JPH04316596A

JPH04316596A - エピポドフィロトキシングリコシド類

Info

Publication number: JPH04316596A
Application number: JP3232591A
Authority: JP
Inventors: Takeshi Ohnuma; 大沼　毅; Hideaki Hoshi; 星　英秋
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 1990-06-11
Filing date: 1991-06-07
Publication date: 1992-11-06
Also published as: CA2044061A1; EP0461556A1; US4997931A

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、新規な抗腫瘍化合物、
その腫瘍増殖の抑制への使用及びそれを含有する医薬組
成物に関する。特に、その新規な化合物としては、４′
−デメチルエピポドフイロトキシングルコシドの誘導体
があげられる。

【０００２】

【従来技術及び解決すべき課題】エトポシド及びテニポ
シドは、両方とも４′−デメチルエピポドフイロトキシ
ングルコシド誘導体である。各種の癌の治療におけるエ
トポシド及びテニポシドの臨床上の効果は文献上よく報
告されている。最近米国においてエトポシドは肺の小細
胞癌及び単丸の癌の治療用剤として承認されている。エ
トポシド及びテニポシドのその好ましい治療剤としての
働き並びに医薬としての性状は、同様な種類の別の活性
類緑体を調査してより活性のあるものを研究することを
おしすすめるものである。

【０００３】報告されたエトポシド及びテニポシドの類
緑体並びに誘導体の殆んどのものはＤ−グロコース部を
有するもので、一方僅かな誘導体が異った糖を有してい
ることが知られているのみである。例えば、Ｊ．Ｍｅｄ
．Ｃｈｅｍ．，１９７１，１０：９３６−４０には三種
のＤ−ガラクトピラノシド体が報告されており、Ｃｈｅ
ｍ．Ｌｅｔｔ．１９８７，７９９−８０２には数種のＬ
−グルコピラノシド体が記載されている。このように異
なった糖置換基がエピポドフイロトキシン誘導体の活性
に対して及ぼす作用については充分にわかっていないこ
とが明らかである。

【０００５】

【課題の解決】本発明は、式（Ｉ）

【化７】（式中、Ｒは４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−アロ
ピラノシル，４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−マン
ノピラノシル，４，６−Ｏ−アルキリデン−α−Ｄ−マ
ンノピラノシル及び５，６，−Ｏ−アルキリデン−β−
Ｄ−アロフラノシルからなる群から選ばれたもので、Ｐ
は水素又は−ＰＯ３Ｈ２である）の新規な抗腫瘍化合物
又はその医薬として許容しうる塩を提供するものである
。

【０００６】以下本発明をより詳細に説明する。本明細
書においては、特にことわらない限り、用語「アルキリ
デン」とは、アルデヒドあるいはケトンから誘導される
ところの環状アセタール／ケタールの一部を意味し、そ
れは１〜６個の炭素原子を有し、その炭素鎖は直鎖状で
も分枝鎖状でもよい。用語「アルキリデン化」とは、環
状アセタール／ケタノールの形成反応、すなわち、ピラ
ノースの４，６−ジオールまたはフラノースの５，６−
ジオールと、カルボニル化合物との反応を意味する。用
語「医薬として許容しうる塩」とは、それに限定される
訳ではないが、例えばナトリウム塩，カリウム塩及びリ
チウム塩のようなアルカリ金属塩、例えばマグネシウム
塩及びカルシウム塩のようなアルカリ土類金属塩，アン
モニアとの塩、さらには例えばトリエチルアミンのよう
な第三級アミンとの塩を含んだものである。

【０００７】本発明の４′−デメチルエピポドフイロト
キシングルコシド類は、４′−保護−４′−デメチルエ
ピポドフイロトキシン（以下、「保護されたアグリコン
」ともいう）と適切な保護された糖とを縮合せしめて製
造される。当該分野において４′−保護−４′−デメチ
ルエピポドフイロトキシンはよく知られている。例えば
、米国特許第３，５２４，８４４号には、４′−ベンジ
ロキシカルボニル−４′−デメチルエピポドフイロトキ
シン及びその製造法が記載されている。フエノールの保
護基が何であるかは特に問題でなく、その保護基としは
、例えばエステル類、カルボネート類などのアシル誘導
体，エーテル類，アセタール類があげられうる。

【０００８】該糖出発原料は、当該分野で普通に入手し
うる方法を用いて製造できる。例えば、３−Ｏ−ベンジ
ル−アロピラノースはＤｉｃｋ等のＣａｒｂｏｈｙｄｒ
，Ｒｅｓ，１９７５，４２：５５−６３に記載の方法に
よって製造される。２，３，４，６−Ｏ−テトラアセチ
ルマンノピラノースは、Ｗａｔａｎａｂｅ等のＣａｒｂ
ｏｈｙｄｒ，Ｒｅｓ，１９８６，１５４：１６５−１７
６に記載された方法によって製造できる。糖ヒドロキシ
基の保護基を何にするかは特に制限されないが、その保
護基としては、ホルミル，プロピオニル，ハロアセチル
及びベンゾイル基といったその他のアシル基があげられ
る。糖出発原料としては、α−アノマー体及びβ−アノ
マー体の混合物あるいはそれぞれのアノマー体を用いる
ことができる。

【０００９】アロースあるいはマンノースの出発原料は
先ずそれぞれアルキリデン化誘導体に変換せしめられ、
次に保護されたアグリコンと縮合せしめられる。また別
法としては、糖は先ず保護されたアグリコンと縮合せし
められ、次にアルキリデン化せしめられる。これら二つ
の工程の順序は問題ではない。

【００１０】第一の方法の例としては、３−Ｏ−ベンジ
ル−アロピラノース（保護されたアノマーヒドロキシ基
を有するもの）を１個〜６個の炭素原子を有するアルデ
ヒド又はケトン、あるいはそのアセタール又はケタール
と、例えばトルエンスルホン酸といった酸の保存下に反
応させ、環状アセタール／ケタールを形成せしめるもの
である。該反応は、メチレンクロライドまたはエチレン
クロライドのような不活性反応溶媒中室温で行なわれう
る。２−Ｏ−ヒドロキシ基は、通常の保護基、例えば水
素化ナトリウムのような塩基で処理した後ベンジルブロ
マイドで処理してベンジル基を導入することなどで保護
される。

【００１０】アノマーヒドロキシ基の通常の保護基とし
てはアリル基があげられ、その基は高温下、例えば、反
応混合物の還流温度に、例えば塩酸のような鉱酸の存在
下に、その糖をアリルアルコールで反応処理して導入す
ることができる。この反応により、アリルアロピラノシ
ドとアリルアロフラノシドの二つの生成物が得られ、そ
れらはクロマトグラフイーにより分離せしめることがで
き、それぞれは別々にあるいは混合物として保護された
アグリコンのグリコシル化に用いられうる。該アリル保
護基は、Ｃｏｒｅｙ等の方法（Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．
，１９７３，３８：３２２４）によって除去することが
でき、その方法は該化合物を例えば、トリス（トリフエ
ニルホスフイン）ロジウムクロライドのようなロジウム
試薬と反応させた後、加水分解することからなっている
。アルキリデン化された糖は、下記に示されるようにし
てグリコシル化される。

【００１２】糖と保護されたアグリコンとの縮合反応の
例としては、２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチルマ
ンノースを用いるものであげられる。本反応は、不活性
有機反応溶媒中、例えば、メチレンクロライド又はエチ
レンクロライド中０℃以下の温度で、三弗化ホウ素−エ
チルエーテレートのような触媒存在下で行なわれうる。その糖反応体と三弗化ホウ素−エチルエーテレートは、
アグリコンに対して等モル量用いられる。しかしそれら
は、該アグリコンに対して約１．５〜約５等量の過剰量
用いることが好ましい。反応時間は、試薬に応じて数分
から約２時間である。三弗化ホウ素−エチルエーテレー
トの作用は、ピリジン又はトリエチルアミンのような第
三級アミンを反応混合物中に加えることにより弱めるこ
とができる。

【００１３】該縮合反応に引き続き、糖保護基を通常の
脱保護法によって除くことができる。例えば、アセチル
基は、例えば酢酸亜鉛のような亜鉛化合物で処理するこ
とにより通常除去できる。糖ヒドロキシ保護基を除去し
た後、アルキリデン化反応は上記したような方法で行な
うことができる。

【００１４】上記した方法のいずれかの方法で得られた
縮合生成物は、α−グリコシド体とβ−グリコシド体の
混合物であってよく、その場合その混合物は、二種のア
ノマー体に分けることができ、その各々は次に脱保護さ
れてその４′−フエノール保護基を除去されるか、ある
いはそのアノマー体の混合物を先ず脱保護し、次に脱保
護された生成物を分離せしめることもできる。その順序
は大して問題ではない。アノマー体の分離は、カラムク
ロマトグラフイーのような通常の方法で行なうことがで
きる。

【００１５】該フエノールの脱保護は、当該分野で認め
られている方法を用いて行なうことができ、どの方法を
採用するかはその保護基の性状による。例えば、ベンジ
ロキシカルボニル保護基は、パラジウム触媒存在下に水
素添加することにより除去することができる。こうして
得られたＰが水素の式Ｉの化合物は、さらに誘導体化処
理せしめられ、相当する４′−ホスフエート体（Ｐが−
ＰＯ３Ｈ２である式Ｉの化合物）を与える。この反応は
、ヒドロキシル基をそのリン酸エステルに変える公知の
方法を利用して行なうことができる。この方法としは、
Ｐが水素である式Ｉの化合物をオキシ塩化リンのような
リン酸化剤と反応せしめ、次に加水分解して、そのホス
フエート生成物を得ることからなるものであるか、Ｐが
水素である式Ｉの化合物をジフエニルクロロホスフエー
トで処理し、次に触媒水素添加し、そのリン酸エステル
を生成せしめることからなるものである。医薬として許
容しうる塩は、炭酸アルカリ金属，重炭酸アルカリ金属
または水酸化アルカリ金属のような塩基で該酸を処理す
ることにより得ることができる。

【００１６】本発明の別の目的は、式（Ｉ）の化合物を
製造する方法にもあり、その製造方法は、式（ＩＩ）

【
化８】（式中、Ｒ′は２，３−ジ−Ｏ−保護−４，６−Ｏ−ア
ルキリデン−β−Ｄ−アロピラノシル，２，３−ジ−Ｏ
−保護−４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−マンノピ
ラノシル，２，３−ジ−Ｏ−保護−４，６−Ｏ−アルキ
リデン−α−Ｄ−マンノピラノシル及び２，３−ジ−Ｏ
−保護−５，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−アロフラ
ノシルからなる群から選ばれ、Ｐ′はフエノールの保護
基である）の化合物から保護基を除去し、任意に該フエ
ノール基をリン酸化することを特徴とするものである。

【００１７】本発明の方法では、さらに式（ＩＩ）の化
合物の製造法が提供され、その方法は、４′−保護−４
′−デメチルエピポドフイロトキシンと、２，３−ジ−
Ｏ−保護−４，６−Ｏ−アルキリデン−Ｄ−アロピラノ
ース，２，３−ジ−Ｏ−保護−４，６−Ｏ−アルキリデ
ン−Ｄ−マンノピラノース，２，３−ジ−Ｏ−保護−５
，６−Ｏ−アルキリデン−Ｄ−アロフラノースから選ば
れた化合物とを、ルイス酸との存在下に反応させること
を特徴としたものである。

【００１８】生物活性本発明の代表的な化合物について、インビトロの細胞毒
活性及びインビトロのマウスでの抗腫瘍活性を調べた。

【００１９】インビトロの細胞毒活性マウスメラノーマ細胞Ｂ１６−Ｆ１０を生育せしめ、カ
ナマイシン（６０μｇ／ｍｌ）を含有し、加熱して不活
性化した牛胎児血清（１０％）及び必須アミノ酸でない
アミノ酸（０．６％）を補ぎっなったイーグルＭＥＭ培
地（ニッスイ）中で、５％ＣＯ２インキュベーター中の
湿った雰囲気のもと、３７℃で保持した。対数増殖期に
あるＢ１６−Ｆ１０細胞を収穣し、その数を数え、２．
０×１０４細胞数１ｍｌの濃度で培養培地中に懸濁した
。９６穴のマイクロタイタープレートの各ウエル中に細
胞懸濁液（１８０μｌ）を入れた後２４時間して、各ウ
エル中に試験物質（２０μｌ）を加え、そのプレートを
７２時間培養した。Ｂ１６−Ｆ１０細胞に対する細胞毒
性活性を、生きている細胞をニュートラルレッド溶液で
染色した後５４０ｎｍで比色分析して測定した。

【００２０】インビボの抗腫瘍活性本発明の代表的な化合物の抗腫瘍活性をリンパ球糸白血
病細胞Ｐ３８８糸を用いて試験した。雌のＣＤＦ１マウ
スに１匹あたり１．０×１０６個の白血病細胞を腹腔内
接種（第０日）し、試験化合物を１度第１日目に（Ｑ１
Ｄ×１）マウスに腹腔内投与した。試験動物を４５日間
観察した。各試験群の平均存在時間（ＭＳＴ）を記録し
、次の式に従って計算し、抗腫瘍活性をＴ／Ｃ％値とし
て示した。Ｔ／Ｃ％＝（処理群のＭＳＴ÷コントロールのＭＳＴ）
×１００Ｔ／Ｃ％値が１２５％をこえるものは、非常に優れて高
い抗腫瘍作用があるとすることができる。

【００２１】インビトロの細胞毒活性分析及びインビボ
の抗腫瘍活性試験の結果を表１に示す。インビボ試験で
は、そこにはＴ／Ｃ％の最大値のみそして投与量はその
最大値のみを示してある。

【００２２】

【表１】

【００２３】その試験結果は、本発明の化合物は抗腫瘍
化合物として非常に優れていることを示している。した
がって、本発明は、式１の化合物の腫瘍を抑制するに有
効な量を、腫瘍を有する宿主体に投与することを特徴と
する哺乳動物などの腫瘍の抑制方法をも提供する。この
目的のためには、それに限定されるものではないが、静
脈内，筋肉内，腫瘍内，動脈内，リンパ組織等内への投
与または経口投与を含めた通常の方法でその薬物は投与
することができる。静脈内への投与は好ましいものであ
る。

【００２４】本発明では、また式Ｉの化合物と医薬とし
て許容しうる担体とからなることを特徴とする医薬組成
物が提供せしめられる。該抗腫瘍組成物は、所要の投与
ルートに適した医薬形態のいかなるかたちにもされるこ
とができる。このような組成物の例としては、経口投与
に適した固体組成物、例えば錠剤，カプセル剤，ピル剤
，粉末剤，顆粒剤など、経口投与に適した液体組成物、
例えば、溶液剤，懸濁剤，シロップ剤，エリキシル剤な
ど、非経口投与に適した調製物、例えば、無菌溶液剤，
懸濁剤，エマルジョン剤などがあげられる。それらのも
のはまた使用直前に無菌水，生理食塩水またはその他の
無菌の注射することのできる媒質に溶解されることので
きる無菌の固体組成物の形態で製造されうる。

【００２５】ある哺乳動物宿主体への最適な投与量及び
治療計画は当業者によって容易に確かめることのできる
ものである。もちろん、実際の投与量は、製剤化された
特定のかたの組成物、使用される特定の化合物、適用方
法、治療すべき特定の部位あるいは宿主体あるいは疾患
に応じて変えることが望ましいことである。その薬物の
作用に影響を与える数多くの要因、例えば年令，体重，
性別，食事，投与時間，投与径路，排泄速度，患者の状
態，薬物の組み合わせ，感受性及び疾患の程度などを考
慮に入れられる。

【００２６】次なる具体例は、本発明を説明するための
ものであり、本願の特許請求の範囲をそれで限定するこ
とを意図するものではない。

【００２７】出発物質の製造製造例Ｉ　　アリル　　３−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−ア
ロピラノシド（化合物Ａ）及び　　アリル　　３−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−アロフ
ラノシド（化合物Ｂ）乾燥塩化水素（約１ｍｏｌ）を、５００ｍｌのアリルア
ルコール中の３−Ｏ−ベンジルアロピラノース（Ｗ．Ｅ
．Ｄｉｃｋ，等　　Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．，１
９７５，４２：５５に記載された方法に従って製造）２
５．５ｇ（０．９０４ｍｏｌ）の溶液中に吹き込んだ。混合物を７０℃で１時間加熱し、次に蒸発乾固した。残
留物をシリカゲルカラム（Ｗａｋｏ　　ゲル　　Ｃ−２
００，２５０ｇ）上で４回クロマトグラフイー処理した
。そのカラムを最後にクロロホルムで、次にクロロホルム
−メタノール（５０：１−２５：１）で処理し、３つの
成分に分けた。

【００２８】Ｒｆ　　０．７０（ＴＬＣ，ＣＨＣｌ３：
ＭｅＯＨ＝２０：１でモニター）のスポットを示す画分
を集め、蒸発乾固し、３．４３ｇ（１４．５％）の３−
ベンジル−１，６−アンヒドロヘキソピラノースを無色
結晶、融点１１２°−１１３℃として得た。

【００２９】Ｒｆ　　０．６０（ＴＬＣ，ＣＨＣｌ３：
ＭｅＯＨ＝２０：１でモニター）のスポットを示す画分
を集め、蒸発乾固し、２．３３ｇ（８％）のアリル　　
３−Ｏ−ベンジル−β−アロフラノシド（化合物Ｂ）を
無色結晶として得た。

【００３０】

【数１】

【００３１】Ｒｆ　　０．５０（ＴＬＣ，ＣＨＣｌ３：
ＭｅＯＨ＝２０：１でモニター）のスポットを示す画分
を集め、アリル　　３−Ｏ−ベンジル−β−アロフラノ
シド及びアリル　　３−Ｏ−ベンジル−β−Ｄ−アロピ
ラノシド（化合物Ａ）の混合物（３．６６ｇ，１２．５
％）を得た。

【００３２】移動速度の一番遅い画分を集め、蒸発乾固
し、４．１ｇ（１４％）のアリル３−Ｏ−ベンジル−β
−Ｄ−アロピラノシド（化合物Ａ）を油状物として得た
。

【００３３】

【数２】

【００３４】製造例ＩＩ　　アリル　　２，３，−ジ−
Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロ
ピラノシド（化合物Ｃ）及びアリル　　２，３，−ジ−
Ｏ−ベンジル−５，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロ
フラノシド（化合物Ｄ）３．６６ｇ（０．０１１８ｍｏｌ）の化合物Ａ及び化合
物Ｂの混合物そして１，１−ジメトキシエタン（４ｍｌ
）の５０ｍｌのジクロロメタンの溶液に、１００ｍｇの
ｐ−トルエンスルホン酸を加え、混合物を室温で１６時
間攪拌した。混合物を順次重炭酸ナトリウム水溶液，水
，塩水で洗滌し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。乾燥
した抽出物を蒸発乾固し、油状残留物をトルエン−酢酸
エチル（１０：１）を溶出液として用いシリカゲルカラ
ム（Ｋｉｅｓｅｌ　　ゲル　　６０，５０ｇ）上のクロ
マトグラフイーにかけた。溶出液をＴＬＣでモニターし
、１５ｍｌづつの分画で集めた。所望生成物を含有する
画分を集め、蒸発乾固し、２．２５ｇ（５６．５％）の
アリル　　３−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−エチリデン
−β−Ｄ−アロピラノシド及びアリル　　３−Ｏ−ベン
ジル−５，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロフラノシ
ドの混合物を得た。

【００３５】水素化ナトリウム（４８２ｍｇ，１０ｍｍ
ｏｌ，油中の約６０％のもの）をジメチルホルムアミド
（２０ｍｌ）の中の上記の混合物（２．２５ｇ，６．７
ｍｍｏｌ）の溶液中に加えた。混合物を３０分間室温で
攪拌し、次にそれにベンジルブロマイド（１ｍｌ，１０
ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分間攪拌した。メタノー
ル（５ｍｌ）を加えた後、混合物を蒸発乾固した。残留
物を１００ｍｌの酢酸エチルで抽出し、水で洗い、次に
塩水で洗い、硫酸マグネシウム上で乾燥した。乾燥した
抽出物を蒸発乾固し、残留物をトルエン−酢酸エチル（
１０：１）を溶出液としてシリカゲルカラム（Ｋｉｅｓ
ｅｌ　　ゲル　　６０，５０ｇ）のクロマトグラフイー
にかけた。溶出液をＴＬＣでモニターし、１５ｍｌづつ
分画して集めた。

【００３６】速く移動する分画（Ｎｏ．１７−３３）を
集め、蒸発乾固し、１．５６ｇ（５４．５％）のアリル
　　２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−エチリデ
ン−β−Ｄ−アロピラノシド（化合物Ｄ）を油状物とし
て得た。

【００３７】

【数３】

【００３８】ゆっくり移動する分画（Ｎｏ．３４−３９
）を集め、蒸発乾固し、９３０ｍｇ（３２．５％）のア
リル　　２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−５，６−Ｏ−エチ
リデン−β−Ｄ−アロフラノシド（化合物Ｄ）を油状物
として得た。

【数４】

【００３９】製造例ＩＩＩ　　２，３−ジ−Ｏ−ベンジ
ル−４，６−Ｏ−エチリデン−Ｄ−アロピラノース（化
合物Ｅ）２０ｍｌのエタノール及び１０ｍｌのアセトニトリル及
び３ｍｌの水の中の１．４２６ｇ（３．３ｍｍｏｌ）の
化合物Ｃと１００ｍｇのトリス（トリフエニルホスフイ
ン）ロジウムクロライドとの混合物を攪拌下１６時間還
流し、５ｍｌに濃縮し、５０ｍｌの酢酸エチルで抽出し
た。抽出物を水及び塩水で洗滌し、硫酸マグネシウム上
で乾燥した。溶媒を除去後、油状残留物をトルエン−酢
酸エチル（２０：１）を溶出液として使用してシリカゲ
ルカラム（Ｋｉｅｓｅｌ　　ｇｅｌ６０，２０ｇ）のク
ロマトグラフイーにかけた。溶出液をＴＬＣでモニター
し、１５ｍｌづつの分画にわけた。所望の生成物を含有
する画分を一緒にし、蒸発乾固し、９７０ｍｇ（７５％
）の１−プロペニル　　２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−４
，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロピラノシドを油状
物として得た。

【００４０】２０ｍｌのアセトン及び２ｍｌの水の混合
物中の１−プロペニル　　２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−
４，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロピラノシド（９
７０ｍｇ，２．２８ｍｍｏｌ）と酸化水銀イエロー（１
ｇ）との攪拌混合物中に、１０ｍｌのアセトンと１ｍｌ
の水との混合物中の塩化水銀（０．８ｇ，２．９５ｍｍ
ｏｌ）の溶液を加え、混合物を３０分間室温で攪拌した
。沈殿物はろ過によって除去し、ろ液を５ｍｌに濃縮し
、５０ｍｌのエーテルで抽出した。抽出液を水及び塩水
で洗滌し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。乾燥した抽
出液を蒸発乾固し、残留物をクロロホルムを溶出液とし
て用いてシリカゲルカラム（Ｋｉｅｓｅｌｇｅｌ　　６
０，５０ｇ）のクロマトグラフイーにかけた。所望生成
物を含有する画分（ＴＬＣ，トルエン−酢酸エチル＝２
：１，Ｒｆ０．４でモニター）を集め、蒸発乾固し、α
−アノマー体及びβ−アノマー体の混合物として目的化
合物８００ｍｇ（９１％）を得た。（このα−アノマー
体とβ−アノマー体との混合物は、化合物Ｅという）。

【００４１】

【数５】

【００４２】製造例ＩＶ　　２，３−ジ−Ｏ−ベンジル
−５，６−Ｏ−エチリデン−Ｄ−アロフラノース（立体
異性体の混合物，化合物Ｆ）製造例ＩＩＩに記載された方法に従って、化合物Ｄ（０
．９ｇ）を変換し、Ｃ−１位及びＣ−７位に基づく４種
の立体異性体の分離できないところの混合物として目的
化合物（４５０ｍｇ）を得た（この異性体混合物は、化
合物Ｆという）。その１Ｈ　　ＮＭＲスペクトルを次に
示す。

【００４３】

【数６】

【００４４】以下実施例を挙げてさらに本発明を具体的
に説明する。実施例１　　４′−デメチル−４−Ｏ−（４，６−Ｏ−
エチリデン−β−Ｄ−アロピラノシル）エピポドフイロ
トキシン

【化９】

【００４５】（ａ）　　４′−Ｏ−ベンジロキシカルボ
ニル−４′−デメチル−４−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベ
ンジル−４，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロピラノ
シル）エピポドフイロトキシン１，２−ジクロロエタン（５０ｍｌ）中の４′−Ｏ−ベ
ンジロキシカルボニル−４′−デメチルエピポドフイロ
トキシン（５３４ｍｇ，１ｍｍｏｌ）及び化合物Ｅ（７
８０ｍｇ，２ｍｍｏｌ）の冷却（−２３℃）攪拌溶液に
、三弗化ホウ素−エーテレート（０．５ｍｌ，４ｍｍｏ
ｌ）を加えた。混合物を−２０℃で１時間攪拌し、ピリ
ジン（０．３ｍｌ）をそこに加え、１０分間攪拌を続け
た。次に混合物をクロロホルムで抽出し、水及び塩水で
洗滌し、硫酸マグネシウム上で乾燥した。乾燥した抽出
物を蒸発乾固し、残留物をシリカゲル（Ｋｉｅｓｅｌ　
　ｇｅｌ　　６０，５０ｇ）のカラムにかけ、トルエン
−酢酸エチル（１０：１）を用いて溶出した。所望の生
成物を含有する画分（分画Ｎｏ．１９−２７）を一緒に
し、蒸発乾固した。残留物を、エーテル・シクロヘキサ
ンでもってトリチュレート処理し、４′−Ｏ−ベンジロ
キシカルボニル−４′−デメチル−４−Ｏ−（２，３−
ジ−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−
アロピラノシル）エピポドフイロトキシン７３５ｍｇ（
８１％）を得た。

【００４６】

【数７】

【００４７】（ｂ）　　４′−デメチル−４−Ｏ−（４
，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロピラノシル）エピ
ポドフイロトキシンの製造法４′−Ｏ−ベンジロキシカルボニル−４′−デメチル−
４−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−エ
チリデン−β−Ｄ−アロピラノシル）エピポドフイロト
キシン（５００ｍｇ，０．５５ｍｍｏｌ）及び１０％パ
ラジウム／炭素（５００ｍｇ）の８ｍｌの酢酸及び２ｍ
ｌエタノールの中の混合物を１気圧下室温で２４時間水
素添加した。その触媒をろ過によって除去し、１０ｍｌ
のメタノールで２回洗滌した。ろ液及び洗液を一緒にし
、混合物を蒸発乾固した。残留物をクロロホルム−メタ
ノール（１００：１−５０：１）を溶出液として使用し
、シリカゲルカラム（Ｋｉｅｓｅｌ　　ｇｅｌ　　６０
，４０ｇ）のクロマトグラフイーにかけた。所望生成物
を含有する分画を集め、蒸発乾固した。残留物をエーテ
ルでトリチュレート処理し、目的化合物２５５ｍｇ（７
８％）を得た。

【００４８】

【数８】

【００４９】実施例２　　４′−デメチル−４−Ｏ−（
５，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロフラノシル）エ
ピポドフイロトキシン

【化１０】（ａ）　　４′−Ｏ−ベンジロキシカルボニル−４′−
デメチル−４−Ｏ−（２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−５，
６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロフラノシル）エピポ
ドフイロトキシン

【００５０】３０ｍｌの乾燥１，２−ジクロロエタン中
の４′−Ｏ−ベンジロキシカルボニル−４′−デメチル
エピポドフイロトキシン（４００ｍｇ，０．７５ｍｍｏ
ｌ）及び化合物Ｆ（４４０ｍｇ，１．１４ｍｍｏｌ）の
冷却（−２２℃）攪拌溶液に、三弗化ホウ素−エーテレ
ート（０．３ｍｌ，２．４４ｍｍｏｌ）を加え、混合物
を−２２℃で３０分間攪拌した。ピリジン（０．２ｍｌ
）を反応混合物に加え、その混合物を−２０℃で１０分
間攪拌し、クロロホルムで抽出した。抽出物を水及び塩
水で洗滌し、硫酸マグネシウムで乾燥した。乾燥した抽
出物を蒸発乾固し、そのエチリデン部に基づいた二つの
異性体を含有した残留物をシリカゲルカラム（Ｋｉｅｓ
ｅｌ　　ｇｅｌ　　６０，４０ｇ）によって分離処理し
た。そのカラムをＴＬＣ（トルエン：酢酸エチル＝２：
１でモニター）した。ゆっくりと移動する分画を集め、
蒸発乾固し、２９０ｍｇ（４３％）の第一のＣ−７″エ
ピマー体（化合物Ｇ）を得た。

【数９】

【００５１】速く移動する分画を集め、蒸発乾固し、２
３０ｍｇ（３４％）の第二のＣ−７”エピマー（化合物
Ｈ）を得た。

【００５２】

【数１０】

【００５３】（ｂ）　　４′−デメチル−４−Ｏ−（５
，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｏ−アロフラノシル）エピ
ポドフイロトキシンの製造炭素担持１０％バラジウムの存在下化合物Ｇ（２７０ｍ
ｇ）を水素化する反応は、相当する目的化合物（エピマ
ーＩ）１１５ｍｇ（６５％）を与えた。

【００５４】

【数１１】

【００５５】炭素担持１０％バラジウムの存在下の化合
物Ｈ（２１０ｍｇ）の水素化により、８４ｍｇ（６１％
）の相当する目的化合物（エピマーＩＩ）を無色結晶と
して得た。

【００５６】

【数１２】

【００５７】実施例３　　４′−デメチル−４−Ｏ−（
４，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−マンノピラノシル）
エピポドフイロトキシン

【化１１】（ａ）　　４′−Ｏ−ベンジロキシカルボニル−４′−
デメチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テトラ−Ｏ−ア
セチル−β−Ｄ−マンノピラノシル）エピポドフイロト
キシン及びそのα−アノマー体の製造

【００５８】２０ｍｌの乾燥１，２−ジクロロエタン中
の４′−Ｏ−ベンジロキシカルボニル−４′−デメチル
エピポドフイロトキシン（３７９ｍｇ，０．７１ｍｍｏ
ｌ）及び２，３，４，６−テトラ−Ｏ−アセチル−Ｄ−
マンノピラノース（Ｋ．Ｗａｔａｎａｂｅ　　等　　Ｃ
ａｒｂｏｈｙｄｒ．Ｒｅｓ．，１９８６，１５４：１６
５に記載の方法に従って製造）（２６９ｍｇ，０．７７
ｍｍｏｌ）の冷却（−１５℃）攪拌溶液に、三弗化ホウ
素−エーテレート０．２７ｍｌ（２．１ｍｍｏｌ）を加
え、混合物を−１５℃で３０分間攪拌した。その混合物
に０．５ｍｌの乾燥ピリジンを加え、その混合物を−１
５℃で１０分間攪拌した。その混合物を水で洗滌し、無
水硫酸ナトリウム上で乾燥した。有機相を濃縮し、残留
物をシリカゲルカラム（１％　　ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ
２；ＴＬＣでモニター）のクロマトグラフイーにかけ、
４５６ｍｇ（７４％）の４′−Ｏ−ベンジロキシカルボ
ニル−４′−デメチル−４−Ｏ−（２，３，４，６−テ
トラ−Ｏ−アセチル−Ｄ−マンノピラノシル）エピポド
フイロトキシンを、α−アノマー体とβ−アノマー体と
の分離不能な混合物として得た。

【００５９】

【数１３】

【００６０】（ｂ）　　４′−Ｏ−ベンジロキシカルボ
ニル−４′−デメチル−４−Ｏ−（４，６−Ｏ−エチリ
デン−β−Ｄ−マンノピラノシル）エピポドフイロトキ
シン及びそのα−アノマー体の製造メタノール（２０ｍｌ）中の上記工程（ａ）で製造され
たα−アノマー体及びβ−アノマー体（４３９ｍｇ，２
．０ｍｍｏｌ）の混合物を４時間攪拌還流し、その混合
物を蒸発乾固した。残留物をクロロホルム（４０ｍｌ）
、ｉ−プロパノール（１０ｍｌ）、及び酢酸（０．２ｍ
ｌ）で希釈し、水及び重炭酸ナトリウム水溶液で洗滌し
、無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。有機相を減圧下除
去し、３１７ｍｇの無色半固体の４′−Ｏ−ベンジロキ
シカルボニル−４′−デメチル−４−Ｏ−（Ｄ−マンノ
ピラノシル）−エピポドフイロトキシンをα−アノマー
体とβ−アノマー体との混合物として得た。その混合物
を精製することなく、次のエチリデン化反応に付した。

【００６１】ジクロロメタン（２０ｍｌ）中の上記半固
体物（２４７ｍｇ，０．３５ｍｍｏｌ）と１，１−ジメ
トキシエタン（４４μｌ，０．４ｍｍｏｌ）との攪拌溶
液に１滴の濃硫酸を加えた。混合物を室温で１時間攪拌
し、重炭酸ナトリウム水溶液及び水で洗い、無水硫酸ナ
トリウム上で乾燥した。有機相を減圧下に蒸発し、２７
０ｍｇの４″，６″−Ｏ−エチリデン化物を二つの主な
スポットをＴＬＣ上で示す（Ｒｆ値：０．３８及び０．
３３，４％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２）を示す粗製半固体
として得、それは繰り返し（２回）シリカゲルカラム（
３％ＭｅＯＨ−ＣＨ２Ｃｌ２，ＴＬＣでモニター）上で
分離処理し、３８ｍｇのβ−アノマー体（Ｒｆ０．３８
）と６９ｍｇのα−アノマー体（Ｒｆ０．３３）とを得
た。その異性体のＣ−１″位における立体配置は、脱保
護した生成物の４′−位の１ＨＮＭＲスペクトルから推
定された。

【００６２】（ｃ）　　４′−デメチル−４−Ｏ−（４
，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−マンノピラノシル）エ
ピポドフイロトキシンの製造酢酸エチル（１０ｍｌ）中の上記β−アノマー体（３８
ｍｇ）及び炭素担持１０％パラジウム（１０ｍｇ）の混
合物を一気圧で水素化した。触媒をろ過した後、ろ液を
濃縮し、粗製生成物を得、それを分離用ＴＬＣ上のクロ
マトグラフイーにかけ、無色結晶として２６ｍｇの目的
化合物を得た。

【００６３】

【数１４】

【００６４】実施例４　　４′−デメチル−４−Ｏ−（
４，６−Ｏ−エチリデン−α−Ｄ−マンノピラノシル）
エピポドフイロトキシン

【化１２】実施例３の工程（ｂ）で得られたα−アノマー体（６９
ｍｇ）を実施例３の工程（ｃ）の方法に従って水素化し
、４５ｍｇの目的化合物を無色結晶として得た。

【００６５】

【数１５】

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】　　式（Ｉ）【化１】（式中、Ｒは４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−アロ
ピラノシル，４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−マン
ノピラノシル，４，６−Ｏ−アルキリデン−α−Ｄ−マ
ンノピラノシル及び５，６，−Ｏ−アルキリデン−β−
Ｄ−アロフラノシルからなる群から選ばれたもので、Ｐ
は水素または−ＰＯ３Ｈ２である）の化合物またはその
医薬として許容しうる塩。
【請求項２】　　該Ｒは４，６−Ｏ−アルキリデン−β
−Ｄ−アロピラノシル，４，６−Ｏ−アルキリデン−β
−Ｄ−マンノピラノシル及び５，６−Ｏ−アルキリデン
−β−Ｄ−アロフラノシルから選ばれたものである請求
項１に記載の化合物。
【請求項３】　　該化合物が、４′−デメチル−４−Ｏ
−（４，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロピラノシル
）エピポドフイロトキシン、４′−デメチル−４−Ｏ−
（５，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロフラノシル）
エピポドフイロトキシン、４′−デメチル−４−Ｏ−（
４，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−マンノピラノシル）
エピポドフイロトキシン及び４′−デメチル−４−Ｏ−
（４，６−Ｏ−エチリデン−α−Ｄ−マンノピラノシル
）エピポドフイロトキシンから選ばれたものである請求
項１に記載の化合物。
【請求項４】　　該化合物が４′−デメチル−４−Ｏ−
（４，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロピラノシル）
エピポドフイロトキシンである請求項１に記載の化合物
。
【請求項５】　　該化合物が４′−デメチル−４−Ｏ−
（５，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロフラノシル）
エピポドフイロトキシンである請求項１に記載の化合物
。
【請求項６】　　該化合物が４′−デメチル−４−Ｏ−
（４，６−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−マンノピラノシル
）エピポドフイロトキシンである請求項１に記載の化合
物。
【請求項７】　　該化合物が４′−デメチル−４−Ｏ−
（４，６−Ｏ−エチリデン−α−Ｄ−マンノピラノシル
）エピポドフイロトキシンである請求項１に記載の化合
物。
【請求項８】　　式（Ｉ）【化２】（式中、Ｒは４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−アロ
ピラノシル，４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−マン
ノピラノシル，４，６−Ｏ−アルキリデン−α−Ｄ−マ
ンノピラノシル及び５，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ
−アロフラノシルからなる群から選ばれたもので、Ｐは
水素または−ＰＯ３Ｈ２である）の化合物またはその医
薬として許容される塩を有効成分とし、１種またはそれ
以上の医薬として許容される担体、賦形剤または希釈剤
を加えた抗腫瘍用医薬組成物。
【請求項９】　　式（ＩＩ）【化３】（式中、Ｒ′は２，３−ジ−Ｏ−保護−４，６−Ｏ−ア
ルキリデン−β−Ｄ−アロピラノシル，２，３−ジ−Ｏ
−保護−４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−マンノピ
ラノシル，２，３−ジ−Ｏ−保護−４，６−Ｏ−アルキ
リデン−α−Ｄ−マンノピラノシル及び２，３−ジ−Ｏ
−保護−５，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−アロフラ
ノシルからなる群から選ばれたもので、Ｐ′はフエノー
ルの保護基である）の化合物を脱保護し、任意にそのフ
エノール基をリン酸化することを特徴とする式（Ｉ）【
化４】（式中、Ｒは４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−アロ
ピラノシル，４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−マン
ノピラノシル，４，６−Ｏ−アルキリデン−α−Ｄ−マ
ンノピラノシル及び５，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ
−アロフラノシルからなる群から選ばれたもので、Ｐは
水素または−ＰＯ３Ｈ２である）の化合物またはその医
薬として許容しうる塩の製造法。
【請求項１０】　　４′−保護−４′−デメチルエピポ
ドフイロトキシンと、２，３−ジ−Ｏ−保護−４，６−
Ｏ−アルキリデン−Ｄ−アロピラノース，２，３−ジ−
Ｏ−保護−４，６−Ｏ−アルキリデン−Ｄ−マンノピラ
ノース，２，３−ジ−Ｏ−保護−５，６−アルキリデン
−Ｄ−アロフラノースから選ばれた化合物とを、ルイス
酸存在下に反応させ、得られた式（ＩＩ）【化５】（式中、Ｒ′は２，３−ジ−Ｏ−保護−４，６−Ｏ−ア
ルキリデン−β−Ｄ−アロピラノシル，２，３−ジ−Ｏ
−保護−４，６−アルキリデン−β−Ｄ−マンノピラノ
シル，２，３−ジ−Ｏ−保護−４，６−Ｏ−アルキリデ
ン−α−Ｄ−マンノピラノシル及び２，３−ジ−Ｏ−保
護−５，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−アロフラノシ
ルからなる群から選ばれたもので、Ｐ′はフエノールの
保護基である）の化合物を脱保護し、任意にそのフエノ
ール基をリン酸化することを特徴とする式（Ｉ）【化６
】（式中、Ｒは４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−アロ
ピラノシル，４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−マン
ノピラノシル，４，６−Ｏ−アルキリデン−α−Ｄ−マ
ンノピラノシル及び５，６−アルキリデン−β−Ｄ−ア
ロフラノシルからなる群から選ばれたもので；Ｐは水素
又は−ＰＯ３Ｈ２である）の化合物またはその医薬とし
て許容しうる塩の製造法。
【請求項１１】　　該ルイス酸が三弗化ホウ素である請
求項１０に記載の方法。
【請求項１２】　　該Ｒ′が２，３−ジ−Ｏ−ベンジル
−４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−アロピラノシル
，２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−アルキリデ
ン−β−Ｄ−マンノピラノシル，２，３−ジ−Ｏ−ベン
ジル−４，６−Ｏ−アルキリデン−α−Ｄ−マンノピラ
ノシル及び２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−５，６−Ｏ−ア
ルキリデン−β−Ｄ−アロフラノシルからなる群から選
ばれたもので、Ｐ′はベンジロキシカルボニルである請
求項９に記載の方法。
【請求項１３】　　該Ｒ′が２，３−ジ−Ｏ−ベンジル
−４，６−Ｏ−アルキリデン−β−Ｄ−アロピラノシル
，２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−４，６−Ｏ−アルキリデ
ン−β−Ｄ−マンノピラノシル，２，３−ジ−Ｏ−ベン
ジル−４，６−Ｏ−アルキリデン−α−Ｄ−マンノピラ
ノシル及び２，３−ジ−Ｏ−ベンジル−５，６−Ｏ−ア
ルキリデン−β−Ｄ−アロフラノシルからなる群から選
ばれたもので、Ｐ′はベンジロキシカルボニルである請
求項１０または１１のいずれかに記載の方法。
【請求項１４】　　４′−デメチル−４−Ｏ−（４，６
−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロピラノシル）エピポド
フイロトキシン，４′−デメチル−４−Ｏ−（５，６−
Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロフラノシル）エピポドフ
イロトキシン，４′−デメチル−４−Ｏ−（４，６−Ｏ
−エチリデン−β−Ｄ−マンノピラノシル）エピポドフ
イロトキシン及び４′−デメチル−４−Ｏ−（４，６−
エチリデン−α−Ｄ−マンノピラノシル）エピポドフイ
ロトキシンから選ばれた化合物を製造するものである請
求項９に記載の方法。
【請求項１５】　　４′−デメチル−４−Ｏ−（４，６
−Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロピラノシル）エピポド
フイロトキシン，４′−デメチル−４−Ｏ−（５，６−
Ｏ−エチリデン−β−Ｄ−アロフラノシル）エピポドフ
イロトキシン，４′−デメチル−４−Ｏ−（４，６−Ｏ
−エチリデン−β−Ｄ−マンノピラノシル）エピポドフ
イロトキシン及び４′−デメチル−４−Ｏ−（４，６−
エチリデン−α−Ｄ−マンノピラノシル）エピポドフイ
ロトキシンから選ばれた化合物を製造するものである請
求項１０に記載の方法。
【請求項１６】　　該保護基の除去が接触水素添加によ
りなされるものである請求項９に記載の方法。
【請求項１７】　　該保護基の除去が接触水素添加によ
りなされるものである請求項１０に記載の方法。