JPH06197772A - 有機酸及びエタノールの製造方法及びそれに用いる複合型リアクター - Google Patents
有機酸及びエタノールの製造方法及びそれに用いる複合型リアクターInfo
- Publication number
- JPH06197772A JPH06197772A JP5014411A JP1441193A JPH06197772A JP H06197772 A JPH06197772 A JP H06197772A JP 5014411 A JP5014411 A JP 5014411A JP 1441193 A JP1441193 A JP 1441193A JP H06197772 A JPH06197772 A JP H06197772A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- reactor
- ethanol
- lactic acid
- bacterium
- carbohydrate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02E—REDUCTION OF GREENHOUSE GAS [GHG] EMISSIONS, RELATED TO ENERGY GENERATION, TRANSMISSION OR DISTRIBUTION
- Y02E50/00—Technologies for the production of fuel of non-fossil origin
- Y02E50/10—Biofuels, e.g. bio-diesel
Landscapes
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
加水分解生成物を発酵菌で発酵させる帯域とを別個に設
け、各帯域における培養液からそれぞれの菌体を分離除
去したのち、培養液のみを各帯域間に循環させることに
より、炭水化物から有機酸及びエタノールを製造する。 【効果】 炭水化物の同時糖化発酵に際し、糖化菌と発
酵菌とをそれぞれの至適条件下が別個に培養しうる上、
各培養条件の制御を容易に行いうるので、効率よくエタ
ノールや乳酸を製造することができる。
Description
ンを発酵させて効率よく乳酸やエタノールを製造する方
法及びそれに用いるリアクターに関するものである。さ
らに詳しくいえば、本発明は、好気性菌と嫌気性菌を別
々のリアクターにおいて、それぞれの最適条件下で培養
しながら、基質のみをその両方のリアクター間に循環さ
せながら、炭水化物の加水分解すなわち糖化と、それに
よって生成するオリゴ糖の発酵を別々のリアクターで同
時に行うことにより、効率よく乳酸やエタノールを製造
する方法及びそのためのリアクターに関するものであ
る。
やエタノールを製造するには、炭水化物を糖化する菌
と、糖化により生成したオリゴ糖を発酵するための菌と
を1つのリアクター内で混合培養し、これに基質を供給
して同時に糖化発酵する方法が行われている。
は、その種類ごとに異なるため、2種以上の菌を混合培
養する場合には、各菌株の増殖状態を個々に把握するこ
とが困難であり、したがって個々の菌株の生育に適した
環境制御を行うことができず、各菌株の能力を十分に発
揮させることができなかった。この傾向は、特に好気性
菌と嫌気性菌の場合に顕著であり、好気性菌の最適条件
を選べば嫌気性菌の活性が低下し、逆に嫌気性菌の最適
条件を選べば好気性菌の活性が低下するため両者の活性
を同時に高めるという培養条件を設定することは不可能
であった。
om)らは、サッカロミコプシス・フィブリガー(Sa
ccharomycopsis fibuliger)
とラクトコッカス・ラクティス(Lactococcu
s lactic)との混合培養で、可溶性デンプンか
ら有機酸とエタノールを製造する方法を提案している
が、15.0g/Lのデンプンから1.4g/LのL‐
乳酸が得られたにすぎず、全生成物の収率は0.35〜
0.40にすぎない[「アプライド・マイクロバイオロ
ジカル・バイオテクノロジー(Appl.Microb
iol.Biotechnol.)」、第12巻、第2
16〜219ページ(1981)]。また黒沢らは、ア
スペルギルス・アワモリ(Aspergilus aw
amori)とラクトコッカス・ラクティスとを共同固
定化培養して、可溶性デンプンから乳酸を製造する方法
を提案しているが、この方法においても乳酸の生産収率
は0.66にすぎなかった。
従来の同時糖化発酵法の欠点を克服し、2種以上の菌株
を用いた培養において、それぞれの菌株をその最適条件
下で培養させ、所望の物質を効率よく生成させることを
目的としてなされたものである。
を同時糖化発酵させて、乳酸及びエタノールを高収率で
得る方法について種々研究を重ねた結果、炭水化物を加
水分解する好気性菌と、それによって生成したオリゴ糖
を乳酸及びエタノールに変換する嫌気性菌をそれぞれ別
々の帯域において、それらの最適条件下で培養し、それ
らの帯域の間を基質のみ循環させて同時培養することに
より、その目的を達成しうることを見出し、この知見に
基づいて本発明をなすに至った。
び乳酸菌を用いて同時糖化発酵させ、乳酸及びエタノー
ルを製造するに当り、前記糖化菌と発酵菌をそれぞれ別
個の発酵帯域において培養し、それぞれの培養液から、
その中に含まれている各菌体を除去したのち、両帯域間
を循環させることを特徴とする有機酸及びエタノールの
製造方法及びこの方法を好適に実施するための、炭水化
物を加水分解する好気性菌を収容した、空気供給手段を
備えた第一リアクター、オリゴ糖から有機酸又はエタノ
ールを発酵生産する嫌気性菌を収容した第二リアクタ
ー、第一リアクターの培養液を第二リアクターへ循環さ
せる導管、第二リアクターの培養液を第一リアクターへ
菌体分離手段を介して循環させる導管及びこれら導管に
それぞれ連結した培養液を強制循環させるための送液ポ
ンプから構成された複合型リアクターを提供するもので
ある。
は、アスペルギルス・アワモリが好適であるが、そのほ
か炭水化物すなわちデンプンを加水分解してグルコース
やマルトースのようなオリゴ糖に変換しうる好気性菌で
あればどのようなものも用いることができる。また嫌気
性菌としてはラクトコッカス・ラクティスが好適である
が、そのほかグルコースやマルトースのようなオリゴ糖
を発酵して乳酸やエタノールを生成しうる嫌気性菌であ
ればどのようなものも用いることができる。
る炭水化物には、例えばバレイショデンプン、カンショ
デンプン、トウモロコシデンプンなどのデンプン類が含
まれるが、そのほかこれまで農産物加工廃棄物として未
利用のまま処分されていたバレイショ残渣なども用いる
ことができる。
の1例を説明する。図1は、本発明の複合型リアクター
の要部を示す系統図であって、このものは、好気性菌を
収容した第一リアクター1と嫌気性菌を収容した第二リ
アクター2から構成され、第一リアクター1は、空気供
給手段3が備えられている。これらの2個のリアクター
1,2はそれぞれ管路4,6及び管路4′,6′によっ
て連結され、管路4と6及び管路4′と6′の間にはそ
れぞれ菌体分離手段7,7′例えば限外ろ過膜モジュー
ルが配設され、そこで各リアクターからの培養液中の菌
体が完全に除去され、この菌体はそれぞれ管路5又は
5′を通って各リアクターに戻される。8は、各培養液
を引制循環させるための送液ポンプである。
明方法を実施するには、第一リアクター1において好気
性菌例えばアスペルギルス・アワモリを培養し、第二リ
アクター2において嫌気性菌例えばラクトコッカス・ラ
クティスを培養する。この各培養に使用する栄養培地の
組成は従来使用されているものと同じで差しつえない。
次に、この第一リアクター1に炭水化物を装入し、液を
循環させながら反応を行わせる。この際の炭水化物濃度
は、系全体に基づき1〜5%程度が適当である。
二リアクター2のそれぞれの培養条件をその中の各菌株
の最適条件に設定し、数時間ないし数10時間培養を継
続することにより、消費原料当りの生産収率0.72又
はそれ以上の高い効率で乳酸又はエタノールを製造する
ことができる。
明する。
L容のリアクター(Fine、四口セパラブルフラス
コ)A及びBをチューブで接続し、その間に送液ポンプ
(Cole‐Parmer Instrument C
o.、Master‐flex、PA‐21B)を組み
込み、ポンプの出口側に分画分子量3×106の限外ろ
過(UF)膜(トーソー、UF‐3000PS)を装着
したUFモジュール(同上、Model SC‐60)
を組み入れたものを用いた。
のアスペルギルス・アワモリ(Aspergillus
awamori IFO 4033)を使用した。ポ
テトデキストロース寒天培地(日水製薬、05707)
に植菌し、30℃で5日間培養して胞子を形成させた後
4℃で冷蔵した。グルコース及びマルトースを乳酸に変
換する菌として、嫌気性のラクトコッカス・ラクティス
(Lactococcus lactis IFO 1
2007)を使用した。GAMブイヨン(日水製薬、0
5422)に寒天1.5%を添加した培地に穿刺培養
し、嫌気的に30℃で24時間培養した後、4℃で保存
した。これらの菌は1ケ月毎に植え替えた。ラクトコッ
カス・ラクティスを賦活するためグルコース2%、トリ
プトン0.5%、酵母抽出物0.5%、カサミノ酸0.
1%、K2HPO40.25%、KH2PO40.25
%、MgSO4・7H2O 0.05%及び2‐(N‐
モジュールモルホリノ)エタンスルホン酸(MES、同
仁)2%で構成される増殖培地(pH6.5)10ml
の入った試験管に保存培地から植菌し、30℃で24時
間静止培養した。その後、同増殖培地200mLの入っ
た500mL容の三角フラスコに移し、30℃で16時
間静止培養した。これを集菌し生産培地に供した。
及びBにそれぞれアスペルギルス・アワモリ及びラクト
コッカス・ラクティスを培養した。生産培地の組成はト
リプトン0.5%、酵母抽出物0.5%、カサミノ酸
0.1%、KH2PO40.1%、MgSO4・7H2
O 0.05%で構成される。アスペルギルス・アワモ
リ側にのみ炭素源として粒状バレイショデンプン(以
下、粒状デンプンと略す)を5%入れた。同時糖化発酵
システムは2つのリアクターで構成されているので、シ
ステム全体でとらえる場合、デンプン濃度は上記の半分
となる。したがって、以下では粒状デンプン2.5%と
記述する。両培地とも初期pHを6.5に調整した。乳
酸によるpHの低下を抑止するため、リアクターA及び
BにCaCO3をそれぞれ6及び9g添加した。アスペ
ルギルス・アワモリ側のみ0.5vvmで通気しながら
マグネチックスターラーで撹拌した。アスペルギルス・
アワモリを胞子懸濁液の状態で生産培地に供して培養を
開始した。アスペルギルス・アワモリによるデンプンの
マルトース及びグルコースへの糖化が顕著になる24時
間後に、集菌したラクトコッカス・ラクティスをリアク
ターBに入れ、約240ml/hの初期透過液流量でポ
ンプによる培養液の循環を開始した。
けてアスペルギルス・アワモリが急激に増殖した。それ
にともない、12時間目から36時間目にかけてデンプ
ンからマルトースへの糖化が著しくなり、24時間目か
らグルコースへの加水分解が進んだ。この24時間目か
らラクトコッカス・ラクティスの培養とポンプによる基
質の循環を同時に始めた。マルトース及びグルコースを
乳酸に変換できるラクトコッカス・ラクティスは、36
時間目から対数増殖期に入り乳酸の生成量が急増した。
このようにして、2菌株の細胞量の個別かつ定量的な測
定に成功し、それらの細胞増殖と基質消費・代謝生産物
生成との相関関係を把握することが可能になった。
に11.3g/Lの乳酸が生成し、消費糖当りの生産収
率は0.72に達した。したがって、既往の研究よりも
本実験の方が高い収率で乳酸を生産したといえる。この
ように本研究における乳酸の収率が高かった原因には2
つの理由が考えられる。第1は、酸素要求量の異なる2
種類の菌株を別々のリアクターに入れ、それぞれに適し
た酸素供給を行ったためであると考えられる。2番目の
理由は、ラクトコッカス・ラクティス側のリアクターに
は低分子の糖類しか供給されなかったため、アスペルギ
ルス・アワモリに比べてマルトース・グルコースと菌体
との接触率が高く、これらの糖がより選択的にラクトコ
ッカス・ラクティスにより代謝されたためであると考え
られる。
用いたバレイショ残渣(川原澱粉工場、北海道士別市)
からの乳酸生産を行った。バレイショ残渣からデンプン
を抽出・濃縮したデンプン濃縮液を3%のデンプン濃度
に調整し、同時糖化発酵実験に使用した。また、UFモ
ジュールの流路のつまりを防止するために流路を約2m
m深くした。細胞増殖、基質消費及び代謝生産物生成の
経時変化は、粒状デンプンの場合とほぼ同じような傾向
を示した。培養開始から72時間後における生成乳酸濃
度は6.3g/L、消費糖当りの生産収率は0.36で
あった。
2種の菌を別個のリアクターに収容し、それぞれの最適
培養条件で培養しながら、炭水化物の同時糖化発酵を行
うことができるため、1つのリアクターによる混合培養
に比べ非常に高い収率で乳酸及びエタノールを製造する
ことができる。
ーの1例を示す系統図。
Claims (2)
- 【請求項1】 炭水化物を糖化菌及び乳酸菌を用いて同
時糖化発酵させ、乳酸及びエタノールを製造するに当
り、前記糖化菌と発酵菌をそれぞれ別個の発酵帯域にお
いて培養し、それぞれの培養液から、その中に含まれて
いる各菌体を除去したのち、両帯域間を循環させること
を特徴とする有機酸及びエタノールの製造方法。 - 【請求項2】 炭水化物を加水分解する好気性菌を収容
した、空気供給手段を備えた第一リアクター、オリゴ糖
から有機酸又はエタノールを発酵生産する嫌気性菌を収
容した第二リアクター、第一リアクターの培養液を第二
リアクターへ循環させる導管、第二リアクターの培養液
を第一リアクターへ菌体分離手段を介して循環させる導
管及びこれら導管にそれぞれ連結した培養液を強制循環
させるための送液ポンプから構成された複合型リアクタ
ー。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP01441193A JP3467521B2 (ja) | 1993-01-04 | 1993-01-04 | 乳酸の製造方法及びそれに用いる複合型リアクター |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP01441193A JP3467521B2 (ja) | 1993-01-04 | 1993-01-04 | 乳酸の製造方法及びそれに用いる複合型リアクター |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPH06197772A true JPH06197772A (ja) | 1994-07-19 |
JP3467521B2 JP3467521B2 (ja) | 2003-11-17 |
Family
ID=11860304
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP01441193A Expired - Fee Related JP3467521B2 (ja) | 1993-01-04 | 1993-01-04 | 乳酸の製造方法及びそれに用いる複合型リアクター |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
JP (1) | JP3467521B2 (ja) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009240167A (ja) * | 2008-03-28 | 2009-10-22 | Honda Motor Co Ltd | エタノールの製造方法 |
JP2009240168A (ja) * | 2008-03-28 | 2009-10-22 | Honda Motor Co Ltd | エタノールの製造方法 |
JP2011041500A (ja) * | 2009-08-20 | 2011-03-03 | Chiba Univ | 酵母Cyniclomycesguttulatusの分離・同定方法およびそれに用いるキット |
-
1993
- 1993-01-04 JP JP01441193A patent/JP3467521B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2009240167A (ja) * | 2008-03-28 | 2009-10-22 | Honda Motor Co Ltd | エタノールの製造方法 |
JP2009240168A (ja) * | 2008-03-28 | 2009-10-22 | Honda Motor Co Ltd | エタノールの製造方法 |
JP2011041500A (ja) * | 2009-08-20 | 2011-03-03 | Chiba Univ | 酵母Cyniclomycesguttulatusの分離・同定方法およびそれに用いるキット |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JP3467521B2 (ja) | 2003-11-17 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US5464760A (en) | Fermentation and recovery process for lactic acid production | |
US4044500A (en) | Integrated fermentation-photosynthesis biomass process | |
Chang et al. | High density cell culture by membrane-based cell recycle | |
Roukas et al. | Production of lactic acid from deproteinized whey by coimmobilized Lactobacillus casei and Lactococcus lactis cells | |
CN101665813A (zh) | 一种l-丙氨酸的微生物发酵生产方法 | |
Melzoch et al. | Lactic acid production in a cell retention continuous culture using lignocellulosic hydrolysate as a substrate | |
Perego et al. | Experimental study of hydrogen kinetics from agroindustrial by-product: optimal conditions for production and fuel cell feeding | |
CN102146415A (zh) | 氧化葡萄糖酸杆菌的基因敲除菌及其制备方法 | |
WO1985001064A1 (en) | Continuous fermentation process | |
Beker et al. | A simultaneous sucrose bioconversion into ethanol and levan by Zymomonas mobilis | |
Németh et al. | Investigation and modeling of lactic acid fermentation on wheat starch via SSF, CHF and SHF technology | |
Ward et al. | Production of ethanol at 45 C on starch-containing media by mixed cultures of the thermotolerant, ethanol-producing yeast Kluyveromyces marxianus IMB3 and the thermophilic filamentous fungus Talaromyces emersonii CBS 814.70 | |
Gianetto et al. | The production of ethanol from lactose in a tubular reactor by immobilized cells of Kluyveromyces fragilis | |
JP3467521B2 (ja) | 乳酸の製造方法及びそれに用いる複合型リアクター | |
WO1994013826A1 (en) | Improved pre-treatment process for lactic acid production | |
JP4170016B2 (ja) | セルロースからの乳酸製造装置および乳酸製造方法 | |
Srinivasan et al. | Continuous culture in the fermentation industry | |
EP0047641B2 (en) | Ethanol production by high performance bacterial fermentation | |
JP3958089B2 (ja) | 嫌気性菌の連続培養法 | |
JP3812019B2 (ja) | 連続発酵によるl−グルタミン酸の製造法 | |
Bojorge et al. | A semi-structured model for the growth and β-galactosidase production by fed-batch fermentation of Kluyveromyces marxianus | |
JP2002085083A (ja) | 微生物を用いた代謝生産物の製造方法 | |
Cooney | Continuous culture: A tool for research, development and production | |
US11186852B1 (en) | Low pH process for fermentation of sugars from carbohydrates for the production of organic acids and biodegradable deicers | |
Kilara et al. | Whey and lactose fermentation |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
R360 | Written notification for declining of transfer of rights |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R360 |
|
R370 | Written measure of declining of transfer procedure |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R370 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080905 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080905 Year of fee payment: 5 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090905 Year of fee payment: 6 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100905 Year of fee payment: 7 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100905 Year of fee payment: 7 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110905 Year of fee payment: 8 |
|
S111 | Request for change of ownership or part of ownership |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313113 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110905 Year of fee payment: 8 |
|
R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120905 Year of fee payment: 9 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |