JPH05194589A - 環状ペプチド、その製造法および用途 - Google Patents
環状ペプチド、その製造法および用途Info
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- JPH05194589A JPH05194589A JP4173065A JP17306592A JPH05194589A JP H05194589 A JPH05194589 A JP H05194589A JP 4173065 A JP4173065 A JP 4173065A JP 17306592 A JP17306592 A JP 17306592A JP H05194589 A JPH05194589 A JP H05194589A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】エンドセリン受容体拮抗作用を有する新規な環
状ペプチドの創製。 【構成】式 【化１】 ［式中、ＡはD-酸性-α-アミノ酸残基を、ＢはD-中性-
α-アミノ酸残基を、ＣはL-α-アミノ酸残基を、Ｄは芳
香環基を有するD-α-アミノ酸残基を、 Ｒは水素原子ま
たはアミド化もしくはエステル化されていてもよいカル
ボキシル基を、nはＲが水素原子の場合は２以上の整数
を、Ｒがアミド化もしくはエステル化されていてもよい
カルボキシル基の場合は正の整数をそれぞれ示す。］で
表される環状ペプチドまたはその塩。 【効果】顕著なエンドセリン受容体拮抗作用を有し、た
とえば高血圧治療剤、心・脳循環疾患治療剤、腎疾患治
療剤等の医薬として有用。
状ペプチドの創製。 【構成】式 【化１】 ［式中、ＡはD-酸性-α-アミノ酸残基を、ＢはD-中性-
α-アミノ酸残基を、ＣはL-α-アミノ酸残基を、Ｄは芳
香環基を有するD-α-アミノ酸残基を、 Ｒは水素原子ま
たはアミド化もしくはエステル化されていてもよいカル
ボキシル基を、nはＲが水素原子の場合は２以上の整数
を、Ｒがアミド化もしくはエステル化されていてもよい
カルボキシル基の場合は正の整数をそれぞれ示す。］で
表される環状ペプチドまたはその塩。 【効果】顕著なエンドセリン受容体拮抗作用を有し、た
とえば高血圧治療剤、心・脳循環疾患治療剤、腎疾患治
療剤等の医薬として有用。
Description
【発明の詳細な説明】
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、高血圧治療剤、心・脳
循環疾患治療剤、腎疾患治療剤、ぜんそく治療剤等、医
薬として有用なエンドセリン受容体拮抗作用を有する新
規な環状ペプチドおよびその用途に関する。
循環疾患治療剤、腎疾患治療剤、ぜんそく治療剤等、医
薬として有用なエンドセリン受容体拮抗作用を有する新
規な環状ペプチドおよびその用途に関する。
【０００２】
【従来の技術】エンドセリン(ET)は1988年、柳沢らによ
りブタ大動脈内皮細胞の培養上清から単離され構造決定
された21個のアミノ酸からなる血管収縮性ペプチドであ
る[柳沢ら、ネイチャー(Nature)，332巻、411〜412
頁]。 その後、エンドセリンをコードする遺伝子の研
究から、エンドセリンに構造の類似したペプチドが存在
することが明らかにされ、それぞれエンドセリン-１(ET
-１)、エンドセリン-２(ET-２)、エンドセリン-３(ET-
３)と命名されている。
りブタ大動脈内皮細胞の培養上清から単離され構造決定
された21個のアミノ酸からなる血管収縮性ペプチドであ
る[柳沢ら、ネイチャー(Nature)，332巻、411〜412
頁]。 その後、エンドセリンをコードする遺伝子の研
究から、エンドセリンに構造の類似したペプチドが存在
することが明らかにされ、それぞれエンドセリン-１(ET
-１)、エンドセリン-２(ET-２)、エンドセリン-３(ET-
３)と命名されている。
【０００３】上記のエンドセリン類は生体内に存在し血
管収縮作用を有していることから、循環系調節に関与す
る内因性因子であると予想され、高血圧症、心・脳循環
疾患(たとえば心筋梗塞)、腎疾患(たとえば急性腎不全)
との関係が推定されている。また、気管支平滑筋収縮作
用も有しており、ぜんそくとの関係も推定されている。
管収縮作用を有していることから、循環系調節に関与す
る内因性因子であると予想され、高血圧症、心・脳循環
疾患(たとえば心筋梗塞)、腎疾患(たとえば急性腎不全)
との関係が推定されている。また、気管支平滑筋収縮作
用も有しており、ぜんそくとの関係も推定されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】上記のエンドセリン類
の受容体に対する拮抗剤が得られれば該エンドセリン類
の作用機作の解明に役立つのみならず、上記の疾患の有
効な治療薬になる可能性が大きいと考えられる。 これ
まで、発酵生産物より得られたエンドセリン受容体拮抗
作用を有する環状ペンタペプチド類について特許出願が
なされている(特願平2-413828および特願平3-126160)
が、それと同様のあるいはそれ以上の効果を有する新規
ペプチドを提供することが本発明の課題である。
の受容体に対する拮抗剤が得られれば該エンドセリン類
の作用機作の解明に役立つのみならず、上記の疾患の有
効な治療薬になる可能性が大きいと考えられる。 これ
まで、発酵生産物より得られたエンドセリン受容体拮抗
作用を有する環状ペンタペプチド類について特許出願が
なされている(特願平2-413828および特願平3-126160)
が、それと同様のあるいはそれ以上の効果を有する新規
ペプチドを提供することが本発明の課題である。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、エンドセ
リン類による強力な血管平滑筋収縮活性を抑制する作用
を指標として鋭意研究を進め、顕著なエンドセリン受容
体拮抗作用を有する新規な環状ペプチドを創製し、さら
に検討を加えて本発明を完成した。
リン類による強力な血管平滑筋収縮活性を抑制する作用
を指標として鋭意研究を進め、顕著なエンドセリン受容
体拮抗作用を有する新規な環状ペプチドを創製し、さら
に検討を加えて本発明を完成した。
【０００６】すなわち本発明は、 １．式［I］
【０００７】
【化２】
【０００８】［式中、ＡはD-酸性-α-アミノ酸残基を、
ＢはD-中性-α-アミノ酸残基を、ＣはL-α-アミノ酸残
基を、Ｄは芳香環基を有するD-α-アミノ酸残基を、 Ｒ
は水素原子またはアミド化もしくはエステル化されてい
てもよいカルボキシル基を、nはＲが水素原子の場合は
２以上の整数を、Ｒがアミド化もしくはエステル化され
ていてもよいカルボキシル基の場合は正の整数をそれぞ
れ示す。］で表される環状ペプチドまたはその塩、 ２．式［I］で表される環状ペプチドまたはその塩の製
造法、および、 ３．式［I］で表される環状ペプチドまたはその薬理学
的に許容される塩を含有するエンドセリン受容体拮抗剤
に関する。
ＢはD-中性-α-アミノ酸残基を、ＣはL-α-アミノ酸残
基を、Ｄは芳香環基を有するD-α-アミノ酸残基を、 Ｒ
は水素原子またはアミド化もしくはエステル化されてい
てもよいカルボキシル基を、nはＲが水素原子の場合は
２以上の整数を、Ｒがアミド化もしくはエステル化され
ていてもよいカルボキシル基の場合は正の整数をそれぞ
れ示す。］で表される環状ペプチドまたはその塩、 ２．式［I］で表される環状ペプチドまたはその塩の製
造法、および、 ３．式［I］で表される環状ペプチドまたはその薬理学
的に許容される塩を含有するエンドセリン受容体拮抗剤
に関する。
【０００９】上記式［I］はＡ−Ｄ間も含めて５ケ所の
アミド結合が存在することにより分子全体として環を形
成していることを示し、本明細書においては cyclo[-Ａ
-NH-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ-Ｃ-Ｄ-]と表す場合もある。
アミド結合が存在することにより分子全体として環を形
成していることを示し、本明細書においては cyclo[-Ａ
-NH-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ-Ｃ-Ｄ-]と表す場合もある。
【００１０】上記式［I］において、Ａで表されるD-酸
性-α-アミノ酸残基の母体となるアミノ酸としては、た
とえば、側鎖にカルボキシル基、スルホニル基またはテ
トラゾリル基のような酸性基を有するアミノ酸があげら
れる。 その具体例としては、D-グルタミン酸、D-アス
パラギン酸、D-システイン酸、D-ホモシステイン酸、D-
β-(５-テトラゾリル)アラニン、D-２-アミノ-４-(５-
テトラゾリル)酪酸などがあげられるが、特にD-グルタ
ミン酸、D-アスパラギン酸、D-システイン酸が好まし
い。
性-α-アミノ酸残基の母体となるアミノ酸としては、た
とえば、側鎖にカルボキシル基、スルホニル基またはテ
トラゾリル基のような酸性基を有するアミノ酸があげら
れる。 その具体例としては、D-グルタミン酸、D-アス
パラギン酸、D-システイン酸、D-ホモシステイン酸、D-
β-(５-テトラゾリル)アラニン、D-２-アミノ-４-(５-
テトラゾリル)酪酸などがあげられるが、特にD-グルタ
ミン酸、D-アスパラギン酸、D-システイン酸が好まし
い。
【００１１】上記式［I］において、Ｂで表されるD-中
性-α-アミノ酸残基の母体となるアミノ酸としては、た
とえば、D-アラニン、D-バリン、D-ノルバリン、 D-ロイ
シン、D-イソロイシン、D-アロイソロイシン、D-ノルロ
イシン、D-ターシャリーロイシン、D-ガンマメチルロイ
シン、D-フェニルグリシン、D-フェニルアラニンなどの
D-α-アミノ酸があげられ、特にD-ロイシン、D-アロイ
ソロイシン、D-ターシャリーロイシン、D-ガンマメチル
ロイシン、D-フェニルグリシンが好ましい。
性-α-アミノ酸残基の母体となるアミノ酸としては、た
とえば、D-アラニン、D-バリン、D-ノルバリン、 D-ロイ
シン、D-イソロイシン、D-アロイソロイシン、D-ノルロ
イシン、D-ターシャリーロイシン、D-ガンマメチルロイ
シン、D-フェニルグリシン、D-フェニルアラニンなどの
D-α-アミノ酸があげられ、特にD-ロイシン、D-アロイ
ソロイシン、D-ターシャリーロイシン、D-ガンマメチル
ロイシン、D-フェニルグリシンが好ましい。
【００１２】上記式［I］において、Ｃで表されるL-α-
アミノ酸残基の母体となるアミノ酸としては、たとえ
ば、グリシン、L-アラニン、L-バリン、L-ノルバリン、
L-ロイシン、L-イソロイシン、L-ターシャリーロイシ
ン、L-ノルロイシン、L-メチオニン、L-２-アミノ酪
酸、L-セリン、L-スレオニン、L-フェニルアラニン、L-
アスパラギン酸、L-グルタミン酸、L-アスパラギン、L-
グルタミン、L-リジン、L-トリプトファン、L-アルギニ
ン、L-チロシン、L-プロリンなど、通常一般に知られて
いるL-α-アミノ酸があげられ、特にL-ロイシン、L-ノ
ルロイシン、L-トリプトファンが好ましい。
アミノ酸残基の母体となるアミノ酸としては、たとえ
ば、グリシン、L-アラニン、L-バリン、L-ノルバリン、
L-ロイシン、L-イソロイシン、L-ターシャリーロイシ
ン、L-ノルロイシン、L-メチオニン、L-２-アミノ酪
酸、L-セリン、L-スレオニン、L-フェニルアラニン、L-
アスパラギン酸、L-グルタミン酸、L-アスパラギン、L-
グルタミン、L-リジン、L-トリプトファン、L-アルギニ
ン、L-チロシン、L-プロリンなど、通常一般に知られて
いるL-α-アミノ酸があげられ、特にL-ロイシン、L-ノ
ルロイシン、L-トリプトファンが好ましい。
【００１３】上記式［I］において、Ｄで表される芳香
環基を有するD-α-アミノ酸残基の母体となるアミノ酸
としては、たとえば、側鎖に芳香環基を有するD-α-ア
ミノ酸があげられる。 その具体例としては、D-トリプ
トファン、D-５-メチルトリプトファン、D-フェニルア
ラニン、D-チロシン、D-１-ナフチルアラニン、D-２-ナ
フチルアラニンなどがあげられ、特にD-トリプトファ
ン、D-５-メチルトリプトファンが好ましい。
環基を有するD-α-アミノ酸残基の母体となるアミノ酸
としては、たとえば、側鎖に芳香環基を有するD-α-ア
ミノ酸があげられる。 その具体例としては、D-トリプ
トファン、D-５-メチルトリプトファン、D-フェニルア
ラニン、D-チロシン、D-１-ナフチルアラニン、D-２-ナ
フチルアラニンなどがあげられ、特にD-トリプトファ
ン、D-５-メチルトリプトファンが好ましい。
【００１４】上記式［I］において、Ｒは水素原子また
はアミド化もしくはエステル化されていてもよいカルボ
キシル基を示す。 ここでアミド化されたカルボキシル
基としてはたとえば-CONR1R2[R1,R2はそれぞれ水素原子
または芳香環基で置換されていてもよい低級アルキル
基；芳香環基はたとえば、フェニル、ナフチルなど；低
級アルキル基はたとえばＣ1-3アルキル基で、メチル、
エチル、プロピルなど]などが、また、エステル化され
たカルボキシル基としてはたとえば-COOＲ'[Ｒ'は芳香
環基で置換されていてもよい低級アルキル基；芳香環基
はたとえば、フェニル、ナフチルなど；低級アルキル基
はたとえばＣ1-3アルキル基で、メチル、エチル、プロ
ピルなど]などがあげられる。 アミド化されたカルボ
キシル基(-CONR1R2)の具体例としては、カルバモイル、
Ｎ-メチルカルバモイル、Ｎ,Ｎ-ジメチルカルバモイ
ル、Ｎ-ベンジルカルバモイルなどが、また、エステル
化されたカルボキシル基(-COOＲ')の具体例としては、
メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ベンジルオ
キシカルボニルなどがあげられる。 Ｒとしては水素原
子またはカルボキシル基(-COOH)がより好ましい。 ま
た、nはＲが水素原子の場合は２以上の整数を、Ｒがア
ミド化もしくはエステル化されていてもよいカルボキシ
ル基の場合は正の整数を示し、好ましくは、Ｒが水素原
子の場合はnは２〜６、Ｒがアミド化もしくはエステル
化されていてもよいカルボキシル基の場合はnは１〜６
である。
はアミド化もしくはエステル化されていてもよいカルボ
キシル基を示す。 ここでアミド化されたカルボキシル
基としてはたとえば-CONR1R2[R1,R2はそれぞれ水素原子
または芳香環基で置換されていてもよい低級アルキル
基；芳香環基はたとえば、フェニル、ナフチルなど；低
級アルキル基はたとえばＣ1-3アルキル基で、メチル、
エチル、プロピルなど]などが、また、エステル化され
たカルボキシル基としてはたとえば-COOＲ'[Ｒ'は芳香
環基で置換されていてもよい低級アルキル基；芳香環基
はたとえば、フェニル、ナフチルなど；低級アルキル基
はたとえばＣ1-3アルキル基で、メチル、エチル、プロ
ピルなど]などがあげられる。 アミド化されたカルボ
キシル基(-CONR1R2)の具体例としては、カルバモイル、
Ｎ-メチルカルバモイル、Ｎ,Ｎ-ジメチルカルバモイ
ル、Ｎ-ベンジルカルバモイルなどが、また、エステル
化されたカルボキシル基(-COOＲ')の具体例としては、
メトキシカルボニル、エトキシカルボニル、ベンジルオ
キシカルボニルなどがあげられる。 Ｒとしては水素原
子またはカルボキシル基(-COOH)がより好ましい。 ま
た、nはＲが水素原子の場合は２以上の整数を、Ｒがア
ミド化もしくはエステル化されていてもよいカルボキシ
ル基の場合は正の整数を示し、好ましくは、Ｒが水素原
子の場合はnは２〜６、Ｒがアミド化もしくはエステル
化されていてもよいカルボキシル基の場合はnは１〜６
である。
【００１５】ＡとＢではさまれた-NH-CHＲ-(CH2)n-CO-
をひとつの基として見ると、Ｒが水素原子の場合は、γ
-アミノ酪酸、δ-アミノ吉草酸、ε-アミノカプロン酸
などのアミノ酸［NH2-(CH2)n+1-COOH］のNHのHとCOOHの
OHとを取り除いてできる基を、Ｒがカルボキシル基の場
合は、アスパラギン酸、グルタミン酸、２-アミノアジ
ピン酸などの酸性-α-アミノ酸[NH2-CH(COOH)-(CH2)n-C
OOH]のNHのHと末端のCOOHのOHとを取り除いてできる基
をそれぞれ表す。 後者の場合、当該酸性-α-アミノ酸
はD、L、DLのいずれでもよい。 本発明においては特にγ
-アミノ酪酸が好ましい。
をひとつの基として見ると、Ｒが水素原子の場合は、γ
-アミノ酪酸、δ-アミノ吉草酸、ε-アミノカプロン酸
などのアミノ酸［NH2-(CH2)n+1-COOH］のNHのHとCOOHの
OHとを取り除いてできる基を、Ｒがカルボキシル基の場
合は、アスパラギン酸、グルタミン酸、２-アミノアジ
ピン酸などの酸性-α-アミノ酸[NH2-CH(COOH)-(CH2)n-C
OOH]のNHのHと末端のCOOHのOHとを取り除いてできる基
をそれぞれ表す。 後者の場合、当該酸性-α-アミノ酸
はD、L、DLのいずれでもよい。 本発明においては特にγ
-アミノ酪酸が好ましい。
【００１６】本発明の環状ペプチド［I］の薬理学的に
許容される塩としてはナトリウム塩、カリウム塩、カル
シウム塩、マグネシウム塩などの金属塩、塩酸塩、硫酸
塩、リン酸塩などの無機酸付加塩、酢酸塩、プロピオン
酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、蓚酸塩など
の有機酸塩などがあげられる。
許容される塩としてはナトリウム塩、カリウム塩、カル
シウム塩、マグネシウム塩などの金属塩、塩酸塩、硫酸
塩、リン酸塩などの無機酸付加塩、酢酸塩、プロピオン
酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、リンゴ酸塩、蓚酸塩など
の有機酸塩などがあげられる。
【００１７】本発明の環状ペプチド［Ｉ］はペプチド合
成の常套手段で製造しうる。 すなわち、液相合成法、
固相合成法のいずれによってもよいが、液相合成法が好
ましい場合もある。 そのようなペプチド合成の手段
は、任意の公知の方法に従えばよく、たとえば、M. Bod
ansky および M. A. Ondetti 著、ペプチド シンセシス
(Peptide Synthesis)、インターサイエンス、ニューヨ
ーク、1966年；F. M. Finn および K. Hofmann 著、ザ
プロテインズ(The Proteins)、第２巻、H. Nenrath、R.
L. Hill 編集、アカデミック プレス インク、ニュー
ヨーク、1976年；泉屋信夫他著「ペプチド合成の基礎と
実験」丸善(株) 1985年；矢島治明、榊原俊平他著、生
化学実験講座１、日本生化学会編、東京化学同人 1977
年；木村俊他著、続生化学実験講座２、日本生化学会
編、東京化学同人 1987年；J. M. Stewart および J.
D. Young 著、ソリッド フェイズ ペプチド シンセシス
(Solid Phase Peptide Synthesis)、ピアス ケミカル
カンパニー、イリノイ、1984年などに記載された方法、
たとえばアジド法、クロリド法、酸無水物法、混酸無水
物法、DCC法、活性エステル法、ウッドワード試薬Ｋを
用いる方法、カルボニルイミダゾール法、酸化還元法、
DCC/HONB法、BOP試薬を用いる方法などがあげられる。
成の常套手段で製造しうる。 すなわち、液相合成法、
固相合成法のいずれによってもよいが、液相合成法が好
ましい場合もある。 そのようなペプチド合成の手段
は、任意の公知の方法に従えばよく、たとえば、M. Bod
ansky および M. A. Ondetti 著、ペプチド シンセシス
(Peptide Synthesis)、インターサイエンス、ニューヨ
ーク、1966年；F. M. Finn および K. Hofmann 著、ザ
プロテインズ(The Proteins)、第２巻、H. Nenrath、R.
L. Hill 編集、アカデミック プレス インク、ニュー
ヨーク、1976年；泉屋信夫他著「ペプチド合成の基礎と
実験」丸善(株) 1985年；矢島治明、榊原俊平他著、生
化学実験講座１、日本生化学会編、東京化学同人 1977
年；木村俊他著、続生化学実験講座２、日本生化学会
編、東京化学同人 1987年；J. M. Stewart および J.
D. Young 著、ソリッド フェイズ ペプチド シンセシス
(Solid Phase Peptide Synthesis)、ピアス ケミカル
カンパニー、イリノイ、1984年などに記載された方法、
たとえばアジド法、クロリド法、酸無水物法、混酸無水
物法、DCC法、活性エステル法、ウッドワード試薬Ｋを
用いる方法、カルボニルイミダゾール法、酸化還元法、
DCC/HONB法、BOP試薬を用いる方法などがあげられる。
【００１８】本発明の環状ペプチド［I］は、そのペプ
チド結合の任意の位置で２分される２種のフラグメント
の一方に相当する反応性カルボキシル基を有する原料
と、他方のフラグメントに相当する反応性アミノ基を有
する原料をペプチド合成の常套手段で縮合させ、ついで
生成物のＣ末端α-カルボキシル基およびＮ末端α-アミ
ノ基の保護基を同時にまたは段階的に除去したのちこの
両者を公知の縮合方法により分子内で縮合し環状化合物
を得、さらに生成物が保護基を有する場合、その保護基
を常套手段で除去することにより製造しうる。 この環
化反応は式 Ｈ−Ｘ−ＯＨ ［式中、Ｘは−Ａ-NH-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ-Ｃ-Ｄ−，−N
H-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ-Ｃ-Ｄ-Ａ−，−Ｂ-Ｃ-Ｄ-Ａ-NH-C
HＲ-(CH2)n-CO−，−Ｃ-Ｄ-Ａ-NH-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ−
または−Ｄ-Ａ-NH-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ-Ｃ−を示し、
Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｒおよびnは請求項１の記載と同意義
を有する。］で表されるペプチドまたは該ペプチドの反
応性誘導体を環化する反応である。
チド結合の任意の位置で２分される２種のフラグメント
の一方に相当する反応性カルボキシル基を有する原料
と、他方のフラグメントに相当する反応性アミノ基を有
する原料をペプチド合成の常套手段で縮合させ、ついで
生成物のＣ末端α-カルボキシル基およびＮ末端α-アミ
ノ基の保護基を同時にまたは段階的に除去したのちこの
両者を公知の縮合方法により分子内で縮合し環状化合物
を得、さらに生成物が保護基を有する場合、その保護基
を常套手段で除去することにより製造しうる。 この環
化反応は式 Ｈ−Ｘ−ＯＨ ［式中、Ｘは−Ａ-NH-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ-Ｃ-Ｄ−，−N
H-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ-Ｃ-Ｄ-Ａ−，−Ｂ-Ｃ-Ｄ-Ａ-NH-C
HＲ-(CH2)n-CO−，−Ｃ-Ｄ-Ａ-NH-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ−
または−Ｄ-Ａ-NH-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ-Ｃ−を示し、
Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｒおよびnは請求項１の記載と同意義
を有する。］で表されるペプチドまたは該ペプチドの反
応性誘導体を環化する反応である。
【００１９】原料の反応に関与すべきでない官能基の保
護および保護基、ならびにその保護基の脱離、反応に関
与する官能基の活性化などもまた公知の基あるいは公知
の手段から適宜選択しうる。
護および保護基、ならびにその保護基の脱離、反応に関
与する官能基の活性化などもまた公知の基あるいは公知
の手段から適宜選択しうる。
【００２０】原料のアミノ基の保護基としては、たとえ
ばベンジルオキシカルボニル、ターシャリーブチルオキ
シカルボニル、ターシャリーアミルオキシカルボニル、
イソボルニルオキシカルボニル、４-メトキシベンジル
オキシカルボニル、２-クロルベンジルオキシカルボニ
ル、アダマンチルオキシカルボニル、トリフルオロアセ
チル、フタリル、ホルミル、２-ニトロフェニルスルフ
ェニル、ジフェニルホスフィノチオイル、９-フルオレ
ニルメチルオキシカルボニルなどがあげられる。カルボ
キシル基の保護基としては、たとえばアルキルエステル
(たとえば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ター
シャリーブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シ
クロヘプチル、シクロオクチル、２-アダマンチルなど
のエステル基)、ベンジルエステル、４-ニトロベンジル
エステル、４-メトキシベンジルエステル、４-クロルベ
ンジルエステル、ベンズヒドリルエステル、フェナシル
エステル、ベンジルオキシカルボニルヒドラジド、ター
シャリーブチルオキシカルボニルヒドラジド、トリチル
ヒドラジドなどがあげられる。
ばベンジルオキシカルボニル、ターシャリーブチルオキ
シカルボニル、ターシャリーアミルオキシカルボニル、
イソボルニルオキシカルボニル、４-メトキシベンジル
オキシカルボニル、２-クロルベンジルオキシカルボニ
ル、アダマンチルオキシカルボニル、トリフルオロアセ
チル、フタリル、ホルミル、２-ニトロフェニルスルフ
ェニル、ジフェニルホスフィノチオイル、９-フルオレ
ニルメチルオキシカルボニルなどがあげられる。カルボ
キシル基の保護基としては、たとえばアルキルエステル
(たとえば、メチル、エチル、プロピル、ブチル、ター
シャリーブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シ
クロヘプチル、シクロオクチル、２-アダマンチルなど
のエステル基)、ベンジルエステル、４-ニトロベンジル
エステル、４-メトキシベンジルエステル、４-クロルベ
ンジルエステル、ベンズヒドリルエステル、フェナシル
エステル、ベンジルオキシカルボニルヒドラジド、ター
シャリーブチルオキシカルボニルヒドラジド、トリチル
ヒドラジドなどがあげられる。
【００２１】セリンの水酸基は、たとえばエステル化ま
たはエーテル化によって保護することができる。 この
エステル化に適する基としてはたとえばアセチル基など
の低級アルカノイル基、ベンゾイル基などのアロイル
基、ベンジルオキシカルボニル基、エチルオキシカルボ
ニル基などの炭酸から誘導される基などがあげられる。
またエーテル化に適する基としては、たとえばベンジル
基、テトラヒドロピラニル基、ターシャリーブチル基な
どである。 しかしながら、セリンの水酸基は必ずしも
保護する必要はない。
たはエーテル化によって保護することができる。 この
エステル化に適する基としてはたとえばアセチル基など
の低級アルカノイル基、ベンゾイル基などのアロイル
基、ベンジルオキシカルボニル基、エチルオキシカルボ
ニル基などの炭酸から誘導される基などがあげられる。
またエーテル化に適する基としては、たとえばベンジル
基、テトラヒドロピラニル基、ターシャリーブチル基な
どである。 しかしながら、セリンの水酸基は必ずしも
保護する必要はない。
【００２２】チロシンのフェノール性水酸基の保護基と
しては、たとえば、ベンジル、２,６-ジクロルベンジ
ル、２-ニトロベンジル、２-ブロムベンジルオキシカル
ボニル、ターシャリーブチルなどがあげられるが、必ず
しも保護する必要はない。メチオニンはスルホキシドの
形で保護しておいてもよい。
しては、たとえば、ベンジル、２,６-ジクロルベンジ
ル、２-ニトロベンジル、２-ブロムベンジルオキシカル
ボニル、ターシャリーブチルなどがあげられるが、必ず
しも保護する必要はない。メチオニンはスルホキシドの
形で保護しておいてもよい。
【００２３】ヒスチジンのイミダゾールの保護基として
は、パラトルエンスルホニル、４-メトキシ-２,３,６-
トリメチルベンゼンスルホニル、２,４-ジニトロフェニ
ル、ベンジルオキシメチル、ターシャリーブトキシメチ
ル、ターシャリーブトキシカルボニル、トリチル、９-
フルオレニルメチルオキシカルボニルなどがあげられる
が、必ずしも保護する必要はない。
は、パラトルエンスルホニル、４-メトキシ-２,３,６-
トリメチルベンゼンスルホニル、２,４-ジニトロフェニ
ル、ベンジルオキシメチル、ターシャリーブトキシメチ
ル、ターシャリーブトキシカルボニル、トリチル、９-
フルオレニルメチルオキシカルボニルなどがあげられる
が、必ずしも保護する必要はない。
【００２４】トリプトファンのインドールの保護基とし
ては、ホルミル、２,４,６-トリメチルベンゼンスルホ
ニル，２,４,６-トリメトキシベンゼンスルホニル，４-
メトキシ-２,３,６-トリメチルベンゼンスルホニル，
２,２,２-トリクロルエチルオキシカルボニル，ジフェ
ニルホスフィノチオイルなどがあげられるが、必ずしも
保護する必要はない。
ては、ホルミル、２,４,６-トリメチルベンゼンスルホ
ニル，２,４,６-トリメトキシベンゼンスルホニル，４-
メトキシ-２,３,６-トリメチルベンゼンスルホニル，
２,２,２-トリクロルエチルオキシカルボニル，ジフェ
ニルホスフィノチオイルなどがあげられるが、必ずしも
保護する必要はない。
【００２５】原料のカルボキシル基の活性化されたもの
としては、たとえば対応する酸無水物、アジド、活性エ
ステル［アルコール(たとえば、ペンタクロルフェノー
ル、２,４,５-トリクロルフェノール、 ２,４-ジニトロ
フェノール、 シアノメチルアルコール、パラニトロフェ
ノール、Ｎ-ヒドロキシ-５-ノルボルネン-２,３-ジカル
ボキシイミド、 Ｎ-ヒドロキシスクシミド、Ｎ-ヒドロキ
シフタルイミド、Ｎ-ヒドロキシベンズトリアゾール)と
のエステル］などがあげられる。 原料のアミノ基の
活性化されたものとしては、たとえば対応するリン酸ア
ミドがあげられる。
としては、たとえば対応する酸無水物、アジド、活性エ
ステル［アルコール(たとえば、ペンタクロルフェノー
ル、２,４,５-トリクロルフェノール、 ２,４-ジニトロ
フェノール、 シアノメチルアルコール、パラニトロフェ
ノール、Ｎ-ヒドロキシ-５-ノルボルネン-２,３-ジカル
ボキシイミド、 Ｎ-ヒドロキシスクシミド、Ｎ-ヒドロキ
シフタルイミド、Ｎ-ヒドロキシベンズトリアゾール)と
のエステル］などがあげられる。 原料のアミノ基の
活性化されたものとしては、たとえば対応するリン酸ア
ミドがあげられる。
【００２６】縮合反応は溶媒の存在下に行うことができ
る。 溶媒としては、ペプチド縮合反応に使用しうるこ
とが知られているものから適宜選択されうる。 たとえ
ば無水または含水のジメチルホルムアミド、ジメチルス
ルホキシド、ピリジン、クロロホルム、ジオキサン、ジ
クロルメタン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、
酢酸エチル、Ｎ-メチルピロリドンあるいはこれらの適
宜の混合物などがあげられる。
る。 溶媒としては、ペプチド縮合反応に使用しうるこ
とが知られているものから適宜選択されうる。 たとえ
ば無水または含水のジメチルホルムアミド、ジメチルス
ルホキシド、ピリジン、クロロホルム、ジオキサン、ジ
クロルメタン、テトラヒドロフラン、アセトニトリル、
酢酸エチル、Ｎ-メチルピロリドンあるいはこれらの適
宜の混合物などがあげられる。
【００２７】反応温度は、ペプチド結合形成反応に使用
されうることが知られている範囲から適宜選択され、通
常約−20℃〜30℃の範囲から適宜選択される。
されうることが知られている範囲から適宜選択され、通
常約−20℃〜30℃の範囲から適宜選択される。
【００２８】分子内環化反応はペプチドの任意の位置で
公知の方法で行なうことができる。たとえば、まず保護
されたペプチドのＣ末端アミノ酸の末端α-カルボキシ
ル保護基を公知の方法で脱離しついでこれを公知の方法
で活性化したのちＮ末端アミノ酸の末端α-アミノ保護
基を公知の方法で脱離するとともに分子内で環化するこ
ともできる。 あるいは保護されたペプチドのＣ末端ア
ミノ酸の末端α-カルボキシル保護基およびＮ末端アミ
ノ酸の末端α-アミノ保護基を同時に脱離したのち公知
の縮合反応により分子内で環化してもよい。 また分子
内環化反応は高度希釈下で行なったほうが好ましい場合
もある。
公知の方法で行なうことができる。たとえば、まず保護
されたペプチドのＣ末端アミノ酸の末端α-カルボキシ
ル保護基を公知の方法で脱離しついでこれを公知の方法
で活性化したのちＮ末端アミノ酸の末端α-アミノ保護
基を公知の方法で脱離するとともに分子内で環化するこ
ともできる。 あるいは保護されたペプチドのＣ末端ア
ミノ酸の末端α-カルボキシル保護基およびＮ末端アミ
ノ酸の末端α-アミノ保護基を同時に脱離したのち公知
の縮合反応により分子内で環化してもよい。 また分子
内環化反応は高度希釈下で行なったほうが好ましい場合
もある。
【００２９】保護基の脱離方法としては、たとえばＰd
黒あるいはＰd-炭素などの触媒の存在下での水素気流中
での接触還元や、また、無水フッ化水素、メタンスルホ
ン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トリフルオロ酢
酸あるいはこれらの混合液などによる酸処理や、また液
体アンモニア中ナトリウムによる還元などもあげられ
る。 上記酸処理による脱離反応は、一般に−20℃〜40
℃の温度で行なわれるが、酸処理においては、アニソー
ル、フェノール、チオアニソール、メタクレゾール、パ
ラクレゾール、ジメチルスルフィド、１,４-ブタンジチ
オール、１,２-エタンジチオールのようなカチオン補足
剤の添加が有効である。 また、ヒスチジンのイミダゾ
ール保護基として用いられる２,４-ジニトロフェニル基
はチオフェノール処理により除去され、トリプトファン
のインドール保護基として用いられるホルミル基は上記
の１,２-エタンジチオール、１,４-ブタンジチオールな
どの存在下の酸処理による脱保護以外に、希水酸化ナト
リウム、希アンモニアなどによるアルカリ処理によって
も除去される。
黒あるいはＰd-炭素などの触媒の存在下での水素気流中
での接触還元や、また、無水フッ化水素、メタンスルホ
ン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、トリフルオロ酢
酸あるいはこれらの混合液などによる酸処理や、また液
体アンモニア中ナトリウムによる還元などもあげられ
る。 上記酸処理による脱離反応は、一般に−20℃〜40
℃の温度で行なわれるが、酸処理においては、アニソー
ル、フェノール、チオアニソール、メタクレゾール、パ
ラクレゾール、ジメチルスルフィド、１,４-ブタンジチ
オール、１,２-エタンジチオールのようなカチオン補足
剤の添加が有効である。 また、ヒスチジンのイミダゾ
ール保護基として用いられる２,４-ジニトロフェニル基
はチオフェノール処理により除去され、トリプトファン
のインドール保護基として用いられるホルミル基は上記
の１,２-エタンジチオール、１,４-ブタンジチオールな
どの存在下の酸処理による脱保護以外に、希水酸化ナト
リウム、希アンモニアなどによるアルカリ処理によって
も除去される。
【００３０】このようにして製造された環状ペプチド
[I]は反応終了後、ペプチドの分離精製手段、たとえ
ば、抽出、分配、再沈殿、再結晶、カラムクロマトグラ
フィー、高速液体クロマトグラフィーなどによって採取
される。本発明の環状ペプチド［I］は自体公知の方法
により金属塩（たとえばナトリウム塩、カリウム塩、カ
ルシウム塩、マグネシウム塩など）、 塩基または塩基性
化合物との塩（たとえばアンモニウム塩、アルギニン塩
など）、酸付加塩、とりわけ薬理学的に許容される酸付
加塩としても得ることができ、たとえば、無機酸(たと
えば、塩酸、硫酸、リン酸)あるいは有機酸(たとえば、
酢酸、プロピオン酸、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、蓚
酸、メタンスルホン酸)などの塩があげられる。
[I]は反応終了後、ペプチドの分離精製手段、たとえ
ば、抽出、分配、再沈殿、再結晶、カラムクロマトグラ
フィー、高速液体クロマトグラフィーなどによって採取
される。本発明の環状ペプチド［I］は自体公知の方法
により金属塩（たとえばナトリウム塩、カリウム塩、カ
ルシウム塩、マグネシウム塩など）、 塩基または塩基性
化合物との塩（たとえばアンモニウム塩、アルギニン塩
など）、酸付加塩、とりわけ薬理学的に許容される酸付
加塩としても得ることができ、たとえば、無機酸(たと
えば、塩酸、硫酸、リン酸)あるいは有機酸(たとえば、
酢酸、プロピオン酸、クエン酸、酒石酸、リンゴ酸、蓚
酸、メタンスルホン酸)などの塩があげられる。
【００３１】本明細書において、アミノ酸およびペプチ
ドなどを略号で表示する場合、ＩＵＰＡＣ-ＩＵＢ Com
mission on Biochemical Nomenclature による略号ある
いは当該分野における慣用略号に基づくものであり、そ
の例を下記する。
ドなどを略号で表示する場合、ＩＵＰＡＣ-ＩＵＢ Com
mission on Biochemical Nomenclature による略号ある
いは当該分野における慣用略号に基づくものであり、そ
の例を下記する。
【００３２】 Gly ：グリシン Ala ：アラニン Val ：バリン Ile ：イソロイシン aIle ：アロイソロイシン Leu ：ロイシン Met ：メチオニン Arg ：アルギニン Lys ：リジン His ：ヒスチジン Asp ：アスパラギン酸 Glu ：グルタミン酸 Ser ：セリン Thr ：スレオニン Phe ：フェニルアラニン Tyr ：チロシン Trp ：トリプトファン Cys ：システイン γAbu ：γ-アミノ酪酸 δAva ：δ-アミノ吉草酸 εAca ：ε-アミノカプロン酸 また本明細書中で常用される保護基および試薬を下記の
略号で表記する。
略号で表記する。
【００３３】 Boc ：ターシャリーブトキシカルボニル Bzl ：ベンジル OBzl ：ベンジルエステル OPac ：フェナシルエステル ONB ：HONBエステル TFA ：トリフルオロ酢酸 TEA ：トリエチルアミン DMF ：Ｎ,Ｎ-ジメチルホルムアミド DCC ：Ｎ,Ｎ'-ジシクロヘキシルカルボジイミド DCU ：Ｎ,Ｎ'-ジシクロヘキシルウレア HONB ：Ｎ-ヒドロキシ-５-ノルボルネン-２,３-ジカ
ルボキシイミド DCM ：ジクロルメタン THF ：テトラヒドロフラン 次に、本発明の環状ペプチドの薬理作用について述べ
る。
ルボキシイミド DCM ：ジクロルメタン THF ：テトラヒドロフラン 次に、本発明の環状ペプチドの薬理作用について述べ
る。
【００３４】レセプター結合アッセ イ ブタの心臓より調製した膜画分をアッセイ用緩衝液を用
いて0.15mg/mlに 希釈し、これを100μlずつアッセイチ
ューブに分注しアッセイに用いる。 この膜画分懸濁液
に、５μMの放射性ヨードで標識したエンドセリン-１溶
液を２μl、さらに被検ペプチド溶液を３μl加えて、１
時間25℃で保温した。 次に膜画分懸濁液を氷冷したア
ッセイ用緩衝液900μlで希釈したのち、12,000×gで10
分間遠心して上清と沈さに分離した。 沈さには細胞膜
とこれに埋め込まれたエンドセリンＡ受容体が含まれ、
受容体に結合した放射性ヨード標識エンドセリンも沈さ
に回収される。 従って、この沈さの放射性ヨードをガ
ンマ線計測機により測定することにより、エンドセリン
Ａ受容体に結合した放射性ヨード標識エンドセリン量を
定量した。 結果は以下の表１のとおり。 なお、対照
化合物は特開平3-130299に記載の化合物である。
いて0.15mg/mlに 希釈し、これを100μlずつアッセイチ
ューブに分注しアッセイに用いる。 この膜画分懸濁液
に、５μMの放射性ヨードで標識したエンドセリン-１溶
液を２μl、さらに被検ペプチド溶液を３μl加えて、１
時間25℃で保温した。 次に膜画分懸濁液を氷冷したア
ッセイ用緩衝液900μlで希釈したのち、12,000×gで10
分間遠心して上清と沈さに分離した。 沈さには細胞膜
とこれに埋め込まれたエンドセリンＡ受容体が含まれ、
受容体に結合した放射性ヨード標識エンドセリンも沈さ
に回収される。 従って、この沈さの放射性ヨードをガ
ンマ線計測機により測定することにより、エンドセリン
Ａ受容体に結合した放射性ヨード標識エンドセリン量を
定量した。 結果は以下の表１のとおり。 なお、対照
化合物は特開平3-130299に記載の化合物である。
【００３５】
【表１】
【００３６】以上のように本発明の新規環状ペプチド
[I]またはその薬理学的に許容される塩はエンドセリン
受容体拮抗剤としての性質を有し、循環機能改善剤、血
管拡張剤またはぜんそく治療剤として用いることができ
る。
[I]またはその薬理学的に許容される塩はエンドセリン
受容体拮抗剤としての性質を有し、循環機能改善剤、血
管拡張剤またはぜんそく治療剤として用いることができ
る。
【００３７】
【作用・効果】本発明の新規な環状ペプチド［I］は、
エンドセリン受容体拮抗剤としてエンドセリンの血管収
縮活性の抑制に顕著な効果を奏する。 そのため本発明
の新規な環状ペプチドもしくはその塩は、循環機能改善
剤または心筋梗塞・急性腎不全等の治療剤またはぜんそ
く治療剤として用いることができる。
エンドセリン受容体拮抗剤としてエンドセリンの血管収
縮活性の抑制に顕著な効果を奏する。 そのため本発明
の新規な環状ペプチドもしくはその塩は、循環機能改善
剤または心筋梗塞・急性腎不全等の治療剤またはぜんそ
く治療剤として用いることができる。
【００３８】本発明の環状ペプチドを上記治療薬として
用いる場合、そのままあるいは薬理学的に許容される担
体、賦形剤、希釈剤と混合し、粉末、顆粒、錠剤、カプ
セル剤、注射剤、座剤、軟膏剤、徐放型製剤などの剤型
で経口的または非経口的に安全に投与することができ
る。 本発明の環状ペプチドは主として非経口的に投与
(たとえば、静脈あるいは皮下注射、脳室内あるいは脊
髄内投剤、経鼻投与、直腸投与)されるが、場合によっ
ては経口投与されることもある。
用いる場合、そのままあるいは薬理学的に許容される担
体、賦形剤、希釈剤と混合し、粉末、顆粒、錠剤、カプ
セル剤、注射剤、座剤、軟膏剤、徐放型製剤などの剤型
で経口的または非経口的に安全に投与することができ
る。 本発明の環状ペプチドは主として非経口的に投与
(たとえば、静脈あるいは皮下注射、脳室内あるいは脊
髄内投剤、経鼻投与、直腸投与)されるが、場合によっ
ては経口投与されることもある。
【００３９】本発明のペプチドは物質として安定である
ため生理食塩水の溶液として保存できるが、マンニトー
ル、ソルビトールを添加して凍結乾燥アンプルとし、使
用時に溶解することもできる。 本発明の環状ペプチド
は、遊離体としてあるいはその塩基塩または酸付加塩と
して投与され得る。 その投与量は、環状ペプチドの遊
離体、塩基塩、酸付加塩ともに、遊離体の量として、一
般に体重１kg当り１μg〜100mgの範囲が適量である。
さらに詳述すれば、投与量は対象疾患、症状、投与対
象、投与方法などによっても異なるが、たとえば成人の
高血圧症患者に対して注射で投与する場合、通常薬効成
分(ペプチド［I］)１回量として１μg/kg〜100mg/kg体
重程度、より好ましくは100μ/Kg〜20mg/Kg体重程度を
１日１回〜３回程度投与するのが好都合である。 ま
た、点滴でも効果があり、点滴の場合の全投与量は注射
の場合と同じである。
ため生理食塩水の溶液として保存できるが、マンニトー
ル、ソルビトールを添加して凍結乾燥アンプルとし、使
用時に溶解することもできる。 本発明の環状ペプチド
は、遊離体としてあるいはその塩基塩または酸付加塩と
して投与され得る。 その投与量は、環状ペプチドの遊
離体、塩基塩、酸付加塩ともに、遊離体の量として、一
般に体重１kg当り１μg〜100mgの範囲が適量である。
さらに詳述すれば、投与量は対象疾患、症状、投与対
象、投与方法などによっても異なるが、たとえば成人の
高血圧症患者に対して注射で投与する場合、通常薬効成
分(ペプチド［I］)１回量として１μg/kg〜100mg/kg体
重程度、より好ましくは100μ/Kg〜20mg/Kg体重程度を
１日１回〜３回程度投与するのが好都合である。 ま
た、点滴でも効果があり、点滴の場合の全投与量は注射
の場合と同じである。
【００４０】この環状ペプチドを治療剤として用いる場
合には、注意深く精製を行ない細菌や発熱物質が存在し
ないように注意しなければならない。
合には、注意深く精製を行ない細菌や発熱物質が存在し
ないように注意しなければならない。
【００４１】
【実施例】以下に実施例をあげて本発明をさらに具体的
に説明する。 なお、実施例中のα-アミノ酸のD,Lは特
記されているもの以外はL体である。
に説明する。 なお、実施例中のα-アミノ酸のD,Lは特
記されているもの以外はL体である。
【００４２】実施例で用いた薄相クロマトグラフィーの
プレートはメルク社製品(SILICAGEL60F-254)を用い、展
開溶媒としては、Ｒf1：クロロホルム-メタノール(19：
１)、Ｒf2：クロロホルム-メタノール-酢酸(９：１：0.
5)を用いた。
プレートはメルク社製品(SILICAGEL60F-254)を用い、展
開溶媒としては、Ｒf1：クロロホルム-メタノール(19：
１)、Ｒf2：クロロホルム-メタノール-酢酸(９：１：0.
5)を用いた。
【００４３】実施例１ cyclo[-D-Glu-γAbu-D-Leu-Leu
-D-Trp-] の製造 (1) Boc-D-Leu-Leu-OBzl の製造 H-Leu-OBzl・Tos(21.6g)をDMF(100ml)に溶かして氷冷
し、TEA(7.7ml)，Boc-D-Leu-ONB[Boc-D-Leu-OH・H2O(12.
5g), HONB(9.86g), DCC(11.4g)より調製]を加え一夜か
き混ぜた。 生成したDCUをろ別し、 ろ液を濃縮し、残留
物をAcOEtに溶かしこれを４%NaHCO3水、10％クエン酸水
で洗浄し、 水洗後、Na2SO4で乾燥、濃縮し、残留物に
エーテルを加えて沈澱をろ取した。
-D-Trp-] の製造 (1) Boc-D-Leu-Leu-OBzl の製造 H-Leu-OBzl・Tos(21.6g)をDMF(100ml)に溶かして氷冷
し、TEA(7.7ml)，Boc-D-Leu-ONB[Boc-D-Leu-OH・H2O(12.
5g), HONB(9.86g), DCC(11.4g)より調製]を加え一夜か
き混ぜた。 生成したDCUをろ別し、 ろ液を濃縮し、残留
物をAcOEtに溶かしこれを４%NaHCO3水、10％クエン酸水
で洗浄し、 水洗後、Na2SO4で乾燥、濃縮し、残留物に
エーテルを加えて沈澱をろ取した。
【００４４】収量 19.8g(収率 91.3%)、 融点 94-95℃、
Rf2 0.76 [α]D 25 +3.6°(ｃ=1.06, DMF) 元素分析 C24H36N2O5として 計算値: C, 66.33; H, 8.81; N, 6.45 実験値: C, 66.38; H, 8.87; N, 6.53 (2) Boc-D-Leu-Leu-OPac の製造 Boc-D-Leu-Leu-OBzl(6.0g)をメタノール(20ml)に溶か
し、10%％Pd-炭素を触媒として、水素気流下に接触還元
を行なった。 触媒をろ別したのち濃縮し、残留物とCs
2CO3(2.1g)を90%メタノール水に溶かし、濃縮した。
残留物をＤＭＦ（６０ｍｌ）に溶かし、臭化フェナシル
（２．８ｇ）を加えて一夜かき混ぜた。 生成したTEA
塩酸塩をろ別し、ろ液を濃縮し、残留物をAcOEtに溶か
しこれを4%NaHCO3水、10%クエン酸水で洗浄し、水洗
後、Na2SO4で乾燥、濃縮し、残留物にエーテルを加えて
沈澱をろ取した。
Rf2 0.76 [α]D 25 +3.6°(ｃ=1.06, DMF) 元素分析 C24H36N2O5として 計算値: C, 66.33; H, 8.81; N, 6.45 実験値: C, 66.38; H, 8.87; N, 6.53 (2) Boc-D-Leu-Leu-OPac の製造 Boc-D-Leu-Leu-OBzl(6.0g)をメタノール(20ml)に溶か
し、10%％Pd-炭素を触媒として、水素気流下に接触還元
を行なった。 触媒をろ別したのち濃縮し、残留物とCs
2CO3(2.1g)を90%メタノール水に溶かし、濃縮した。
残留物をＤＭＦ（６０ｍｌ）に溶かし、臭化フェナシル
（２．８ｇ）を加えて一夜かき混ぜた。 生成したTEA
塩酸塩をろ別し、ろ液を濃縮し、残留物をAcOEtに溶か
しこれを4%NaHCO3水、10%クエン酸水で洗浄し、水洗
後、Na2SO4で乾燥、濃縮し、残留物にエーテルを加えて
沈澱をろ取した。
【００４５】 収量 5.48g(収率 85.8%)、 融点 98-99℃、 Ｒf2 0.66 [α]D 25 -3.9°(ｃ=1.09, DMF) 元素分析 C25H38N2O6として 計算値: C, 64.91; H, 8.28; N, 6.08 実験値: C, 65.21; H, 8.54; N, 6.24 (3) Boc-γAbu-D-Leu-Leu-OPac の製造 Boc-D-Leu-Leu-OPac(1.85g)にTFA(15ml)を加えて溶かし
たのち濃縮し、残留物をDMF(15ml)に溶かして氷冷し、B
oc-γAbu-ONB[Boc-γAbu-OH(0.90g), HONB(0.87g), DCC
(1.00g)より調整]を加えて一夜かき混ぜた。 これに(C
H3)2N(CH2)3NH2(0.17ml)を加えて30分間ふり混ぜたのち
濃縮し、残留物をAcOEtに溶かし、これを4%NaHCO3水、1
0%クエン酸水で洗浄し、水洗後、Na2SO4で乾燥し、濃縮
し、残留物にエーテルを加えて結晶としてろ取した。
たのち濃縮し、残留物をDMF(15ml)に溶かして氷冷し、B
oc-γAbu-ONB[Boc-γAbu-OH(0.90g), HONB(0.87g), DCC
(1.00g)より調整]を加えて一夜かき混ぜた。 これに(C
H3)2N(CH2)3NH2(0.17ml)を加えて30分間ふり混ぜたのち
濃縮し、残留物をAcOEtに溶かし、これを4%NaHCO3水、1
0%クエン酸水で洗浄し、水洗後、Na2SO4で乾燥し、濃縮
し、残留物にエーテルを加えて結晶としてろ取した。
【００４６】収量 2.15g(収率98.1%) 元素分析 C29H45N3O7として 計算値: C, 63.60; H, 8.28; N, 7.67 実験値: C, 63.42; H, 8.36; N, 7.77 (4) Boc-D-Glu(OBzl)-γAbu-D-Leu-Leu-OPac の製造 Boc-γAbu-D-Leu-Leu-OPac(1.10g)にTFA(15ml)を加えて
溶かしたのち濃縮し、残留物をDMF(15ml)に溶かして氷
冷し、Boc-D-Glu(OBzl)-ONB[Boc-D-Glu(OBzl)-OH(0.81
g), HONB(0.47g), DCC(0.54g)より調整]を加えて一夜か
き混ぜた。 これに(CH3)2N(CH2)3NH2(0.17ml)を加えて
30分間ふり混ぜたのち濃縮し、残留物をAcOEtに溶か
し、これを4%NaHCO3水、10%クエン酸水で洗浄し、水洗
後、Na2SO4で乾燥し、濃縮し、残留物にエーテル-石油
エーテルを加えて沈殿をろ取した。
溶かしたのち濃縮し、残留物をDMF(15ml)に溶かして氷
冷し、Boc-D-Glu(OBzl)-ONB[Boc-D-Glu(OBzl)-OH(0.81
g), HONB(0.47g), DCC(0.54g)より調整]を加えて一夜か
き混ぜた。 これに(CH3)2N(CH2)3NH2(0.17ml)を加えて
30分間ふり混ぜたのち濃縮し、残留物をAcOEtに溶か
し、これを4%NaHCO3水、10%クエン酸水で洗浄し、水洗
後、Na2SO4で乾燥し、濃縮し、残留物にエーテル-石油
エーテルを加えて沈殿をろ取した。
【００４７】収量 1.43g(収率93.2%) 元素分析 C41H58N4O10として 計算値: C, 64.21; H, 7.62; N, 7.31 実験値: C, 64.03; H, 7.77; N, 7.44 (5) Boc-D-Trp-D-Glu(OBzl)-γAbu-D-Leu-Leu-OPac の
製造 Boc-D-Glu(OBzl)-γAbu-D-Leu-Leu-OPac(1.20g)にTFA(2
0ml)を加えて溶かしたのち濃縮し、残留物をDMF(20ml)
に溶かして氷冷し、Boc-D-Trp-ONB(0.83g)を加えて一夜
かき混ぜた。 これに(CH3)2N(CH2)3NH2(0.17ml)を加え
て30分間ふり混ぜたのち濃縮し、残留物をAcOEtに溶か
し、これを4%NaHCO3水、10%クエン酸水で洗浄し、水洗
後、Na2SO4で乾燥し、濃縮し、残留物にエーテル-石油
エーテルを加えて沈殿をろ取した。
製造 Boc-D-Glu(OBzl)-γAbu-D-Leu-Leu-OPac(1.20g)にTFA(2
0ml)を加えて溶かしたのち濃縮し、残留物をDMF(20ml)
に溶かして氷冷し、Boc-D-Trp-ONB(0.83g)を加えて一夜
かき混ぜた。 これに(CH3)2N(CH2)3NH2(0.17ml)を加え
て30分間ふり混ぜたのち濃縮し、残留物をAcOEtに溶か
し、これを4%NaHCO3水、10%クエン酸水で洗浄し、水洗
後、Na2SO4で乾燥し、濃縮し、残留物にエーテル-石油
エーテルを加えて沈殿をろ取した。
【００４８】収量 1.48g(収率99.5%) 元素分析 C52H68N6O11として 計算値: C, 65.53; H, 7.19; N, 8.82 実験値: C, 65.37; H, 7.58; N, 8.88 (6) Boc-D-Trp-D-Glu(OBzl)-γAbu-D-Leu-Leu-OH の製
造 Boc-D-Trp-D-Glu(OBzl)-γAbu-D-Leu-Leu-OPac(1.30g)
を90%AcOH(40ml)に溶かし、Zn末(4.44g)を加えて２時間
かき混ぜた。 Zn末をろ別し、ろ液を濃縮した。 残留
物にAcOEtを加えて溶かし、10%クエン酸水で洗浄し、水
洗したのちNa2SO4で乾燥し、濃縮し、残留物にAcOEt-石
油エーテルを加えて沈殿をろ取した。
造 Boc-D-Trp-D-Glu(OBzl)-γAbu-D-Leu-Leu-OPac(1.30g)
を90%AcOH(40ml)に溶かし、Zn末(4.44g)を加えて２時間
かき混ぜた。 Zn末をろ別し、ろ液を濃縮した。 残留
物にAcOEtを加えて溶かし、10%クエン酸水で洗浄し、水
洗したのちNa2SO4で乾燥し、濃縮し、残留物にAcOEt-石
油エーテルを加えて沈殿をろ取した。
【００４９】収量 1.11g 元素分析 C44H62N6O10・1/2H2Oとして 計算値: C, 62.61; H, 7.52; N, 9.96 実験値: C, 62.52; H, 7.79; N, 9.80 (7) cyclo[-D-Glu-γAbu-D-Leu-Leu-D-Trp-] の製造 Boc-D-Trp-D-Glu(OBzl)-γAbu-D-Leu-Leu-OH(0.59g)をD
CM(20ml)に溶かして氷冷し、HONB(0.25g), DCC(0.29g)
を加えて４時間かき混ぜたのち、生成したDCUをろ別
し、濃縮し、残留物に石油エーテルを加えて沈澱をろ取
した。 これに氷冷下、エタンジチオール(0.17ml), 8N
-HCl/ジオキサン(20ml)を加えて溶かしたのち、10分間
かき混ぜて、濃縮し、残留物にエーテル-石油エーテル
を加えて沈澱をろ取し、乾燥した。 これをDMF(14ml)
に溶かし、TEA(0.98ml)を含むDMF(126ml)中に30分かけ
て滴下したのち、一夜かき混ぜて濃縮した。 残留物に
アセトニトリルを加えて沈澱をろ取し、乾燥した(0.50
g)。 このうち200mgをDMF(10ml)に溶かし、Pd黒を触媒
として、水素気流下に接触還元を行なった。 触媒をろ
別して濃縮し、残留物を少量のAcOHに溶かしたのち、水
を加えて、凍結乾燥した。収量 174mg(100%)。 このう
ちの26.2mgをYMC-D-ODS-5のカラム（2×25cm）を用いる
高速液体クロマトグラフィーで精製した。
CM(20ml)に溶かして氷冷し、HONB(0.25g), DCC(0.29g)
を加えて４時間かき混ぜたのち、生成したDCUをろ別
し、濃縮し、残留物に石油エーテルを加えて沈澱をろ取
した。 これに氷冷下、エタンジチオール(0.17ml), 8N
-HCl/ジオキサン(20ml)を加えて溶かしたのち、10分間
かき混ぜて、濃縮し、残留物にエーテル-石油エーテル
を加えて沈澱をろ取し、乾燥した。 これをDMF(14ml)
に溶かし、TEA(0.98ml)を含むDMF(126ml)中に30分かけ
て滴下したのち、一夜かき混ぜて濃縮した。 残留物に
アセトニトリルを加えて沈澱をろ取し、乾燥した(0.50
g)。 このうち200mgをDMF(10ml)に溶かし、Pd黒を触媒
として、水素気流下に接触還元を行なった。 触媒をろ
別して濃縮し、残留物を少量のAcOHに溶かしたのち、水
を加えて、凍結乾燥した。収量 174mg(100%)。 このう
ちの26.2mgをYMC-D-ODS-5のカラム（2×25cm）を用いる
高速液体クロマトグラフィーで精製した。
【００５０】収量 12.6mg(収率 48.1%) アミノ酸分析値[110℃, 24時間6N-HCl加水分解; ()内は
理論値を示す]: Glu 1.00(1); Leu 1.98(2) ＬＳＩＭＳ(M+H+)＝627 理論値＝627 実施例２ cyclo[-D-Glu-δAva-D-Leu-Leu-D-Trp-] の
製造 実施例１の方法に準じて標記の化合物を合成した。
理論値を示す]: Glu 1.00(1); Leu 1.98(2) ＬＳＩＭＳ(M+H+)＝627 理論値＝627 実施例２ cyclo[-D-Glu-δAva-D-Leu-Leu-D-Trp-] の
製造 実施例１の方法に準じて標記の化合物を合成した。
【００５１】ＬＳＩＭＳ(M+H+)＝641 理論値＝641 実施例３ cyclo[-D-Glu-εAca-D-Leu-Leu-D-Trp-] の
製造 実施例１の方法に準じて標記の化合物を合成した。
製造 実施例１の方法に準じて標記の化合物を合成した。
【００５２】ＬＳＩＭＳ(M+H+)＝655 理論値＝655 実施例４ cyclo[-D-Asp-γAbu-D-Leu-Leu-D-Trp-] の
製造 実施例１の方法に準じて標記の化合物を合成した。
製造 実施例１の方法に準じて標記の化合物を合成した。
【００５３】ＬＳＩＭＳ(M+H+)＝613 理論値＝613 実施例５ cyclo[-D-Asp-δAva-D-Leu-Leu-D-Trp-] の
製造 実施例１の方法に準じて標記の化合物を合成した。
製造 実施例１の方法に準じて標記の化合物を合成した。
【００５４】ＬＳＩＭＳ(M+H+)＝627 理論値＝627 実施例６ cyclo[-D-Asp-εAca-D-Leu-Leu-D-Trp-] の
製造 実施例１の方法に準じて標記の化合物を合成した。
製造 実施例１の方法に準じて標記の化合物を合成した。
【００５５】ＬＳＩＭＳ(M+H+)＝641 理論値＝641 実施例７
【００５６】
【化３】
【００５７】実施例１の方法に準じて標記の化合物を合
成した。
成した。
【００５８】ＬＳＩＭＳ(M+H+)＝643 理論値＝６４３
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 Ｃ０７Ｋ 1/06 7/56 7306−4Ｈ // Ｃ０７Ｋ 99:00
Claims (9)
- 【請求項１】式 【化１】 ［式中、ＡはD-酸性-α-アミノ酸残基を、ＢはD-中性-
α-アミノ酸残基を、ＣはL-α-アミノ酸残基を、Ｄは芳
香環基を有するD-α-アミノ酸残基を、 Ｒは水素原子ま
たはアミド化もしくはエステル化されていてもよいカル
ボキシル基を、nはＲが水素原子の場合は２以上の整数
を、Ｒがアミド化もしくはエステル化されていてもよい
カルボキシル基の場合は正の整数をそれぞれ示す。］で
表される環状ペプチドまたはその塩。 - 【請求項２】Ｒが水素原子でnが２ないし６の整数であ
る請求項１記載のペプチド。 - 【請求項３】Ｒがアミド化もしくはエステル化されてい
てもよいカルボキシル基でnが１ないし６の整数である
請求項１記載のペプチド。 - 【請求項４】ＡがD-グルタミン酸またはD-アスパラギン
酸である請求項１ないし３記載のペプチド。 - 【請求項５】ＢがD-ロイシンである請求項１ないし４記
載のペプチド。 - 【請求項６】ＣがL-ロイシンである請求項１ないし５記
載のペプチド。 - 【請求項７】ＤがD-トリプトファンである請求項１ない
し６記載のペプチド。 - 【請求項８】式 Ｈ−Ｘ−ＯＨ ［式中、Ｘは−Ａ-NH-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ-Ｃ-Ｄ−，−N
H-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ-Ｃ-Ｄ-Ａ−，−Ｂ-Ｃ-Ｄ-Ａ-NH-C
HＲ-(CH2)n-CO−，−Ｃ-Ｄ-Ａ-NH-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ−
または−Ｄ-Ａ-NH-CHＲ-(CH2)n-CO-Ｂ-Ｃ−を示し、
Ａ，Ｂ，Ｃ，Ｄ，Ｒおよびnは請求項１の記載と同意義
を有する。］で表されるペプチドまたは該ペプチドの反
応性誘導体を環化し、 必要に応じて保護基を除去するこ
とを特徴とする請求項１記載の環状ペプチドまたはその
塩の製造法。 - 【請求項９】請求項１ないし７記載の環状ペプチドまた
はその薬理学的に許容される塩を含有するエンドセリン
受容体拮抗剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4173065A JPH05194589A (ja) | 1991-07-31 | 1992-06-30 | 環状ペプチド、その製造法および用途 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP3-191454 | 1991-07-31 | ||
| JP19145491 | 1991-07-31 | ||
| JP4173065A JPH05194589A (ja) | 1991-07-31 | 1992-06-30 | 環状ペプチド、その製造法および用途 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05194589A true JPH05194589A (ja) | 1993-08-03 |
Family
ID=26495192
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4173065A Withdrawn JPH05194589A (ja) | 1991-07-31 | 1992-06-30 | 環状ペプチド、その製造法および用途 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH05194589A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6114570A (en) * | 1995-06-07 | 2000-09-05 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Silver halide photographic material and hydroxamic acid-based compound for use therein |
| US6136781A (en) * | 1995-04-28 | 2000-10-24 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | LH-RH receptor antagonists |
-
1992
- 1992-06-30 JP JP4173065A patent/JPH05194589A/ja not_active Withdrawn
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6136781A (en) * | 1995-04-28 | 2000-10-24 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | LH-RH receptor antagonists |
| US6114570A (en) * | 1995-06-07 | 2000-09-05 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Silver halide photographic material and hydroxamic acid-based compound for use therein |
| US6180818B1 (en) | 1995-06-07 | 2001-01-30 | Fuji Photo Film Co., Ltd. | Silver halide photographic material and hydroxamic acid-base compound for use therein |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 19990831 |