JPH05509317A - 還元によるヒドロキシル保護基の直交除去及びオリゴヌクレオチドの化学合成におけるそれらの利用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 液体還元剤による還元により直交的に除去できるヒドロキシル保護基が開示され る。この新規ヒドロキシル保護基は、それらが緩試薬、たとえばジチオナイトに より保護された分子から容易に除去されるので、線状及び枝分れオリゴヌクレオ チド構造体の化学的合成において特に有用である。そのようなヒドロキシル保護 基の例は、２−メチレン−９，１０−アントラキノン（Ｍａｑ）カーボネートエ ステル及びｐ−ニトロベンジルカーボネートエステルを包含する。

手続補正書（方式） ％式％ １、事件の表示 ＰＣＴ／ＵＳ９１１０５２２７ ２、発明の名称 還元によるヒドロキシル保護基の直交除去及びオＩノゴヌクレオチドの化学合成 におけるそれらの手１１用３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 名称　チロン　コーポレーション ４、代理人 住所　〒１０５東京都港区虎ノ門−丁目８番１０号静光虎ノ門ビル　電話３５０ ４−０７２１氏名　弁理士（７７０９）宇　井　正　−フ ロ、補正の対象 明細書、請求の範囲及び要約書の翻訳文７、補正の内容 明細書、請求の範囲及び要約書の翻訳文の浄書（内容に変更なし） ８、添付書類の目録 明細書、請求の範囲及び要約書の 翻訳文　各１通 国際調査報告 一１０１Ａ□１にゴ／［１５９１１０５２２７

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １．下記構造式 ▲数式、化学式、表等があります▼（Ｉ）〔式中、ＲはＲ１又はＲ２に影響を与 えないで、液体還元剤による還元により除去され、そして置換され得るヒドロキ シル保護基であり； Ｒ１は化学合成の間、オリゴヌクレオチド鎖の５′−位置へのヌクレオチドの付 加を可能にするリン誘導体であり；Ｒ２は一般的に塩基安定性且つ酸感受性であ る保護基であり；Ｒ３は水素、メチル、ｌ，Ｂｒ及びＦから成る群から選択され ；Ｒ４は水素又はメチルであり；そして Ｚは下記基： （Ｚ）▲数式、化学式、表等があります▼（Ｚ）▲数式、化学式、表等がありま す▼（Ｚ）▲数式、化学式、表等があります▼（ｚ）▲数式、化学式、表等があ ります▼（Ｚ）▲数式、化学式、表等があります▼及び（Ｚ）▲数式、化学式、 表等があります▼（ここでｘ及びｙは同じであっても又は異なっていても良く、 そして１〜８の範囲の整数である）から成る基から選択される〕を有する多官能 核酸。 ＺＲ１がホスホルアミダイト、ホスホジエステル又はホスホトリエステルである 請求の範囲第１項記載の多官能核酸。 ３．Ｒ２がジメトキシトリチル又はビキシルである請求の範囲第１又は２項記載 の多官能核酸。 ４．Ｒが下記構造式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ′は水素、アリール又はアラルキルであり；Ｒｉは同じであっても又 は異なっていても良く、そしてアミノ、ニトロ、ハロゲノ、ヒドロキシル、低級 アルキル及び低級アルコキシから成る基から選択され； Ｒｊは同じであっても又は異なっていても良く、そしてアミノ、ニトロ、ハロゲ ノ、ヒドロキシル、低級アルキル及び低級アルコキシから成る基から選択され； ｉはゼロ、１，２又は３であり；そしてｊはゼロ、１，２，３又は４である〕を 有する請求の範囲第１項記載の多官能核酸。 ５．Ｒ′が水素又はフェニルであり、そしてｉ及びｊの両者がゼロである請求の 範囲第４項記載の多官能核酸。 ６．Ｒが２−オキシメチレンアントラキノン（Ｍａｑ）である請求の範囲第３項 記載の多官能核酸。 ７．Ｒが下記構造式： ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ｋは０，１，２，３又は４であり；そしてＲｋは同じであっても又は異 なっていても良く、そしてアミノ、ニトロ、ハロゲノ、ヒドロキシル、低級アル キル及び低級アルコキシから成る基から選択される〕を有する請求の範囲第１項 記載の多官能核酸。 ８．前記Ｒｋが水素である請求の範囲第７項記載の多官能核酸。 ９．下記構造式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒは、Ｒ１又はＲ２に影響を与えないで、液体還元剤による還元により 除去され、そして置換され得るヒドロキシル保護基であり； Ｒ３は水素、メチル、Ｉ，Ｂｒ及びＦから成る群から選択され；Ｒ４は水素又は メチルであり；そして Ｚは下記基： （Ｚ）▲数式、化学式、表等があります▼（Ｚ）▲数式、化学式、表等がありま す▼（Ｚ）▲数式、化学式、表等があります▼（Ｚ）▲数式、化学式、表等があ ります▼（Ｚ）▲数式、化学式、表等があります▼及び（Ｚ）▲数式、化学式、 表等があります▼（ここでｘ及びｙは同じであっても又は異なっていても良く、 そして１〜８の範囲の整数である）から成る基から選択される〕をそれぞれ有す る少なくとも１つの変性シトシンを含むオリゴヌクレオチド鎖。 １０．Ｒが下記構造式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ′は水素、アリール又はアラルキルであり；Ｒｉは同じであっても又 は異なっていても良く、そしてアミノ、ニトロ、ハロゲノ、ヒドロキシル、低級 アルキル及び低級アルコキシから成る基から選択され； Ｒｊは同じであっても又は異なっていても良く、そしてアミノ、ニトロ、ハロゲ ノ、ヒドロキシル、低級アルキル及び低級アルコキシから成る基から選択され； ｉはゼロ、１，２又は３であり；そしてｊはゼロ、１，２、３又は４である〕を 有する請求の範囲第９項記載の多官能核酸。 １１．他の成分の化学的転換の間、ヒドロキシル含有化合物のヒドロキシル基を 保護するための方法であって、前記化学的転換の間、前記化合物と下記構造式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ′は水素、アリール又はアラルキルであり；Ｒｉは同じであっても又 は異なっていても良く、そしてアミノ、ニトロ、ハロゲノ、ヒドロキシル、低級 アルキル及び低級アルコキシから成る基から選択され； Ｒｊは同じであっても又は異なっていても良く、そしてアミノ、ニトロ、ハロゲ ノ、ヒドロキシル、低級アルキル及び低級アルコキシから成る基から選択され； ｉはゼロ、１，２又は３であり；そしてｊはゼロ、１，２，３又は４である〕を 有する保護基とを反応せしめることを含んで成る方法。 １２．含まれる他の官能基の化学的転換の間、ヒドロキシル含有化合物のヒドロ キシル基を保護するための方法であって、前記化学的転換の前、前記化合物と、 下記構造式：▲数式、化学式、表等があります▼ （上式中、ｋは０，１，２，３又は４であり；そしてＲｋは同じであっても又は 異なっていても良く、そしてアミノ、ニトロ、ハロゲノ、ヒドロキシル、低級ア ルキル及び低級アルコキシから成る基から選択される〕を有する保護基とを反応 せしめることを含んで成る方法。 １３．成長オリゴヌクレオチド鎖の５′末端−ヒドロキシル基に３′−ブロック された及び５′−ブロックされたヌクレオモノマーの連続的付加を含んで成る、 ヌクレオチドモノマーからオリゴヌクレオチドを調製するための方法であって、 前記３′ブロッキング基又は前記５′ブロッキング基として、液体還元剤による 還元により直交的に除去できる成分を使用することを特徴とする方法。 １４．前記直交的に除去できる成分が、下記構造式：▲数式、化学式、表等があ ります▼ 〔式中、Ｒ′は水素、アリール又はアラルキルであり；Ｒｉは同じであっても又 は異なっていても良く、そしてアミノ、ニトロ、ハロゲノ、ヒドロキシル、低級 アルキル及び低級アルコキシから成る基から選択され； Ｒｊは同じであっても又は異なっていても良く、そしてアミノ、ニトロ、ハロゲ ノ、ヒドロキシル、低級アルキル及び低級アルコキシから成る基から選択され； ｉはゼロ、１，２又は３であり；そしてｊはゼロ、１，２，３又は４である〕を 有する請求の範囲第１３項記載の多官能核酸。 １５．枝分れオリゴヌクレオチド構造体の製造方法であって、請求の範囲第１２ 項記載のオリゴヌクレオチド横の３′−及び５′−末端ヒドロキシル基をキャッ プし、Ｎ−４位置にアルキレン結合基を通して結合される遊離ヒドロキシル基を 付与するために液体還元剤による処理によりＲ成分を除去し、そして前記遊離ヒ ドロキシル基で二次オリゴヌクレオチド鎖を合成することを含んで成る方法。