JPH04501421A - 血小板産生刺激薬剤のためのｉｌ―７の使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 発明の名称 血小板産生刺激薬剤のためのＴＬ−７の使用発明の背景 本発明は一般的には血液学および血液成長因子の分子生物学に関するものであり 、詳しくは、巨核球分化を誘導するための薬剤調製にインターロイキン−７を使 用することに関するものである。

巨核球は細胞の血小板の基となるものであり、全ての造血細胞系列を生じさせる 共通骨髄前駆細胞に由来するものである。

共通前駆細胞は、多能性造血細胞（ｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｉａｌ　ｈｅｍａｔ ｏｐｏｉｅｔｉｃ　ｓｔｅｍ　ｃｅｌｌ、　ＰＨ３Ｃ）として知られており、ｉ ｎ　ｖｉｔｒｏでＩＬ−３および腫瘍誘導性ホルボールエステル（例えば、ホル ボールミリステートアセテート、ＰＩＩＡ）に反応するバースト形成ユニット巨 核球（ＢＦＵ−ＭＫ）を生じ、巨核球（ＭＷ）の巨大な多フォーカス性コロニー の発達が誘導される。ＢＦＵ−ＭＫはＭＫコロニー形成細胞（ＣＦＵ−ＭＫ）に 分化し、ｉｎ　ｖｉｔｒｏでＩＬ−３、ＧＭ−ＣＳＦ、　ＥＰＯ，Ｇ−Ｃ３Ｆ、 　ＩＬ−６、あるいはＩＬ−４に反応してコロニーを形成するが、後ろ４つに関 しては議論の余地がある。ＣＦＵ−ＭＷは、マウス中でアセチルコリンエステラ ーゼで染色される形態学的に識別可能な小さなＭＫを生じる（ＳＡＣｈＥ＋細・ 胞）。これらの細胞に増殖能が残っているかどうかは不明である。

５ＡＣｈＥ十細胞は続いて一連の細胞質性および核性成熟過程（倍数体化）を行 い、最終的にＭＫを産生ずる血小板となる。Ｉｎ　ｖｉｖｏの結果から、ＭＫコ ロニー産生細胞のレベルの増殖過程と血小板産生に至る成熟過程とは、異なるサ イトカインによって独立に制御゛　されていると考えられている。

巨核球過少性血小板減少症の患者由来の尿、血清および血漿は、ｉｎ　ｖｉｔｒ ｏで骨髄単核細胞によってＣＦＵ−ＭＫの産生が促進されることが示されている 。カワキタ他、Ｂｒ、　Ｊ、Ｈａｅｍａｔｏｌ、、　５２：４２９；ホフマン（ Ｈｏｆｆｍａｎ）他、Ｎ、　Ｅｎｇｌ、　Ｊ、　１ｌｅｄ、、　３０５：５３３ 　（１９８１）；メスナー（蓋ｅｓｓｎｅｒ）他、１．　Ｃｅ１１．Ｐｈｙｓｉ ｏｌ、　５ｕｐｐ、、　１：４５　（１９８２）；およびキムラ他、Ｊ、　Ｃｅ １ｌ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ、　１１８：８７−９６等を参照されたい。これらの予 想される因子のなかでかなりの程度までに精製されたものはない。

ホフマン他、Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　７５：１１７４　（１９８５ ）は巨核球過少性血小板減少症患者の血清からＭｅｇ−Ｃ３Ｆと呼ばれる巨核球 コロニー刺激因子の精製を報告した。硫酸アンモニウム沈澱、ＤＥＡＥ−セルロ ースクロマトグラフィー、レクチンアフィニティークロマトグラフィー、および ！？Ｐ−ＨＰＬＣにより、分子量が約４６．０００ダルトン（Ｄａ）で骨髄アッ セイでＣ３Ｆ−ＭＥ分化を刺激する糖タンパク質性物質が得られた。この物質の クローニングや塩基配列決定はまだ行われておらず、また、ｉｎ　ｖｉｖｏでは 穏やかな効果しか報告されていない。

ローゼンベルグ（Ｒｏｓｅｎｂｅｒｇ）、ヨーロッパ特許出願第２６０．９１８ 号は、ヒト胎児腎臓細胞によって産生され、巨核球系列細胞の特異的造血素と仮 定される“巨核球刺激因子”を開示している。この参考文献で開示されている精 製画分は、部分精製された巨核球画分とラット前巨核球芽細胞によってタンパク 質合成が決定されるアッセイにおいて、見かけの分子量が約１５．０００の“酸 性タンパク質”であつた。ｉｎ　ｖｉｖｏの研究は報告されておらず、この因子 のクローニングまたは塩基配列決定に関するそれ以降の成果に関する文献は発表 されていない。

インターロイキン−？（ＩＬ−７）はまた、リンホボエチン−１としても知られ 、最初に単離されたリンパ球生成成長因子であり、骨髄においてＢおよびＴ細胞 前駆細胞の増殖刺激能を利用してクローニングされた。１９８８年１０月１９日 に提出されたＰＣＴ出願ＵＳ８ｇ１０３７４７および１９８８年１０月２４日に 提出されたヨーロッパ特許出願第８８３０９９７７、２号（ＵＳＳＮＯ７／１１ ．３．５５６号も参照のこと）は、組み換えＤＮＡ技術によって哺乳類ＩＬ−７ タンパク質を産生ずるためのＤＮＡ、ベクター、およびそれに関連した過程を開 示している。これらの特許出願の関連した開示もここに参考として含める。マウ スＩＬ−７のクローニングはナーメン（Ｎａｍｅｎ）他、Ｎａｔｕｒｅ　３３３ ：５７１　（１９８８）によって、ヒトＩＬ−７のクローニングはグツドウィン （Ｇｏｏｄｖｉｎ）他、Ｐｒｏｃ。

Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ（印刷中）によって、最初に報告さ れた。

トランスフオームした骨髄間質細胞系の上清からのマウスＩＬ−７の精製から、 見かけの分子量が約２５．０００ｄａであることが示唆された。ナーメン他、Ｊ 、　Ｅｘｐ、　１ｌｅｄ、　１６７：９８８　（１９８ｇ）を参照されたい。ナ ーメンとグツドウィンによって報告されたクローニングされたＤＮＡは、グルコ シル化を除いて、マウスおよびヒトＩＬ−７分子の最小分子量はそれぞれ１４． ８９７および１７．３８７ダルトンであることを示している。

これまでに、ＩＬ−７はｉｎ　ｖｉｖｏで血小板産生（血小板形成）を顕著に刺 激する能力を有することが示されている。ＩＬ−７のこの性質により、例えば多 様な癌の化学療法や放射線療法の結果として起こった急性血小板減少症患者の治 療において有用な補助を与えるはずである。現在のところ、このような患者は血 小板生成が不可能な状態にまで循環血小板レベルが下がると、非常に危険な状態 となる。生命を脅かす急性血小板減少症の通常の治療法は、生成した血小板の反 復注入によるものである。

発明の概要 本発明は血小板が必要な哺乳動物において血小板産生を誘導するための薬剤を供 給する際のＩＬ−７の使用に関するものである。

組成物の面では、本発明は血小板産生の誘導のための組成物を供給し、これは薬 剤学的に受容し得る希釈剤、担体、または賦形剤との混合物中の効果的な量のＩ Ｌ−７を含むものであり、また本発明は血小板産生を誘導するための薬剤組成物 を調製する際にＩＬ−７を用いる方法も含むものである。

図面の簡単な説明 第１図は、正常なマウスにＩＬ−７が投与された場合に見られる血小板数の増加 を示している。

第２図は、照射マウスにＩＬ−７を投与した場合に見られる血小板レベルの回復 の促進を示している。第２図において水平な点線はコントロールの正常マウスに おける血小板レベルを示す（ｎ＝１４）。

発明の望ましい態様の詳細な説明 本発明の方法にしたがって使用するために、例えばＩＬ−７タンパク質に関する 上述の参照特許出願で述べられているような哺乳類細胞系での発現などの、通常 の方法によって産生ずることが可能である。ヒトおよびマウスＩＬ−７のアミノ 酸配列を表１および表２に示す。

表１：　ヒトＩ　Ｌ−７ 表２＝　マウスＩＬ−７ 前述のタンパク質の生物学的に活性のある多様な類似物質も本発明の方法および 組成物に使用可能である。したがって、ここで用いる場合に“ＩＬ−７”という 語は天然の哺乳類ＩＬ−７と実質的に同一のアミ、ノ酸配列および、例えば標準 的バイオアッセイやＩＬ−７１７セプタ一結合アフィニティーアッセイにおいて 同等の生物活仕を有するタンパク質を意味する。組み換えタンパク質は昆虫細胞 、酵母、細菌、その他の細胞を用いても適当なプロモーターの制御下でも産生さ れるが、哺乳類ＩＬ−７を産生ずるには哺乳動物細胞内で発現させる方法が望ま しい。細菌、菌類、酵母、および吐乳動物細胞宿主で用いるのに適したクローニ ングおよび発現ベクターは、バウエルス（Ｐｏｕｖｅｌｓ）他、Ｃｌｏｎｉｎｇ 　Ｖｅｃｔｏｒｓ：Ａ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　Ｍａｎｕａｌ、（エルセヴイア ・−、ニューヨーク、１９８５）に記載されており、その関連した開示をここに 参考として含める。多様な哺乳動物細胞培養系を組み換えタンパク質の発現に用 いることができる。＠乳動物発現系の例としては、グルラマン（Ｇｌｕｚｍａｎ ）、Ｃｅ１ｌ　２３：１７５　（１９８１）に報告されているサル腎臓繊維芽細 胞のＣＯ３−’？系、およびその他の互換性のあるベクターを発想できる細胞系 、例えばＣｌ２７．３Ｔ３．　Ｃ１１０，ＩＩｅＬａおよびＢＨＫ細胞系が含ま れる。哺乳類発現ベクタ・−は、複製開始部位、適当なプロモータ・−およびエ ノハンサー、およびその他の５゛または３゛隣接非転写配列、および必須のりボ ゾーム結合部位、ポリアデニル化部位、スプライシングのドナーおよびアクセプ タ一部位、および終結配列などの５゛または３′非翻訳配列を含むことができる 。ＳＶ４０複製開始部位、初期プロモーター、エンハンサ−、スプライシング、 およびポリアデニル化部位などのｓｖ４ｇウィルスゲノム由来のＤＮＡ配列を、 外来性のＤＮＡ配列の発現に必要な他の遺伝子要素を付与するために用いること ができる。組み換え哺乳類ＩＬづを産生ずるための哺乳類高発現ベクターの使用 に関する詳細は以下に示す。典型的なベクターは、岡山とバーブ（Ｂｅｒｇ）、 　Ｍｏ１．　Ｃｅ１ｌ。

Ｂｉｏｌ、　３：２８０　（１９８３）、コスマン（Ｃｏｓｍａｎ）他、Ｎａｔ ｕｒｅ　３１２ニア６８　（１９８４）、：ｌスマン他、Ｍｏ１．　Ｉｍ＋ｍｕ ｎｏ１．２３：９３５　（１９８６）、あるいは、クラーク（Ｃ１ａｒｋ）他、 米国特許第４．６７５．２８５号で記述されているように構築することができる 。

発現ベクターは、成熟タンパク質のＮ末端残基をコードするコドンに近接した部 位でｃＤＮ＾クローンを切断することによって容易に構築される。例えば、マウ スｃＤＮＡはＮｄｅＩまたはＣ１ａＩで、ヒトｃＤＮＡはＣ１ａＩで切断して実 質的に全コード領域を含む断片を生成することができる。そして、合成オリゴヌ クレオチドを用いて、コード領域の欠失した部分を“再付加”し、発現ベクター 中の適当な読み枠でコード領域の連結のための連結配列を与え、さらに任意に開 始メチオニンを特定するコドンを付加することもできる。

ヒトＩＬ−７の他の哺乳動物細胞発現系は、選択マーカーを含む安定な哺乳動物 発現ベクターにＩＬ−７構造を挿入し、それをハムスター乳児腎臓細胞（ＢＨＫ ）に導入することによって作成される。

発現ベクターは以下のように構築される。ＳｍａＩ−１１ｉｎｃＩＩ　ｃＤＮＡ 断片を、Ｐ（Ｔ出願ＵＳ８８１０３７４７号およびヨーロッパ特許出願第８８３ ０９９７７．２号（上述）に記載されているプラスミドｐＤＣ２０１／ｈＩＬ− ２Ｒ／ｈＩＬ−７から切り出し、マウスメタロチオネインプロモーター（ＭＴ− １）に付加されたＳＶ４０複製開始部位とウィルスエンハンサ−配列を含む哺乳 動物発現ベクター１）ＮＰＶＩの修復された（クレノーポリメラーゼによる）Ｂ ａｍＨＩ部位にクローニングする。このハイ−ブリッドプロモーターは多数の哺 乳動物細胞型において高レベルの安定な、構造的発現を示す。ｐＮＰＶｌはまた 、このプラスミドを含有する哺乳動物細胞のメトトレキセート選択を可能にする 正常なジヒドロ葉酸リダクテース（ＤＩ’１ＰＲ）　ＤＮＡ配列を含む。このよ うな細胞におけるＤＩＩＦＲ配列増幅現象は、メトトレキセート濃度の上昇によ って選択可能である。このようにして、近接したＤＮＡ配列も一般的に増幅し、 発現の増強を行うことができる。

選択と発現は、ウエヒタ−（Ｗａｅｃｈｔｅｒ）他、Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　 Ａｃａｄ。

Ｓｅｉ、　ＵＳＡ　７９：１１０６　（１９８２）およびタラベラ（Ｔａｌａｖ ｅｒａ）他、Ｊ、Ｃｅ１ｌＰｈｙｓｉｏ１．９２：４２５　（１９７７）によっ て報告されている接着性ＢｔＩＫｔｋ−ｔｓ　１３細胞（ＡＴＣＣＣＲＬ　１６ ３２）を用いて行われる。これらの細胞は、高マンノースおよび複合オリゴ糖タ ンパク質修飾の双方が可能である。５ａｌＩによる発現ベクターの直鎖状化の後 、ＤＮＡを３００ボルト、９６０マイクロフアラツドでのエレクトロポレーショ ンによってＢＨＫ細胞に導入する。適当なエレクトロポレーション法は、アウス ベル（Ａｕｓｕｂｅｌ）他編集、Ｃｕｒｒｅｎｔ　Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ　ｉｎ　 ＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ　（ウィリー−インターサイエンス、メディ ア、ＰＡ、　ＵＳＡ）の９．３．１．に記載されている。４８時間後、１マイク ロモルのメトトレキセートを培地に加え、耐性のコロニーを２週間後に選択する 。

典型的なりローンに対して、培養液の上清両分へのｈＩＬ−７の分泌に関してバ イオアッセイを行う。最も高い発現を示したクローンに関して、１０．２０、お よび５０マイクロモルのメトトレキセート要用いてさらに選択を行った。耐性の コロニーをさらに解析して高発現レベルのクローンを単離する。この方法を用い て選択したＢＨＫ細胞系は接着性細胞であり、ビーズを用いた懸濁液培養または ホローファイバー技術を用いたバイオリアクターでの培養を用いて大規模合成を 行わせることができる。ＢＩＩＫ細胞は懸濁細胞としての培養に容易に適合させ ることができる。

投与のためのＩＬ−７は細胞培養液上清から以下のようにして精製することがで きる。上清は、市販のタンパク質濃縮フィルター、例えば、アミコン（Ａｍｉｃ ｏｎ　；登録商標）（ｆ、Ｒ，ブレース社、ダンバース、ＭＡ、　ＵＳＡ）やベ リコン（Ｐｅｌｌｉｃｏｎ　；登録商標）（ミリボア社、ベッドフォード、　Ｍ Ａ、　ＵＳＡ）限外濾過ユニットを用いて濃縮する。濃縮過程に続いて、例えば ジエチルアミノエチル（ＤＥＡＥ）基が付加しているマトリックスまたは基剤な どの、適当な陰イオン交換樹脂に濃縮液をとおす。マトリックスは、アクリルア ミド、アガロース、デキストラン、セルロース、あるいはその他のタンパク質精 製に通常用いられているものを使用することができる。望ましいマトリックスは ＤＥＡＥセファセル（登録商標；ファルマシア社）である。ＤＥＡＥ基を含むマ トリックスを用いる場合には、ＩＬ−７を含む抽出液を弱い塩基性ｐＨ（ｐＨ８ など）とし、塩化ナトリウム濃度（あるいは他の適当な塩）を約１００ｄとする 。多（の混在しているタンパク質はイオン交換樹脂に結合するが、ＩＬ−７は非 結合画分として回収される。陰イオン交換クロマトグラフィーに続いて、陽イオ ン交換過程を行う。この過程では、ＩＬ−７を含む両分を弱酸、低イオン濃度（ 例えばｐＨ５，１００ｍＭ　ＮａＣ１）で陽イオン交換樹脂にかける。ＩＬ−７ は交換樹脂に結合し、高塩濃度および弱塩基性ｐ■において、より高度に精製さ れた形で溶出される。適当な陽イ゛　オン交換樹脂には、スルフォブロビル基ま たはカルボキシメチル基を含む多様な不溶性マトリックスが含まれる。スルフォ ブロピル基を用いるのが望ましい。ＩＬ−７精製に有用なものは、ｓｐ−トリス アクリル（登録商標；ファルマシアーＬＫＢ）である。陽イオン交換クロマトグ ラフィーに続いて、ブルーダイリガンドを有するマトリックスを用いるアフィニ ティー精製過程を行うのが有効であることが示されている。適当なグイリガンド は、ブルーＢであり、これはアガロースとの複合体として入手できる（ブルーＢ アガロース）。その他の同等のグイリガンドも使用可能である。最後に、疎水性 ＲＰ−ＨＰＬＣ物質、例えばメチル基などの疎水性基を付加しているシリカゲル などを用いて、１回以上の逆相高性能液体クロマトグラフィー（ＲＰ−ＨＰＬＣ ）過程を行い、さらにＩＬ−７組成物を精製することができる。上記の精製過程 のいくつかまたは全てを、さまざまな組み合わせで行い、薬剤処方に適した均一 な組み換えタンパク質を与えることも可能である。

組成物と使用法の面において、本発明は、効果的な量の本発明の哺乳類ＩＬ−７ タンパク質のいずれかおよび適当な希釈剤あるいは担体を含む治療用組成物、お よび効果的な量の上述の組成物のいずれかを投与することを含む、ヒトを含む哺 乳動物の巨核球分化を刺激する方法または、血小板産生を修飾あるいは増大させ る方法を与えるものである。他のリンホカイン、例えば、ＩＬ−１ａ、　ＩＬ− １，ｂ、　ＩＬ−２，ＩＬ−３，ＩＬ−４，ＩＬ−５，ＩＬ−６，Ｃ５Ｆ−１， ＧＭ−Ｃ３Ｆ、　Ｇ−ＣＳＦ、　ＥＰＯ。

ＩＦＮ−ａ、　ＩＦＮ−ｂ、またはＩＦＮ−ｇとの同時使用または混合物での使 用も予想される。

治療用に用いる場合には、指示に適した方法で哺乳動物の治療のために精製した ＩＬ−７を投与する。したがって、例えば、血小板産生または機能の刺激剤とし て投与される哺乳動物ＩＬ−７組成物は、ポーラス注射（ｂｏｌυｓ　１ｎｊｅ ｃｔｉｏｎ）、連続的注入、移植片からの持続的放出、またはその他の適当な技 術によって与えることができる。典型的にはＩＬ−７治療用組成物は、病理学的 に受容できる担体、賦形剤または希釈剤との混合物で精製タンパク質を含む組成 物の形で投与される。中性緩衝化生理食塩水または同種の血清アルブミンと混合 した生理食塩水は典型的に好適な希釈剤である。望ましくは、産生物は好適な賦 形剤溶液（例えばサッカロース）を希釈剤として用いた凍結乾燥物として調製さ れる。

適当な投与量は試行で決定されるニ一般に、１０ｎｇから１００μｇ／ｋｇ／日 、望ましくは１１００ｎから１μｇ／ｋｇ／日で１−２０日間の投与が、生物学 的効果を誘導すると期待される。例えば、血小板産生の刺激剤として１μｇ／ｋ ｇのポーラス注射を４日ごとにすることができる。

以下の実施例は本発明の方法と組成物の使用を例示するものＥＳＴ−ＩＵと呼ば れるヒト骨髄細胞系が急性リンパ性白血病と縦隔生殖細胞腫瘍患者から誘導され た。患者の骨髄が肺繊維芽細胞フィーダ一層上の培養液中に置かれ、最終的にフ ィーダー細胞から離脱された。細胞を各細胞継代時に液体窒素で凍結させ、この ような各継代の子孫を以下の実験に用いた。細胞は多倍散性を含む、ヒ［Ｋと一 致する表現形質を示す。ＰＭＡで細胞を処理することで、より高い倍数性となり 、血小板を産生ずるＭＫ表現形質への成熟と一致する血小板関連抗原の発現が促 進される。

ＩＬ−７効果を評価するために、培地のみ、５Ｘ　１０−”Ｍ　ＰＭＡ、あるい は３０００Ｕ／ｍｌ　（ブレＢ細胞増殖アッセイ）の精製マウスＩＬ−７を含む 液体培地で３日間培養したＥＳＴ−ＩＵ細胞を準備した。用いた培地は１０％Ｖ ／Ｖウシ胎児血清を添加したＲＰＭＩ　１６４０である。細胞を１ｍｌの培地に ２Ｘ　１０’細胞の濃度で懸濁した。３日後、細胞を回収し、洗浄して飽和濃度 のマウス抗ヒト血小板糖タンパク質Ｉｂ　（Ｇｐｌｂ）と反応させ、つづいてヤ ギ抗マウスフルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）結合抗ＩｇＧ（Ｆａ ｂ断片）と反応させた。完全に洗浄した後、細胞をフローサイトメトリーで解析 した。ＧｐＩｂは比較的成熟したＭＫ細胞では発現しているが、ＭＫとして認識 される最も初期の細胞では存在しない。結果から、期待された通り、ＰＭＡ処理 後はＧｐＩｂの発現が培地コントロール細胞中の２１％から６７％陽性に誘導さ れたことがわかった。ＩＬ−７処理細胞はＧｐＩｂ発現が６１％陽性まで誘導さ れた。

実施例２：正常マウス中の循環血小板へのＩＬ−７の効果正常なＣ５７Ｂ１／６ ７ウスに１日に２回、２０ｎｇ若しくは１１００ｎのＩＬ−７を、または、コン トロールとしてマウス血清アルブミン（ＭＳＡ）を５日間注射した。治療開始後 １から４日の心臓血の血小板数を顕微鏡で、ウノペット（Ｕｎｏｐｅｔｔｅ　； 登録商標）システムで決定した。循環血小板数は、治療後１日のＩＳＡ処理した コントロールよりもＩＬ−７処理したマウス（１グループあたり４−５匹）の方 が顕著に（ｐ＝０．００１）多く、４日目には正常レベルに戻った。結果は第１ 図に模式的に示しである。

実施例３：　準致死的に照射したマウスへのＩＬ−７の効果正常なＣ５７Ｂ１／ ６ｖウスを０日目に＋３７Ｃ８源を用いて７５０ｒａｄのレベルまで照射し、毎 日１ｍｇのＩＬ−７またはＩＳＡを注射した（２Ｘ　５００ｎｇを注射）。次に 、心臓血または後眼窩血の血小板数をＭＳＡコントロール、ＩＬ−７処理、およ び非照射コントロール群に関して決定し、このとき処理群あたり４−１０マウス およびヒト照射コントロール群に関しては１４マウスを調べた。結果は第２図に 示してあり、ＩＬ−７は照射誘導性の急性血小板減少症の発病を遅らせ、１１１ 日目最低レベルから血小板レベルの回復を促進することが示唆された。

ＩＬ−７およびＩＳＡ処理群間の平均血小板数は、８日目と１１１日目除いた全 ての日に統計学的に顕著に異なっていた。

本発明は上記の特定の態様に制限されるものではなく、以下の請求の範囲内の全 ての組成物および方法が含まれる。

国際調査報告

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. １．血小板が必要な哺乳動物内で血小板産生を刺激するための薬剤を供給する際 の哺乳類ＩＬ−７の使用。
2. ２．　哺乳類ＩＬ−７がヒトＩＬ−７である、請求の範囲第１項記載の使用。
3. ３．　ＩＬ−１ａ，ＩＬ−１ｂ，ＩＬ−３，ＩＬ−４，ＩＬ−６，ＥＰＯ，ＧＭ −ＣＳＦおよびＧ−ＣＳＦからなる群から選択される１種以上のサイトカインと の組み合わせでＩＬ−７が調製されるものである、請求の範囲第２項記載の使用 。
4. ４．適当な賦形剤または担体と共に哺乳類ＩＬ−７を調製することを含む、哺乳 動物中で血小板産生を刺激するための薬剤を調製する方法。
5. ５．ＩＬ−７がヒトＩＬ−７である、請求の範囲第４項記載の方法。