JPH0430787A - 細胞内の物質測定装置の洗浄方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 Ａ　産業上の利用分野 本発明は、生体細胞を含む試料中から被測定物質を抽出
し、その被測定物質を発光反応を利用して４１す定する
装置に使用される洗浄方法に関するものである。

！３　　発明の概要 本発明は、生体細胞膜を破壊して被測定物質を抽出した
抽出液を１本の測定用ノズルで分取し、濃度の穴なる試
料を順次測定する物質測定装置において、一検体測定す
る毎に測定用ノズル部および周囲を洗浄液で洗浄すると
としに、主流通路およびフ【】−セル等の内部をキャリ
ヤー液で洗浄することにより、高精度で高感度の測定を
容易に実現できるようにしたしのである。

Ｃ従来の技術 一般に、下水処理場では、汚水を活性汚泥法により浄化
処理することが広く行われている。この活性汚泥法は、
まず下水や工場廃水等の汚水に含まれでいる浮遊物を沈
殿除去し、その後に有機性汚濁物質を各種の微生物に摂
取させ、浄化する方法である。このような活性汚泥法に
よる汚水処理プロセスにおいては、浄化に関与する微生
物濃度および活性度を把握することが最も重要である。

現在、微生物濃度を測定する方法としては、活性汚泥浮
遊物質（ＭＬ　Ｓ　Ｓ　）や活性汚泥有機性浮遊物質（
ＭＬＶＳＳ）が用いられている。これらの試験操作方法
は、社団法人日本下水道協会発行の「下水試験方法Ｊ　
１９Ｂ４年版、第２８４，２８５頁に開示されている。

ＭＬＳＳやＭＬＶＳＳは、野菜くずや砂などの復活性物
質および死滅して活性のない微生物をも微生物濃度とし
て測定してしまうため、正確な指標とは言えない。しか
し、現状では微生物濃度を正確に測定する方法がないた
めに、ＭＬＳＳやＭＬＶＳＳが微生物濃度を表す指標と
して用いられている。特に、ＭＬＶＳＳは測定に時間が
かかるために、主としてＭＬＳＳが用いられている。

上述の下水試験方法に記載されている分析方法は、非常
に操作が煩雑で一連の分析操作を手動で行っているため
に、相当な時間と手間を要するばかりか、再現性を得る
ことが困難となる問題がある。

近年、ＭＬＳＳやＭＬＶＳＳに代わる微生物濃度の測定
方法として、いろいろな測定方法が研究されている。そ
の中で、生体細胞中に存在するアデノノン三りん酸（Ａ
ＴＰ）を抽出して測定することにより微生物濃度を推定
する方法が注目されている。

生体細胞中には、生体のりん酸代謝およびエネルギー代
謝の役割を果しているＡ　’ｌ’　Ｐが必ず存在し、死
細胞中にはＡ　’ｌ’　Ｉ）が存在しないことが知られ
ている。また、１個の細胞中に存在するＡＴＰ量は、同
一細胞では同一濃度のＡ　’Ｉ’　Ｐ　ｈ・（を在する
。

従って、ＡＴＰが定量できれば、細胞の数がおよび生細
勧か死細胞かの判定や細胞の活性度が測定できることに
なる。生物処理プロセスを正常に機能さ什る上で、微生
物の量と活性度を同時に知ることが不可欠であり、活性
汚泥中のＡＴＰを測定することは極めて有用である。

このようなことから、微生物の細胞中のＡＴＰを測定す
ることは、水処理１食品、医学等の様々な分野において
注目されている。特に、水処理分野においては、水を浄
化するために活性汚泥を用いているので、その微生物量
および活性度を迅速に測定することが重要であり、ＡＴ
Ｐは重要な指ｔうと之えられる。

活性ｔ’ｉ泥中のΔ′ｌ″Ｐ　ｍを測定する方法として
、ボイリングトリス法およびブタノール法が、社団法人
［１本下水道協会発行の１下水試験方法」１９８４年版
、第２９３．第２９４頁に開示されている。

上述の１Ｓ水試験法に記載されているボイリングトリス
法は、沸騰、撹拌、遠心分離、冷却等の抽出操作か必要
である。また、ブタノール法は、撹ｒ１゛、遠心分離等
の抽出操作が必要である。これらの分析方法は、操作が
繁雑で一連の分析操作を手動で行っているため、相当の
時間と手間を必要とするばかりか、再現性を得ることが
困難となる問題がある。

現在、活性汚泥中に存在する微生物の体内に含まれてい
るＡＴＰを、精度良く高感度に、抽出から計測までの一
連の操作を自動的に測定できる装置はなかった。そこで
、本出願人は、抽出効率が良く、かつ自動化が容易な抽
出方法を開発し、この抽出方法に基づき抽出から計測ま
で一連の操作を自動化し得る細胞内の物質測定方法およ
びその装置を同日付けで出願した。

Ｄ１発明が解決しようとする課題 抽出から計測までの一連の操作を自動化した細胞内の物
質測定装置では、生体細胞膜を破壊して被測定物質を抽
出した抽出液を１本の測定用ノズルで分取し、蟲度の異
なる試料を順次測定できるようになっている。このよう
に構成した物質測定装置おいては、前に測定した抽出液
が測定用ノズル、主流通路、フローセル等の内部に残っ
ていると、その残存する抽出液に含まれる被測定物質が
次の抽出液の測定に悪影響を及ぼす。

本発明は、上記の事情に鑑みてなされたもので、一連の
測定が終了する毎に、測定用ノズル、主流通路、フロー
セルの内部を洗浄して、コンタミネーション（汚染）の
影響の少ない高精度の測定を可能にし得る細胞内の物質
測定装置の洗浄方法を提供することを目的とする。

０１課題を解決するための手段および作用本発明の物質
測定装置の洗浄方法は、上記目的を達成するために、生
体細胞膜を破壊して被測定物質を抽出した抽出液を１本
の測定用ノズルで分取し、鵡度の異なる試料を順次測定
する細胞内の物質測定装置おいて、一検体測定する毎に
前記測定用ノズル内部および周囲を洗浄液で洗浄すると
としに、主流通路およびフローセル専の内部をキャリヤ
ー液で洗浄することにより、コンタミ不一ノヨンの影響
の少ない高精度の測定を行うことか可能となる。

Ｆ　実施例 以下、本発明の実施例を第１図ないし第４図に基づいて
説明する。第１図は本発明を適用したΔＴ　Ｉ）測定装
置の測定プロセスを説明するための説明図、第２図は生
物発光現象における時間と発光量との関係を示すグラフ
、第３図は同Ａ　’ｒ　Ｉ）測定装置の概略的な構成を
示すブロック図、第４図はΔＴＰ溶液およびブランクと
発光量との関係を示すグラフである。

まず、本発明を適用したＡ　Ｔ　Ｉ）測定装置の測定ブ
【１セスを第１図により説明する。

（１’）　Ａ　ＴＰ油抽 出料（活性ｔＴ）泥）０．２５＊（！に抽出試薬（５％
のトリクＣ１０酢酸）０．２５＊Ｑを混合し、微生物の
細胞膜を破壊して、微生物体内に存在するＡＴｌ）を微
生物体外へ放出する操作を行う。その後、発光反応に及
ぼす抽出試薬の影響を最小限に抑え’＋　７：　メニ、
希釈液（４Ｘ　Ｉ　Ｏ−３ｓｏ（！／　（！（７）　Ｅ
　Ｄ　Ｔ　Ａを含むＯ、ｌ　ｍｏｂ／　Ｑの］・リス緩
衝液ｐｎ７．７５）４．５１１！を添加する操作を行う
。ここで、試料と抽出試薬と希釈液の液ｍは混合比率を
一定にずれば良く、上記の液量に限定されないことが予
備実験により確認されている。

（２）発光反応 抽出液５ｗＱから０．５ｍ１２を分取して、発光試薬（
ベーリンガー・マンハイム山之内社製のＡＴＰ測定用キ
ットｒＡＴＰ　ｂｉｏｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ＣＬ
Ｓｊ）　０．５ｙｘＱと反応さ廿、その反応により発光
した混合液をフローセルに導き、センサー（光電子増倍
管）で発光量を計数する。この発光法は、生物発光法と
呼ばれ、ＡＴＰは生物発光物質であるルシフェリンとル
シフェラーゼとをマグネシウムイオンと酸素の存在下で
反応させて、以下のように発光現象を起こさせることが
できる。なお、この発光反応はホタルの体内で起こって
いるのと同し反応である。

上述の発光反応はＡＴＰ　１分子に対して光が１個放出
されるので、発光量からＡＴＰを定量することができる
。実際には、種々の濃度に調製した既知濃度のＡＴＰ量
を測定し、標準曲線（検量線）を作成する。そして、活
性汚泥の測定結果から得られる発光量に対するＡＴＰｆ
ｉ度を標準曲線から読み取り、活性汚泥中に含まれる微
生物体内のＡ］゛Ｐ量の測定を行う。

ＡＴＰとルシフェリンおよびルシフェラーゼなどの試薬
との反応により生ずる生物発光現象における時間と発光
量との関係は、第２図に示すような発光パターンとなる
。第２図において、発光量（ｃｒ’ｓ）はＡ’ｒＰと試
薬との混合時間り。から時間の経過に伴って急激に増加
し、時間１．で最大値（ＣＰ　Ｓ　）　ＩＩＩａｘに達
し、その後は徐々に紘少して行く。

（３）データ処理 このデータ処理では、発光反応終了後に標準曲線の発光
量のパラメータとして必要となる最大発光量の積分値を
演算処理してプリンタに印字する操作を行う。本装置は
、必要ならば演算処理した結果をＩｔ　Ｓ　−２３２Ｃ
によりパーソナルコンピュータに伝送し、標準曲線の作
成など種々のデータ処理ができるようになっている。標
準曲線の発光パターンは通常最大発光１１（ＣＰＳ）ｍ
ａｗかまたはある時間間隔の発光１ｉ（ＣＰ　Ｓ　）の
積分値か用いられる。

（４）洗浄 この洗浄は一連の測定が終了した後に、抽出液の分取に
用いられる測定用ノズルの内部または周囲を洗浄液（蒸
留水）で洗浄するととしに、主流通路およびフローセル
等の内部をキャリヤー液で洗浄する操作を行う。

このように、１本の測定用ノズルで抽出液を分取し、乙
度の異なる試料を連続的に自動測定する装；ｙＮては、
４１す定Ｉ１１ノズル、主流通路、フローセルの内部に
１つ１１；１に測定した抽出液が残存していると、その
液に含まれろＡ　ｉ’　Ｐが次の抽出液の測定に影響を
及はし、正確な測定ができなくなる。そのために、本装
置では一連の測定が終了した後に、測定用ノズルの内部
または周囲を洗浄するとともに、」−流通路およびフロ
ーセル等の内部をキャリヤー液で洗浄することが行われ
ている。

以上に述べたＡ’ｒＰ測定プロセスを自動化するΔ１゛
Ｐ測定装置は、第３図に示すように構成されている。

本図において、１は生体細胞を含む試料（例えば活性汚
泥）が注入される複数の試験管を、同心位置に配置した
ターンテーブルである。このターンテーブルｌの下方に
は、予め試験管内に入れられた磁石を回転させるスター
テ２が設けられている。このターンテーブルｌは、駆動
モーター３を制御器４で制御することにより、原点調整
がなされ複数の試験管を測定順に測定用ノズル５で吸弓
する位置（吸引ボート）まで移送する。測定用ノズル５
は、モーター６を制御器７で制御することにより、上下
方向および回転方向（吸引ボートと廃液ボートとの間）
を移動する。このとき、測定用ノズル５の上下方向およ
び回転方向の位置検出はリミットスイッチによりおこな
われる。

８はトリクロロ酢酸等の抽出試薬を貯蔵する抽出試薬タ
ンクであり、９はトリス緩衝液等の希釈液を貯蔵する希
釈液タンクである。これらのタンク８．９には、抽出試
薬タンク８内に貯蔵された抽出試薬および希釈液タンク
９内に貯蔵された希釈液を前記試験管内に所定量注入す
る抽出試薬用シリンジｌＯおよび希釈液用シリンジ１１
が三方バルブ１２および１３を介して連結されている。

三方バルブ１２は、後述するマイクロプロセッサの制御
を受けて切り替えられ、抽出試薬流通路１４ａと１４ｂ
を連結し、また抽出試薬流通路１４ｂと１４ｃを連結す
る。三方バルブ１３は、後述するマイクロプロセッサの
制御を受けて切り替えられ、希釈液流通路１５ａと１５
ｂを連結し、また希釈液流通路１５ｂと１５ｃを連結す
る。シリンジｔｏ、ｔｔは、シリンダ部にピストン部を
嵌挿して構成され、両方のシリンジ１０．１１のピスト
ン部を機械的に結合し、１個のモーター１６で駆動でき
るようになっている。モーター１６は制御器１７により
制御される。

１８は測定用ノズル５により分取された試料に前記抽出
試薬および希釈液を混合させて得た抽出混合液を、反応
コイル１９を介してフローセル２０に導く主流通路であ
る。２１は蒸留水等のキャリヤー液を貯蔵するキャリヤ
ー液タンク、２２は洗浄液を貯蔵する洗浄液タンク、２
３．２４はルシフェリンおよびルシフェラーゼ等の発光
試薬を貯蔵する発光試薬タンク、２５は廃液を収容する
廃液タンクである。

キャリヤー液タンク２１には、キャリヤー液タンク２Ｉ
内に貯蔵されたキャリヤー液を主流通路Ｉ８に供給する
キャリヤー液用シリンン２６が三方バルブ２７を介して
連結されている。三方バルブ２７は、後述するマイクロ
プロセッサの制御を受けて切り替えられ、キャリヤー液
流通路２Ｂａと２８ｂを連結し、またキャリヤー液流通
路２８ｂと２８ｃを連結する。キャリヤー液流通路２８
Ｃは三方バルブ２９を介して主流通路１８に連結されて
いる。シリンジ２６は、ノリンダ部にピストン部を嵌挿
して構成され、ピストン部をモーター３０で駆動できる
ようになっている。モーター３０は前記制御器１７によ
り制御される。

洗浄液タンク２２には、洗浄液タンク２１内に貯蔵され
た洗浄液を主流通路１８に供給する洗浄液用シリンジ３
１が三方バルブ３２．．３３を介して連結されている。

三方バルブ３２．３３は、後述するマイクロプロセッサ
の制御を受けて切り替えられ、洗浄液流通路３４ａ、３
４ｂ、３４ｃを連結し、洗浄液流通路３４ｃ、３４ｂ、
３４ｄを連結し、洗浄液流通路３４ｃ、３４ｅを連結す
る３洗浄液流通路３４ｄは三方バルブ３５を介して主流
通路１８に連結され、３４ｅは洗浄ポート３６に連結さ
れている。シリンジ３１は、シリンダ部にピストン部を
嵌挿して構成され、ピストン部をモーター３７で駆動で
きるようになっている。モーター３７は制御器３８によ
り制御される。

発光試薬タンク２３および２４には、発光試薬タンク２
３．２４内に貯蔵された発光試薬を前記主流通路１８に
所定量供給する発光試薬用シリンジ３９．４０が三方バ
ルブ４１．４２を介して連結されている。三方バルブ４
１は、後述するマイクロプロセッサの制御を受けて切り
替えられ、発光試薬流通路４３ａ、４３ｂを連結し、ま
た発光試薬流通路４３ｂ、４３ｃを連結する。三方バル
ブ４２は、後述するマイクロプロセッサの制御を受けて
切り替えられ、発光試薬流通路４４ａ、４４ｂを連結し
、また発光試薬流通路４４ｂ、４４Ｃを連結する。シリ
ンジ３９．４０は、シリンダ部にピストン部を嵌挿して
構成され、両方のシリンジ３９．４０のピストン部を機
械的に結合し、１個のモーター４５で駆動できるように
なっている。モーター４５は前記制御器３８により制御
される。

４６は電源、４７はシャッタ、４８は光電子増倍管、４
９は増幅器、５０は波形整形回路であり、これらは抽出
混合液に発光試薬を混合させて得た反応混合液の光情報
を、前記フローセル２０を介して測定する光学的測定装
置を構成する。

５１はマイクロプロセッサ、５２はキーボード、５３は
レコーダ、５４は表示器、５５はプリンタである。

次に、本実施例のＡＴＰ測定装置の動作を説明する。

［測定準備］ 磁石を入れた複数の試験管をターンテーブル１にセット
し、各試験管に試料（活性汚泥）０．２５ｍ（ｌをピペ
ットなどの手動式分注器に上り分取する。その後、ター
ンテーブルｌをターンテーブル取付台にセットし、モー
ド（ＭＯＤＥ）スイッチを投入して準備（ＲＥＡＤＹ）
モードに選択する。

この状態で、スタート（ＳＴＡＲＴ）スイッチを投入す
ると、モーター１６，３０，３７．４５が駆動してシリ
ンジ１０．Ｉｔ、２６，３１．３９゜４０の各シリンダ
部および各流通路内に試薬、キャリヤー液、洗浄液が充
填される。

［測定〕 モートスイッチを投入して測定（ＭＥΔ５ｔＪＩｉ１〕
）モードに選択する。この状態で、スタートスイッチを
投入すると、ターンテーブルｌに設置されたモーター３
が駆動し、原点調整か行われる。

この原点調整により、試料の測定順序が指定される。す
なわち、ターンテーブルｌ」−に刻印された“１”の数
字が刻印された場所に設置された試験管から測定される
ようになっている。

原点調整が行われると、まず“ｌ”の数字が刻印された
位置に設置された試験管にシリンジｌＯにより、抽出試
薬（５％のトリクロロ酢酸）０．２５１１Ｑが注入され
る。これにより、試料中の微生物からＡＴＰが抽出され
る。続いて、３０秒後に同じ試験管内にシリンジ１１に
より希釈液（４×１０−”ｍｏＱ／（ｌのＥＤＴＡを含
む０　、　　Ｉ　ｍｏＱ／Ｑのトリス緩衝液ｐＨ７，７
５）４．５ｘＱが注入される。

このとき、スターク２で試験管内の磁石を回転させ、試
験管内部の混合液を適度に撹拌させることにより、抽出
試薬の作用を促進させ、適切な抽出処理を行うことがで
きる。

この抽出操作が終了すると、ターンテーブルｌが所定の
角度回転して、前記の試験管は吸引ボートの位置に設置
される。続いて、測定用ノズル５が廃液ボート位置から
吸引ボート位置まで移動する。その後、測定用ノズル５
は所６定の位置まで下降し、試験管内の抽出液を０．５
１吸引する。吸引された抽出液はキャリヤー液により反
応コイル１９の直前まで導入され、−時的に配管内に滞
留される。その後、この抽出液に発光試薬（ベーリンガ
ー・マンハイム山之内社製のＡＴＰ測定用キットｒ　Ａ
ＴＰ　ｂｉｏｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ　ＣＬＳＪ）　
０　、　５１１２が注入される。この混合液は、反応コ
イル１９へ送液されし、ここで抽出液と発光試薬が混合
されて生物発光反応が起こる。

発光反応した反応混合液は、瞬時に光電子倍増管４８の
直前の位置に設置されたフローセル２０内ニ導かれる。

ここで反応混合液の光情報は、光電子倍管４８により検
出された後、マイクロプロセッサ５１によりデータ処理
される。

し洗浄コ このデータ処理が終了すると、測定用ノズル５は土性し
、吸引ボートの位置から廃液ボートの位置まで移動する
。そして、この測定用ノズル５が廃液ボート位置にて下
降すると同時に、洗浄液がシリソノ３１→バルブ３３→
バルブ３２→バルブ３５−バルブ２９→測定用ノズル５
の流路を介して、測定用ノズル５の内部を繰り返し洗浄
する。

続いて、シリソノ３Ｉ−バルブ３３−洗浄ボ−ト３６の
流路が開放され、洗浄液がノヤワー状に噴出して測定用
ノズル５の周囲を洗浄する。この場合、まず測定準備工
程でシリンジ３１．洗浄液流通路３４ｃ、３４ｂ、３４
ｄに充填された洗浄液が、上記開放流路を介して測定用
ノズル５および洗浄ボート３６に供給される。その後は
、バルブ３２を切り替えることにより、洗浄液タンク２
２の洗浄液が上記開放流路を介して測定用ノズル５およ
び洗浄ボート３６に０（給される。

この測定用ノズル５の周囲の洗浄と同時に、シリソノ２
６→バルブ２フーバルブ２９→バルブ３５−反応コイル
１９−フローセル２０→廃液タンク２５の流路が開放さ
れ、キャリヤー液により主流通路！８．反応コイル＋９
．フローセル２０の内部が洗浄される。この場合、バル
ブ２７を切り替えることにより、キャリヤー液タンク２
！のキャリヤー液が上記開放流路を介して主流通路１８
に供給される。

本発明の洗浄方法を採用したＡＴＰ装置装置を使用して
、所定の濃度に調整したＡ　Ｔ　Ｐ溶液とブランクとし
て蒸留水を、それぞれターンテーブルに設置した１０本
の試験管に５＋ｙ１２づつ分取し、各溶液の発光反応に
よる発光量を測定した。標準ＡＴＰおよび発光試薬には
、ベーリンガー・マンハイム山之内社製のＡＴＰ測定キ
ットを用いた。またＡＴＰ溶液には、標準ＡＴＰ濃度を
蒸留水で希釈して、１０−’ｍｏ１２の濃度に調製した
ものを用いた。試料番号１．３．５，７．９のブランク
（蒸留水）と試料番号２．４，６，８．１０のＡＴＰ溶
液をそれぞれ３回づつ３０秒間計測する。

その測定結果を第４図に示す。第４図のグラフによれば
、比較的農度の高いｌ　Ｏ−５ｍｏｆ２のＡ　Ｔ　Ｉ）
溶液を測定した後でも、ブランク値は最初の値とほぼ同
等の値を示した。このことは、本発明の洗浄方法が十分
洗浄効果のあることを示している。

なお、本発明は上記実施例に限定されるものではなく、
要旨を変更しない範囲において種々変形して実施するこ
とができる。

Ｇ１発明の効果 以上に詳述したように本発明によれば、一検体測定する
毎に測定用ノズル内部および周囲を洗浄液で洗浄すると
ともに、主流通路およびフローセル等の内部をキャリヤ
ー液で洗浄することで、コンタミネーションの影響の少
ない高精度の測定を行うことができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明を適用したＡＴＰ測定装置の測定プロセ
スを説明するための説明図、第２図は生物発光現象にお
ける時間と発光量との関係を示すグラフ、第３図は同Ａ
ＴＰ測定装置の概略的な構成を示すブロック図、第４図
はＡＴＰ溶液およびブランクと発光量との関係を示すグ
ラフである。 ｌ・・ターンテーブル、２・・・スターク、３．６゜１
６．３０．４５・・・モーター　４，７，１７゜３８・
・制御器、５・・・測定用ノズル、８・・・抽出試薬タ
ンク、９・希釈液タンク、ｌＯ・・・抽出試薬用シリン
ジ、１１・−希釈液用シリンジ、１２．＋３゜２７．２
９，３２．３３，３５，４１．４２・・・二方バルブ、
Ｉ　４　ａ　−１４ｃ・・抽出試薬流通路、１５　ａ　
−１５ｃ・・希釈液流通路、＋８・主流通路、１９・反
応コイル、２０・・・フローセル、２１・キャリヤー液
タンク、２２・・洗浄液タンク、２３゜２４・・・発光
試薬タンク、２５−・廃液タンク、２７・・・キャリヤ
ー液用シリンノ、２８ａ〜２８ｃ・・ギヤリアー液流通
路、３１・・洗浄液用シリンジ、３４ａ〜３４ｅ・・洗
浄液流通路、３６・・洗浄ボート、３９．４０・・・発
光試薬用シリンジ、４３ａ〜４３ｃ、４４ａ〜４４ｃ・
・発光試薬流通路、４６・電源、４７・・・シャッタ、
４８・・光電子増倍管、４９・増幅器、５０・・・波形
整形回路、５１・・・マイク〔ノブ〔１セツサ、５２・
キーホード、５３・・・レコーダ、５４・表示器、５５
・・プリンタ。 外２名

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１）生体細胞膜を破壊して被測定物質抽出した抽出液
   を１本の測定用ノズルで分取し、濃度の異なる試料を順
   次測定する物質測定装置おいて、一検体測定する毎に前
   記測定用ノズル内部および周囲を洗浄液で洗浄するとと
   もに、主流通路およびフローセル等の内部をキャリヤー
   液で洗浄することを特徴とする細胞内の物質測定装置の
   洗浄方法。