生じない範囲内において、で
きるだけ高いことが好ましい。このろ過温度の好ましい
範囲は、用いるフィルターおよび溶液の成分の種類によ
って変動するが、通常は３０〜８０℃（更には５０〜８
０℃）の範囲が好ましい。
は、上記したようなフィルターでパイロジエン含有溶液
をろ過する際、温度を高くすると上記溶液の見かけ上の
粘度が低下するため、目づまりを起こしにくくなりろ過
速度が速くなる。また、本発明者の知見によれば、正に
帯電させたフィルターの有するパイロジエンの除去効果
は、温度を高くすることにより向上する。したがって、
正に帯電させたフィルターを用いる際のろ過温度は、そ
のフィルターの特性の変化及び溶液の主成分（例えば高
分子物質）の特性が変化を生じない範囲内において、で
きるだけ高いことが好ましい。このろ過温度の好ましい
範囲は、用いるフィルターおよび溶液の成分の種類によ
って変動するが、通常は３０〜８０℃（更には５０〜８
０℃）の範囲が好ましい。
【００２６】例えば、ヒアルロン酸ナトリウム水溶液
（ＰＨは約７）に混入しているパイロジエンを除去する
ためのろ過温度は、８０℃以下で、且つできる限り８０
℃に近い温度が好ましい。８０℃を超えた温度でろ過し
た場合、ヒアルロン酸ナトリウム水溶液の粘性が低下
し、ヒアルロン酸ナトリウムの物性が変化してしまうお
それがある。
（ＰＨは約７）に混入しているパイロジエンを除去する
ためのろ過温度は、８０℃以下で、且つできる限り８０
℃に近い温度が好ましい。８０℃を超えた温度でろ過し
た場合、ヒアルロン酸ナトリウム水溶液の粘性が低下
し、ヒアルロン酸ナトリウムの物性が変化してしまうお
それがある。
【００２７】ろ過速度はろ過時の圧力を高くすることに
より、速くなるので、正に帯電させたフィルターにより
パイロジエンを除去する際の最大ろ過圧力は、上記フィ
ルターの許容耐差圧（ｋｇ／ｃｍ2 ）範囲内で、できる
だけ高いほうが好ましい。この場合、ろ過の初期の段階
においてはろ過圧力をやや低い値（例えば１ｋｇ／ｃｍ
2）とし、ろ過速度の低下に対応して徐々に（段階的に
あるいは連続的に）ろ過圧力を最大ろ過圧力（許容耐圧
差）に至るまで増大させることが好ましい。より具体的
には、例えば、１ｋｇ／ｃｍ2→２ｋｇ／ｃｍ2→３ｋｇ
／ｃｍ2→最大ろ過圧力のように、ろ過圧力を変化させ
ることが好ましい。例えば、前述した日本ポール（株）
製の「ポジダイン・フィルター」においては、許容耐圧
差は５０〜８０℃では４．２ｋｇ／ｃｍ2 であり、５０
℃以下では、５．６ｋｇ／ｃｍ2 である。
より、速くなるので、正に帯電させたフィルターにより
パイロジエンを除去する際の最大ろ過圧力は、上記フィ
ルターの許容耐差圧（ｋｇ／ｃｍ2 ）範囲内で、できる
だけ高いほうが好ましい。この場合、ろ過の初期の段階
においてはろ過圧力をやや低い値（例えば１ｋｇ／ｃｍ
2）とし、ろ過速度の低下に対応して徐々に（段階的に
あるいは連続的に）ろ過圧力を最大ろ過圧力（許容耐圧
差）に至るまで増大させることが好ましい。より具体的
には、例えば、１ｋｇ／ｃｍ2→２ｋｇ／ｃｍ2→３ｋｇ
／ｃｍ2→最大ろ過圧力のように、ろ過圧力を変化させ
ることが好ましい。例えば、前述した日本ポール（株）
製の「ポジダイン・フィルター」においては、許容耐圧
差は５０〜８０℃では４．２ｋｇ／ｃｍ2 であり、５０
℃以下では、５．６ｋｇ／ｃｍ2 である。
【００２８】以下、実施例により本発明を説明するが、
本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
【００２９】
【実施例】実施例１ 粘弾性物質であるヒアルロン酸ナトリウム１０ｇを注射
用水９９０ｇに溶解し、高粘性の１％ヒアルロン酸ナト
リウム水溶液（３７℃における粘度４１，０００センチ
ストークス、ｐＨ＝６．０）を調製した。
用水９９０ｇに溶解し、高粘性の１％ヒアルロン酸ナト
リウム水溶液（３７℃における粘度４１，０００センチ
ストークス、ｐＨ＝６．０）を調製した。
【００３０】ｐＨ６〜１０において正に帯電するディス
クメンブレンフィルター（定格ろ過精度０．８μｍ，直
径１４２ｍｍ、日本ポール（株）製のポジダインフィル
ター（商品名））を用い、ろ過温度（高粘性水溶液の液
温）２５℃の条件で上記ヒアルロン酸ナトリウム水溶液
のろ過を行った。この際のろ過圧力は、当初は１ｋｇ／
ｃｍ2とし、ろ過速度の低下に応じて、徐々に４．２ｋ
ｇ／ｃｍ2（最大ろ過圧力）まで変化させた。
クメンブレンフィルター（定格ろ過精度０．８μｍ，直
径１４２ｍｍ、日本ポール（株）製のポジダインフィル
ター（商品名））を用い、ろ過温度（高粘性水溶液の液
温）２５℃の条件で上記ヒアルロン酸ナトリウム水溶液
のろ過を行った。この際のろ過圧力は、当初は１ｋｇ／
ｃｍ2とし、ろ過速度の低下に応じて、徐々に４．２ｋ
ｇ／ｃｍ2（最大ろ過圧力）まで変化させた。
【００３１】ろ過前後のエンドトキシン量（パイロジエ
ン量）と粘度を下記表１に示す。実施例２ ろ過温度を７０℃とした以外は、実施例１と同様の方法
でヒアルロン酸ナトリウム水溶液のろ過を行った。
ン量）と粘度を下記表１に示す。実施例２ ろ過温度を７０℃とした以外は、実施例１と同様の方法
でヒアルロン酸ナトリウム水溶液のろ過を行った。
【００３２】実施例３ ろ過温度を８０℃とした以外は、実施例１と同様の方法
でヒアルロン酸ナトリウム水溶液のろ過を行った。
でヒアルロン酸ナトリウム水溶液のろ過を行った。
【００３３】比較例１ 実施例１で用いた正帯電のフィルターに代えて、正に帯
電していない通常のディスク・メンブレンフィルター
（日本ポール（株）製のメンブレンディスク（商品
名））を用いた以外は、実施例１と同様の方法でヒアル
ロン酸ナトリウム水溶液のろ過を行った。
電していない通常のディスク・メンブレンフィルター
（日本ポール（株）製のメンブレンディスク（商品
名））を用いた以外は、実施例１と同様の方法でヒアル
ロン酸ナトリウム水溶液のろ過を行った。
【００３４】
【表１】
【００３５】上記表１から明らかなように、実施例１〜
３で用いた「ｐＨ６〜１０で正に帯電したフィルター」
は比較例１で用いた通常のフィルターに比べ、パイロジ
エン（エンドトキシン）除去効果が優れている。
３で用いた「ｐＨ６〜１０で正に帯電したフィルター」
は比較例１で用いた通常のフィルターに比べ、パイロジ
エン（エンドトキシン）除去効果が優れている。
【００３６】また、上記表１から明らかなように、ろ過
温度を高くすることにより、パイロジエン除去効果は増
大する。
温度を高くすることにより、パイロジエン除去効果は増
大する。
【００３７】エンドトキシン量測定方法 上述したヒアルロン酸ナトリウム水溶液中のパイロジエ
ンたるエンドトキシンの量は、市販の血漿中エンドトキ
シン定量試薬キット、エンドトキシンテスト−Ｄ（生化
学工業社製）を用いた比色法より測定した。
ンたるエンドトキシンの量は、市販の血漿中エンドトキ
シン定量試薬キット、エンドトキシンテスト−Ｄ（生化
学工業社製）を用いた比色法より測定した。
【００３８】より具体的には、実施例１で調製した１％
ヒアルロン酸ナトリウム水溶液を１０倍希釈し、検体を
調製した。上記エンドトキシンテスト−Ｄの反応管（主
剤）に、同キットに付属の緩衝液１００μｌを加え、直
ちに上記検体１００μｌを加えて、３７℃で３０分後イ
ンキュベートした後５４５ｎｍの吸光度を測定した。上
記と同様の操作はエンドトキシン標準液に対して行な
い、検量線を求めた。エンドトキシン標準液に基づく検
量線を用いて上記検体中のエンドトキシン量を求め、そ
の結果を１０倍して、上述した１％ヒアルロン酸ナトリ
ウム水溶液中のエンドトキシン量を算出した。
ヒアルロン酸ナトリウム水溶液を１０倍希釈し、検体を
調製した。上記エンドトキシンテスト−Ｄの反応管（主
剤）に、同キットに付属の緩衝液１００μｌを加え、直
ちに上記検体１００μｌを加えて、３７℃で３０分後イ
ンキュベートした後５４５ｎｍの吸光度を測定した。上
記と同様の操作はエンドトキシン標準液に対して行な
い、検量線を求めた。エンドトキシン標準液に基づく検
量線を用いて上記検体中のエンドトキシン量を求め、そ
の結果を１０倍して、上述した１％ヒアルロン酸ナトリ
ウム水溶液中のエンドトキシン量を算出した。
【００３９】
【発明の効果】上述したように本発明のパイロジエン除
去方法によれば、高粘性の溶液中に混入したパイロジエ
ンを簡便に且つ低コストで除去することができる。
去方法によれば、高粘性の溶液中に混入したパイロジエ
ンを簡便に且つ低コストで除去することができる。
Claims (2)
- 【請求項１】 パイロジエンを含有し、３７℃において
２万〜６万センチストークスの粘度を有する溶液を、ｐ
Ｈ６〜１０において溶液中で正に帯電したフィルターに
通すことにより、前記溶液からパイロジエンを除去する
ことを特徴とするパイロジエンの除去方法。 - 【請求項２】 前記パイロジエンを含有する溶液がヒア
ルロン酸塩の溶液であることを特徴とする請求項１記載
のパイロジエンの除去方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35875292A JPH06199656A (ja) | 1992-12-28 | 1992-12-28 | パイロジエンの除去方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP35875292A JPH06199656A (ja) | 1992-12-28 | 1992-12-28 | パイロジエンの除去方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06199656A true JPH06199656A (ja) | 1994-07-19 |
Family
ID=18460934
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP35875292A Pending JPH06199656A (ja) | 1992-12-28 | 1992-12-28 | パイロジエンの除去方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06199656A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1989000209A1 (en) * | 1987-06-29 | 1989-01-12 | Carondelet Foundry Company | Corrosion resistant alloy |
| EP0867453A2 (en) * | 1997-03-27 | 1998-09-30 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | A method of purifying sodium hyaluronate |
| JP2008266524A (ja) * | 2007-04-24 | 2008-11-06 | Hisamitsu Pharmaceut Co Inc | 薬液の滅菌方法、並びにプレフィルドシリンジ及びその製造方法 |
| US7575914B2 (en) | 2002-08-19 | 2009-08-18 | Kolon Life Science, Inc. | Microorganism producing hyaluronic acid and purification method of hyaluronic acid |
-
1992
- 1992-12-28 JP JP35875292A patent/JPH06199656A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1989000209A1 (en) * | 1987-06-29 | 1989-01-12 | Carondelet Foundry Company | Corrosion resistant alloy |
| EP0867453A2 (en) * | 1997-03-27 | 1998-09-30 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | A method of purifying sodium hyaluronate |
| EP0867453A3 (en) * | 1997-03-27 | 1999-01-20 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | A method of purifying sodium hyaluronate |
| US7575914B2 (en) | 2002-08-19 | 2009-08-18 | Kolon Life Science, Inc. | Microorganism producing hyaluronic acid and purification method of hyaluronic acid |
| JP2008266524A (ja) * | 2007-04-24 | 2008-11-06 | Hisamitsu Pharmaceut Co Inc | 薬液の滅菌方法、並びにプレフィルドシリンジ及びその製造方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Ogston et al. | On the state of hyaluronic acid in synovial fluid | |
| EP2289945B1 (fr) | Réticulation de hyaluronates de sodium de faible et forte masse moléculaire; préparation d'hydrogels monophasiques injectables; hyaluronate de sodium rétioculé et hydrogel ainsi obtenus | |
| JPH05508417A (ja) | ビスコ―サージェリイ用のコラーゲンを基材とする粘弾性溶液 | |
| FR2878444A1 (fr) | Solutions viscoelastiques renfermant du hyaluronate de sodiu et de l'hydroxypropylmethylcellulose, preparation et utilisations | |
| US5492936A (en) | Bimodal molecular weight hyaluronate formulations and methods for using same | |
| JP2009536232A (ja) | オクラの莢から単離したペクチンの多糖類 | |
| CN110124117B (zh) | 一种可注射水凝胶及其制备方法 | |
| US7125967B2 (en) | Water-soluble chitosan having low endotoxin concentration and methods for making and using the same | |
| Reed et al. | Enhancement of ocular in situ gelling properties of low acyl gellan gum by use of ion exchange | |
| Winkeljann et al. | Macromolecular coatings enhance the tribological performance of polymer‐based lubricants | |
| WO2012013895A1 (fr) | Particules formees d'un complexe polyelectrolyte de chitosane et d'un polysaccharide anionique, presentant une stabilite amelioree | |
| US6017764A (en) | Erythrocyte sedimentation rate control | |
| JPH06199656A (ja) | パイロジエンの除去方法 | |
| JP2007525515A (ja) | アルギネートの粘弾性組成物、その使用法及びパッケージ | |
| Yu et al. | A bioinspired synthetic soft hydrogel for the treatment of dry eye | |
| KR20060131938A (ko) | 점탄성 조성물을 포함하는 신규한 유리-라디칼 제거제,사용 방법 및 패키지 | |
| NO300016B1 (no) | Karboksyvinylpolymer som har newtonsk viskositet, fremgangsmåte for fremstilling av denne, oftalmiske preparater og bærer for disse | |
| JP3751017B2 (ja) | 二頂分子量ヒアルロネート製剤およびその使用方法 | |
| Tanaka et al. | Relationship between postoperative intraocular pressure elevation and residual sodium hyaluronate following phacoemulsification and aspiration | |
| Izak et al. | Calcification on the surface of the Bausch & Lomb Hydroview intraocular lens | |
| BR112021001515A2 (pt) | método para filtração dinâmica de um hidrogel reticulado | |
| BRPI0215189B1 (pt) | composição viscoelástica aquosa, estéril, para uso em procedimentos cirúrgicos oftálmicos | |
| JP2002193815A (ja) | 眼手術用角膜乾燥防止点眼剤 | |
| JP2010106015A (ja) | 点眼剤 | |
| JP3509829B2 (ja) | 抗凝血材料 |