JPH05252940A - 形質転換成長因子βを使用した、マクロファージおよび顆粒球の再集団化 - Google Patents
形質転換成長因子βを使用した、マクロファージおよび顆粒球の再集団化Info
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- JPH05252940A JPH05252940A JP3095842A JP9584291A JPH05252940A JP H05252940 A JPH05252940 A JP H05252940A JP 3095842 A JP3095842 A JP 3095842A JP 9584291 A JP9584291 A JP 9584291A JP H05252940 A JPH05252940 A JP H05252940A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】化学療法後の個体において、マクロファージお
よび顆粒球体集団を増加させる方法の提供。 【構成】形質転換成長因子βを単独でまたはコロニー刺
激因子と組み合わせて治療に使用すると、哺乳類中の顆
粒球および単核細胞／マクロファージの数が増加する。
よび顆粒球体集団を増加させる方法の提供。 【構成】形質転換成長因子βを単独でまたはコロニー刺
激因子と組み合わせて治療に使用すると、哺乳類中の顆
粒球および単核細胞／マクロファージの数が増加する。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、化学療法および造血制
御の分野に関する。さらに詳細には、本発明は、化学療
法後の個体において、マクロファージおよび顆粒球集団
を増加させる方法に関する。
御の分野に関する。さらに詳細には、本発明は、化学療
法後の個体において、マクロファージおよび顆粒球集団
を増加させる方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】癌の主要な特徴の１つは、悪性細胞の異
常に迅速な分裂および増殖である。このことは、最近、
静止細胞に比べて迅速に分裂する細胞により大きな影響
を及ぼす多数の化学療法形態において開拓されている。
従って、通常、ゆるやかに分裂する細胞は、悪性細胞ほ
ど影響を受けない。ところが、毛嚢、腸の内層および造
血に関連する細胞を含有するいくつかの細胞型は、通
常、迅速に分裂する。化学療法に起因する造血の低下
は、最も深刻な副作用であり、多くの場合、患者をリン
パ球、マクロファージおよび顆粒球の欠如による感染に
さらすことになる。
常に迅速な分裂および増殖である。このことは、最近、
静止細胞に比べて迅速に分裂する細胞により大きな影響
を及ぼす多数の化学療法形態において開拓されている。
従って、通常、ゆるやかに分裂する細胞は、悪性細胞ほ
ど影響を受けない。ところが、毛嚢、腸の内層および造
血に関連する細胞を含有するいくつかの細胞型は、通
常、迅速に分裂する。化学療法に起因する造血の低下
は、最も深刻な副作用であり、多くの場合、患者をリン
パ球、マクロファージおよび顆粒球の欠如による感染に
さらすことになる。
【０００３】骨髄細胞の誘導および末端分化に必要と思
われるいくつかの成長因子が知られている。顆粒球マク
ロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）は、顆粒
球（好中球および好酸球）およびマクロファージ／単核
細胞へと分化し得る幼若細胞の形成を刺激する。顆粒球
コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）は、顆粒球／マクロフ
ァージ前駆細胞からの顆粒球（主として好中球）の生産
を刺激する。マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−Ｃ
ＳＦ）は、顆粒球／マクロファージ前駆細胞からの単核
細胞／マクロファージの生産を刺激する。化学療法を受
けている患者に、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、および／
またはＭ−ＣＳＦを投与することは、当然の解決策のよ
うであるが、これらのサイトカインは、有毒な投与量で
のみ有効となり得る。
われるいくつかの成長因子が知られている。顆粒球マク
ロファージコロニー刺激因子（ＧＭ−ＣＳＦ）は、顆粒
球（好中球および好酸球）およびマクロファージ／単核
細胞へと分化し得る幼若細胞の形成を刺激する。顆粒球
コロニー刺激因子（Ｇ−ＣＳＦ）は、顆粒球／マクロフ
ァージ前駆細胞からの顆粒球（主として好中球）の生産
を刺激する。マクロファージコロニー刺激因子（Ｍ−Ｃ
ＳＦ）は、顆粒球／マクロファージ前駆細胞からの単核
細胞／マクロファージの生産を刺激する。化学療法を受
けている患者に、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ、および／
またはＭ−ＣＳＦを投与することは、当然の解決策のよ
うであるが、これらのサイトカインは、有毒な投与量で
のみ有効となり得る。
【０００４】１９８７年１２月１０日に提出された、Ｓ
ｅｙｅｄｉｎの米国特許第４、７７４、３２２号は、Ｃ
ＩＦ−ＡおよびＣＩＦ−Ｂと命名された２つのウシの骨
由来軟骨誘導因子（ＣＩＦ）について説明している。こ
れらの因子は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって、およそ２
６、０００ダルトンの分子量を有するダイマーである。
これらは、胎児ネズミ間葉細胞を使用したアガロースゲ
ル培養物モデルにおける、軟骨特異性プロテオグリカン
（ＰＧ）生産によって測定されるように、それぞれイン
ビトロにおいて独自に軟骨形成活性を示す。しかし、イ
ンビボにおいては、いずれも独自に軟骨形成活性を示さ
ない。ＣＩＦ−Ａのアミノ酸配列は、β型形質転換成長
因子（ＴＧＦ−β）と呼ばれるヒト胎盤由来ポリペプチ
ドについて報告されているものと同一の部分（３０個の
アミノ酸）Ｎ末端配列を有していることを示した。ＣＩ
Ｆ−Ｂの部分Ｎ末端配列は、ＴＧＦ−βの部分Ｎ末端配
列とは異なる。これらのＣＩＦは、両方とも、ＴＧＦ−
βアッセイにおいて活性（軟寒天における正常なネズミ
の腎臓細胞コロニーの基質非依存性成長を誘導する能
力）を示す。ＣＩＦ−Ａ／ＴＧＦ−βは、ＴＧＦ−β１
という名称で現在知られており、ＣＩＦ−Ｂは、一般
に、ＴＧＦ−β２と呼ばれる。
ｅｙｅｄｉｎの米国特許第４、７７４、３２２号は、Ｃ
ＩＦ−ＡおよびＣＩＦ−Ｂと命名された２つのウシの骨
由来軟骨誘導因子（ＣＩＦ）について説明している。こ
れらの因子は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって、およそ２
６、０００ダルトンの分子量を有するダイマーである。
これらは、胎児ネズミ間葉細胞を使用したアガロースゲ
ル培養物モデルにおける、軟骨特異性プロテオグリカン
（ＰＧ）生産によって測定されるように、それぞれイン
ビトロにおいて独自に軟骨形成活性を示す。しかし、イ
ンビボにおいては、いずれも独自に軟骨形成活性を示さ
ない。ＣＩＦ−Ａのアミノ酸配列は、β型形質転換成長
因子（ＴＧＦ−β）と呼ばれるヒト胎盤由来ポリペプチ
ドについて報告されているものと同一の部分（３０個の
アミノ酸）Ｎ末端配列を有していることを示した。ＣＩ
Ｆ−Ｂの部分Ｎ末端配列は、ＴＧＦ−βの部分Ｎ末端配
列とは異なる。これらのＣＩＦは、両方とも、ＴＧＦ−
βアッセイにおいて活性（軟寒天における正常なネズミ
の腎臓細胞コロニーの基質非依存性成長を誘導する能
力）を示す。ＣＩＦ−Ａ／ＴＧＦ−βは、ＴＧＦ−β１
という名称で現在知られており、ＣＩＦ−Ｂは、一般
に、ＴＧＦ−β２と呼ばれる。
【０００５】ＴＧＦ−βは、ＥＧＦまたはＴＧＦ−αと
結合すると、（１）軟寒天培養物アッセイにおける細胞
の増殖を促進し、そして（２）ネズミ軟組織創傷治癒モ
デルにおける細胞の増殖およびタンパクの沈着を促進す
る。本願は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって、およそ２６、
０００ダルトン（２６ ｋＤａ）の分子量を有するダイ
マーとしてＴＧＦ−βを特徴づける。ＴＧＦ−βは、広
範囲な活性を示す。これらの活性は、主として、さらさ
れる細胞型に依存しているようである。例えば、ＴＧＦ
−βは、ＥＧＦまたはＴＧＦ−αの存在下で、通常の繊
維芽細胞の増殖を刺激するが、いくつかの腫瘍細胞の増
殖を阻止する。これについてはＡ．Ｂ．Ｒｏｂｅｒｔｓ
ら、Ｐｒｏｃ Ｎａｔ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ
（１９８５）８２：１１９−２３を参照。Ｂｅｎｔｚら
の米国特許第４、８０６、５２３号は、炎症を阻止する
ためのＴＧＦ−β（ＣＩＦ−ＡおよびＣＩＦ−Ｂとして
も知られる）の使用を開示しており、ＴＧＦ−βがＴ細
胞の増殖および抗体の生産を阻止することを示してい
る。Ｓ．Ｔｓｕｎａｗａｋｉら、Ｎａｔｕｒｅ （１９
８８）３３４：２６０−６２は、ＴＧＦ−β１またはＴ
ＧＦ−β２でインキュベートしたマクロファージが可逆
的に不活性となることを見いだしている。Ｈ．Ｇｏｅｙ
ら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ（１９８９）１４３：８７７−
８０は、インビボにおけるマウスの大腿骨髄に直接ＴＧ
Ｆ−β１を投与することが、多分化能性前駆細胞の増殖
を可逆的に抑制することを報告している。
結合すると、（１）軟寒天培養物アッセイにおける細胞
の増殖を促進し、そして（２）ネズミ軟組織創傷治癒モ
デルにおける細胞の増殖およびタンパクの沈着を促進す
る。本願は、ＳＤＳ−ＰＡＧＥによって、およそ２６、
０００ダルトン（２６ ｋＤａ）の分子量を有するダイ
マーとしてＴＧＦ−βを特徴づける。ＴＧＦ−βは、広
範囲な活性を示す。これらの活性は、主として、さらさ
れる細胞型に依存しているようである。例えば、ＴＧＦ
−βは、ＥＧＦまたはＴＧＦ−αの存在下で、通常の繊
維芽細胞の増殖を刺激するが、いくつかの腫瘍細胞の増
殖を阻止する。これについてはＡ．Ｂ．Ｒｏｂｅｒｔｓ
ら、Ｐｒｏｃ Ｎａｔ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳＡ
（１９８５）８２：１１９−２３を参照。Ｂｅｎｔｚら
の米国特許第４、８０６、５２３号は、炎症を阻止する
ためのＴＧＦ−β（ＣＩＦ−ＡおよびＣＩＦ−Ｂとして
も知られる）の使用を開示しており、ＴＧＦ−βがＴ細
胞の増殖および抗体の生産を阻止することを示してい
る。Ｓ．Ｔｓｕｎａｗａｋｉら、Ｎａｔｕｒｅ （１９
８８）３３４：２６０−６２は、ＴＧＦ−β１またはＴ
ＧＦ−β２でインキュベートしたマクロファージが可逆
的に不活性となることを見いだしている。Ｈ．Ｇｏｅｙ
ら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ（１９８９）１４３：８７７−
８０は、インビボにおけるマウスの大腿骨髄に直接ＴＧ
Ｆ−β１を投与することが、多分化能性前駆細胞の増殖
を可逆的に抑制することを報告している。
【０００６】
【発明の目的】本発明の目的は、化学療法後の個体にお
いて、マクロファージおよび顆粒球体集団を増加させる
方法を提供することにある。
いて、マクロファージおよび顆粒球体集団を増加させる
方法を提供することにある。
【０００７】
【発明の構成】本発明は、ＴＧＦ−βを単独でまたはＣ
ＳＦと組み合わせて投与することによって、顆粒球およ
びマクロファージの数を増加させる必要のある哺乳類の
治療方法である。ＴＧＦ−βを、ＣＳＦより前にまたは
ＣＳＦと同時に投与すると、必要なＣＦＳの有効投与量
は、有毒なレベルよりも低くなる。
ＳＦと組み合わせて投与することによって、顆粒球およ
びマクロファージの数を増加させる必要のある哺乳類の
治療方法である。ＴＧＦ−βを、ＣＳＦより前にまたは
ＣＳＦと同時に投与すると、必要なＣＦＳの有効投与量
は、有毒なレベルよりも低くなる。
【０００８】本発明の方法は、哺乳類顆粒球または単核
細胞／マクロファージの増殖および分化を誘導する方法
であって、造血幹細胞を、有効量のＴＧＦ−βに接触さ
せる工程；および該造血幹細胞を、該ＴＧＦ−βと接触
させてから０〜５日の間に有効量のＣＳＦと接触させる
工程を含む方法である。
細胞／マクロファージの増殖および分化を誘導する方法
であって、造血幹細胞を、有効量のＴＧＦ−βに接触さ
せる工程；および該造血幹細胞を、該ＴＧＦ−βと接触
させてから０〜５日の間に有効量のＣＳＦと接触させる
工程を含む方法である。
【０００９】本発明の組成物は、単核細胞／マクロファ
ージまたは顆粒球の増殖および分化を誘導するための組
成物であって、有効量のＴＧＦ−βおよび有効量のＣＳ
Ｆを含有する組成物である。
ージまたは顆粒球の増殖および分化を誘導するための組
成物であって、有効量のＴＧＦ−βおよび有効量のＣＳ
Ｆを含有する組成物である。
【００１０】本発明のキットは、単核細胞／マクロファ
ージまたは顆粒球の増殖および分化を誘導するためのキ
ットであって、有効量のＴＧＦ−βを有する第１の容
器、および有効量のＣＳＦを有する第２の容器を含むキ
ットである。
ージまたは顆粒球の増殖および分化を誘導するためのキ
ットであって、有効量のＴＧＦ−βを有する第１の容
器、および有効量のＣＳＦを有する第２の容器を含むキ
ットである。
【００１１】Ａ．定義 用語「ＴＧＦ−β」または「形質転換成長因子β」は、
タンパクＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、および関連タン
パク（ＴＧＦ−βレセプターと結合しＴＧＦ−β型活性
に影響を与え得る）のことをさしていう。一般に、ＴＧ
Ｆ−β活性は、インビトロにおける繊維芽細胞の基質非
依存性増殖の観察およびインビボにおける創傷治癒モデ
ル中のタンパクと結合組織の形成促進によって評価され
得る。「ＴＧＦ−β」は、ＴＧＦ−β様タンパクをすべ
て含むのに対して、「ＴＧＦ−β１」および「ＴＧＦ−
β２」は、本願で参考のために取り入れた米国特許第
４、７７４、３２２号においてＣＩＦ−ＡおよびＣＩＦ
−Ｂという名称で説明されているような特定のタンパク
のみを示す。
タンパクＴＧＦ−β１、ＴＧＦ−β２、および関連タン
パク（ＴＧＦ−βレセプターと結合しＴＧＦ−β型活性
に影響を与え得る）のことをさしていう。一般に、ＴＧ
Ｆ−β活性は、インビトロにおける繊維芽細胞の基質非
依存性増殖の観察およびインビボにおける創傷治癒モデ
ル中のタンパクと結合組織の形成促進によって評価され
得る。「ＴＧＦ−β」は、ＴＧＦ−β様タンパクをすべ
て含むのに対して、「ＴＧＦ−β１」および「ＴＧＦ−
β２」は、本願で参考のために取り入れた米国特許第
４、７７４、３２２号においてＣＩＦ−ＡおよびＣＩＦ
−Ｂという名称で説明されているような特定のタンパク
のみを示す。
【００１２】用語「ＣＳＦ」は、コロニー刺激因子をさ
し、前駆細胞が顆粒球およびマクロファージ／単核細胞
型へと分化するように誘導し得るタンパクを含む。現
在、好ましいＣＳＦは、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦおよ
びＧ−ＣＳＦである。
し、前駆細胞が顆粒球およびマクロファージ／単核細胞
型へと分化するように誘導し得るタンパクを含む。現
在、好ましいＣＳＦは、Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ−ＣＳＦおよ
びＧ−ＣＳＦである。
【００１３】「マクロファージコロニー刺激因子」また
はＭ−ＣＳＦは、適切な前駆細胞からのマクロファージ
／単核細胞の増殖を刺激する約４５ｋＤａの重グリコシ
ル化ホモダイマーである。自然源からのＭ−ＣＳＦ（Ｃ
ＳＦ−１としても知られる）の精製については、Ｅ．
Ｒ．Ｓｔａｎｌｅｙ、Ｍｅｔｈ Ｅｎｚｙｍｏｌ（１９
８５）１１６：５６４−８７によって説明されている
が、クローニングについては、Ｅ．Ｓ．Ｋａｗａｓａｋ
ｉら、Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８５）２３０：２９１−９
６およびｋａｗａｓａｋｉら、ＰＣＴ ＷＯ８６／０４
６０７によって開示されている。
はＭ−ＣＳＦは、適切な前駆細胞からのマクロファージ
／単核細胞の増殖を刺激する約４５ｋＤａの重グリコシ
ル化ホモダイマーである。自然源からのＭ−ＣＳＦ（Ｃ
ＳＦ−１としても知られる）の精製については、Ｅ．
Ｒ．Ｓｔａｎｌｅｙ、Ｍｅｔｈ Ｅｎｚｙｍｏｌ（１９
８５）１１６：５６４−８７によって説明されている
が、クローニングについては、Ｅ．Ｓ．Ｋａｗａｓａｋ
ｉら、Ｓｃｉｅｎｃｅ（１９８５）２３０：２９１−９
６およびｋａｗａｓａｋｉら、ＰＣＴ ＷＯ８６／０４
６０７によって開示されている。
【００１４】「顆粒球マクロファージコロニー刺激因
子」またはＧＭ−ＣＳＦは、適切な前駆細胞からの顆粒
球（好中球および好酸球を含む）およびマクロファージ
／単核細胞への分化が可能な細胞の増殖を刺激する約２
３kDaの糖タンパクである。
子」またはＧＭ−ＣＳＦは、適切な前駆細胞からの顆粒
球（好中球および好酸球を含む）およびマクロファージ
／単核細胞への分化が可能な細胞の増殖を刺激する約２
３kDaの糖タンパクである。
【００１５】「顆粒球コロニー刺激因子」またはＧ−Ｃ
ＳＦは、好中球コロニーの増殖を刺激する約１８ｋＤａ
の分子量を有する糖タンパクである。部分Ｎ末端配列
は、Thr-Pro-Leu-Gly-Pro-Ala-Ser-Ser-Leu-Pro-Gln-Se
r-Phe-Leu-Leu-Lys-Cys-leu-Glu-Glnである。馴化培地
からのＧ−ＣＳＦの精製については、Ｏｎｏらの米国特
許第４、８３３、１２７号によって説明されている。Ｇ
−ＣＳＦのクローニングおよび発現については、Ｓｏｕ
ｚａの米国特許第４、８１０、６４３号によって説明さ
れている。
ＳＦは、好中球コロニーの増殖を刺激する約１８ｋＤａ
の分子量を有する糖タンパクである。部分Ｎ末端配列
は、Thr-Pro-Leu-Gly-Pro-Ala-Ser-Ser-Leu-Pro-Gln-Se
r-Phe-Leu-Leu-Lys-Cys-leu-Glu-Glnである。馴化培地
からのＧ−ＣＳＦの精製については、Ｏｎｏらの米国特
許第４、８３３、１２７号によって説明されている。Ｇ
−ＣＳＦのクローニングおよび発現については、Ｓｏｕ
ｚａの米国特許第４、８１０、６４３号によって説明さ
れている。
【００１６】Ｂ：一般的方法 ＴＧＦ−β、ＧＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦおよびＭ−ＣＳ
Ｆはすべて市販されているが、当業者によって既知の上
記の方法を使用して、容易に入手できる材料からも調製
され得る。
Ｆはすべて市販されているが、当業者によって既知の上
記の方法を使用して、容易に入手できる材料からも調製
され得る。
【００１７】ＴＧＦ−βおよび選択されたＣＳＦは、イ
ンビボまたは半ビボのいずれかにおいて使用される。Ｔ
ＧＦ−βは、インビボにおいて好適に投与される。イン
ビボで投与される場合、タンパクは一般に、非経口手
段、例えば、静脈注射、骨髄注射、インプラント（ｉｍ
ｐｌａｎｔｅｄ）装置、鼻孔内エアゾール等によって導
入される。インビボにおける現在好ましい投与方法は、
静脈注射である。
ンビボまたは半ビボのいずれかにおいて使用される。Ｔ
ＧＦ−βは、インビボにおいて好適に投与される。イン
ビボで投与される場合、タンパクは一般に、非経口手
段、例えば、静脈注射、骨髄注射、インプラント（ｉｍ
ｐｌａｎｔｅｄ）装置、鼻孔内エアゾール等によって導
入される。インビボにおける現在好ましい投与方法は、
静脈注射である。
【００１８】本発明の方法は、免疫抑制障害が生じた場
合、感染または悪性腫瘍の治療を行う場合、あるいは骨
髄抑制効力を有する薬を用いて治療した場合に、意図的
にまたは副作用として顆粒球および／またはマクロファ
ージの数の増加が所望される場合に、有用である。顆粒
球および造血の抑制は、しばしば、放射線または化学療
法剤を用いて悪性腫瘍を治療する際の副作用として発生
する。このことは、被検体の感染に対する抵抗力を損な
い、しばしば、危険な程度まで日和見微生物を増殖させ
てしまう。本発明の実施において、ＴＧＦ−βは、治療
時または障害時あるいは治療後または障害後に投与さ
れ、好ましくは、ＴＧＦ−βは、治療後５日以内に投与
される。ＣＳＦは、化学療法または放射線療法による治
療の直後で、ＴＧＦ−βと同時にまたはＴＧＦ−β投与
後４日以内に投与されるのが好ましい。ＣＳＦは、ＴＧ
Ｆ−β投与後、約24から48時間以内に投与するのが好ま
しい。
合、感染または悪性腫瘍の治療を行う場合、あるいは骨
髄抑制効力を有する薬を用いて治療した場合に、意図的
にまたは副作用として顆粒球および／またはマクロファ
ージの数の増加が所望される場合に、有用である。顆粒
球および造血の抑制は、しばしば、放射線または化学療
法剤を用いて悪性腫瘍を治療する際の副作用として発生
する。このことは、被検体の感染に対する抵抗力を損な
い、しばしば、危険な程度まで日和見微生物を増殖させ
てしまう。本発明の実施において、ＴＧＦ−βは、治療
時または障害時あるいは治療後または障害後に投与さ
れ、好ましくは、ＴＧＦ−βは、治療後５日以内に投与
される。ＣＳＦは、化学療法または放射線療法による治
療の直後で、ＴＧＦ−βと同時にまたはＴＧＦ−β投与
後４日以内に投与されるのが好ましい。ＣＳＦは、ＴＧ
Ｆ−β投与後、約24から48時間以内に投与するのが好ま
しい。
【００１９】本発明の半ビボ方法において、骨髄（また
は他の造血組織）は、（好ましくは）ＴＧＦ−βの投与
後に被検体から除去され、細胞は、ＣＳＦで処理される
まで培養物中に維持される。
は他の造血組織）は、（好ましくは）ＴＧＦ−βの投与
後に被検体から除去され、細胞は、ＣＳＦで処理される
まで培養物中に維持される。
【００２０】投与に使用する、ＴＧＦ−β、ＣＳＦまた
はその組合せの組成物は、一般に、薬学上受け入れられ
る賦形剤に加えて有効量のＴＧＦ−βおよび／またはＣ
ＳＦを含む。適切な賦形剤は、非経口投与用として認め
られている、水、食塩水、リンガー液、ハンクス液、お
よびグルコース、ラクトース、デクストロース、エタノ
ール、グリセロール、アルブミン等の溶液を包含する大
抵の担体を含有する。これらの組成物は、必要に応じ
て、安定剤、酸化防止剤、抗菌剤、防腐剤、緩衝剤、界
面活性剤および他の付属添加物を含有し得る。現在好ま
しい賦形剤は、リン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）中に約１ｍｇ
／ｍＬの血清アルブミンを含む。非経口投与に適切な賦
形剤については、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ、”Ｒｅｍｉｎ
ｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉ
ｅｎｃｅｓ”（Ｍａｃｋ Ｐｕｂ．Ｃｏ．最新版）にお
いて詳しく説明されている。
はその組合せの組成物は、一般に、薬学上受け入れられ
る賦形剤に加えて有効量のＴＧＦ−βおよび／またはＣ
ＳＦを含む。適切な賦形剤は、非経口投与用として認め
られている、水、食塩水、リンガー液、ハンクス液、お
よびグルコース、ラクトース、デクストロース、エタノ
ール、グリセロール、アルブミン等の溶液を包含する大
抵の担体を含有する。これらの組成物は、必要に応じ
て、安定剤、酸化防止剤、抗菌剤、防腐剤、緩衝剤、界
面活性剤および他の付属添加物を含有し得る。現在好ま
しい賦形剤は、リン酸緩衝溶液（ＰＢＳ）中に約１ｍｇ
／ｍＬの血清アルブミンを含む。非経口投与に適切な賦
形剤については、Ｅ．Ｗ．Ｍａｒｔｉｎ、”Ｒｅｍｉｎ
ｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉ
ｅｎｃｅｓ”（Ｍａｃｋ Ｐｕｂ．Ｃｏ．最新版）にお
いて詳しく説明されている。
【００２１】正確な必要投与量は、被検体の年齢、大き
さおよび条件、治療される疾患の特性および程度等によ
って異なる。従って、正確な有効量を前もって決定し得
ない。しかし、適切な量は、以下に記載されるように、
動物モデルを使用した通常の実験によって決定され得
る。一般に、ＴＧＦ−βの有効投与量は、約１０μｇ／
ｋｇから約１ｍｇ／Ｋｇの範囲内である。現在好ましい
ＴＧＦ−βは、ＴＧＦ−β１である。Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ
−ＣＳＦおよび／またはＧ−ＣＳＦの有効投与量は、約
１０μｇ／Ｋｇから約１ｍｇ／Ｋｇの範囲内である。現
在好ましいＣＳＦは、Ｍ−ＣＳＦおよびＧＭ−ＣＳＦで
ある。
さおよび条件、治療される疾患の特性および程度等によ
って異なる。従って、正確な有効量を前もって決定し得
ない。しかし、適切な量は、以下に記載されるように、
動物モデルを使用した通常の実験によって決定され得
る。一般に、ＴＧＦ−βの有効投与量は、約１０μｇ／
ｋｇから約１ｍｇ／Ｋｇの範囲内である。現在好ましい
ＴＧＦ−βは、ＴＧＦ−β１である。Ｍ−ＣＳＦ、ＧＭ
−ＣＳＦおよび／またはＧ−ＣＳＦの有効投与量は、約
１０μｇ／Ｋｇから約１ｍｇ／Ｋｇの範囲内である。現
在好ましいＣＳＦは、Ｍ−ＣＳＦおよびＧＭ−ＣＳＦで
ある。
【００２２】適切な動物モデルは、以下の実施例に示さ
れるようなマウスのモデルを含む。簡単に説明すると、
ＴＧＦ−βを、非経口的に投与し、１から９日後、骨髄
を抽出する。骨髄を単一細胞懸濁液に希釈し、ＣＳＦで
処理する。処理した細胞を増殖させ、マクロファージお
よび／または顆粒球に分化させ、増殖および分化の程度
を標準的な方法（例えば、過酸化物生成、3Ｈ−チミジ
ンの取り込み、蛍光活性細胞の選別（ＦＡＣＳ）、細胞
染色等）でアッセイする。顆粒球および／またはマクロ
ファージ／単核細胞の増加数（コントロールと比較し
て）は、前駆細胞によるＣＳＦへの反応性が増加したこ
とを示し、ＴＧＦ−βによる存在する前駆細胞の増加数
を示し得る。
れるようなマウスのモデルを含む。簡単に説明すると、
ＴＧＦ−βを、非経口的に投与し、１から９日後、骨髄
を抽出する。骨髄を単一細胞懸濁液に希釈し、ＣＳＦで
処理する。処理した細胞を増殖させ、マクロファージお
よび／または顆粒球に分化させ、増殖および分化の程度
を標準的な方法（例えば、過酸化物生成、3Ｈ−チミジ
ンの取り込み、蛍光活性細胞の選別（ＦＡＣＳ）、細胞
染色等）でアッセイする。顆粒球および／またはマクロ
ファージ／単核細胞の増加数（コントロールと比較し
て）は、前駆細胞によるＣＳＦへの反応性が増加したこ
とを示し、ＴＧＦ−βによる存在する前駆細胞の増加数
を示し得る。
【００２３】
【実施例】以下に示す実施例は、当業者への指針として
提供されており、本発明を限定するものではない。
提供されており、本発明を限定するものではない。
【００２４】（実施例１） （活性の証明） （Ａ）天然のウシＴＧＦ−β１を、４ｍＭのＨＣＬ
０．２５ｍＬに溶解し、次いでリン酸緩衝溶液（ＰＢ
Ｓ）中の０．７５ｍＬのマウス血清アルブミン（ＭＳ
Ａ、１ｍｇ／ｍＬ）を加えて５００μｇ／ｍＬのＴＧＦ
−β１貯蔵液を調製した。この貯蔵液を２５μｇ／ｍ
Ｌ、５０μｇ／ｍＬおよび１２５μｇ／ｍＬに希釈する
ことによって、３つの実験用溶液を調製した。同様に、
ＴＧＦ−β１を除いてコントロール溶液を調製した。
０．２５ｍＬに溶解し、次いでリン酸緩衝溶液（ＰＢ
Ｓ）中の０．７５ｍＬのマウス血清アルブミン（ＭＳ
Ａ、１ｍｇ／ｍＬ）を加えて５００μｇ／ｍＬのＴＧＦ
−β１貯蔵液を調製した。この貯蔵液を２５μｇ／ｍ
Ｌ、５０μｇ／ｍＬおよび１２５μｇ／ｍＬに希釈する
ことによって、３つの実験用溶液を調製した。同様に、
ＴＧＦ−β１を除いてコントロール溶液を調製した。
【００２５】（Ｂ）６０匹の雌Ｃ５７Ｂ１マウスを５つ
の実験群（１群当り１２匹のマウス）に分類し、以下の
ように、同じ日にＴＧＦ−β１（0.2ｍＬ）を皮下注射
した。
の実験群（１群当り１２匹のマウス）に分類し、以下の
ように、同じ日にＴＧＦ−β１（0.2ｍＬ）を皮下注射
した。
【００２６】 Ａ： マウス１匹当り５μｇのＴＧＦ−β１。 Ｂ： マウス１匹当り１０μｇのＴＧＦ−β１。 Ｃ： マウス１匹当り２５μｇのＴＧＦ−β１。 Ｄ： 処理しなかった。 Ｅ： 希釈液で処理した。
【００２７】１日目に、各群から３匹のマウスを取り出
し、骨髄細胞を大腿骨および頸骨から収集した。この工
程を２、４および９日目に繰り返し行った。ＤＭＥＭ＋
１０％ウマ血清中に単一細胞懸濁液を調製し、１０5細
胞／ｍＬに調整し、１．０ｍＬの懸濁液／ウェル（ｗｅ
ｌｌ）で２４ウェルプレート（２４−ｗｅｌｌ ｐｌａ
ｔｅ）中にプレートした。次いで、各ウェルにＭ−ＣＳ
Ｆ（０．１ｍＬの５００Ｕ／ｍＬの貯蔵液）、ＧＭ−Ｃ
ＳＦ（０．１ｍＬの５００Ｕ／ｍＬの貯蔵液）または
０．１ｍＬのＰＢＳを加えた。これらのプレートをＣＯ
2で加湿したインキュベータ中で６日間インキュベート
し、ＰＢＳで洗浄し、細胞をホルムアルデヒドで固定し
た。固定したプレートを０．１Ｍのホウ酸緩衝液（ｐＨ
８．５）で洗浄し、１％のメチレンブルーで１０分間染
色した。染色したプレートを再びホウ酸緩衝液で洗浄
し、風乾した。その後、０．１ＮのＨＣｌを使用してプ
レートから染料を４２oＣで２０分間溶離すると、溶離
したものの吸収は６３０ｎｍであった。
し、骨髄細胞を大腿骨および頸骨から収集した。この工
程を２、４および９日目に繰り返し行った。ＤＭＥＭ＋
１０％ウマ血清中に単一細胞懸濁液を調製し、１０5細
胞／ｍＬに調整し、１．０ｍＬの懸濁液／ウェル（ｗｅ
ｌｌ）で２４ウェルプレート（２４−ｗｅｌｌ ｐｌａ
ｔｅ）中にプレートした。次いで、各ウェルにＭ−ＣＳ
Ｆ（０．１ｍＬの５００Ｕ／ｍＬの貯蔵液）、ＧＭ−Ｃ
ＳＦ（０．１ｍＬの５００Ｕ／ｍＬの貯蔵液）または
０．１ｍＬのＰＢＳを加えた。これらのプレートをＣＯ
2で加湿したインキュベータ中で６日間インキュベート
し、ＰＢＳで洗浄し、細胞をホルムアルデヒドで固定し
た。固定したプレートを０．１Ｍのホウ酸緩衝液（ｐＨ
８．５）で洗浄し、１％のメチレンブルーで１０分間染
色した。染色したプレートを再びホウ酸緩衝液で洗浄
し、風乾した。その後、０．１ＮのＨＣｌを使用してプ
レートから染料を４２oＣで２０分間溶離すると、溶離
したものの吸収は６３０ｎｍであった。
【００２８】上記の結果を図１および図２に示す。図１
は、Ｍ−ＣＳＦをＴＧＦ−β１誘導骨髄細胞に付与した
際に生じるマクロファージ集団の増加を示す。２５μｇ
／マウスのＴＧＦ−β１を投与すると、１日目でマクロ
ファージの数はコントロールの約２４０％に増加した。
このことは、骨髄におけるマクロファージ前駆細胞の数
がインビボにおけるＴＧＦ−β１の投与によって増加し
たことを示す。図２は、ＧＭ−ＣＳＦの投与によって得
られたマクロファージおよび顆粒球の増加数を示し、こ
れは、インビボにおけるＴＧＦ−β１の投与に起因する
ウシ骨髄中のＧＭ前駆細胞のＣＳＦに対する感度の増加
を示している。
は、Ｍ−ＣＳＦをＴＧＦ−β１誘導骨髄細胞に付与した
際に生じるマクロファージ集団の増加を示す。２５μｇ
／マウスのＴＧＦ−β１を投与すると、１日目でマクロ
ファージの数はコントロールの約２４０％に増加した。
このことは、骨髄におけるマクロファージ前駆細胞の数
がインビボにおけるＴＧＦ−β１の投与によって増加し
たことを示す。図２は、ＧＭ−ＣＳＦの投与によって得
られたマクロファージおよび顆粒球の増加数を示し、こ
れは、インビボにおけるＴＧＦ−β１の投与に起因する
ウシ骨髄中のＧＭ前駆細胞のＣＳＦに対する感度の増加
を示している。
【００２９】（実施例２） （Ａ）１５匹の雄ＣＢ６Ｆ1マウスを５つの実験群（１
群当り３匹のマウス）に分類し、以下のように、同じ日
にＴＧＦ−β１（0.2ｍＬ）を皮下注射した。
群当り３匹のマウス）に分類し、以下のように、同じ日
にＴＧＦ−β１（0.2ｍＬ）を皮下注射した。
【００３０】Ａ： 処理しなかった。 Ｂ： 希釈液コントロール。 Ｃ： マウス１匹当り２５μｇのＴＧＦ−β１。 Ｄ： マウス１匹当り１０μｇのＴＧＦ−β１。 Ｅ： マウス１匹当り５μｇのＴＧＦ−β１。
【００３１】２日目に、各群からマウスを取り出し、骨
髄細胞を大腿骨および頸骨から収集した。ＤＭＥＭ＋１
０％ウマ血清中に単一細胞懸濁液を調製し、１０5細胞
／ｍＬに調整し、１．０ｍＬの懸濁液／ウェルで２４ウ
ェルプレート中にプレートした。次いで、各ウェルにＭ
−ＣＳＦ（０．１ｍＬの５００Ｕ／ｍＬの貯蔵液）、Ｇ
Ｍ−ＣＳＦ（０．１ｍＬの５００Ｕ／ｍＬの貯蔵液）ま
たは０．１ｍＬのＰＢＳを加えた。これらのプレート
を、ＣＯ2で加湿したインキュベータ中で６日間インキ
ュベートし、ＰＢＳで洗浄し、細胞をホルムアルデヒド
で固定した。固定したプレートを０．１Ｍのホウ酸緩衝
液（ｐＨ８．５）で洗浄し、１％のメチレンブルーで１
０分間染色した。染色したプレートを再びホウ酸緩衝液
で洗浄し、風乾した。その後、０．１ＮのＨＣｌを使用
してプレートから染料を４２oＣで２０分間溶離する
と、溶離したものの吸収は６３０ｎｍであった。
髄細胞を大腿骨および頸骨から収集した。ＤＭＥＭ＋１
０％ウマ血清中に単一細胞懸濁液を調製し、１０5細胞
／ｍＬに調整し、１．０ｍＬの懸濁液／ウェルで２４ウ
ェルプレート中にプレートした。次いで、各ウェルにＭ
−ＣＳＦ（０．１ｍＬの５００Ｕ／ｍＬの貯蔵液）、Ｇ
Ｍ−ＣＳＦ（０．１ｍＬの５００Ｕ／ｍＬの貯蔵液）ま
たは０．１ｍＬのＰＢＳを加えた。これらのプレート
を、ＣＯ2で加湿したインキュベータ中で６日間インキ
ュベートし、ＰＢＳで洗浄し、細胞をホルムアルデヒド
で固定した。固定したプレートを０．１Ｍのホウ酸緩衝
液（ｐＨ８．５）で洗浄し、１％のメチレンブルーで１
０分間染色した。染色したプレートを再びホウ酸緩衝液
で洗浄し、風乾した。その後、０．１ＮのＨＣｌを使用
してプレートから染料を４２oＣで２０分間溶離する
と、溶離したものの吸収は６３０ｎｍであった。
【００３２】上記の結果を以下の表１に示す。これらの
結果は、ＴＧＦ−β１の投与が骨髄におけるマクロファ
ージおよび顆粒球前駆細胞のＣＳＦに対する感度を増加
させたことを示している。
結果は、ＴＧＦ−β１の投与が骨髄におけるマクロファ
ージおよび顆粒球前駆細胞のＣＳＦに対する感度を増加
させたことを示している。
【００３３】
【表１】
【００３４】（Ｂ）ＴＧＦ−βの投与量を１．０、２．
５および５．０μｇ／マウスに変えて、上記（Ａ）の実
験を繰り返した。結果を、コントロールのパーセントと
して図３に示す。投与量の依存性を観察した。
５および５．０μｇ／マウスに変えて、上記（Ａ）の実
験を繰り返した。結果を、コントロールのパーセントと
して図３に示す。投与量の依存性を観察した。
【００３５】（実施例３） （投与の形態）この実験は、投与の形態が生物的反応に
影響を与えるかどうかを決定するために行った。
影響を与えるかどうかを決定するために行った。
【００３６】１２匹の雄ＣＢ６Ｆ1マウスを５つの実験
群（１群当り３匹のマウス）に分類し、以下のように、
同じ日にＴＧＦ−β１（０．２ｍＬ）を皮下注射した。
群（１群当り３匹のマウス）に分類し、以下のように、
同じ日にＴＧＦ−β１（０．２ｍＬ）を皮下注射した。
【００３７】Ａ： 処理しなかった。 Ｂ： マウス１匹当り２５μｇのＴＧＦ−β１を皮下注
射。 Ｃ： マウス１匹当り２５μｇのＴＧＦ−β１を静脈注
射。 Ｄ： マウス１匹当り２５μｇのＴＧＦ−β１を腹膜注
射。
射。 Ｃ： マウス１匹当り２５μｇのＴＧＦ−β１を静脈注
射。 Ｄ： マウス１匹当り２５μｇのＴＧＦ−β１を腹膜注
射。
【００３８】２日目に、各群からマウスを取り出し、骨
髄細胞を大腿骨および頸骨から収集した。ＤＭＥＭ＋１
０％ウマ血清中に単一細胞懸濁液を調製し、１０5細胞
／ｍＬに調整し、１．０ｍＬの懸濁液／ウェルで２４ウ
ェルプレート中にプレートした。次いで、各ウェルにＭ
−ＣＳＦ（０．１ｍＬの５００Ｕ／ｍＬの貯蔵液）、Ｇ
Ｍ−ＣＳＦ（０．１ｍＬの５００Ｕ／ｍＬの貯蔵液）ま
たは０．１ｍＬのＰＢＳを加えた。これらのプレート
を、ＣＯ2で加湿したインキュベータ中で６日間インキ
ュベートし、ＰＢＳで洗浄し、細胞をホルムアルデヒド
で固定した。固定したプレートを０．１Ｍのホウ酸緩衝
液（ｐＨ８．５）で洗浄し、１％のメチレンブルーで１
０分間染色した。染色したプレートを再びホウ酸緩衝液
で洗浄し、風乾した。その後、０．１ＮのＨＣｌを使用
してプレートから染料を４２oＣで２０分間溶離する
と、溶離したものの吸収は６３０ｎｍであった。
髄細胞を大腿骨および頸骨から収集した。ＤＭＥＭ＋１
０％ウマ血清中に単一細胞懸濁液を調製し、１０5細胞
／ｍＬに調整し、１．０ｍＬの懸濁液／ウェルで２４ウ
ェルプレート中にプレートした。次いで、各ウェルにＭ
−ＣＳＦ（０．１ｍＬの５００Ｕ／ｍＬの貯蔵液）、Ｇ
Ｍ−ＣＳＦ（０．１ｍＬの５００Ｕ／ｍＬの貯蔵液）ま
たは０．１ｍＬのＰＢＳを加えた。これらのプレート
を、ＣＯ2で加湿したインキュベータ中で６日間インキ
ュベートし、ＰＢＳで洗浄し、細胞をホルムアルデヒド
で固定した。固定したプレートを０．１Ｍのホウ酸緩衝
液（ｐＨ８．５）で洗浄し、１％のメチレンブルーで１
０分間染色した。染色したプレートを再びホウ酸緩衝液
で洗浄し、風乾した。その後、０．１ＮのＨＣｌを使用
してプレートから染料を４２oＣで２０分間溶離する
と、溶離したものの吸収は６３０ｎｍであった。
【００３９】上記の結果を以下の表２に示す。これらの
結果は、生物的効力が投与の手段に無関係であることを
示す。
結果は、生物的効力が投与の手段に無関係であることを
示す。
【００４０】
【表２】
【図１】半ビボにおけるＭ−ＣＳＦの投与に次ぐ、イン
ビボにおけるＴＧＦ−β１の投与後の、マウスの骨髄前
駆細胞由来のマクロファージの数の増加を、コントロー
ルのパーセントで表したものを示す。この実験は、実施
例１において記載されている。
ビボにおけるＴＧＦ−β１の投与後の、マウスの骨髄前
駆細胞由来のマクロファージの数の増加を、コントロー
ルのパーセントで表したものを示す。この実験は、実施
例１において記載されている。
【図２】半ビボにおけるＧＭ−ＣＳＦの投与に次ぐ、イ
ンビボにおけるＴＧＦ−β１の投与後の、マウスの骨髄
前駆細胞由来のマクロファージおよび顆粒球の数の増加
を、コントロールのパーセントで表したものを示す。こ
の実験は、実施例１において記載されている。
ンビボにおけるＴＧＦ−β１の投与後の、マウスの骨髄
前駆細胞由来のマクロファージおよび顆粒球の数の増加
を、コントロールのパーセントで表したものを示す。こ
の実験は、実施例１において記載されている。
【図３】半ビボにおけるＧＭ−ＣＳＦの投与に次ぐ、イ
ンビボにおけるＴＧＦ−β１の投与後の、マウスの骨髄
前駆細胞由来のマクロファージおよび顆粒球の投与依存
性数の増加を、コントロールのパーセントで表したもの
を示す。この実験は、実施例２（Ｂ）において記載され
ている。
ンビボにおけるＴＧＦ−β１の投与後の、マウスの骨髄
前駆細胞由来のマクロファージおよび顆粒球の投与依存
性数の増加を、コントロールのパーセントで表したもの
を示す。この実験は、実施例２（Ｂ）において記載され
ている。
フロントページの続き (71)出願人 391015708 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カン パニー ＢＲＩＳＴＯＬ−ＭＹＥＲＳ ＳＱＵＩＢ Ｂ ＣＯＭＰＡＮＹ アメリカ合衆国ニューヨーク州 10154 ニューヨーク パーク アベニユー 345 (72)発明者 イシア バーシュカー アメリカ合衆国 コネティカット 06410, チェシア，カリアー ウエイ 29 (72)発明者 ジョゼフ エイ．カーリノ アメリカ合衆国 カリフォルニア 94122, サンフランシスコ，エヌオー．５，ヒュー ゴ ストリート 445 (72)発明者 キム ネダーマン アメリカ合衆国 コネティカット 06770, ノーガタック，クレストウッド ドライブ 183 (72)発明者 バーニス シャクター アメリカ合衆国 コネティカット 96443, マディソン，ダーラム ロード 748 (72)発明者 ラリー エリングズワース アメリカ合衆国 カリフォルニア 95148, サンホゼ，ウッドリイ ドライブ 3566 (72)発明者 ジョージ スパイタルニー アメリカ合衆国 コネティカット 06410, チェシア，ブルックフィールド コート ６
Claims (14)
- 【請求項１】哺乳類顆粒球または単核細胞／マクロファ
ージの増殖および分化を誘導する方法であって、 造血幹細胞を、有効量のＴＧＦ−βに接触させる工程；
および該造血幹細胞を、該ＴＧＦ−βと接触させてから
０〜５日の間に有効量のＣＳＦと接触させる工程を含
む、方法。 - 【請求項２】前記ＣＳＦがＭ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦおよ
びＧＭ−ＣＳＦからなる群から選択される、請求項１に
記載の方法。 - 【請求項３】前記ＴＧＦ−βがＴＧＦ−β１およびＴＧ
Ｆ−β２からなる群から選択される、請求項１に記載の
方法。 - 【請求項４】前記造血幹細胞を、ＴＧＦ−βと接触させ
てから約１から２日の間にＣＳＦと接触させる、請求項
１に記載の方法。 - 【請求項５】有効量のＴＧＦ−βを、造血幹細胞を有す
る哺乳類に投与することによって、該造血幹細胞をイン
ビボにおいてＴＧＦ−βと接触させる、請求項１に記載
の方法。 - 【請求項６】前記造血幹細胞をＣＳＦと接触させる前で
あって、該造血幹細胞をＴＧＦ−βと接触させた後に、
該造血幹細胞を前記哺乳類から除去し、該造血幹細胞を
ＣＳＦと半ビボで接触させる工程をさらに含む、請求項
５に記載の方法。 - 【請求項７】前記造血幹細胞をＣＳＦと接触させた後、
単核細胞／マクロファージまたは顆粒球の追加を必要と
する哺乳類に、該造血幹細胞を誘導させる工程をさらに
含む、請求項６に記載の方法。 - 【請求項８】インビボで有効量のＣＳＦを前記哺乳類に
投与することによって、前記造血幹細胞をＣＳＦと接触
させる、請求項５に記載の方法。 - 【請求項９】単核細胞／マクロファージまたは顆粒球の
増殖および分化を誘導するための組成物であって、有効
量のＴＧＦ−βおよび有効量のＣＳＦを含有する組成
物。 - 【請求項１０】前記ＣＳＦが、Ｍ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ
およびＧＭ−ＣＳＦからなる群から選択される、請求項
９に記載の組成物。 - 【請求項１１】前記ＴＧＦ−βがＴＧＦ−β１である、
請求項９に記載の組成物。 - 【請求項１２】単核細胞／マクロファージまたは顆粒球
の増殖および分化を誘導するためのキットであって、 有効量のＴＧＦ−βを有する第１の容器、および有効量
のＣＳＦを有する第２の容器を含むキット。 - 【請求項１３】前記ＴＧＦ−βがＴＧＦ−β１である、
請求項１２に記載のキット。 - 【請求項１４】前記ＣＳＦが、Ｍ−ＣＳＦ、Ｇ−ＣＳＦ
およびＧＭ−ＣＳＦからなる群から選択される、請求項
１２に記載のキット。
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|---|---|---|---|
| US07/513,999 US5147799A (en) | 1990-04-25 | 1990-04-25 | Repopulation of macrophages and granulocytes using transforming growth factor-beta |
| US513,999 | 1990-04-25 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05252940A true JPH05252940A (ja) | 1993-10-05 |
Family
ID=24045403
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP3095842A Pending JPH05252940A (ja) | 1990-04-25 | 1991-04-25 | 形質転換成長因子βを使用した、マクロファージおよび顆粒球の再集団化 |
Country Status (8)
| Country | Link |
|---|---|
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| EP (1) | EP0454400A3 (ja) |
| JP (1) | JPH05252940A (ja) |
| KR (1) | KR0173967B1 (ja) |
| CA (1) | CA2040969C (ja) |
| HU (1) | HUT62030A (ja) |
| IL (1) | IL97922A0 (ja) |
| ZA (1) | ZA913087B (ja) |
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|---|---|---|---|---|
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| US5795568A (en) * | 1984-09-19 | 1998-08-18 | Novartis Corporation | Method of treating infectious disease with GM-CSF |
| US5529982A (en) * | 1985-08-06 | 1996-06-25 | Celtrix Pharmaceuticals, Inc. | Inducing granulocyte production or B cell production in peripheral blood by TGF-β |
| CA2067498C (en) * | 1990-09-21 | 1996-10-15 | Joseph Carlino | Composition for inducing granulocyte production or b cell production in peripheral blood |
| WO1993014782A1 (en) * | 1992-01-29 | 1993-08-05 | La Jolla Cancer Research Foundation | Methods of controlling the proliferation of macrophages |
| AU1024899A (en) | 1997-09-19 | 1999-04-12 | Biopharm Gesellschaft Zur Biotechnologischen Entwicklung Von Pharmaka Mbh | Cytokines having neurotrophic activity |
| US8338373B2 (en) * | 2003-10-24 | 2012-12-25 | Nora Therapeutics, Inc. | Method for reducing the risk of spontaneous abortion in a human female subject |
| EP2198875A1 (en) * | 2003-10-24 | 2010-06-23 | Nora, LLC | A method for reducing the likelihood of preterm labour in a subject in need thereof |
| US20090226397A1 (en) * | 2003-10-24 | 2009-09-10 | Nora Therapeutics, Inc. | Compositions and methods for reducing the likelihood of implantation failure or miscarriage in recipients of artificial insemination |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0169016B2 (en) * | 1984-07-16 | 2004-04-28 | Celtrix Pharmaceuticals, Inc. | Polypeptide cartilage-inducing factors found in bone |
| US4843063A (en) * | 1984-07-16 | 1989-06-27 | Collagen Corporation | Polypeptide cartilage-inducing factors found in bone |
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